本發(fā)明涉及生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，具體涉及一種no緩釋型敷料及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、皮膚傷口愈合需要經(jīng)歷一個復(fù)雜、漫長的自我愈合過程。開放性傷口和由某些皮膚疾病引起的傷口可持續(xù)數(shù)月甚至數(shù)年，重復(fù)換藥和頻繁使用消毒劑與抗生素會導(dǎo)致由多藥耐藥細(xì)菌引起的感染和傷口損傷，嚴(yán)重者會危及生命。因此，開發(fā)一種新策略來對抗病原體，促進(jìn)傷口愈合，從而避免頻繁換藥和過度使用抗生素十分有必要。

2、no是傷口愈合的關(guān)鍵因素之一，它可以促進(jìn)炎性細(xì)胞的趨化，刺激細(xì)胞增殖，增強(qiáng)膠原的合成和沉積，促進(jìn)新生血管的生成，同時(shí)no分子及其與周圍環(huán)境中的氧化劑發(fā)生反應(yīng)生成的副產(chǎn)物過氧亞硝酸鹽(onoo-)和三氧化二氮(n2o3)易導(dǎo)致細(xì)菌膜的脂質(zhì)過氧化作用，從而表現(xiàn)出顯著的抗菌性能。

3、目前還沒有敷料能夠通過酶法原位產(chǎn)生no分子，以補(bǔ)充傷口處的內(nèi)源no不足，這可能造成傷口愈合延遲或者傷口難以愈合。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種no緩釋型敷料及其制備方法，該敷料既能夠通過產(chǎn)生過氧亞硝酸鹽實(shí)現(xiàn)抗菌，又能產(chǎn)生適量的no，刺激細(xì)胞增殖，增強(qiáng)膠原的合成和沉積，促進(jìn)新生血管生成，加速傷口愈合。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種no緩釋型敷料的制備方法，包括如下步驟：

3、s1.將金屬有機(jī)框架材料、氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸和聚乙烯吡咯烷酮加入水中，調(diào)ph值至10.0-11.0，升溫至80-95℃，孵育20-24h，降溫至4-6℃，再加入誘導(dǎo)型一氧化氮合酶重組蛋白和京尼平，充分?jǐn)噭?，離心去上清液，凍干得到載nos2的微粒；

4、s2.將步驟s1制得的載nos2的微粒、吐溫80和甘油加入海藻酸鈉溶液中，充分分散后倒入聚四氟乙烯水凝膠模具孔中，然后浸沒在氯化鈣溶液中，靜置12-18h，取出后洗滌，得到no緩釋型敷料。

5、進(jìn)一步的，所述金屬有機(jī)框架材料為mil-100(fe)。

6、進(jìn)一步的，步驟s1中，所述氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸中，聚精氨酸的聚合度為8-15，聚乙烯吡咯烷酮重均分子量為16000-30000。

7、進(jìn)一步的，步驟s1中，所述金屬有機(jī)框架材料、氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸、水、聚乙烯吡咯烷酮、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶重組蛋白和京尼平的投料比為(10-18)mg:(8-16)mg:10ml:(1.0-2.0)mg:(50-100)μg:(8-16)μg。

8、進(jìn)一步的，步驟s1中，海藻酸鈉溶液的濃度為2.0-4.0w/v％。

9、進(jìn)一步的，步驟s2中，所述的載nos2的微粒、海藻酸鈉溶液、吐溫80和甘油的投料比為(2-3)mg:(10-20)ml:(0.2-0.4)g:(0.05-0.10)g。

10、進(jìn)一步的，步驟s2中，氯化鈣溶液的濃度為1.5-2.0w/v％。

11、進(jìn)一步的，步驟s2中，所述洗滌為用pbs溶液浸漬洗滌3遍。

12、本發(fā)明還提供了一種上述的制備方法制備得到的no緩釋型敷料。

13、進(jìn)一步的，所述no緩釋型敷料的厚度為5-8mm。

14、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

15、1)本發(fā)明通過有機(jī)金屬框架(mofs)材料經(jīng)過與嵌段共聚物氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸進(jìn)行穿梭纏結(jié)形成載體，用于吸附誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(nos2)重組蛋白。利用海藻酸鈣的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)進(jìn)行包埋最終得到原位生成no的固定化酶反應(yīng)體系。該體系能夠?qū)⑶抖喂簿畚镏械木劬彼徭湺沃械木彼釟埢D(zhuǎn)化為l-瓜氨酸并釋放一氧化氮(no)。特別地，這一過程需要重組蛋白先與氧氣結(jié)合，通過mofs中的類血紅素鐵中間體，產(chǎn)生超氧自由基。后者經(jīng)超氧化物歧化酶形成過氧化氫和氧氣。過氧化氫再與精氨酸上的氨基反應(yīng)釋放出no。因此，本發(fā)明構(gòu)建了持續(xù)產(chǎn)生并釋放no的固定化酶體系。

16、2)no分子及其與周圍環(huán)境中的氧氣等氧化劑發(fā)生反應(yīng)生成的副產(chǎn)物過氧亞硝酸鹽(onoo-)和三氧化二氮(n2o3)易導(dǎo)致細(xì)菌膜的脂質(zhì)過氧化作用，從而表現(xiàn)出顯著的抗菌性能。同時(shí)，no還能促進(jìn)傷口愈合，增加成纖維細(xì)胞的增殖和膠原蛋白的產(chǎn)生。

技術(shù)特征：

1.一種no緩釋型敷料的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述金屬有機(jī)框架材料為mil-100(fe)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，所述氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸中，聚精氨酸的聚合度為8-15，聚乙烯吡咯烷酮重均分子量為16000-30000。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，所述金屬有機(jī)框架材料、氨基-聚乙二醇3400-聚精氨酸、水、聚乙烯吡咯烷酮、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶重組蛋白和京尼平的投料比為(10-18)mg:(8-16)mg:10ml:(1.0-2.0)mg:(50-100)μg:(8-16)μg。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s1中，海藻酸鈉溶液的濃度為2.0-4.0w/v％。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述的載nos2的微粒、海藻酸鈉溶液、吐溫80和甘油的投料比為(2-3)mg:(10-20)ml:(0.2-0.4)g:(0.05-0.10)g。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s2中，氯化鈣溶液的濃度為1.5-2.0w/v％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟s2中，所述洗滌為用pbs溶液浸漬洗滌3遍。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8中任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的no緩釋型敷料。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的no緩釋型敷料，其特征在于，所述no緩釋型敷料的厚度為5-8mm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，具體涉及一種NO緩釋型敷料及其制備方法。該制備方法包括：首先將MIL?100(Fe)、氨基?聚乙二醇3400?聚精氨酸、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白一同孵育，之后將固體顆粒分散到海藻酸鈉溶液中，用鈣離子交聯(lián)，制得海藻酸水凝膠，即為NO緩釋型敷料。該敷料既能夠通過產(chǎn)生過氧亞硝酸鹽實(shí)現(xiàn)抗菌，又能產(chǎn)生適量的NO，刺激細(xì)胞增殖，增強(qiáng)膠原的合成和沉積，促進(jìn)新生血管生成，加速傷口愈合。

技術(shù)研發(fā)人員：葛彥,李小蒙,張瑋,李瑞萌,湯佳鵬
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南通大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9