本公開的實施例涉及生物醫(yī)用材料，具體涉及負載外泌體水凝膠制備方法、負載外泌體水凝膠及用途。

背景技術(shù)：

1、水凝膠作為一種三維親水性聚合物網(wǎng)絡(luò)，可以作為藥物輸送系統(tǒng)，提供濕潤的治療環(huán)境，促進組織生長和控制外泌體的釋放。目前，在制備搭載外泌體的水凝膠時，通常采用的方式為：將人臍靜脈內(nèi)皮細胞源的外泌體(huvecs-exos)加入到明膠甲基丙烯酰(gelma)水凝膠中，制備成可用于傷口敷料的水凝膠。

2、然而，實踐中發(fā)現(xiàn)，當采用上述方式制備負載外泌體的水凝膠時，經(jīng)常會存在如下技術(shù)問題：

3、明膠甲基丙烯酰水凝膠的機械性能較低，可控降解性較差，導(dǎo)致明膠甲基丙烯酰水凝膠負載的外泌體的滯留能力和活性較差，且明膠甲基丙烯酰水凝膠的粘性較大，導(dǎo)致明膠甲基丙烯酰水凝膠的可噴涂性較差，從而造成明膠甲基丙烯酰水凝膠的適用性較低。

4、該背景技術(shù)部分中所公開的以上信息僅用于增強對本發(fā)明構(gòu)思的背景的理解，并因此，其可包含并不形成本國的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的現(xiàn)有技術(shù)的信息。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本公開的內(nèi)容部分用于以簡要的形式介紹構(gòu)思，這些構(gòu)思將在后面的具體實施方式部分被詳細描述。本公開的內(nèi)容部分并不旨在標識要求保護的技術(shù)方案的關(guān)鍵特征或必要特征，也不旨在用于限制所要求的保護的技術(shù)方案的范圍。

2、本公開的一些實施例提出了負載外泌體水凝膠制備方法、負載外泌體水凝膠及用途，來解決以上背景技術(shù)部分提到的技術(shù)問題。

3、第一方面，本公開的一些實施例提供了一種負載外泌體水凝膠制備方法，該方法包括：對透明質(zhì)酸進行氧化處理，得到氧化透明質(zhì)酸；將上述氧化透明質(zhì)酸和甲基丙烯酸酐在預(yù)設(shè)環(huán)境條件下進行混合反應(yīng)，得到第一混合溶液；對上述第一混合溶液進行透析凍干處理，得到目標氧化透明質(zhì)酸，其中，上述目標氧化透明質(zhì)酸為接枝甲基丙烯酸酯鍵的氧化透明質(zhì)酸；將上述目標氧化透明質(zhì)酸加入外泌體溶液中，得到負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液；將上述負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液與多聚賴氨酸進行混合反應(yīng)，得到負載外泌體水凝膠，其中，上述負載外泌體水凝膠中的目標氧化透明質(zhì)酸與多聚賴氨酸的質(zhì)量比例范圍為1～2。

4、可選地，上述對透明質(zhì)酸進行氧化處理，得到氧化透明質(zhì)酸，包括：將透明質(zhì)酸溶于水中，得到透明質(zhì)酸溶液，其中，透明質(zhì)酸溶液的百分比濃度為1％；將高碘酸鈉與上述透明質(zhì)酸溶液進行混合反應(yīng)，得到第二混合溶液，其中，上述高碘酸鈉與上述透明質(zhì)酸的質(zhì)量比為3:5；將無水乙醇與上述第二混合溶液進行混合反應(yīng)，得到第三混合溶液，其中，上述無水乙醇與上述第二混合溶液的溶液比為1:100；對上述第三混合溶液進行透析凍干處理，得到氧化透明質(zhì)酸。

5、可選地，在上述預(yù)設(shè)環(huán)境條件為：混合溶液的酸堿值范圍為8～9，環(huán)境溫度為4攝氏度；以及上述將上述氧化透明質(zhì)酸和甲基丙烯酸酐在預(yù)設(shè)環(huán)境條件下進行混合反應(yīng)，得到第一混合溶液，包括：將上述氧化透明質(zhì)酸溶于蒸餾水中，得到氧化透明質(zhì)酸溶液，其中，上述氧化透明質(zhì)酸溶液的濃度為1％；在環(huán)境溫度為4攝氏度的環(huán)境中，將上述氧化透明質(zhì)酸溶液與甲基丙烯酸酐進行混合預(yù)設(shè)時長，得到第一混合溶液，其中，上述氧化透明質(zhì)酸溶液與上述甲基丙烯酸酐的體積比為100:2，在對應(yīng)上述預(yù)設(shè)時長的預(yù)設(shè)時間段內(nèi)，還需執(zhí)行以下步驟：通過酸堿值檢測裝置實時檢測混合溶液酸堿值；響應(yīng)于確定上述混合溶液酸堿值未在上述酸堿值范圍內(nèi)，將氫氧化鈉溶液加入混合溶液中以使混合溶液的酸堿值在上述酸堿值范圍內(nèi)，其中，上述混合溶液為混合有上述氧化透明質(zhì)酸溶液與上述甲基丙烯酸酐的溶液。

6、可選地，在上述將上述目標氧化透明質(zhì)酸加入外泌體溶液中，得到負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液之前，上述方法還包括：從臍帶干細胞中分離外泌體，得到干細胞外泌體；將上述干細胞外泌體加入磷酸鹽緩沖溶液中，得到外泌體溶液，其中，上述干細胞外泌體與上述磷酸鹽緩沖溶液的配比為50微克：100毫升。

7、可選地，上述從臍帶干細胞中分離外泌體，得到干細胞外泌體，包括：通過離心機裝置對臍帶干細胞進行離心處理，得到細胞上清；通過上述離心機裝置對上述細胞上清進行離心處理，得到外泌體球狀體；采用上述磷酸鹽緩沖溶液對上述外泌體球狀體進行沉淀處理，得到干細胞外泌體。

8、可選地，上述將上述目標氧化透明質(zhì)酸加入外泌體溶液中，得到負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液，包括：根據(jù)水凝膠應(yīng)用場景信息和預(yù)設(shè)多聚賴氨酸溶液濃度，確定透明質(zhì)酸溶液濃度；將上述目標氧化透明質(zhì)酸加入外泌體溶液中，得到對應(yīng)上述透明質(zhì)酸溶液濃度的負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液。

9、可選地，上述根據(jù)水凝膠應(yīng)用場景信息和預(yù)設(shè)多聚賴氨酸溶液濃度，確定透明質(zhì)酸溶液濃度，包括：根據(jù)水凝膠應(yīng)用場景信息，確定外泌體釋放速率；根據(jù)上述外泌體釋放速率和預(yù)設(shè)多聚賴氨酸溶液濃度，確定透明質(zhì)酸溶液濃度。

10、可選地，上述將上述負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液與多聚賴氨酸進行混合反應(yīng)，得到負載外泌體水凝膠，包括：通過灌裝裝置將上述負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液灌裝至空噴霧瓶中，得到透明質(zhì)酸噴霧瓶；通過灌裝裝置將預(yù)設(shè)濃度的多聚賴氨酸溶液灌裝至空噴霧瓶中，得到多聚賴氨酸噴霧瓶；同時按壓上述透明質(zhì)酸噴霧瓶和上述多聚賴氨酸噴霧瓶，以使上述透明質(zhì)酸噴霧瓶噴出的負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液與上述多聚賴氨酸噴霧瓶噴出的多聚賴氨酸溶液在預(yù)設(shè)噴射位置處混合，得到水凝膠混合溶液；對上述水凝膠混合溶液進行光固化處理，得到負載外泌體水凝膠。

11、第二方面，本公開的一些實施例提供了一種負載外泌體水凝膠，上述負載外泌體水凝膠溶液是通過如上述第一方面任一實現(xiàn)方式所描述的負載外泌體水凝膠制備方法制備得到的。

12、第三方面，本公開的一些實施例提供了一種如上述第二方面任一實現(xiàn)方式所描述的負載外泌體水凝膠的用途，其中，該負載外泌體水凝膠用于皮膚創(chuàng)傷治療。

13、本公開的上述各個實施例具有如下有益效果：通過本公開的一些實施例的負載外泌體水凝膠制備方法，可以提高負載外泌體水凝膠的機械性能和可控降解性，進而提高負載外泌體水凝膠的適用性以及外泌體的滯留能力和活性。具體來說，造成明膠甲基丙烯酰(水凝膠的可噴涂性和適用性較差的原因在于：明膠甲基丙烯酰水凝膠的機械性能較低，可控降解性較差，導(dǎo)致明膠甲基丙烯酰水凝膠負載的外泌體的滯留能力和活性較差，且明膠甲基丙烯酰水凝膠的粘性較大，導(dǎo)致明膠甲基丙烯酰水凝膠的可噴涂性較差，從而造成明膠甲基丙烯酰水凝膠的適用性較低?；诖?，本公開的一些實施例的負載外泌體水凝膠制備方法，對透明質(zhì)酸進行氧化處理，得到氧化透明質(zhì)酸；將上述氧化透明質(zhì)酸和甲基丙烯酸酐在預(yù)設(shè)環(huán)境條件下進行混合反應(yīng)，得到第一混合溶液；對上述第一混合溶液進行透析凍干處理，得到目標氧化透明質(zhì)酸，其中，上述目標氧化透明質(zhì)酸為接枝甲基丙烯酸酯鍵的氧化透明質(zhì)酸；將上述目標氧化透明質(zhì)酸加入外泌體溶液中，得到負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液；將上述負載外泌體氧化透明質(zhì)酸溶液與多聚賴氨酸進行混合反應(yīng)，得到負載外泌體水凝膠，其中，上述負載外泌體水凝膠中的目標氧化透明質(zhì)酸與多聚賴氨酸的質(zhì)量比例范圍為1～2。因為通過對透明質(zhì)酸進行氧化和接枝甲基丙烯酸酯鍵，提高了得到的目標氧化透明質(zhì)酸的生物相容性和保濕性，從而提高了制成噴霧型負載外泌體水凝膠的可能性，又因為將抗菌的多聚賴氨酸和具有醛基和甲基丙烯酸酯鍵的目標氧化透明質(zhì)酸結(jié)合，得到的負載外泌體水凝膠中包括schiff堿鍵，從而在提高負載外泌體水凝膠的抗菌性能的同時，提高了負載外泌體水凝膠的機械性能和可控降解性，進而提高了負載外泌體水凝膠的外泌體滯留能力和活性，由此，可以提高負載外泌體水凝膠的機械性能和可控降解性，進而提高負載外泌體水凝膠的適用性以及外泌體的滯留能力和活性。