1.本發(fā)明總體上涉及分子生物學(xué)、免疫學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。更具體地，其涉及用于刺激抗腫瘤免疫應(yīng)答的方法和組合物。2.相關(guān)技術(shù)的說明三陰性乳腺癌(tnbc)是一種高度侵襲性和惡性的乳腺癌亞型，其缺乏雌激素受體(er)和孕激素受體(pr)的表達(dá)，并且不表現(xiàn)出人表皮生長因子受體2(her2/erbb2)的顯著擴增或過度表達(dá)。與er+、pr+或her2hi腫瘤相比，tnbc目前缺乏明確的針對療法的分子靶標(biāo)，并且盡管進(jìn)行了激進(jìn)的手術(shù)和輔助化學(xué)療法，但仍與高復(fù)發(fā)率和遠(yuǎn)處復(fù)發(fā)相關(guān)。tnbc的診斷常常是滯后的，并且大多數(shù)女性都已處于晚期疾病，其五年存活率槽糕地為30％。因此，盡管tnbc僅占美國乳腺癌診斷的15％，但其死亡人數(shù)卻占所有死亡人數(shù)的一半，估計每年有20,000人。鑒于tnbc缺乏有效的輔助療法，對于開發(fā)能夠降低遠(yuǎn)處復(fù)發(fā)的發(fā)生率、預(yù)防嚴(yán)重的合并癥并挽救生命的新的治療方案，存在迫切的未滿足的醫(yī)療需要。(hubalek,czech等人,2017,marra,viale等人,2019,waks&winer,2019)癌癥免疫監(jiān)視的概念幾十年來一直存在爭議，直到免疫檢查點抑制的出現(xiàn)證實腫瘤反應(yīng)性t細(xì)胞確實存在，并且可能通過阻斷與耐受、耗竭和/或無反應(yīng)性相關(guān)的信號傳導(dǎo)通路而使其具有功能相關(guān)性。(brahmer,tykodi等人,2012,hodi,o'day等人,2010,topalian,hodi等人,2012)對于某些腫瘤適應(yīng)癥，特別是那些具有高突變負(fù)擔(dān)的適應(yīng)癥，諸如黑色素瘤、吸煙特征性nsclc或任何dmmr/msi+腫瘤類型，結(jié)果可能是顯著的，如目前在采用阻斷ctla-4信號傳導(dǎo)通路和pd-1信號傳導(dǎo)通路兩者的抑制劑的組合療法后iv期黑色素瘤的接近50％的持久緩解率所例證的。(hellmann,ciuleanu等人,2018,marcus,lemery等人,2019,overman,lonardi等人,2018,wolchok,chiarion-sileni等人,2017)盡管如此，大多數(shù)腫瘤仍然無法對檢查點抑制劑療法產(chǎn)生應(yīng)答，并且即使是可以產(chǎn)生應(yīng)答的腫瘤類型，如果在療法開始時還沒有自發(fā)產(chǎn)生足夠的腫瘤抗原反應(yīng)性t細(xì)胞，通常也不會產(chǎn)生應(yīng)答。為了克服這一重大限制并誘導(dǎo)產(chǎn)生更多的腫瘤反應(yīng)性t細(xì)胞，許多研究人員已經(jīng)嘗試了各種不同的免疫激動劑和拮抗劑化合物，其既作為單一藥劑，也與檢查點抑制組合使用。這種方法的問題之一是存在大量不同的激動劑和拮抗劑通路，它們以冗余的方式以及未知和不可預(yù)測的方式彼此相互作用、與腫瘤相互作用并與免疫效應(yīng)細(xì)胞相互作用。因此，開發(fā)用于治療tnbc以及其他侵襲性癌癥(諸如胰腺導(dǎo)管腺癌(pdac)、黑色素瘤和頭頸部癌)的新治療方案的需求尚未得到滿足。

背景技術(shù)：

0、背景

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、在第一實施例中，提供了一種免疫原性組合物，其包含以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該組合物包含(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種(例如4種或5種)：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

2、在第一實施例中，提供了免疫原性組合物，其包含以下各項中的至少4種、至少5種、至少6種或全部7種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該組合物包含(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種、至少4種或全部5種：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

3、在一些方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在具體方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在特定方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該組合物包含以下各項中的至少5種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含以下各項中的至少5種：4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

4、在某些方面，該tgfβ拮抗劑是加盧色替(ly2157299)、曲貝德生(trabedersen)、瑞索利尤單抗(fresolimumab)、ly2382770、lucanix或pf-03446962。在某些方面，該sting激動劑是環(huán)狀二核苷酸或呫噸酮類似物。例如，該sting激動劑是2'3'-c-di-am(ps)2(rp,rp)。在某些方面，該sting激動劑是選自由以下組成的組的環(huán)狀二核苷酸：3'3'-cgamp、2'3'-cgamp、2'2'-cgamp、c-di-apm、c-di-gmp、c-di-imp和c-di-ump。在某些方面，該sting激動劑是呫噸酮類似物，諸如5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸(dmxaa)。在某些方面，該tlr7/8激動劑是瑞喹莫德(resiquimod)(r848)、cl075、cl097、cl264、cl307、gs-9620、聚(dt)、咪喹莫德(imiquimod)、加迪喹莫德(gardiquimod)、洛索立賓(loxoribine)或ssrna寡核苷酸。在某些方面，該rig-i激動劑是5'ppp-dsrna、mda5配體、lgp2配體、ssrna、dsrna、聚(da:dt)或聚(i:c)。在某些方面，該蛋白酶體抑制劑是二乙基二硫代氨基甲酸銅(ii)、硼替佐米(bortezomib)、地蘭佐米(delanzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、mg132、mg115、ipsi?001、非魯酰胺(fellutamide)b、alln、亮抑酶肽、環(huán)氧霉素(epoxomicin)、奧普佐米(oprozomib)、pr-957、卡非佐米(carfilzomib)、乳胞素(lactacystin)、omuralide、鹽孢酰胺a、鹽孢酰胺b、belactosine、cinnabaramide、多酚、tmc-95或ps-519。在特定方面，該腺苷a3受體激動劑是2-氯-n(6)-(3-碘芐基)腺苷-5'-n-甲基甲酰胺(2-cl-ib-meca)、ib-meca(cf101)、cp-608,039、cp-532,903、mrs5698、mrs5980、lj-529?33或mrs4322。在一些方面，該4-1bb激動劑是4-1bb激動劑抗體、重組4-1bb配體(4-1bbl)或4-1bb適體。例如，該4-1bb激動劑抗體是托米利尤單抗(utomilumab)或烏瑞利尤單抗(urelumab)。

5、在某些方面，該組合物不包含水凝膠。在其他方面，該組合物確實包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。在一些方面，該組合物不包含免疫檢查點抑制劑、細(xì)胞因子和/或抗原。

6、另一個實施例提供了包含本實施例的免疫原性組合物(例如，包含以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)的免疫原性組合物：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑)和賦形劑的藥物組合物。

7、另一個實施例提供了包含本實施例的免疫原性組合物(例如，包含以下各項中的至少4種、至少5種、至少6種或全部7種的免疫原性組合物：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑)和賦形劑的藥物組合物。

8、另一個實施例提供了刺激受試者中的抗腫瘤免疫應(yīng)答的方法，該方法包括向該受試者施用有效量的以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該方法包括施用(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種(例如，4種或5種)：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

9、另一個實施例提供了刺激受試者中的抗腫瘤免疫應(yīng)答的方法，該方法包括向該受試者施用有效量的以下各項中的至少4種、至少5種、至少6種或全部7種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該方法包括施用(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種、至少4種或全部5種：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

10、在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在特定方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在具體方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

11、在某些方面，該tgfβ拮抗劑是加盧色替(ly2157299)、曲貝德生(trabedersen)、瑞索利尤單抗(fresolimumab)、ly2382770、lucanix或pf-03446962。在某些方面，該sting激動劑是環(huán)狀二核苷酸或呫噸酮類似物。例如，該sting激動劑是2'3'-c-di-am(ps)2(rp,rp)。在某些方面，該sting激動劑是選自由以下組成的組的環(huán)狀二核苷酸：3'3'-cgamp、2'3'-cgamp、2'2'-cgamp、c-di-apm、c-di-gmp、c-di-imp和c-di-ump。在某些方面，該sting激動劑是呫噸酮類似物，諸如5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸(dmxaa)。在某些方面，該tlr7/8激動劑是瑞喹莫德(resiquimod)(r848)、cl075、cl097、cl264、cl307、gs-9620、聚(dt)、咪喹莫德(imiquimod)、加迪喹莫德(gardiquimod)、洛索立賓(loxoribine)或ssrna寡核苷酸。在某些方面，該rig-i激動劑是5'ppp-dsrna、mda5配體、lgp2配體、ssrna、dsrna、聚(da:dt)或聚(i:c)。在某些方面，該蛋白酶體抑制劑是二乙基二硫代氨基甲酸銅(ii)、硼替佐米(bortezomib)、地蘭佐米(delanzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、mg132、mg115、ipsi?001、非魯酰胺(fellutamide)b、alln、亮抑酶肽、環(huán)氧霉素(epoxomicin)、奧普佐米(oprozomib)、pr-957、卡非佐米(carfilzomib)、乳胞素(lactacystin)、omuralide、鹽孢酰胺a、鹽孢酰胺b、belactosine、cinnabaramide、多酚、tmc-95或ps-519。在特定方面，該腺苷a3受體激動劑是2-氯-n(6)-(3-碘芐基)腺苷-5'-n-甲基甲酰胺(2-cl-ib-meca)、ib-meca(cf101)、cp-608,039、cp-532,903、mrs5698、mrs5980、lj-529?33或mrs4322。在一些方面，該4-1bb激動劑是4-1bb激動劑抗體、重組4-1bb配體(4-1bbl)或4-1bb適體。例如，該4-1bb激動劑抗體是托米利尤單抗(utomilumab)或烏瑞利尤單抗(urelumab)。

12、在一些方面，該受試者是人。在某些方面，該受試者患有癌癥，諸如三陰性乳腺癌(tnbc)、胰腺導(dǎo)管腺癌(pdac)、黑色素瘤或頭頸部癌。

13、在某些方面，在手術(shù)干預(yù)之前進(jìn)行施用。在一些方面，施用包括瘤內(nèi)注射。在具體方面，該瘤內(nèi)注射不包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。

14、在一些方面，該免疫原性組合物施用多于一次。在某些方面，該免疫原性組合物施用兩次或更多次。

15、在某些方面，施用該免疫原性組合物導(dǎo)致循環(huán)cd8+t細(xì)胞、m1巨噬細(xì)胞和/或腫瘤浸潤性樹突細(xì)胞的增加。在具體方面，該cd8+t細(xì)胞是cd8+ifn-γ+細(xì)胞。在特定方面，施用該免疫原性組合物導(dǎo)致持久的t細(xì)胞記憶應(yīng)答，如通過與施用之前的cd44+cd127+t細(xì)胞相比cd44+cd127+t細(xì)胞的增加所測量的。在一些方面，該方法不包括在施用該免疫原性組合物時向所述受試者施用細(xì)胞療法，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。在某些方面，該方法不包括在施用免疫原性組合物時向所述受試者施用免疫檢查點抑制劑、細(xì)胞因子和/或抗原，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。

16、另一個實施例提供了治療患有癌癥的受試者的方法，該方法包括向該受試者施用有效量的以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該方法包括施用(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種(例如，4種或5種)：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

17、在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在特定方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在具體方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

18、在某些方面，該tgfβ拮抗劑是加盧色替(ly2157299)、曲貝德生(trabedersen)、瑞索利尤單抗(fresolimumab)、ly2382770、lucanix或pf-03446962。在某些方面，該sting激動劑是環(huán)狀二核苷酸或呫噸酮類似物。例如，該sting激動劑是2'3'-c-di-am(ps)2(rp,rp)。在某些方面，該sting激動劑是選自由以下組成的組的環(huán)狀二核苷酸：3'3'-cgamp、2'3'-cgamp、2'2'-cgamp、c-di-apm、c-di-gmp、c-di-imp和c-di-ump。在某些方面，該sting激動劑是呫噸酮類似物，諸如5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸(dmxaa)。在某些方面，該tlr7/8激動劑是瑞喹莫德(resiquimod)(r848)、cl075、cl097、cl264、cl307、gs-9620、聚(dt)、咪喹莫德(imiquimod)、加迪喹莫德(gardiquimod)、洛索立賓(loxoribine)或ssrna寡核苷酸。在某些方面，該rig-i激動劑是5'ppp-dsrna、mda5配體、lgp2配體、ssrna、dsrna、聚(da:dt)或聚(i:c)。在某些方面，該蛋白酶體抑制劑是二乙基二硫代氨基甲酸銅(ii)、硼替佐米(bortezomib)、地蘭佐米(delanzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、mg132、mg115、ipsi?001、非魯酰胺(fellutamide)b、alln、亮抑酶肽、環(huán)氧霉素(epoxomicin)、奧普佐米(oprozomib)、pr-957、卡非佐米(carfilzomib)、乳胞素(lactacystin)、omuralide、鹽孢酰胺a、鹽孢酰胺b、belactosine、cinnabaramide、多酚、tmc-95或ps-519。在特定方面，該腺苷a3受體激動劑是2-氯-n(6)-(3-碘芐基)腺苷-5'-n-甲基甲酰胺(2-cl-ib-meca)、ib-meca(cf101)、cp-608,039、cp-532,903、mrs5698、mrs5980、lj-529?33或mrs4322。在一些方面，該4-1bb激動劑是4-1bb激動劑抗體、重組4-1bb配體(4-1bbl)或4-1bb適體。例如，該4-1bb激動劑抗體是托米利尤單抗(utomilumab)或烏瑞利尤單抗(urelumab)。

19、在一些方面，在手術(shù)干預(yù)之前進(jìn)行施用。在特定方面，該受試者尚未經(jīng)歷腫瘤的手術(shù)切除。在特定方面，施用包括注射該免疫原性組合物。在一些方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為一次注射施用。在某些方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為多于一次注射施用。在某些方面，該注射是瘤內(nèi)注射。

20、在一些方面，該癌癥是三陰性乳腺癌(tnbc)、pdac、頭頸部癌或黑色素瘤。在某些方面，該瘤內(nèi)注射不包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。在一些方面，該瘤內(nèi)注射包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。

21、在某些方面，該施用多于一次。在一些方面，該施用是兩次或更多次。

22、在一些方面，施用導(dǎo)致循環(huán)cd8+t細(xì)胞、m1巨噬細(xì)胞和/或腫瘤浸潤性樹突細(xì)胞的增加。在具體方面，該cd8+t細(xì)胞是cd8+ifn-γ+細(xì)胞。在特定方面，施用導(dǎo)致持久的t細(xì)胞記憶應(yīng)答，如通過與施用之前的cd44+cd127+t細(xì)胞相比cd44+cd127+t細(xì)胞的增加所測量的。在某些方面，該方法不包括在施用該轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑(或4-1bb激動劑)、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑時向所述受試者施用細(xì)胞療法，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。在某些方面，該方法不包括在施用該轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑(或4-1bb激動劑)、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑時向所述受試者施用免疫檢查點抑制劑、細(xì)胞因子和/或抗原，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。

23、在一些方面，該方法進(jìn)一步包括施用額外的抗癌療法。在某些方面，該額外的抗癌療法包括化學(xué)療法、放射療法、基因療法、手術(shù)、激素療法、抗血管生成療法或免疫療法。

24、在一些方面，該患者是人。在一些方面，該患者先前已施用過抗癌療法。

25、另一個實施例提供了預(yù)防患有癌癥的受試者中的腫瘤轉(zhuǎn)移的方法，該方法包括向該受試者施用有效量的以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該方法包括施用(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種(例如，4種或5種)：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

26、在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在特定方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在具體方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用以下各項中的至少5種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，向該受試者施用4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，向該受試者施用轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

27、在某些方面，該tgfβ拮抗劑是加盧色替(ly2157299)、曲貝德生(trabedersen)、瑞索利尤單抗(fresolimumab)、ly2382770、lucanix或pf-03446962。在某些方面，該sting激動劑是環(huán)狀二核苷酸或呫噸酮類似物。例如，該sting激動劑是2'3'-c-di-am(ps)2(rp,rp)。在某些方面，該sting激動劑是選自由以下組成的組的環(huán)狀二核苷酸：3'3'-cgamp、2'3'-cgamp、2'2'-cgamp、c-di-apm、c-di-gmp、c-di-imp和c-di-ump。在某些方面，該sting激動劑是呫噸酮類似物，諸如5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸(dmxaa)。在某些方面，該tlr7/8激動劑是瑞喹莫德(resiquimod)(r848)、cl075、cl097、cl264、cl307、gs-9620、聚(dt)、咪喹莫德(imiquimod)、加迪喹莫德(gardiquimod)、洛索立賓(loxoribine)或ssrna寡核苷酸。在某些方面，該rig-i激動劑是5'ppp-dsrna、mda5配體、lgp2配體、ssrna、dsrna、聚(da:dt)或聚(i:c)。在某些方面，該蛋白酶體抑制劑是二乙基二硫代氨基甲酸銅(ii)、硼替佐米(bortezomib)、地蘭佐米(delanzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、mg132、mg115、ipsi?001、非魯酰胺(fellutamide)b、alln、亮抑酶肽、環(huán)氧霉素(epoxomicin)、奧普佐米(oprozomib)、pr-957、卡非佐米(carfilzomib)、乳胞素(lactacystin)、omuralide、鹽孢酰胺a、鹽孢酰胺b、belactosine、cinnabaramide、多酚、tmc-95或ps-519。在特定方面，該腺苷a3受體激動劑是2-氯-n(6)-(3-碘芐基)腺苷-5'-n-甲基甲酰胺(2-cl-ib-meca)、ib-meca(cf101)、cp-608,039、cp-532,903、mrs5698、mrs5980、lj-529?33或mrs4322。在一些方面，該4-1bb激動劑是4-1bb激動劑抗體、重組4-1bb配體(4-1bbl)或4-1bb適體。例如，該4-1bb激動劑抗體是托米利尤單抗(utomilumab)或烏瑞利尤單抗(urelumab)。

28、在一些方面，在手術(shù)干預(yù)之前進(jìn)行施用。在某些方面，該受試者尚未經(jīng)歷腫瘤的手術(shù)切除。在一些方面，施用包括注射該免疫原性組合物。在特定方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為一次注射施用。在其他方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為多于一次注射施用。在特定方面，該注射是瘤內(nèi)注射。

29、在一些方面，該癌癥是三陰性乳腺癌(tnbc)、pdac、頭頸部癌或黑色素瘤。在一些方面，該瘤內(nèi)注射不包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。在其他方面，該瘤內(nèi)注射確實包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。

30、在某些方面，該施用多于一次。在其他方面，該施用是兩次或更多次。

31、在一些方面，施用導(dǎo)致循環(huán)cd8+t細(xì)胞、m1巨噬細(xì)胞和/或腫瘤浸潤性樹突細(xì)胞的增加。在具體方面，該cd8+t細(xì)胞是cd8+ifn-γ+細(xì)胞。在某些方面，施用導(dǎo)致持久的t細(xì)胞記憶應(yīng)答，如通過與施用之前的cd44+cd127+t細(xì)胞相比cd44+cd127+t細(xì)胞的增加所測量的。

32、在某些方面，該方法不包括在施用該轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑(或4-1bb激動劑)、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑時向所述受試者施用細(xì)胞療法，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。在特定方面，該方法不包括在施用該轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑時向所述受試者施用免疫檢查點抑制劑、細(xì)胞因子和/或抗原，諸如在該免疫原性組合物的1天、1周、2周、1個月或3個月內(nèi)不施用。

33、在一些方面，該方法進(jìn)一步包括施用額外的抗癌療法。例如，該額外的抗癌療法包括化學(xué)療法、放射療法、基因療法、手術(shù)、激素療法、抗血管生成療法或免疫療法。

34、在一些方面，該患者是人。在一些方面，該患者先前已施用過抗癌療法。

35、另一個實施例提供了免疫原性組合物，其包含以下各項中的至少4種(例如，至少5種、6種或7種)：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該組合物包含(a)轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑或4-1bb激動劑和(b)以下各項中的至少3種(例如4種或5種)：干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

36、在一些方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在某些方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和蛋白酶體抑制劑。在具體方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在特定方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑和腺苷a3受體激動劑。在一些方面，該組合物包含以下各項中的至少5種：轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含以下各項中的至少5種：4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含轉(zhuǎn)化生長因子β(tgfβ)拮抗劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。在某些方面，該組合物包含4-1bb激動劑、干擾素基因刺激因子(sting)激動劑、toll樣受體7/8(tlr7/8)激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑。

37、在某些方面，該tgfβ拮抗劑是加盧色替(ly2157299)、曲貝德生(trabedersen)、瑞索利尤單抗(fresolimumab)、ly2382770、lucanix或pf-03446962。在某些方面，該sting激動劑是環(huán)狀二核苷酸或呫噸酮類似物。例如，該sting激動劑是2'3'-c-di-am(ps)2(rp,rp)。在某些方面，該sting激動劑是選自由以下組成的組的環(huán)狀二核苷酸：3'3'-cgamp、2'3'-cgamp、2'2'-cgamp、c-di-apm、c-di-gmp、c-di-imp和c-di-ump。在某些方面，該sting激動劑是呫噸酮類似物，諸如5,6-二甲基呫噸酮-4-乙酸(dmxaa)。在某些方面，該tlr7/8激動劑是瑞喹莫德(resiquimod)(r848)、cl075、cl097、cl264、cl307、gs-9620、聚(dt)、咪喹莫德(imiquimod)、加迪喹莫德(gardiquimod)、洛索立賓(loxoribine)或ssrna寡核苷酸。在某些方面，該rig-i激動劑是5'ppp-dsrna、mda5配體、lgp2配體、ssrna、dsrna、聚(da:dt)或聚(i:c)。在某些方面，該蛋白酶體抑制劑是二乙基二硫代氨基甲酸銅(ii)、硼替佐米(bortezomib)、地蘭佐米(delanzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、mg132、mg115、ipsi?001、非魯酰胺(fellutamide)b、alln、亮抑酶肽、環(huán)氧霉素(epoxomicin)、奧普佐米(oprozomib)、pr-957、卡非佐米(carfilzomib)、乳胞素(lactacystin)、omuralide、鹽孢酰胺a、鹽孢酰胺b、belactosine、cinnabaramide、多酚、tmc-95或ps-519。在特定方面，該腺苷a3受體激動劑是2-氯-n(6)-(3-碘芐基)腺苷-5'-n-甲基甲酰胺(2-cl-ib-meca)、ib-meca(cf101)、cp-608,039、cp-532,903、mrs5698、mrs5980、lj-529?33或mrs4322。在一些方面，該4-1bb激動劑是4-1bb激動劑抗體、重組4-1bb配體(4-1bbl)或4-1bb適體。例如，該4-1bb激動劑抗體是托米利尤單抗(utomilumab)或烏瑞利尤單抗(urelumab)。

38、在一些方面，受試者是人。在某些方面，該癌癥是三陰性乳腺癌(tnbc)、pdac、頭頸部癌或黑色素瘤。

39、在一些方面，該組合物在手術(shù)干預(yù)之前施用。在某些方面，該組合物通過瘤內(nèi)注射施用。在一些方面，該瘤內(nèi)注射不包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。在其他方面，該瘤內(nèi)注射確實包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。

40、在某些方面，該免疫原性組合物施用多于一次。在一些方面，該免疫原性組合物施用兩次或更多次。

41、在一些方面，施用該免疫原性組合物導(dǎo)致循環(huán)cd8+t細(xì)胞、m1巨噬細(xì)胞和/或腫瘤浸潤性樹突細(xì)胞的增加。在某些方面，該cd8+t細(xì)胞是cd8+ifn-γ+細(xì)胞。在一些方面，該組合物導(dǎo)致持久的t細(xì)胞記憶應(yīng)答，如通過與施用之前的cd44+cd127+t細(xì)胞相比cd44+cd127+t細(xì)胞的增加所測量的。

42、在一些方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為一次注射施用。在其他方面，該tgfβ拮抗劑(或4-1bb激動劑)、sting激動劑、tlr7/8激動劑、rig-i激動劑、蛋白酶體抑制劑和腺苷a3受體激動劑作為多于一次注射施用。

43、在某些方面，該瘤內(nèi)注射不包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。在其他方面，該瘤內(nèi)注射確實包含生物材料，諸如水凝膠或聚合物。

44、在一些方面，該免疫原性組合物施用多于一次。在某些方面，該組合物施用兩次或更多次。在特定方面，該組合物不包含細(xì)胞療法。在具體方面，該組合物不包含免疫檢查點抑制劑、細(xì)胞因子和/或抗原。

45、在一些方面，該組合物還包含額外的抗癌療法，諸如化學(xué)療法、放射療法、基因療法、手術(shù)、激素療法、抗血管生成療法或免疫療法。

46、本發(fā)明的其它目的、特征和優(yōu)點將從以下詳細(xì)描述中變得清楚。然而，應(yīng)理解，具體實施方式和特定實例雖然指示本發(fā)明的優(yōu)選實施例，但僅以說明方式給出，因為本領(lǐng)域的技術(shù)人員將由此實施方式而變得顯而易知本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)的各種變化和修改。