本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及一種具有抗病毒作用的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：蟾酥是蟾蜍耳后腺及表皮腺體的分泌物，白色乳狀液體或淺黃色漿液，有毒。蟾酥提取漿液，干燥，上色，密封保存后可以入藥。具有解毒、鎮(zhèn)痛、開竅、抗腫瘤等多種功能而被廣泛應(yīng)用。德國(guó)已將蟾酥制劑用于臨床治療冠心病，日本以蟾酥為原料生產(chǎn)“救生丹”。中國(guó)著名的梅花點(diǎn)舌丹、一粒牙痛丸、心寶、華蟾素注射液等50余種中成藥中都有蟾酥成分。由于蟾酥具有很大的毒性，現(xiàn)有的上市藥物制劑都是以經(jīng)特殊方法處理過的蟾酥提取物入藥的。蟾酥提取物雖然能夠在臨床上取得一定的效果，但由于其中的成分復(fù)雜，而且根據(jù)提取工藝以及原料來源的不同會(huì)導(dǎo)致蟾酥提取物中的有效成分含量不穩(wěn)定，質(zhì)量不易控制，用藥的安全性也會(huì)大打折扣。因此，從蟾酥中開發(fā)一種成分明確的藥物，具有廣闊的市場(chǎng)前景?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)，蟾酥中含有大量的蟾蜍毒素類物質(zhì)、甾體類、生物堿類化學(xué)成分。但在眾多的成分當(dāng)中，哪些成分的組合具有優(yōu)異的抗病毒作用，以及哪些成分的組合具有低毒作用尚無研究報(bào)道。因此，開發(fā)一種具有優(yōu)異作用的抗病毒且成分明確的組合物對(duì)人類健康事業(yè)具有重大的貢獻(xiàn)，尤其是開發(fā)一種成分明確、抗病毒作用優(yōu)異且毒性低的藥物組合物，其意義更重大。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種具有抗病毒作用的藥物組合物。本發(fā)明所要解決的上述技術(shù)問題，通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：本發(fā)明提供，一種具有抗病毒作用的藥物組合物，其包含蟾毒靈和華蟾酥毒基。優(yōu)選地，所述的蟾毒靈和華蟾酥毒基的重量比為1~10:1~10。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的蟾毒靈和華蟾酥毒基的重量比為1~5:1~5。更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的蟾毒靈和華蟾酥毒基的重量比為1~3:1~3。發(fā)明人經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，將蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后能發(fā)揮協(xié)同抗病毒作用，尤其是將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1~3:1~3混合后其協(xié)同抗病毒效果更明顯。本領(lǐng)域技術(shù)人員都知道，藥物之間能否發(fā)生協(xié)同作用，和藥物的組合以及各藥物之間的用量有著密切的關(guān)系；藥物組合不當(dāng)不僅不能發(fā)生協(xié)同作用反而會(huì)相互之間發(fā)生抑制作用；此外，藥物之間用量配比不當(dāng)，同樣決定著藥物之間是否發(fā)生協(xié)同作用或抑制作用。本發(fā)明所述的藥物組合和藥物組合物之間的重量配比是發(fā)明經(jīng)大量實(shí)驗(yàn)摸索出來的具有協(xié)同抗病毒作用的組合和配比。優(yōu)選地，所述的具有抗病毒作用的藥物組合物，還包含甾醇類化合物，所述的甾醇類化合物選自β-谷甾醇和菜油甾醇中的一種或兩種的混合。優(yōu)選地，所述的甾醇類化合物的重量用量為蟾毒靈和華蟾酥毒基重量之和的1/10~1/30。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的甾醇類化合物的重量用量為蟾毒靈和華蟾酥毒基重量之和的1/10~1/20。優(yōu)選地，所述的甾醇類化合物選自β-谷甾醇和菜油甾醇的混合，β-谷甾醇和菜油甾醇的重量比為1~5:1~5。進(jìn)一步優(yōu)選地，β-谷甾醇和菜油甾醇的重量比為1~3:1~3。發(fā)明人通過大量實(shí)驗(yàn)還進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，蟾毒靈和華蟾酥毒基組合后雖然具有協(xié)同抗流感病毒作用，但其細(xì)胞毒性還是比較大，不宜大劑量長(zhǎng)期服用；但當(dāng)甾醇類化合物后加入后，尤其是β-谷甾醇和菜油甾醇加入后，蟾毒靈和華蟾酥毒基組合物的細(xì)胞毒性大幅降低，且β-谷甾醇和菜油甾醇加入后并不影響蟾毒靈和華蟾酥毒基的抗病毒效果。優(yōu)選地，所述的病毒為流感病毒。最優(yōu)選地，所述的流感病毒為禽流感病毒或副流感病毒。優(yōu)選地，所述的藥物組合物還包含藥學(xué)上可接受的載體。優(yōu)選地，所述的抗炎藥物組合物的劑型為液體注射劑、粉針劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊、散劑、丸劑、口服液、膏劑、顆粒劑或敷料。優(yōu)選地，所述的病毒為流感病毒、禽流感病毒、腸道病毒、人乳頭瘤病毒、肝炎病毒。有益效果：本發(fā)明提供了一種全新的具有抗病毒作用的藥物組合物，組合物中蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后能發(fā)揮協(xié)同抗病毒作用，尤其是將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1~3:1~3混合后其協(xié)同抗病毒效果更明顯，其抗流感病毒的作用與陽性對(duì)照藥利巴韋林相當(dāng)；此外，本發(fā)明還可在組合物中加入甾醇類化合物，尤其是β-谷甾醇和菜油甾醇加入后，蟾毒靈和華蟾酥毒基組合物的細(xì)胞毒性大幅降低。具體實(shí)施方式以下結(jié)合具體實(shí)施例來進(jìn)一步解釋本發(fā)明，但實(shí)施例對(duì)本發(fā)明不做任何形式的限定。實(shí)施例1藥物組合物抗流感病毒測(cè)試在長(zhǎng)滿單層mdck細(xì)胞層的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，加入100tcid50（100倍半數(shù)感染量）病毒液（h1n1病毒或piv3副流感病毒）100μl/孔，吸附1h，然后每孔分別加入，再加入用維持液稀釋好的系列濃度樣品溶液100μl，置于37℃、5%co2培養(yǎng)箱中孵育。48h后將96孔板中的舊液吸棄，再用cck8溶液稀釋10倍后分別按每孔100μl加入被測(cè)試孔中，在培養(yǎng)箱孵育1h后，用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)吸光度，測(cè)試各樣品溶液的ic50值。ic50計(jì)算方式如下：細(xì)胞存活率=（加藥孔o(hù)d值－病毒對(duì)照組od值）/（細(xì)胞對(duì)照組od值－病毒對(duì)照組od值）×100%；以藥物濃度為x軸，細(xì)胞存活率為y軸，在origin作圖，求出50%細(xì)胞存活率對(duì)應(yīng)的濃度則為ic50。樣品分別為蟾毒靈；華蟾酥毒基；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為10:1組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:10組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為3:1組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:3組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:1組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:1組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基和β-谷甾醇按重量比為1:1:0.05組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基、β-谷甾醇和菜油甾醇按重量比為1:1:0.03:0.02組成的混合樣品；對(duì)照組樣品溶液為利巴韋林。各樣品溶液的抗病毒效果測(cè)試數(shù)據(jù)見表1。表1.本發(fā)明藥物組合物抗流感病毒ic50測(cè)試結(jié)果樣品h1n1病毒ic50值（μm）piv3病毒ic50值（μm）蟾毒靈10.5315.46華蟾酥毒基15.4416.89蟾毒靈：華蟾酥毒基（10:1）8.4110.12蟾毒靈：華蟾酥毒基（1:10）9.8811.32蟾毒靈：華蟾酥毒基（3:1）4.275.71蟾毒靈：華蟾酥毒基（1:3）4.825.43蟾毒靈：華蟾酥毒基（1:1）3.664.21蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇（1:1:0.05）3.984.33蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇：菜油甾醇（1:1:0.03:0.02）3.844.29利巴韋林3.414.34從表1數(shù)據(jù)中可以看出單獨(dú)使用蟾毒靈和華蟾酥毒基具有一定的抗流感病毒（禽流感病毒和副流感病毒）作用，但其ic50值是陽性對(duì)照藥利巴韋林的好幾倍，這說明單獨(dú)使用蟾毒靈和華蟾酥毒基，其抗流感病毒的作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及利巴韋林。從表1數(shù)據(jù)還可以看出，當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基以10:1或1:10的比例混合后使用，其抗流感病毒的其ic50值比單獨(dú)使用蟾毒靈和華蟾酥毒基時(shí)要小，說明當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后，其抗流感病毒作用能進(jìn)一步加強(qiáng)，這說明當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后產(chǎn)生了協(xié)同的抗流感病毒作用。從表1數(shù)據(jù)還可以看出，當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基以1~3:1~3的比例混合后，其ic50值和利巴韋林的ic50值接近，這說明當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基以1~3:1~3的比例混合后，其協(xié)同抗流感病毒作用更明顯。從表1數(shù)據(jù)中還可以看出蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后加入β-谷甾醇和菜油甾醇等藥物成分對(duì)其協(xié)同抗流感病毒作用并無影響。綜上所述，由于蟾毒靈和華蟾酥毒基具有協(xié)同抗流感病毒的作用，因此可以將蟾毒靈和華蟾酥毒基混合后作為抗病毒藥物使用，尤其是作為抗禽流感病毒和副流感病毒的藥物。實(shí)施例2藥物組合物細(xì)胞毒性測(cè)試將hep-2細(xì)胞培養(yǎng)在96孔培養(yǎng)板中，待單層細(xì)胞長(zhǎng)好后，加入用維持液稀釋好的系列濃度樣品溶液100μl，在5％co2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天；然后加入10μlmtt溶液，mtt溶液的濃度為5mg/ml，用緩沖溶液配置，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)；吸出樣品溶液，加入二甲亞砜，室溫下，將96孔板置于微空孔板振蕩器中振蕩10分鐘；用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的od值，測(cè)量波長(zhǎng)為570nm，參比波長(zhǎng)為630nm，計(jì)算樣品對(duì)細(xì)胞的半數(shù)致死毒性濃度(cc50)。每組設(shè)4個(gè)平衡孔，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。計(jì)算結(jié)果，畫出曲線，求出半數(shù)毒性濃度(cc50)。樣品分別為蟾毒靈；華蟾酥毒基；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為10:1組成的混合樣品；蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:1組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基和β-谷甾醇按重量比為1:1:0.05組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基、β-谷甾醇和菜油甾醇按重量比為1:1:0.03:0.02組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基和β-谷甾醇按重量比為1:1:0.1組成的混合樣品；蟾毒靈、華蟾酥毒基、β-谷甾醇和菜油甾醇按重量比為1:1:0.06:0.04組成的混合樣品，對(duì)照組樣品溶液為病毒唑。各樣品的細(xì)胞毒性測(cè)試數(shù)據(jù)見表2。表2.本發(fā)明藥物組合物抗流感病毒ic50測(cè)試結(jié)果樣品cc50值（μm）蟾毒靈25.44華蟾酥毒基18.33蟾毒靈：華蟾酥毒基（3:1）22.14蟾毒靈：華蟾酥毒基（1:3）19.18蟾毒靈：華蟾酥毒基（1:1）21.44蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇（1:1:0.05）40.13蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇：菜油甾醇（1:1:0.03:0.02）55.21蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇（1:1:0.1）52.36蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇：菜油甾醇（1:1:0.06:0.04）64.45病毒唑62.5從表2數(shù)據(jù)中可以看出，單獨(dú)使用蟾毒靈、華蟾酥毒基或二者的組合，其對(duì)細(xì)胞的cc50值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于病毒唑?qū)?xì)胞的cc50值，這說明單獨(dú)使用蟾毒靈、華蟾酥毒基或二者的組合作為藥物，其具有一定的毒性，其細(xì)胞毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于病毒唑的細(xì)胞毒性，因此，不宜長(zhǎng)期大劑量服用蟾毒靈、華蟾酥毒基或二者的組合。從表2中還可以看出，當(dāng)在蟾毒靈和華蟾酥毒基中加入甾醇類化合物后，蟾毒靈和華蟾酥毒基的細(xì)胞毒性得到了中和，如蟾毒靈：華蟾酥毒基：β-谷甾醇=1:1:0.05或1:1:0.1時(shí)，其cc50值大幅提高，這說明了當(dāng)甾醇類化合物按重量用量為蟾毒靈和華蟾酥毒基重量之和的1/10~1/20加入到蟾毒靈和華蟾酥毒基中后，能減輕蟾毒靈和華蟾酥毒基對(duì)細(xì)胞的毒性；從上述數(shù)據(jù)中還可以看出，當(dāng)蟾毒靈和華蟾酥毒基中加入β-谷甾醇和菜油甾醇的組合后，其細(xì)胞毒性進(jìn)一步降低，其cc50值與病毒唑的相當(dāng)，這說明蟾毒靈和華蟾酥毒基中加入β-谷甾醇和菜油甾醇的組合后，β-谷甾醇和菜油甾醇協(xié)同中和了蟾毒靈和華蟾酥毒基的毒性，使得其細(xì)胞毒性進(jìn)一步大幅降低。綜合表1和表2的數(shù)據(jù)可以看出，蟾毒靈和華蟾酥毒基組合后雖然具有協(xié)同抗流感病毒作用，但其細(xì)胞毒性還是比較大，不宜大劑量長(zhǎng)期服用；但當(dāng)甾醇類化合物后加入后，尤其是β-谷甾醇和菜油甾醇加入后，蟾毒靈和華蟾酥毒基組合物的細(xì)胞毒性大幅降低，且從表1數(shù)據(jù)中可以看出β-谷甾醇和菜油甾醇加入后并不影響蟾毒靈和華蟾酥毒基的抗病毒效果。實(shí)施例3具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成粉針劑。實(shí)施例4具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為10:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成粉針劑。實(shí)施例5具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:10混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成粉針劑。實(shí)施例6具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為5:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成液體注射劑。實(shí)施例7具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:5混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成液體注射劑。實(shí)施例8具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為3:1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成片劑。實(shí)施例9具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈和華蟾酥毒基按重量比為1:3混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成膠囊劑。實(shí)施例10具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈、華蟾酥毒基和β-谷甾醇按重量比為1:1:0.05混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成片劑。實(shí)施例11具有抗病毒作用的藥物組合物將蟾毒靈、華蟾酥毒基和β-谷甾醇按重量比為1:1:0.1混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成片劑。實(shí)施例12具有抗病毒作用的藥物組合物蟾毒靈、華蟾酥毒基、β-谷甾醇和菜油甾醇按重量比為1:1:0.03:0.02混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成液體注射劑。實(shí)施例12具有抗病毒作用的藥物組合物蟾毒靈、華蟾酥毒基、β-谷甾醇和菜油甾醇按重量比為1:1:0.06:0.04混合作為有效成分，然后按制藥領(lǐng)域常規(guī)的方法制成液體注射劑。當(dāng)前第1頁12