本發(fā)明涉及醫(yī)療器械領(lǐng)域，具體涉及一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備。

背景技術(shù)：

自體脂肪移植是將患者自身脂肪移植到軟組織缺損部位,從而使受區(qū)達(dá)到豐滿塑形的效果。中國專利CN103598901A公開了一種脂肪移植裝置，利用一體化的結(jié)構(gòu)，將取出的脂肪進(jìn)行過濾提純后再直接進(jìn)行脂肪植入，脂肪活性不會受到影響，而且也避免了脂肪的污染；另外抽取出的脂肪經(jīng)過濾網(wǎng)提純，提純后的脂肪植入人體，相容性好。結(jié)構(gòu)簡單，實(shí)用性強(qiáng)，易于產(chǎn)業(yè)化。

但是在實(shí)際工作中我們發(fā)現(xiàn)，移植后的脂肪存活率較低,一般為30％～60％。其關(guān)鍵原因在于脂肪細(xì)胞對缺血耐受力較差,移植體周邊區(qū)脂肪組織由于血運(yùn)恢復(fù)較快,存活較好,而中央?yún)^(qū)因不能及時(shí)得到充足血供,脂肪細(xì)胞壞死較多。所以一般需要在手術(shù)區(qū)域經(jīng)過多次注射才能達(dá)到預(yù)期的效果，多次注射的間隔時(shí)間一般為3-6個月，多次注射一方面加長了手術(shù)周期不利于手術(shù)部位的恢復(fù)生產(chǎn)，另一方面也增加了施術(shù)者的工作量，也讓手術(shù)者要承受多次手術(shù)的痛苦，而且取脂的部位由于比較集中會出現(xiàn)取完脂后皮膚松弛起皺等癥狀。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述現(xiàn)有的自體脂肪移植設(shè)備存在脂肪細(xì)胞存活率不高、取脂部位容易產(chǎn)生皮膚松弛等問題，本發(fā)明提供了一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備，具體方案如下：

一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備，包括收集裝置、處理裝置和注射裝置，其特征在于：

所述收集裝置包括取脂裝置和取血裝置，所述取脂裝置包括取脂支架和若干吸脂腔，所述取脂支架上設(shè)有若干第一滑軌，所述吸脂腔上設(shè)有若干第一滑塊，所述吸脂腔通過所述第一滑塊設(shè)置于所述第一滑軌上，所述吸脂腔可以在所述第一滑軌上運(yùn)動；所述吸脂腔內(nèi)設(shè)有活塞，所述吸脂腔被所述活塞分成工作腔和負(fù)壓腔，所述負(fù)壓腔的一端設(shè)有負(fù)壓管路，所述工作腔的一端設(shè)有可拆卸的針頭，所述工作腔與所述針頭的連接處設(shè)有第一單向閥；所述吸脂腔側(cè)壁上開設(shè)有出脂口，所述出脂口連接有可拆卸的出脂管路，所述出脂口與所述出脂管路之間設(shè)有第二單向閥；所述取血裝置為醫(yī)用注射器；所述處理裝置包括提取裝置和培養(yǎng)裝置，所述提取裝置包括清洗部、離心部和消化部，所述清洗部用于將取得的脂肪細(xì)胞進(jìn)行清洗，所述離心部和所述消化部用于分離脂肪細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞；所述培養(yǎng)裝置包括脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和共培養(yǎng)系統(tǒng)，分別用于脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)和將脂肪干細(xì)胞接種于脂肪細(xì)胞之后的培養(yǎng)；所述注射裝置包括與取脂裝置結(jié)構(gòu)相對的注射支架和若干注射腔，所述注射支架上設(shè)有若干第二滑軌，所述注射腔上設(shè)有若干第二滑塊，所述注射腔通過所述第二滑塊設(shè)置于所述第二滑軌上，所述注射腔可以在所述第二滑軌上運(yùn)動；所述注射腔側(cè)壁上開設(shè)有入脂口，所述入脂口連接有可拆卸的入脂管路，所述入脂口與所述入脂管路之間設(shè)有第三單向閥。

進(jìn)一步地，所述吸脂腔與所述第一滑軌以及所述注射腔與所述第二滑軌之間均設(shè)有限位裝置，保證吸脂腔和注射腔可以固定在滑軌上不同的位置，從而保證吸脂腔和注射腔的針頭可以處于不同的工作平面上。

進(jìn)一步地，所述限位裝置包括設(shè)置于所述吸脂腔和所述注射腔一端的限位螺栓以及所述第一滑軌和所述第二滑軌上開設(shè)的若干限位孔，通過限位螺栓是否伸入限位孔內(nèi)達(dá)到吸脂腔和注射腔的位置是否限定的目的。

進(jìn)一步地，所述清洗部包括盛裝有清洗液的細(xì)胞皿，用于將取出的脂肪組織進(jìn)行清洗。

進(jìn)一步地，所述離心部包括離心管和離心機(jī)，用于將清洗后的脂肪組織進(jìn)行離心從而取得想要獲得的脂肪細(xì)胞。

進(jìn)一步地，所述消化部包括盛裝有消化液的試管，用于將清洗后的脂肪組織進(jìn)行消化，用于取得脂肪干細(xì)胞。

進(jìn)一步地，所述脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)面積為25cm²的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用于將得到的脂肪干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

進(jìn)一步地，所述共培養(yǎng)系統(tǒng)包括插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿，將長滿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的脂肪干細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分別置于插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿的上室和下層中，然后共培。

進(jìn)一步地，所述培養(yǎng)液為含有15-20mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5-7.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：1-3份黃芩素、5-7.5份氯化膽堿和2.5-3份山梨醇。

進(jìn)一步地，所述培養(yǎng)添加劑還包括如下重量份數(shù)的各成分：1-3份硝酸銨、2-5份聚甲基丙烯酸甲酯、0.5-1份生物素、5-10份谷胱甘肽、1-3份月桂酰谷氨酸鈉。

本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提出的一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備，利用多個吸脂腔和注射腔進(jìn)行吸脂和注射的步驟，從而分散人體內(nèi)取脂和注射脂肪的位置，防止取脂位置過于集中導(dǎo)致的皮膚松弛的問題以及注射脂肪位置過于集中導(dǎo)致的脂肪細(xì)胞存活率低的問題；而且利用滑塊和滑軌將多個吸脂腔和注射腔設(shè)置于支架上，然后通過限位裝置可以控制各個吸脂腔和注射腔的針頭處于不同的工作平面，從而符合人體的取脂或者注射部位的結(jié)構(gòu)；此外利用處理裝置從取出的脂肪組織里分離出脂肪細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞，分別培養(yǎng)后共培，誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞在脂肪細(xì)胞內(nèi)向毛細(xì)血管分化，進(jìn)一步提高脂肪細(xì)胞的存活率，從而減少手術(shù)的次數(shù)。

附圖說明

圖1.本發(fā)明的取脂裝置結(jié)構(gòu)示意圖，

圖2.本發(fā)明的取脂腔結(jié)構(gòu)放大圖，

圖3.本發(fā)明的取脂腔與第一滑軌的連接結(jié)構(gòu)示意圖，

圖4.本發(fā)明的共培養(yǎng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意圖，

圖5.本發(fā)明的共培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)室結(jié)構(gòu)示意圖，

圖6.本發(fā)明的注射裝置結(jié)構(gòu)示意圖，

圖7.本發(fā)明的注射腔結(jié)構(gòu)放大圖，

圖8.本發(fā)明的注射腔與第二滑軌的連接結(jié)構(gòu)示意圖，

圖9.本發(fā)明的工作流程圖。

附圖序號及名稱：1、取脂支架，2、吸脂腔，201、第二單向閥，202、出脂管路，203、針頭，204、第一單向閥，205、工作腔，206、活塞，207、負(fù)壓腔，208、負(fù)壓管路，3、第一滑軌，31、第一滑塊，4、限位孔，5、限位螺栓，6、插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿，601、上室，602、下層，7、注射腔，701、第三單向閥，8、注射支架，9、第二滑軌，91、第二滑塊。

具體實(shí)施方式

為詳細(xì)說明本發(fā)明之技術(shù)內(nèi)容、構(gòu)造特征、所達(dá)成目的及功效，以下茲例舉實(shí)施例并配合附圖詳予說明。

實(shí)施例1

如圖1-8所示，一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備，包括收集裝置、處理裝置和注射裝置，收集裝置包括取脂裝置和取血裝置，取脂裝置包括取脂支架1和若干吸脂腔2，取脂支架1上設(shè)有若干第一滑軌3，吸脂腔2上設(shè)有若干第一滑塊31，吸脂腔2通過第一滑塊31設(shè)置于第一滑軌3上，吸脂腔2可以在第一滑軌3上運(yùn)動；吸脂腔2內(nèi)設(shè)有活塞206，吸脂腔2被活塞206分成工作腔205和負(fù)壓腔207，負(fù)壓腔207的一端設(shè)有負(fù)壓管路208，工作腔205的一端設(shè)有可拆卸的針頭203，工作腔205與針頭203的連接處設(shè)有第一單向閥204；吸脂腔2側(cè)壁上開設(shè)有出脂口，出脂口連接有可拆卸的出脂管路202，出脂口與出脂管路202之間設(shè)有第二單向閥201；取血裝置為醫(yī)用注射器；處理裝置包括提取裝置和培養(yǎng)裝置，提取裝置包括清洗部、離心部和消化部，清洗部用于將取得的脂肪細(xì)胞進(jìn)行清洗，離心部和消化部用于分離脂肪細(xì)胞和脂肪干細(xì)胞；培養(yǎng)裝置包括脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和共培養(yǎng)系統(tǒng)，分別用于脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)和將脂肪干細(xì)胞接種于脂肪細(xì)胞之后的培養(yǎng)；所述注射裝置包括與取脂裝置結(jié)構(gòu)相對的注射支架8和若干注射腔7，所述注射支架8上設(shè)有若干第二滑軌9，所述注射腔7上設(shè)有若干第二滑塊91，所述注射腔7通過所述第二滑塊91設(shè)置于所述第二滑軌9上，所述注射腔7可以在所述第二滑軌9上運(yùn)動；所述注射腔7側(cè)壁上開設(shè)有入脂口，所述入脂口連接有可拆卸的入脂管路，所述入脂口與所述入脂管路之間設(shè)有第三單向閥701。吸脂腔2與第一滑軌3以及注射腔7與第二滑軌9之間均設(shè)有限位裝置，保證吸脂腔2和注射腔7可以固定在滑軌上不同的位置，從而保證吸脂腔2和注射腔的針頭可以處于不同的工作平面上。限位裝置包括設(shè)置于吸脂腔2和注射腔7一端的限位螺栓5以及第一滑軌3和第二滑軌上開設(shè)的若干限位孔4，通過限位螺栓5是否伸入限位孔4內(nèi)達(dá)到吸脂腔2和注射腔7的位置是否限定的目的。

清洗部包括細(xì)胞皿和清洗液，用于將取出的脂肪組織進(jìn)行清洗。離心部包括離心管和離心機(jī)，用于將清洗后的脂肪組織進(jìn)行離心從而取得想要獲得的脂肪細(xì)胞。消化部包括試管和消化液，用于將清洗后的脂肪組織進(jìn)行消化，用于取得脂肪干細(xì)胞。脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)面積為25cm²的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用于將得到的脂肪干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。共培養(yǎng)系統(tǒng)包括插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿6，將長滿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的脂肪干細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分別置于插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿的上室601和下層602中，然后共培。

如圖9所示，將吸脂腔取到的脂肪組織分成兩組，第一組用清洗液沖洗，去除殘留的血細(xì)胞和組織碎片，把脂肪組織放入離心管中，記錄原始體積，向組織中加入等體積的消化液，放入37℃氣浴振蕩器中消化30min，然后將消化好的組織靜置5min，待其分層后，用吸管吸取位于懸液上層的脂肪細(xì)胞，將含有脂肪細(xì)胞的懸液以1000r/min(167g)離心2min后棄掉下層懸液得到脂肪細(xì)胞；將第二組脂肪組織用清洗液沖凈，稱重后消化，當(dāng)消化完成后，棄掉上層未消化的脂肪組織，將下層的細(xì)胞懸液以1500r/min(375g)離心10min后棄上清，得到離心管底部的脂肪干細(xì)胞團(tuán)，將其重懸，密度調(diào)整到1×105mL-1，然后接種在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中；之后將準(zhǔn)備好的脂肪干細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分別置于插入式細(xì)胞培養(yǎng)皿的上室和下層中，利用普通培養(yǎng)基進(jìn)行共培；最后將共培后的脂肪干細(xì)胞和脂肪細(xì)胞利用注射腔注入目標(biāo)位置。上述的清洗液為D-hanks溶液，消化液為與待消化組織等體積的0.1％Ⅰ型膠原酶，培養(yǎng)液為L-DMEM培養(yǎng)基的濃度為15mg/mL的DMEM培養(yǎng)基水溶液。

實(shí)施例2

實(shí)施例2與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述培養(yǎng)液為含有15mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：1份黃芩素、5份氯化膽堿和2.5份山梨醇。

實(shí)施例3

實(shí)施例3與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述培養(yǎng)液為含有20mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為7.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：3份黃芩素、7.5份氯化膽堿和3份山梨醇。

實(shí)施例4

實(shí)施例4與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述培養(yǎng)液為含有20mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：2份黃芩素、6份氯化膽堿、2.5份山梨醇、1份硝酸銨、2份聚甲基丙烯酸甲酯、0.5份生物素、5份谷胱甘肽、1份月桂酰谷氨酸鈉。

實(shí)施例5

所述培養(yǎng)液為含有17.5mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為6mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：2.5份黃芩素、7份氯化膽堿、3份山梨醇、2份硝酸銨、3份聚甲基丙烯酸甲酯、0.75份生物素、7.5份谷胱甘肽、2份月桂酰谷氨酸鈉。

實(shí)施例6

所述培養(yǎng)液為含有18mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：2.5份黃芩素、7份氯化膽堿、2.7份山梨醇、3份硝酸銨、5份聚甲基丙烯酸甲酯、1份生物素、10份谷胱甘肽、3份月桂酰谷氨酸鈉。

對照例1

與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述培養(yǎng)液為含有20mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為7.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：7.5份氯化膽堿和3份山梨醇。

對照例2

與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述培養(yǎng)液為含有20mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為7.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：3份黃芩素和3份山梨醇。

對照例3

所述培養(yǎng)液為含有18mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：2.5份黃芩素、7份氯化膽堿、2.7份山梨醇、3份硝酸銨、1份生物素、10份谷胱甘肽、3份月桂酰谷氨酸鈉。

對照例4

所述培養(yǎng)液為含有18mg/mL培養(yǎng)添加劑的DMEM培養(yǎng)基水溶液，所述DMEME培養(yǎng)基水溶液的濃度為5.5mg/mL，所述培養(yǎng)添加劑包括如下重量份數(shù)的成分：2.5份黃芩素、7份氯化膽堿、2.7份山梨醇、3份硝酸銨、5份聚甲基丙烯酸甲酯、1份生物素、3份谷氨酸鈉

利用本發(fā)明實(shí)施例2、3和對照例1-2的一種增加脂肪細(xì)胞存活率的自體脂肪移植設(shè)備進(jìn)行脂肪移植和培養(yǎng)，在溫度-4℃±2℃下，相對濕度為60％±5％的條件下放置1個月后，檢測培養(yǎng)瓶中細(xì)菌情況，檢測結(jié)果見表1。

表1 自體脂肪移植設(shè)備抗菌性能評價(jià)結(jié)果

由表1的數(shù)據(jù)可以得出實(shí)施例2和實(shí)施例3的培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)菌數(shù)量明顯少于對照例1和對照例2，即實(shí)施例2和實(shí)施例3具有較好的抗菌性。

自體脂肪移植設(shè)備對脂肪細(xì)胞增殖能力的評價(jià)：

取實(shí)施例4、實(shí)施例6、對照例3、對照例4的自體脂肪移植設(shè)備，培養(yǎng)脂肪細(xì)胞，采用臺盼藍(lán)經(jīng)典染色法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，分別統(tǒng)計(jì)原代、第3代活脂肪細(xì)胞的數(shù)量，結(jié)果見表2。

表2 脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)擴(kuò)增效果評價(jià)

由表2的數(shù)據(jù)可以得出實(shí)施例4和實(shí)施例6的脂肪細(xì)胞數(shù)量數(shù)量明顯多于對照例4，即實(shí)施例4和實(shí)施例6對于脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)效果優(yōu)于對照例4。

自體脂肪移植設(shè)備對脂肪細(xì)胞存活率的評價(jià)：

取實(shí)施例2、實(shí)施例4、對照例2和4的自體脂肪移植設(shè)備，培養(yǎng)脂肪細(xì)胞，在4℃下保存240小時(shí)，期間分別于第12h、24h、48h、96h、240h時(shí)觀察脂肪細(xì)胞形態(tài)，并用臺盼蘭染色計(jì)數(shù)脂肪細(xì)胞存活率，試驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 脂肪細(xì)胞存活率結(jié)果

(其中：A表示細(xì)胞分散度好、大小均勻、形態(tài)不變、輪廓清晰；B表示細(xì)胞體積變大、大小不等、輪廓模糊、出現(xiàn)橢圓或不規(guī)則等異常形態(tài)。)

由表3的數(shù)據(jù)可以得出實(shí)施例2和實(shí)施例4的脂肪細(xì)胞存活率明顯高于對照例2和對照例4，即實(shí)施例2和實(shí)施例4對于脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)效果優(yōu)于對照例2和對照例4。

綜上所述，僅為本發(fā)明之較佳實(shí)施例，不以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡依本發(fā)明專利范圍及說明書內(nèi)容所作的等效變化與修飾，皆為本發(fā)明專利涵蓋的范圍之內(nèi)。