本發(fā)明涉及疫苗佐劑技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑。
背景技術(shù)：
仔豬副傷寒也稱豬沙門菌病，是由沙門菌引起的仔豬的一種傳染病。急性者為敗血癥，慢性者為壞死性腸炎，常發(fā)生于6月齡以下仔豬，特別是2～4月齡仔豬多見，一年四季均可發(fā)生,多雨潮濕、寒冷、季節(jié)交替時發(fā)生率高?，F(xiàn)有的仔豬副傷寒疫苗注射后，有些豬反應(yīng)較大，有的仔豬會出現(xiàn)體溫升高、發(fā)抖、嘔吐和減食等癥狀。
佐劑最初是由 Gaston Ramon作為與特異性抗原聯(lián)合應(yīng)用的一種物質(zhì)而進行敘述的，而與佐劑聯(lián)合應(yīng)用的特異性抗原此時所產(chǎn)生的免疫應(yīng)答比其單獨應(yīng)用時要高得多。
佐劑是非特異性免疫增強劑，當(dāng)與抗原一起注射或預(yù)先注入機體時，可增強機體對抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型。佐劑增強免疫應(yīng)答的機制是通過改變抗原的物理形狀，延長抗原在機體內(nèi)保留時間；刺激單核吞噬細(xì)胞對抗原的遞呈能力；刺激淋巴細(xì)胞分化，增加擴大免疫應(yīng)答能力。
現(xiàn)有的免疫佐劑，因為效果差或者毒力大，尤其是缺乏針對性，沒有一種得到滿意效果。因此本發(fā)明的目的在于提供一種用于仔豬副傷寒活疫苗的新型免疫佐劑。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的就是針對上述存在的缺陷而提供一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，本發(fā)明將氫氧化鋁膠、磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂有機結(jié)合，互相協(xié)調(diào)，制備出用于仔豬副傷寒活疫苗的免疫復(fù)合佐劑，發(fā)揮佐劑的最大優(yōu)勢，與抗原合用免疫效果較好，毒性小，成本低。能顯著降低疫苗的副作用，并且提高免疫效果。
本發(fā)明的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑技術(shù)方案為，包括氫氧化鋁膠、磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，包括按重量比的以下成分：氫氧化鋁膠20-60、磷酸鈣20-40、維生素E10-20、香菇多糖1-10、羊毛脂10-30。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，包括按重量比的以下成分：氫氧化鋁膠30-55、磷酸鈣25-35、維生素E12-16、香菇多糖2-8、羊毛脂15-20。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，包括按重量比的以下成分：氫氧化鋁膠38、磷酸鈣30、維生素E15、香菇多糖4、羊毛脂17。
氫氧化鋁膠的制備方法為：將質(zhì)量濃度25%-28%的明礬與質(zhì)量濃度10-12%的純堿溶液在溫度在50℃～60℃混合，以60rpm速度不斷攪拌，pH值6.5-6.8，通入蒸汽管進行熟化，驅(qū)除CO2使膠態(tài)變稀，發(fā)灰、青亮為熟化標(biāo)準(zhǔn)，吹沸時間到?jīng)]有大量氣泡為止，pH7.6～7.8之間；加冷水使熟化膠溫下降到75℃以下，攪拌均勻；控干母液后進行洗滌，洗滌水溫在50～55℃，洗滌時用攪棒打碎膠鹽，攪拌均勻，洗滌5-6次，檢查硫酸鹽合格后，停止洗滌；使膠量水份脫至約為明礬投料量的2～2.5倍時得到氫氧化鋁膠。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，制備方法為：
（1）用生理鹽水溶解氫氧化鋁膠；
（2）將磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂加入氫氧化鋁膠生理鹽水混合液中，混合均勻，調(diào)pH到6.5制成佐劑。
步驟（1）中，用生理鹽水溶解氫氧化鋁膠，氫氧化鋁膠質(zhì)量百分比含量為20%。
將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中，按照3000rpm，乳化30分鐘。
本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明將氫氧化鋁膠、磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂有機結(jié)合，互相協(xié)調(diào)，制備出用于仔豬副傷寒活疫苗的免疫復(fù)合佐劑，發(fā)揮佐劑的最大優(yōu)勢，與抗原合用免疫效果較好，毒性小，成本低。能顯著降低疫苗的副作用，并且提高免疫效果。
本發(fā)明佐劑與仔豬副傷寒活疫苗抗原結(jié)合，組成最佳的配方，即形成免疫刺激復(fù)合物，更好的發(fā)揮免疫佐劑效果。應(yīng)用該佐劑和單獨使用氫氧化鋁膠佐劑或者使用現(xiàn)有的弗氏佐劑、分別配置仔豬副傷寒活疫苗活疫苗免疫動物，應(yīng)用本發(fā)明佐劑組其抗體滴度均明顯高于單獨使用明礬佐劑或者使用現(xiàn)有的弗氏佐劑實驗組，高出8-12個抗體滴度。
具體實施方式：
為了更好地理解本發(fā)明，下面用具體實例來詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但是本發(fā)明并不局限于此。
實施例１
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，包括按重量比的以下成分：氫氧化鋁膠38、磷酸鈣30、維生素E15、香菇多糖4、羊毛脂17。
氫氧化鋁膠的制備方法為：將質(zhì)量濃度25%-28%的明礬與質(zhì)量濃度10-12%的純堿溶液在溫度在50℃～60℃混合，以60rpm速度不斷攪拌，pH值6.5-6.8，通入蒸汽管進行熟化，驅(qū)除CO2使膠態(tài)變稀，發(fā)灰、青亮為熟化標(biāo)準(zhǔn)，吹沸時間到?jīng)]有大量氣泡為止，pH7.6～7.8之間；加冷水使熟化膠溫下降到75℃以下，攪拌均勻；控干母液后進行洗滌，洗滌水溫在50～55℃，洗滌時用攪棒打碎膠鹽，攪拌均勻，洗滌5-6次，檢查硫酸鹽合格后，停止洗滌；使膠量水份脫至約為明礬投料量的2～2.5倍時得到氫氧化鋁膠。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，制備方法為：
（1）用生理鹽水溶解氫氧化鋁膠，氫氧化鋁膠質(zhì)量百分比含量為20%；
（2）將磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂加入氫氧化鋁膠生理鹽水混合液中，混合均勻，調(diào)pH到6.5制成佐劑。
將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中，按照3000rpm，乳化30分鐘。
依照國家獸藥標(biāo)準(zhǔn)，驗證其結(jié)果：
安全檢驗： 用30日齡、體重12kg以上、斷乳仔豬20頭，每頭耳后淺層肌肉注射疫苗1ml。觀察24小時，均應(yīng)無不良反應(yīng)。觀察10日后20頭仔豬均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。
效力檢驗： 免疫組用30日齡、體重12kg以上、斷乳仔豬10頭，每頭耳后淺層肌肉注射疫苗1ml，30天后，連同條件相同的未免疫對照仔豬5頭，靜脈注射經(jīng)肉肝胃 ( 膜 ) 消化湯培養(yǎng) 2 代的豬霍亂沙門氏菌 (CVCC79102 株 ) 菌液 2.0ml( 含 1MLD 活菌 )。隔離飼養(yǎng)，觀察 21日，記錄仔豬的存活情況。
檢驗結(jié)果：對照仔豬全發(fā)病，免疫組保護率為100%。
實施例2
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，包括按重量比的以下成分：氫氧化鋁膠42、磷酸鈣28、維生素E12、香菇多糖5、羊毛脂15。
氫氧化鋁膠的制備方法為：將質(zhì)量濃度25%-28%的明礬與質(zhì)量濃度10-12%的純堿溶液在溫度在50℃～60℃混合，以60rpm速度不斷攪拌，pH值6.5-6.8，通入蒸汽管進行熟化，驅(qū)除CO2使膠態(tài)變稀，發(fā)灰、青亮為熟化標(biāo)準(zhǔn)，吹沸時間到?jīng)]有大量氣泡為止，pH7.6～7.8之間；加冷水使熟化膠溫下降到75℃以下，攪拌均勻；控干母液后進行洗滌，洗滌水溫在50～55℃，洗滌時用攪棒打碎膠鹽，攪拌均勻，洗滌5-6次，檢查硫酸鹽合格后，停止洗滌；使膠量水份脫至約為明礬投料量的2～2.5倍時得到氫氧化鋁膠。
所述的一種用于仔豬副傷寒活疫苗佐劑，制備方法為：
（1）用生理鹽水溶解氫氧化鋁膠，氫氧化鋁膠質(zhì)量百分比含量為20%；
（2）將磷酸鈣、維生素E、香菇多糖、羊毛脂加入氫氧化鋁膠生理鹽水混合液中，混合均勻，調(diào)pH到6.5制成佐劑。
將抗原按照1:1的重量比加入佐劑中，按照3000rpm，乳化30分鐘。
依照國家獸藥標(biāo)準(zhǔn)，驗證其結(jié)果：
安全檢驗： 用30日齡、體重12kg以上、斷乳仔豬20頭，每頭耳后淺層肌肉注射疫苗1ml。觀察24小時，均應(yīng)無不良反應(yīng)。觀察10日后20頭仔豬均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。
效力檢驗： 免疫組用30日齡、體重12kg以上、斷乳仔豬10頭，每頭耳后淺層肌肉注射疫苗1ml，30天后，連同條件相同的未免疫對照仔豬5頭，靜脈注射經(jīng)肉肝胃 ( 膜 ) 消化湯培養(yǎng) 2 代的豬霍亂沙門氏菌 (CVCC79102 株 ) 菌液 2.0ml( 含 1MLD 活菌 )。隔離飼養(yǎng)，觀察 21日，記錄仔豬的存活情況。
檢驗結(jié)果：對照仔豬全發(fā)病，免疫組保護率為100%。