本發(fā)明涉及的是一種生藥醫(yī)藥領(lǐng)域的技術(shù)，具體是一種青刺尖在抗前列腺增生藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

青刺尖(Prinsepia utilis Royle)屬薔薇科(Rosaceae)扁核木屬(Prinsepia)植物，藥用始載于《滇南本草》，“性微寒，味苦。攻一切瘡毒癰疽?！泵耖g藥用廣泛，為云南納西族、白族、彝族、摩梭族等多民族常用藥，具有“清熱消炎，生津止瀉”的功效?，F(xiàn)代藥理研究證明，青刺尖中所含的黃酮類、萜類、木脂素類、多糖類、脂肪酸類等化合物，有著明顯的抑菌、調(diào)節(jié)血脂、降血糖、提高免疫、抗氧化、抗炎等藥理作用，但無(wú)公開(kāi)文獻(xiàn)報(bào)道其治療前列腺增生的研究與應(yīng)用。

前列腺增生是中老年男性的常見(jiàn)病，其癥狀為：尿頻、尿線變細(xì)、排尿費(fèi)力、尿潴留等，重癥患者可導(dǎo)致腎積水、腎功能衰竭(LUTS)。BPH造成排尿困難等甚至小便失禁、誘發(fā)炎癥等給患者帶來(lái)身體、精神的雙重傷害，嚴(yán)重者出現(xiàn)抑郁、偏執(zhí)、精神障礙等。從全球范圍看，BPH屬于中老年易患病，發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)而升高，60歲人群發(fā)病率高于50％，85歲人群發(fā)病率則達(dá)90％。前列腺增生現(xiàn)已成為世界范圍內(nèi)影響老年人健康和生活質(zhì)量的主要疾病之一。

前列腺增生是一個(gè)復(fù)雜腺體和間質(zhì)組織增生的組織學(xué)變化過(guò)程?，F(xiàn)有的研究機(jī)制表明雄激素是引發(fā)和維持前列腺增生的重要因素，前列腺的正常發(fā)生、生長(zhǎng)以及功能的維持都有賴于一定量的雄激素。雌、雄激素的協(xié)同作用，在前列腺增生的發(fā)病機(jī)制中起到了重要作用。外源性抗氧化劑對(duì)前列腺增生也有一定的防護(hù)作用，機(jī)體自由基生產(chǎn)和清除過(guò)程中的不平衡可導(dǎo)致自由基介導(dǎo)的細(xì)胞成分的破壞，加速細(xì)胞代謝過(guò)程，介導(dǎo)氧化損傷，降低抗氧化酶水平，通過(guò)尋找潛在的抗氧化劑也可以緩解前列腺增生。

目前臨床上前列腺增生的治療方法主要是手術(shù)治療及藥物治療。手術(shù)治療效果較好，但對(duì)身體造成一定的創(chuàng)傷，患者接受度低。西藥雖然有療效，但由于需長(zhǎng)期服用會(huì)產(chǎn)生一定的副作用。因此開(kāi)發(fā)療效好、副作用較小的治療前列腺增生的中藥或天然藥物具有重要意義和應(yīng)用前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，提出一種青刺尖在抗前列腺增生藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明涉及一種青刺尖藥在抗前列腺增生藥物中的應(yīng)用，將青刺尖藥干浸膏用于制備抑制前列腺增生的藥物。

所述的藥物，其形態(tài)采用但不限于顆粒劑、片劑、膠囊劑、貼劑或軟膏劑。

所述的藥物，通過(guò)青刺尖藥干浸膏，或由干浸膏制備得到的干混懸或混懸劑制成。

所述的青刺尖藥干浸膏，通過(guò)將青刺尖葉回流提取并減壓濃縮后制成。

所述的回流提取是指：將青刺尖葉40℃干燥至恒重，第一次用藥材8‐16倍重量的水，浸泡0.5‐1小時(shí)，回流提取1‐2小時(shí)，三層紗布過(guò)濾后100目篩網(wǎng)過(guò)濾，藥渣再加藥材8‐14倍重量的水回流提取并濾出藥液。

所述的抑制前列腺增生，包括：減少腺上皮細(xì)胞高度、降低前列腺濕重及前列腺指數(shù)、降低前列腺組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)、降低腺上皮細(xì)胞的平均光密度、降低雄激素水平、提高血液中GSH‐Px、CAT、SOD含量并降低MDA含量。

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺濕重的影響示意圖；

圖中：^**P<0.01，與模型組比較；

圖2為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺指數(shù)的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖3為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)前列腺增生大鼠前列腺組織病理影響示意圖；

圖中：a和b分別為200和400倍下的空白組、模型組、非那雄胺組、高劑量組、中劑量組和低劑量組；

圖4為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺上皮細(xì)胞高度的影響示意圖；

圖中：^**P<0.01，與模型組比較；

圖5為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)前列腺增生大鼠前列腺組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)的影響示意圖；

圖中：a和b分別為200和400倍下的空白組、模型組、非那雄胺組、高劑量組、中劑量組和低劑量組；

圖6為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺上皮細(xì)胞中VEGF平均光密度的影響示意圖；

圖中：^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖7為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠血清中酸性磷酸酶(ACP)、睪酮(T)、雙氫睪酮(DHT)、雌二醇(E2)含量的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖8為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠血清中T/E2和DHT/E2的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖9為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺組織中過(guò)氧化氫酶(CAT)含量的影響示意圖；

圖中：^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖10為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺組織中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH‐Px)含量的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖11為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺組織中超氧化物歧化酶(SOD)含量的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較；

圖12為實(shí)施例2青刺尖藥物對(duì)大鼠前列腺組織中丙二醛(MDA)含量的影響示意圖；

圖中：#P<0.05，##P<0.01，與空白組比較；^*P<0.05，^**P<0.01，與模型組比較。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

青刺尖藥物的制備

青刺尖藥物制備工藝如下：青刺尖葉40℃干燥至恒重，第一次用藥材12倍重量的水，浸泡0.5小時(shí)，回流提取1.5小時(shí)，過(guò)濾，藥渣再加藥材10倍重量的水，藥液濾出，先用紗布過(guò)濾再用100目篩網(wǎng)過(guò)濾，合并水煎液。

實(shí)施例2

青刺尖藥物抗丙酸睪酮誘導(dǎo)的大鼠前列腺增生作用藥效學(xué)研究。

試驗(yàn)動(dòng)物：雄性SD大鼠，42只，體重200g‐250g。

試驗(yàn)藥物：

試驗(yàn)1組：1mg/kg非那雄胺組混懸液(陽(yáng)性藥)

試驗(yàn)2組：7.2g生藥/kg青刺尖提取物混懸液(高劑量組)

試驗(yàn)3組：3.6g生藥/kg青刺尖提取物混懸液(中劑量組)

試驗(yàn)4組：1.8g生藥/kg青刺尖提取物混懸液(低劑量組)

試驗(yàn)方法：取健康雄性清潔級(jí)SD大鼠35只，大鼠稱重后麻醉，無(wú)菌條件下摘除雙側(cè)睪丸，殘端處結(jié)扎。將手術(shù)動(dòng)物隨機(jī)分為五組。另設(shè)空白對(duì)照組7只，陰囊切開(kāi)后再縫合，但不摘除睪丸。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)1周自然恢復(fù)。每次給藥前稱取體重。除空白對(duì)照組之外，其余各組動(dòng)物隔日皮下注射丙酸睪酮10mg/kg誘發(fā)大鼠造前列腺增生模型。造模同時(shí)開(kāi)始灌胃給藥，連續(xù)給藥28天。末次給藥后，取出前列腺，計(jì)算前列腺濕重和前列腺指數(shù)。

取稱重后的左側(cè)葉前列腺組織固定，石蠟包埋切片。HE染色，光鏡下觀察各組前列腺組織形態(tài)變化，測(cè)定大鼠前列腺上皮細(xì)胞高度。測(cè)定VEGF免疫組化陽(yáng)性表達(dá)和平均光密度(MOD)值。

采集大鼠腹主動(dòng)脈血，靜置后離心取上清。按試劑盒操作分別檢測(cè)酸性磷酸酶(ACP)、睪酮(T)、雙氫睪酮(DHT)、雌二醇(E₂)含量。

將右側(cè)葉前列腺組織用冰凍的生理鹽水清洗1‐2次后，制備成10％組織勻漿。按試劑盒操作分別檢測(cè)過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH‐Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。

應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示，計(jì)量資料組間比較采用One‐way ANOVA分析，計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。試驗(yàn)結(jié)果：

對(duì)大鼠前列腺濕質(zhì)量及前列腺指數(shù)的影響

由圖1和圖2可以看出，與空白組相比，模型組前列腺濕質(zhì)量顯著性增加，前列腺指數(shù)顯著性升高，說(shuō)明模型組大鼠前列腺明顯增生造模成功。青刺尖各給藥組均可顯著性降低BPH模型大鼠前列腺濕重及前列腺指數(shù)。

對(duì)大鼠前列腺組織形態(tài)的影響

前列腺組織形態(tài)

由圖3可以看出，空白組大鼠前列腺組織腺腔無(wú)擴(kuò)張，腺腔大小基本一致，腺上皮細(xì)胞無(wú)明顯增生，為常扁平狀或短柱狀，前列腺組織結(jié)構(gòu)正常。模型組大鼠前列腺組織病變顯著，腺上皮細(xì)胞增生及間質(zhì)增生較嚴(yán)重，腺腔內(nèi)分泌物增多，腺上皮細(xì)胞乳頭狀增生突入腔內(nèi)，說(shuō)明造模成功。青刺尖各劑量組同模型組相比，鏡下病理組織改變顯著減輕，腺上皮細(xì)胞乳頭狀增生顯著減少。

半定量標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定各組大鼠前列腺組織形態(tài)

根據(jù)表1制定的半定量標(biāo)準(zhǔn)利用秩和檢驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)各組前列腺增生病理形態(tài)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。模型組病變范圍基本占視野范圍1/3以上，腺體、腺上皮及間質(zhì)均增生較明顯，與空白組相比產(chǎn)生極顯著的前列腺增生病理改變，說(shuō)明造模較成功。青刺尖經(jīng)給藥后均可顯著減輕大鼠前列腺增生的癥狀。

表1前列腺組織評(píng)價(jià)病理學(xué)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)

表2青刺尖對(duì)前列腺增生模型大鼠前列腺組織形態(tài)的影響

對(duì)大鼠前列腺上皮細(xì)胞高度的影響

青刺尖對(duì)大鼠前列腺上皮細(xì)胞高度的影響見(jiàn)圖4。與空白組相比，模型組的前列腺腺上皮細(xì)胞高度明顯升高；與模型組相比，青刺尖各組均顯著減少腺上皮細(xì)胞高度。

對(duì)前列腺組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)的影響

實(shí)驗(yàn)各組大鼠VEGF免疫組化結(jié)果見(jiàn)圖5。與空白組相比，模型組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增多，大多呈染色較深的深黃色；青刺尖高劑量組、中劑量組較模型組均有所改善，染色較淺。

實(shí)驗(yàn)各組大鼠腺上皮細(xì)胞的平均光密度結(jié)果見(jiàn)圖6。模型組VEGF陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度最高，平均光密度值較空白組呈極顯著差異。與模型組相比，非那雄胺組、青刺尖高劑量組、中劑量組VEGF的表達(dá)明顯下降，平均光密度值極顯著降低；青刺尖低劑量組平均光密度值顯著降低，青刺尖各給藥組間呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

對(duì)大鼠血清中ACP、T、DHT、E₂水平及T/E₂和DHT/E₂比值的影響

對(duì)大鼠血清中ACP、T、DHT、E₂水平及T/E₂和DHT/E₂比值的影響見(jiàn)圖7和圖8。與空白組相比，模型組ACP含量極顯著升高，說(shuō)明造模成功；給藥組中非那雄胺組、青刺尖各劑量組均可改善前列腺增生狀態(tài)，降低血清ACP含量；其中青刺尖劑量組呈一定的量效關(guān)系，隨著劑量的升高，大鼠血清中ACP含量減小。T、DHT的測(cè)定結(jié)果表明：模型組血清中T與DHT的含量與空白組相比顯著升高；與模型組相比，青刺尖高劑量組與模型組相比也呈現(xiàn)顯著性差異：睪酮含量降低，雙氫睪酮含量顯著降低；青刺尖中劑量和低劑量組睪酮和雙氫睪酮與模型組比均無(wú)顯著性差異。E₂的測(cè)定結(jié)果表明除青刺尖高劑量組較之于模型組和空白組均極顯著升高外，其它各組與模型組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與空白組相比，模型組T/E₂和DHT/E₂比值極顯著升高。與模型組相比，青刺尖高劑量組可顯著降低血清中T/E₂和DHT/E₂比值。青刺尖各劑量組隨著劑量升高，T/E₂和DHT/E₂比值減小。提示青刺尖藥物能夠降低雄激素水平，改善雌/雄激素比例，對(duì)前列腺增生有較好的治療作用。

對(duì)大鼠前列腺組織勻漿中CAT、GSH‐Px、SOD、MDA水平的影響

對(duì)大鼠前列腺組織勻漿中CAT、GSH‐Px、SOD、MDA水平的影響見(jiàn)圖9、10、11、12。模型組中GSH‐Px、SOD水平極顯著降低，CAT水平顯著降低，MDA水平極顯著升高。青刺尖各劑量組GSH‐Px、CAT、SOD含量均高于模型組，MDA含量低于模型組，提示青刺尖能夠增加大鼠體內(nèi)抗氧化酶的含量，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，對(duì)前列腺增生有較好的治療作用。

上述具體實(shí)施可由本領(lǐng)域技術(shù)人員在不背離本發(fā)明原理和宗旨的前提下以不同的方式對(duì)其進(jìn)行局部調(diào)整，本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求書為準(zhǔn)且不由上述具體實(shí)施所限，在其范圍內(nèi)的各個(gè)實(shí)現(xiàn)方案均受本發(fā)明之約束。