本發(fā)明涉及用于運(yùn)載抗癌藥劑的組合物，該組合物包括碘化油和表面活性劑，該表面活性劑對制備處于油包水乳劑形式的組合物有用，該組合物包含抗癌藥劑、碘化油和該表面活性劑。
背景技術(shù)：
：一個(gè)多世紀(jì)以來，碘化油(例如產(chǎn)品碘油)已被用來作為放射性檢查如淋巴系統(tǒng)造影術(shù)中的對比產(chǎn)品或用于肝臟病變的診斷。碘油主要由罌粟油的碘化脂肪酸的乙酯組成。三十多年以來，這些碘化油已經(jīng)被用于介入放射學(xué)治療中。碘油的特征是它傾向于被肝臟腫瘤選擇性地吸收。因此，已經(jīng)建議在被稱為經(jīng)動(dòng)脈化療栓塞(TACE)的技術(shù)中將其作為用于治療肝細(xì)胞癌的抗癌藥劑載體(納卡穆拉(Nakamura)等人，放射學(xué)(Radiology)，1989，170:783-6；以及J.M.Idée-B.Guiu：腫瘤學(xué)/血液學(xué)關(guān)鍵評論(CriticalReviewsinOncology/Hematology)，2013，88(3):530-49)。碘化油，特別是碘油也已知會(huì)誘導(dǎo)動(dòng)脈循環(huán)的短暫性栓塞，從而導(dǎo)致其放緩。鑒于大多數(shù)抗癌藥劑是水溶性的(以“乳劑”的形式，其適用于混合兩種彼此不相溶的相)，似乎用于混合碘化油和抗癌藥劑是最明智的。這似乎是最適合以非乳化的形式經(jīng)動(dòng)脈內(nèi)或全身性給藥時(shí)將毒性太大和不夠有效的抗癌藥劑運(yùn)輸和傳送至腫瘤?！坝桶比閯?，被稱為“反相”乳劑，是被表示為W/O(油包水)的乳劑。它是水相的液滴在脂質(zhì)相中的分散體?！八汀比閯┦潜槐硎緸镺/W(水包油)的“直接”乳劑。與W/O乳劑不同，它是脂質(zhì)相的液滴在水相中的分散體。當(dāng)提及乳劑的W/O或O/W性質(zhì)時(shí)，使用術(shù)語“乳劑感官”。在水連續(xù)相中包含抗癌藥劑的水包油(O/W)乳劑具有在血液中快速地釋放抗癌藥劑的相當(dāng)大的缺點(diǎn)。因此，治療劑的不重要的部分不到達(dá)目標(biāo)部位，這可能一方面誘發(fā)全身性毒性，并且另一方面減少這種治療劑的療效。此外，這種O/W乳劑類型具有導(dǎo)致肺或甚至腦栓塞的風(fēng)險(xiǎn)。當(dāng)這些乳劑的油的液滴尺寸小于10μm時(shí)，這一風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加。這個(gè)第二缺點(diǎn)很難排除，因?yàn)楫?dāng)液滴尺寸增加時(shí)，這些乳劑的不穩(wěn)定性增加。油包水(W/O)乳劑也被稱為“反相乳劑”并包括碘化油和抗癌藥劑，通常它們比O/W乳劑在文獻(xiàn)中更少被提及。它們被描述為比水包油乳劑在腫瘤中釋放治療劑更加緩慢且具有更高的粘性(得·貝爾(DeBaere)等人，放射學(xué)(Radiology)，1995，194:165-170)。這些原因?qū)е逻x擇W/O乳劑形式在腫瘤中用于運(yùn)載抗癌藥劑。然而，由于其缺乏與血液接觸的穩(wěn)定性和腫瘤上游的血管分叉，這些W/O乳劑并非總是足夠有效。事實(shí)上，為了增加抗癌藥劑的腫瘤靶向性和同時(shí)提高治療的療效和治療的耐受性，乳劑必須保持穩(wěn)定直到其達(dá)到腫瘤的時(shí)刻，并且其在腫瘤病變中的分布必須完整和統(tǒng)一。因此，在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)提出了穩(wěn)定乳劑的各種解決方案。許多作者已經(jīng)建議使用具有高親水親油平衡值(HLB)(大于8)的表面活性劑來穩(wěn)定O/W乳劑。使用高的甚至很高的HLB值的表面活性劑，如山梨聚糖聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨聚糖單硬脂酸酯或聚山梨醇酯60(60，HLB＝14.9)以及聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯或聚山梨酯20(MontanoxHLB＝16.7)，已被描述為用于制備基于伊達(dá)比星和碘油的水包油乳劑，這些水包油乳劑可穩(wěn)定6個(gè)月。JPH0647559描述了O/W乳劑，該乳劑包含10％-30％碘油抗癌藥劑和0.1％-2％的親水性表面活性劑HCO-60，也被稱為聚氧乙烯氫化蓖麻油(HLB＝14)。它是一個(gè)前體，鍵合到蓖麻油酸的PEG-60。EP0294534描述了由使用有機(jī)化合物乳化的碘化油制得的乳劑形式的對比產(chǎn)品，這些有機(jī)化合物例如是氨基酸(苯丙氨酸、丙氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甘氨酸、絲氨酸或?；撬?，脂肪酸如壬酸、油酸(HLB＝17)或亞油酸(HLB＝16)，或脂溶性維生素如維生素E。EP0581842描述了含有脂肪酸酯的水包油乳劑，這些脂肪酸酯是被碘化的并且來源于使用磷脂和環(huán)戊烯并菲衍生物如甾醇的混合物乳化的罌粟子油。申請EP0294534和EP0581842引用了其他文件。特別地發(fā)現(xiàn)DE2602907描述了水包油乳劑，該水包油乳劑包含50％-60％碘化的三酸甘油脂、2％-10％聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯(HLB＝13-17)和2％-40％的水。格蘭姆斯(Grimes)等人(藥物科學(xué)雜志(J.Pharm.Sci.)1979年1月，68(1):52-6)描述了使用聚山梨醇酯80(HLB＝15)、脫水山梨糖醇單油酸酯(HLB＝8.6)和磷脂酰膽堿來獲得包含碘化油的乳劑。Vermess等人描述了包含53％(v/v)碘油10％酒精和0.45％大豆卵磷脂的乳劑(US4404182或計(jì)算機(jī)輔助X線斷層攝影術(shù)雜志(J.Comput.Assist.Tomogr.)3:25-31，1979)。這些水包油乳劑具有2-3μm的顆粒尺寸。舒馬赫(Schumacher)等人(歐洲放射學(xué)雜志(Europ.J.Radiol.)5,167-174，1985)描述了包含碘化油的不同乳劑，這些乳劑使用乳化劑例如聚氧乙烯-4-山梨聚糖單月桂酸酯(吐溫80，賽瓦公司(Serva)：HLB＝15.3)、甘油聚乙二醇蓖麻醇酸酯(聚氧乙烯蓖麻油EL：HLB＝14.5)、二乙酰磷酸DP(Sigma公司)、來自雞蛋的卵磷脂(Fluka股份有限公司)、氧化聚明膠(doxypolygelatin)(5.5％生物監(jiān)測股份有限公司(BiotestGmbH))和右旋糖酐60(4.5％，Rl諾爾公司)來制備。GB676738描述了包含碘化油和合成的非離子型乳化劑的乳劑，這些非離子型乳化劑例如是多羥基醇脂肪酸單酯(具有脂肪酸如棕櫚酸、硬脂酸或月桂酸的山梨醇和月桂酸單酯、棕櫚酸單酯、硬脂酸單酯或油酸單酯，甘油單酯和脂肪酸單酯如單硬脂酸甘油酯和單油酸甘油酯，乙二醇單酯如乙二醇、四甘醇或十二甘醇)，這些酯類可能與聚亞烷基氧化物反應(yīng)形成聚乙二醇衍生物。US3356575描述了包含碘化油、甘油和卵磷脂的乳劑。US4917880描述了含有10％碘化油的乳劑，并且在水相中，含有1.2％純化的卵磷脂、2.25％甘油和0.1％苯丙氨酸。在37℃下，使用胺碘酮(化學(xué)式為(2-丁基-3-苯并呋喃基)[4-[2-(二乙基氨基)乙氧基]-3,5-二碘苯基]甲酮的抗心律失常藥物)有可能使碘油(44％(v/v))和多柔比星或吡柔比星的水包油乳劑穩(wěn)定長達(dá)四周。這一特性是由于在這種藥物中存在賦形劑聚山梨醇酯80，其是具有高HLB值的乳化劑(布蘭(Boulin)等人，消化系統(tǒng)和肝臟疾病(DigestiveandLiverDisease)43(2011)905-911)。由同一團(tuán)隊(duì)進(jìn)行的另外的研究有可能表明胺碘酮幾乎沒有對基于碘油和伊達(dá)比星的乳劑的穩(wěn)定性提供改善，并似乎沒有增加抗癌藥劑的細(xì)胞毒性。因此，甚至建議單獨(dú)使用伊達(dá)比星和碘油納卡穆拉(Nakamura)等人，(放射學(xué)(Radiology)，1989，170:783-6)顯示了不同乳劑的視覺外觀，這些乳劑通過混合1mL含有離子型對比產(chǎn)品的蒸餾水、葡甲胺泛影鈉(泛影鈉泛影葡胺或優(yōu)路芬)和3mL碘油而獲得(圖1)。結(jié)果表明，24h后乳劑C沒有發(fā)生相分離，但可以很容易注意到在這個(gè)圖中該乳劑實(shí)際上是不穩(wěn)定的，包含它的管下部比其上部更清澈。此文獻(xiàn)還描述了以2-3/1比例的碘油和多柔比星或絲裂霉素的乳劑的制備。結(jié)果表明，所得的乳劑是W/O乳劑。在使用該乳劑的情況下，強(qiáng)調(diào)抗癌藥劑釋放的最低量(圖2)。但是，注射這種乳劑后可視化的血漿峰值仍然并非無足輕重。由于沒有使用表面活性劑，該乳劑應(yīng)該不足夠穩(wěn)定。事實(shí)上，相比單獨(dú)注射多柔比星這種抗癌藥劑后測量的血漿濃度，經(jīng)動(dòng)脈內(nèi)注射它們的乳劑2分鐘后觀察到多柔比星的血漿濃度要低83％(((3500-600)/3500)x100)。5分鐘后，這種下降為80％。拉烏爾(Raoul)等人(癌癥(Cancer)，1992，第70卷，第3期，585-90)描述了包含50mg多柔比星的乳劑，該乳劑通過混合10mL碘油和2.5mL碘克酸(低滲顯影葡胺)制成。所得的乳劑(其W/O或O/W感官是未指明的)導(dǎo)致血漿峰值比動(dòng)脈內(nèi)單獨(dú)注射多柔比星的血漿峰值顯著更低。然而，這種血漿峰值表明有效地將抗癌藥劑傳輸進(jìn)入血液。事實(shí)上，相比單獨(dú)注射多柔比星這種抗癌藥劑后測量的血漿濃度，動(dòng)脈內(nèi)注射這些乳劑2分鐘后觀察到多柔比星的血漿濃度要低59％(((2200-900)/2200)x100)。注射5分鐘后相應(yīng)的計(jì)算甚至更加不利，因?yàn)檫@種減少則只有33％(((1050-700)/1050)x100)。當(dāng)這些乳劑注射后進(jìn)行栓塞術(shù)時(shí)，這些減小在2分鐘和5分鐘后分別是82％(((2200-400)/2200)x100)和43％(((700-400)/700)x100)。當(dāng)這些不同的乳劑是“水包油”形式時(shí)，它們具有不足的抗癌藥劑運(yùn)載能力，即使它們已使用高HLB的表面活性劑穩(wěn)定，并且它們的使用仍表現(xiàn)出顯著的栓塞的風(fēng)險(xiǎn)。這個(gè)不足的運(yùn)載容量正好由乳劑的性質(zhì)來說明，由于在水包油乳劑的情況下，通常是水溶性的抗癌藥劑是在水連續(xù)相中，因此在血流中非常迅速地被稀釋。此外，若干種這些乳劑含有合成的乳化劑如吐溫(高HLB)或(較低或較高的HLB)，它們是在歐洲藥典中列出的乳化劑，并且會(huì)引起副作用。聚山梨醇酯如吐溫被描述為具有潛在的毒性。山梨糖醇酯如不推薦用于通過胃腸外注射(藥物賦形劑手冊(HandbookofPharmaceuticalExcipients)，2009年)。通常，在出版物中被描述為“油包水”乳劑的乳劑不是這種性質(zhì)的乳劑。當(dāng)它們實(shí)際上是在W/O形式時(shí)，這些乳劑沒有足夠的穩(wěn)定性和足夠的抗癌藥劑運(yùn)載能力。因此，注射后它們沒有足夠的效力，因?yàn)橄喈?dāng)大部分經(jīng)動(dòng)脈內(nèi)注射的抗癌藥劑的量沒有到達(dá)目標(biāo)病變(拉烏爾(Raoul)等人，1992)。申請人已開發(fā)出能夠制備包含抗癌藥劑的油包水乳劑的組合物，該油包水乳劑在20℃下可穩(wěn)定至少24小時(shí)，并且與現(xiàn)有技術(shù)的乳劑相比總體上具有改進(jìn)的運(yùn)載容量。因此，這種乳劑具有兩個(gè)主要優(yōu)點(diǎn)：它可以容易地在醫(yī)院環(huán)境中使用，因?yàn)樗姆€(wěn)定性允許它在醫(yī)院藥房中提前至少24小時(shí)制備，以及在具有改進(jìn)的治療效力的同時(shí)它對患者顯示非常有限的風(fēng)險(xiǎn)。這種乳劑還具有可能使存在于腫瘤中的碘化油(如碘油)的量與實(shí)際存在于腫瘤中的抗癌藥劑的量相關(guān)聯(lián)，存在于腫瘤中的碘化油的量可通過成像方法的方式來估計(jì)。對于大多數(shù)現(xiàn)有技術(shù)的乳劑，估計(jì)存在于腫瘤中的碘化油的量決不指示存在于這種腫瘤中的抗癌藥劑的量。因此，當(dāng)試圖驗(yàn)證該抗癌藥劑已有效地被給予到腫瘤的中心時(shí)，根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑能夠降低假陽性。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：因此，本發(fā)明的主題是油包水乳劑形式的組合物，該組合物包括：-20％至40％(v/v)的水相，優(yōu)選地20％到35％(v/v)的水相，更優(yōu)選地25％(v/v)的水相，該水相處于液滴形式，包含抗癌藥劑，-60％至80％，優(yōu)選地65％至80％(v/v)，更優(yōu)選地75％(v/v)的脂質(zhì)相，該脂質(zhì)相包含碘化油和具有化學(xué)式(I)的至少一種表面活性劑，該表面活性劑的比例按相對于組合物的總體積的表面活性劑的重量計(jì)為0.3％至5％，優(yōu)選地0.5％至2％，更優(yōu)選地1％，所述表面活性劑的化學(xué)式(I)如下：其中：-s是0或1，-m代表從2至30的整數(shù)，-R1代表具有化學(xué)式(II)的基團(tuán)其中n代表從4至10的整數(shù)，o代表從1至4的整數(shù)，p代表從3至7的整數(shù)，q代表從2至10的整數(shù)，并且r是0或1，-R2代表氫原子或與R1相同，并且-每個(gè)R3獨(dú)立地代表氫原子或與R1相同。優(yōu)選地，在如上化學(xué)式(I)中，每個(gè)R3代表氫原子。然后所述表面活性劑的化學(xué)式(I)具有以下化學(xué)式(I')：表面活性劑的比例是按相對于乳劑形式的組合物的總體積的表面活性劑的重量來表達(dá)。水相或脂質(zhì)相的比例是按相對于乳劑形式的組合物的總體積的該相的體積來表示。這種組合物是用于運(yùn)載抗癌藥劑。本發(fā)明還涉及將這種組合物作為抗癌藥劑載體。這種組合物是處于油包水乳劑(也被稱為“反相乳劑”或W/O乳劑)的形式。這樣一種乳劑由脂質(zhì)相和分散為液滴形式的水相組成。該組合物的碘化油處于脂質(zhì)相?；瘜W(xué)式(I)或(I')的表面活性劑處于水相和脂質(zhì)相之間的界面。出于本申請的目的，對于水相和脂質(zhì)相的比例的計(jì)算，將表面活性劑視為處于脂質(zhì)相。特別地，下面的實(shí)施例是有利的：有利的是，根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑有利地是穩(wěn)定的。術(shù)語“穩(wěn)定的乳劑”旨在意指乳劑在常規(guī)溫度(20℃)和大氣壓(1巴)的條件下和在其制備后的24小時(shí)內(nèi)具有相對于乳劑形式的總組合物的小于5％體積的視覺相分離。優(yōu)選地，“穩(wěn)定的乳劑”旨在意指乳劑在上文提及的條件下和在其制備后的24小時(shí)內(nèi)沒有顯示出視覺相分離。視覺相分離表現(xiàn)在當(dāng)溶液表面上看不再出現(xiàn)均勻的外觀，即觀察到至少兩個(gè)相的外觀時(shí)。更優(yōu)選地，術(shù)語“穩(wěn)定的乳劑”旨在意指乳劑在其制備24小時(shí)后，其平均液滴尺寸的變化小于10％，特別是小于5％，優(yōu)選地其平均液滴尺寸不變化，其中平均尺寸用光學(xué)顯微鏡(例如萊卡(Leica)DM2000LED顯微鏡)測量。優(yōu)選地，相對于單獨(dú)的抗癌藥劑的動(dòng)脈內(nèi)注射，根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑的動(dòng)脈內(nèi)注射在這種注射后0-5分鐘內(nèi)誘導(dǎo)抗癌藥劑的血漿濃度降低90％以上，優(yōu)選地94％以上，更優(yōu)選地97％以上，甚至更優(yōu)選地99％以上。有利的是，根據(jù)本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的實(shí)驗(yàn)方案，這些血漿濃度以及這種降低通過血漿動(dòng)力學(xué)測量得到確認(rèn)。洪(Hong)等人(臨床癌癥研究(Clin.CancerRes.)2006：12(8))特別提及在注射包含抗癌藥劑的特定產(chǎn)品后和在單獨(dú)注射該抗癌藥劑后獲得的抗癌藥劑的血漿濃度峰值之間差異的表達(dá)。當(dāng)乳劑包含小于20％(v/v)的水相時(shí)，抗癌藥劑難以在其中溶解。當(dāng)乳劑包含40％以上的水相時(shí)，乳劑形式的組合物的粘度就太高了。這是因?yàn)?，?dāng)在包含碘化油的脂質(zhì)連續(xù)相中增加水相的液滴的濃度時(shí)，整個(gè)組合物的粘度增加了。水相包含治療有效劑量的抗癌藥劑。術(shù)語“治療有效劑量”旨在意指能夠治療癌癥或使其進(jìn)展慢下來的劑量。優(yōu)選地，當(dāng)抗癌藥劑是選自蒽環(huán)類藥物時(shí)，治療有效劑量表示20-150mg，更優(yōu)選地50-100mg的抗癌藥劑的量。脂質(zhì)相的密度優(yōu)選地是1.10-1.30，更優(yōu)選地是1.20-1.30，甚至更優(yōu)選地是1.28。優(yōu)選地，水相和脂質(zhì)相具有相同的密度(換言之，它們具有相等的密度)或密度彼此不同高達(dá)5％。為了增加水相的密度，可以向其中加入致密化藥劑(然后進(jìn)行包含抗癌藥劑的這個(gè)相的致密化)。相反地，為了降低包含碘化油的脂質(zhì)相的密度，可以加入具有小于1的密度的第二油(然后進(jìn)行包含碘化油的脂質(zhì)相的“去致密化”)。因此，在一個(gè)有利的實(shí)施例中，水相還可包括致密化藥劑，優(yōu)選是至少一種非離子碘化對比產(chǎn)品?？梢杂米髦旅芑巹┑姆请x子碘化產(chǎn)品優(yōu)選地是選自碘比醇(三代顯)、碘異酞醇(碘帕醇碘帕醇)、碘美普爾碘佛醇(安射力)、碘海醇(歐乃派克)、碘噴托ioxitol(碘昔蘭)、碘普羅胺(優(yōu)維顯)、甲泛葡胺(阿米培克)、碘沙考碘曲侖(伊索顯)、碘克沙醇(威視派克)、碘美醇、碘西胺及其混合物。碘比醇是優(yōu)選的非離子碘化產(chǎn)品。三代顯250和三代顯300產(chǎn)品分別具有1.28和1.34的密度。這些非離子碘化對比產(chǎn)品具有允許抗癌藥劑在水相中有良好溶解性的優(yōu)點(diǎn)，而不會(huì)使乳劑減少穩(wěn)定性。沒有指出利用離子碘化對比產(chǎn)品如碘克沙酸(低滲顯影葡胺)或葡甲胺和/或泛影鈉(泛影鈉泛影葡胺或優(yōu)路芬)，因?yàn)檫@些對比產(chǎn)品具有降低抗癌藥劑在水相中的溶解度的缺點(diǎn)，或甚至防止其溶解和/或增加組合物的滲透度。在另一個(gè)有利的實(shí)施例中(其可以或不可以與上述包含致密化藥劑的水相的實(shí)施例相結(jié)合)，脂質(zhì)相還可以包括至少一種密度小于1的非碘化油，優(yōu)選地非碘化油的密度小于0.96，更優(yōu)選地非碘化油選自亞麻籽油、大豆油、棕櫚油、椰子油、蓖麻油、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、紅花油、杏仁油、橄欖油、罌粟油，以及包括或由如下化學(xué)式的脂肪酸甘油三酯的混合物組成的油：(R＝C8+C10)>95％其中R是包含3-35個(gè)碳原子的脂肪鏈，其條件是，95％以上的所述脂肪酸是C8和/或C10，例如以名稱出售，如油810、油812(辛酸/癸酸甘油三酯)、油818(辛酸/癸酸/亞油酸甘油三酯)、油612(三己酸甘油酯)或其他丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯衍生物。表達(dá)式(R＝C8+C10)>95％表示該混合物的甘油三酯是脂肪酸的甘油三酯，其中95％以上是C8和/或C10脂肪酸(癸酸或辛酸)。當(dāng)脂肪酸是C8脂肪酸時(shí)，R是包含7個(gè)碳原子的鏈，且當(dāng)脂肪酸是C10脂肪酸時(shí)，R是包含9個(gè)碳原子的鏈。在下表中詳細(xì)說明了所列出的各種非碘化油的密度：在這個(gè)明確的實(shí)施例中，如上述所定義的包含碘化油和一種或多種非碘化油的脂質(zhì)相的密度優(yōu)選是0.9-1.2，更優(yōu)選地是0.95-1.10，甚至更優(yōu)選地是1.05。水相液滴的尺寸優(yōu)選地包括1-200μm，更優(yōu)選地包括5-100μm，甚至更優(yōu)選地包括5-50μm，或甚至5-10μm。這種尺寸甚至進(jìn)一步改進(jìn)乳劑的穩(wěn)定性。尺寸可以用光學(xué)顯微鏡(例如，徠卡DM2000LED顯微鏡)測量。優(yōu)選地，將水相液滴均勻地分布。均勻性使用光學(xué)顯微鏡來證實(shí)：如果觀察到液滴的聚集體，則這些液滴不是均勻地分布的。在根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物中有利的水相/脂質(zhì)相的體積比率是1/2(即0.5)至1/4(即0.25)，優(yōu)選地是2/5(即0.4)至3/10(即0.3)，更優(yōu)選地是1/3(即約0.33)。小于1/2的比率使得能夠肯定獲得W/O乳劑。事實(shí)上，脂質(zhì)相和水相之間1/1的比率天然地促進(jìn)O/W感。為了加強(qiáng)W/O感，添加的碘化油的量必須增加。大于1/4的比率，栓塞的風(fēng)險(xiǎn)變得顯著。這是因?yàn)?，為了在水相中溶解治療有效量的抗癌藥劑，有必要使這個(gè)水相具有足夠的體積。如果包含碘化油的脂質(zhì)相在體積上比水相多4倍以上，大體上會(huì)導(dǎo)致使用的碘化油的劑量變得比核定限額更大。在關(guān)于產(chǎn)品如碘油的法律告示中，它表明在介入放射學(xué)治療中注射的體積必須不超過15ml。水相和脂質(zhì)相的體積百分率和根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物的水相/脂質(zhì)相體積比率使得能夠系統(tǒng)地獲得反相(W/O)乳劑，該反相乳劑能夠提高抗癌藥劑輸送至腫瘤中。有利的是，根據(jù)本發(fā)明所述的組合物在20℃下粘度為100至200mPa.s，優(yōu)選地120至170mPa.s，更優(yōu)選地150至165mPa.s，和/或在37℃下粘度為40至80mPa.s，優(yōu)選地50至70mPa.s，更優(yōu)選地60至70mPa.s。粘度值是使用馬爾文儀器(MalvernInstruments)Kinexus專業(yè)流變儀獲得的，該流變儀具有40mm直徑的4°錐板單元。在施加的范圍為0.16-10帕的壓力下進(jìn)行該測量。碘化油術(shù)語“脂肪酸”旨在表示具有至少4個(gè)碳原子的碳鏈的飽和或不飽和的脂肪羧酸。天然的脂肪酸具有4至28個(gè)碳原子(一般是偶數(shù))的碳鏈。術(shù)語“長鏈脂肪酸”是用于14至22個(gè)碳原子的長度，并且術(shù)語“非常長鏈脂肪酸”用于超過22個(gè)碳原子的長度。相反，術(shù)語“短鏈脂肪酸”用于4至10個(gè)碳原子的長度，特別是6至10個(gè)碳原子的長度，尤其是8或10個(gè)碳原子的長度。本領(lǐng)域的技術(shù)人員知曉相關(guān)的命名法和特定的用途：-Ci-Cp表示一系列Ci至Cp的脂肪酸-Ci+Cp，Ci脂肪酸和Cp脂肪酸的總和例如：-將具有14至18碳原子數(shù)的脂肪酸寫為“C14-C18脂肪酸”-將C16脂肪酸和C18脂肪酸的總和寫為C16+C18。-對于飽和脂肪酸，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將使用以下命名法Ci:0，其中i是脂肪酸的碳原子數(shù)。例如棕櫚酸將用命名法(C16:0)來表示。-對于不飽和脂肪酸，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將使用以下命名法Ci:xn-N，其中N將處于從酸基團(tuán)對面的碳開始的不飽和脂肪酸中雙鍵的位置，i是脂肪酸的碳原子數(shù)，以及x是這個(gè)脂肪酸的雙鍵(未飽和)數(shù)。例如油酸將用命名法(C18:1n-9)來表示。有利的是，根據(jù)本發(fā)明所述的碘化油包含或由碘化脂肪酸衍生物組成，優(yōu)選地由碘化脂肪酸乙酯組成，更優(yōu)選地由罌粟油、橄欖油、菜籽油、花生油、大豆油或核桃油的碘化脂肪酸乙酯組成，甚至更優(yōu)選地由罌粟油或橄欖油的碘化脂肪酸乙酯組成。更優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明所述的碘化油包含或者由罌粟油的碘化脂肪酸乙酯(所述罌粟也被稱為藍(lán)色種子罌粟或罌粟變種葵(Papaversomniferumvar.nigrum))。罌粟油，也稱為罌粟籽油，優(yōu)選地包含80％以上不飽和脂肪酸(特別是亞油酸(C18:2n-6)和油酸(C18:1n-9)，其中包含至少70％亞油酸和至少10％油酸。碘化油是從油(如罌粟油)的完全碘化獲得，其條件是酯基轉(zhuǎn)移后允許不飽和脂肪酸的每個(gè)雙鍵鍵合一個(gè)碘原子(沃爾夫(Wolff)等人，2001，醫(yī)藥(Medicine)80，20-36)。根據(jù)本發(fā)明所述的碘化油優(yōu)選地包含29％至53％(w/w)的碘，更優(yōu)選地包含37％至39％(w/w)的碘。作為碘化油的實(shí)例，可能要提及碘油(來源于油菜籽(蕓苔屬(Brassicacompestis))、(來源于花生油)、(來源于罌粟油，但是以脂肪酸甘油三酯的形式)以及(來源于橄欖油)。優(yōu)選地，該碘化油是碘油其是被用作對比產(chǎn)品并用于某些介入放射學(xué)治療中的碘化油。這種油是罌粟籽油的碘化和非碘化脂肪酸的乙酯的混合物。它主要(特別地，超過84％)由來源于罌粟籽油的長鏈碘化脂肪酸(特別是C18脂肪酸)乙酯的混合物組成，優(yōu)選地由單碘硬脂酸乙酯和二碘硬脂酸乙酯的混合物組成。碘化油也可以是基于來源于橄欖油的硬脂酸(C18:0)的單碘化乙酯的油。這種類型的產(chǎn)品，名為幾年前已有出售。碘油的主要特點(diǎn)如下：化合物在脂肪酸混合物中的比例棕櫚酸乙酯(乙基C16:0)4.6％至6.7％(w/w)，優(yōu)選地是4.8％(w/w)硬脂酸乙酯(乙基C18:0)0.8％至1.9％(w/w)，優(yōu)選地是1.2％(w/w)單碘硬脂酸乙酯11.3％至15.3％(w/w)，優(yōu)選地是13.4％(w/w)二碘硬脂酸乙酯73.5％至82.8％(w/w)，優(yōu)選地是78.5％(w/w)優(yōu)選地，存在于根據(jù)本發(fā)明所述的組合物中的碘化油的量不超過15ml。優(yōu)選地，脂質(zhì)相基本上由如以上所定義的碘化油和具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑組成。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施例中，脂質(zhì)相基本上由如以上所定義的碘化油、如以上所定義的非碘化油和具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑組成?？拱┧巹┯筛鶕?jù)本發(fā)明所述的組合物運(yùn)載的抗癌藥劑或在根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物中包含的抗癌藥劑優(yōu)選地是選自蒽環(huán)類藥物、鉑絡(luò)合物，蒽環(huán)類相關(guān)化合物(例如米托蒽醌和奈莫柔比星)、抗生素(例如絲裂霉素C(絲裂霉素)、博來霉素和放線菌素D)、其他抗腫瘤化合物(例如伊立替康、5-氟尿嘧啶(氟尿嘧啶)、索拉非尼舒尼替尼(索坦)、瑞格非尼、布立尼布、奧安替尼(orantinib)、林斯替尼(linsitinib)、厄洛替尼、卡博替尼、福瑞替尼(foretinib)、替范替尼(tivantinib)、福莫司汀、?；悄就?TCNU)、卡莫司汀、胞嘧啶C、環(huán)磷酰胺、阿拉伯糖胞苷(或阿糖胞苷)、紫杉醇、多烯紫杉醇、甲氨蝶呤、依維莫司(癌伏妥)、PEG-精氨酸脫亞胺酶、喃氟啶/吉莫斯特/氧嗪組合muparfostat、培維A酸、吉西他濱、貝伐單抗(阿瓦斯丁)、雷莫蘆單抗、氟尿苷)、免疫刺激劑(例如GM-CSF(粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子)以及其重組形式)：莫拉司亭或沙格司亭(沙格司亭)、OK-432(畢西巴尼)、白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-4和腫瘤壞死因子α(TNFα)、125I-標(biāo)記的抗-CEA(癌胚抗原)抗體、裝載有上述化合物中的一種的微球、放射性元素、所述帶有螯合物的放射性元素絡(luò)合物、基于鐵化合物的磁性顆粒(氧化鐵的超小超順磁性顆?；騏SPIOs)和/或基于釓螯合物的磁性顆粒、放射性微球、核酸序列或這些化合物中的一種或多種的混合物(優(yōu)選地一種或多種蒽環(huán)類藥物的混合物或一種蒽環(huán)類藥物和一種放射性元素的混合物，如上文提及的，或一種蒽環(huán)類藥物和一種基于鐵化合物和/或釓螯合物的顆粒的混合物)。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的水相包含0.5％至2.5％(w/v)的抗癌藥劑，更優(yōu)選地1％至2％(w/v)的抗癌藥劑。乳劑形式的組合物可包含一種或多種抗癌藥劑。優(yōu)選地，至少一種抗癌藥劑是水溶性的，即它在水相中有50％以上是可溶的。因此，當(dāng)乳劑形式的組合物僅包含一種抗癌藥劑時(shí)，所述藥劑優(yōu)選是水溶性的，因而是在分散的水相中。當(dāng)乳劑形式的組合物包括若干種抗癌藥劑，它們中的一些可以是在連續(xù)的脂質(zhì)相中。優(yōu)選的抗癌藥劑是選自蒽環(huán)類藥物、絲裂霉素C、鉑絡(luò)合物、放射性元素和以上列出的它們的絡(luò)合物?？拱┧巹└鼉?yōu)選地是選自蒽環(huán)類藥物，并且甚至更優(yōu)選地是選自多柔比星、表柔比星、奈莫柔比星和伊達(dá)比星。有利的是，抗癌藥劑是選自嵌入劑，如多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星、奈莫柔比星、米托蒽醌和吡柔比星；烷化劑，如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、洛鉑、環(huán)磷酰胺和絲裂霉素C、福莫司汀；拓?fù)洚悩?gòu)酶1型抑制劑，如伊立替康；拓?fù)洚悩?gòu)酶2型抑制劑，如多柔比星和米托蒽醌；酪氨酸激酶抑制劑，如依維莫司；多激酶抑制劑，如索拉非尼；抗代謝藥劑，如5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤和吉西他濱；如以上列出的放射性元素、這些放射性元素具有大環(huán)螯合物的絡(luò)合物、基于鐵化合物的磁性顆粒、放射性微球、核酸序列和它們的混合物。優(yōu)選地，上文提及的蒽環(huán)類藥物是選自多柔比星(或由輝瑞(Pfizer)銷售的名下的亞德里亞霉素)、表柔比星伊達(dá)比星(善唯達(dá))、道諾霉素、吡柔比星、奈莫柔比星以及這些化合物中的一種或多種的混合物。優(yōu)選地，上文提及的鉑絡(luò)合物是選自順鉑(順鉑(Platinol))，卡鉑、米立鉑、奧沙利鉑(樂沙定)、洛鉑以及這些化合物中的一種或多種的混合物。優(yōu)選地，上文提及的放射性元素是選自錸186(186Re)、錸188(188Re)、釔90(90Y)、镥177(177Lu)、鈥166(166Ho)、碘125(125I)、131碘(131I)、磷32(32P)、鍶89(89Sr)、釤153(153Sm)、銅67(67Cu)、錫117m(117mSn)、鉍213(213Bi)、鉍212(212Bi)、砹211(211At)、鐳223(223Ra)、銦111(111In)、鎵67(67Ga)、鎵68(68Ga)、亞穩(wěn)態(tài)锝99(99mTc)以及這些化合物中的一種或多種的混合物。任選地處于與直鏈或大環(huán)螯合物絡(luò)合的形式的放射性元素優(yōu)選地是選自188Re、90Y、177Lu、166Ho、131I、111In、67Ga、68Ga和99mTc，或甚至更優(yōu)選地是選自188Re、90Y、177Lu、166Ho和131I。優(yōu)選地，上文提及的這些放射性元素的絡(luò)合物的螯合物是選自線性螯合物和大環(huán)螯合物如DOTA、PCTA、DTPA、NOTA、及其衍生物，更優(yōu)選地是選自大環(huán)螯合物如DOTA、PCTA、NOTA、以及它們的衍生物。釔90(90Y)和釔90的絡(luò)合物和上述定義的大環(huán)螯合物的的絡(luò)合物是在其各自分類中的優(yōu)選化合物。優(yōu)選地，上文提及的核酸序列是選自脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)序列，更優(yōu)選地是選自由基因治療載體運(yùn)載的DNA或RNA序列，這些基因治療載體例如是選自腺病毒(DNA病毒)載體、逆轉(zhuǎn)錄病毒(RNA病毒)載體、來源于腺病毒相關(guān)病毒或AVV的載體和來源于其他病毒(如單純皰疹病毒(HSV)、痘病毒、流感病毒)的載體，以及非病毒載體如聚陽離子或納米顆粒(尤其是羥磷灰石或修飾的羥磷灰石(例如聚-L-賴氨酸(PLL)修飾的羥磷灰石))和干擾RNA(用于小干擾RNA的siRNA)或雙鏈RNA(dsRNA)序列。核酸序列優(yōu)選地是選自基因的天然的或修飾的序列或天然的或修飾的序列的一部分，該基因是編碼p53蛋白、編碼Rb蛋白(尤其是Rb1基因)或編碼白細(xì)胞介素12(IL-12)的基因或其各自的轉(zhuǎn)錄物(即RNA形式)。這些抗癌藥劑的商購形式通常是凍干形式或粉狀形式(即粉末形式)?？拱┧巹┑倪@些凍干或粉末可以包含常規(guī)用于藥學(xué)領(lǐng)域中的賦形劑：乳糖(溶解和凍干劑)、對羥基苯甲酸甲酯(抗氧化劑)和/或氯化鈉(NaCl)。出于本說明的目的，術(shù)語“基于鐵化合物顆粒”旨在意指包含或由通常包括鐵(III)(通常是鐵的氧化物或氫氧化物)的鐵化合物組成的顆粒。術(shù)語氧化鐵的超小顆?；騏SPIO經(jīng)常被使用。一般來說，磁性顆粒完全或部分地由氫氧化鐵；氧化鐵水合物；鐵氧體；混合氧化鐵，例如鈷、鎳、錳、鈹、鎂、鈣、鋇、鍶、銅、鋅或鉑的混合氧化鐵；或它們的混合物構(gòu)成。根據(jù)一個(gè)特別優(yōu)選的變體，該磁性顆粒是超順磁性的。然后，磁性顆粒在涂抹上合適的涂層前，優(yōu)選具有5至200nm的晶體直徑，甚至更優(yōu)選具有10至60nm或10至20nm的晶體直徑。在一個(gè)有利的實(shí)施例中，基于鐵化合物的磁性顆粒覆蓋有親水化合物，優(yōu)選是聚乙二醇(PEG)型，更優(yōu)選是具有包括1500至3000摩爾質(zhì)量的聚乙二醇。在另一個(gè)有利的實(shí)施例中，基于鐵化合物的磁性顆粒覆蓋有不飽和脂肪酸，優(yōu)選地是單不飽和脂肪酸，更優(yōu)選地是油酸(C18:1n-9)。由此制得脂溶性的磁性顆粒，懸浮在連續(xù)的脂質(zhì)相中。出于本申請的目的，術(shù)語“鐵氧體”表示通式[xFe2O3，yMoz]z]的鐵氧化物，其中M表示可在磁場的作用下磁化的金屬，如Fe、Co、Ru、Mg或Mn，可磁化的金屬可能任選地是放射性的。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物的磁性顆粒包括鐵氧體，特別是磁赤鐵礦(γFe2O3)、磁鐵礦(Fe3O4)，或其他鈷(Fe2CoO4)或錳(Fe2MnO4)的混合鐵氧體。在這樣的背景下，特別將偏好給予磁性顆粒，該磁性顆粒完全或者部分由鐵氧體和優(yōu)選地基本上(即按重量計(jì)超過90％，優(yōu)選地超過95％，甚至更優(yōu)選地超過98％)由磁赤鐵礦或磁鐵礦或它們的混合物組成。優(yōu)選地，上文提及的放射性微球是由標(biāo)記有釔90(由Sirtex醫(yī)藥公司出售的射釔菲爾)的陽離子交換樹脂組成(該陽離子交換樹脂包括例如聚乙烯醇或含有苯乙烯和二乙烯基苯的共聚物，如來自BioRad公司的安美納斯(Aminex)50W-X4)，或由包含釔90的玻璃組成(由BTG公司出售的)，或由聚合物如聚乳酸(PLLA)和上文提及的放射性元素組成，鈥(166Ho)則是優(yōu)選的放射性元素。更優(yōu)選地，處于89Y2O3形式的釔被納入由玻璃組成的微球中，然后所述微球用中子輻照以便使它們通過將冷釔89Y轉(zhuǎn)化為放射性釔90Y而具有放射性。甚至更優(yōu)選地，由陽離子交換樹脂或由玻璃組成的微球分別具有20至60μm和20至30μm的直徑。特別地，射釔菲爾型微球?qū)＠鸈P0740581B1的主題。優(yōu)選地，裝載有如上提及的化合物中的一種的微球被裝載上蒽環(huán)類藥物如多柔比星、表柔比星、或伊達(dá)比星，或裝載上拓?fù)洚悩?gòu)酶I型抑制劑如伊立替康，或裝載上鉑絡(luò)合物如順鉑。優(yōu)選地，這些微球由聚乙烯醇(PVA)生產(chǎn)。優(yōu)選地，這些微球由PVA的水凝膠組成，以及更優(yōu)選地當(dāng)這些微球帶正電時(shí)由具有磺酸SO3-基團(tuán)(上文提及的化合物附接到該磺酸SO3-基團(tuán))修飾的聚合物組成(由生物兼容性(Biocompatibles)公司出售的DC玻璃粉DC-玻璃粉和LC-玻璃粉)，或當(dāng)這些微球帶正電時(shí)，這些微球由單體如乙酸乙烯酯和丙烯酸甲酯生產(chǎn)，當(dāng)乙酸乙烯酯和丙烯酸甲酯被組合在一起時(shí)，它們形成PVA/丙烯酸共聚物(聚(丙烯酸鈉-共乙烯醇)共聚物)，該共聚物被羧酸COO-基團(tuán)修飾，上文提及的化合物通過簡單的離子鍵合附接到該羧酸COO-基團(tuán)(由麥瑞通醫(yī)療系統(tǒng)公司(MeritMedical)出售的或)。這些微球還可以由聚磷腈聚合物組成，然后被裝載上多柔比星、表柔比星、伊達(dá)比星或伊立替康(由Celonova生物科學(xué)公司出售的微球)。這些微球也可以由來自水解的馬鈴薯粉的聚合物組成，該馬鈴薯粉是交聯(lián)的且被甘油乙醚基取代，然后這些微球被裝載上多柔比星、放線菌素D、?；悄就?、順鉑、卡鉑、絲裂霉素C，福莫司汀、卡莫司汀、伊立替康、5-FU、氟尿苷或多烯紫杉醇，125I-標(biāo)記的抗CEA(癌胚抗原)抗體或99mTc-DTPA絡(luò)合物(由Pharmacept公司出售的S微球)。表面活性劑應(yīng)當(dāng)指出，術(shù)語“表面活性劑”是指具有兩親結(jié)構(gòu)的組合物，該兩親結(jié)構(gòu)賦予在水/油型界面上的特別的親和力，從而使它能夠降低這些界面的自由能并且穩(wěn)定分散的系統(tǒng)。根據(jù)本發(fā)明所述的組合物包括如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的至少一種表面活性劑。因此，它可以包括具有化學(xué)式(I)或(I')的一種表面活性劑或具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑的混合物。表面活性劑具有如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')，優(yōu)選地其中s是0或1，m代表2至10的整數(shù)，以及R1代表如上所定義的具有化學(xué)式(II)的基團(tuán)，其中n代表5至7的整數(shù)，o代表1至3的整數(shù)，p代表3至5的整數(shù)，q代表2至5的整數(shù)，并且r是0或1。甚至更優(yōu)選地，如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')中，s是1，m代表2至5的整數(shù)，并且在由R1代表的化學(xué)式(II)中，n是7，o是1，p是5，q代表2至4的整數(shù)，并且r是1。HLB(意指親水親油平衡)是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的量級，是表面活性劑的特性。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明所述的表面活性劑是具有低HLB的表面活性劑，即具有包括1至8的HLB值，優(yōu)選包括1到6的HLB值的表面活性劑。HLB使得能夠確定水包油或油包水乳劑的類型，如在W.C.格里芬(W.C.Griffin)的文章中所闡明的(“通過“HLB”的表面活性劑的分類(ClassificationofSurface-activeagentsby"HLB")”，化妝品化學(xué)家協(xié)會(huì)雜志(JournaloftheSocietyofCosmeticChemists)，1949，311-326)。該文章表明，特別地，對于HLB為4至6的表面活性劑，觀察到W/O型的乳劑，而對于HLB為8至18的表面活性劑，相反觀察到O/W型的乳劑。有利的是，具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑可溶于碘化油，特別是在上述比例范圍內(nèi)的碘化油。有利的是，根據(jù)本發(fā)明所述的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑是選自聚蓖麻酸聚甘油酯和PEG-30二聚羥基硬脂酸酯。聚蓖麻酸聚甘油酯或PGPR(帕斯嘉4125，帕斯嘉4150，帕斯嘉4110，帕斯嘉4120或帕斯嘉4175)是表面活性劑，該表面活性劑作為親水基團(tuán)具有聚甘油(優(yōu)選地包括至少75％的二-和三甘油和至多10％的七甘油)，并且作為疏水基團(tuán)，具有交酯的蓖麻油酸(ricinoleiques)脂肪酸。它具有1.5的HLB。它對應(yīng)于如上所定義的具有化學(xué)式I的表面活性劑，其中：-s是1，-m代表從2至5的整數(shù)，-R1代表如上所定義的具有化學(xué)式(II)的基團(tuán)，其中n是7，o是1，p是5，q是2至4，以及r是1，-R2代表R1和/或氫原子。優(yōu)選地，化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑是化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑的混合物，其中：-s是1，-m是2、3、4或5，-R1代表如上所定義的具有化學(xué)式(II)的基團(tuán)，其中n是7，o是1，p是5，q是2、3或4，以及r是1，-R2代表R1和/或氫原子。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明所述的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑是選自以下化學(xué)式的化合物的表面活性劑的混合物：HLB為5-6的PEG-30二聚羥基硬脂酸酯(由Croda公司出售的DPHS和以前的P135)。名稱PEG與INCI建立的命名慣例一致，以上指定的值30對應(yīng)于環(huán)氧乙烷單體單元的平均數(shù)。它對應(yīng)于如上所定義的具有化學(xué)式1的表面活性劑，其中：-s是0，-m是30，-R1代表如上所定義的具有化學(xué)式(II)的基團(tuán)，其中n是9，o是1，p是5，q是7，以及r是0，-R2與R1相同。根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的用途根據(jù)第二主題，本發(fā)明涉及將如上所定義的組合物用于運(yùn)載抗癌藥劑的用途。本發(fā)明還涉及如上所定義的乳劑形式的組合物，其用于治療癌癥或其轉(zhuǎn)移，優(yōu)選采用動(dòng)脈化療栓塞。在一個(gè)有利的實(shí)施例中，本發(fā)明涉及使用根據(jù)本發(fā)明所述的組合物，用于制備藥物來治療癌癥或其轉(zhuǎn)移，優(yōu)選采用動(dòng)脈化療栓塞。動(dòng)脈化療栓塞是指經(jīng)動(dòng)脈經(jīng)皮導(dǎo)入物質(zhì)以便阻塞血管，并聯(lián)合導(dǎo)入抗癌藥劑以遞送治療有效量的藥劑進(jìn)入腫瘤。優(yōu)選地，這樣治療的癌癥是選自肝癌(特別是原發(fā)性肝癌，如肝細(xì)胞癌或HCC)、膽管癌、原發(fā)癌的肝臟轉(zhuǎn)移，該原發(fā)癌是選自結(jié)腸直腸癌、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、乳腺癌、腎腫瘤和黑色素瘤。優(yōu)選地，肝腫瘤的化療栓塞通過執(zhí)行以下連續(xù)步驟來實(shí)施：a)從股動(dòng)脈經(jīng)皮導(dǎo)管插入術(shù)，b)給予據(jù)本發(fā)明所述的乳劑，直到在二階或三階分支觀察到停滯，c)任選地，乳劑被給予后，給予栓塞劑至腫瘤中。優(yōu)選地，這樣給予的根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑含有不超過20ml碘化油，更優(yōu)選地不超過15ml碘化油。在成像技術(shù)的協(xié)助下有利地實(shí)施導(dǎo)管插入，其在于將管(稱為導(dǎo)管)插入肝動(dòng)脈，然后進(jìn)入散布癌癥病灶的這個(gè)動(dòng)脈的分支。此外，介入放射科醫(yī)生提供指導(dǎo)軟件以使他們盡可能以最佳方式放置導(dǎo)管。術(shù)語“栓塞劑”旨在意指一種或多種使得能夠絕對地或暫時(shí)地減緩或停止血管內(nèi)的血流的化合物。作為“栓塞劑”的一個(gè)例子，可能要提及明膠海綿、明膠海綿顆粒(明膠海綿海綿明膠)、聚乙烯醇(PVA)或校準(zhǔn)微球，例如基于三丙烯明膠的校準(zhǔn)微球、基于PVA的校準(zhǔn)微球(埃弗倫)，等。有利的是，化療栓塞程序之前，執(zhí)行了血管造影術(shù)或動(dòng)脈X線攝影法以查明內(nèi)臟血管化和一種或多種腫瘤的動(dòng)脈灌注，該血管造影術(shù)或動(dòng)脈X線攝影法的實(shí)施采用了血管掃描(angioscan)或MR血管造影法(磁共振血管造影術(shù)或MRA)，且通常采用注射對比產(chǎn)品(例如，對于血管掃描：水溶性碘化的對比產(chǎn)品如碘比醇(三代顯)或碘海醇(歐乃派克)，以及對于MR血管造影法：釓螯合物如釓特酸或釓布醇(加樂顯))。這種化療栓塞技術(shù)可以單獨(dú)使用或與下面提到的一個(gè)或多個(gè)其他技術(shù)相結(jié)合使用。它也可以被替換為這些其他技術(shù)之一。當(dāng)抗癌藥劑是選自上文提及的具有大環(huán)螯合物的放射性元素或放射性元素的絡(luò)合物時(shí)，使用的技術(shù)是內(nèi)部選擇性放射療法或放射性栓塞術(shù)。它在于將根據(jù)本發(fā)明所述的組合物直接注射入散布腫瘤的肝動(dòng)脈的分支。這種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是將非常顯著的照射遞送至腫瘤而沒有顯著地照射患者的健康肝臟和其他器官。當(dāng)抗癌藥劑是選自基于鐵化合物的磁性顆粒(USPIOs)時(shí)，使用的技術(shù)是磁熱療消融。這在于在腫瘤組織的水平誘導(dǎo)局部的溫度增加，因?yàn)槟[瘤細(xì)胞比健康細(xì)胞對溫度的增加更敏感。通過對需要治療的區(qū)域使用外部刺激尤其是應(yīng)用交變磁場來造成這種溫度的增加。區(qū)分兩種類型的熱療這取決于所達(dá)到的溫度：當(dāng)溫度高于46℃時(shí)，有可能誘發(fā)組織壞死，那么使用術(shù)語熱消融；當(dāng)溫度為42℃至46℃時(shí)，有可能修改許多結(jié)構(gòu)和酶蛋白質(zhì)的功能，從而修改細(xì)胞的發(fā)育和分化，并可能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，那么使用術(shù)語適中熱療。如果這些細(xì)胞不死亡，它們對電離輻射或化療變得更加敏感。當(dāng)抗癌藥劑是選自由上文提及的病毒載體或非病毒載體運(yùn)載的脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的序列的核酸序列，或是干擾RNA(小干擾RNA，siRNA)或雙鏈RNA(dsRNA)序列時(shí)，所用的技術(shù)是基因治療(genetherapy)，有時(shí)也被稱為“基因療法(genotherapy)”。這種方法的原理是引入外源基因，該外源基因的表達(dá)產(chǎn)物(直接地或間接地)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的死亡。計(jì)劃性地，可以使用三種方法：a)通過修飾腫瘤細(xì)胞膜抗原來誘導(dǎo)免疫防御(“免疫刺激”)；b)將腫瘤“抑制”基因轉(zhuǎn)移到腫瘤細(xì)胞的基因組，或最后c)轉(zhuǎn)移“自殺”基因，其使得可能將非激活的抗癌藥劑的前藥轉(zhuǎn)化成對腫瘤細(xì)胞有毒的分子。所有這些不同的技術(shù)是本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將知道如何容易地選擇待調(diào)整的參數(shù)，以便使用根據(jù)本發(fā)明所述的組合物執(zhí)行這些技術(shù)。除非另有說明，術(shù)語“治療(treating和treatment)”旨在意指任何旨在提高個(gè)人的舒適度、幸福感與生存的行動(dòng)，因此這個(gè)術(shù)語涵蓋衰減、減少、緩解和治療。根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物的制備優(yōu)選地，乳劑形式的組合物是即興地制備的。本發(fā)明還涉及用于制備如上所定義的乳劑形式的組合物，該方法包括以下步驟：a)在碘化油中，混合如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑，并且b)將在步驟a)中得到的溶液與包含抗癌藥劑的水溶液混合。與在步驟a)中得到的溶液混合的水溶液也可包括如上所定義的致密化劑。在步驟a)中制備的脂質(zhì)相也可以包括如上所定義的非碘化油。在步驟b)中進(jìn)行的混合可以通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的任何方式來實(shí)施。優(yōu)選地，使用三通旋塞。將含有表面活性劑的碘化油置于連接至三通旋塞的第一注射器。在90℃下，將含有抗癌藥劑的水溶液置于也被連接到這個(gè)三通旋塞的第二注射器。兩相的混合是通過交替地推壓在兩個(gè)注射器上的活塞(優(yōu)選為20至35次)來進(jìn)行。優(yōu)選地，所有的混合物通過一個(gè)注射器，然后每隔1至2秒通過其他的注射器。旋塞的第三通道使得能夠附接導(dǎo)管，該導(dǎo)管在熒光控制下選擇性地被推進(jìn)至腫瘤病變以給予乳劑。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的制備是在10℃至40℃之間的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選地在20℃至30℃之間的溫度下進(jìn)行。用于根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的銷售形式本發(fā)明還涉及一種試劑盒，其包括：-如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑，-碘化油，-抗癌藥劑，作為組合產(chǎn)品同時(shí)、單獨(dú)或隨著時(shí)間的推移分散使用用于治療癌癥。該表面活性劑、該碘化油和該抗癌藥劑(一般溶解在水溶液中)是在三個(gè)不同的容器中。一般地，[在水溶液中的表面活性劑/碘化油/抗癌藥劑]的混合生成根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物。此外，本發(fā)明涉及一種試劑盒，其包括：-組合物，其包含如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑和碘化油，-抗癌藥劑，作為組合產(chǎn)品同時(shí)、單獨(dú)或隨著時(shí)間的推移分散使用用于治療癌癥。該組合物和該抗癌藥劑(優(yōu)選是以凍干形式提供)是在兩個(gè)不同的容器中。優(yōu)選地，該抗癌藥劑是即興地或在治療前一天溶解在水溶液中。優(yōu)選地，該組合物是由具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑、碘化油和任選地非碘化油的混合物組成。一般地，該組合物與在水溶液中的表面活性劑混合生成根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物。本發(fā)明還涉及一種試劑盒的使用，該試劑盒包括：-如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑，-碘化油，用于作為多個(gè)組合產(chǎn)品以用于運(yùn)載抗癌藥劑。該表面活性劑和該碘化油是在兩個(gè)不同的容器中。本發(fā)明還涉及一種組合物的用途，該組合物包括：-溶解于碘化油中的如上所定義的具有化學(xué)式(I)或(I')的表面活性劑，用于作為產(chǎn)品以用于運(yùn)載抗癌藥劑。將表面活性劑溶解在同一個(gè)容器中的碘化油中。術(shù)語“容器”旨在表示可以容納產(chǎn)品的任何藥學(xué)上可接受的容器。通過舉例的方式，可能要提及安瓿、瓶子或載藥注射器。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的容器”旨在表示任何不與產(chǎn)品相互作用的容器，優(yōu)選是任何不會(huì)釋放化合物至碘化油中和不會(huì)降解碘化油的容器。附圖說明在下文中出現(xiàn)的實(shí)例是以對本發(fā)明的非限制性說明的方式呈現(xiàn)的。圖1：通過若干種乳劑的化療栓塞(TACE)治療，注射后多柔比星在攜帶肝細(xì)胞癌的大鼠中的血漿動(dòng)力學(xué)。圖2：通過若干種乳劑的化療栓塞(TACE)治療，注射后多柔比星在攜帶肝細(xì)胞癌的兔子中的血漿動(dòng)力學(xué)。圖3：根據(jù)給予的乳劑，在腫瘤中測得的碘油的量和在所述腫瘤中測得的多柔比星的量之間的相關(guān)性研究結(jié)果。具體實(shí)施方式實(shí)例1：1.根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑形式的組合物的制備1.1.碘油和蒽環(huán)類藥物的乳劑50mg多柔比星(艾霉素注射劑)在2.5ml的三代顯250(250mg碘/ml)中重構(gòu)。為了很好的溶解手動(dòng)攪拌30秒后，將所得的溶液用20ml的魯爾鎖定注射器移除。然后將該注射器置于三通旋塞上。PGPR(1％w/v總?cè)芤海?00mg-Interchim公司)通過手動(dòng)攪拌溶解在7.5ml的碘油中。所得油用20ml魯爾鎖定注射器移除，該魯爾鎖定注射器也在90℃下置于三通旋塞上。以水進(jìn)油開始，以中等力度進(jìn)行34次來回，即17次后退和前進(jìn)動(dòng)作。對于這些乳劑，水相的體積和選擇的脂質(zhì)相的體積為分別為2.5ml(即25％v/v)和7.5ml(即75％v/v)。水相/脂質(zhì)相比率為1/3。制備了其他乳劑：-通過使用伊達(dá)比星(善唯達(dá))、絲裂霉素C(協(xié)和公司(Kyowa))或表柔比星替代多柔比星作為抗癌藥劑，和/或-通過引入非致密化劑，或-通過用三代顯300(300mg碘/ml)、碘帕醇350，碘帕醇300，300，優(yōu)維顯300或歐乃派克240替代致密化劑三代顯250，或-通過用CithrolTMDPHS(PEG-30二聚羥基硬脂酸酯)替代表面活性劑PGPR，或-通過改變表面活性劑的比例。對于CithrolTMDPHS，通過使用超聲波(VialTweeter超聲波設(shè)備，3x45s)得到溶解。乳劑感官的驗(yàn)證：一旦已經(jīng)準(zhǔn)備乳劑，其感官通過簡單的視覺測試的方式來驗(yàn)證。制備兩個(gè)瓶子：一個(gè)裝水相(三代顯250或三代顯300，視情況而定)并且另一個(gè)裝碘化油(碘油)。將一滴新鮮制備的乳劑加入兩個(gè)瓶子的每一個(gè)中。液滴在碘油的瓶子中分散，并且在三代顯的瓶子中不分散；因此該乳劑確實(shí)是W/O(油包水)乳劑。紅色多柔比星液滴在黃色油背景中清晰可見。使用光學(xué)顯微鏡對水相液滴的尺寸進(jìn)行評估。在下表中描述制備的主要乳劑：*在室溫(20℃)**三代顯250***三代顯300****碘帕醇250這些不同的乳劑使用具有化學(xué)式(I)的表面活性劑制備，且各種抗癌藥劑全都表現(xiàn)出期望的穩(wěn)定性。1.2.碘油和放射性元素的乳劑1.2.1.碘油和90YCl3的乳劑將緩沖液(tris)加入釔90(以酸溶液形式(釔綠泥石，0.05MHl))的放射性溶液中，以便使所得溶液的pH與患者中使用(6<pH<9)的兼容。所得溶液可在大量生理鹽水中稀釋，使最終體積不超過10ml。根據(jù)以上所述的技術(shù)將1％(w/v)的PGPR溶解在7.5ml的碘油中。然后，將由7.5ml碘油和1％的PGPR組成的脂質(zhì)相加入水相中并且乳劑通過攪拌來制備，該攪拌是通過抽吸和重懸由此得到的懸浮液來進(jìn)行。1.2.2.碘油和與DOTA絡(luò)合的90YCl3的乳劑在pH6-7的緩沖液中，將放射性溶液加入DOTA(1,4,7,10-四氮雜十二烷-N,N',N",N"'-四乙酸)溶液中，并且將該介質(zhì)加熱到80℃持續(xù)30分鐘。將大量生理鹽水加入該溶液中，使最終體積不超過10ml。根據(jù)如上所述的技術(shù)，將1％(w/v)的PGPR溶解在7.5ml的碘油中。然后，將由7.5ml碘油和1％的PGPR組成的脂質(zhì)相加入水相中，并且乳劑通過有力的攪拌由此得到的懸浮液來制備。1.3.碘油和基于鐵的磁性顆粒的乳劑1.3.1.碘油基于鐵的磁性顆粒和蒽環(huán)類藥物的乳劑將覆蓋有油酸(根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的技術(shù)合成)的基于鐵化合物的磁性納米顆粒在60℃下完全溶解于60g的碘油中持續(xù)24h。通過觀察肉眼可見的聚集體的不存在來評估所述磁性納米顆粒的總?cè)芙舛?。返回到室溫后，將溶液?chǔ)存或用于生產(chǎn)乳劑。一瓶50mg艾霉素注射劑用2.5ml三代顯250來重構(gòu)。為了很好的溶解，手動(dòng)進(jìn)行攪拌30秒。將所得溶液用置于三通旋塞上的20ml魯爾鎖定注射器移除。將PGPR(1％w/v總?cè)芤海?00mg)分散在7.5ml包含磁性顆粒的碘油中。將所得油用也置于三通旋塞上的20ml魯爾鎖定注射器移除。以水進(jìn)油開始，以中等力度進(jìn)行30次來回，即15次后退和前進(jìn)動(dòng)作。1.3.2.碘油和基于鐵的磁性顆粒的乳劑基于鐵化合物的磁性納米顆粒(根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中已知的技術(shù)來合成：具體參見WO2004/058275)覆蓋有一層以下化學(xué)式的偕-二膦酸酯：耦合于PEG2000，在60℃下被完全溶解在10g生理鹽水中持續(xù)24h以獲得0.5M的鐵濃度。通過觀察肉眼可見的聚集體的不存在來評估所述磁性納米顆粒的總?cè)芙舛取７祷氐绞覝睾?，將溶液?chǔ)存或用于生產(chǎn)乳劑。將2.5ml所得溶液用置于三通旋塞上的20ml魯爾鎖定注射器移除。將PGPR(1％w/v總?cè)芤海?00mg)分散在7.5ml的碘油中。將所得油用20ml魯爾鎖定注射器移除，該魯爾鎖定注射器也在90℃下置于三通旋塞上。以水進(jìn)油開始，以中等力度進(jìn)行30次來回，即15次后退和前進(jìn)動(dòng)作。2.與不符合本發(fā)明的乳劑的比較根據(jù)如在段落1.1中詳細(xì)說明的相同的實(shí)驗(yàn)方案或稍微不同的實(shí)驗(yàn)方案(在下面的表中指出了與段落1.1的實(shí)驗(yàn)方案比較的差別：水相和脂質(zhì)相各自的體積以它們的比例為基礎(chǔ)來計(jì)算)制備的乳劑是使用不符合本發(fā)明濃度的PGPR或具有低或高HLB的表面活性劑，例如家族的表面活性劑(山梨糖醇的脂肪酸酯)、具有高HLB的克列莫佛家族的表面活性劑(甘油聚乙二醇蓖麻醇酸酯)、具有高HLB的吐溫家族的表面活性劑(山梨糖醇聚氧乙烯脂肪酸酯)或具有高HLB的普郎尼克類家族的表面活性劑(基于環(huán)氧乙烷和環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物，由BASF出售)，以及具有低HLB值(HLB＝6.7)的PG32IS表面活性劑。除了非離子碘化對比產(chǎn)品，對致密化劑進(jìn)行了測試，如PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、甘油、或還有葡聚糖T40(Sigma公司)，但是可使用的最大量沒能達(dá)到碘化油如碘油的密度。碘克沙酸(低滲顯影葡胺)沒能容易地溶解抗癌藥劑如多柔比星并且顯著地增加組合物的滲透度。在下面的表中描述了制備的主要乳劑：使用符合本發(fā)明的表面活性劑但使用不符合的濃度制備的乳劑：使用不符合本發(fā)明的表面活性劑和/或致密化劑制備的乳劑，和/或在不符合本發(fā)明的水相/脂質(zhì)相比率中制備的乳劑：*使用不符合本發(fā)明的致密化劑制備的乳劑：PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、葡聚糖T40、碘克沙酸(低滲顯影葡胺)或甘油不使用表面活性劑和/或不使用致密化劑制備的乳劑：*不使用致密化劑制備的乳劑80(禾大公司(Croda))是脫水山梨糖醇單油酸酯。吐溫80(禾大公司)，也稱為聚山梨醇酯80，是PEG-20脫水山梨糖醇單油酸酯?？肆心餎L(BASF)具有(作為化學(xué)名稱)：聚氧乙烯35蓖麻油。PG32IS是聚甘油-3-二異硬脂酸酯。因此，并不像具有化學(xué)式(I)的表面活性劑一樣分支。除了80(HLB＝4.3)，對其他進(jìn)行了測試：20(HLB＝8.6)、65(HLB＝2.1)、83(HLB＝3.7)和85(HLB＝1.8)。使用這些表面活性劑制備的乳劑在它們被制備后都立即經(jīng)歷了相分離。使用普朗尼克化合物(BASF)進(jìn)行的測試也不是決定性的，因?yàn)椴豢赡苁褂眠@些化合物制備乳劑。因此，所有得到的可比較乳劑表現(xiàn)出不足的穩(wěn)定性或不符合本發(fā)明的感官。3.對根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑進(jìn)行體內(nèi)評估和與不符合本發(fā)明的乳劑進(jìn)行比較3.1.動(dòng)物模型：大鼠，其攜帶通過給予N1-S1細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤3.1.1.材料與方法加林(Garin)等人(實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(LabAnim)，2005年7月；39(3):314-20)描述的腫瘤誘導(dǎo)方法被用于預(yù)先麻醉的雌性斯普拉格-杜勒(Sprague-Dawley)大鼠(供應(yīng)商德普雷(Dépré)或讓維耶(Janvier)，法國)。將懸浮在100μl的IMDM培養(yǎng)基(伊斯科夫氏(Iscove's)改良的杜爾貝科氏(Dulbecco's)培養(yǎng)基)中的6×106N1-S1大鼠肝細(xì)胞癌腫瘤細(xì)胞(在參考號(hào)CRL-1604TM下保藏在ATCC，也稱為諾維科夫(Novikoff)細(xì)胞)，通過以大約50秒的過程緩慢注射，給予至雌性大鼠的肝包膜的左外側(cè)葉下。通過信息的方式，N1-S1腫瘤細(xì)胞系最初從肝細(xì)胞瘤中獲得，該肝細(xì)胞瘤是在雄性斯普拉格-杜勒大鼠中通過口服給藥4-二甲胺基偶氮苯誘導(dǎo)的。形成了8個(gè)組，每組4只動(dòng)物。測試的產(chǎn)品(每組一個(gè)產(chǎn)品)：根據(jù)本發(fā)明所述的組合物：多柔比星*(艾霉素注射劑輝瑞公司)表柔比星**(輝瑞公司)水相和脂質(zhì)相之間的比率是1/3(25μl水相和75μl碘油)。測試的四個(gè)乳劑組合物是反相(W/O)乳劑。不符合本發(fā)明(不使用表面活性劑)的組合物：多柔比星*(艾霉素注射劑輝瑞公司)“對照”產(chǎn)品：將單獨(dú)的多柔比星(0.9％NaCl)或者(在適當(dāng)情況下)單獨(dú)的表柔比星作為對照注射在一個(gè)4只大鼠的組中。產(chǎn)品的給予：這些方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的，因此他們知道自己如何調(diào)整某些證明有需要的參數(shù)。在TACE治療的前一天(D-1)，將動(dòng)物通過MRI(布魯克公司(Bruker)，2.35T)成像以驗(yàn)證腫瘤的生長。在TACE治療的當(dāng)天(D0)，治療前將大鼠再次成像以測量肝臟腫瘤的大小和體積(使用圖像處理軟件)。已經(jīng)進(jìn)行腫瘤誘導(dǎo)方法7天后，將產(chǎn)品(體積：100μl)經(jīng)由胃十二指腸動(dòng)脈注射到預(yù)麻醉的動(dòng)物。對包含在這些乳劑中的抗癌藥劑在其注射后的血漿動(dòng)力學(xué)的測定：在動(dòng)脈內(nèi)注射后0、5、10、20、30和45分鐘，頸動(dòng)脈導(dǎo)管插入術(shù)后采集300μl的血樣。然后，離心后回收150μl的血漿，并對其進(jìn)行肝素化以測定抗癌藥劑。從而，對抗癌藥劑的血漿動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。血漿多柔比星測定是通過高效液相色譜法(或HPLC)在肝素化的大鼠血漿中進(jìn)行的，該色譜儀配備有熒光檢測器。通過在具有40％乙腈的酸性介質(zhì)(乙酸銨，pH3.5)中沉淀來制備血漿樣品。200μl大鼠血漿(肝素鋰)是必需的。在Zorbax300SB-C184.6x150mm，3.5μm柱(具有Zorbax300SB-C184.6x12.5mm，5μm前置柱)上通過反相HPLC以及利用熒光檢測(激發(fā)波長480nm，發(fā)射波長560nm)對10μl提取物進(jìn)行了分析。用5mM乙酸銨(pH3.5)/乙腈梯度進(jìn)行了歷經(jīng)30分鐘的分析。樣品經(jīng)校正曲線(2μg/l至1600μg/l的DOX標(biāo)定范圍-2μg/l至400μg/l的DOXol標(biāo)定范圍)測定。當(dāng)HPLC峰的面積大于量化的上限時(shí)，5μl代替10μl進(jìn)行注射以獲得包括在范圍內(nèi)的多柔比星的區(qū)域。在時(shí)間T0、5分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘和45分鐘進(jìn)行盲樣測定。腫瘤和健康肝臟樣品的組織學(xué)評價(jià)：用1l/min的O2通過異氟烷氣體麻醉(5％)對動(dòng)物實(shí)施安樂死。進(jìn)行尸體解剖并采集血液、血漿、腫瘤和健康肝臟樣品以便執(zhí)行多柔比星和表柔比星的測定。將采集的腫瘤和健康肝臟樣品凍結(jié)(未固定)用于腫瘤的組織學(xué)分析。其上放置有標(biāo)本樣品的載玻片處理(切片、固定用于H&E等)后，進(jìn)行H&E(蘇木精-伊紅)染色以便在腫瘤部分及其健康肝環(huán)境之間獲得更好的區(qū)分。對針對存在或不存在多柔比星特異的熒光進(jìn)行測量，并在1(弱熒光)至6(強(qiáng)熒光)的分值范圍顯示了熒光水平。這種熒光與存在于研究中的組織中的多柔比星的量成正比。所有這些技術(shù)對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是熟知的。3.1.2.所得的結(jié)果3.1.2.1.抗癌藥劑的血漿動(dòng)力學(xué)可以注意到，在圖1的曲線圖上代表作為時(shí)間的函數(shù)的平均濃度的以下幾點(diǎn)：對于8個(gè)組的動(dòng)物，多柔比星的濃度峰值是在5分鐘。最高峰值(即最高血漿濃度)是注射單獨(dú)的多柔比星(對照多柔比星)的，平均為2447μg/l。緊跟其后的是接受E22產(chǎn)品的組(乳劑感官O/W-1/1比率，有三代顯250，沒有表面活性劑)，其濃度峰值的平均值為1287μg/l，即幾乎比注射單獨(dú)的多柔比星獲得的值低一半的值，然后是接受E23產(chǎn)品的組(乳劑感官W/O-1/3比率，既沒有表面活性劑也沒有致密化劑)，再然后是接受E21產(chǎn)品的組(乳劑感官O/W-1/1比率，既沒有表面活性劑也沒有致密化劑)。在10分鐘和45分鐘的采樣時(shí)間之間，接受單獨(dú)的多柔比星和E21、E22和E23的產(chǎn)品的組與接受E21、E22和E23的產(chǎn)品的組遵循相同的降低，具有更低的值(在45分鐘，“單獨(dú)的多柔比星對照”組＝112μg/l，“E21”組＝106μg/l，“E22”組＝63μg/l以及“E23”組＝143μg/l)。對于接受E1(乳劑感官W/O-1/3，有三代顯250，使用PGPR作為表面活性劑)、E2(乳劑感官W/O，有PGPR，沒有致密化劑)、E4(乳劑感官W/O，有表柔比星、PGPR和三代顯250)和E11(乳劑感官的W/O，有多柔比星、CithrolTMDPHS和三代顯250)產(chǎn)品的組，多柔比星的濃度要比接受單獨(dú)的多柔比星或E21、E22和E23產(chǎn)品的組低得多，這在所有采樣點(diǎn)都是如此。血漿動(dòng)力學(xué)的分析表明，注射符合本發(fā)明的組合物E1、E2、E11(圖1)和E4(結(jié)果在圖1中未示出)后沒有血漿峰值。*用于E4乳劑的單獨(dú)的表柔比星對照與只接受了單獨(dú)的多柔比星的動(dòng)物相比，對接受了符合本發(fā)明的穩(wěn)定的W/O乳劑的雌性大鼠觀察到血漿多柔比星水平降低94％以上。對于接受了不符合本發(fā)明的E21、E22和E23乳劑的雌性大鼠，在其注射后5分鐘時(shí)觀察到血漿峰值。與只接受了單獨(dú)的多柔比星的動(dòng)物相比，對接受了不符合本發(fā)明的乳劑的雌性大鼠觀察到血漿多柔比星水平降低最多59％。可通過使用具有化學(xué)式I的表面活性劑(PGPR或PEG-30二聚羥基硬脂酸酯)改良W/O乳劑的感官和其穩(wěn)定性，使得能夠預(yù)想根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的有效的臨床用途。3.1.2.2.腫瘤與健康肝臟樣本的組織學(xué)評價(jià)切片的分析，特別是H&E染色的分析，能夠證明HCC(肝細(xì)胞癌)腫瘤類型(多角形細(xì)胞嵌入厚的致密的帶狀物中)在所有種植了N1S1細(xì)胞的動(dòng)物中存在，顯然與健康的組織劃定了界限。使用尼康(Nikon)Eclipse80iABS顯微鏡測定熒光，該顯微鏡配備了尼康強(qiáng)光C-HGFI前置中心光纖照明系統(tǒng)。這些圖像通過濱松(Hamamatsu)NDP.view2.5可視化軟件來查看。在對照動(dòng)物的切片上確定組織的自發(fā)熒光。這種熒光水平從來自已接受乳劑組合物的動(dòng)物的腫瘤和健康肝臟樣品中觀察到的熒光水平推導(dǎo)出。對這些切片的測定表明攜帶的腫瘤層面上多柔比星的量的差異，按進(jìn)行分類(測定盲樣)的順序?yàn)椋篍1(6分)、E21(1分)、E22(3分)和E23(2分)。因此，相比不符合本發(fā)明的乳劑，E1乳劑使得能夠在更大的程度上在腫瘤水平保持抗癌藥劑。根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑的組合物證明其運(yùn)載抗癌藥劑的強(qiáng)大能力，因?yàn)樗鼈冊试S這些藥劑保留在腫瘤中而不進(jìn)入血管腔隙。3.2.動(dòng)物模型：兔子，其攜帶通過給予VX2癌細(xì)胞誘導(dǎo)的癌癥3.2.1.材料與方法洪(Hong)等人描述的腫瘤誘導(dǎo)方法(臨床癌癥研究(ClinCancerRes)2006，12(8):2563-2567)用于預(yù)先麻醉的新西蘭兔(NZ；供應(yīng)商查爾斯河公司(CharlesRiver)，法國)。將VX2腫瘤組織片段移植在兔子肝包膜的左外側(cè)葉的下(25mg的片段/每葉新西蘭兔的肝臟)。這些在左肝葉具有腫瘤的兔子隨后將被稱為“VX2兔子”。形成了3個(gè)組，每組6只動(dòng)物。測試的產(chǎn)品(每組一個(gè)產(chǎn)品)：-E1(根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑)-E21(不符合本發(fā)明的乳劑)-“對照”產(chǎn)品：將單獨(dú)的多柔比星(0.9％NaCl)作為對照注射至一個(gè)具有6只兔子的組。產(chǎn)品的給予：這些方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的，因此他們知道自己如何調(diào)整某些證明有需要的參數(shù)。在TACE治療的當(dāng)天(D0)，治療前(D0)將動(dòng)物通過MRI(布魯克公司(Bruker)，2.35T)成像以便驗(yàn)證腫瘤的生長和測量肝臟腫瘤的大小和體積(使用圖像處理軟件)。實(shí)施腫瘤誘導(dǎo)方法后的19天，進(jìn)行TACE治療。從而，使用導(dǎo)管將產(chǎn)品(體積：300μl)注射進(jìn)預(yù)先麻醉的動(dòng)物，該導(dǎo)管經(jīng)由股動(dòng)脈被X線透視(X射線成像)引導(dǎo)并被帶到動(dòng)脈輸送給肝腫瘤(只注射已經(jīng)實(shí)現(xiàn)選擇性的位置)。在專用的房間和接近臨床實(shí)踐(介入放射學(xué))的條件下進(jìn)行TACE。對包含在這些乳劑中的抗癌藥劑在其注射后的血漿動(dòng)力學(xué)的測定：動(dòng)脈內(nèi)注射后的0、5、15、30和45分鐘，耳靜脈導(dǎo)管插入術(shù)后采集300μl的血樣。然后，離心后回收200μl的血漿，并對其進(jìn)行肝素化以測定抗癌藥劑。從而，對抗癌藥劑的血漿動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。在如上所述的同樣條件下，血漿多柔比星測定在VX2兔子的肝素化血漿中進(jìn)行。還在如上所述的同樣條件下進(jìn)行分析。遞送至腫瘤和健康肝臟樣本的多柔比星和碘油的組織學(xué)評價(jià)和量的評價(jià)：在實(shí)施TACE(在X射線成像的指導(dǎo)下動(dòng)脈內(nèi)注射產(chǎn)品)后1天(D1)，用1l/min的O2通過異氟烷(5％)氣體麻醉對動(dòng)物實(shí)施安樂死。進(jìn)行尸體解剖并采集血液、血漿、腫瘤和健康肝臟樣品以便執(zhí)行多柔比星和碘油的測定。將采集的腫瘤和健康肝臟樣品凍結(jié)(未固定)用于腫瘤的組織學(xué)分析。對于組織的組織學(xué)分析，將腫瘤和健康肝臟樣品冷凍(未固定)。在低溫恒溫器上切割7μm厚的連續(xù)切片，然后儲(chǔ)存在-80℃。組織的H&E或HE形態(tài)染色由使用蘇木精的核染色和使用1％伊紅的胞漿染色組成。He染色的組織直接在白光顯微鏡上進(jìn)行分析。碘油是通過銀浸漬方法的方式來證明，該銀浸漬方法通過將組織孵育在2.5％硝酸銀溶液中，隨后在蒸餾水中充分漂洗2次來執(zhí)行。然后，該組織用蘇木精復(fù)染并在白光顯微鏡下觀察。為了證明多柔比星，該組織在4％緩沖甲醛溶液中進(jìn)行后固定，在PBS中漂洗，然后使用封固劑將其封固，該封固劑保留熒光(延長抗褪色劑)且包含復(fù)染色細(xì)胞核的4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)。通過采用TRITC(四甲基羅達(dá)明)濾波器的熒光顯微鏡來觀測組織。采用計(jì)分法，對每個(gè)染色的載玻片上的碘油或多柔比星的量以及擴(kuò)散進(jìn)行了半定量評估。分值范圍如下：-量：分值從0(不存在)到5(存在擴(kuò)散)，-擴(kuò)散：分值從0(僅限于血管腔(對于碘油)，或不存在熒光(對于多柔比星))至3(在距離血管大約10排細(xì)胞和更遠(yuǎn)的位置擴(kuò)散)。最后，根據(jù)下列等級對多柔比星和碘油分布的相關(guān)性進(jìn)行了評價(jià)：-良好：在連續(xù)切片的相同組織結(jié)構(gòu)的水平上(除了只有碘油存在的少數(shù)稀有結(jié)構(gòu)外)檢測化合物。-部分或很少部分：只有少數(shù)結(jié)構(gòu)共同具有兩種化合物，其他結(jié)構(gòu)只包含碘油-無：在包含碘油的結(jié)構(gòu)中完全沒有多柔比星。腫瘤中多柔比星的測定是通過高效液相色譜法(或HPLC)進(jìn)行的，該色譜儀配備有熒光檢測器。在GentleMacsTM分離器中，通過在乙酸鹽緩沖液(pH3.5)中研磨，然后在研磨的肝臟材料(對照)中稀釋(以1/4的因子)，接著通過在具有40％乙腈的酸性介質(zhì)(乙酸銨，pH3.5)中沉淀來制備樣品。根據(jù)上述的條件通過反相HPLC對10μl提取物進(jìn)行分析。用5mM乙酸銨(pH3.5)/乙腈梯度進(jìn)行了歷經(jīng)34分鐘的分析。通過在兔肝臟中制備的校正曲線(100ng/g至20000ng/g)對樣品進(jìn)行測定。在GentleMacsTM分離器中，在水中研磨后，對照兔肝臟的校正曲線，通過X射線熒光測量總碘來對腫瘤中碘油進(jìn)行測定，該兔肝臟已被研磨并摻雜有碘油(500μgI/g至24000μgI/g)。3.2.2.所得的結(jié)果3.2.2.1.抗癌藥劑的血漿動(dòng)力學(xué)可以注意到，在圖2的曲線圖上代表作為時(shí)間的函數(shù)的平均濃度的以下幾點(diǎn)：對于4個(gè)組的動(dòng)物，血漿多柔比星的濃度峰值是在5分鐘。最高峰值是注射單獨(dú)的多柔比星(對照多柔比星)，平均值(±SD)為563±282μg/l。緊隨其后的是接受了接收E21產(chǎn)品的組(乳劑感官O/W-1/1比率，沒有三代顯250，沒有表面活性劑)其濃度峰值的平均值(±SD)為275±78μg/l，然后是接受了E1產(chǎn)品的組(乳劑感官O/W-1/3比率，有表面活性劑和1％致密化劑)，其平均值(±SD)為19±6μg/l。在15分鐘和45分鐘的采樣時(shí)間之間，接受了單獨(dú)的多柔比星和E21產(chǎn)品的組與接受了E21產(chǎn)品的組遵循相同的下降，具有更低的值。對于接受了E1產(chǎn)品的組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，外觀看起來似乎在降低但非常平坦(規(guī)模效應(yīng))的曲線，這是由于在血漿中發(fā)現(xiàn)非常低的濃度，即使是在注射后5分鐘時(shí)。對于接受了E1產(chǎn)品的組，多柔比星濃度比接受了E21產(chǎn)品的組要低得多，這在所有的采樣點(diǎn)都是如此，并且與單獨(dú)的多柔比星相比，這甚至更加顯著。血漿動(dòng)力學(xué)的分析表明，注射符合本發(fā)明的E1組合物后沒有血漿峰值(圖2)。多柔比星*(艾霉素注射劑輝瑞公司)與只接受了單獨(dú)的多柔比星的動(dòng)物相比，對接受了符合本發(fā)明的W/O穩(wěn)定的乳劑的VX2兔子觀察到血漿多柔比星水平降低98％以上。對于接受了不符合本發(fā)明的E21乳劑的VX2兔子，在其注射后5分鐘時(shí)觀察到血漿峰值。與只接受了單獨(dú)的多柔比星的動(dòng)物相比，對接受了不符合本發(fā)明的乳劑的兔子觀察到血漿多柔比星水平降低最多51％(圖2)。這些結(jié)果證實(shí)，可通過使用具有化學(xué)式I的表面活性劑(PGPR)改良W/O乳劑的感官和其穩(wěn)定性，使得能夠預(yù)想根據(jù)本發(fā)明所述的組合物的有效的臨床用途。3.2.2.抗癌藥劑的遞送在符合本發(fā)明的E1產(chǎn)品注射后輸送的量的測定顯示在腫瘤水平存在的多柔比星的量比不符合本發(fā)明的E21乳劑顯著更高(表1)。表1對于接受了符合本發(fā)明的W/O穩(wěn)定乳劑的VX2兔子，比接受了不符合本發(fā)明的乳劑的兔子觀察到更多的多柔比星的遞送。碘油的量也被確定了，并且相比不符合本發(fā)明的E21乳劑，使用符合本發(fā)明的E1乳劑在腫瘤中發(fā)現(xiàn)更高量的碘油(表2)。表2多柔比星和碘油濃度的測定使得能夠評估這兩個(gè)測量之間是否有相關(guān)性(圖3)。因此，在圖3中，對于接受了符合本發(fā)明的W/O穩(wěn)定乳劑(E1)的VX2兔子，在腫瘤中多柔比星和碘油濃度之間觀察到高的相關(guān)性(r2＝0.95)。對于接受了不符合本發(fā)明的E21乳劑的VX2兔子，沒有觀察到相關(guān)性。因此，對于接受了E1乳劑的VX2兔子，相比接受了不符合本發(fā)明的E21乳劑的兔子，觀察到多柔比星和碘油的更高的伴隨遞送。3.2.3.腫瘤與健康肝臟樣本的組織學(xué)評價(jià)切片的分析，特別是H&E染色的分析，能夠證明HCC腫瘤類型(多角形細(xì)胞嵌入厚的致密的帶狀物中)在所有種植了VX2腫瘤片段的動(dòng)物中存在，顯然與健康的組織劃定了界限。在細(xì)胞層面上，如它的作用機(jī)制所暗示，在細(xì)胞核或在核碎片觀察到多柔比星。對多柔比星的分布進(jìn)行了半定量評價(jià)(盲讀)，分值表明給予E1產(chǎn)品后(分值3.5±0.84)和給予E21產(chǎn)品后(分值1.75±0.96)腫瘤中多柔比星的量的差異。E1產(chǎn)品將更多的多柔比星遞送進(jìn)入腫瘤。關(guān)于碘油在對于注射的量進(jìn)行歸一化后，對腫瘤分布進(jìn)行了半定量評價(jià)，分值沒有顯示在兩種乳劑之間腫瘤中碘油的量的任何差異。因此，E1乳劑比不符合本發(fā)明的乳劑能夠遞送更多的抗癌藥劑至腫瘤。因而，可以清楚地表明，根據(jù)本發(fā)明所述的乳劑的組合物具有大的運(yùn)載抗癌藥劑能力，因?yàn)樗鼈冊试S這些藥劑保留在腫瘤中而不進(jìn)入血管腔隙。最后，這兩種化合物的組織相關(guān)性在E1組中的腫瘤水平上是良好的，但對于E21組是很小的，證實(shí)了通過測定獲得的結(jié)果。關(guān)于產(chǎn)品在健康肝臟中的毒性，在接受了E1和E21產(chǎn)品的動(dòng)物和對照動(dòng)物(沒有注射的VX2兔子)中，對于壞死、炎癥、血管質(zhì)或膽管纖維化/增殖的分值沒有差別。當(dāng)前第1頁1 2 3