一種注射用卡巴他賽白蛋白納米粒制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種卡巴他賽白蛋白納米粒制劑及其制備方法，該卡巴他賽白蛋白納米制劑包括卡巴他賽、白蛋白和藥劑學上必要的輔料，可通過高壓乳勻法、薄膜剪切法、溶劑揮發(fā)法等方法制備而成。本發(fā)明解決了現(xiàn)有白蛋白納米粒的載藥量和穩(wěn)定性問題；本發(fā)明采用低毒的有機溶劑，能避免卡巴他賽注射液使用吐溫-80（Tween-80）所產生的高過敏反應；本發(fā)明可以利用納米粒子對腫瘤的高通透性和滯留效應，能使更多藥物被動靶向而濃集于腫瘤組織，提高抗腫瘤效果；且制備方法簡單，適合工業(yè)化大生產。
【專利說明】-種注射用卡己他賽白蛋白納米粒制劑及其制備方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物制劑領域，涉及一種將難溶性藥物卡己他賽制備成可溶性注射用 白蛋白納米粒制劑及其制備方法。該卡己他賽白蛋白納米巧驚IJ包括卡己他賽、白蛋白和藥 劑學上必要的輔料，可通過高壓乳勻法、薄膜剪切法、溶劑揮發(fā)法等方法制備而成。本發(fā)明 可W利用納米粒子對腫瘤的高通透性和滯留效應，能使更多藥物被動祀向而濃集于腫瘤組 織，提高抗腫瘤效果；同時，還能避免卡己他賽注射液使用吐溫-80 (Tween-80)所產生的高 過敏反應。本制劑制備方法簡單，適合工業(yè)化大生產。

【背景技術】
[0002] 卡己他賽（C油azitaxel)為廣譜抗腫瘤藥物，主要通過加強微管蛋白聚合和抑制 微管解聚從而形成穩(wěn)定的非功能性微管束，具有抑制有絲分裂和分裂間期的腫瘤細胞功 能，起到抗腫瘤作用。該藥不僅對多西他賽敏感型腫瘤有效，而且對其他化療藥物（如多西 他賽）不敏感的腫瘤模型也表現(xiàn)出了活性。
[0003] 目前，上市的卡己他賽注射液是由法國賽諾菲-安萬特（Sanofi-Aventis)公司開 發(fā)，商品名為Jwtana。該注射液先將藥物溶解于吐溫-80中，臨床使用前，用13%己醇稀釋 至lOmg/ml，給藥前，進一步用5%葡萄糖或者生理鹽水稀釋至臨床使用濃度，稀釋后注射液 需在24小時內使用，否則將會產生沉淀。
[0004] 白蛋白是一類在血漿中大量存在、功能較多且分子量較小的蛋白。人血清白蛋白 是人體內最豐富的血漿蛋白，人血清白蛋白在體內具有多種作用，如：1)增加長鏈脂肪酸的 溶解度；2)作為一些金屬離子、膽紅素等的解毒蛋白；3)作為載體與多種藥物結合，如抗生 素、抗感染藥、苯二氮卓類等。
[0005] -種白蛋白納米粒是W白蛋白為載體的一類納米制劑。該種白蛋白納米制劑，不 含有有機溶劑，給藥后納米粒能快速分散，并在病變組織優(yōu)先攝取，從而提高抗癌效果；并 且腫瘤部位的EH?效應能夠促進納米粒在腫瘤組織的選擇性分布，可W增加藥效并減少系 統(tǒng)副作用；并且白蛋白無毒性、可生物降解和無免疫原性的特點使得包裹在白蛋白中的藥 物生物相容性好，在血液運輸過程中也可W減少血液相互作用和被清除的幾率，一定程度 上提高了給藥濃度，減少了毒副作用。
[0006] 上市的卡己他賽注射液雖然有其突出的抗腫瘤作用，但也存在一些尚未解決的問 題；（1)水溶性差導致需要使用表面活性劑助溶，而上市的注射液中使用的吐溫-80,易引 起過敏反應。（2)臨床上需要兩次稀釋，耗時費力。（3)所形成的制劑穩(wěn)定性差，一旦稀釋 必須在24小時內使用。（4)組織分布廣泛，對腫瘤部位無祀向性，一定程度上減弱了其抗腫 瘤效果，增加了全身性的毒副作用。
[0007] 目前，有關卡己他賽和白蛋白已有較多專利和論文公開。專利CN102068407A公 開了一種cabazitaxel注射液及其制備方法，該注射液為單一制劑，無需用專用溶劑預先 溶解配制，可直接稀釋后給藥。但該注射劑仍使用吐溫-80,過敏性問題沒有得到解決。專 利CN103768018A將卡己他賽制成脂質體，雖具有較好的腫瘤祀向作用，但現(xiàn)有技術仍然存 在不足，且該類制劑穩(wěn)定性差，載藥量低，制備方法繁瑣，尚無法進行工業(yè)化大生產。專利 CN102784109A將紫杉焼類制成白蛋白納米粒，但其使用磯脂作為穩(wěn)定劑，雖然磯脂也是生 物膜的組成部分，但其穩(wěn)定性差，易發(fā)生水解反應、輕基化、醜基化、飽和化等多種反應，它 作為穩(wěn)定劑會破壞制劑穩(wěn)定性。專利CN103520734 A公開了一種基于白蛋白的納米粒子其 制備方法及用途，但其利用白蛋白的電性與帶正電的大分子結合而制得納米粒。中國專利 CN102415999 A、CN103495179 A、CN103768024 A等公開了白蛋白用于制備納米粒，但其制 備過程中要么使用化學方法制得白蛋白納米粒，要么使用大量的有機溶劑，毒性較大。
[0008] 本發(fā)明針對上述缺陷，提供了一種卡己他賽白蛋白納米粒巧Ij劑，相比于 CN102068407A公開的C油azitaxe注射液，本制劑不使用吐溫-80,解決了使用吐溫-80 所可能產生的過敏反應；相比于專利CN103768018A公開的卡己他賽脂質體，本制劑穩(wěn)定性 好，載藥量高并且制備工藝簡單，可工業(yè)化生產；相比于專利CN102784109A公開的紫杉焼 類白蛋白納米粒，本法制備的卡己他賽白蛋白納米粒穩(wěn)定性大大提高等。所W，本法制得的 卡己他賽白蛋白納米粒具有毒性低、臨床上使用簡便、增加患者順應性而且祀向性高并且 穩(wěn)定性好的特點。本發(fā)明克服了 W上缺陷，并且尋找到一種穩(wěn)定劑，大大提高了制劑的穩(wěn)定 性。


【發(fā)明內容】

[0009] 本發(fā)明的目的是克服已上市的卡己他賽注射液的缺陷和不足，提供一種可溶性注 射用白蛋白納米粒制劑及其制備方法。
[0010] 本發(fā)明所述的可溶性注射用白蛋白納米制劑W油類為穩(wěn)定劑，難溶性藥物卡己他 賽與白蛋白結合后經油類分散并使其穩(wěn)定。本發(fā)明利用卡己他賽與白蛋白結合率高的特 性，在高速剪切條件下將有機相加入到水相中形成初乳，再用高壓均質機均質W獲得更小 的粒徑，最后旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑而制得卡己他賽白蛋白納米粒制劑。
[0011] 本發(fā)明提供了一種卡己他賽白蛋白納米粒制劑及其制備方法，該卡己他賽白蛋白 納米粒制劑包括卡己他賽、白蛋白及藥劑學上必要的輔料制成。其中，所述的卡己他賽、白 蛋白和藥劑學上必要的輔料所占的質量比分別為1?30 %，1?80 %，1%?20%。其中優(yōu) 選的為卡己他賽、白蛋白、和藥劑學上必要的輔料所占的質量比分別為5?20%，30?75%， 1〇/〇 ?5〇/〇。
[0012] 本發(fā)明中，所述的白蛋白選自人血清白蛋白、牛血清白蛋白、羊血清白蛋白、驢血 清白蛋白、馬血清白蛋白、兔血清白蛋白、豬血清白蛋白及其他種類白蛋白，優(yōu)選人血清白 蛋白或牛血清白蛋白。
[0013] 本發(fā)明中，所述的藥劑學上必要的輔料主要為油類如大豆油、精制麻油、精制茶 油、精制棉巧油、精制紅花油、橄攬油、挪子油、深海魚油及植物揮發(fā)油中的一種或幾種的混 合物。
[0014] 本發(fā)明采用乳化法制備注射用白蛋白納米粒，初乳已經具有合適的粒徑，但可選 擇性采用超聲或高壓均質或微射流工藝進一步控制粒徑。本發(fā)明的一個實施例1中，將處 方量的卡己他賽溶于適量二氯甲焼和無水己醇的混合溶劑或其他合適溶劑中，將油類溶于 上述混合溶劑中作為油相；將白蛋白和一些其他輔料溶于適量去離子水中作為水相，于室 溫或冰水浴中將油相逐滴滴入高速剪切的水相中，然后40 OC水浴旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑， 制得載卡己他賽的白蛋白納米粒。
[0015] 本發(fā)明的卡己他賽白蛋白納米粒制劑可作為藥物用于癌癥治療或用于制備治療 癌癥的藥物；其中，所述的癌癥包括小細胞肺癌、激素難治性前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、腦 膠質瘤、肝癌、膜腺導管癌、食管癌、膜腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、膀脫 癌、結腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、淋己瘤、頭頸部腫瘤和起源于膽囊、口腔、外周神經系 統(tǒng)、粘膜、腺體、血管、骨組織、淋己結、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤等。
[0016] 本發(fā)明的卡己他賽白蛋白納米粒制劑經藥效學試驗，結果表明，其治療效果優(yōu)于 市售制劑。
[0017] 本發(fā)明的卡己他賽白蛋白納米粒與現(xiàn)有技術相比，具有W下顯著優(yōu)點： 1避免了使用表面活性劑吐溫-80,提高了用藥安全性和患者順應性。
[0018] 2給藥前不用預處理，不用給予抗過敏藥且不用稀釋可直接使用，方便易行。
[0019] 3穩(wěn)定性大大提高，室溫下可放置一周。
[0020] 4其中發(fā)揮活性的是白蛋白本身，卡己他賽物理結合于白蛋白的親脂性空穴中，具 有生物降解性、毒性和免疫原性小的特點。
[002。 5包封率幾乎為100%，制備過程無損失，載藥量亦較高； 6可溶性注射用白蛋白納米粒制劑可利用腫瘤部位的EPR效應，增加藥物在腫瘤組織 的蓄積，利于發(fā)揮藥物的抗腫瘤效果，降低對其它組織的毒副作用。
[0022] 為了便于理解，W下將通過具體的附圖和實例對本發(fā)明的卡己他賽白蛋白納米粒 制劑進行詳細地描述。需要特別指出的是，具體實例和附圖僅是為了說明，顯然本領域的普 通技術人員可W根據(jù)本文說明，在本發(fā)明的范圍內對本發(fā)明做出各種各樣的修正和改變， 該些修正和改變也納入本發(fā)明的范圍內。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0023] 圖1為實施例4所得的載卡己他賽的白蛋白納米粒和空白納米粒的粒徑分布圖； A為空白納米粒的粒徑，B為載卡己他賽的白蛋白納米粒的粒徑。
[0024] 圖2為實施例5所得的常溫和4C放置一周前后的載卡己他賽白蛋白納米粒的粒 徑。A為剛制出的載卡己他賽白蛋白納米粒的粒徑，B為4C放置一周后的卡己他賽白蛋白 納米粒的粒徑，C為室溫放置一周后卡己他賽白蛋白納米粒的粒徑。
[00巧]圖3為實施例6中各制劑組給藥后人前列腺癌PC3瘤體體積與時間的關系。
[0026] 圖4為實施例7中各巧驚U組給藥后小鼠神經膠質瘤昆明鼠的生存期。
[0027] 圖5為實施例9中正常小鼠給予卡己他賽白蛋白納米粒和卡己他賽注射液后體重 隨時間的變化。

【具體實施方式】
[0028] 實施例1 : 取處方量的卡己他賽溶于二氯甲焼和無水己醇（9:1)的混合溶劑中，并加一定體積的 棉巧油，超聲使混合均勻作為有機相。取IOmg的人血清白蛋白溶于IOml的去離子水中作 為水相，于室溫或冰水浴中，在高速剪切下將有機相逐滴加入水相中，并繼續(xù)剪切一定時間 制成初乳，進一步用高壓均質機進行均質，然后4(TC水浴旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑即得卡己 他賽白蛋白納米粒。
[002引 實施例2 : 取處方量的卡己他賽溶于二氯甲焼和無水己醇（1:3)的混合溶劑中，并加一定體積的 大豆油，超聲使混合均勻作為有機相。取IOOmg的牛血白蛋白溶于IOml的去離子水中作為 水相，于室溫或冰水浴中，在高速剪切下將有機相逐滴加入水相中，并繼續(xù)剪切一定時間制 成初乳，進一步用高壓均質機進行均質，然后4(TC水浴旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑即得卡己他 賽白蛋白納米粒。
[0030] 實施例3 : 取處方量的卡己他賽溶于二氯甲焼和無水己醇（1:9)的混合溶劑中，并加一定體積的 麻油，超聲使混合均勻作為有機相。取IOOmg的卵清白蛋白溶于IOml的去離子水中作為水 相，于室溫或冰水浴中，在高速剪切下將有機相逐滴加入水相中，并繼續(xù)剪切一定時間制成 初乳，進一步用高壓均質機進行均質，然后4(TC水浴旋轉蒸發(fā)除去有機溶劑即得卡己他賽 白蛋白納米粒。
[00引]實施例4; 將所得卡己他賽白蛋白納米粒和不含卡己他賽的空白白蛋白納米粒進行比較，兩者的 粒徑沒有明顯差別，說明載藥過程不影響納米粒的性質，在一定程度上驗證了卡己他賽藥 物是通過物理作用結合在白蛋白的疏水空穴中。含卡己他賽和空白白蛋白納米粒的粒徑及 電位分布圖如附圖1，其中A為空白納米粒的粒徑，B為載卡己他賽白蛋白納米粒的粒徑。 [003引 實施例5 : 將實施例2所得的卡己他賽白蛋白納米粒分別于室溫和4C放置，隔天測其粒徑和電 位。所得的粒徑和電位數(shù)據(jù)如下： 表1穩(wěn)定性試驗粒徑和電位數(shù)據(jù)

【權利要求】
1. 一種卡巴他賽白蛋白納米粒制劑，其特征在于，由卡巴他賽、白蛋白和藥劑學上必要 的輔料制成，其中所述的難溶性卡巴他賽、白蛋白和藥劑學上必要的輔料所占的質量比分 別為 1 ?30 %，1 ?80 %，1% ?20%。
2. 其中優(yōu)選的為難溶性卡巴他賽、白蛋白和藥劑學上必要的輔料所占的質量比分別為 5 ?20%，30 ?75%，Ρ/Γ5%。
3. 按權利要求1所述的卡巴他賽白蛋白納米粒制劑，其特征在于，所述的白蛋白選自 人血清白蛋白、牛血清白蛋白、羊血清白蛋白、驢血清白蛋白、馬血清白蛋白、兔血清白蛋白 或豬血清白蛋白。
4. 其中優(yōu)選蛋白為人血清白蛋白和牛血清白蛋白。
5. 按權利要求1所述的藥劑學上必要的輔料主要為油類如大豆油、精制麻油、精制茶 油、精制棉籽油、精制紅花油、橄欖油、椰子油、深海魚油及植物揮發(fā)油中的至少一種。
6. 本發(fā)明的卡巴他賽白蛋白納米粒制劑可作為藥物用于癌癥治療或用于制備治療癌 癥的藥物；其中，所述的癌癥包括前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌、腦膠質瘤、肝癌、胰腺導管癌、 食管癌、胃癌、胰腺癌、甲狀腺癌、鼻咽癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、腎癌、前列腺癌、膀胱癌、 結腸癌、直腸癌、睪丸癌、皮膚癌、淋巴瘤、頭頸部腫瘤和起源于膽囊、口腔、外周神經系統(tǒng)、 粘膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、眼睛的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤等。
【文檔編號】A61P35/00GK104224750SQ201410472342
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月17日 優(yōu)先權日:2014年9月17日
【發(fā)明者】何勤, 高會樂, 邰曉偉 申請人:四川大學