Shps1在治療血管損傷后再狹窄中的功能和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種SHPS1在治療血管損傷后再狹窄中的功能和應(yīng)用，屬于基因的功能與應(yīng)用領(lǐng)域。本發(fā)明以SHPS1基因敲除小鼠和野生型小鼠為實驗對象，通過血管損傷模型，進(jìn)行了小鼠內(nèi)膜新生、血管壁細(xì)胞增殖水平和平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換的檢測。結(jié)果表明，SHPS1基因敲除可以明顯促進(jìn)內(nèi)膜新生和細(xì)胞增殖，促進(jìn)平滑肌細(xì)胞由收縮型向合成型轉(zhuǎn)換。這表明SHPS1在血管損傷后再狹窄中的功能，主要體現(xiàn)在SHPS1具有抑制內(nèi)膜新生和細(xì)胞增殖以及抑制平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換的功能。針對SHPS1的上述功能，SHPS1可用于制備預(yù)防、緩解和/治療血管損傷后再狹窄的藥物和動脈支架。
【專利說明】SHPS1在治療血管損傷后再狹窄中的功能和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于基因的功能與應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種SHPSl在治療血管損傷后再狹窄中的功能和應(yīng)用，具體是SHPSl在制備預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的藥物中應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]隨著飲食結(jié)構(gòu)的變化和人口的老齡化進(jìn)程，動脈粥樣硬化閉塞性病變呈現(xiàn)逐年增高的趨勢并成為我們國家主要的致死原因之一。目前對這類疾病尚無根治辦法，血管外科的治療手段包括球囊擴張、支架置入及動脈旁路等方式，但是血管重建后再狹窄嚴(yán)重影響了治療效果。已有研究表明，在損傷形成的過程中，新生內(nèi)膜及中膜組織過度增生以及同時伴隨的細(xì)胞外基質(zhì)形成，是造成血管重建后再狹窄的主要病理基礎(chǔ)。血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)表型轉(zhuǎn)化在新生內(nèi)膜形成過程中扮演著重要的角色。VSMCs有兩種不同的表型狀態(tài)，即分化/收縮型和去分化/合成型，兩種表型在一定條件下可以相互轉(zhuǎn)化。VSMCs由收縮型向合成型轉(zhuǎn)化時，增殖、遷移能力增強并分泌、合成大量的細(xì)胞外基質(zhì)，從而形成新生內(nèi)膜，進(jìn)而導(dǎo)致嚴(yán)重的血管增生性疾病的發(fā)生。如果能預(yù)防甚至逆轉(zhuǎn)VSMCs表型轉(zhuǎn)化，即可在早期遏制上述疾病的發(fā)生發(fā)展。
[0003]腫瘤壞死因子-a (tumor necrosis factor-α , TNF-α )是一個多功能細(xì)胞因子，它是細(xì)胞凋亡、炎癥和免疫的主要調(diào)節(jié)因子，它和細(xì)胞膜上的特異性的受體結(jié)合后發(fā)揮促進(jìn)細(xì)胞生長、分化、凋亡及誘發(fā)炎癥等重要作用。TNF-α信號失調(diào)與敗血癥、糖尿病、癌癥、骨質(zhì)疏松以及動脈粥樣硬化等密切相關(guān)【I】。TNF-α通過激活細(xì)胞內(nèi)炎癥相關(guān)的信號通路尤其是NF-K B通路而誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)各種炎癥標(biāo)志物，在血管損傷局部浸潤的炎性細(xì)胞，通過分泌TNF-α而誘導(dǎo)VSMC表型轉(zhuǎn)化和增殖。已有研究報道TNF-α自身及其誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白與VSMC增殖和遷移的過程密切相關(guān)【2，3】。
[0004]信號調(diào)節(jié)蛋白(signal regulatory proteins, SIRPs)家族屬于免疫球蛋白超家族成員，第一個被發(fā)現(xiàn)的SIRP家族成員是SHPS1，即含Src同源結(jié)構(gòu)域2的蛋白酪氨酸磷酸酶底物 I (Src homology 2 (SH2) domain-containing protein tyrosine phosphatasesubstratel),又稱為 SIRP a (signal regulatory protein a )、BIT、MFR 或 P84 神經(jīng)黏著分子【4，5】。SHPSl是一約115kDa的跨膜蛋白，是SIRP家族成員之一。SHPSl主要在心肌細(xì)胞、樹突細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、白細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞中表達(dá)，其次在成纖維細(xì)胞中也有表達(dá)，發(fā)揮負(fù)性調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的吞噬作用、肥大細(xì)胞的激活、樹突細(xì)胞的激活以及促進(jìn)凋亡的作用。近期研究發(fā)現(xiàn)SHPSl可負(fù)性調(diào)節(jié)NF- K B信號的激活來促進(jìn)TNF- α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮抑制細(xì)胞生長和增殖的作用【6，7】。由此推測，SHPSl作為腫瘤壞死因子受體TNFRl的調(diào)節(jié)蛋白，可能通過負(fù)性調(diào)節(jié)TNF- α的下游信號通路及相關(guān)目的基因的表達(dá)，影響血管VSMC的功能，從而在血管再狹窄中發(fā)揮作用。
[0005]【參考文獻(xiàn)】
1、Barzilay JII, Abraham L, Heckbert SR, et al.The relat1n of markersof inflammat1n to the development of glucose disorders in the elderly: theCard1vascular Health Study.Diabetes.2001， 50(10):2384-9.2、YoshidaS， Ono M， Shono T， et al.1nvolvement of interleukin-8, vascularendothelial growth factor, and basic fibroblast growth factor in tumor necrosisfactor alpha-dependent ang1genesis.Molecular and Cellular B1logy, 1997，17:4015-4023.3、LeeSJj Kim WJj Moon SK.TNF- a regulates vascular smooth muscle cellresponses in genetic hypertens1n.1nternat1nal Immunopharmacologyj 2009;9:837-843.4λ Kharitonenkovj Chen Z，Sures I，et al.A family of proteins that inhibitsignalling through tyrosine kinase receptors.Nature.1997;386(6621):181-6.5λComu Sj Weng Wj Olinsky S，et al.The murine P84 neural adhes1n moleculeis SHPS-1j a member of the phosphatase-binding protein family.J Neurosc1.1997; 17(22):8702-10.6、Zhiyong Liao, Mingjiang Wuj Xiaoli Chen.Novel funct1n of RECSl as anegative regulator of TNF—a—induced NF_kB activat1n.Mol Cell B1chem.2009.7、NeznanovN，Neznanova L，Kondratov RVj et al.Dominant Negative Formof Signa1-regulatory Protein-a (SIRPa /SHPS-1) Inhibits Tumor NecrosisFactor-mediated Apoptosis by Activat1n of NF-κ B.The Journal of B1logicalChemistry.2003; 278 (6):3809-15。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，本發(fā)明的目的在于確定SHPSl的表達(dá)和血管損傷后再狹窄的相互關(guān)系，提供一個用于預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的靶基因SHPSl的新用途。
[0007]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):
本發(fā)明以野生型C57BL/6小鼠與SHPSl基因敲除小鼠(SHPS1-K0小鼠)為實驗對象，通過頸動脈導(dǎo)絲損傷模型誘導(dǎo)獲得小鼠血管損傷模型(vascular injury, VI),進(jìn)行了血管損傷模型(VI)小鼠內(nèi)膜新生測定、血管壁細(xì)胞增殖水平的檢測和平滑肌細(xì)胞表型的檢測的研究，結(jié)果表明:與野生型C57BL/6小鼠對比，SHPSl基因敲除小鼠表現(xiàn)出內(nèi)膜新生及細(xì)胞增殖明顯大于WT小鼠；SHPS1基因敲除可以促進(jìn)細(xì)胞增殖核抗原(Proliferating CellNuclear Antigen,PCNA)和細(xì)胞周期蛋白(Cyclin Dl)的表達(dá),可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和內(nèi)膜增生；SHPSl基因敲除可以抑制平滑肌肌動蛋白(Smooth Muscle Actin，SMA)和平滑肌22 α (smooth muscle 22 alpha, SM22 α )的表達(dá)，可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞由收縮型向合成型的表型轉(zhuǎn)換，從而促進(jìn)內(nèi)膜增生。上述結(jié)果表明SHPSl基因敲除會促進(jìn)血管損傷后再狹窄的發(fā)生，SHPSl能夠抑制血管損傷后再狹窄的形成，為研究預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的新靶點和新策略提供了理論依據(jù)和臨床基礎(chǔ)。
[0008]本發(fā)明的研究證明了:在血管損傷后再狹窄模型中，SHPSl可以抑制內(nèi)膜新生和細(xì)胞增殖，抑制平滑肌細(xì)胞由收縮型向合成型轉(zhuǎn)換，特別是改善血管損傷后再狹窄的作用。
[0009]針對SHPSl的上述功能，提供一種SHPSl的應(yīng)用，主要體現(xiàn)為SHPSl在制備預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的藥物中應(yīng)用。
[0010]一種預(yù)防、緩解和/治療血管損傷后再狹的藥物，包含SHPS1。
[0011]一種預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的動脈支架，其包被有SHPS1。
[0012]在本發(fā)明中，所述血管損傷主要是指動脈血管損傷。
[0013]在本發(fā)明中，所述血管損傷是指動脈粥樣硬化引起的血管損傷，或者在治療動脈粥樣硬化時引起的血管損傷，例如通過球囊擴張或放入支架引起的血管損傷，或者移植后動脈病或肺動脈高壓引起的血管損傷。
[0014]在本發(fā)明中，所述動脈粥樣硬化既包括動脈粥樣硬化較早期階段的血管狹窄期，也包括動脈粥樣硬化嚴(yán)重時的血管梗塞期。
[0015]在本發(fā)明中，所述動脈支架是指用于支撐人體內(nèi)因病變而狹窄、閉塞的血管，恢復(fù)血液流通的管狀器件，采用金屬或高分子材料加工制成，可長期或暫時留于人體血管內(nèi)。在管腔球囊擴張成形的基礎(chǔ)上，在病變段置入支架以達(dá)到支撐狹窄閉塞段血管、減少血管彈性回縮及再塑形、保持管腔血流通暢的目的，既包括外周動脈支架，也包括冠狀動脈支架。
[0016]在本發(fā)明中，所述再狹窄是指在局部血管發(fā)生損傷時，所作出的導(dǎo)致血管管腔再狹窄的普遍性生物學(xué)反應(yīng)。這里主要指醫(yī)源性損傷引起的血管再狹窄，損傷過程主要由動脈重塑和內(nèi)皮增生組成。
[0017]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及效果:
(I)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了 SHPSl基因的新功能，即SHPSl能夠抑制血管損傷后再狹窄的作用。
[0018](2)基于SHPSl在抑制血管損傷后再狹窄的功能，為研制血管損傷后再狹窄的藥物提供基礎(chǔ)，可用于制備預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再窄中的藥物。
[0019](3) SHPSl可用于制備預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的動脈支架。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]圖1是WT和SHPSl-KO小鼠術(shù)后28天的HE染色及內(nèi)膜面積結(jié)果統(tǒng)計柱狀圖；其中，A:HE染色圖，B:內(nèi)膜面積統(tǒng)計柱狀圖(*:p < 0.05 vs WT VI組)。
[0021]圖2是WT和SHPSl-KO小鼠術(shù)后28天血管壁細(xì)胞增殖水平標(biāo)志物PCNA、CyclinDl表達(dá)的免疫熒光染色及結(jié)果統(tǒng)計柱狀圖；其中，A:免疫熒光染色，B:結(jié)果統(tǒng)計柱狀圖(*:p< 0.05 vs WT VI 組)。
[0022]圖3是WT和SHPSl-KO小鼠術(shù)后28天平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換標(biāo)志物SMA、SM22 α表達(dá)的免疫熒光染色及結(jié)果統(tǒng)計柱狀圖；其中，A:免疫熒光染色，B:柱狀圖(*:ρ < 0.05 vsWT VI 組)。

【具體實施方式】
[0023]下面結(jié)合具體實施例和附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的描述。應(yīng)理解，下面的實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。
[0024]實驗用動物及飼養(yǎng)實驗動物:選用8-10周齡、體重在24-27g，雄性，C57BL/6小鼠(WT小鼠，購自北京華阜康生物科技有限公司)和SHPSl基因敲除小鼠(SHPS1-K0，購自日本RIKEN公司，貨號:RBRCOI544)。
[0025]飼養(yǎng)環(huán)境:所有實驗小鼠均飼養(yǎng)在武漢大學(xué)心血管病研究所SPF級實驗動物中心。SPF級大小鼠飼料購自北京華阜康生物科技有限公司，飼養(yǎng)條件:室溫在22-24°C之間，濕度在40-70%之間，明暗交替照明時間為12h，自由飲水?dāng)z食。
[0026]實施例1小鼠血管損傷模型(VI)獲得
1.實驗動物分組:使用8-10周齡，體重24-27g的WT和SHPSl-KO小鼠，共分為2組:WT血管損傷組，SHPSl-KO血管損傷組，每組各20只小鼠。分別在手術(shù)后28天處死小鼠，取損傷節(jié)段血管進(jìn)行分析。
[0027]2.小鼠血管損傷模型操作流程:
I)用電子天平于動態(tài)模式下準(zhǔn)確稱取小鼠體重(g)，用雙蒸水準(zhǔn)確配置3%戊巴比妥鈉溶液，輕輕搖動使其充分溶解，采用80mg/kg體重劑量，計算所需戊巴比妥鈉溶液體積后用ImL注射器準(zhǔn)確抽取相應(yīng)體積溶液，行腹腔注射麻醉小鼠，待小鼠充分麻醉倒(約3min)后，8%硫化鈉頸部脫毛。
[0028]2)分離頸內(nèi)和頸外動脈。
[0029]3)在頸內(nèi)動脈和頸外動脈分叉處用8-0線結(jié)扎頸外動脈，同時用血管夾(WPI，501784-G)暫時性阻斷頸內(nèi)動脈及頸總動脈供血。
[0030]4)用顯微剪(WPI，501839)在頸外動脈結(jié)扎線的上方橫向剪一個小口。經(jīng)此血管切口插入直徑 0.015 英寸的導(dǎo)絲(N0.C-SF-15-15, Cook, Bloomington, Indiana),旋轉(zhuǎn)導(dǎo)絲進(jìn)退5-6次。
[0031]5)在切口近心端結(jié)扎頸外動脈，松開頸內(nèi)及頸總動脈置留的血管夾，剪斷線頭，清理術(shù)野，縫合頸部切口。
[0032]實施例2血管損傷模型(VI)小鼠內(nèi)膜新生測定
1.小鼠取材
I)麻醉小鼠，剪破心臟放血。
[0033]2)從頸動脈近分叉處剪下頸動脈，取0.5-0.6cm長，保留頸外動脈線結(jié)。
[0034]3)將頸動脈放入PBS中，用顯微鑷輕柔排干管腔內(nèi)的殘血。
[0035]4)將血管放入裝有ImL 4%多聚甲醛的1.5mL EP管中固定。
[0036]2.病理學(xué)檢測
2.1制備石臘標(biāo)本切片
由實驗室專業(yè)病理工作人員制備石蠟標(biāo)本切片，主要操作程序包括:4%多聚甲醛中隔夜固定后，將血管用濾紙小心包好，放入包埋框一流水沖洗一脫水一透明一浸蠟一包埋一切片(3μπι)—攤片一晾干或烘烤后備用。
[0037]2.2蘇木精-伊紅(HE)染色
主要步驟為:55 °C烘烤30min — 二甲苯5min，3次一100%酒精I(xiàn)min — 95%酒精I(xiàn)min — 70%酒精I(xiàn)min —雙蒸水Imin —蘇木素溶液(珠海貝索，BA-4021) 5min —水洗Imin — 1%鹽酸酒精(取3mL濃鹽酸與297mL 70%酒精充分混合均勻)l_3s —水洗Imin — Scott液(碳酸氫鈉0.35g,硫酸鎂2g,蒸懼水100mL)lmin —水洗Imin —伊紅溶液(珠海貝索，BA-4024)3-5min —蒸餾水洗去浮色一70%酒精I(xiàn)s — 95%酒精I(xiàn)s — 100%酒精30s，3次一二甲苯2min，3次一趁二甲苯未干立即封片一通風(fēng)櫥內(nèi)吹干，顯微鏡拍照。
[0038]以血管內(nèi)彈力纖維和外彈力纖維為界，內(nèi)彈力板以內(nèi)為血管內(nèi)膜，外彈力板以外為血管外膜，內(nèi)外彈力板之間為血管中膜。用Image-Pro Plus 6.0軟件分別圈各血管管腔面積。
[0039]內(nèi)膜面積大小的計算參照公式如下:
新生內(nèi)膜面積=內(nèi)彈力板面積-管腔面積；
中膜面積=外彈力板面積_內(nèi)彈力板面積。
[0040]小鼠HE染色后的血管內(nèi)膜新生的結(jié)果如圖1。正常的血管壁結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，血管內(nèi)膜為單層內(nèi)皮細(xì)胞，結(jié)構(gòu)完整，中膜平滑肌細(xì)胞排列整齊。通過HE染色觀察到，血管損傷組(VI組)血管壁結(jié)構(gòu)不完整，血管內(nèi)皮細(xì)胞缺失，新生內(nèi)膜增生明顯，并伴有大量炎細(xì)胞浸潤；SHPS1-K0組在術(shù)后28天新生內(nèi)膜面積明顯比WT小鼠要增大。同樣，內(nèi)膜面積/中膜面積的比值在VI術(shù)后SHPSl-KO組要高于WT組。這說明SHPSl基因的缺失可以促進(jìn)血管損傷后引起的內(nèi)膜新生。
[0041]實施例3血管壁細(xì)胞增殖水平的檢測
免疫突光染色檢測細(xì)胞增殖核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen, PCNA)、細(xì)胞周期蛋白(Cyclin Dl)的表達(dá)。所需一抗信息:PCNA (#2586; 1:100; mouse;Cell Signaling Technology), cyclin Dl (#2978; 1:25; rabbit; Cell SignalingTechnology);所需二抗信息:Alexa Fluor 568-conjugated goat ant1-rabbit IgG(A11011; Invitrogen, Carlsbad, CA), Alexa Fluor 568-conjugated goat ant1-mouseIgG (A11004; Invitrogen, Carlsbad, 150 d, CA)。
[0042]主要步驟為:
I)烤片:將石蠟切片置于55°C烤箱中30min以上。
[0043]2)脫蠟:二甲苯 5minX3。
[0044]3)水合:100% 乙醇 5minX2 ；95% 乙醇 5min ；70% 乙醇 5min ；ddH20 浸洗 5minX2。
[0045]4)檸檬酸鹽組織抗原修復(fù)(高壓修復(fù)):取一定量的pH6.0檸檬酸鹽抗原修復(fù)工作液(購自福州邁新生物科技有限公司，貨號MVS-0100)于修復(fù)盒中，修復(fù)工作液的量必須能足夠浸沒整張切片，將修復(fù)盒放入已加入適量自來水的高壓鍋中，大火加熱至沸騰，將脫蠟水合后的組織切片置于耐高溫染色架上，再將染色架緩慢放入修復(fù)盒中，蓋上鍋蓋，扣上壓力閥，繼續(xù)加熱至噴氣，開始計時5min后，壓力鍋斷開電源，去閥開蓋，取出修復(fù)盒；室溫放置20min自然冷卻后取出切片。
[0046]5 ) ddH20 漂洗 5min X 2 次，PBS 漂洗 5min X 2 次。
[0047]6)組化筆劃圈，滴加10%羊血清(GTX27481，GeneTex)封閉，于濕盒中37°C封閉60mino
[0048]7)棄封閉液,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，4°C孵育過夜,37°C復(fù)溫30min,棄去一抗，PBS 洗 1minX 3 次。
[0049]8)滴加二抗，于濕盒中37°C孵育60min，棄去二抗，PBS浸洗5minX3次。
[0050]9) SlowFade Gold antifade reagent with DAPI (S36939, Invitrogen)封片。
[0051]10)熒光鏡下觀察，拍照。若需保存，于暗濕盒中4°C保存。
[0052]熒光統(tǒng)計方法:PCNA免疫熒光染色統(tǒng)計采用IPP軟件計數(shù)，PCNA陽性細(xì)胞百分比=PCNA陽性細(xì)胞個數(shù)/ (內(nèi)膜+中膜)的總DAPI個數(shù)*100% ；CyclinDl免疫熒光染色統(tǒng)計采用IPP軟件直接測陽性吸光度。
[0053]免疫熒光法觀察平滑肌細(xì)胞增殖標(biāo)志物PCNA、CyclinDl在WT和SHPSl-KO小鼠血管損傷后的表達(dá)變化，結(jié)果見圖2。PCNAXyclinDl在血管組織中有表達(dá)，SHPSl-KO小鼠在術(shù)后28天PCNA的陽性細(xì)胞個數(shù)及CyclinDl的熒光強度均要增大于同組的WT小鼠，表明SHPSl基因敲除可以促進(jìn)PCNA、CyclinDl的表達(dá)，可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和血管內(nèi)膜新生。
[0054]實施例4平滑肌細(xì)胞表型的檢測
免疫熒光染色檢測平滑肌細(xì)胞分化標(biāo)志物:平滑肌肌動蛋白(Smooth Muscle Actin,SMA)、平滑肌22 α (smooth muscle 22 alpha，SM22 α )的表達(dá)。所需一抗信息:SMA(ab5694;1:100; rabbit; Abeam) and SM22 a (abl4106; 1:100; rabbit; Abeam);所需二抗信息:Alexa Fluor 488-conjugated goat ant1-rabbit IgG(A11008; Invitrogen, Carlsbad,CA)。
[0055]主要步驟參照實施例3。
[0056]熒光統(tǒng)計方法:采用IPP軟件直接測陽性吸光度。
[0057]在正常生理狀態(tài)下，血管平滑肌細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)，主要表現(xiàn)為收縮型；血管損傷后，血管平滑肌細(xì)胞由中膜向內(nèi)膜遷移，平滑肌細(xì)胞的增殖凋亡失平衡，表型由收縮型向合成型轉(zhuǎn)變，血管壁不適重塑，從而引起內(nèi)膜增生。免疫熒光觀察SMA、SM22 α在WT和SHPS1-K0小鼠血管損傷后的表達(dá)變化，結(jié)果見圖3。SMA、SM22a在血管組織中有表達(dá)，SHPS1-K0小鼠在術(shù)后28天SMA、SM22 α的熒光強度均要低于同組的WT小鼠，表明SHPSl基因敲除可以抑制SMA、SM22a的表達(dá)，可促進(jìn)平滑肌細(xì)胞由收縮型向合成型的表型轉(zhuǎn)換，從而促進(jìn)內(nèi)膜增生。
[0058]以上述實施例結(jié)果顯示，野生型小鼠和SHPS1-K0小鼠在血管損傷模型(VI)的誘導(dǎo)下均發(fā)生血管損傷后再狹窄。SHPSl基因敲除小鼠的內(nèi)膜新生、細(xì)胞增殖水平以及平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換均比野生型小鼠要顯著。這些結(jié)果表明，SHPSl可以改善血管損傷誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞的增殖、表型轉(zhuǎn)化和血管新生內(nèi)膜形成。
[0059]上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.SHPSl在制備預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的藥物中的應(yīng)用。
2.一種預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的藥物，其特征在于:包含SHPS1。
3.一種預(yù)防、緩解和/或治療血管損傷后再狹窄的動脈支架，其特征在于:包被有SHPSl。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用、權(quán)利要求2所述的藥物或權(quán)利要求3所述的動脈支架，其特征在于:所述的血管損傷為動脈粥樣硬化、動脈粥樣硬化介入治療、移植后動脈病或肺動脈高壓引起的血管損傷。
【文檔編號】A61L31/16GK104174010SQ201410410887
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年8月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月20日
【發(fā)明者】李紅良, 王朗, 程文林, 張書敏, 王丕曉 申請人:武漢大學(xué)