一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，是由以下原料藥制成的：淫羊藿25～35g，杜仲10～20g，丹參25～35g，川芎10～20g，白芍10～20g，茯苓10～15g，牛膝10～15g，鹿角膠8～12g，香附6～12g，甘草6～12g。制備方法為：取除鹿角膠外的各原料藥，混合，加入水，煎煮，過濾，向濾液中加入烊化的鹿角膠，然后加入乙醇，靜置，過濾，干燥，加入糊精進行干法制粒，即得。本發(fā)明具有以下特點：(1)溫補與活血并用，標本兼治，正本清源；(2)溫補藥與行血、斂陰藥合用，使全方溫而不燥，剛?cè)嵯酀?，祛瘀而不傷正，補虛而不雍滯，以達溫養(yǎng)、通絡(luò)之效。(3)組方嚴謹，方義明確，搭配合理，通補并用，氣血兼顧。
【專利說明】一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]中醫(yī)典籍對股骨頭壞死的記載不多，但其對骨病的總體把握至今仍具有重大的指導意義。中醫(yī)學認為:“腎藏精”、“腎主骨生髓”?！夺t(yī)精經(jīng)義》曰:“腎藏精，精生髓，髓生骨。髓者，腎精所生，精足則髓足，髓在骨內(nèi)，髓足則骨強”。腎精的充足是骨骼的生長發(fā)育及其生理功能的基礎(chǔ)。若先天稟賦不足，腎精虧虛，腎氣不足，則骨失所養(yǎng)。故有古代醫(yī)家將股骨頭壞死歸為“骨蝕”。根據(jù)髖關(guān)節(jié)疼痛、活動受限等臨床表現(xiàn)，也有醫(yī)家將之歸為“骨痹”?！端貑?痹論》曰:“風寒濕三氣雜至，合而為痹也……以冬遇此者為骨痹?！栽谟诠莿t重。骨痹不己，復感于邪，內(nèi)舍于腎”。指出外邪的侵入，阻滯經(jīng)絡(luò)，氣血不暢為發(fā)病的外因。顧松園《醫(yī)鏡》曰:“邪郁病久，風變?yōu)榛?，寒變?yōu)闊幔瑵褡優(yōu)樘?。”骨痹患者，病久不愈，風寒濕則化為痰熱，致骨枯而髓弱。然而“骨痹”易將股骨頭壞死與髖骨性關(guān)節(jié)炎相混淆。亦有將之歸于“骨萎”。《素問?痿論篇》云:“腎氣熱則腰脊不舉，骨枯而髓減發(fā)為骨痿?！I者，水藏也，今水不勝火，則骨枯而髓虛故足不任身發(fā)為骨痿”。指出骨痿的發(fā)病原因為陰津枯竭，陽氣過盛，傷于腎，腎不生精則骨髓失養(yǎng)，也強調(diào)了腎的生理功能在骨痿發(fā)病中的重要性。
[0003]當代中醫(yī)學者對本病進行了廣泛、深入的研究，對SANHl有了更全面更系統(tǒng)的認識。鄧沂等指出“骨痹”、“骨痿”、“骨蝕”是股骨頭壞死的不同發(fā)展階段，不同病理改變，不同證候表現(xiàn)的相應(yīng)病名。即早期以瘀血、氣血閉阻為基本病機，可稱為“骨痹”;晚期股骨頭失去正常形態(tài)、局部缺損，可稱為“骨蝕”;早期與晚期之間髓減骨枯而筋骨痿軟，則可稱為“骨痿”。內(nèi)因為氣血不足、肝腎虛衰，外因為感受外邪毒素、郁而化熱致濕熱蘊結(jié)等，病機為氣血不足，熱劫血瘀、氣血閉阻而筋骨受損、骨骼失養(yǎng)；或肝腎虧虛，筋骨失養(yǎng)，以血瘀、肝腎虧虛為關(guān)鍵。糖皮質(zhì)激素為辛熱燥烈之品，大劑量或久用可耗傷陰精，陰虧血滯，經(jīng)脈不通，而腎精虧虛，骨髓失充，發(fā)為本病。
[0004]因當代各醫(yī)家辨證分型尚不統(tǒng)一，治則治法各有側(cè)重，治療激素性股骨頭壞死的方藥眾多。許多學者通過科學實驗進行了大量的中藥方劑的研究，探索其作用機制。張弛通過對活血通絡(luò)方(雞內(nèi)金、丹參、紅花、當歸、川芎、黃芪、白芍、桑寄生、懷牛膝等)的實驗研究，證實活血通絡(luò)方能夠促進PGI2合成，抑制TXA2的產(chǎn)生，緩解激素引起的血管內(nèi)皮損害，保護血管內(nèi)皮，抑制血管內(nèi)凝血，改善壞死股骨頭局部的血供，阻斷導致股骨頭壞死的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，改善了激素性股骨頭壞死的血瘀狀態(tài)。楊俊興等觀察通絡(luò)生骨膠囊對實驗性激素性股骨頭壞死模型大鼠 血清骨鈣素(BGP)、降鈣素(CT)水平及骨密度的影響。研究結(jié)果顯示通絡(luò)生骨膠囊可升高血清BGP、CT水平及骨密度，認為通絡(luò)生骨膠囊對股骨頭壞死的治療作用與其促進骨鈣素、降鈣素合成，改善骨密度有關(guān)。齊振熙通過實驗觀察桃紅四物湯(桃仁、紅花、熟地、當歸、白芍、川芎)對激素性股骨頭壞死堿性成纖維細胞生長因子表達的影響。研究表明桃紅四物湯能促進激素性股骨頭缺血壞死模型兔體內(nèi)堿性成纖維細胞生長因子的表達，明顯減少股骨頭局部空骨陷窩數(shù)，促進壞死股骨頭的修復。崔省珍對處于臨床觀察階段的中成藥仙靈骨葆膠囊的研究證實:該藥具有提高體內(nèi)鈣、磷水平，提高骨密度，降低血液粘度，擴張毛細血管，改善微循環(huán)及增加雌激素樣作用，還具有抗骨吸收、促進骨形成等藥理作用。張弛等用家兔造模對活血通絡(luò)方的進一步研究表明，活血通絡(luò)方可明顯改善激素性股骨頭壞死的血液流變學狀態(tài)，其防治激素性股骨頭壞死的機理可能是該方具有改善血液流變性和骨微循環(huán)，重建股骨頭血液供應(yīng)，促進骨形成等作用。
[0005]綜合上述眾多醫(yī)家對激素性股骨頭壞死的認識、不同治法及實驗研究成果，本申請的發(fā)明人認為:激素性股骨頭壞死的發(fā)生以正虛為本，邪實為標。先天不足，或后天失養(yǎng)造成肝腎虧虛，而致生骨充髓能力降低，出現(xiàn)髓枯骨痿，成為激素性股骨頭壞死的內(nèi)在根源；在外邪(激素)襲入的致病因素作用下，造成經(jīng)脈氣血阻塞不暢，髓海瘀滯，髓死骨枯。另加肝腎虧虛，腎精匱乏，脾胃失養(yǎng)，推動血行能力降低，致血行遲緩瘀滯，股骨頭失去氣血溫煦、濡養(yǎng)而壞死。虛、瘀兩大病機在激素性股骨頭壞死的發(fā)病中貫穿始終。由此確立了補腎益精、活血祛瘀的治則治法。其中補虛重在補腎，補腎又重在溫腎壯陽，并提供了一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑——補腎活血膠囊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑(補腎活血膠囊)。本發(fā)明的補腎活血膠囊，具有以下功效:活血化瘀，補腎壯骨?；钛c補腎兼顧，標本同治。與發(fā)明人對激素性股骨頭壞死的病機認識及治則治法相一致，且大量的臨床結(jié)果顯示補腎活血膠囊對激素性股骨頭壞死早期的病例療效顯著，具有堅實的臨床實踐基礎(chǔ)。探討研究其主要作用機制為中藥臨床治療激素性股骨頭壞死提供理論依據(jù)具有重要的意義。
[0007]本發(fā)明是通 過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
[0008]一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，是由以下原料藥制成的:淫羊藿25~35g，杜仲10~20g，丹參25~35g，川芎10~20g，白芍10~20g，茯苓10~15g，牛膝10~15g,鹿角膠8~12g,香附6~12g,甘草6~12g。
[0009]優(yōu)選的，是由以下原料藥制成的:淫羊藿30g,杜仲15g,丹參30g,川彎15g,白茍15g，茯苓12g，牛膝12g，鹿角膠10g，香附9g，甘草9g。
[0010]所述治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑的制備方法為:取除鹿角膠外的各原料藥，混合，加入12~16倍量的水(重量倍數(shù))，煎煮130~140min，過濾除去濾渣，向濾液中加入烊化的鹿角膠，濃縮濾液至相對密度為1.1，然后加入濃度為80~100%的乙醇(體積百分數(shù))，調(diào)整乙醇含量為70% (體積百分數(shù))，靜置10~15h，過濾，濾液減壓回收乙醇并濃縮至稠膏，60°C減壓干燥，加入10%的糊精(質(zhì)量百分數(shù))進行干法制粒，即得，裝入膠囊制成膠囊劑。
[0011]本發(fā)明的治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，配方中，鹿角膠溫腎壯陽，益精補血，補虛兼祛瘀，針對肝腎虧虛之本，為君藥。丹參活血祛瘀，主治氣滯血瘀之標，與川芎、杜仲、淫羊藿協(xié)助君藥發(fā)揮活血通絡(luò)、補益肝腎之功效，合為臣藥。香附、白芍、茯苓具有散瘀消腫、緩急止痛之功，可改善局部疼痛、活動受限等癥狀，共為佐藥。牛膝活血通經(jīng)，引火下行，助藥效抵達患處，為本方中的使藥。甘草能清熱解毒，潤肺止咳，調(diào)和諸藥性。[0012]本發(fā)明的治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，各原料藥簡介如下:
[0013]鹿角膠:甘、咸，溫。歸腎、肝經(jīng)。鹿角膠成分很多，有氨基酸類成分，包括甘氨酸、谷氨酸、精氨酸等。糖類化合物，有蛋白多糖等以及堿基成分尿嘧啶尿苷等。生物胺類精瞇、腐胺和精胺。還有留體化合物，激素和激素樣物質(zhì)。功效:溫補肝腎，益精養(yǎng)血。用于肝腎不足而致的腰膝酸冷，陽痿遺精，虛勞羸瘦，崩漏下血，便血尿血，陰疽腫痛。鹿角膠具有抗氧化、延緩衰老的作用。研究表明鹿茸精能使小鼠肝、腦組織中脂褐質(zhì)和丙二醛(MDA)的含量明顯降低，超氧歧化酶(SOD)活性顯著增強，其對羥基自由基有明顯的抑制作用。防治骨質(zhì)疏松作用，研究發(fā)現(xiàn)鹿角膠及鹿茸對骨質(zhì)疏松癥能起到拮抗的效果。此外，總鹿茸多肽外涂抹于大鼠皮膚損傷組織，能加速創(chuàng)傷的修復愈合。王志超等發(fā)現(xiàn)應(yīng)用鹿角膠丸后，可增加骨密度，調(diào)節(jié)AKP、BGP、H0P含量，為鹿角膠丸治療骨質(zhì)疏松提供實驗依據(jù)。對心血管系統(tǒng)的作用，鹿茸可以減輕心肌細胞損傷，增加心肌的血液供應(yīng)，擴張冠脈血管及保護心肌細胞膜來恢復心肌的功能?？梢砸欢ǔ潭鹊谋Ｗo缺血心肌的繼發(fā)性損傷。對神經(jīng)系統(tǒng)作用，在鹿鸞多肽對Bax、BCl_2、caspase-3的影響中發(fā)現(xiàn)，鹿鸞多肽能對福射誘導脊髓神經(jīng)細胞凋亡起到抑制作用。
[0014]丹參:苦，微寒。歸心、肝經(jīng)。功效:祛瘀止痛，活血通經(jīng)。用于血瘀證及風濕痹痛。丹參的有效成分主要分為脂溶性和水溶性兩類。脂溶性成分包括多種菲醌衍生物，如丹參酮、隱丹參酮、二氫丹參酮、異丹參酮、異隱丹參酮、丹參新酮等。水溶性成分有原兒茶醛及丹參素等。脂溶性的丹參酮類以改善血液循環(huán)、抗菌和抗炎為主，而水溶性的丹酚類則以抗氧化、抗凝血、抗血栓形成、調(diào)血脂和細胞保護作用明顯。藥理學研究顯示丹參具有調(diào)節(jié)血液流變學的作用，能夠擴張外周血管，改善微循環(huán)；因丹參所含的丹參酮、丹參素等物質(zhì)能強有力地使纖維蛋白裂解，促進纖維蛋白原溶解，使毛細血管網(wǎng)開放數(shù)目增多，調(diào)節(jié)微血管口徑[9]。丹參對血小板聚集有抑制作用，可降低血液粘度，加速紅細胞電泳，從而促進血液的流動性，對瘀血狀態(tài)起到清除作用[9]。另外，丹參具有清除氧自由基，防治脂質(zhì)過氧化的作用。可減輕自由基對線粒體膜流動的影響，保護線粒體。還具有抗炎、鎮(zhèn)痛、降血脂，增強細胞對缺氧的耐受力，提高超氧化物歧化酶的活性，減輕缺血再灌注損傷的作用。
[0015]杜仲:甘，溫。歸肝、腎經(jīng)。功效:補肝腎，強筋骨，安胎。用于肝腎不足，腰膝酸痛，筋骨無力，頭暈?zāi)垦?，妊娠漏血，胎動不安。目前從杜仲皮中分離得到的化合物主要是木脂素類、環(huán)烯醚萜類和苯丙素類及黃酮和多糖類。其中木脂素類雙環(huán)氧木質(zhì)素類、單環(huán)氧木質(zhì)素類、新木質(zhì)素類、和倍半木質(zhì)素等類型。
[0016]杜仲主要有降壓作用、預防肌肉骨骼老化、抗骨質(zhì)疏松、抗癌防癌、保肝利膽及利尿作用，并且其可以抗氧化、抗衰老。
[0017]淫羊藿:甘、辛，溫。歸肝、腎經(jīng)。功效:溫腎壯陽，強筋骨，祛風濕。用于肝腎不足的筋骨痹痛，風濕拘攣等證。本品主要含淫羊藿苷等黃酮苷以及留醇、多糖、生物堿、揮發(fā)油、維生素E等成分。其中多糖和黃酮類成分為淫羊藿的主要有效成分。其中黃酮類有朝藿素、朝藿苷、朝鮮淫羊藿苷、朝藿菲苷A、朝藿酮A、異槲皮素、Icariin — 3 — O — α —rhamnoside、金絲桃苷、箭葉淫羊藿苷等成分。研究證明淫羊藿水煎液可顯著提高小鼠DNA的合成率并能促進大鼠的骨生長；還能預防醋酸潑尼松所致的骨質(zhì)疏松；淫羊藿煎劑能降低實驗性高脂血癥家兔的β_脂蛋白及膽固醇水平；淫羊藿煎劑可明顯降低ADP誘導的血小板聚集率并可促進血小板解聚。[0018]香附:辛、微苦、微甘，平。歸肝、脾、三焦經(jīng)。功效:疏肝解郁，理氣寬中，調(diào)經(jīng)止痛。用于肝郁氣滯，胸脅脹痛，疝氣疼痛，脾胃氣滯，脘腹痞滿，脹滿疼痛，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)。香附中主要含有揮發(fā)油類成分，此外還有糖類、生物堿。香附主要有大黃素甲醚、十六烷酸、谷留醇、豆留醇、Catenarin、胡蘿卜苷。以及山柰酚，木犀草素，槲皮素，西黃松黃酮，穗花杉雙黃酮，去甲基銀杏雙黃酮，銀杏雙黃酮，異銀杏雙黃酮，金松雙黃酮等黃酮類成分。香附有中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，香附醇提物有安定作用，使小鼠自發(fā)活動減少，遲緩，并可消除大鼠的條件性回避反射，對去水嗎啡引起的嘔吐有保護作用。對心血管系統(tǒng)的作用，香附水提醇沉物對貓和兔等都具有強心和減慢心率作用。對消化系統(tǒng)的作用，香附水煎液十二指腸給藥對正常大鼠有較強利膽作用，可促進膽汁分泌，提高膽汁流量，同時對肝損傷大鼠的肝細胞有保護功能。
[0019]白芍:苦、酸、甘，微寒。歸肝、脾經(jīng)。功效:養(yǎng)肝陰，調(diào)肝氣，平肝陽，緩急止痛。《本草備要》論述白芍曰:“補血，瀉肝，益脾，斂肝陰?！卑咨种兄饕炙庈铡咨周?、沒食子酰芍藥苷、6-0-沒食子?；?D-吡喃葡萄糖、鄰苯三酚、沒食子酸、沒食子酸甲酯、沒食子酸乙酯、兒茶素等。白芍甙具有降低紅細胞粘度，抑制血小板聚集，降低紅細胞壓積及抗凝血酶的作用。白芍總甙可抑制人紅細胞滲透性溶血，能顯著抑制H2O2引起的溶血反應(yīng)。
[0020]茯苓:甘、淡，平。歸心、脾、腎經(jīng)。功效:利水滲濕，健脾安神。茯苓中主要含有茯苓多糖和三萜類化合物，各種氨基酸和微量元素、蛋白質(zhì)。用于各種濕證。茯苓具有良好的利尿作用。其利尿作用與影響腎小管對Na+的重吸收有關(guān)。大鼠注射茯苓提取液對四氯化碳引起的肝細胞損傷及丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高有良好防治效果。茯苓還可提高消化系功能，給大鼠口服茯苓水浸膏，可預防輕度胃潰瘍的發(fā)生。
[0021]牛膝:苦、甘、酸，平。歸肝、腎經(jīng)。功效:活血通經(jīng)，補肝腎，強筋骨，利脈通淋，引火下行。牛膝中的主要成分有齊墩果酸型三萜皂苷類化合物、留酮類化合物有牛膝留酮、蛻皮甾酮、旌節(jié)花留酮A'podecdysone C、旌節(jié)花留酮D、漏蘆留酮B、水龍骨留酮B等。另外還有多糖類化合物以及杜鵑花酸、琥珀酸等有機酸；小檗堿、巴馬丁等生物堿還有蘆丁等黃酮類成分。藥理實驗證實，牛膝具有抗骨質(zhì)疏松作用。牛膝可增加骨小梁密度、面積、總體積及密質(zhì)骨面積，減小骨髓腔面積。牛膝有顯著的活血作用，其煎液對大鼠的血液粘度、紅細胞壓積及紅細胞聚集指數(shù)均有顯著的降低作用，可延長兔體外凝血時間，對血液流變學除纖維蛋白原含量外的各項指標均有一定的降低作用。牛膝還能降低高膽固醇飼喂所致兔總膽固醇及游離膽固醇的升高，對肝臟脂肪沉著也有改善作用。
[0022]甘草:甘，平。歸心、肺、脾、胃經(jīng)。功效:補脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥。用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心悸氣短，咳嗽痰多，脘腹、四肢攣急疼痛，癰腫瘡毒，緩解藥物毒性、烈性。甘草中的有效成分包括三萜皂苷類、黃酮類、多糖類、香豆素類、生物堿類和氨基酸等。其中三萜皂苷類有甘草酸、甘草次酸、甘草甜素、甘草內(nèi)酯及異甘草內(nèi)酯等。黃酮類成份主要包括甘草苷、甘草苷元、異甘草苷、異甘草苷元。多糖化合物，包括:葡聚糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等。其藥理作用主要有抗炎作用、抗腫瘤作用、抗病毒作用。
[0023]以上方藥分析可以發(fā)現(xiàn):補腎活血膠囊中的多數(shù)藥物經(jīng)現(xiàn)代藥理學證實具有諸多如調(diào)節(jié)微血管口徑、降低血液粘度、抗血小板聚集、增加鈣磷的沉積、抗骨質(zhì)疏松作用、促進組織愈合、促進骨再生等作用。補腎活血膠囊的作用不僅是其組成藥物的作用的簡單集合，而是通過藥物間的相互作用，相互促進而發(fā)揮更顯著的效力，使得氣血通暢、肝腎得養(yǎng)，骨髓得充，共奏活血補腎、化瘀止痛之功。本方的配伍特點:(I)溫補與活血并用，標本兼治，正本清源；(2)溫補藥與行血、斂陰藥合用，使全方溫而不燥，剛?cè)嵯酀?，祛瘀而不傷正，補虛而不雍滯，以達溫養(yǎng)、通絡(luò)之效。(3)組方嚴謹，方義明確，搭配合理，通補并用，氣血兼顧。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0024]圖1:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(正常組第4周)。
[0025]圖2:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(正常組第8周)。
[0026]圖3:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(正常組第12周)。
[0027]圖4:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(模型組第4周)。
[0028]圖5:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(模型組第8周)。
[0029]圖6:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(模型組第12周)。
[0030]圖7:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(治療組第4周)。
[0031]圖8:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(治療組第8周)。
[0032]圖9:股骨頭HE染色的組織形態(tài)學觀察(X200)示意圖(治療組第12周)。
[0033]圖10:技術(shù)路線圖。 [0034]圖11:大鼠成骨細胞培養(yǎng)的倒置相差顯微鏡觀察(X100)示意圖，其中，A:原代成骨細胞培養(yǎng)第2天；B:原代成骨細胞培養(yǎng)第5天；C:原代成骨細胞培養(yǎng)第7天；D第2代成骨細胞培養(yǎng)第2天；E:第3代成骨細胞培養(yǎng)第2天；F:第3代成骨細胞培養(yǎng)第3天。
[0035]圖12:大鼠第3代成骨細胞培養(yǎng)的HE染色觀察(X200)示意圖，其中，A:第3代成骨細胞培養(yǎng)第2天；B:第3代成骨細胞培養(yǎng)第3天。
[0036]圖13:大鼠第3代成骨細胞培養(yǎng)的堿性磷酸酶染色染色觀察(X200)示意圖，其中，A:第3代成骨細胞培養(yǎng)第2天；B:第3代成骨細胞培養(yǎng)第3天。
[0037]圖14:含藥血清干預后成骨細胞形態(tài)的相差顯微鏡觀察(X100)示意圖，其中，A:生理鹽水組培養(yǎng)第3天；B:低劑量組培養(yǎng)第3天；C:中劑量組培養(yǎng)第3天；D:高劑量組培養(yǎng)第3天。
[0038]圖15 =MTT法測各組成骨細胞的OD值。
[0039]圖16:各組大鼠成骨細胞OPG、RANKL mRNA表達值。
[0040]圖17:各組大鼠成骨細胞0PG、RANKLmRNA表達電泳圖，其中，A:各組大鼠成骨細胞β-actin mRNA表達電泳圖；B:各組大鼠成骨細胞OPGmRNA表達電泳圖；(:各組大鼠成骨細胞RANKLmRNA表達電泳圖(圖中a:生理鹽水組，b:低劑量組，c:中劑量組，d:高劑量組)。
[0041]圖18:星點設(shè)計優(yōu)化立體圖。
【具體實施方式】
[0042]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
[0043]實施例1制備補腎活血膠囊
[0044]配方為:淫羊藿3000g,杜仲1500g,丹參3000g,川芎1500g,白芍1500g,茯苓1200g，牛膝 1200g,鹿角膠 1000g,香附 900g,甘草 900g。
[0045]制備方法為:取除鹿角膠外的各原料藥，混合，加入14倍量的水(重量倍數(shù))，煎煮136min，過濾除去濾渣，向濾液中加入烊化的鹿角膠，濃縮濾液至相對密度為1.1，然后加入無水乙醇，調(diào)整乙醇含量為70% (體積百分數(shù))，靜置12h，過濾，濾液減壓回收乙醇并濃縮至稠膏，60°C減壓干燥，加入10%的糊精(質(zhì)量百分數(shù))進行干法制粒，即得，裝入膠囊制成膠囊劑。
[0046]實施例2制備補腎活血膠囊
[0047]配方為:淫羊藿25g，杜仲20g，丹參25g，川芎20g,白芍10g，茯苓15g，牛膝IOg,鹿角膠12g，香附6g，甘草12g。
[0048]制備方法同實施例1。
[0049]實施例3制備補腎活血膠囊
[0050]配方為:淫羊藿35g,杜仲IOg,丹參35g,川彎IOg,白茍20g,獲茶IOg,牛膝15g,鹿角膠8g，香附12g，甘草6g。
[0051]制備方法同實施例1。
[0052]實驗一、補腎活血膠囊對兔激素性股骨頭壞死BGP、IL-6、血管內(nèi)皮四項含量測定
[0053]1.實驗材料
[0054](I)實驗動物
[0055]健康的新西蘭大白兔20只，體重2.5~3.0Kg，雌雄各半，由山東中醫(yī)藥大學動物房提供，合格證號:scxk(魯)20030004。標準飼料喂養(yǎng)，室溫15~25°C，相對濕度45%~60%，每日正常光照，空氣流通，自由攝食、飲水。
[0056](2)實驗藥品
[0057]1.補腎活血膠囊:實施例1制備。
[0058]2.仙靈骨葆膠囊:由貴州同濟堂制藥有限公司生產(chǎn)(國藥準字Z20025337)。
[0059]3.地塞米松注射液:由山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司提供(國藥準字H37021969)。
[0060](3)實驗儀器及試劑
[0061 ] 1.GMJ型全自動放射免疫r計數(shù)器(江蘇省醫(yī)療電子研究所)、DDL_5冷凍離心機(上海安亭科學儀器廠)、721分光光度計(上海第三分析儀器廠)、0LYMPAS光學顯微鏡等。
[0062]2.NO試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；BGP、IL-6、ET、TXB2、6-Keto_PGFla放免藥盒由解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所(北京東亞免疫技術(shù)研究所公司)提供。
[0063]2.實驗方法
[0064](I)動物分組及模型制作
[0065]隨機將20只新 西蘭大白兔分為四組，A正常組、B模型組、C對照組、D治療組，每組各5只。所有家兔均在同一條件下單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)一周后，參照賀式造模法(張弛，何洪陽，楊志偉，等.活血通絡(luò)法防治激素性股骨頭壞死的作用及機制研究[J].成都中醫(yī)藥大學學報，2007，30(1):39-42.)給模型組、對照組、治療組家兔臀部肌肉注射地塞米松注射液的方法，每次10mg/kg/只，每周2次，共4周，正常組皮下注射生理鹽水2ml/kg/只，所有動物肌注青霉素8萬U/只，每周I次，以預防感染。
[0066](2)給藥劑量設(shè)置
[0067]根據(jù)Meeh-Rubner公式A (體表面積)=K (系數(shù)).W (體重g)2/3.I(T4及相關(guān)文獻的參考，計算出兔服用補腎活血膠囊的劑量為IOg/日/只，其濃度為lg/ml ;仙靈骨葆膠囊的劑量為5g/日/只，使用時用溫開水溶化，含0.5g/ml。[0068](3)給藥方法
[0069]造模成功后，一周后起對照組給予IOml/日仙靈骨葆膠囊水溶液灌胃，治療組給予IOml/日補腎活血膠囊灌胃，正常組、模型組給以生理鹽水5ml/kg/日體重灌胃飼養(yǎng)，連續(xù)給藥8周(兩個療程)后取材。
[0070](4)觀察指標
[0071]1.肉眼觀察包括動物的一般情況，如精神、飲食、體重、毛發(fā)光澤度及股骨頭大體形態(tài)。
[0072]2.光學顯微鏡觀察股骨頭組織形態(tài)。
[0073]3.血清骨鈣素(BGP)含量測定。
[0074]4.血清白介素-6 (IL-6)含量測定。
[0075]5.血管內(nèi)皮四項含量測定。
[0076](5)統(tǒng)計學方法
[0077]實驗數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計軟件處理，采用單因素方差分析及q檢驗。
[0078]3.實驗結(jié)果
[0079](I) 一般情況觀察及股骨頭大體形態(tài)
[0080]1.一般情況觀察:在所有實驗動物中，B組、C組、D組在注射激素后出現(xiàn)精神萎糜，飲食減少，大便稀塘，表現(xiàn)營養(yǎng)不良，消瘦，毛發(fā)干枯，無光澤。A組精神飽滿，飲食及二便正常，體重增加，毛發(fā)光澤，至造模結(jié)束所有動物均無死亡。治療開始后，B組(模型組)精神差，飲食尚可，大便較稀，體重變化不大，C組和D組精神逐漸變好，飲食增加，大便逐漸正常，體重增加，毛發(fā)逐漸變得有光澤。A組精神良好，飲食及二便正常，體重較前增加，毛發(fā)光澤。各組動物治療后無死亡。如表1所示。
[0081]表1各組動物實驗過程中體重變化情況(了土S) (kg)
[0082]
【權(quán)利要求】
1.一種治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，其特征在于:是由以下原料藥制成的:淫羊藿25~35g，杜仲10~20g，丹參25~35g，川芎10~20g，白芍10~20g，茯苓10~15g,牛膝10~15g,鹿角膠8~12g,香附6~12g,甘草6~12g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑，其特征在于:是由以下原料藥制成的:淫羊藿30g，杜仲15g，丹參30g，川芎15g，白芍15g，茯苓12g，牛膝12g，鹿角膠10g，香附9g，甘草9g。
3.權(quán)利要求1或2所述的治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑的制備方法，其特征在于:取除鹿角膠外的各原料藥，混合，加入12~16倍量的水，煎煮130~140min，過濾除去濾渣，向濾液中加入烊化的鹿角膠，濃縮濾液，然后加入濃度為80~100%的乙醇，調(diào)整乙醇含量為70%，靜置10~15h，過濾，濾液減壓濃縮至稠膏，干燥，加入糊精進行干法制粒，SP得。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述濃縮濾液具體為:濃縮濾液至相對密度為1.1。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述干燥為60°C減壓干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述糊精的加入量為稠膏干燥后所得物料的10%。
7.根據(jù)權(quán)利要求3~6中任一項所述的制備方法，其特征在于:所述治療激素性股骨頭壞死的中藥制劑的劑型為膠囊劑，干法制粒后，裝入膠囊制成膠囊劑。
【文檔編號】A61K36/8905GK103989878SQ201410268593
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】李剛, 彭偉, 傅春升, 孫德舜, 顏冰, 李越, 于福義, 任維龍, 孫彬, 劉彬 申請人:山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院