吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin株脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗及制備方法，每100ml聯(lián)合疫苗中含有下列組份：百日咳毒素3000~6000ugPN、絲狀血細(xì)胞凝集素3000~6000ugPN、百日咳桿菌粘附素1000~2000ugPN、破傷風(fēng)類毒素1000～3000Lf、白喉類毒素3000~6000Lf、Al(OH)3126～154mg、sIPVⅠ型3000~6000DU、sIPVⅡ型5700~7100DU、sIPVⅢ型4500~9000DU、NaCl765~935mg、2-苯氧乙醇0~600mg、余量H2O。該疫苗能預(yù)防多種目標(biāo)疾病，減少接種針次，簡(jiǎn)化免疫程序，提高接種率，降低交叉感染機(jī)會(huì)。
【專利說(shuō)明】吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sab i η株脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種吸附無(wú)細(xì)胞百日咳、白喉、破傷風(fēng)和Sabin株脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗及其制備方法，屬于生物醫(yī)學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002] 百日咳是由百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)引起的小兒呼吸道傳染病，傳染性很強(qiáng)。臨床特征為咳嗽逐漸加重、呈陣發(fā)性痙攣性咳嗽，未經(jīng)治療的病人，病程可延續(xù)2~3月。百日咳病是影響兒童健康和導(dǎo)致死亡的主要疾病之一，在未實(shí)行計(jì)劃免疫前，5歲以下兒童發(fā)病率達(dá)到20~60%。最初應(yīng)用的疫苗是基于用甲醛處理以殺死細(xì)菌并使有毒物質(zhì)失活后的完整菌體。自二十世紀(jì)70年代后期實(shí)施計(jì)劃免疫后,全菌體百白破(Daphtheria Tetanus and whole Pertussis Combined Vaccine,簡(jiǎn)稱 DTwP)聯(lián)合疫苗覆蓋率大大提高。但該疫苗與包括發(fā)熱和局部反應(yīng)的副作用相關(guān)。近年來(lái)，無(wú)細(xì)胞百白破是經(jīng)培養(yǎng)，提純百日咳抗原成分、精制白喉類毒素、精制破傷風(fēng)類毒素，用氫氧化鋁吸附制成，無(wú)細(xì)胞百白破(DTaP)聯(lián)合疫苗的人群血清學(xué)效果和人群保護(hù)率與DTwP疫苗相近，副反應(yīng)明顯低于DTwP疫苗。因具有良好的免疫原性和安全性，而廣泛用于兒童的預(yù)防接種。但是基于對(duì)百日咳有效抗原更明確的認(rèn)識(shí)，現(xiàn)有較少數(shù)量的高度純化的抗原的疫苗，即組份疫苗。本發(fā)明的疫苗中使用的百日咳抗原包括百日咳毒素PT，絲狀血細(xì)胞凝集素FHA，百日咳桿菌粘附素PRN。
[0003]白喉是由白喉?xiàng)U菌引起的急性呼吸道傳染病，以咽、喉等處粘膜充血、腫脹并有灰白色偽膜形成為突出臨床特征，嚴(yán)重者可引起心肌炎與末梢神經(jīng)麻痹。因呼吸道堵塞和心臟衰竭的致死率高達(dá)10%。破傷風(fēng)是由破傷風(fēng)桿菌侵入傷口，并在傷口內(nèi)繁殖、分泌毒素而引起的急性特異性感染，主要表現(xiàn)為全身或局部肌肉的持續(xù)性收縮和陣發(fā)性痙攣。這些細(xì)菌的毒素是相應(yīng)疾病的主要病因，針對(duì)這些細(xì)菌提供保護(hù)作用的疫苗包含被弱毒化的失去侵染性的類毒素，使用甲醛進(jìn)行處理來(lái)制備白喉類毒素(DT)和破傷風(fēng)類毒素(TT)。
[0004]脊髓灰質(zhì)炎(WPV)是由脊髓灰質(zhì)炎病毒1、I1、III型引起的傳播廣泛且危害極大的急性傳染病，能侵襲任何年齡段人群，但主要是3歲以下的兒童(占所有病例的50%)，嚴(yán)重造成肢體不可逆轉(zhuǎn)的麻痹甚至死亡。在疫苗問(wèn)世前，該病在全世界范圍內(nèi)流行。50年代中后期，美國(guó)的兩位科學(xué)家Salk和Sabin先后研制成功脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗(InactivatedPoliovirus Vaccine,簡(jiǎn)稱IPV)和口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(Oral PoliovirusVaccine，簡(jiǎn)稱0PV)。從此人們有了預(yù)防和消滅脊髓灰質(zhì)炎的有力武器，實(shí)踐證明這兩種疫苗都是安全有效的。世界衛(wèi)生組織(World Health Organization, WHO) 1988年發(fā)起全球范圍內(nèi)消滅脊髓灰質(zhì)炎的倡議，此后，消滅脊髓灰質(zhì)炎的活動(dòng)在降低脊髓灰質(zhì)炎的發(fā)病率和減少脊髓灰質(zhì)炎病毒的傳播范圍方面都取得了重大進(jìn)展。2007年I月~2008年6月，16個(gè)國(guó)家從AFP病例的糞便標(biāo)本中檢測(cè)到野毒株(WPV)，只檢測(cè)到WPVI型和WPVIII型，自1999年以來(lái)在全球范圍內(nèi)未檢測(cè)到WPVII型，這些進(jìn)步的取得歸功于全世界共同實(shí)施的消滅脊髓灰質(zhì)炎策略。在全球消滅脊髓灰質(zhì)炎(WPV)行動(dòng)中，口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗(OPV)得到廣泛應(yīng)用，已大幅度降低全球脊髓灰質(zhì)炎的發(fā)病率。然而，由于疫苗相關(guān)麻痹型脊髓灰質(zhì)炎(Vaccine Associated Paralytic Poliomyelitis, VAPP)和疫苗衍生脊髓灰質(zhì)炎病毒(Vaccine- derived Poliovirus, VDPV)風(fēng)險(xiǎn),今后必須停止口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗OPV的使用，以徹底根除脊髓灰質(zhì)炎。只有使用脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗IPV才能避免VAPP和VDPV風(fēng)險(xiǎn)。脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗IPV可預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎爆發(fā)，并能產(chǎn)生群體免疫力，是消滅脊髓灰質(zhì)炎后續(xù)階段的最佳選擇。目前全球有6個(gè)廠商在生產(chǎn)IPV，但所使用的生產(chǎn)毒種均為野毒株。用野毒株生產(chǎn)IPV需達(dá)到生物安全水平3級(jí)(BSL-3)的要求，全世界消滅脊髓灰質(zhì)炎后，甚至BSL-4的條件亦非絕對(duì)保證。對(duì)于疫苗生產(chǎn)廠家難以達(dá)到如此嚴(yán)格的生物安全要求，因而WHO鼓勵(lì)疫苗生產(chǎn)廠家研發(fā)減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗SabinIPV (Inactivated Poliovirus Vaccine, Sabin strain,簡(jiǎn)稱 sIPV)。
[0005]在我國(guó)實(shí)施的兒童計(jì)劃免疫中，無(wú)細(xì)胞百白破疫苗、脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗都是分開(kāi)接種的，較多的接種針次，復(fù)雜化的免疫程序，不僅給家長(zhǎng)們帶來(lái)諸多麻煩，給兒童帶來(lái)痛苦，且增加各種費(fèi)用，而且會(huì)影響接種率，增加交叉感染機(jī)會(huì)，不利于計(jì)劃免疫的推進(jìn)。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決現(xiàn)有疫苗接種次數(shù)多，接種程序復(fù)雜等問(wèn)題，本發(fā)明提供一種方便、安全、有效的吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin株脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗(DTaP-sIPV)及其制備方法，以徹底消滅脊髓灰質(zhì)炎和預(yù)防白百破，保障兒童健康成長(zhǎng)。
[0007]本發(fā)明提供的是這樣一種吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗，其特征在于每IOOmL聯(lián)合疫苗中含有下列組份:
百日咳毒素(PT)3000~6000ugPN
絲狀血細(xì)胞凝集素(FHA)3000~6000ugPN
百日咳桿菌粘附素(PRN)1000~2000ugPN
破傷風(fēng)類毒素(TT)1000~3000Lf
白喉類毒素(DT)3000~6000Lf
Al (OH)3126 ~154mg
sIPV I 型3000 ~6000 DU
sIPV II型5700 ~7100DU
sIPV III型4500 ~9000DU
NaCl765 ~935mg
2-苯氧乙醇O~600mg
H2O余量。
[0008]所述百日咳毒素PT、絲狀血細(xì)胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN、破傷風(fēng)類毒素TT、白喉類毒素DT、Al (OH) 3、SlPV I型、sIPV II型、sIPV III型、NaCl、2_苯氧乙醇均是常規(guī)產(chǎn)品。
[0009]所述H2O為醫(yī)用注射用水。
[0010]本發(fā)明的另一目的是提供一種吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗的制備方法，其特征在于經(jīng)過(guò)下列各步驟:(1)按常規(guī)方法分別制備無(wú)細(xì)胞百日咳抗原(PT、FHA、PRN)、破傷風(fēng)類毒素(TT)和白喉類毒素(DT)，以及1、I1、III型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活液sIPV I型、sIPV II型、sIPVΠΙ型；
(2)按每IOOmL聯(lián)合疫苗中含有下列組份進(jìn)行備料:
【權(quán)利要求】
1.一種吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗，其特征在于每IOOmL聯(lián)合疫苗中含有下列組份: 百日咳毒素PT3000~6000ugPN 絲狀血細(xì)胞凝集素FHA3000~6000ugPN 百日咳桿菌粘附素PRN1000~2000ugPN 破傷風(fēng)類毒素TT1000~3000Lf 白喉類毒素DT3000~6000Lf Al (OH)3126 ~154mg sIPV I 型3000 ~6000 DU sIPV II 型5700 ~7100DU sIPV III型4500 ~9000DU NaCl765 ~935mg 2-苯氧乙醇O~600mgH2O余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗，其特征在于:所述百日咳毒素PT、絲狀血細(xì)胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN、破傷風(fēng)類毒素TT、白喉類毒素DT、Al (OH) 3、sIPV I型、sIPV II型、sIPV III型、NaCl、2_苯氧乙醇均是常規(guī)產(chǎn)品O
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗，其特征在于:所述H2O為醫(yī)用注射用水。
4.一種吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗的制備方法，其特征在于經(jīng)過(guò)下列各步驟: (O按常規(guī)方法分別制備無(wú)細(xì)胞百日咳抗原PT、FHA, PRN、破傷風(fēng)類毒素TT和白喉類毒素DT，以及1、I1、111型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活液sIPV I型、sIPV II型、sIPV III型； (2)按每IOOmL聯(lián)合疫苗中含有下列組份進(jìn)行備料: 百日咳毒素PT3000~6000ugPN 絲狀血細(xì)胞凝集素FHA3000~6000ugPN 百日咳桿菌粘附素PRN1000~2000ugPN 破傷風(fēng)類毒素TT1000~3000Lf 白喉類毒素DT3000~6000Lf Al (OH)3126 ~154mg sIPV I 型3000 ~6000 DU sIPV II型5700 ~7100DU sIPV III型4500 ~9000DU NaCl765 ~935mg 2-苯氧乙醇O~600mgH2O余量； (3)將步驟(2)所備Al(OH)3^NaCl和H2O混合后，進(jìn)行高壓滅菌，再在室溫下連續(xù)攪拌，并依次加入白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、百日咳毒素、絲狀血細(xì)胞凝集素、百日咳桿菌粘附素、SlPV I型、sIPV II型、sIPV III型，然后調(diào)節(jié)pH值為5.8~7.2，再加入2-苯氧乙醇作為防腐劑，即得到吸附無(wú)細(xì)胞百白破-Sabin株脊髓灰質(zhì)炎聯(lián)合疫苗。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(1)的常規(guī)方法是根據(jù)中華人民共和國(guó)藥典2010年版的要求制備各原液，其中制備百日咳毒素PT、絲狀血細(xì)胞凝集素FHA、百日咳桿菌粘附素PRN所用的百日咳I相CS菌株的菌號(hào)為58003-3 ;制備破傷風(fēng)類毒素TT所用的破傷風(fēng)梭狀芽孢桿菌的菌號(hào)為64008 ;制備白喉類毒素DT所用的白喉?xiàng)U菌PW8株的菌號(hào)為38007，均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院血清室；制備1、I1、III型Sabin株脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活液所用的脊髓灰質(zhì)炎病毒分別是I型為SabinSO+2，II型為SabinSO+2，III型為PfizerSOR+Ι，均購(gòu)自世界衛(wèi)生組織WHO。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(3)的pH值用pH8.0的PB緩沖液進(jìn) 行調(diào)節(jié)。
【文檔編號(hào)】A61P31/14GK103908667SQ201410156859
【公開(kāi)日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年4月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月18日
【發(fā)明者】孫明波, 姜述德, 楊凈思, 廖國(guó)陽(yáng), 姜莉, 衡燮, 馬艷, 高娜, 奚光躍, 姬光, 宋霞, 陳洪波, 梁疆莉, 周健 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所