用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑，其原料藥包括黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、枸杞子、山麥冬、石斛、大棗、桑白皮、雞血藤、姜黃、側(cè)柏葉、梔子、魚腥草、青蒿、三楞草、山柰、八寶茶、小茴香、肉豆蔻、核桃仁、萊菔子和蘇木。該免疫制劑具有資源豐富、低毒、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，能夠提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)免疫力、預(yù)防疾病。
【專利說(shuō)明】用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003]在現(xiàn)代集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)中廣泛采用早期斷奶技術(shù)，仔豬離開母豬后，在飼養(yǎng)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)突然改變，重新合群、建立新的等級(jí)秩序等不良因素的作用下，容易發(fā)生以生長(zhǎng)緩慢和腹瀉為主要特征的仔豬早期斷奶應(yīng)激綜合癥。由于這種疾病具有較高的發(fā)生率和死亡率，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了重大損失。
[0004]目前，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中普遍采用在飼料中添加抗生素、激素、化學(xué)合成藥物等來(lái)防治畜禽腹瀉，長(zhǎng)期使用這些物質(zhì)，不僅易引起病原微生物產(chǎn)生耐藥性、動(dòng)物免疫力下降和產(chǎn)品品質(zhì)下降等問(wèn)題，并可造成畜產(chǎn)品及環(huán)境中的有害殘留增加，嚴(yán)重威脅著人類健康。
[0005]中草藥因其具有資源豐富、低毒、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，并且能夠促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)、提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)免疫力、預(yù)防疾病、緩解應(yīng)激、提高生長(zhǎng)性能，而越來(lái)越受到人們的重視。
[0006]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑，其具有資源豐富、低毒、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，能夠提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)免疫力、預(yù)防疾病。
`[0008]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑，其原料藥包括黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、枸杞子、山麥冬、石斛、大棗、桑白皮、雞血藤、姜黃、側(cè)柏葉、桅子、魚腥草、青蒿、三楞草、山柰、八寶茶、小茴香、肉豆蘧、核桃仁、萊菔子和蘇木。
[0009]其中，所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪75g~85g、白術(shù)35g~45g、當(dāng)歸30g~40g、枸杞子45g~55g、山麥冬25g~35g、石斛30g~40g、大率25g~35g、桑白皮30g~40g、雞血藤25g~35g、姜黃30g~40g、側(cè)柏葉25g~35g、桅子30g~40g、魚腥草20g~30g、青蒿30g~40g、三榜草25g~35g、山柰30g~40g、八寶茶20g~30g、小茴香15g~25g、肉豆蘧IOg~20g、核桃仁20g~30g、萊菔子35g~45g和蘇木20g~30g。
[0010]其中，所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g~85g、白術(shù)40g~45g、當(dāng)歸35g~40g、枸杞子50g~55g、山麥冬30g~35g、石斛35g~40g、大率30g~35g、桑白皮30g~35g、雞血藤25g~30g、姜黃30g~35g、側(cè)柏葉25g~30g、桅子30g~35g、魚腥草20g~25g、青蒿30g~35g、三楞草25g~30g、山柰30g~35g、八寶茶20g~25g、小茴香15g~20g、肉豆蘧IOg~15g、核桃仁20g~25g、萊菔子35g~40g和蘇木20g~25g。
[0011]其中，所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g、白術(shù)40g、當(dāng)歸35g、枸杞子50g、山麥冬30g、石斛35g、大棗30g、桑白皮35g、雞血藤30g、姜黃35g、側(cè)柏葉30g、桅子35g、魚腥草25g、青蒿35g、三榜草30g、山柰35g、八寶茶25g、小茴香20g、肉豆蘧15g、核桃仁25g、萊菔子40g和蘇木25g。[0012]本發(fā)明還提供了上述中藥免疫制劑的制備方法，具體為:
第一步，將各原料藥組分分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物；
第二步，將第一步獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液；
第三步，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與第一步獲得的混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液；
第四步，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為 1.10 ~1.20(70°C )；
第五步，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1~3:1 ;
第六步，將含醇清膏在室溫下靜置12~24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑。
[0013]本發(fā)明還提供了一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的飼料，其原料包括:玉米、豆柏、魚粉、磷酸氫鈣、食鹽、用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑和維生素預(yù)混料。
[0014]其中，所述飼料中各原料的重量份分別為玉米60重量份~70重量份、豆柏20重量份~30重量份、魚粉5重量份~10重量份、磷酸氫鈣2重量份飛重量份、食鹽0.5重量份~1.5重量份、用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑10重量份~15重量份、維生素預(yù)混料1重量份重量份。
[0015]進(jìn)一步優(yōu)選，所述飼料中各原料的重量份分別為玉米65重量份、豆柏25重量份、魚粉8重量份、磷酸氫鈣3重量份、食鹽1重量份、用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑12重量份、維生素預(yù)混料2重量份。
[0016]本發(fā)明還提供了上述飼料的制備方法，具體為將飼料中的各添加原料粉碎，混合攪拌均勻，獲得飼料。
[0017]本發(fā)明的有益效果:
本發(fā)明提供的中藥免疫制劑具有資源豐富、低毒、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，其能夠提高飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)免疫力、預(yù)防疾病。
[0018]
【具體實(shí)施方式】
[0019]本發(fā)明提供了一 種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑，其原料藥包括黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、枸杞子、山麥冬、石斛、大棗、桑白皮、雞血藤、姜黃、側(cè)柏葉、桅子、魚腥草、青蒿、三楞草、山柰、八寶茶、小茴香、肉豆蘧、核桃仁、萊菔子和蘇木。
[0020]進(jìn)一步，所述免疫制劑僅由上述原料藥構(gòu)成。
[0021]所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪75g~85g、白術(shù)35g~45g、當(dāng)歸30g~40g、枸杞子45g~55g、山麥冬25g~35g、石斛30g~40g、大率25g~35g、桑白皮30g~40g、雞血藤25g~35g、姜黃30g~40g、側(cè)柏葉25g~35g、桅子30g~40g、魚腥草20g~30g、青蒿30g~40g、三榜草25g~35g、山柰30g~40g、八寶茶20g~30g、小茴香15g~25g、肉豆蘧10g~20g、核桃仁20g~30g、萊菔子35g~45g和蘇木20g~30g。
[0022]進(jìn)一步，所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g~85g、白術(shù)40g~45g、當(dāng)歸35g~40g、枸杞子50g~55g、山麥冬30g~35g、石斛35g~40g、大率30g~35g、桑白皮30g~35g、雞血藤25g~30g、姜黃30g~35g、側(cè)柏葉25g~30g、桅子30g~35g、魚腥草20g~25g、青蒿30g~35g、三楞草25g~30g、山柰30g~35g、八寶茶20g~25g、小茴香15g~20g、肉豆蘧10g~15g、核桃仁20g~25g、萊菔子35g~40g和蘇木20g~25g。
[0023]最優(yōu)選，所述中藥免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g、白術(shù)40g、當(dāng)歸35g、枸杞子50g、山麥冬30g、石斛35g、大棗30g、桑白皮35g、雞血藤30g、姜黃35g、側(cè)柏葉30g、桅子35g、魚腥草25g、青蒿35g、三榜草30g、山柰35g、八寶茶25g、小茴香20g、肉豆蘧15g、核桃仁25g、萊菔子40g和蘇木25g。
[0024]方中，各原料藥的藥理如下:
黃苗-.Ο?名astragali rat/ijr,味甘，性溫，入脾、肺經(jīng)，有補(bǔ)益脾肺，升舉陽(yáng)氣、固表止汗，托瘡生肌等功效，主要用于脾肺氣虛所致之乏力食少便溏，心悸氣短，中氣下陷之臟器下垂，氣不攝血之崩漏便血，久瀉脫肛；表虛不固之自汗盜汗，氣血不足等證。
[0025]白術(shù):拉丁^atractylodismacrocephalae味甘、苦,性溫,入脾、胃經(jīng)，有補(bǔ)脾利氣，燥濕利水，固表止汗，運(yùn)脾潤(rùn)燥的作用，主要用于脾失健運(yùn)、氣不化水所致之痞滿腹瀉，痰飲水腫；中氣不足之心煩懶言，崩中漏下，久痢脫肛；脾虛氣弱之奏里不固、虛汗自汗等證。
[0026]當(dāng)歸MCT名angelicae sinensis味甘、辛、苦，性溫，入肝、心、脾經(jīng)，有補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止疼，潤(rùn)腸通便的作用。主要用于治療心血不足之頭目昏眩，倦怠乏力，心悸氣短，及其他血虛證；血?？仗?，沖任虛寒或淤血阻滯之月經(jīng)不調(diào)，量少衍期等癥狀。
[0027]枸杞子:拉丁名lycii fructus,味甘，性平，歸肝經(jīng)、腎經(jīng)、肺經(jīng)，其具有滋補(bǔ)肝腎，益精養(yǎng)血，明目消翳，潤(rùn)肺止咳的作用。主治腎虛骨痿，陽(yáng)痿遺精，久不生育，早老早衰，須發(fā)早白，血虛萎黃，產(chǎn)后乳少，目暗不明，內(nèi)外障眼，內(nèi)熱消渴，勞熱骨蒸，虛癆咳嗽，干咳少痰等病證。
[0028]山麥冬:拉丁名liriopes rat/ijr,味甘、微苦,性微寒，歸心、肺、胃經(jīng)，具有養(yǎng)陰生津，潤(rùn)肺清心的功效，用于肺燥干咳，虛勞咳嗽，津傷口渴，心煩失眠，腸燥便秘等證。
[0029]石斛:拉丁名Dendrobii Caul is,性微寒，味甘，歸胃、腎經(jīng)，具有益胃生津，滋陰清熱的功效，主治陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明等證。
[0030]大率:拉丁名jujubae fructus,味甘,性溫,入脾、胃經(jīng),具有補(bǔ)氣健脾、養(yǎng)血安神、調(diào)和營(yíng)衛(wèi)、緩和藥性的作用，用于脾胃虛弱，體倦乏力，食少便溏，氣血不足，頭痛發(fā)熱，汗出熱風(fēng)等證。
[0031]桑白皮:拉丁名Mori Cortex,味甘，性寒，入肺經(jīng)，具有瀉肺平喘，利水消腫的功效，用于肺熱咳喘，面目浮腫，小便不利等癥。
[0032]雞血藤:拉丁名spatholobi caul is,味苦、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具有擴(kuò)張血管，補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)，舒筋活絡(luò)的功效，主治血虛有淤之月經(jīng)不調(diào)，四肢疼痛不仁，腰膝酸軟、疼痛等證。[0033]姜黃:拉丁名ctfrcwffiae longae味苦、辛,性溫,入肝經(jīng),具有破血行氣，通經(jīng)止痛的功效，用于胸脅剌痛，閉經(jīng)，癥瘕，風(fēng)濕肩臂疼痛，跌撲腫痛等證。
[0034]側(cè)柏葉?尤CX名Platycladi味苦、潘，性寒，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有涼血止血，化痰止咳，生發(fā)烏發(fā)的功效，主治吐血，咳血，便血，崩漏帶下，肺熱咳喘，血熱脫發(fā)，須發(fā)早白等證。
[0035]桅子:拉丁名gardeniae fructus,味苦，性寒，入心、肺、三焦,有除煩灣火、疏肝解郁、清熱利濕、涼血止血的作用，主要用于溫?zé)岵嵊粜仉渲臒┎话?、煩擾不寧；肝郁不舒或肝經(jīng)有熱之頭暈?zāi)垦?，胸脅疼痛，目赤咽干；濕熱黃疸；氣滯血瘀之脘腹脹痛等癥狀。
[0036]魚腥草:拉丁名houttuyniae herba,味辛,性微寒,入肺、膀胱經(jīng),具有清熱解毒，排膿消癰，利尿通淋的功效，用于肺癰吐膿，痰熱咳喘，熱毒血痢，濕熱淋證，熱毒瘡癰，蛇蟲要上等證。
[0037]青蒿:拉丁名Annuae ZferAa,味苦，辛，性寒，歸肝、膽經(jīng)，具有清透虛熱，涼血除蒸，除蒸，截瘧的功效，主治暑邪發(fā)熱，陰虛發(fā)熱，夜熱早涼，骨蒸勞熱，瘧疾寒熱，濕熱黃疸等證。
[0038]三楞草:味苦；辛；性涼，肝；肺經(jīng)，具有行氣開郁；祛風(fēng)止癢；寬胞利痰的功效，主治胸悶不舒；風(fēng)疹瘙癢；癰伴隨腫毒等證。
[0039]山柰:拉丁名kaempferiae rhizoma,性溫,味辛，歸胃經(jīng)，具有溫中，消食,止痛的功效，主治心腹冷痛，停食不化，跌打損傷，牙痛，飲食不消等證。
[0040]八寶茶:味苦、辛，性微寒，具有祛瘀調(diào)經(jīng)，通絡(luò)止痛的功效，主治月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后腹痛、跌打腫痛、半身不遂等證。
[0041]小茴香:拉丁名/be/?icw7i /rwciiAs,味辛，性溫，入腎、膀胱、胃經(jīng),具有開胃進(jìn)食，理氣散寒，有助陽(yáng)道的作用。主治中焦有`寒，食欲減退，惡心嘔吐，腹部冷痛；疝氣疼痛，睪丸腫痛；脾胃氣滯，脘腹脹滿作痛等證。
[0042]肉豆蘧:拉丁名myristicae semen,味辛,苦,性溫,歸脾，胃，大腸經(jīng),具有溫中潘腸，行氣消食的功效，用于虛瀉；冷?。浑涓姑浲?；食少嘔吐；宿食不消等證。
[0043]核桃仁:拉丁名juglandis味甘,性溫,入腎、肺、大腸經(jīng),具有補(bǔ)腎益精，溫肺定喘，潤(rùn)腸通便的作用，用于腎氣虧虛之腰痛腿軟，頭暈乏力，尿頻遺精，消渴，肺腎兩虛之咳喘，老年人氣虛及產(chǎn)后血虧津少而致的腸燥便秘，跌打損傷，瘡瘍癰腫等證。
[0044]萊菔子:拉丁名raphani性平,味辛、甘,歸肺、脾、胃經(jīng),具有消食除脹,降氣化痰的功效，主治飲食停滯、脘腹脹痛、大便秘結(jié)、積滯瀉痢、痰壅喘咳等證。
[0045]蘇木:拉丁名sappan lignum,味甘、咸,性平,入心、肝、大腸經(jīng),具有活血祛瘀,消腫止痛的作用，用于血淤閉經(jīng)，痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀滯腹痛，跌打損傷，骨折癰腫瘡毒等證。
[0046]本發(fā)明還提供了上述中藥免疫制劑的制備方法，具體為:
第一步，將各原料藥組分分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物；
第二步，將第一步獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液；
第三步，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與第一步獲得的混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液；
第四步，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為 1.10 ~1.20(70°C )；
第五步，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1~3:1 ;
第六步，將含醇清膏在室溫下靜置12~24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑。
[0047]本發(fā)明還提供了一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的飼料，其原料包括
所述飼料中各原料的重量份分別為玉米60重量份~70重量份、豆柏20重量份~30重量份、魚粉5重量份~10重量份、磷酸氫鈣2重量份飛重量份、食鹽0.5重量份~1.5重量份、用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑10重量份~15重量份、維生素預(yù)混料1重量份^3重量份。
[0048]進(jìn)一步優(yōu)選，所述飼料中各原料的重量份分別為玉米65重量份、豆柏25重量份、魚粉8重量份、磷酸氫鈣3重量份、食鹽1重量份、用于提高仔豬免疫機(jī)能的中藥免疫制劑12重量份、維生素預(yù)混料2重量份。
[0049]所述維生素預(yù)混料為，每kg含有維生素A4500萬(wàn)IU，維生素D31600萬(wàn)IU，維生素 ElOOOOOmg，維生素 K310000mg，維生素 VBfOOOmg，維生素 B230000mg，維生素 B12120mg，維生素B61100mg，生物素500mg，泛酸鈣80000mg，葉酸6000mg，煙酰胺150000mg，為亨懋多維-101 (濰坊亨懋動(dòng)物保健品有限公司提供)。
[0050]本發(fā)明還提供了上述飼料的制備方法，具體為將飼料中的各添加原料粉碎，混合攪拌均勻，獲得飼料。
[0051]以下采用實(shí)施例來(lái)詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式，借此對(duì)本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來(lái)解決技術(shù)問(wèn)題，并達(dá)成技術(shù)效果的實(shí)現(xiàn)過(guò)程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。
[0052]實(shí)施例1中藥免疫制劑1 (740)
將黃芪80g、白術(shù)40g、當(dāng)歸35g、枸杞子50g、山麥冬30g、石斛35g、大棗30g、桑白皮35g、雞血藤30g、姜黃35g、側(cè)柏葉30g、桅子35g、魚腥草25g、青蒿35g、三楞草30g、山柰35g、八寶茶25g、小茴香20g、肉豆蘧15g、核桃仁25g、萊菔子40g和蘇木25g分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物，將獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量6kg,煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液；，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量為6kg，煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為1.15 (70°C )，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1，將含醇清膏在室溫下靜置24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑1。
[0053] 實(shí)施例2中藥免疫制劑2
將黃芪80g、白術(shù)40g、當(dāng)歸35g、枸杞子50g、山麥冬30g、石斛35g、大棗30g、桑白皮30g、雞血藤25g、姜黃30g、側(cè)柏葉25g、桅子30g、魚腥草20g、青蒿30g、三楞草25g、山柰30g、八寶茶20g、小茴香15g、肉豆蘧10g、核桃仁20g、萊菔子35g和蘇木20g分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物，將獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量5.5kg，煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液；，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量為5.5kg,煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為1.15 (70°C)，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1，將含醇清膏在室溫下靜置24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑2。
[0054]實(shí)施例3中藥免疫制劑3
將黃芪85g、白術(shù)45g、當(dāng)歸40g、枸杞子55g、山麥冬35g、石斛40g、大棗35g、桑白皮35g、雞血藤30g、姜黃35g、側(cè)柏葉30g、桅子35g、魚腥草25g、青蒿35g、三楞草30g、山柰35g、八寶茶25g、小茴香20g、肉豆蘧15g、核桃仁25g、萊菔子40g和蘇木25g分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物，將獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量6.5kg,煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液；，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為3小時(shí)，所加入的水的量為6.5kg,煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為1.15 (70°C )，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1，將含醇清膏在室溫下靜置24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑3。
[0055]實(shí)施例4急性毒性實(shí)驗(yàn)和長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)
急性毒性實(shí)驗(yàn)
按照急性毒性試驗(yàn)要求進(jìn)行預(yù)試，發(fā)現(xiàn)受試`藥物無(wú)法測(cè)出LD5(I。故進(jìn)行一日內(nèi)最大給藥量試驗(yàn)。取上述小鼠40只，禁食不禁水12小時(shí)后，按體重隨機(jī)分為給藥組和水對(duì)照組，每組20只，給藥組給含實(shí)施例1制備的中藥免疫制劑的生藥量2.4g/ml濃度的藥液0.4ml/10g,灌胃一天2次，使一日內(nèi)給藥劑量達(dá)合生藥量192.0g/kg，水對(duì)照組給同等體積的水。各組動(dòng)物給藥后，每盒5只，正常飼養(yǎng)，密切觀察，均連續(xù)觀察七天，記錄可能出現(xiàn)的毒性反應(yīng)和死亡情況，給藥后，小鼠外觀毛色光亮，行為活動(dòng)正常，無(wú)異常病理性神經(jīng)反射出現(xiàn)，七天中進(jìn)食良好，末見其它異常表現(xiàn)，體重變化與水對(duì)照組相比無(wú)明顯差異且無(wú)一動(dòng)物死亡，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎等主要臟器，無(wú)明顯的出血、組織變性、壞死等大體病理改變。
[0056]長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)共設(shè)2組:本發(fā)明中藥免疫制劑組(給藥量分別為51.6g原生藥/kg)和空白對(duì)照組，對(duì)9周齡大白鼠連續(xù)180天灌服，在給藥90天、180天及停藥30天后，分別處死大鼠，檢查各組動(dòng)物血液學(xué)指標(biāo)[紅細(xì)胞(RBC)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞比積(HCT)、血小板(PLT)、平均血小板體積(MPV)、白細(xì)胞(WBC)、血紅蛋白(HGB)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、淋巴細(xì)胞百分率(LPR)、中性粒細(xì)胞百分率(GPR)、中值細(xì)胞百分率(MPR)、紅細(xì)胞分布寬度(RDWR)、紅細(xì)胞分布寬度數(shù)(RDWA)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率(RET)、凝積血酶原時(shí)間(PT)];血液生化學(xué)指標(biāo)[谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)、總膽固醇(CHOL)、甘油三脂(TG)、谷氨酰胺氨基轉(zhuǎn)移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)、血清鉀離子(K+)、血清鈉離子(Na+)、血清氯離子(Cl_)]。對(duì)所有動(dòng)物心、肝、脾、肺、腎、腦、子宮、卵巢、胸腺、腎上腺進(jìn)行肉眼觀察，并稱重計(jì)算臟器指數(shù)；同時(shí)對(duì)空白對(duì)照組和中藥免疫制劑組動(dòng)物心、肝、脾、肺、腎、腦(大腦、小腦、腦干)、垂體、視神經(jīng)、坐骨神經(jīng)、脊髓(頸段、胸段、腰段)、子宮、卵巢、乳腺、甲狀腺、胸腺、胰腺、腎上腺、唾液腺(頜下腺)、食道、胃、十二指腸、回、結(jié)腸、膀胱、淋巴結(jié)(頜下淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié))、氣管、主動(dòng)脈進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)檢查。
[0057]結(jié)果顯示:各給藥組動(dòng)物在不同給藥周期，以上指標(biāo)與對(duì)照組比較，均無(wú)異常發(fā)現(xiàn)，血液學(xué)和生化學(xué)指標(biāo)均在正常值范圍內(nèi)。
[0058]結(jié)果表明本發(fā)明中藥組合物長(zhǎng)期大劑量使用是安全的。 [0059]實(shí)施例5飼料的制備
將玉米65kg、豆柏25 kg、魚粉8 kg、磷酸氫鈣3 kg、食鹽1 kg、實(shí)施例1制備的免疫制劑12 kg、維生素預(yù)混料亨懋多維-101 (濰坊亨懋動(dòng)物保健品有限公司提供)2kg粉碎，混合攪拌均勻，獲得飼料。
[0060]實(shí)施例6免疫實(shí)驗(yàn)飼料喂食方法
飼料連續(xù)飼喂1周，停3d，再服，30 d為一階段。
[0061]主要試劑
血清免疫球蛋白試劑為德靈公司進(jìn)口原裝試劑；肝素鈉、RMP 1-1640培養(yǎng)液、96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板、Hanks液、PHA、MTT、DMS0溶液；豬瘟活疫苗(諸穩(wěn)康)，福州大北農(nóng)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；偽狂犬病活疫苗，哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)。
[0062]動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)動(dòng)物為同一保育舍的杜長(zhǎng)大三元斷奶仔豬，出生日齡前后不超過(guò)4d，平均為30~35日齡，初始體重相近，組間差異不顯著。在同一保育舍內(nèi)隨機(jī)分成2組，對(duì)照組120頭，飼喂基礎(chǔ)日糧(加常規(guī)抗生素和化學(xué)藥物);試驗(yàn)組150頭，飼喂實(shí)施例4制備的飼料。疫苗注射時(shí)間:試驗(yàn)后第2天注射偽狂犬活疫苗，試驗(yàn)1周后豬瘟疫苗首免，5周后豬瘟疫苗二免，兩組注射疫苗條件完全一致。
[0063]飼養(yǎng)管理
豬舍、飼養(yǎng)條件、衛(wèi)生環(huán)境、飼料品質(zhì)及其他飼養(yǎng)管理等均相同，自由采食和飲水。
[0064]血樣采集
血樣采集采取三次采血的方式，即試驗(yàn)前、試驗(yàn)一個(gè)階段后、試驗(yàn)兩個(gè)階段后。清晨空腹，分別從兩組活體采血，每組隨機(jī)10頭，靜脈采血，每頭豬無(wú)菌采集10 mL血液。分裝在3個(gè)離心試管中，其中2管靜置lh后，3000r/m in離心，取上層血清分裝于eppendorf管中，保存?zhèn)溆茫?管(加1%肝素鈉抗凝)立即送實(shí)驗(yàn)室測(cè)定。
[0065]檢測(cè)項(xiàng)目和方法血清免疫球蛋白的測(cè)定
血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA )的水平，均使用德靈全自動(dòng)特定蛋白分析儀(BNP)，采用終點(diǎn)散射比濁法測(cè)定。
[0066]淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的測(cè)定
采用比色法(MTT法)檢測(cè)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能。MTT法是一種較新的檢驗(yàn)淋巴細(xì)胞功能的方法。取抗凝血3mL,等量Hank’ s液稀釋，加于3mL淋巴細(xì)胞分離液上層，2000 r/min離心lOmin，吸取淋巴細(xì)胞層，移入無(wú)菌離心管，適量Hank’s液洗滌2次，2000r/m in離心lOmin，然后將細(xì)胞懸浮于RMP 1- 1640完全培養(yǎng)液中(含100 ml/L小牛血清)，6 g/L臺(tái)盼藍(lán)拒染，活細(xì)胞計(jì)數(shù)(>95% )，調(diào)整細(xì)胞濃度為5X106個(gè)/mL。稀釋的細(xì)胞懸液在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上培養(yǎng)，每孔加50 μ L，對(duì)照組加50yL RMP 1-1640完全培養(yǎng)液，每孔并加入濃度為20 μ g/mL ConA，每組設(shè)5個(gè)重復(fù)，置5% C02、37°C培養(yǎng)，培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束前3h，加入10 g/L MTT 10yL，繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后，室溫下2000 r/m in離心lOmin,傾去上清液，加入150 μ L DMS0溶液，使紫色結(jié)晶完全溶解后，用酶標(biāo)儀在570 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)各孔0D值。按下列公式計(jì)算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率:淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(%)=(試驗(yàn)組0D值-對(duì)照組0D值)/對(duì)照組0D值X 100%。
[0067]豬瘟抗體水平的測(cè)定
分別在試驗(yàn)前、1個(gè)階段后(豬瘟活疫苗首免3周后)、2個(gè)階段后(豬瘟活疫苗二免3周后)3次采血，保存?zhèn)溆醚?，采用豬瘟抗體EL ISA檢測(cè)試驗(yàn)的方法。具體檢測(cè)方法按試劑盒(CSFV - E2 - Ab)說(shuō)明書測(cè)定，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處讀取吸光值(0D)，阻斷率(PI) = [1 _(樣品0D值/陰性對(duì)照平均0D值)]X 100。豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):P I≥40判為合格。
[0068]偽狂犬抗體水平的測(cè)定
分別在試驗(yàn)前、1個(gè)階段后(偽狂犬病活疫苗首免4周后)、2個(gè)階段后(偽狂犬病活疫苗首免8周后)3次采血，保存?zhèn)溆醚?，采用豬偽狂犬抗體EL ISA檢測(cè)試驗(yàn)的方法。具體檢測(cè)方法按試劑盒(PRV - gB - Ab)說(shuō)明書測(cè)定，用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處讀取吸光值(0D)，阻斷率(PI) = [1 _(樣品0D值/陰性對(duì)照平均0D值)]X100，P I≥40判為合格。
[0069]數(shù)據(jù)處理
采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPASS 17.0基礎(chǔ)統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以平均值土標(biāo)準(zhǔn)差Ο? )表示，差異顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析。
[0070]結(jié)果
中藥免疫制劑對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白的影響，結(jié)果如表1所示。
[0071]表1中藥免疫制劑對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白的影響(單位:g/L)
【權(quán)利要求】
1.一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑，其特征在于:原料藥包括黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、枸杞子、山麥冬、石斛、大棗、桑白皮、雞血藤、姜黃、側(cè)柏葉、桅子、魚腥草、青蒿、三楞草、山柰、八寶茶、小茴香、肉豆蘧、核桃仁、萊菔子和蘇木。
2.如權(quán)利要求1所述的免疫制劑，其特征在于:所述免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪75g~85g、白術(shù)35g~45g、當(dāng)歸30g~40g、枸杞子45g~55g、山麥冬25g~35g、石斛30g~40g、大率25g~35g、桑白皮30g~40g、雞血藤25g~35g、姜黃30g~40g、側(cè)柏葉25g~35g、桅子30g~40g、魚腥草20g~30g、青蒿30g~40g、三楞草25g~35g、山柰30g~40g、八寶茶20g~30g、小茴香15g~25g、肉豆蘧IOg~20g、核桃仁20g~30g、萊菔子35g~45g和蘇木20g^30go
3.如權(quán)利要求1或2所述的免疫制劑，其特征在于:所述免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g~85g、白術(shù)40g~45g、當(dāng)歸35g~40g、枸杞子50g~55g、山麥冬30g~35g、石斛35g~40g、大率30g~35g、桑白皮30g~35g、雞血藤25g~30g、姜黃30g~35g、側(cè)柏葉25g~30g、桅子30g~35g、魚腥草20g~25g、青蒿30g~35g、三榜草25g~30g、山柰30g~35g、八寶茶20g~25g、小茴香15g~20g、肉豆蘧IOg~15g、核桃仁20g~25g、萊菔子35g~40g和蘇木20g~25g。
4.如權(quán)利要求1至3所述的免疫制劑，其特征在于:所述免疫制劑中各原料藥的重量份分別為黃芪80g、白術(shù)40g、當(dāng)歸35g、枸杞子50g、山麥冬30g、石斛35g、大棗30g、桑白皮35g、雞血藤30g、姜黃35g、側(cè)柏葉30g、桅子35g、魚腥草25g、青蒿35g、三楞草30g、山柰35g、八寶茶25g、小茴香20g、肉豆蘧15g、核桃仁25g、萊菔子40g和蘇木25g。
5.權(quán)利要求1至4所 述中藥免疫制劑的制備方法，其特征在于: 第一步，將各原料藥組分分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物； 第二步，將第一步獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液； 第三步，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與第一步獲得的混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液； 第四步，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為 1.10 ~1.20 (700C )； 第五步，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1~3:1 ; 第六步，將含醇清膏在室溫下靜置12~24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻，獲得免疫制劑。
6.一種用于提高仔豬免疫機(jī)能的免疫制劑，其特征在于:原料藥包括黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、枸杞子、山麥冬、石斛、大棗、桑白皮、雞血藤、姜黃、側(cè)柏葉、桅子、魚腥草、青蒿、三楞草、山柰、八寶茶、小茴香、肉豆蘧、核桃仁、萊菔子和蘇木； 所述中藥免疫制劑的制備方法包括，第一步，將各原料藥組分分別進(jìn)行粉碎處理，得到粗粉末，將各個(gè)粗粉末混合，獲得混合物； 第二步，將第一步獲得的混合物進(jìn)行第一次水煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第一次煎煮液； 第三步，將第一次煎煮液過(guò)濾后的藥渣進(jìn)行第二次煎煮處理，煎煮時(shí)間為2~4小時(shí)，優(yōu)選為3小時(shí)，所加入的水的量與第一步獲得的混合物的質(zhì)量之比為6~10:1，煎煮液過(guò)濾，獲得第二次煎煮液； 第四步，合并第一次煎煮液和第二次煎煮液，濃縮，獲得混合物清膏，清膏的相對(duì)密度為 1.10 ~1.20 (700C )； 第五步，在混合物清膏中加入醇濃度為95%的乙醇，獲得含醇清膏，所加入的乙醇量與清膏之間的質(zhì)量比為2:1~3:1 ; 第六步，將含醇清膏在室溫下靜置12~24h，取上清液，將清膏殘?jiān)M(jìn)行過(guò)濾處理，過(guò)濾的液體與上清液合并，減壓濃縮并干燥，獲得干膏，粉碎成粉末，加入相對(duì)于該粉末質(zhì)量1/10的淀粉，混合攪拌均勻 ，獲得免疫制劑。
【文檔編號(hào)】A61K36/9066GK103638471SQ201310692046
【公開日】2014年3月19日 申請(qǐng)日期:2013年12月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月17日
【發(fā)明者】郝智慧 申請(qǐng)人:郝智慧