專利名稱：調(diào)節(jié)肽gm21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用，屬于多肽技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
抗生素的廣泛應用，耐藥菌株和多重耐藥菌株日益增加，臨床抗感染治療已面臨嚴峻挑戰(zhàn)，尋找廣譜高效的抗細菌、抗病毒藥物，仍然是一個十分艱巨的任務?？咕氖莿游矬w內(nèi)極為重要的先天免疫物質(zhì)，是一種具有高效抗菌、抗病毒、免疫功能的生物活性因子?？咕氖撬拗鞣翘禺愋悦庖叻烙到y(tǒng)產(chǎn)生的一類對抗外源性病原體的肽類活性物質(zhì)， 是天然免疫的效應分子。研究表明，抗菌肽有著與傳統(tǒng)抗生素完全不同的作用機制，不易誘導耐藥菌株的產(chǎn)生；抗菌譜廣，對細菌、真菌、病毒、原蟲及癌細胞均有作用。在家禽上，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了 3 個家族的抗菌妝包括 cathelicidin, liver-expressed antimicrobial peptide(LEAP), and β-defensin。這些抗菌肽對于家禽抵抗細菌性、病毒性疾病具有至關(guān)重要的作用。相關(guān)這些基因的突變或者缺失對于家禽抗微生物感染的能力將有顯著的影響。這些些抗菌肽除了具有廣譜抗菌活性，同時還有高效的抗真菌、抗病毒、抗原蟲和(或)抗腫瘤活性，如Bat5和Mc7能殺滅鉤端螺旋體，對白色念珠菌、隱球菌和包膜病毒和寄生蟲都有較好的殺滅作用；一些抗菌肽對皰疹病毒、流感病毒、艾滋病病毒等有囊膜病毒有明顯的殺傷力。此外，有些抗菌肽同時還具有多種其他的調(diào)控功能，如Cathelicidin還具有促進傷口愈合、組織損傷修復、化學趨化作用、促血管生成和抗寄生蟲等功能，在調(diào)節(jié)動物機體免疫上有著重要生物學活性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用。本發(fā)明的所用的調(diào)節(jié)肽GM21采用常規(guī)的化學合成的方法獲得，調(diào)節(jié)肽GM21的分子量為2398. 66 Da,等電點為5. 45，氨基酸序列為AVLHAVDRINEQSSEANLYRL。該調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用。調(diào)節(jié)肽GM21的抗菌試驗，其試驗方案為常規(guī)方法，具體如下將已制備好的高柱肉湯瓊脂培養(yǎng)基加熱熔化后，待冷卻至50°C左右時，加入肉湯培養(yǎng)基菌液ImL (經(jīng)過恒溫37°C培養(yǎng)18小時的菌液)，輕輕搖動，使之均勻.然后倒入無菌的平皿內(nèi)，輕輕晃動平皿，以使培養(yǎng)基均勻地平鋪在平皿上，待冷卻凝固后，用消毒過的鑷子將青霉素干紙片、鏈霉素干紙片、四環(huán)素干紙片、磺胺嘧啶干紙片整齊有順序的放入平血內(nèi)，蓋上陶瓦蓋，標好記號置37°C恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時.24小時后取出培養(yǎng)基，用卡尺量取抑菌圈大小并記錄之，并比較不同抗菌藥物對不同細菌的作用強度。本發(fā)明的效果在于用調(diào)節(jié)肽GM21制備的調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物，抑菌效果明顯。


圖I是山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21對金黃色葡萄球菌的抑制效果。
具體實施例方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步的詳細說明。實施例所用的山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21采用常規(guī)的化學合成的方法獲得，山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21的分子量為2398. 66 Da,等電點為5. 45，氨基酸序列為AVLHAVDRINEQSSEANLYRLο 調(diào)節(jié)肽GM21的抗菌試驗具體步驟同發(fā)明內(nèi)容部分的描述。實施例I :免疫調(diào)節(jié)肽GM21對大腸桿菌的抑制作用。取6Pg/ml以及10 Pg/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21進行抑菌試驗。結(jié)果為6ug/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21僅有微弱的抑菌效果(圖l-B)，10ug/ml山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21抑菌效果很明顯(圖1-C)，圖I-A為山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21對照試驗。實施例2 免疫調(diào)節(jié)肽GM21對不同微生物的最低抑菌濃度。取不同濃度的山羊免疫調(diào)節(jié)肽GM21分別抑制大腸桿菌、綠膿桿菌、金色葡萄球菌，枯草桿菌以及白色念珠菌。其中表I為該多肽對大腸桿菌、綠膿桿菌、金色葡萄球菌，枯草桿菌以及白色念珠菌的最低抑制濃度分別為13. 88Pg/ml,29. 35Pg/ml,5. 38Pg/ml,27. 5M-g/ml, 13. 79M-g/ml 表I
微生物最低抑菌濃度@g/ml)
大腸桿菌08A86613.88
綠膿桿菌0803101429^5
金黃色葡萄球菌ATCC25925
枯草桿菌27.5
白色念珠菌 08030809 (Cl，DR)I 7 J
權(quán)利要求
1.分子量2398. 66 Da，等電點為5. 43，其全序列一級結(jié)構(gòu)為AVLHAVDRIN EQSSEANLYRL的調(diào)節(jié)肽 GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用，屬于多肽技術(shù)領(lǐng)域。分子量2398.66Da，等電點為5.43，其全序列一級結(jié)構(gòu)為AVLHAVDRIN EQSSEANLYRL的調(diào)節(jié)肽GM21在制備調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物中的應用。本發(fā)明的效果在于用調(diào)節(jié)肽GM21制備的調(diào)節(jié)山羊免疫功能藥物，抑菌效果明顯。
文檔編號A61K38/16GK102961735SQ201210533879
公開日2013年3月13日 申請日期2012年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月12日
發(fā)明者賴仞, 容明強 申請人:中國科學院昆明動物研究所