專利名稱：用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及組織工程學和材料學領域，具體地說，涉及用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片及其制備方法。
背景技術：
后鞏膜加固手術是治療進行性近視，高度近視安全有效的方法。在以往臨床應用中，后鞏膜加固手術所使用的材料，大多取自同種異體尸源身上的硬腦膜或鞏膜，經過眼科醫(yī)生的簡單處理后即直接用于手術臨床。然而，受到醫(yī)師技能水平和醫(yī)療條件的制約，自制的后鞏膜片質量標準不一，存在一定的手術風險，另外，如果尸源生前罹患某些重大疾病，則不適于作為供體。由于取材的限制使得后鞏膜加固手術發(fā)展緩慢，無法大規(guī)模推廣應用。

發(fā)明內容
本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術中存在的缺陷，提供一種基材來源廣泛，硬度和彈性適宜，易于植入且無排異反應的適用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片。本發(fā)明的另一目的是提供上述適用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片的制備方法。為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的一種用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片，所述異種鞏膜片包括三種規(guī)格第一種規(guī)格鞏膜片呈長方形，長為If 22mm，寬為8 12mm (優(yōu)選長X寬為20mmX10mm);第二種規(guī)格鞏膜片呈長方形，長為75 80mm,寬為8 12mm (優(yōu)選IOmm)；第三種規(guī)格鞏膜片呈左右不對稱的倒“凹”字形，且各邊具有一定弧度，該倒“凹”字形鞏膜片的長為2Γ26πιπι，寬為19 20mm ;以上三種規(guī)格鞏膜片的厚度均為O. 6-lmm ;鞏膜片的基材來源于動物的心包膜或鞏膜。所述動物為牛、豬或家兔等家畜。優(yōu)選兩年左右的健康家畜。本發(fā)明還提供上述用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片的制備方法，包括以下步驟I)基材選擇選取動物的心包膜或鞏膜；2)基材預處理除去心包膜或鞏膜上的多余組織(如脂肪組織)，然后將基材浸泡于去污劑中去除雜質,制成毛材；3)剪裁成形根據需要，將毛材剪裁或切割成所需規(guī)格的后鞏膜片形狀；4)脫細胞處理分別用胰蛋白酶液和TritonX-IOO處理成形的毛材，以充分消化和裂解細胞，制成精材；5)消毒殺菌對精材進行化學或物理滅菌；6)調pH值用pH值7. 2-7. 4的PBS緩沖液清洗滅菌后的精材，即得成品。前述方法中，步驟I)中所述動物為牛、豬或家兔等家畜。前述方法中，步驟2)中所述去污劑為氯己定，浸泡時間為30_40min。主要目的是利用去污劑對細胞膜脂和脂蛋白的破壞作用，破壞細菌胞漿膜上的滲透屏障，導致部分胞漿滲漏，胞漿凝聚變性，起到殺菌消毒作用。前述方法中，步驟4)中使用的胰蛋白酶液和TritonX-IOO的濃度分別為O. 25%和2%ο具體為將成形的毛材浸泡于胰蛋白酶液中12h，然后轉移至TritonX-IOO中振蕩處理36h。經抑制劑胰蛋白酶的消化，使細胞膜上的蛋白變性，通過胰蛋白酶對細胞核的水解作用，有效地去除了組織中的細胞成分。采用中性去污劑TrtionX-IOO在恒溫振蕩器中裂解細胞，經過處理的毛材保持天然的結構，蛋白結構保持穩(wěn)定狀態(tài)，使經過裂解的細胞喪失活力。前述方法中，步驟5)的滅菌方式優(yōu)選為用戊二醛處理精材lh。戊二醛能與蛋白質發(fā)生反應，從而殺滅各種微生物。前述方法中，步驟5)滅菌采用鈷-60輻照滅菌。前述方法中，還包括將鞏膜片成品保存于75%的乙醇溶液中。三種規(guī)格的異種后鞏膜片使用說明如下I、第一種規(guī)格為四片包裝的后鞏膜片，主要適用于近視度在20(Γ500度的輕度近視青少年患者。 2、第二種規(guī)格為一片包裝的后鞏膜片，主要適用于50(Γ900度的高度近視患者。3、第三種呈左右不對稱的倒“凹”字形的后鞏膜片，主要針對高度近視并發(fā)癥患者。采用去污劑聯(lián)合酶脫細胞技術可以徹底脫去組織中的所有細胞、抗原、脂質、可溶性蛋白質等雜質，保留具有完整外觀形態(tài)和組織學及超微結構的不溶性基質成分，主要包括膠原、彈性蛋白、蛋白多糖、糖胺多糖和非膠原糖蛋白等，除去了引起免疫反應的細胞成分，使基材只起到支架作用的載體。本發(fā)明使用異種家畜的心包膜或鞏膜替代同種人源鞏膜材料，解決了長期以來后鞏膜加固術材料資源稀缺，材料安全性差及受到醫(yī)學倫理的限制等問題，僅需對來源于家畜的心包膜或鞏膜基材進行清洗、去脂肪、去污、脫細胞、殺菌等加工處理工序。采用本發(fā)明方法制成的異體后鞏膜片，硬度和彈性適宜，順應性好，易于植入，容易與受體鞏膜貼付和縫合固定；植入人體后毒性低，機械強度高，無排異反應，組織相容性好，不會留下疤痕，抗降解能力強，不易鈣化，鞏膜片呈特殊形狀設計，能夠避免渦靜脈受壓和損傷，植入穿行過程中，不容易引起扭曲翻轉，可長期停留于體內，避免了因頻繁手術操作引起的并發(fā)癥，達到長期治療進行性近視和高度近視的效果。通過對四種后鞏膜材料(牛心包補片、豬心包補片、兔鞏膜片及人鞏膜片)進行力學試驗，結果表明牛心包是用于后鞏膜加固手術最佳的材料。


圖I為本發(fā)明實施例I的用于后鞏膜加固術的鞏膜片的制備工藝流程圖。圖2為本發(fā)明實施例I中制備的第一種規(guī)格的后鞏膜片。圖3為本發(fā)明實施例I中制備的第二種規(guī)格的后鞏膜片。圖4為本發(fā)明實施例I中制備的第三種規(guī)格的后鞏膜片。
具體實施例方式以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規(guī)手段，所用原料均為市售商品。實施例I用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片的制備
I材料及來源取屠宰的牛心包膜為基材，牛為檢疫無病，取材和運輸過程要注意無菌操作。2用于后鞏膜加固術的鞏膜片的制備工藝(參見圖I)2. I基材預處理去除心包膜上的雜質和多余部分(如脂肪組織)，以蒸餾水浸泡，崩解血細胞；然后將基材浸泡于去污劑氯己定中40min，去除雜質，制成毛材。2. 2剪裁成形去除經2. I處理后毛材上厚度、彈性、硬度和顏色不均的部分，選取厚度O. 6-lmm的部位，將毛材剪裁或切割成不同規(guī)格的形狀。2. 3脫細胞處理將成形的毛材浸泡于O. 25%的胰蛋白酶液中12h消化細胞，然后轉移至2%的中性去污劑TrtionX-IOO在恒溫(37°C )振蕩器中裂解細胞36h，制成精材。
2. 4消毒殺菌將上述制得的精材浸泡于戊二醛中l(wèi)h。2. 5調pH值滅菌結束后，取出精材用pH值7. 2-7. 4的PBS緩沖液清洗，即得用于后鞏膜加固術的鞏膜片成品。2. 6將鞏膜片成品保存于75%的乙醇溶液中備用。在進行后鞏膜加固手術時，可根據患者的實際需求對鞏膜片成品進行適當修剪。三種規(guī)格的異異種后鞏膜片及其使用說明I、第一種規(guī)格長X寬=20mmX IOmm (參見圖2)，為四片包裝的后鞏膜片，主要適 用于近視度在20(Γ500度的輕度近視青少年患者。2、第二種規(guī)格長X寬=75 80mmX IOmm (參見圖3)，為一片包裝的后鞏膜片，主要適用于500、00度的高度近視患者。3、第三種呈左右不對稱的倒“凹”字形的后鞏膜片(參見圖4)，主要針對高度近視并發(fā)癥患者。實施例2異種后鞏膜加固術后鞏膜片的生物力學特性的研究I材料及制備分別以牛心包補片、豬心包補片和兔鞏膜片為基材，同實施例I的制備工藝，制成相應的后鞏膜片。2不同材料的后鞏膜片的生物力學研究本實施例中，用顯微測厚儀測量后鞏膜的厚度，得出后鞏膜片的截面積。用萬能拉力機，對待測后鞏膜片施以不同的拉力，可測量后鞏膜片的力學性能。在對牛心包、豬心包、兔鞏膜的動物實驗的力學觀察中，選擇兔做為實驗對象。對實驗兔左眼實施后鞏膜加固手術，右眼不做手術，經過180天觀察，處死動物，取出實驗兔眼球在光鏡、透射電鏡下動態(tài)觀察。結果顯示牛心包補片材料最終被自身結締組織替代；牛心包補片逐漸形成植片纖維與自身結締組織相互交織的組織形態(tài)；材料的纖維成分與宿主纖維結締組織相互交織，其纖維成為支架，植片周圍亦包裹著纖維組織，不易移動和分離。光鏡下所見異物巨細胞和透射電鏡觀察細胞質內粗面內質網和核糖體增多，表明以上三種材料中，牛心包的單軸拉伸、蠕變、極限抗拉強都好于其他材料，同時會刺激宿主細胞代謝活動增強，組織增生活躍，但其成分并不被吸收，能夠與鞏膜形成牢固的關系。牛心包材料作為后鞏膜加固術治療是穩(wěn)定安全的最佳材料。雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的 范圍。
權利要求
1.用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片，其特征在于，所述鞏膜片包括三種規(guī)格第一種規(guī)格鞏膜片呈長方形，長為If 22mm，寬為8 12mm ;第二種規(guī)格鞏膜片呈長方形，長為75 80mm，寬為8 12mm ;第三種規(guī)格鞏膜片呈左右不對稱的倒“凹”字形，且各邊具有一定弧度，該倒“凹”字形鞏膜片的長為2r26mm，寬為19 20mm ;以上三種規(guī)格鞏膜片的厚度均為0.6-lmm ;異種鞏膜片的基材來源于動物的心包膜或鞏膜。
2.根據權利要求I所述的異種鞏膜片，其特征在于，所述動物為牛、豬或家兔。
3.用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片的制備方法，其特征在于， 包括以下步驟 1)基材選擇選取動物的心包膜或鞏膜； 2)基材預處理除去心包膜或鞏膜上的多余組織，然后將基材浸泡于去污劑中去除雜質，制成毛材； 3)剪裁成形根據需要，將毛材剪裁或切割成所需規(guī)格的后鞏膜片形狀； 4)脫細胞處理分別用胰蛋白酶液和TritonX-IOO處理成形的毛材，以充分消化和裂解細胞，制成精材； 5)消毒殺菌對精材進行化學或物理滅菌； 6)調pH值用pH值7.2-7. 4的PBS緩沖液清洗滅菌后的精材，即得成品。
4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟I)中所述動物為牛、豬或家兔。
5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述去污劑為氯己定，浸泡時間為30-40min。
6.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟4)中使用的胰蛋白酶液和TritonX-IOO的濃度分別為0. 25%和2%。
7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟4)具體為將成形的毛材浸泡于胰蛋白酶液中12h，然后轉移至TritonX-IOO中振蕩處理36h。
8.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟5)為用戊二醛處理精材lh。
9.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟5)為采用鈷60輻照滅菌。
10.根據權利要求3-9任一項所述的制備方法，其特征在于，將鞏膜片成品保存于75%的乙醇溶液中。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于后鞏膜加固術的異種鞏膜片及其制備方法。其基材來源廣泛，硬度和彈性適宜，順應性好，易于植入，容易與受體鞏膜貼付和縫合固定；植入人體后無毒性，機械強度高，無排異反應，組織相容性好，不會留下疤痕，抗降解能力強，不易鈣化，鞏膜片特殊的形狀設計，能夠避免渦靜脈受壓和損傷，植入穿行過程中，不容易引起扭曲翻轉，可長期停留于體內，避免了因頻繁手術操作引起的并發(fā)癥，達到長期治療進行性近視和高度近視的效果。
文檔編號A61L27/36GK102793593SQ20121032264
公開日2012年11月28日 申請日期2012年9月3日 優(yōu)先權日2012年9月3日
發(fā)明者于好勇 申請人:于好勇