專利名稱：一種光敏劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物制藥領(lǐng)域，更具體涉及由酞菁鋅配合物組成的光敏劑。
背景技術(shù)：
脂質(zhì)體是由類脂分子層形成的，內(nèi)部為水相的閉合囊泡，粒徑從幾十納米到幾十微米。脂質(zhì)體具有類似細胞結(jié)構(gòu)，有生物膜的特性和功能，它可以包裹水溶性和脂溶性藥物，水溶性藥物包裹于內(nèi)部水相中，脂溶性藥物插入于脂質(zhì)雙分子層，脂質(zhì)體作為藥物載體可以控制藥物的釋放，提高藥物的靶向性，降低藥物毒副作用、提高生物利用度、并具有長效緩釋作用。1998年第一個脂質(zhì)體制劑，即含益康唑的脂質(zhì)體凝膠“Pevary Lipogel”在瑞士 CILAG制藥公司注冊，并在瑞士、意大利、比利時和挪威等國上市銷售，脂質(zhì)體與生物膜親和力強，能提高藥物的粘膜透過性，如將青霉素脂質(zhì)體制成眼用制劑時，局部透過角膜的能力是單純藥物的4倍，實驗證明，只用原劑量的1/10即可具有角膜透過能力。此外，還有研究表明，脂質(zhì)體能與細菌膜融合，直接使藥物進入細胞漿，從而顯著增加藥物的抗菌能力。某些特殊的細胞如綠膿假單胞菌能產(chǎn)生磷脂酶，促使脂質(zhì)體在細菌的感染部位釋放高濃度藥物。近年來脂質(zhì)體局部給藥的研究開展廣泛，脂質(zhì)體對創(chuàng)傷或病變皮膚、粘膜起治療和保護作用，既有利于藥物與患處接觸，在局部發(fā)揮藥效，又可避免因全身吸收而產(chǎn)生的不良反應(yīng)。α-(8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅(簡稱F7)已獲得中國專利，專利號為 200810070879. 1，結(jié)構(gòu)如圖1所示。F7表現(xiàn)出很高的光動力活性，其對胃癌BGC-823細胞、肝癌BEL7402細胞和肝癌 HepG2細胞的半致死濃度IC5tl (細胞死亡50%的濃度)分別為0. 02,0. 024,0. 08mmol/L,且 F7對這幾種腫瘤細胞的暗毒性很低。在光照時，其光滅活癌細胞能力很強，這是作為理想光敏劑必備的條件。F7對正常HELF細胞無論是光毒性和暗毒性都很低，而且都低于其對癌細胞相應(yīng)的毒性。理想光敏劑應(yīng)該對癌細胞具有高的光毒性和低的暗毒性，且對正常細胞具有較低的光毒性和暗毒性，這樣才能在充分發(fā)揮光敏劑的光動力活性的同時又不損傷正常細胞，減少毒副作用。因此，以上研究結(jié)果表明F7是性能優(yōu)良的光敏劑，有望開發(fā)成為光動力治療用光敏劑。BEL7402癌細胞對F7的攝取率明顯高于正常細胞。F7的水溶性極差，幾乎不溶于水。這就給給藥途徑帶來了極大困難，特別是靜脈注射給藥，該缺陷大大限制了 F7在抗癌方面的使用范圍。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服以上問題，本發(fā)明提供了一種光敏劑及其制備方法和應(yīng)用，該光敏劑是由酞菁鋅配合物組成的脂質(zhì)體制劑，能在水溶液中均勻分散且穩(wěn)定存在，因而可以方便的作為注射藥物使用。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實施的 一種光敏劑是由酞菁鋅配合物組成的脂質(zhì)體制劑。
所述光敏劑的原料包括酞菁鋅配合物、磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑、有機溶劑和水。所述酞菁鋅配合物的摩爾濃度為1. 48-104. OOmmol/L，磷脂的濃度為0. l-10g/L, 磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為10:1-1:2，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為0.01%- ，有機溶劑體積與水的體積比為1:20-10:1。所述酞菁鋅配合物選自α - (8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅、α-(8-(4,6-二甲基-2-嘧啶氧基)_3，6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、β - (8- (4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)_3， 6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、雙α-(8-(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、α-喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅和β-喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅和二-α-喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅。 所述磷脂選自二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂膽酰、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、 卵磷脂、大豆磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、2，2-二羥甲基丙酸、磷脂酰甘油、疊氮磷酸二苯酯、飽和卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰甘油、氫化大豆卵磷脂、磷脂酰絲氨酸和鞘磷脂。所述的親脂性化合物選自C12-C18直連飽和或不飽和脂肪酸、單甘脂、生育酚和膽固醇。所述穩(wěn)定劑選自甘露醇、葡萄糖、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐溫、司盤和右旋糖苷。所述有機溶劑選自THF、乙醇、乙醚、氯仿和三氯甲烷。所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，酞菁鋅配合物和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為 1 20-10 1，邊加邊攪拌，加完后在溫度10-70°c條件下減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，得到單取代酞箐鋅脂質(zhì)體制劑，即所述的光敏劑。該制備方法得到的脂質(zhì)體的粒徑為50nm-5微米。所述應(yīng)用是該光敏劑作為一種光動力治療藥物使用。本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑的制備方法選自薄膜法、逆向蒸發(fā)法、熔融法、注入法、冷凍干燥法、表面活性劑法、復(fù)乳法和鈣融合法。但優(yōu)選注入法，即本發(fā)明所述的方法。由α - (8-喹啉氧基)單取代酞箐鋅組成的脂質(zhì)體，簡稱:￥!。本發(fā)明的優(yōu)點為
1)本發(fā)明制備的酞菁鋅配合物組成的脂質(zhì)體制劑是一種第三代光敏劑，因此其可以在水溶液中均勻分散且較長時間穩(wěn)定存在，且具有較高的靶向性，能更好的發(fā)揮藥效，因而可以方便的作為注射藥物使用，更好的發(fā)揮藥效。2)本發(fā)明制備的脂質(zhì)體制劑，可作為臨床治療的藥物制劑，用于抗癌及殺菌的治療。該制劑使用方便，療效顯著，安全可靠，對各類細菌具有廣泛的滅殺和抑制作用，對各種癌細胞具有很強的殺傷作用。3)本發(fā)明制備的脂質(zhì)體制劑的質(zhì)量安全可靠，根據(jù)中華人民共和國藥典2005年版二部，對脂質(zhì)體的質(zhì)量進行檢查。結(jié)果表明，該方法制備的脂質(zhì)體平均粒徑為50nm-5微米，分散系數(shù)為0. 01-0. 60。形態(tài)均一，包封率高，滲透率低，符合藥典對脂質(zhì)體制劑的各項要求。


圖1為α - (8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅的分子結(jié)構(gòu)式；
圖2為α - (8- (4，6- 二甲基-2-嘧啶氧基)_3，6_ 二氧雜辛氧基)酞菁鋅； 圖3為β - (8- (4，6- 二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6- 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅； 圖4為雙α - (8- (4，6- 二甲基-2-嘧啶氧基)_3，6_ 二氧雜辛氧基)酞菁鋅； 圖5為α-喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅，其中η=2、3、4、5、6、8、9、28 ； 圖6為β-喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅，其中η=2、3、4、5、6、8、9、28 ； 圖7為二 - α -喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅，其中η=2、3、4、5、6、8、9、28 ； 圖8為W7的UV-Vis光譜圖； 圖9為W7對胃癌BGC823細胞的光毒暗毒性測試； 圖10為W7對肝癌HepG2細胞的光毒暗毒性測試； 圖11為W7對正常細胞HepG2細胞的光毒暗毒性。
具體實施例方式一種光敏劑的原料包括酞菁鋅配合物、磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑和水。所述酞菁鋅配合物的摩爾濃度為1. 48-104. 00微mol/L，磷脂的濃度為0. I-IOg/ L,磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為10 1-1 2，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為0. 01%-2%,有機溶劑體積與水的體積比為1:20-10:1。所述磷脂選自二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂膽酰、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、 卵磷脂、大豆磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、2，2-二羥甲基丙酸、磷脂酰甘油、疊氮磷酸二苯酯、飽和卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰甘油、氫化大豆卵磷脂、磷脂酰絲氨酸和鞘磷脂。所述的親脂性化合物選自C12-C18直連飽和或不飽和脂肪酸、單甘脂、生育酚和膽固醇。所述穩(wěn)定劑選自甘露醇、葡萄糖、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐溫、司盤和右旋糖苷。所述有機溶劑選自THF、乙醇、乙醚、氯仿和三氯甲烷。所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，酞菁鋅配合物和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為 1 20-10 1，邊加邊攪拌，加完后在溫度10-70°C條件下減壓蒸發(fā)除去THF，得到酞菁鋅配合物脂質(zhì)體制劑，即所述的光敏劑。該制備方法得到的脂質(zhì)體的粒徑為50nm-5微米。所述應(yīng)用是該光敏劑作為一種光動力治療藥物使用。實施例1
一種光敏劑的原料包括α - (8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅、磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑、有機溶劑和水。所述α - (8-喹啉氧基)單取代酞箐鋅的摩爾濃度為1. 48微mol/L，磷脂的濃度為0. lg/L，磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為10:1，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為0. 01%，有機溶劑體積與水的體積比為1:20-10:1。所述磷脂選自二硬脂酰磷脂酰膽堿和二棕櫚酰磷脂膽酰。所述的親脂性化合物選自生育酚和膽固醇。所述穩(wěn)定劑選自司盤和右旋糖苷。
所述有機溶劑選自THF。所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，α - (8-喹啉氧基)單取代酞箐鋅和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為1:20，邊加邊攪拌，加完后在溫度10-70°C條件下減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，得到 α - (8-喹啉氧基)單取代酞箐鋅脂質(zhì)體制劑，即所述的第三代光敏劑。實施例2
一種第三代光敏劑的原料包括α - (8- (4，6- 二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6- 二氧雜辛氧基)酞菁鋅、磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑、有機溶劑和水，有機溶劑體積與水的體積比為 10:1。所述α-(8-(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅的摩爾濃度為104. 00微mol/L，磷脂的濃度為10g/L，磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為1 2，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為H所述磷脂為磷脂酰甘油。所述的親脂性化合物為C12-C18直連飽和脂肪酸。所述穩(wěn)定劑為甘露醇。所述有機溶劑選自氯仿。所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，α-(8_(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6_ 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為10:1，邊加邊攪拌，加完后在溫度 10-70°C條件下減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，得到α -(8-(4,6- 二甲基_2_嘧啶氧基)_3，6_ 二氧雜-ι-辛氧基)酞菁鋅脂質(zhì)體制劑，即所述的第三代光敏劑。實施例3
一種第三代光敏劑的原料包括雙α-(8-(4,6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6_ 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑、有機溶劑和水，有機溶劑體積與水的體積比為1: 1。所述雙α-(8-(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅的摩爾濃度為50mmol/L，磷脂的濃度為lg/L，磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為1:1，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為1%。所述磷脂為疊氮磷酸二苯酯。所述的親脂性化合物為單甘脂。所述穩(wěn)定劑為聚乙二醇。所述有機溶劑選自氯仿和三氯甲烷。所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，雙α-(8_(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3,6- 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為1:1，邊加邊攪拌，加完后在溫度 10-70°C條件下減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，得到雙α-(8-(4,6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3， 6- 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅脂質(zhì)體制劑，即所述的第三代光敏劑。性能測試
W7的光降解速率常數(shù)為0. 0039 mirT1，相同條件下F7的光降解速率常數(shù)為0. OHmirT1。說明W7比F7更穩(wěn)定。W7光敏化產(chǎn)生1O2速率常數(shù)為0.0114 mirT1，相同條件下F7光敏化產(chǎn)生1O2速率常數(shù)為0. 0035 mirT1。說明W7產(chǎn)生1O2的能力強于F7。W7光敏氧化酪氨酸的速率常數(shù)為0. 024 mirT1，相同條件下F7光敏化酪氨酸的速率常數(shù)為0.008 mirT1。說明W7光敏氧化酪氨酸的能力強于F7。由上述結(jié)果可知在光化學性質(zhì)方面，相對于F7，W7表現(xiàn)出作為光敏藥物的明顯優(yōu)勢。同時，由圖3，圖4可知，W7對胃癌BGC823細胞、肝癌H印G2細胞具有很強的殺傷作用，其IC50值都很低(分別為1.42ymol/LU.46ymol/L)0由圖5可知，W7對正常細胞HepG2細胞的光毒性暗毒性都比較低。在較高濃度范圍內(nèi)W7對正常細胞H印G2細胞都幾乎沒有光毒性和暗毒性。因此，W7具有很好的選擇性殺傷癌細胞。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
權(quán)利要求
1.一種光敏劑，其特征在于所述光敏劑是由酞菁鋅配合物組成的脂質(zhì)體制劑，其粒徑為50納米-5微米。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的光敏劑，其特征在于所述光敏劑的原料包括酞菁鋅配合物、 磷脂、親脂性化合物、穩(wěn)定劑、有機溶劑和水。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種光敏劑，其特征在于所述酞菁鋅配合物的摩爾濃度為1. 48-104. 00微mol/L,磷脂的濃度為0. l-10g/L,磷脂與親脂性化合物質(zhì)量比為 10:1-1:2，穩(wěn)定劑的質(zhì)量濃度為0. 01%- ，有機溶劑體積與水的體積比為1:20-10:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的光敏劑，其特征在于所述酞菁鋅配合物選自α-(8-喹啉氧基)單取代酞菁鋅、α-(8-(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6-二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、β-(8-(4,6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6_ 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、雙α-(8-(4， 6- 二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6- 二氧雜-1-辛氧基)酞菁鋅、α -喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅和β -喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅和二 - α -喹啉-低聚乙二醇酞菁鋅。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種光敏劑，其特征在于所述磷脂選自二硬脂酰磷脂酰膽堿、二棕櫚酰磷脂膽酰、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、卵磷脂、大豆磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、2，2-二羥甲基丙酸、磷脂酰甘油、疊氮磷酸二苯酯、飽和卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰甘油、 氫化大豆卵磷脂、磷脂酰絲氨酸和鞘磷脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種光敏劑，其特征在于所述的親脂性化合物選自C12-C18 直連飽和或不飽和脂肪酸、單甘脂、生育酚和膽固醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種光敏劑，其特征在于所述穩(wěn)定劑選自甘露醇、葡萄糖、 聚乙二醇、泊洛沙姆、吐溫、司盤和右旋糖苷。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種光敏劑，其特征在于所述有機溶劑選自THF、乙醇、乙醚、氯仿和三氯甲烷。
9.一種如權(quán)利要求1或3所述的光敏劑的制備方法，其特征在于所述制備方法包括以下步驟按所述比例將磷脂，膽固醇，酞菁鋅配合物和穩(wěn)定劑用有機溶劑溶解后，將所得溶液注入到蒸餾水中，其有機溶劑與蒸餾水體積比為1 20-10 1，邊加邊攪拌，加完后在溫度10-70°C條件下減壓蒸發(fā)除去有機溶劑，得到所述的光敏劑。
10.一種如權(quán)利要求1所述的光敏劑或如權(quán)利要求9所述的制備方法制備的光敏劑的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用是該光敏劑作為一種光動力治療藥物使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種光敏劑及其制備方法和應(yīng)用，所述光敏劑是由酞菁鋅配合物組成的脂質(zhì)體制劑。該脂質(zhì)體制劑可以在水溶液中均勻分散且較長時間穩(wěn)定存在，因而可以方便的作為注射藥物使用，且具有較高的靶向性，能更好的發(fā)揮藥效。同時，該制劑對各類細菌具有廣泛的滅殺和抑制作用，對各種癌細胞具有很強的殺傷作用，形態(tài)均一，包封率高，滲透率低，符合藥典對脂質(zhì)體制劑的各項要求。
文檔編號A61K47/28GK102284059SQ20111024171
公開日2011年12月21日 申請日期2011年8月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月23日
發(fā)明者劉宏, 方昱婷, 王立武, 薛金萍, 陳耐生, 黃金陵 申請人:福州大學