專利名稱：一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法。
背景技術(shù)：
靈芝，為多孔菌科真菌靈芝的子實(shí)體。味甘性平，功能益氣血、安心神、健脾胃。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，稱其有益心氣、補(bǔ)中、增智慧不忘、保神、益精氣、利關(guān)節(jié)、堅(jiān)筋骨、久服輕身延年不老等多種作用。靈芝孢子粉則為靈芝成熟時(shí)從菌蓋彈射的孢子。靈芝孢子經(jīng)破壁加工后，開(kāi)發(fā)成新的保健藥材，它濃縮了靈芝的精華，稟天地生云之氣，藥效及臨床應(yīng)用效果更有明顯提
尚ο靈芝孢子含有蛋白質(zhì)、氨基酸類、三萜類、多糖類、腺苷類、留醇類、生物堿類、脂肪酸類等化學(xué)物質(zhì)。現(xiàn)代藥理研究及臨床試驗(yàn)證實(shí)，靈芝孢子粉比靈芝具有更強(qiáng)更全面的作用，靈芝孢子具有抗染色體突變，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖、殺傷癌細(xì)胞，拈抗環(huán)磷酰胺引起的小鼠耐力下降、血紅蛋白與白細(xì)胞下降、巨噬細(xì)胞吞噬力下降和SGPT升高，抑制6tlCo照射引起的白細(xì)胞減少不良反應(yīng)、激活并提高特異性殺傷細(xì)胞(CTL)和非特異性殺傷細(xì)胞(NK、LAK)的抗腫瘤作用、增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，并具有抗脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)等作用。靈芝孢子油是從破壁靈芝孢子中通過(guò)(X)2超臨界萃取提取出來(lái)的天然成分，具有調(diào)節(jié)血脂，增強(qiáng)免疫，抗腫瘤等多方面的作用。相對(duì)于靈芝孢子粉，靈芝孢子油集中了靈芝孢子中的三萜類等成分，是靈芝孢子有效成分的集合體，是靈芝孢子的“精華”。但是，按照已有方法提取得到的靈芝孢子油對(duì)于抗腫瘤功效已達(dá)不到需求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述不足之處提供一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，該方法包括以下步驟a)、將破壁靈芝孢子粉放入萃取器中，通入CO2,控制萃取壓力20 35Mpa，萃取溫度35 65°C，萃取時(shí)間1 35小時(shí)；從萃取器流出的含有靈芝孢子油的(X)2進(jìn)入分離器， 控制分離器內(nèi)的分離壓力為8 lOMpa，從分離器底部分離得到萃取物；b)、將通過(guò)步驟“a) ”得到的萃取物超聲提取10 20分鐘，收集提取物；c)、將提取物離心10 20分鐘后靜置12小時(shí)以上，所得油液分為3層，取中層油液在溫度60 80°C，真空度0. IMPa條件下加熱0. 5 1. 5小時(shí)，冷卻。優(yōu)選在溫度60°C， 真空度0. IMPa條件下加熱1 1. 5小時(shí)。所述的超聲條件優(yōu)選采用功率2500W的超聲器。所述的離心轉(zhuǎn)速優(yōu)選為10000轉(zhuǎn)/分鐘。以下通過(guò)試驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明方法的效果做進(jìn)一步闡述。試驗(yàn)例1靈芝孢子油ig對(duì)小鼠移植瘤肉瘤S18tl實(shí)體型的抑制作用試驗(yàn)材料按照專利ZL99123952. 0實(shí)施例1的方法得到的孢子油為原靈芝孢子油。按照實(shí)施例1方法制備得到的靈芝孢子油為新靈芝孢子油。試驗(yàn)方法取ICR小鼠40只，按移植性腫瘤研究法接種S18tl實(shí)體型瘤(在無(wú)菌操作下取瘤塊，稱重，用玻璃組織勻漿器研磨，磨勻后放人無(wú)菌容器內(nèi)，加生理鹽水稀釋成1 3 的細(xì)胞懸液，容器置冰塊上，用空針抽吸，每次抽吸前將細(xì)胞混勻，每只小鼠右前肢腋窩皮下接種0. 2ml)，接種后M小時(shí)稱鼠重，并隨機(jī)分為4組，每組10只，空白對(duì)照組(0. 5% CMC-Na)、環(huán)磷酰胺O0mg/kg)組分別為陰、陽(yáng)性對(duì)照組，原靈芝孢子油組(160mg/kg)，新靈芝孢子油組(160mg/kg)。于接種M小時(shí)后給藥，ig給藥，每天一次，共給藥7次，于停藥后第2天處死荷瘤小鼠稱重，并分離瘤塊稱重，所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))，結(jié)果見(jiàn)表 1。表1.靈芝孢子油ig對(duì)小鼠移植瘤肉瘤S18tl實(shí)體型的抑制作用(I ± ^D ) (n = 10)
序號(hào)組別劑量 (mg/kg)體重(g) 給藥前給藥后瘤重 (g)抑瘤率 (%)1陰性對(duì)照(CMC)-19.68±1.2926.11±2.731.72±0.410.002原靈芝孢子油16019.78±1.2926.36±2.431.30±0.2745.28**3新靈芝孢子油16019.87±1.2527.30±2.381.14±0.3255.57**4陽(yáng)性對(duì)照(CY)2019 31±1.1023.61±1.72*0.61±0.2064 34***Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01 與空白組比較試驗(yàn)例2靈芝孢子油ig對(duì)小鼠胸腔積液中原代腫瘤細(xì)胞的抑制作用試驗(yàn)材料按照專利ZL99 1 23952. 0實(shí)施例1的方法得到的孢子油為原靈芝孢子油。按照實(shí)施例1方法制備得到的靈芝孢子油為新靈芝孢子油。實(shí)驗(yàn)方法取上述規(guī)格ICR小鼠40只，按移植性腫瘤研究法接種原代腫瘤細(xì)胞 (在無(wú)菌操作下取瘤塊，稱重，用玻璃組織勻漿器研磨，磨勻后放人無(wú)菌容器內(nèi)，加生理鹽水稀釋成1 3的細(xì)胞懸液，容器置冰塊上，用空針抽吸，每次抽吸前將細(xì)胞混勻，每只小鼠右前肢腋窩皮下接種0. 2ml)，接種后M小時(shí)稱鼠重，并隨機(jī)分為4組，每組10只，空白對(duì)照組(0. 5% CMC-Na)、環(huán)磷酰胺(20mg/kg)組分別為陰、陽(yáng)性對(duì)照組，原靈芝孢子油組(160mg/ kg)，新靈芝孢子油組(160mg/kg)。于接種M小時(shí)后給藥，ig給藥，每天一次，共給藥7次， 于停藥后第2天處死荷瘤小鼠稱重，并分離瘤塊稱重，所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))， 具體結(jié)果見(jiàn)表2。表2靈芝孢子油ig對(duì)小鼠胸腔積液中原代腫瘤細(xì)胞的抑制作用(I ± ^D ) (n = 10)
權(quán)利要求
1.一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，其特征在于該方法包括以下步驟a)、將破壁靈芝孢子粉放入萃取器中，通入CO2,控制萃取壓力20 35Mpa，萃取溫度 35 65°C，萃取時(shí)間1 35小時(shí)；從萃取器流出的含有靈芝孢子油的(X)2進(jìn)入分離器，控制分離器內(nèi)的分離壓力為8 lOMpa，從分離器底部分離得到萃取物；b)、將通過(guò)步驟“a)”得到的萃取物超聲提取10 20分鐘，收集提取物；c)、將提取物離心10 20分鐘后靜置12小時(shí)以上，所得油液分為3層，取中層油液在溫度60 80°C，真空度0. IMPa條件下加熱0. 5 1. 5小時(shí)，冷卻。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，其特征在于在溫度 60°C，真空度0. IMPa條件下加熱1 1. 5小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，其特征在于所述的超聲條件為采用功率2500W的超聲器。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，其特征在于所述的離心轉(zhuǎn)速為10000轉(zhuǎn)/分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種提高靈芝孢子油抗腫瘤功效的加工方法，該方法是將破壁靈芝孢子粉提取得到靈芝孢子油，再超聲、離心后靜置，所得油液分為3層，取中層油液在溫度60～80℃，真空度0.1MPa條件下加熱后，冷卻。通過(guò)采用本發(fā)明靈芝孢子油的加工方法能進(jìn)一步提高靈芝孢子油的抗腫瘤功效，抑瘤率達(dá)到55％以上。
文檔編號(hào)A61K36/074GK102379906SQ20111016883
公開(kāi)日2012年3月21日 申請(qǐng)日期2011年6月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月22日
發(fā)明者馮敏, 沈建, 王云鵬, 錢(qián)一帆 申請(qǐng)人:南京中科藥業(yè)有限公司