專利名稱：防粘連材料的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及防止術后臟器粘連的防粘連材料。另外，本發(fā)明涉及羧甲基纖維素(CMC)結構體及其制備方法。本發(fā)明的CMC結構體例如可用作醫(yī)療材料，更具體而言，可用于要求在生物體內保持一定時間形狀后被吸收/排泄的性質的物品，例如防粘連材料、片狀纖蛋白粘合劑用基材、DDS用基材、吸收性縫合增強材料、人造硬膜、骨接合材料、吸收性縫合線等。
背景技術：
在心臟外科、整形外科、腦神經外科、腹部外科、婦產科等臨床領域，在各種外科手術后或由于外傷，患部與其周圍的生物體組織粘連會導致重大問題。例如，引起疼痛或功能障礙，當嚴重時，可引起腸梗阻等，往往需要另外實施用以剝離上述粘連的手木。另外，由于 粘連，也會產生針對原疾病的再次手術變難的問題。因此，目前為防止生物體組織的粘連，開發(fā)出覆蓋、保護有發(fā)生粘連之虞的組織的防粘連材料，實際上，再生氧化纖維素布和透明質酸鈉 羧甲基纖維素混合膜等作為防粘連材料已實用化。關于防粘連材料，為了具體發(fā)揮防粘連功能，防粘連材料需要在必要的時間內存在于有粘連之虞的應用部位(患部)，在作為上述應用部位的組織間的屏障發(fā)揮作用后，最終被分解，被生物體所吸收。換句話說，防粘連材料要求生物相容性、生物吸收性、時間控制等優(yōu)異。但是，如上所述的現(xiàn)有防粘連材料例如難以控制在體內存在的時間，或即使生物體組織無粘連之虞，還存在于體內，由此對患者造成負擔。為消除此類缺點，專利文獻I中公開了以含有溶解性半衰期為5小時 30小時的水難溶性化的羧甲基纖維素為特征的防粘連材料。該水難溶性化的羧甲基纖維素例如可通過以下方法獲得將水溶性的羧甲基纖維素鈉(鈉型CMC)溶于蒸餾水以達到1%質量后，將該水溶液的PH用IN硝酸調節(jié)至I. 5，將該酸性溶液于-20°C靜置3日后，于25°C解凍，從而得到海綿狀的水難溶性化的羧甲基纖維素(實施例I)。即，專利文獻I中記載的水難溶性化的羧甲基纖維素在通過酸處理而完全轉化為酸型CMC后，經凍結和解凍獲得。該防粘連材料的特征在于可控制溶解性半衰期的方面，但到底只是半衰期，存在發(fā)揮完作用的防粘連材料完全不溶而殘留于體內的可能性，無法完全消除對患者的負擔。另外，術后臟器粘連可引起疼痛、不孕、腸梗阻(腸梗阻，ileus)等并發(fā)癥，使術后患者的QOL (生活質量，quality of life)惡化。特別是婦產科領域的粘連是成為不孕癥病因的重大問題。據(jù)說主要的婦產科手術的約90%會發(fā)生粘連。在防止術后粘連方面，以通過密封手術創(chuàng)傷部分來防止與鄰近臟器的粘連的方法為主。例如，專利文獻2中公開了使用水溶性羧甲基纖維素鈉的1%水溶液作為注入腹腔內的防粘連材料的技術，或者專利文獻3中公開了使用水難溶性化的羧甲基纖維素(酸型羧甲基纖維素)的膜作為防粘連材料的技木。另外，作為市售的防粘連材料，已知有
Seprafilm (セプラフイルム)(Genzyme Japan K. K.(ジニンザイム ジャパン)，以2:1
的比例(重量比)含有透明質酸鈉和羧甲基纖維素的半透明膜狀防粘連材料)、Interceed(インタ一シ一ド)(Johnson & Johnson K. K.(ジヨンソン エンド ジヨンソン)，再
生氧化纖維素網)，但期待具有更優(yōu)異的防粘連效果的防粘連材料。例如，在上述專利文獻3中記載有使用羧甲基纖維素鈉水溶液的防粘連材料的效果雖然被確認，但未得到充分的效果的內容。另外，S^rafilm (セブラフイルム)由于一旦潤濕則會自身相互粘附，和若用濕潤的手接觸則會粘在手上而難以重新粘貼的方面，以及取決于保管條件，若過度干燥則會破裂的方面，和密封的操作復雜，從該方面也無法期待充分的防粘連效果。技術文獻 專利文獻
專利文獻I :日本特開2004-51531號公報 專利文獻2 :日本特開平1-301624號公報 專利文獻3 :國際公開W001/034214號小冊子。

發(fā)明內容
發(fā)明所要解決的課題
作為需要在生物體內植埋一定時間的醫(yī)療材料(例如防粘連材料)，為完全消除對患者的負擔，希望在其功能變得不再需要后(例如就防粘連材料而言，在生物體組織粘連的可能性消失后)迅速溶解，為生物體所吸收。即，僅憑對溶解性半衰期的控制并不足夠，希望可控制作用發(fā)揮時間和溶解時間?；蛘?，公知堿金屬型CMC (特別是鈉型CMC)具有創(chuàng)傷愈合效果，若術后可對患部緩慢釋放此類堿金屬型CMC，則使得在發(fā)揮防粘連效果的同時順利的創(chuàng)傷愈合持續(xù)進展，合
乎需要。本發(fā)明人為獲得這樣的CMC結構體而深入研究的結果發(fā)現(xiàn)，通過對水易溶性的堿金屬型CMC構成的結構體在維持其結構的狀態(tài)下進行部分酸處理，或對酸型CMC構成的結構體在維持其結構的狀態(tài)下進行部分堿處理(例如通過在完全進行堿金屬型CMC構成的結構體的上述酸處理后進行堿處理)，可獲得水易溶性的堿金屬型CMC與水難溶性的酸型CMC混雜的新型CMC結構體，這些結構體可發(fā)揮上述性能。因此，本發(fā)明的第I課題在于，提供可提供作為醫(yī)療材料，特別是防粘連材料有用的新型CMC結構體的制備方法，進而提供生物相容性、生物吸收性優(yōu)異，并且作用發(fā)揮時間和溶解時間可控的CMC結構體，或可同時發(fā)揮防粘連效果和創(chuàng)傷愈合效果的CMC結構體。另外，本發(fā)明的第2課題在于，提供具有比現(xiàn)有產品更優(yōu)異的防粘連效果的防粘連材料。本發(fā)明人為解決上述課題而刻苦努力時發(fā)現(xiàn)，通過以纖維狀形態(tài)使用已知作為防粘連材料未示出充分的效果的羧甲基纖維素鈉，即使與目前市售的已知作為防粘連材料示出最優(yōu)異的效果的S印rafilm (セブラフイルム)相比，也示出同等或在它之上的優(yōu)異的防粘連效果，從而完成本發(fā)明。需說明的是，在羧甲基纖維素鈉作為防粘連材料的用途方面，若附帯說本專利申請時的技術常識，則推測上述S印rafilm (セブラフイルム)以2:1的比例(重量比)含有透明質酸鈉和羧甲基纖維素作為原料的理由為，由于羧甲基纖維素鈉單獨的防粘連效果不充分，所以與透明質酸鈉合用。另外，在本發(fā)明人已知范圍內，不存在實質上僅由羧甲基纖維素鈉構成的防粘連材料市售品，從這一點也可知単獨使用羧甲基纖維素鈉時防粘連效果不充分為本專利申請時的技術常識。因此，根據(jù)本專利申請時的上述技術常識，通過以纖維狀形態(tài)使用羧甲基纖維素鈉而示出比市售的S印rafilm (セブラフイルム)優(yōu)異的防粘連效果是極其意外并且預想不到的發(fā)現(xiàn)。解決課題的手段 本發(fā)明涉及
[1]羧甲基纖維素結構體，其特征在于，實質上由羧甲基纖維素構成，處于酸型羧甲基纖維素與堿金屬型羧甲基纖維素混雜的狀態(tài)；
[2][I]的羧甲基纖維素結構體，其中，形狀為纖維片、膜或海綿；
[3][I]或[2]的羧甲基纖維素結構體，其中，在體內的作用持續(xù)時間為5小時飛個 月；
[4]防粘連材料，其特征在于，含有[1] [3]的羧甲基纖維素結構體；
[5][1] [3]的羧甲基纖維素結構體或[4]的防粘連材料的制備方法，其特征在于，從外側對由堿金屬型羧甲基纖維素構成的結構體進行酸處理(特別是浸潰于酸性溶液中)，在堿金屬型羧甲基纖維素完全轉化為酸型羧甲基纖維素前結束上述酸處理(特別是浸潰)；
[6][ir[3]的羧甲基纖維素結構體或[4]的防粘連材料的制備方法，其特征在于，從外側對由酸型羧甲基纖維素構成的結構體進行堿處理(特別是浸潰于堿性溶液中)，在酸型羧甲基纖維素完全轉化為堿金屬型羧甲基纖維素前結束上述堿處理；
[7]通過調節(jié)從外側對由堿金屬型羧甲基纖維素構成的結構體進行酸處理的時間(特別是浸潰于酸性溶液中的時間)，從而控制由羧甲基纖維素構成的結構體在體內的作用持續(xù)時間的方法；
[8]通過調節(jié)從外側對由酸型羧甲基纖維素構成的結構體進行堿處理的時間(特別是浸潰于堿性溶液中的時間)，從而控制由羧甲基纖維素構成的結構體在體內的作用持續(xù)時間的方法。
以下往往將這些本發(fā)明稱為本發(fā)明的第I發(fā)明。另外，本發(fā)明涉及
[1]防粘連材料，其特征在于，實質上由纖維狀堿金屬型羧甲基纖維素構成；
[2][I]的防粘連材料，其中，単位面積重量為l(T300g/m2;
[3][I]或[2]的防粘連材料，其中，分子量為2萬 200萬道爾頓。
以下往往將這些本發(fā)明稱為本發(fā)明的第2發(fā)明。發(fā)明的效果
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，可提供作為醫(yī)療材料，特別是防粘連材料有用的新型CMC結構體。通過本發(fā)明的制備方法獲得的CMC結構體可控制作用發(fā)揮時間和溶解時間，作為要求在生物體內保持一定時間形狀后被吸收/排泄的性質的物品的材料優(yōu)異?；蛘撸赏瑫r發(fā)揮防粘連效果和創(chuàng)傷愈合效果。另外，本發(fā)明的防粘連材料與公知的市售的各種防粘連材料相比，示出優(yōu)異的防粘連效果。


[圖I]示出在實施實施例1(1)中的鹽酸處理前無紡布試驗片(鹽酸未處理)形狀的代替附圖的照片。[圖2]示出將無紡布試驗片(鹽酸處理時間=2小時)用MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)10日后的形狀的代替附圖的照片。[圖3]示出將無紡布試驗片(鹽酸處理時間=4小時)用MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)10日后的形狀的代替附圖的照片。[圖4]示出將無紡布試驗片(鹽酸處理時間=6小時)用MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)10日 后的形狀的代替附圖的照片。[圖5]示出針對本發(fā)明的防粘連材料和比較用的市售品(Seprafilm(セプラフィルム))使用豬評價防粘連效果的結果(實施例4)的圖。[圖6]示出針對本發(fā)明的防粘連材料和比較用的各種防粘連材料使用小鼠評價防粘連效果的結果(實施例7)的圖。[圖7]示出針對本發(fā)明的防粘連材料和比較用的市販品(Seprafilm(セプラフィルム))使用小鼠評價防粘連效果的結果(實施例9)的圖。
具體實施例方式本發(fā)明的羧甲基纖維素(CMC)結構體例如可通過本發(fā)明的制備方法獲得，實質上由羧甲基纖維素構成，處于酸型羧甲基纖維素與堿金屬型羧甲基纖維素混雜的狀態(tài)。在本說明書中“羧甲基纖維素(CMC)”只要無特殊說明，均以包含易溶于水的堿金屬型羧甲基纖維素(以下稱堿金屬型CMC)和難溶于水的酸型羧甲基纖維素(狹義的羧甲基纖維素，以下稱酸型CMC)的含義使用。作為上述堿金屬型CMC，例如可列舉出羧甲基纖維素鈉(Na型CMC)、羧甲基纖維素鉀等。以下在對本發(fā)明的第I發(fā)明進行說明后，對本發(fā)明的第2發(fā)明進行說明?！侗景l(fā)明的第I發(fā)明》
在本發(fā)明的制備方法中，對堿金屬型CMC (優(yōu)選Na型CMC)構成的結構體在維持其結構的狀態(tài)下進行酸處理，在堿金屬型CMC完全轉化為酸型CMC前，例如酸處理到達上述結構體的中心部或內側部分前結束上述酸處理(以下稱第I制備方法)?；蛘撸瑢λ嵝虲MC構成的結構體在維持其結構的狀態(tài)下進行堿處理，在酸型CMC完全轉化為堿金屬型CMC (優(yōu)選Na型CMC)前，例如堿處理到達上述結構體的中心部或內側部分前結束上述堿處理(以下稱第2制備方法)。堿金屬型CMC構成的結構體由于為水易溶性，所以容易通過加水形成水溶液，失去其結構，但在本發(fā)明的制備方法中，例如通過使用含有低級醇的溶劑實施酸處理或堿處理，可維持其結構。作為第I制備方法中的上述酸處理，可列舉出結構體在酸性溶液中的浸潰、酸性溶液在結構體表面的涂布或噴霧等。例如，作為上述酸處理，當進行在酸性溶液中的浸潰時，將堿金屬型CMC構成的結構體浸潰于酸性溶液中，在酸性溶液到達上述結構體的中心部或內側部分前結束上述浸潰。另外，第2制備方法中的上述堿處理除使用堿性溶液代替酸性溶液以外，與上述酸處理一祥，也可列舉出結構體在堿性溶液中的浸潰、堿性溶液在結構體表面的涂布或噴霧等。例如，作為上述堿處理，當進行在堿性溶液中的浸潰時，將酸型CMC構成的結構體浸潰于堿性溶液中，在堿性溶液到達上述結構體的中心部或內側部分前結束上述浸潰。第I制備方法中使用的堿金屬型CMC結構體例如可通過以下方法制備對任意的CMC構成的結構體進行堿處理，完全轉化為堿金屬型CMC，或由堿金屬型CMC直接形成結構體。另外，第2制備方法中使用的酸型CMC結構體例如可通過以下方法制備對任意的CMC構成的結構體(例如將任意的CMC構成的結構體通過堿處理完全轉化為堿金屬型CMC而成的堿金屬型CMC結構體)進行酸處理，完全轉化為酸型CMC，或由酸型CMC直接形成結構體。
本發(fā)明中可使用的CMC可使用能夠用作醫(yī)療材料的各種CMC，例如可使用醚化度為0. 5^1. 5、優(yōu)選0. 5^1的CMC，分子量(以出芽短梗孢糖(pullulan)為指標時)為2萬 200萬Da、優(yōu)選2萬 100萬Da的CMC。本發(fā)明的第I制備方法中使用的上述酸性溶液只要在對堿金屬型CMC結構體進行酸處理(例如浸潰于酸性溶液中)時可緩慢滲透至堿金屬型CMC結構體的內部，并且可將形成結構體的堿金屬型CMC置換為酸型CMC，則無特殊限定。例如可使用鹽酸、硫酸、硝酸、醋酸等。作為酸濃度，例如可為0. Of 4. 8當量濃度、優(yōu)選0. r3. 6當量濃度、更優(yōu)選0. 5^2. 4當量濃度。需說明的是，堿金屬型CMC結構體由于由易溶于水的堿金屬型CMC構成，所以作為溶劑優(yōu)選使用以低級醇(例如甲醇、こ醇、異丙醇)為主體的醇水溶液(作為醇濃度，例如為60%以上、優(yōu)選70%以上、更優(yōu)選80%以上)。本發(fā)明的第2制備方法中使用的上述堿性溶液只要在對酸型CMC結構體進行堿處理(例如浸潰于堿性溶液中)時可緩慢滲透至酸型CMC結構體的內部，并且可將形成結構體的酸型CMC置換為堿金屬型CMC，則無特殊限定。例如可使用氫氧化鈉、氫氧化鋰、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋇、胍的各自的水溶液。作為濃度，例如可為0. 0廣5當量濃度、優(yōu)選0. r4當量濃度、更優(yōu)選0. 3^3當量濃度。在第2制備方法中，由于進行堿處理獲得的反應生成物中含有易溶于水的堿金屬型CMC，所以作為溶劑優(yōu)選使用以低級醇(例如甲醇、こ醇、異丙醇)為主體的醇水溶液(作為醇濃度，例如為60%以上、優(yōu)選70%以上、更優(yōu)選80%以上)。在酸性溶液或堿性溶液中的浸潰時間可考慮所使用的堿金屬型CMC結構體或酸型CMC結構體的形狀、酸性溶液或堿性溶液的種類、濃度、pH、溫度、產品所要求的在生物體內的功能(即作用發(fā)揮時間、溶解時間)等條件適宜確定，例如可通過如下述實施例所示的簡單的小規(guī)模試驗來確定。具體而言，可通過改變浸潰時間來準備不同的多個樣品[參照實施例1(1)、實施例2(1)]，通過使用適當?shù)娜芙庠囼炗萌芤旱娜芙馑俣仍囼瀬磉x擇示出所希望的溶解分布曲線的樣品[參照實施例1(2)、實施例2(2)]，從而確定浸潰時間。作為上述溶解試驗用溶液，可使用盡可能忠實再現(xiàn)生物體內條件的試驗用溶液，或者也可使用以迅速評價為先的試驗用溶液(例如實施例I (2)中記載的MEM培養(yǎng)基)。通過本發(fā)明的第I制備方法獲得的本發(fā)明的CMC結構體中，關于酸型CMC與堿金屬型CMC的混雜狀態(tài)，由于可考慮產品所要求的在生物體內的功能，通過CMC結構體的形狀、酸處理的條件等適宜確定，所以無特殊限定，但由其制備方法可知，酸型CMC與堿金屬型CMC混雜遍及該結構體的表面至中心部的全部區(qū)域，在其含有比率方面，在表面為酸型CMC占優(yōu)勢，在中心部為堿金屬型CMC占優(yōu)勢，可列舉出該含有比率從表面向中心部連續(xù)或間斷變化的混雜狀態(tài)，或外側部分為酸型CMC，內側部分為堿金屬型CMC的混雜狀態(tài)等。另外，在通過本發(fā)明的第2制備方法獲得的本發(fā)明的CMC結構體中，除將酸型CMC與堿金屬型CMC的構成反轉以外，也示出同樣的混雜狀態(tài)。即，酸型CMC與堿金屬型CMC混雜遍及該結構體從表面至中心部的全部區(qū)域，在其含有比率方面，在表面堿金屬型CMC占優(yōu)勢，在中心部酸型CMC占優(yōu)勢，可列舉出其含有比率從表面向中心部連續(xù)或間斷變化的混雜狀態(tài)，或外側部分為堿金屬型CMC，內側部分為酸型CMC的混雜狀態(tài)等。需說明的是，當外側部分為酸型CMC，內側部分為堿金屬型CMC時，或外側部分為堿金屬型CMC，內側部分為酸型CMC時，其中間部分無特殊限定，例如為酸型CMC或堿金屬型CMC中的任一方時，可為酸型CMC與堿金屬型CMC混雜的狀態(tài)等。本發(fā)明的CMC結構體的形狀無特殊限定，但優(yōu)選可用作醫(yī)療材料的形狀。作為本 發(fā)明的CMC結構體，例如可列舉出纖維片(例如編織品、織布、無紡布)、膜或海綿。將CMC構成的結構體浸潰于溶液中時，溶液緩慢滲透至結構體內部的現(xiàn)象進展。在本說明書中，結構體“外側部分”、“中間部分”、“內側部分”指，將從在溶液中的浸潰開始至對結構體整體的滲透完成為止的過程分為初期、中期、后期時，分別將在初期階段溶液所滲透的區(qū)域稱為“外側部分”，將在后期階段溶液所滲透的區(qū)域稱為“內側部分”，將“外側部分”與“內側部分”之間的區(qū)域稱為“中間部分”。另外，結構體的“表面”指將結構體浸潰于溶液中時，在剛浸潰后溶液所接觸的區(qū)域。例如，當CMC構成的結構體為膜時，其表面指膜表面，而當CMC構成的結構體為纖維片(例如編織物、織布、無紡布)時，其表面并不是表觀的片表面，而是指各組成纖維的纖維表面。另外，對于外側部分和內側部分，在膜的情況下，直接指膜的外側部分和內側部分，在纖維片的情況下，并非指作為纖維片的外側部分和內側部分，而是指各組成纖維的外側部分和內側部分。本發(fā)明的CMC結構體在酸型CMC與堿金屬型CMC混雜遍及從表面至中心部的全部區(qū)域吋，由于緩慢釋放出具有創(chuàng)傷愈合效果的堿金屬型CMC，所以可同時發(fā)揮防粘連效果和創(chuàng)傷愈合效果。另外，本發(fā)明的CMC結構體在外側部分由水難溶性的酸型CMC構成，內側部分由水易溶性的堿金屬型CMC構成時，例如作為防粘連材料留置于生物體內時，外側的酸型CMC部分緩慢溶解。但是，若外側的酸型CMC部分溶解，內側的堿金屬型CMC部分露出，則由于內側部分迅速溶解，因此以此時刻為界，CMC結構體的形狀急劇發(fā)生變化。即，就這樣的本發(fā)明的CMC結構體而言，在內側的堿金屬型CMC部分露出為止的時間(作用發(fā)揮時間)，和在內側的堿金屬型CMC部分露出后的時間(溶解時間)，作為CMC結構體整體的表觀溶解速度急劇發(fā)生變化，所以使得發(fā)揮過作用的CMC結構體被迅速從生物體內排除。另外，本發(fā)明的CMC結構體在外側部分由水易溶性的堿金屬型CMC構成，內側部分由水難溶性的酸型CMC構成時，例如適合在留置后希望在初期階段發(fā)揮創(chuàng)傷愈合效果的情況。此時，使得具有創(chuàng)傷愈合效果、為水易溶性的堿金屬型CMC在初期階段迅速對臟器等起作用，然后殘存的內側部分的酸型CMC在留置的最適時間內發(fā)揮作用。關于本發(fā)明的CMC結構體，例如在作為術后粘連的預防用途(例如防粘連材料)使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選2日 14日，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的5小時或比通常時間長的6個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選I日個月，更優(yōu)選I日 I個月)。優(yōu)選可通過目測確認在體內的存在，例如可在腹腔內、骨盆腔內使用。當作為片狀纖蛋白粘合劑用基材使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選2日個月，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的I日或比通常時間長的3個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選I日 I個月)。優(yōu)選具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在腹腔內、骨盆腔內、胸腔內使用。通過在本發(fā)明的CMC結構體上擔載纖蛋白粘合劑(例如凝血酶/纖維蛋白原)，可制備片狀纖蛋 白粘合剤。當作為載藥用基材(例如DDS用基材)使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選I周個月，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的I日或比通常時間長的6個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選4日個月，更優(yōu)選I周 I個月)。優(yōu)選可通過目測確認在體內的存在，例如可在腹腔內、骨盆腔內、胸腔內、顱使用。當作為組織結合部等的增強用補片用途(例如吸收性縫合增強材料)使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選I周個月，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的3日或比通常時間長的6個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選3日 3個月，更優(yōu)選3日 2個月)。優(yōu)選具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在腹腔內、骨盆腔內、胸腔內、顱中使用。當作為硬膜替代品用途(例如人造硬膜)使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選4個月I個月，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的I個月或比通常時間長的24個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選3個月 12個月)。優(yōu)選具有充分的強度(例如IMPa以上)，可在顱中使用。當作為用以固定骨與骨的骨接合材料用途(例如螺釘、螺帽、螺桿、板等)使用吋，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選3個月飛個月，但若采用本發(fā)明技術，上述時間可為比通常時間短的I個月或比通常時間長的24個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選I個月 12個月，更優(yōu)選2個月、個月)。優(yōu)選具有充分的強度(例如IMPa以上)，可在全身的骨骼中使用。當作為吸收性縫合線使用時，在體內的作用持續(xù)時間通常認為優(yōu)選I周個月，但若采用本發(fā)明技術，則上述時間可為比通常時間短的I周或比通常時間長的24個月，可按照手術或癥狀適應所希望的時間(優(yōu)選I周 12個月，更優(yōu)選I周飛個月)。優(yōu)選具有充分的強度(例如IMPa以上)，例如可在全身各臟器或組織、顱、皮膚中使用?！侗景l(fā)明的第2發(fā)明》
本發(fā)明的防粘連材料實質上由纖維狀堿金屬型羧甲基纖維素構成，優(yōu)選僅由纖維狀堿金屬型羧甲基纖維素構成。在本說明書中“羧甲基纖維素(CMC)”如在本發(fā)明的第I發(fā)明中所述，只要無特殊說明，均以包含易溶于水的堿金屬型羧甲基纖維素(以下往往稱堿金屬型CMC)和難溶于水的酸型羧甲基纖維素(狹義的羧甲基纖維素，以下往往稱酸型CMC)的含義使用。
本發(fā)明中使用的羧甲基纖維素為堿金屬型羧甲基纖維素。作為堿金屬型羧甲基纖維素，例如可列舉出羧甲基纖維素鈉(Na型CMC)、羧甲基纖維素鉀等。本發(fā)明中使用的堿金屬型羧甲基纖維素在pH7. 4下羧甲基解離，處于陰離子的狀態(tài)。因此，上述堿金屬型羧甲基纖維素可在PH7.4下與堿性蛋白質(例如趨化因子、肝素結合細胞因子等)進行離子結合。在本發(fā)明中，可使用能夠用作醫(yī)療材料的各種堿金屬型羧甲基纖維素，例如可使用醚化度為0. 5^1. 5、優(yōu)選0. 5 1、更優(yōu)選0. 6^0. 9的堿金屬型羧甲基纖維素、分子量(以出芽短梗孢糖為指標時)為2萬 200萬Da、優(yōu)選2萬 100萬Da、更優(yōu)選2萬 50萬Da的堿
金屬型羧甲基纖維素。
本發(fā)明中使用的堿金屬型羧甲基纖維素的形狀只要為纖維狀，則無特殊限定，例如可直接或以編織物、織布、無紡布等纖維片形狀使用纖維結構體。當堿金屬型羧甲基纖維素為纖維片形狀時，其単位面積重量(目付)優(yōu)選為l(T300g/m2。特別是當堿金屬型羧甲基纖維素為織布時，其単位面積重量優(yōu)選為4(T300g/m2，更優(yōu)選為8(T250g/m2。當堿金屬型羧甲基纖維素為無紡布時，其単位面積重量優(yōu)選為10 150g/m2,更優(yōu)選為 15 80g/m2。本發(fā)明中使用的纖維狀堿金屬型羧甲基纖維素其本身公知(例如參照日本特許第3057446號說明書)，可通過公知方法制備。例如，羧甲基纖維素鈉如下述實施例所示可通過在將天然、純化或再生纖維素用含氫氧化鈉的こ醇水溶液處理后，用含一氯こ酸的こ醇水溶液進ー步處理而羧甲基化來獲得。對于在本發(fā)明的防粘連材料中堿金屬型羧甲基纖維素示出防粘連效果的機制，雖然目前并未完全闡明，但本發(fā)明人推測其基于以下機制。需說明的是，本發(fā)明并不限定于以下機制。本發(fā)明中使用的羧甲基纖維素由于為堿金屬型羧甲基纖維素，所以在pH7. 4下羧甲基解離，處于陰離子的狀態(tài)。因此，認為可在PH7. 4下與已知為粘連促進物質的堿性蛋白質趨化因子、肝素結合細胞因子等細胞因子進行離子結合，由此抑制粘連促進活性。另外，已知堿金屬型羧甲基纖維素具有止血作用和細胞粘合促進作用，可用作創(chuàng)傷愈合止血材料(日本特許第3057446號)，若考慮因出血造成的血液貯留被認為是粘連的原因之一，則該止血作用被認為可進ー步提高防粘連效果。
實施例以下通過實施例對本發(fā)明進行具體說明，但它們并不限定本發(fā)明的范圍?！秾嵤├齀》
(I)無紡布狀防粘連材料的制備
將0. 17g的人造絲制無紡布(尺寸IOcmX 10cm、單位面積重量17g/m2、厚0. 08mm)放入反應容器中，添加IL的含氫氧化鈉的こ醇水溶液(4. 2mol/L氫氧化鈉、9. 3mol/Lこ醇)，于室溫培養(yǎng)17小吋。進ー步添加615mL的含一氯こ酸的こ醇水溶液(4. 9mol/L ー氯こ酸、10. 3mol/Lこ醇)，于50°C培養(yǎng)4小吋。依次用70%甲醇水溶液、80%甲醇水溶液洗滌，然后用含鹽酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L鹽酸、90%甲醇)中和至pH6. 0^8. O。
然后，依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗滌后，干燥，獲得片材(I)。構成該片材的CMC的大部分為Na型CMC。另外，此時醚化度為0. 83，分子量為16萬Da。由獲得的片材⑴切出切片(2cmX lcm)，向8支50mL塑料管中分別各放入10片。向各管中添加30mL的含鹽酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L鹽酸、90%甲醇)，于室溫培養(yǎng)0分鐘(即未處理)、10分鐘、20分鐘、30分鐘、I小時、2小時、4小時、6小時。在培養(yǎng)后依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗滌，然后干燥，獲得本發(fā)明的防粘連材料(以下稱樣品)。(2)基于溶解速度的評價
向裝有各樣品的50mL塑料管中分別添加5mL的100%こ醇。將管蓋上,使液體無遺漏地覆蓋管內。減壓抽吸，干燥樣品，用于以下評價試驗。 溶解速度實驗中使用的MEM培養(yǎng)基通過向IOOmL的培養(yǎng)基(GIBC0 10370-021)中添加 ImL 的 200mmol/L L-谷氨酰胺(GIBC0 25030-081)、IOmL 的胎牛血清(TRACEBIOSCIENCE 15-010-0500V)、ImL 的 5000u/mL 青霉素-5000 u g/mL 鏈霉素溶液(GIBC015070-063)來制備。由于在培養(yǎng)基中添加作為pH指示劑的酚紅，所以如下所示，可根據(jù)培養(yǎng)基的顔色判斷大概的PH
酸性(黃)く<約PH6. 8 (橙) 約pH8. 0 (紅)〈〈堿性(紅紫)。在實施例1(1)中于各種處理時間下實施鹽酸處理，然后在實施例1(2)中向15mL取樣管中各放入I片實施過こ醇消毒的各種樣品。向各管中添加5mL的MEM培養(yǎng)基，將蓋子松開，在可換氣的狀態(tài)下放入培養(yǎng)箱(37°C、5%C02)中。作為MEM培養(yǎng)基的顏色樣本，對未投入樣品者也同樣進行培養(yǎng)。在剛添加MEM培養(yǎng)基后、I日后、2日后、3日后、6日后、7日后、10日后、14日后、16日后、17日后從培養(yǎng)箱中取出，觀察樣品的狀態(tài)和培養(yǎng)基的顔色。將樣品的溶解程度示出于表I中。如表I所示的樣品欄中示出的時間為實施例1(1)中實施的鹽酸處理的處理時間。另外，在經時觀察用之外，將添加MEM培養(yǎng)基10日后從MEM培養(yǎng)基中取出，用100%甲醇洗滌后的形狀分別示出于圖2 (鹽酸處理時間=2小吋)、圖3 (鹽酸處理時間=4小時)、圖4 (鹽酸處理時間=6小時)中。另外，作為參考，將實施在實施例1(1)中實施的鹽酸處理前的片材切片的形狀示出于圖I中。[表 I]I終品]ゆ]擧加后 1020 3 ￡1 6 3 7 a IO 日14316 0I El
表.處理EE E E E E EEEE
10 分計BCDEEEEEEE
20 分鐘BE I I E E EI*fc；E
30 分鐘BC D E E E IiIiEE
1小時AA BCEEEEEE
2小時AA A A BBEEEE
4小時AA A A 4 A DDF,E 6 小時/\A A A A A ABI)E
A:未膨潤 B:膨潤./透明， C:部分溶解,..
D;大部分溶解 E:完全溶解ハ
如表I所示，雖然在10分鐘處理樣品和20分鐘處理樣品中至溶解為止所需要的天數(shù)的順序相替換了，但在其它結果中，對應于鹽酸處理(酸型化處理)時間，至溶解為止所需要的天數(shù)延長。另外，如圖廣圖4所示，鹽酸處理時間短者透明，大部分溶解(圖2)，而隨著鹽酸處理時間延長，接近與實施鹽酸處理前的樣品(圖I)同樣的外觀(圖3、圖4)。需說明的是，雖然在圖2(鹽酸處理時間=2小時)的結果(雖然大部分溶解但有殘留物)與表I中的結果[鹽酸處理時間=2小時，作為10日后的結果評價為E (完全溶解)]之間發(fā)現(xiàn)不一致，但認為其理由是由于經時觀察用樣品(表I用樣品)在觀察時毎次在搖晃取樣管的同時進行狀態(tài)觀察，與之相対，圖疒圖4的攝影用樣品靜置10日?！秾嵤├?》
(I)膜狀防粘連材料的制備
將在實施例I (I)中作為中間產物獲得的由Na型CMC (醚化度0.83，分子量16萬Da)構成的片材(I)溶于水中，使?jié)舛冗_到50mg/mL，制備Na型CMC水溶液。將其中的5mL添加于載玻片(76mmX26mm)上，于室溫放置2晝夜使之干燥。將獲得的膜狀物質從載玻片上剝離，剪裁成切片(2cmX lcm)后，向50mL塑料管中分別各放入10片。向各管中添加30mL的含鹽酸的甲醇水溶液(I. 2mol/L鹽酸，90%甲醇)，于室溫培養(yǎng)0小時(即未處理)和2小吋。在培養(yǎng)后依次用80%甲醇水溶液、100%甲醇洗滌，然后干燥，獲得本發(fā)明的防粘連材料樣品。(2)基于溶解速度的評價
基于溶解速度的評價依據(jù)實施例1(2)中記載的方法實施。另外，除在實施例2(1)中制備的膜狀樣品外，對在實施例1(1)中制備的無紡布狀樣品也同時進行評價。將結果示出于表2中 [表2]
權利要求
1.防粘連材料，其特征在于，實質上由纖維狀堿金屬型羧甲基纖維素構成。
2.權利要求I的防粘連材料，其中，単位面積重量為l(T300g/m2。
3.權利要求I或2的防粘連材料，其中，分子量為2萬 200萬道爾頓。
4.羧甲基纖維素結構體，其特征在于，實質上由羧甲基纖維素構成，處于酸型羧甲基纖維素與堿金屬型羧甲基纖維素混雜的狀態(tài)。
5.權利要求4的羧甲基纖維素結構體，其中，形狀為纖維片、膜或海綿。
6.權利要求4的羧甲基纖維素結構體，其中，在體內的作用持續(xù)時間為5小時飛個月。
7.防粘連材料，其特征在于，含有權利要求4飛中任一項的羧甲基纖維素結構體。
8.權利要求Γ6中任一項的羧甲基纖維素結構體的制備方法，其特征在于，從外側對由堿金屬型羧甲基纖維素構成的結構體進行酸處理，在堿金屬型羧甲基纖維素完全轉化為酸型羧甲基纖維素前結束所述酸處理。
9.權利要求Γ6中任一項的羧甲基纖維素結構體的制備方法，其特征在于，從外側對由酸型羧甲基纖維素構成的結構體進行堿處理，在酸型羧甲基纖維素完全轉化為堿金屬型羧甲基纖維素前結束所述堿處理。
10.通過調節(jié)從外側對由堿金屬型羧甲基纖維素構成的結構體進行酸處理的時間，從而控制由羧甲基纖維素構成的結構體在體內的作用持續(xù)時間的方法。
11.通過調節(jié)從外側對由酸型羧甲基纖維素構成的結構體進行堿處理的時間，從而控制由羧甲基纖維素構成的結構體在體內的作用持續(xù)時間的方法。
全文摘要
本發(fā)明提供可提供作為醫(yī)療材料、特別是防粘連材料有用的新型羧甲基纖維素(CMC)結構體的制備方法，進而提供生物相容性、生物吸收性優(yōu)異，并且可控制作用發(fā)揮時間和溶解時間的CMC結構體，或可同時發(fā)揮防粘連效果和創(chuàng)傷愈合效果的CMC結構體。上述結構體實質上由羧甲基纖維素構成，處于酸型羧甲基纖維素與堿金屬型羧甲基纖維素混雜的狀態(tài)。上述制備方法的特征在于，從外側對由堿金屬型(或酸型)羧甲基纖維素構成的結構體進行酸處理(或堿處理)，在堿金屬型(或酸型)羧甲基纖維素完全轉化為酸型(或堿金屬型)羧甲基纖維素前結束上述酸處理(或堿處理)。
文檔編號A61L31/00GK102858383SQ201080066048
公開日2013年1月2日 申請日期2010年12月9日 優(yōu)先權日2010年3月31日
發(fā)明者徐吉夫, 青島元法, 井上利樹, 長谷川清孝 申請人:保木醫(yī)療股份有限公司