專利名稱：用于增強(qiáng)非特異性免疫功能的中藥獸用藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及獸藥領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及一種用于提高生長性能、增強(qiáng)機(jī)體非 特異性免疫功能的獸用中藥組合物，以及由該獸用中藥組合物制成的獸用藥、該獸用藥的 制備方法以及該獸用中藥組合物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
禽類是重要的經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，而禽疫病一直制約著養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。盡管目前有很多禽 類疫苗可以供為選擇，但它們大多是針對特異性免疫，起效慢，作用專一，禽類有時(shí)在疫苗 提供有效保護(hù)前就已經(jīng)發(fā)生了病毒感染。非特異性免疫是抵抗微生物感染的第一道防線， 具有起效快，作用范圍廣的特點(diǎn)。因此，目前很多研究者都在尋找和鑒定能有效激活禽類非 特異性免疫的新型免疫調(diào)節(jié)劑。天然中藥中的某些藥物及其提取物，具有增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力、促進(jìn)生長、抑制病 原體等多種作用，并且利用中藥防治動(dòng)物疾病符合綠色養(yǎng)殖之趨勢，目前許多大型養(yǎng)殖場 也越來越重視中藥保健品的增強(qiáng)免疫作用。因而研究中藥對禽類非特異性免疫功能及其生 長性能的影響就顯得頗為重要，具有一定的研究意義和應(yīng)用價(jià)值。發(fā)明人在查閱相關(guān)文獻(xiàn)后發(fā)現(xiàn)，目前國內(nèi)外尚未有能有效提高禽類生長性能，增 強(qiáng)禽類機(jī)體非特異性免疫功能的獸用中藥組合物。

發(fā)明內(nèi)容
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明提供一種獸用中藥組合物，其由以下原料藥制成 白頭翁、黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根、黃芩、柴胡、大黃。該獸用中藥組合物能夠用于提高生長性能、 增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能。在所述獸用中藥組合物中，各原料藥組分優(yōu)選的重量份配比為白頭翁10 30重 量份、黃芪10 30重量份、白術(shù)5 15重量份、板藍(lán)根5 15重量份、黃芩5 15重量 份、柴胡5 15重量份、大黃5 15重量份；各原料藥組分更優(yōu)選的重量份配比為白頭翁 20 30重量份、黃芪20 30重量份、白術(shù)10 15重量份、板藍(lán)根10 15重量份、黃芩 10 15重量份、柴胡10 15重量份、大黃5 10重量份；各原料藥組分最優(yōu)選的重量份 配比為白頭翁25重量份、黃芪25重量份、白術(shù)10重量份、板藍(lán)根10重量份、黃芩10重量 份、柴胡10重量份、大黃10重量份。本發(fā)明還提供了一種用于提高生長性能、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的獸用藥， 其由所述的獸用中藥組合物和藥學(xué)可接受的輔料制成。所述獸用藥的劑型包括但不限于口 服溶液劑、顆粒劑、可溶性粉劑、預(yù)混劑。其中所用藥學(xué)可接受的輔料為本領(lǐng)域所屬技術(shù)人 員熟知的常用輔料，獸用藥的制備方法為本領(lǐng)域所屬技術(shù)人員熟知的常規(guī)方法，具體可參 見《獸藥制劑生產(chǎn)應(yīng)用手冊》(江西科學(xué)技術(shù)出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》 (四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農(nóng)業(yè)出版 社，2006年4月出版)。
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本發(fā)明還提供了一種制備所述獸用藥的方法，該方法包括1)稱取原料藥白頭翁、黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根、黃芩、柴胡、大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍(lán)根、黃芩、大黃粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-4. 5小時(shí)，濾取 煎液備用。其中粉碎步驟優(yōu)選將原料藥粉碎成粗粉；煎煮步驟優(yōu)選分3次進(jìn)行第1次加入 藥材8倍量的水煎煮3小時(shí)，第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時(shí)，第3次加入藥材3倍 量的水煎煮1小時(shí)。3)將白術(shù)、柴胡粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-3小時(shí)，收集揮發(fā)油備用，并濾取煎 液備用。其中粉碎步驟優(yōu)選將原料藥粉碎成粗粉；煎煮步驟優(yōu)選將原料藥在加水后、煎煮前 進(jìn)行浸泡，其中浸泡時(shí)間優(yōu)選為45分鐘；加水量優(yōu)選為藥材8倍量的水，煎煮時(shí)間優(yōu)選為3 小時(shí)。4)將步驟3)中濾得的藥渣加3-8倍量的水煎煮1-3小時(shí)，濾取煎液，與步驟3)中 所得的煎液合并備用。其中煎煮步驟優(yōu)選分2次進(jìn)行第1次加入藥材5倍量的水煎煮2 小時(shí)，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)。5)將步驟2)中所得煎液和步驟4)中所得的合并煎液合并，將合并液濃縮，使得 每Iml濃縮液相當(dāng)于含0. 5g原料藥；然后向濃縮液中加入乙醇，調(diào)節(jié)pH值為5. 0 7. 5， 靜置，取上清液。其中加入乙醇的量優(yōu)選為使乙醇終濃度為60%的量；調(diào)節(jié)pH值的試劑優(yōu) 選為10% NaOH溶液。6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇后與步驟3)中所得的揮發(fā)油合并，干 燥制成浸膏粉，備用。7)將步驟6)制得的浸膏粉加入藥學(xué)可接受的輔料制成所述獸用藥，例如口服溶 液劑、顆粒劑、可溶性粉劑、預(yù)混劑，并使得每Ig或每Iml獸用藥相當(dāng)于含有Ig原料藥。本發(fā)明還提供了一種所述獸用中藥組合物在制備用于提高生長性能、增強(qiáng)機(jī)體非 特異性免疫功能的獸用藥中的應(yīng)用。本發(fā)明獸用中藥組合物、獸用藥特別適用于禽類動(dòng)物，包括但不限于雞、鴨、鵝。本發(fā)明獸用藥可通過拌入飼料或兌入飲水的方式給藥，使動(dòng)物通過自由采食或自 由飲水?dāng)z入本發(fā)明獸用藥。拌入飼料的藥物濃度為0.5% (W/W)，即每IOOg飼料拌入0.5g 本發(fā)明獸用藥；兌入飲水的藥物濃度為0. 3-0. 5% (W/W)，即每IOOg飲用水兌入0. 3-0. 5g 本發(fā)明獸用藥。給藥次數(shù)為一天一次，連續(xù)給藥5到7天。本發(fā)明所述獸用藥采用《中國獸藥典》2005年版二部附錄31頁的薄層色譜法進(jìn) 行定性測定所述獸用藥中的黃芩苷、黃芩素、白頭翁提取物和大黃提取物；參照《獸藥質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)》2003年版定性測定所述獸用藥中的黃芪多糖；采用反相高效液相色譜法(參見王蓿， 等，反相高效液相色譜法測定白頭翁藥材中白頭翁皂苷B4的含量，《時(shí)珍國醫(yī)國藥》，2009 年11月，第20卷第11期)，測定藥品中白頭翁皂苷B4的含量。1)黃芩苷、黃芩素的定性測定取本發(fā)明所述獸用藥lg，加乙酸乙酯-甲醇(3 1)混合溶液30mL，加熱回流30 分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使其溶解，取上清液作為供試品溶液。另取黃 芩苷對照品、黃芩素對照品，加甲醇分別制成每ImL含lmg、0. 5mg的對照品溶液。照薄層色 譜法(附錄31頁)試驗(yàn)，吸取供試品溶液，上述二種對照品溶液各1 μ L，分別點(diǎn)于同一聚酰 胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10 3 1 2)為展開劑，預(yù)飽和30分鐘，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯兩個(gè)相同的暗色斑點(diǎn)。(2)白頭翁提取物的測定取本發(fā)明所述獸用藥4g，加乙醇20mL，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液濃縮至約6mL， 放冷，加丙酮適量，則生成沉淀，濾過，速取沉淀少量(約5g)，置試管中，加醋酐ImL使溶解， 沿管壁加硫酸lmL，兩液接界處顯紅色或紅紫色環(huán)。(3)大黃提取物的測定取本發(fā)明所述獸用藥0. lg，加甲醇20mL，浸泡1小時(shí)，濾過，取濾液5mL，蒸干，殘?jiān)?加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次振搖提取，每 次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄镮mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照 藥材0. Ig,同法制成對照藥材溶液。再取大黃酸對照品，加甲醇制成每ImL含Img的溶液， 作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄31頁)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4 μ L，分別點(diǎn)于 同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以石油醚(30-60°C)-甲酸乙酯-甲 酸(15 5 1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供 試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光主斑點(diǎn)；在與對照品 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)，置氨蒸氣中熏后，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。(4)黃芪多糖的測定取本發(fā)明所述獸用藥5g，加去離子水20mL，浸泡30分鐘，濾過，取濾液5mL，加2% α -萘酚乙醇溶液3滴，搖勻后，沿試管壁緩緩加硫酸0. 5mL，在兩液面交界處顯棕色環(huán)。(5)白頭翁皂苷B4的含量測量取本發(fā)明所述獸用藥lg，準(zhǔn)確量取，置于具塞錐形瓶中，然后精密加入甲醇10ml， 超聲30分鐘，放冷，過濾，濾液置50ml量瓶中，用少量流動(dòng)相(乙腈0. 磷酸(V V ； 28 72))洗滌容器及殘?jiān)匆翰⑷胪涣科恐?，加流?dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過0.2μπι濾 膜，經(jīng)反相高效液相色譜檢測，計(jì)算，白頭翁皂苷Β4的含量(g/g)均不得低于0. 4%。在本發(fā)明獸用中藥組合物中，白頭翁為毛莨科白頭翁Pulsatilla chinensis (Bge.) Regel的干燥根，主要含有白頭翁皂苷、三萜酸、木脂素、白頭翁靈、白頭翁 英、白頭翁素、原白頭翁素、胡蘿卜苷以及糖蛋白等成分。其中白頭翁皂苷有抗腫瘤、增強(qiáng)免 疫功能、抗阿米巴原蟲及殺菌等作用。白頭翁及白頭翁皂苷對雞增重、免疫器官功能有一 定的促進(jìn)作用，略優(yōu)于黃芪，對雞中性粒細(xì)胞的吞噬率有極顯著的增強(qiáng)作用，白頭翁及其皂 苷，作為免疫增強(qiáng)劑，具有很好的研究價(jià)值與應(yīng)用前景。黃苗為豆科植物蒙古黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. )Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao 或膜莢黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge.的干燥根， 是被普遍認(rèn)為對動(dòng)物免疫有促進(jìn)作用的一味中藥。黃芪能增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能， 使白細(xì)胞及多核白細(xì)胞數(shù)量顯著增加，使巨噬細(xì)胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)顯著上升，對體 液免疫、細(xì)胞免疫均有促進(jìn)作用。黃芪具有增強(qiáng)病毒誘生干擾素的能力。易感冒者在感冒 流行季節(jié)服用黃芪，不僅可使感冒次數(shù)明顯減少，而且可使感冒癥狀減輕，病程縮短。同時(shí) 黃芪所含的有效成分黃芪多糖有明顯的抗疲勞、耐低溫作用，能使正常以及虛損小鼠的抗 疲勞時(shí)間明顯延長。黃芪還可使細(xì)胞的生理代謝增強(qiáng)，能促進(jìn)血清和肝臟的蛋白質(zhì)更新，對 蛋白質(zhì)代謝有促進(jìn)作用。黃芪對痢疾、肺炎雙球菌、溶血性鏈球菌A、B、C及金黃色、檸檬色、白色葡萄球菌等均有抑制作用。白術(shù)為菊科植物白術(shù)Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根莖，具有健脾 益氣，燥濕利水，止汗，安胎的功效。用于脾虛食少，腹脹泄瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動(dòng)不 安等。白術(shù)水煎液對胃腸運(yùn)動(dòng)有興奮作用，具有抗?jié)儯蛊?，能顯著增強(qiáng)白細(xì)胞吞噬金 黃色葡萄球菌的能力。同時(shí)白術(shù)可促進(jìn)小鼠紅細(xì)胞造血作用，能有效抑制脂質(zhì)過氧化，降低 組織脂質(zhì)過氧化物的含量，避免有害物質(zhì)對組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞。白術(shù)對瘤細(xì)胞有 細(xì)胞毒作用，能降低瘤細(xì)胞的增殖率，減低瘤組織的侵襲性，提高機(jī)體抗腫瘤反應(yīng)的能力。板藍(lán)根為十字花科菘藍(lán)Isatis indigotica Fort.的干燥根，在臨床上具有清熱 涼血、抗菌抗病毒作用，其水浸液對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌，八聯(lián)球菌、大腸桿菌、 傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌、痢疾(志賀氏、弗氏)桿菌、腸炎桿菌等都有抑制作用，同時(shí)板藍(lán) 根具有很好的解毒作用。板藍(lán)根所有含的板藍(lán)根多糖能顯著增加正常小鼠脾重，白細(xì)胞總 數(shù)及淋巴細(xì)胞數(shù)，還能明顯增強(qiáng)抗體形成功能，增強(qiáng)小鼠靜脈注射碳粒廓清速率。板藍(lán)根所 含成分靛玉紅，能增強(qiáng)動(dòng)物的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬能力，提高機(jī)體免疫功能，具有一定 的抗癌作用。黃芩為唇形科植物黃芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根。其有較廣 的抗菌譜，在試管內(nèi)對痢疾桿菌、白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌以及 腦膜炎球菌等均有抑制作用，煎劑作喉頭噴霧，對腦膜炎帶菌者亦有效，即使對青霉素等抗 菌素已產(chǎn)生抗藥性的金黃色葡萄球菌，對黃芩仍屬敏感。對多種皮膚致病性真菌，體外亦有 抑制效果，并能殺死鉤端螺旋體。黃芩所含黃芩苷、黃芩苷元有抗炎抗變態(tài)反應(yīng)作用。黃芩 甙有降壓、利尿、鎮(zhèn)靜作用，能抑制小白鼠的自發(fā)活動(dòng)，作用強(qiáng)度與劑量有關(guān)，黃芩煎劑可抑 制小鼠陽性條件反射，此作用可能是由于它加強(qiáng)了皮層抑制過程所致，可用于神經(jīng)興奮性 增高及失眠的高血壓患者。黃芩根莖的酊劑靜脈注射，對士的寧中毒的蛙、貓、狗，可消除強(qiáng) 直性痙攣的癥狀，并使動(dòng)物免于死亡。柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium ffilld.的干燥根。按性狀不同，分別習(xí)稱“北柴胡”及“南柴胡”。其所 含的揮發(fā)油(丁香酚、己酸、r-十一酸內(nèi)酯和對甲氧基苯二酮)，柴胡皂苷(皂苷元A)對傷 寒、副傷寒疫苗、大腸桿菌液、發(fā)酵牛奶、酵母等所致發(fā)熱有明顯解熱作用，且能使動(dòng)物正常 體溫下降。柴胡總皂苷、皂苷還具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)咳作用，對多種致炎劑所致踝關(guān)節(jié)腫和結(jié) 締組織增生性炎癥均有抑制作用。柴胡皂苷元a和d、柴胡醇、α -菠菜留醇可以降血脂(在 實(shí)驗(yàn)性高脂血癥動(dòng)物身上降低膽固醇、甘油三酯和磷酯)、保肝(對CCl4、酒精、傷寒疫苗、 卵黃、霉米、D-半乳糖胺等所致肝功能障礙有保護(hù)作用。表現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶降低，肝功能恢復(fù)、肝 損傷減輕)。柴胡中的柴胡多糖可使吞噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞功能增強(qiáng)，提高病毒特異性抗 體滴度，對流感病毒、肝炎病毒、牛痘病毒、I型脊髓灰白質(zhì)炎病毒、皰疹病毒有較好的抑制 作用。大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim, ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。臨床常用于治療 大便燥結(jié)、熱結(jié)便秘，一般在用藥后6-19小時(shí)可排便。各種實(shí)驗(yàn)證明大黃對多種革蘭氏陽 性菌、某些陰性菌及真菌有不同程度的抑制作用，其抑菌的有效成分為蒽醌衍生物，其中大 黃酸、大黃素、蘆薈大黃素的作用最強(qiáng)。大黃能活血祛淤、降壓及降血脂，促進(jìn)膽汁分泌、膽囊收縮、疏通膽小管內(nèi)膽汁淤結(jié)，增加膽管收縮功能，松弛奧狄氏括約肌，從而使膽汁排出 增加，起到利膽退黃作用，因而大黃有利膽退黃，保肝除濕作用。本發(fā)明獸用中藥組合物首次將白頭翁、黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根配伍，具有扶正祛邪、清 熱解毒、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的功效，能治療機(jī)體免疫功能低下、免疫耐受、內(nèi)源性 毒素以及應(yīng)激等所致的多種非典型性病癥，生長性能下降，以及風(fēng)熱感冒、流感、法氏囊病、 腸毒綜合征等濕熱性病癥。在雞群的臨床試驗(yàn)中，本發(fā)明獸用中藥組合物能夠有效提高雞 群的采食量和體重，降低料重比和死亡率，增加單位容積白細(xì)胞和紅細(xì)胞的數(shù)量，提高雞群 的抗體水平，說明本發(fā)明獸用中藥組合物能有效提高禽類生長性能，增強(qiáng)禽類機(jī)體非特異 性免疫功能，且療效顯著，值得在市場中推廣運(yùn)用。
具體實(shí)施例方式以下通過具體實(shí)施方式
的描述對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但這并非是對本發(fā)明的限 制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本 發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。實(shí)施例1制備本發(fā)明獸用藥預(yù)混劑1)稱取原料藥25g白頭翁、25g黃芪、IOg白術(shù)、IOg板藍(lán)根、IOg黃芩、IOg柴胡、IOg
大黃；2)將白頭翁、黃芪、板藍(lán)根、黃芩、大黃干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時(shí)，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時(shí)，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)，分別濾取煎液，合并3次煎液備用；3)將白術(shù)、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然后加熱煎煮3小時(shí)， 收集揮發(fā)油另外儲(chǔ)存?zhèn)溆?，并濾取煎液備用；4)將步驟3)中過濾后的剩余藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時(shí)，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合并備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合并，將合并液減壓濃縮至200ml ；然后將濃 縮液中加入300ml乙醇，并以10% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為7. 0，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇后與步驟3)中所得的揮發(fā)油合并，噴 霧干燥得10. Sg浸膏粉備用；7)將步驟6)制得的浸膏粉，按現(xiàn)有獸藥制備方法(參見《獸藥制劑生產(chǎn)應(yīng)用手冊》 (江西科學(xué)技術(shù)出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農(nóng)業(yè)出版社，2006年4月出版))，制成 IOOg本發(fā)明獸用藥預(yù)混劑。實(shí)施例2 制備本發(fā)明獸用藥口服溶液1)稱取原料藥22. 5g白頭翁、22.5g黃芪、12.5g白術(shù)、12. 5g板藍(lán)根、12. 5g黃芩、 12. 5g柴胡、5g大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍(lán)根、黃芩、大黃干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時(shí)，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時(shí)，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)，分別濾取煎液，合并3次煎液備用；
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3)將白術(shù)、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然后加熱煎煮3小時(shí)， 收集揮發(fā)油另外儲(chǔ)存?zhèn)溆茫V取煎液備用；4)將步驟3)中過濾后的剩余藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時(shí)，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合并備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合并，將合并液減壓濃縮至200ml ；然后將濃 縮液中加入300ml乙醇，并以10% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為6. 5，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇后與步驟3)中所得的揮發(fā)油合并，噴 霧干燥得10. 2g浸膏粉備用；7)將步驟6)制得的浸膏粉，按現(xiàn)有獸藥制備方法(參見《獸藥制劑生產(chǎn)應(yīng)用手冊》 (江西科學(xué)技術(shù)出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農(nóng)業(yè)出版社，2006年4月出版))，制成 IOOml本發(fā)明獸用藥口服溶液。實(shí)施例3 制備本發(fā)明獸用藥顆粒劑1)稱取原料藥24. 5g白頭翁、22.5g黃芪、12g白術(shù)、12g板藍(lán)根、12g黃芩、IOg柴
胡、7g大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍(lán)根、黃芩、大黃干燥后粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時(shí)，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時(shí)，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)，分別濾取煎液，合并3次煎液備用；3)將白術(shù)、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然后加熱煎煮3小時(shí)， 收集揮發(fā)油另外儲(chǔ)存?zhèn)溆?，并濾取煎液備用；4)將步驟3)中過濾后的剩余藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時(shí)，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時(shí)；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合并備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合并，將合并液減壓濃縮至200ml ；然后將濃 縮液中加入300ml乙醇，并以10% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為7. 5，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇后與步驟3)中所得的揮發(fā)油合并，噴 霧干燥得10. 5g浸膏粉備用；7)將步驟6)制得的浸膏粉，按現(xiàn)有獸藥制備方法(參見《獸藥制劑生產(chǎn)應(yīng)用手冊》 (江西科學(xué)技術(shù)出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學(xué)技術(shù)出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農(nóng)業(yè)出版社，2006年4月出版))，制成 IOOg本發(fā)明獸用藥顆粒劑。以上三個(gè)實(shí)施例的質(zhì)量控制結(jié)果如表1所示表1本發(fā)明實(shí)施例1-3的獸用藥質(zhì)量控制結(jié)果
實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3黃芩苷(定性)陽性陽性陽性 以下通過具體試驗(yàn)例對本發(fā)明有益效果作進(jìn)一步說明。試驗(yàn)例1本發(fā)明獸用中藥組合物對雞生長性能的影響<試驗(yàn)方法>1.試驗(yàn)藥品本發(fā)明實(shí)施例1-3制成的獸用藥。2.試驗(yàn)動(dòng)物20日齡“青腳麻”Al系肉雞10300只，體況良好，無發(fā)病跡象，由四川 邦禾農(nóng)業(yè)科技有限公司下屬雞場提供。3.動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理將試驗(yàn)用雞隨機(jī)分為4組，3個(gè)平行試驗(yàn)組，1個(gè)對照組。采用集中拌料的方式分別在試驗(yàn)組雞群的2個(gè)生長階段(21-28日齡，51_58日 齡)按每天料量5%0 (W/W)的濃度飼喂本發(fā)明獸用藥，讓雞群在12h內(nèi)自由采食完畢，剩余 12h飼喂基礎(chǔ)日糧，對照組整個(gè)過程只飼喂基礎(chǔ)日糧。同時(shí)在整個(gè)試驗(yàn)階段，對雞群按照以下免疫程序接種新城疫、禽流感(H5W亞型， Re-5株；H9亞型)疫苗16 日齡禽流感H5W亞型，Re-5株0. 5ml/只(肌肉注射)，遼寧益康生物制品有限公司， 批號=20100203 ；30 日齡雞新城疫、禽流感(H9亞型)二聯(lián)滅活疫苗(La Sota株+WD株)0· 5ml/只(肌 肉注射)，上海海利生物藥品有限公司，批號20100310。4.生長性能測定在飼養(yǎng)開始與結(jié)束后，計(jì)算增重量、采食量、料重比、死亡率，其中增重量分別于試驗(yàn)的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，逐只空腹稱重，計(jì)算雞 群在2個(gè)生長階段(21-28日齡，51-58日齡)的體重變化；采食量分別于試驗(yàn)的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，稱量各組飼料消耗量；料重比料重比=飼養(yǎng)期內(nèi)飼料消耗總量(kg)/同一飼養(yǎng)期內(nèi)增重量(kg)。5.數(shù)據(jù)處理與分析數(shù)據(jù)用SpSS13. 0軟件進(jìn)行單因素方差分析，組間差異采用Duncan多重比較，顯著 水平為0. 05。數(shù)據(jù)結(jié)果用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差(means 士 S. D)表示。<試驗(yàn)結(jié)果>本發(fā)明實(shí)施例1的獸用藥預(yù)混劑的試驗(yàn)結(jié)果雞群在2個(gè)生長階段(21-28日齡，51_58日齡)飼養(yǎng)結(jié)束后的增重量、采食量、料重比、死亡率的結(jié)果見表2。表2本發(fā)明實(shí)施例1的獸用藥預(yù)混劑對雞增重量、采食量、料重比、死亡率的影響 注同行肩標(biāo)字母相同表示無差異顯著(P >0.05)；同行肩標(biāo)字母不同表示有差 異顯著(P < 0. 05)。由表2可以看出，在雞群處于21-28日齡時(shí)，試驗(yàn)組每只雞平均增重0. 160kg，對照 組每只雞平均增重0. 168kg，2個(gè)組別的增重量差異不顯著(P > 0. 05)；在雞群處于51-58 日齡時(shí)，試驗(yàn)組每只雞平均增重0. 356kg，對照組每只雞平均增重0. 325kg，2個(gè)組別的增重 量差異顯著(P < 0. 05)。在21-28日齡的生長階段中，試驗(yàn)組雞群的采食量增加量比對照組大；在51-58日 齡的生長階段中，試驗(yàn)組的采食量大于對照組，但采食增加量不及對照組。同時(shí)由表2可 見，雞群在2個(gè)生長階段的料重比都顯著低于對照組，死亡率顯著低于對照組。本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液和本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗(yàn)結(jié)果在對本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液的試驗(yàn)中，在雞群處于21-28日齡時(shí)，試驗(yàn) 組每只雞平均增重0. 19kg，對照組每只雞平均增重0. 16kg，2個(gè)組別的增重量差異顯著(P
<0. 05)；在雞群處于51-58日齡時(shí)，試驗(yàn)組每只雞平均增重0. 389kg，對照組每只雞平均增 重0. 345kg，2個(gè)組別的增重量差異顯著(P<0. 05)。試驗(yàn)組雞群的采食增加量在21-28日 齡，51-58日齡時(shí)，較對照組均有所增加，同時(shí)，雞群在2個(gè)生長階段的料重比都顯著低于對 照組，死亡率顯著低于對照組；在對本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑的試驗(yàn)中，在雞群處于21-28日齡時(shí)，試驗(yàn)組 每只雞平均增重0. 175kg，對照組每只雞平均增重0. 151kg，2個(gè)組別的增重量差異顯著(P
<0. 05)；在雞群處于51-58日齡時(shí)，試驗(yàn)組每只雞平均增重0. 376kg，對照組每只雞平均增 重0. 342kg，2個(gè)組別的增重量差異顯著(P<0. 05)。試驗(yàn)組雞群的采食增加量在21-28日 齡，51-58日齡時(shí)，較對照組均有所增加，同時(shí)，雞群在2個(gè)生長階段的料重比都顯著低于對 照組，死亡率顯著低于對照組。
目前，國內(nèi)外眾多的研究機(jī)構(gòu)轉(zhuǎn)向從純天然植物中提取有效成分來調(diào)控畜禽消化 道內(nèi)環(huán)境，并對其微生態(tài)進(jìn)行調(diào)控，以減少抗生素作為畜禽促生長劑的使用。本試驗(yàn)在正常 的養(yǎng)殖條件下對10300只20日齡“青腳麻”Al系肉雞的生長性能的研究發(fā)現(xiàn)，在雞群的2 個(gè)生長階段(21-28日齡，51-58日齡)分別使用本發(fā)明獸用藥2周后，能明顯提高雞群的采 食量，降低料重比和死亡率，由此說明本發(fā)明獸用中藥組合物能夠有效提高飼料報(bào)酬，降低 死亡率，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫力。試驗(yàn)例2本發(fā)明獸用中藥組合物對雞外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞數(shù)量的影響<試驗(yàn)方法>1.試驗(yàn)藥品同試驗(yàn)例1。2.試驗(yàn)動(dòng)物同試驗(yàn)例1。3.動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理同試驗(yàn)例1。4.雞外周血白細(xì)胞和紅細(xì)胞數(shù)的測定將試驗(yàn)組、對照組的雞群在60日齡分別隨機(jī)翼靜脈采血16份。用常規(guī)方法(《動(dòng) 物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)》(第2版)，楊秀平主編，高等教育出版社，2009年8月出版)計(jì)數(shù)白細(xì)胞和 紅細(xì)胞。5.數(shù)據(jù)處理與分析同試驗(yàn)例1?！丛囼?yàn)結(jié)果〉本發(fā)明實(shí)施例1的獸用藥預(yù)混劑的試驗(yàn)結(jié)果將試驗(yàn)組、對照組的雞群在60日齡分別隨機(jī)翼靜脈采血16份后，用常規(guī)方法(《動(dòng) 物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)》(第2版)，楊秀平主編，高等教育出版社，2009年8月出版)計(jì)數(shù)白細(xì)胞和 紅細(xì)胞，具體結(jié)果見表3。表3飼喂本發(fā)明實(shí)施例1的獸用藥預(yù)混劑后雞白細(xì)胞、紅細(xì)胞數(shù)量的變化(η = 16) 注表示白細(xì)胞、紅細(xì)胞數(shù)量的單位分別為X107L ； X IO1VLo由試驗(yàn)結(jié)果表3可知，試驗(yàn)組的平均白細(xì)胞數(shù)為2. 73，對照組平均白細(xì)胞數(shù)為 2. 40，結(jié)果經(jīng)方差分析后，差異顯著(P < 0. 05)；而試驗(yàn)組的平均紅細(xì)胞數(shù)為2. 93，對照組 平均紅細(xì)胞數(shù)為2. 57，數(shù)據(jù)通過方差分析后，差異顯著(P < 0. 05)。即試驗(yàn)組的平均紅細(xì) 胞數(shù)和平均白細(xì)胞數(shù)均顯著高于對照組。本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液和本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗(yàn)結(jié)果在對本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液的試驗(yàn)中，試驗(yàn)組的平均白細(xì)胞數(shù)為 2. 88，對照組平均白細(xì)胞數(shù)為2. 47，結(jié)果經(jīng)方差分析后，差異顯著(P <0.05)；而試驗(yàn)組 的平均紅細(xì)胞數(shù)為3. 10，對照組平均紅細(xì)胞數(shù)為2. 69，數(shù)據(jù)通過方差分析后，差異顯著(P < 0. 05)；在對本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑的試驗(yàn)中，試驗(yàn)組的平均白細(xì)胞數(shù)為2. 89， 對照組平均白細(xì)胞數(shù)為2. 54，結(jié)果經(jīng)方差分析后，差異顯著(P < 0. 05)；而試驗(yàn)組的平均紅 細(xì)胞數(shù)為2. 97，對照組平均紅細(xì)胞數(shù)為2. 51，數(shù)據(jù)通過方差分析后，差異顯著(P < 0. 05)。近年來，已有研究報(bào)道指出，中草藥中含有生理活性物質(zhì)，能起到刺激畜禽生長， 維持動(dòng)物體內(nèi)環(huán)境正常平衡。從根本上保護(hù)、維持畜禽的整體健康，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能， 調(diào)節(jié)體內(nèi)有益微生物群落，充分發(fā)揮和提高機(jī)體本身預(yù)防疾病的潛在能力。機(jī)體免疫力的 強(qiáng)弱與免疫細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)，因而免疫細(xì)胞的數(shù)量在一定程度上可以反映機(jī)體的免疫水 平。白細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分，能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機(jī)體損傷治愈、 抗御病原入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。已有研究證明紅細(xì)胞參與機(jī)體許多重 要的生理功能，其免疫功能是其他免疫細(xì)胞所無法替代的，它和白細(xì)胞一起在機(jī)體非特異 性免疫力方面發(fā)揮著非常重要的作用，因而本試驗(yàn)通過計(jì)數(shù)雞外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞的數(shù) 量，從而可以在一定程度上了解本發(fā)明獸用中藥組合物對雞非特異性免疫功能的影響。 由試驗(yàn)結(jié)果可知，三個(gè)試驗(yàn)組的平均紅細(xì)胞數(shù)和平均白細(xì)胞數(shù)均分別顯著高于對 照組。由此說明，雞服用本發(fā)明獸用藥后能提高單位容積白細(xì)胞、紅細(xì)胞的數(shù)量，從而對提 高雞群的非特異性免疫力有積極作用。試驗(yàn)例3本發(fā)明獸用中藥組合物對雞血清抗體的影響〈試驗(yàn)方法〉1.試驗(yàn)藥品同試驗(yàn)例1。
2.試驗(yàn)動(dòng)物同試驗(yàn)例1。3.動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理同試驗(yàn)例1。4.雞血清抗體水平檢測于雞群60日齡，在試驗(yàn)組和對照組分別隨機(jī)翼靜脈采血，做雞血清抗體檢測。檢 測指標(biāo)為雞新城疫抗體水平、雞禽流感抗體水平，均采用間接血凝試驗(yàn)。5.數(shù)據(jù)處理與分析同試驗(yàn)例1?！丛囼?yàn)結(jié)果〉本發(fā)明實(shí)施例1的獸用藥預(yù)混劑的試驗(yàn)結(jié)果采用間接血凝試驗(yàn)于雞群60日齡隨機(jī)翼靜脈采血，檢測了試驗(yàn)組、對照組雞群新 城疫和禽流感的抗體水平，結(jié)果見表4。表4雞血清抗體檢測結(jié)果
試驗(yàn) 組19ND2 8 t5 3 10.513.716AI(H5Re-5)1 3 7 4 16.193.816AI(H9)4 4 5 2 17.5100對照 組21ND3 2 4 7 58.411.216AI(H5Re-5)2 2 3 4 55.580.916AI(H9)1 1 4 2 3 56.387.5注n表示樣品數(shù)；ND表示新城疫；AI表示禽流感；AI (H5Re_5)、AI (H9)分別表示 禽流感的2個(gè)亞型J表示平均抗體滴度。由表4可知，試驗(yàn)組新城疫平均抗體滴度為10. 5高于對照組8. 4，差異顯著(P
<0. 05)；而檢測禽流感平均抗體滴度時(shí)，禽流感H5Re-5平均抗體滴度為6. 1高于對照組 5. 5，差異顯著(P < 0. 05)；禽流感H9平均抗體滴度為7. 5高于對照組6. 3，差異顯著(P
<0. 05)。本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液和本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗(yàn)結(jié)果在對本發(fā)明實(shí)施例2的獸用藥口服溶液的試驗(yàn)中，試驗(yàn)組新城疫平均抗體滴度為 11. 7高于對照組9. 4，差異顯著(P < 0. 05)，而檢測禽流感平均抗體滴度時(shí)，也得到了類似
測目 檢項(xiàng)
組別
13的結(jié)果。試驗(yàn)組各禽流感亞型的平均抗體滴度均顯著高于對照組；在對本發(fā)明實(shí)施例3的獸用藥顆粒劑的試驗(yàn)中，試驗(yàn)組新城疫平均抗體滴度為 11. 5高于對照組8. 2，差異顯著(P < 0. 05)，而檢測禽流感平均抗體滴度時(shí)，也得到了類似 的結(jié)果。試驗(yàn)組各禽流感亞型的平均抗體滴度均顯著高于對照組。本研究通過檢測雞群血清抗體滴度，評價(jià)了本發(fā)明獸用中藥組合物對增強(qiáng)新城 疫、禽流感(H5Re-5亞型，H9亞型)疫苗免疫效果的影響。由上述結(jié)果可知，在正常免疫接 種的同時(shí)采用本發(fā)明獸用藥配合使用，能夠起到協(xié)同作用，可有效增加免疫效果，比起單純 依靠疫苗，更能提高雞的抗體水平。
權(quán)利要求
一種用于提高生長性能、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的獸用藥，其由獸用中藥組合物和藥學(xué)可接受的輔料制成，其中所述獸用中藥組合物由原料藥白頭翁、黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根、黃芩、柴胡、大黃制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸用藥，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁10 30 黃芪10 30 白術(shù)5 15板藍(lán)根5 15 黃芩5 15 柴胡5 15 大黃5 15。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的獸用藥，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁20 30 黃芪20 30 白術(shù)10 15板藍(lán)根10 15 黃芩10 15 柴胡10 15 大黃5 10。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的獸用藥，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁25 黃芪25 白術(shù)10板藍(lán)根10 黃芩10 柴胡10 大黃10。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的獸用藥，其為口服溶液劑、顆粒劑、可溶性粉劑或 預(yù)混劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸用藥，其中每Ig或每Iml獸用藥相當(dāng)于含有Ig原料藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于提高生長性能、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的獸用中藥組合物，它是由下列原料藥制成白頭翁、黃芪、白術(shù)、板藍(lán)根、黃芩、柴胡、大黃。本發(fā)明還涉及由該獸用中藥組合物制成的獸用藥、該獸用藥的制備方法以及該獸用中藥組合物的應(yīng)用。本發(fā)明所述的獸用中藥組合物具有扶正祛邪、清熱解毒、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能的功效，能治療機(jī)體免疫功能低下、免疫耐受、內(nèi)源性毒素以及應(yīng)激等所致的多種非典型性病癥，生長性能下降，以及風(fēng)熱感冒、流感、法氏囊病、腸毒綜合征等濕熱性病癥。
文檔編號A61P43/00GK101926862SQ20101027076
公開日2010年12月29日 申請日期2010年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月31日
發(fā)明者楊莉, 田學(xué)華, 鄧仕偉, 陳金 申請人:四川華神農(nóng)大動(dòng)物保健藥品有限公司