專利名稱：一種中藥制劑補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑的檢測(cè)方法，具體的說，本發(fā)明涉及中成藥補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
補(bǔ)中益氣合劑是由黃芪(蜜炙)、黨參、甘草(蜜炙)、白術(shù)、當(dāng)歸、升麻、柴胡、陳皮、生姜、大棗等十味中藥組成，國內(nèi)有多種劑型上市。但經(jīng)我們研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)有的補(bǔ)中益氣合劑存在質(zhì)量控制方法落后，產(chǎn)品質(zhì)量不易控制的缺點(diǎn)?，F(xiàn)有質(zhì)量控制方法中并沒有對(duì)甘草、當(dāng)歸和陳皮進(jìn)行鑒別，或?qū)S芪甲苷成分進(jìn)行含量測(cè)定。故現(xiàn)有質(zhì)量控制方法不能有效控制補(bǔ)中益氣合劑的質(zhì)量，從而將影響產(chǎn)品的生產(chǎn)和保證質(zhì)量。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們建立了補(bǔ)中益氣合劑的新的質(zhì)量控制方法，該方法采用薄層色譜法對(duì)甘草、當(dāng)歸和陳皮進(jìn)行鑒別，采用高效液相色譜法對(duì)黃芪甲苷進(jìn)行含量測(cè)定。該質(zhì)量控制方法專屬性、穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性均較好，能確保產(chǎn)品質(zhì)量的安全穩(wěn)定、有效可控。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法。本發(fā)明所述的補(bǔ)中益氣合劑是由如下重量份的中藥原料藥制成的黃芪(蜜炙)280g、黨參84g、甘草(蜜炙)140g、白術(shù)84g、當(dāng)歸84g、升麻84g、柴胡84g、陳皮84g、生姜^g、大棗56g以上組成制成的藥物制劑為液體制劑1000ml，以上組成是按重量份作為配比的， 在生產(chǎn)時(shí)可按照相應(yīng)比例增大或減少。本發(fā)明補(bǔ)中益氣合劑的制備方法可以采用以下方法白術(shù)、陳皮、當(dāng)歸提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣和生姜照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用50%乙醇作溶劑，漸漬M小時(shí)，進(jìn)行滲漉，漉液回收乙醇；黃芪、 黨參、甘草、升麻、柴胡、大棗等六味加水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至1000ml，與上述水溶液、漉液合并，靜置，濾過，濃縮至約1000ml，加入苯甲酸鈉3g，放冷， 加入上述揮發(fā)油，調(diào)整總量至1000ml，攪勻，即得。本發(fā)明提供的是針對(duì)以上補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法，為控制補(bǔ)中益氣合劑的質(zhì)量，我們提供了如下檢測(cè)方法本發(fā)明所述檢測(cè)方法包括以下主要步驟(1)對(duì)本發(fā)明藥物制劑中的甘草、當(dāng)歸和陳皮進(jìn)行鑒別；(2)測(cè)定本發(fā)明藥物制劑中黃芪甲苷成分的含量。本發(fā)明的鑒別方法是以下方法的一種或幾種1)取本品30ml，加鹽酸1ml，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30 60°C )-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10 20 7 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。2)取本品30ml，加等量的石油醚(30 60°C )，振搖提取，分取石油醚提取液，自然揮散至約1ml，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，置具塞試管中，加石油醚(30 60°C)aiil，振搖，浸漬2小時(shí)，取上清液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005 年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(3 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。3)取本品30ml，用石油醚(30 60°C )振搖提取2次，每次25ml，石油醚液備用； 水溶液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32 17 幻的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。本發(fā)明的含量測(cè)定方法為以下的方法照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 (35 65)為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg 的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取本品20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取5次，每次 25ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供試品溶液10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。本品每Iml含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計(jì)，不得少于0. 05mg。本發(fā)明提供了甘草、當(dāng)歸和陳皮的薄層色譜鑒別，選擇了君藥黃芪中有效成分黃芪甲苷作為含量測(cè)定指標(biāo)，建立了補(bǔ)中益氣合劑的含量測(cè)定方法；經(jīng)過多次重復(fù)試驗(yàn)，確認(rèn)方法簡便、重復(fù)性良好，可以作為補(bǔ)中益氣合劑的質(zhì)量控制指標(biāo)。
具體實(shí)施例方式通過下面的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更加詳細(xì)的說明，但不作為限制作用。實(shí)施例1 取白術(shù)84g、陳皮84g、當(dāng)歸8 提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集； 藥渣和生姜^g照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用50%乙醇作溶劑，漸漬M小時(shí)，進(jìn)行滲漉，漉液回收乙醇；取黃芪(蜜炙)280g、黨參84g、甘草(蜜炙)140g、升麻84g、柴胡84g、 大棗56g等六味加水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至1000ml，與上述水溶液、漉液合并，靜置，濾過，濃縮至約IOOOml，加入苯甲酸鈉3g，放冷，加入上述揮發(fā)油，調(diào)整總量至1000ml，攪勻，即得。同法分批制備，共制得藥物共計(jì)十個(gè)批次，分別為080901、080902、080903、 080904、081001、081002、081003、081004、081101和 081102。以上十批藥物的檢測(cè)方法包括以下方法1)取本品30ml，加鹽酸1ml，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每Iml 含0.2mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30 60°C )_甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10 20 7 0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。2)取本品30ml，加等量的石油醚(30 60°C )，振搖提取，分取石油醚提取液，自然揮散至約1ml，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，置具塞試管中，加石油醚(30 60°C)aiil，振搖，浸漬2小時(shí)，取上清液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005 年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-醋酸乙酯(3 1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。3)取本品30ml，用石油醚(30 60°C )振搖提取2次，每次25ml，石油醚液備用； 水溶液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32 17 幻的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水 (35 65)為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg 的溶液，即得。供試品溶液的制備精密量取本品20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取5次，每次 25ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供試品溶液10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得。
本品每Iml含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計(jì)，不得少于0. 05mg。藥物檢測(cè)結(jié)果為
表1十批生產(chǎn)藥物樣品檢測(cè)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法，所述合劑由黃芪^0g、黨參84g、甘草140g、白術(shù) 84g、當(dāng)歸84g、升麻84g、柴胡84g、陳皮84g、生姜28g和大棗56g加工制成，其特征在于，所述檢測(cè)方法包括以下步驟(1)對(duì)合劑中的甘草、當(dāng)歸和陳皮進(jìn)行鑒別；(2)測(cè)定合劑中黃芪甲苷成分的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，合劑中的甘草鑒別過程取合劑30ml，加鹽酸1ml，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，殘?jiān)右掖?2ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液；另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含0. 2mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，30 60°C以體積比為10 20 7 0. 5 石油醚-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所棕的檢測(cè)方法，其特征在于，合劑中的當(dāng)歸鑒別過程取合劑30ml，30 60°C加等量的石油醚，振搖提取，分取石油醚提取液，自然揮散至約 lml，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，置具塞試管中，30 60°C加石油醚^il,振搖，浸漬2小時(shí)，取上清液作為對(duì)照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上，以體積比3 1環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，合劑中的陳皮鑒別過程取合劑30ml，用30 60°C石油醚振搖提取2次，每次25ml，石油醚液備用；水溶液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比32 17 5三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述含量測(cè)定方法包括以下步驟照中國藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比35 65乙腈-水為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ；對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密量取本品20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取5次，每次25ml， 合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供試品溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得；本品每Iml含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計(jì)，不得少于0. 05mg。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述合劑的制備方法為白術(shù)、陳皮、當(dāng)歸提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集；藥渣和生姜照流浸膏劑與浸膏劑項(xiàng)下的滲漉法，用50%乙醇作溶劑，漸漬M小時(shí)，進(jìn)行滲漉，漉液回收乙醇；黃芪、黨參、甘草、升麻、柴胡、大棗等六味加水煎煮三次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至 1000ml，與上述水溶液、漉液合并，靜置，濾過，濃縮至約1000ml，加入苯甲酸鈉3g，放冷，加入上述揮發(fā)油，調(diào)整總量至1000ml，攪勻，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟取合劑30ml，加鹽酸1ml，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，殘?jiān)右掖?2ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液；另取甘草次酸對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含0. 2mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，30 60°C以體積比為10 20 7 0. 5 石油醚-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的磷鉬酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。取合劑30ml，30 60°C加等量的石油醚，振搖提取，分取石油醚提取液，自然揮散至約 lml，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0. 5g，置具塞試管中，30 60°C加石油醚a(bǔ)nl，振搖，浸漬2小時(shí)，取上清液作為對(duì)照藥材溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各20μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G 薄層板上，以體積比3 1環(huán)己烷-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。取合劑30ml，用30 60°C石油醚振搖提取2次，每次25ml，石油醚液備用；水溶液用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取橙皮苷對(duì)照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對(duì)照品溶液；照中國藥典2005年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比32 17 5三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。所述含量測(cè)定方法包括以下步驟照中國藥典2005年版一部附錄VI D高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比35 65 乙腈-水為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000 ；對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含Ojmg的溶液，即得；供試品溶液的制備精密量取本品20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取5次，每次25ml， 合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，離心，取上清液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供試品溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得；本品每Iml含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計(jì)，不得少于0. 05mg。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥制劑補(bǔ)中益氣合劑的檢測(cè)方法，所述合劑由黃芪280g、黨參84g、甘草140g、白術(shù)84g、當(dāng)歸84g、升麻84g、柴胡84g、陳皮84g、生姜28g和大棗56g加工制成，所述檢測(cè)方法包括以下步驟對(duì)合劑中的甘草、當(dāng)歸和陳皮進(jìn)行鑒別；測(cè)定合劑中黃芪甲苷成分的含量。
文檔編號(hào)A61K36/9068GK102335402SQ20101023408
公開日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2010年7月22日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月22日
發(fā)明者劉艷陽, 黎家檢 申請(qǐng)人:江西濟(jì)民可信藥業(yè)有限公司, 江西濟(jì)民可信集團(tuán)有限公司