專利名稱：八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥復(fù)方制劑的檢測(cè)方法，特別是八珍益母膠囊的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
八珍益母丸源于《景岳全書》，處方組成為益母草、黨參、熟地黃、炒白術(shù)、茯苓、當(dāng) 歸、酒白芍、川芎和甘草，具有補(bǔ)氣血，調(diào)月經(jīng)的功效，臨床用于婦女素體虧虛、或大病久病 后、或失血過多所致氣虛血虧、經(jīng)血不調(diào)，為氣血雙虧，月經(jīng)不調(diào)的首選方劑。但是蜜丸以全 部的原料藥直接打粉入藥，服用量大，服用不方便；因此，藥物研究人員開發(fā)出方便患者服 用且療效有所提高的八珍益母膠囊劑，并研究了系統(tǒng)的質(zhì)量控制方法，建立了制劑中當(dāng)歸、 川芎以及益母草中鹽酸水蘇堿薄層色譜鑒別，制定了制劑中酒白芍中芍藥苷含量測(cè)定方 法，從而保證用藥安全。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是本發(fā)明所述八珍益母膠囊的原料藥組成如下益母草273重量份 黨參68重量份 熟地黃137重量份炒白術(shù)68重量份 茯苓68重量份 當(dāng)歸137重量份酒白芍68重量份 川芎68重量份 甘草34重量份本發(fā)明所述膠囊的制備工藝是取三分之一重量份的茯苓與所述重量份的酒白芍粉碎成粗粉；所述重量份的當(dāng) 歸、川芎、炒白術(shù)蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與所述重量份的黨參、熟 地黃、益母草、甘草及剩余三分之二重量份的茯苓加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1. 5 小時(shí)，煎液濾過，濾液合并，與蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密度為1. 25 1. 30 的浸膏，加入所述粗粉，攪勻，80 90°C烘干，粉碎，加入淀粉，過蹄，混勻，用90%乙醇制顆 粒，干燥，噴入所述揮發(fā)油，密封，裝入膠囊，每粒裝0. 28g，即得。本發(fā)明所述膠囊的制備工藝，蒸餾提取當(dāng)歸、川芎、炒白術(shù)的揮發(fā)油時(shí)，優(yōu)選的蒸 餾提取時(shí)間為3小時(shí)；加水煎煮時(shí)，優(yōu)選總加水量為所述重量份的當(dāng)歸、川彎、炒白術(shù)、黨 參、熟地黃、益母草、甘草及三分之二重量份茯苓的總重量的19倍，第一次加10倍量水，第 二次加9倍量水。所述八珍益母膠囊口服，一次3粒，一日3次，每lg所述八珍益母膠囊內(nèi)容物折算 成原料藥量，相當(dāng)于3. 29g，也就是每1粒所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物折算成原料藥量，相 當(dāng)于 0. 921g。本發(fā)明所述八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法包括如下I、II的鑒定方法I、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物6g，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾 液揮干，殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各lg，分別加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 3 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C石油醚-乙酸乙酯 為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物8g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙 醇回流提取4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶 液濾過，合并濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)， 用垂熔玻璃漏斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫 酸銀溶液至沉淀不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加 入氯化鋇溶液約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1. 5g的層 析柱上，用70%乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供 試品溶液；另取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照 薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為 8:1: 3的正丁醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化 鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。酒白芍為方中主要藥味，而且以原粉入藥，芍藥苷的含量可以直接反映酒白芍的 等級(jí)質(zhì)量和投料量，故對(duì)芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定對(duì)本發(fā)明所述中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量檢測(cè)是有 意義的。因此，本發(fā)明所述的質(zhì)量檢測(cè)方法還包括如下的高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含20y g 的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物2. 8g，混勻，研細(xì)，取約0. 3g， 精密稱定，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，密塞，功率250W、頻率25kHz的超聲處理60 分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；每粒所述八珍益母膠囊含酒白芍以芍藥苷C23H280n計(jì)，不得少于0. 90mg。上述高效液相色譜法中，為保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，制備對(duì)照品溶液時(shí)，優(yōu)選經(jīng)五 氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品。本發(fā)明所述八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法優(yōu)選所述鑒別方法I和II，以及所述含 量測(cè)定方法的組合，能夠從多方面反映制劑的質(zhì)量。下面通過實(shí)驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明所述八珍益母膠囊的制備工藝研究，以及本發(fā)明所述質(zhì) 量檢測(cè)方法的建立。實(shí)驗(yàn)例1八陣益母膠囊的制備工藝本發(fā)明所述八珍益母膠囊的制備涉及揮發(fā)油提取、水溶性成分提取以及原料藥直 接入藥，因此，制備工藝對(duì)上述三方面都進(jìn)行了考察，以確定最佳工藝條件。1. 1揮發(fā)油提取時(shí)間
當(dāng)歸、川芎、白術(shù)含有大量揮發(fā)性活性物質(zhì)，因此，應(yīng)當(dāng)單獨(dú)將揮發(fā)性成分提取出 來(lái)。按照本發(fā)明說(shuō)明書記載的原料藥組成配比，稱取共400g的當(dāng)歸、川芎和白術(shù)各三份， 每份加水2000ml，蒸餾提取揮發(fā)油，以揮發(fā)油的得量為指標(biāo)考察了不同提取時(shí)間，結(jié)果見表 1。表1揮發(fā)油提取時(shí)間考察 結(jié)果表明，一般提取3小時(shí)后，揮發(fā)油已基本提取完全，得率約為0. 12%。因此，確 定揮發(fā)油的提取時(shí)間為3小時(shí)。1. 2水煎煮的最佳工藝條件水煎煮的提取工藝，受煎煮次數(shù)、加水量、煎煮時(shí)間等因素的影響，為了簡(jiǎn)化影響 因數(shù)，首選在固定加水量和煎煮時(shí)間的情況下，考察煎煮次數(shù)；其次，在優(yōu)選的煎煮次數(shù)下， 考察加水量和煎煮時(shí)間。1.2. 1水煎煮次數(shù)按照本發(fā)明所述優(yōu)選的原料藥組成，稱取一定量的用水煎煮的原料藥，在總加水 量為15倍于原料藥和煎煮時(shí)間為每次4. 5小時(shí)的固定條件下，以干浸膏收率為考察指標(biāo)， 考察了不同煎煮次數(shù)，結(jié)果見表2。表2水煎煮次數(shù)的考察
結(jié)果表明，在加水15倍量，每次煎煮時(shí)間為4. 5小時(shí)的煎煮條件下，煎煮3次比2 次干浸膏收率只提高1%，從生產(chǎn)成本考慮，水煎煮的次數(shù)確定為2次。1. 2. 2加水量和煎煮時(shí)間按照本發(fā)明所述優(yōu)選的原料藥組成，稱取一定量的用水煎煮的原料藥，在煎煮2 次的條件下，以干浸膏收率和鹽酸水蘇堿含量為考察指標(biāo)，考察了不同加水量和煎煮時(shí)間， 結(jié)果見表3。表3加水量和煎煮時(shí)間考察 結(jié)果表明，總加水19倍量——第1次10倍，第2次9倍，提取時(shí)間分別為——第1 次2小時(shí)，第2次1. 5小時(shí)的條件下，干浸膏收率和鹽酸水蘇堿含量都最高；故確定該條件 為最佳的工藝條件。1. 3酒白芍、茯苓直接打粉入藥酒白芍、茯苓富含淀粉和蛋白質(zhì)，色澤白，易粉碎；將二者打粉直接入藥，可以減少 制劑的引濕性、增加崩解度，便于干浸膏粉碎、制粒、裝膠囊和保存。但是如果茯苓全部打粉 入藥，則按8. 3g原料藥折合成的日服用量體積過大，9粒1號(hào)膠囊也裝不下。采用三分之一 茯苓打粉入藥，按8. 3g原料藥折合成的日服用量剛好裝入9粒1號(hào)膠囊。故確定以全部重 量份的酒白芍和三分之一重量份的茯苓打粉入藥。實(shí)驗(yàn)例2八珍益母膠囊與現(xiàn)有技術(shù)中的八珍益母丸的藥效學(xué)比較八珍益母丸的原料組成為益母草200g 黨參50g 熟地黃100g 炒白術(shù)50g 茯苓50g 當(dāng)歸 100g 酒白芍50g 川芎50g 甘草25g通過下述方法制備以上九味粉碎，按照重量比為原料藥煉蜜=100 45，加入煉蜜以及適量水泛 丸，干燥，制成水蜜丸。每lg所述八珍益母丸折算成原料藥量，相當(dāng)于0. 69g。通過藥理學(xué)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，兩種劑型均能促進(jìn)大鼠子宮發(fā)育、提高血液中雌二醇含量 及降低孕酮含量；對(duì)正常大鼠離體子宮平滑肌活動(dòng)無(wú)明細(xì)影響、能明顯增加催產(chǎn)素對(duì)大鼠 離體子宮的興奮作用，增加其收縮頻率及活動(dòng)力，能對(duì)抗黃體酮對(duì)催產(chǎn)素興奮大鼠離體子 宮平滑肌的抑制作用，增加其收縮頻率、幅度及活動(dòng)力；能提高小鼠碳粒廓清速率、血清溶 血素水平、外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率；能延長(zhǎng)小鼠游泳、耐缺氧時(shí)間；能促進(jìn)失血性血虛大鼠 癥狀體征的改善及體重增長(zhǎng)，加快血液RBC、Hb恢復(fù)；此外，尚能減輕瓊脂所致的大鼠足跖 腫脹及肉芽腫增生。本發(fā)明所述膠囊劑與所述八珍益母丸相比，在促進(jìn)大鼠子宮發(fā)育、提高 血液中雌二醇含量，增強(qiáng)催產(chǎn)素對(duì)大鼠離體子宮的興奮作用，提高小鼠碳粒廓清速率，延長(zhǎng) 小鼠游泳時(shí)間等方面都有不同程度的增強(qiáng)。說(shuō)明與現(xiàn)有技術(shù)中的丸劑相比，本發(fā)明所述膠 囊劑可以在一定程度上提高療效。實(shí)驗(yàn)例3當(dāng)歸、川芎薄層色譜鑒別的專屬性試驗(yàn)鑒別方法I為當(dāng)歸、川芎的薄層色譜鑒別。當(dāng)歸、川芎原料藥來(lái)源于傘形科植物， 兩者化學(xué)成分比較近似，在適宜的薄層層析條件下，二者的薄層色譜也有一定程度的相似;因此，通過一次薄層層析，就可以同時(shí)定性鑒別當(dāng)歸和川芎。取處方中不含當(dāng)歸、川芎的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣品， 取本發(fā)明所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物(以下簡(jiǎn)稱供試品)6g，陰性樣品6g，當(dāng)歸對(duì)照藥材 lg(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)120927-200613)，川芎對(duì)照藥材lg(中國(guó)藥品生物制 品檢定所，批號(hào)120918-200501)按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、 對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液、 陰性樣品溶液、對(duì)照藥材溶液各3iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4 的60 90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試 品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照 品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性無(wú)干擾。(見圖1)實(shí)驗(yàn)例4益母草薄層色譜鑒別的專屬性試驗(yàn)鑒別方法II為益母草的薄層色譜鑒別。取處方中不含益母草的其它藥材按照說(shuō)明書記載的制備方法制成陰性樣 品，取供試品8g，陰性樣品8g，鹽酸水蘇堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào) 110712-200508)按說(shuō)明書所述的方法配制成供試品溶液、陰性樣品溶液、對(duì)照品溶液。照薄 層色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以體積比為8 1 3的正丁醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取 出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性樣品色譜中與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上無(wú)相應(yīng)的斑點(diǎn)。說(shuō)明陰性 無(wú)干擾。(見圖2)實(shí)驗(yàn)例5芍藥苷含量測(cè)定1、儀器與試藥 SHIMADZU LC-2010AHT 高效液相色譜儀，SHIMADZU LC-2010AHT 化學(xué)工作站， VP-ODS C18色譜柱(150讓\4.6讓，511111)，紫外可變檢測(cè)器。水為超純水，乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純；芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物 制品檢定所，批號(hào)110736-200526)。2、系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為13 87乙腈-0. 磷酸溶液為 流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。3、波長(zhǎng)選擇取芍藥苷對(duì)照品適量，用50%甲醇制成適當(dāng)?shù)臐舛?，?0%甲醇為空白，在400 200nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，結(jié)果在230nm波長(zhǎng)處有最大吸收(見圖3)，故確定檢測(cè)波 長(zhǎng)為230nm。4、流動(dòng)相的選擇現(xiàn)有技術(shù)中，流動(dòng)相是體積比為13 87的乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液，但 芍藥苷峰形不好，理論板數(shù)低，在換成體積比為13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液后，芍藥苷 峰形好，理論板數(shù)高(見圖4)。5、供試品溶液的制備5. 1提取溶劑的考察
取本發(fā)明所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物四份，各0.3g，精密稱定，分別以50%甲醇、 乙醇、50%乙醇、甲醇四種溶劑進(jìn)行考察，采用超聲處理(功率250W，頻率25kHz)提取方法 進(jìn)行提取，測(cè)定結(jié)果見表8。表8不同溶劑提取測(cè)定結(jié)果 確定50%甲醇為最佳提取溶劑。5. 2提取時(shí)間的考察取本發(fā)明所述八陣益母膠囊的內(nèi)容物三份，各0.3g，精密稱定，分別超聲處理(功 率250W，頻率25kHz) 30分鐘、60分鐘、120分鐘，結(jié)果見表9。表9不同提取時(shí)間測(cè)定結(jié)果 結(jié)果表明，超聲處理(功率250W，頻率25kHz) 60分鐘和120分鐘含量測(cè)定結(jié)果基 本一致，說(shuō)明超聲提取60分鐘已能達(dá)到效果，故確定超聲處理時(shí)間為60分鐘。6、空白試驗(yàn)取處方中不含酒白芍的其它對(duì)照樣品，按說(shuō)明書記載的供試品溶液制備方法制成 陰性樣品，再按照說(shuō)明書中記載的供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液，依說(shuō)明書記載 的含量測(cè)定方法試驗(yàn)，比較供試品溶液色譜及芍藥苷對(duì)照品色譜，結(jié)果陰性樣品中其他成 分對(duì)芍藥苷峰無(wú)干擾(見圖4、5、6)，且芍藥苷有較好的色譜分離。7、對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的所述芍藥苷對(duì)照品12. 59mg,置50ml量瓶 中，加入50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取2ml置25ml量瓶中，加50%甲醇至 刻度，搖勻，即得。8、線性關(guān)系考察精密吸取上述對(duì)照品溶液各5111、10111、20111、30111、40111，注入液相色譜儀， 按照說(shuō)明書記載的色譜分析條件，測(cè)定峰面積，結(jié)果見表10。表10線性關(guān)系測(cè)定結(jié)果
程為
芍藥苷在0. 10072 0. 80576 u g之間呈良好線性。9、精密度試驗(yàn)9. 1對(duì)照品精密度試驗(yàn)精密吸取所述對(duì)照品溶液20 iU，按說(shuō)明書記載的液相色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣5次， 結(jié)果見表11，芍藥苷面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0. 2%。表11對(duì)照品精密度試驗(yàn)結(jié)果 9. 2供試品精密度試驗(yàn)取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物0.3g，精密稱定，按照說(shuō)明書記載的方法制備供試 品溶液，精密吸取所述供試品溶液20 u 1，按說(shuō)明書記載的液相色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣5次，結(jié) 果見表12，芍藥苷面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0. 2%。表12供試品精密度試驗(yàn)結(jié)果 10、穩(wěn)定性試驗(yàn)取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物0.3g，精密稱定，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試 品溶液，按說(shuō)明書記載的色譜條件，精密吸取所述供試品溶液20 yl，注入液相色譜儀，每隔 一定時(shí)間進(jìn)樣測(cè)定一次，在24小時(shí)內(nèi)，峰面積基本保持一致，RSD= 1.6%。表明芍藥苷在 所述流動(dòng)相溶液中24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見表13。表13穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
10 11、重復(fù)性試驗(yàn)分別取同一批所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物5份，精密稱定，按照說(shuō)明書記載的方 法制成供試品溶液，在說(shuō)明書記載的色譜條件下，測(cè)定芍藥苷的含量，RSD= 1.9%，表明本 法重復(fù)性良好，結(jié)果見表14。表14重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果 12、加樣回收率試驗(yàn)取同一批已知芍藥苷含量為2. 9113mg/g的所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物5份，每份 約0. 15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密添加芍藥苷對(duì)照品溶液(濃度7. 554 ug/ ml) 50ml，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試品溶液，在說(shuō)明書記載的色譜條件下，測(cè)定芍藥 苷的含量，計(jì)算回收率，平均回收率為99. 86%,RSD = 0.9%，表明本法回收率良好，結(jié)果見 表15。 表15回收率試驗(yàn)結(jié)果 13、樣品測(cè)定
取本發(fā)明所述八珍益母膠囊6批，按照說(shuō)明書記載的方法制成供試品溶液，在 明書記載的色譜條件下，測(cè)定芍藥苷的含量，測(cè)定結(jié)果見表16。
表16樣品測(cè)定結(jié)果
根據(jù)表16中樣品測(cè)定結(jié)果，擬定本發(fā)明所述八珍益母膠囊每粒含酒白芍以芍藥 苷C23H280n計(jì)，不得少于0. 90mg。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明所述八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法同樣適用于 原料藥組成與本發(fā)明所述八珍益母膠囊相同或相似的其它中藥復(fù)方制劑，如丸劑、片劑、顆 粒劑、口服液、濃縮丸等。不同中藥復(fù)方制劑的日服劑量因?yàn)橹苿┕に嚨牟煌胁町?，?是每日服用劑量折算成原料藥是一致的，因此可以折算成原料藥的量來(lái)稱取所要的供檢測(cè) 的制劑。


圖1是當(dāng)歸和川芎薄層鑒別，其中1為陰性樣品，2為當(dāng)歸對(duì)照藥材，3為川芎對(duì)照 藥材，4、5、6為三批樣品。圖2是益母草薄層鑒別，其中1為陰性樣品，2為鹽酸水蘇堿對(duì)照品，3、4、5為三批樣品。圖3是芍藥苷對(duì)照品的紫外吸收光譜
圖4是芍藥苷對(duì)照品溶液HPLC圖譜圖5是所述膠囊劑供試品溶液HPLC圖譜圖6是陰性樣品溶液HPLC圖譜圖7是芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
具體實(shí)施例方式下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例的效果，但本發(fā)明并不限于所述實(shí)施例。實(shí)施例1八珍益母膠囊益母草273g 黨參68g 熟地黃137g 炒白術(shù)68g 茯苓68g 當(dāng)歸 137g酒白芍68g 川芎68g 甘草34g取22. 5g的茯苓與68g酒白芍粉碎成粗粉；所述處方量的當(dāng)歸、川芎、白術(shù)提取揮 發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與所述處方量的黨參、熟地黃、益母草、甘草及剩余的 茯苓加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，加10倍量水，第二次1. 5小時(shí)，加9倍量水；合并煎液， 濾過，濾液與蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密度為1. 25 1. 30的浸膏，加入所 述粗粉，攪勻，80 90°C烘干，粉碎，加入淀粉調(diào)整總量為280g，過蹄，混勻，用90%醇制粒， 干燥，噴入上述揮發(fā)油，密封，裝入膠囊，制成1000粒，每粒裝0. 28g，即得。服用方法口服，一次3粒，一天三次。每lg所述八珍益母膠囊內(nèi)容物折算成原料藥量，相當(dāng)于3. 29g。實(shí)施例2八珍益母片益母草300g 黨參75g 熟地黃120g 炒白術(shù)60g 茯苓72g 當(dāng)歸 150g酒白芍75g 川芎65g 甘草35g取48g的茯苓與75g酒白芍粉碎成粗粉；所述處方量的當(dāng)歸、川芎、白術(shù)提取揮發(fā) 油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與所述處方量的黨參、熟地黃、益母草、甘草及剩余的茯 苓加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，加10倍量水，第二次1. 5小時(shí)，加9倍量水；合并煎液，濾 過，濾液與蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密度為1. 25 1. 30的浸膏，加入所述 粗粉，攪勻，80 90°C烘干，粉碎，加入常規(guī)輔料，制粒，噴入預(yù)先用適量的無(wú)水乙醇稀釋的 揮發(fā)油，密封，壓成片劑，制成1000片，每片0. 3g,即得。服用方法口服，一次3片，一天三次。每lg所述八珍益母片折算成原料藥量，相當(dāng)于3. 17g。實(shí)施例3八珍益母顆粒益母草250g 黨參60g 熟地黃150g 炒白術(shù)70g 茯苓66g 當(dāng)歸 120g酒白芍70g 川芎65g 甘草30g以上九味，按照常規(guī)制劑方法制備顆粒劑，每袋1. 5g。服用方法一次一袋，一天三次。每lg所述八珍益母顆粒折算成原料藥量，相當(dāng)于1.89g。實(shí)施例4八珍益母丸益母草200g 黨參50g 熟地黃100g 炒白術(shù)50g 茯苓50g 當(dāng)歸 100g酒白芍50g 川芎50g 甘草25g以上九味粉碎，按照重量比為原料藥煉蜜=100 45，加入煉蜜以及適量水泛丸，干燥，制成水蜜丸。服用方法一次1丸，一天二次。每lg所述八珍益母丸折算成原料藥量，相當(dāng)于0. 69g。實(shí)施例5八珍益母濃縮丸益母草300g 黨參75g 熟地黃150g 炒白術(shù)70g 茯苓75g 當(dāng)歸 150g酒白芍75g 川芎70g 甘草35g取36g的茯苓與60g酒白芍粉碎成粗粉；所述處方量的當(dāng)歸、川芎、白術(shù)提取揮發(fā) 油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與所述處方量的黨參、熟地黃、益母草、甘草及剩余的茯 苓加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，加10倍量水，第二次1. 5小時(shí)，加9倍量水；合并煎液，濾 過，濾液與蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密度為1. 25 1. 30的浸膏，加入所述 粗粉，攪勻，80 90°C烘干，粉碎，加入常規(guī)輔料，制成1000粒濃縮丸，裝瓶，每瓶100粒。服用方法每次8丸，一天三次每lg所述八珍益母濃縮丸折算成原料藥量，相當(dāng)于2. 78g。實(shí)施例6實(shí)施例1制備的八珍益母膠囊質(zhì)量檢測(cè)方法鑒別照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法I、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物6g，研細(xì)，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾 過，濾液揮干，殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥 材各lg，分別加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶 液各3 iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C石油醚-乙 酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥 材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物8g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙 醇回流提取4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶 液濾過，合并濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)， 用垂熔玻璃漏斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫 酸銀溶液至沉淀不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加 入氯化鋇溶液約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1. 5g的層 析柱上，用70%乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供 試品溶液；另取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照 薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為 8:1: 3的正丁醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化 鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加 50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物2. 8g，混勻，研細(xì)，取0.3g，精密稱定，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，密塞，功率250W，頻率25kHz的超聲處理60分 鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；每粒所述八珍益母膠囊含酒白芍以芍藥苷C23H280n計(jì)，不得少于0. 90mg。實(shí)施例7實(shí)施例2制備的片劑的質(zhì)量檢測(cè)方法鑒別照中國(guó)藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法I、取所述片劑6. 3g，研細(xì)，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)?加正己烷1ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各lg，分別加正 己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3iU，分別點(diǎn) 于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C 石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在 與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述片劑8. 2g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙醇回流提取4小 時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶液濾過，合并濾 液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)，用垂熔玻璃漏斗 濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫酸銀溶液至沉淀不 再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加入1 %氯化鋇溶液 約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1.5g的層析柱上，用70% 乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽 酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各10iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8 1 3的正丁 醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品 色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加 50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述片劑3g，研細(xì)，取0.3g，精密稱定，精密加入50%甲醇 50ml，稱定重量，功率250W，頻率25kHz的超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇 補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；相當(dāng)于原料藥0.92g的所述片劑含酒白芍以芍藥苷(C23H280n)計(jì)，不得少于 0.90mg。實(shí)施例8實(shí)施例3制備的顆粒劑的質(zhì)量檢測(cè)方法鑒別照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法
I、取所述顆粒劑10. 6g，研細(xì)，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮干， 殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各lg，分別 加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3 yl，分 別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜 中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述顆粒劑13. 8g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙醇回流提取 4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶液濾過，合并 濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)，用垂熔玻璃漏 斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫酸銀溶液至沉淀 不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加入1 %氯化鋇溶 液約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1. 5g的層析柱上，用70% 乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽 酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8 1 3的正丁 醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品 色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加 50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述顆粒劑5g，研細(xì)，取0. 5g，精密稱定，精密加入50%甲 醇50ml，稱定重量，功率250W，頻率25kHz的超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲 醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得。實(shí)施例9實(shí)施例4制備的蜜丸劑的質(zhì)量檢測(cè)方法鑒別照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法I、取所述蜜丸劑28g，研均勻，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮干， 殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各lg，分別 加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3 yl，分 別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜 中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述蜜丸劑37. 7g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙醇回流提取 4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶液濾過，合并 濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)，用垂熔玻璃漏斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫酸銀溶液至沉淀 不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加入1 %氯化鋇溶 液約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1. 5g的層析柱上，用70% 乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽 酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8 1 3的正丁 醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品 色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加 50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述蜜丸劑13g，研均勻，取1. 5g，精密稱定，精密加入50% 甲醇50ml，稱定重量，功率250W，頻率25kHz的超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用50 % 甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；相當(dāng)于原料藥0.92g的所述蜜丸劑含酒白芍以芍藥苷(C23H280n)計(jì)，不得少于 0.90mg。實(shí)施例10實(shí)施例5制備的濃縮丸劑的質(zhì)量控制方法鑒別照中國(guó)藥典2005年版一部附錄VIB薄層色譜法I、取所述濃縮丸劑7. 2g，研均勻，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮 干，殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各lg，分 別加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3 yl， 分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以體積比為10 0.4的60 90°C石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜 中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述濃縮丸劑9. 4g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙醇回流提取 4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0. lmol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶液濾過，合并 濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10°C以下放置1小時(shí)，用垂熔玻璃漏 斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0. 5%硫酸銀溶液至沉淀 不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加入1 %氯化鋇溶 液約2. 5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80 100目中性氧化鋁1. 5g的層析柱上，用70% 乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽 酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)， 吸取上述兩種溶液各10 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8 1 3的正丁 醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版一部附錄VID)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為 13 87的乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng) 不低于1500 ；對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加 50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶液，即得；供試品溶液的制備取所述濃縮丸劑3. 3g，研均勻，取0. 36g，精密稱定，精密加入 50%甲醇50ml，稱定重量，功率250W，頻率25kHz的超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用 50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 iU，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；相當(dāng)于原料藥0.92g的所述中藥復(fù)方制劑含酒白芍以芍藥苷(C23H280n)計(jì)，不得 少于 0. 90mgo
權(quán)利要求
原料藥組成如下的八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，益母草273重量份，黨參68重量份，熟地黃137重量份，炒白術(shù)68重量份，茯苓68重量份，當(dāng)歸137重量份，酒白芍68重量份，川芎68重量份，甘草34重量份；所述膠囊通過如下方法制備取三分之一重量份的茯苓與所述重量份的酒白芍粉碎成粗粉；所述重量份的當(dāng)歸、川芎、白術(shù)蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與所述重量份的黨參、熟地黃、益母草、甘草及剩余三分之二重量份的茯苓加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，煎液濾過，濾液合并，與蒸餾后的水溶液合并，濃縮至60℃時(shí)相對(duì)密度為1.25～1.30的浸膏，加入所述粗粉，攪勻，80～90℃烘干，粉碎，加入淀粉，過篩，混勻，用90％乙醇制粒，干燥，噴入所述揮發(fā)油，密封，裝入膠囊，每粒裝0.28g，即得；其特征在于所述質(zhì)量檢測(cè)方法包括如下I、II的鑒定方法I、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物6g，加正己烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)诱和?ml使溶解，作為供試品溶液；另取當(dāng)歸對(duì)照藥材、川芎對(duì)照藥材各1g，分別加正己烷15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10∶0.4的60～90℃石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；II、取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物8g，加適量硅藻土，研勻，置索氏提取器中，加乙醇回流提取4小時(shí)，提取液濾過，濾液回收乙醇，用0.1mol/L鹽酸溶液8ml分次溶解，酸溶液濾過，合并濾液，加入臨用配制的硫氰酸鉻銨鹽飽和溶液12ml，在10℃以下放置1小時(shí)，用垂熔玻璃漏斗濾過，沉淀用少量水洗滌后，加丙酮5ml使溶解，再加入約5ml的0.5％硫酸銀溶液至沉淀不再析出，濾過，沉淀用少量丙酮洗滌，洗液與濾液合并，濃縮至約2ml，加入1％氯化鋇溶液約2.5ml，混勻，加在內(nèi)徑為15mm，內(nèi)裝80～100目中性氧化鋁1.5g的層析柱上，用70％乙醇35ml洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘?jiān)右掖?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸水蘇堿對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8∶1∶3的正丁醇-乙酸乙酯-鹽酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以新配制的改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述質(zhì)量檢測(cè)方 法還包括如下的照高效液相色譜法的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以體積比為13 87 的乙腈-0. 磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 1500 ；對(duì)照品溶液的制備取芍藥苷對(duì)照品，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含20 y g的溶 液，即得；供試品溶液的制備取所述八珍益母膠囊的內(nèi)容物2. 8g，混勻，研細(xì)，取0. 3g，精密稱 定，精密加入50%甲醇50ml，稱定重量，密塞，功率250W、頻率25kHz的超聲處理60分鐘，放 冷，再稱定重量，用50 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20 yl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；每粒所述八珍益母膠囊含酒白芍以芍藥苷C23H280n計(jì)，不得少于0. 90mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述重量份的當(dāng)歸、川芎、 白術(shù)蒸餾提取揮發(fā)油的時(shí)間為3小時(shí)；加水煎煮的總加水量為所述重量份的當(dāng)歸、川芎、白 術(shù)、黨參、熟地黃、益母草、甘草及三分之二重量份茯苓的總重量的19倍，第一次10倍，第二 次9倍。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種由益母草273重量份，黨參68重量份，熟地黃137重量份，炒白術(shù)68重量份，茯苓68重量份，當(dāng)歸137重量份，酒白芍68重量份，川芎68重量份，甘草34重量份等九味原料藥組成的八珍益母膠囊的質(zhì)量檢測(cè)方法。該方法包括當(dāng)歸、川芎及益母草的薄層色譜鑒別，制劑中酒白芍中的芍藥苷的含量測(cè)定。所述質(zhì)量檢測(cè)方法能夠從多個(gè)方面反映所述八珍益母膠囊的質(zhì)量，從而保證用藥安全和臨床療效。本發(fā)明還公開了所述八珍益母膠囊的制備工藝。
文檔編號(hào)A61K9/48GK101874852SQ201010158809
公開日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2010年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月28日
發(fā)明者張龍輝, 李振華, 楊俊華, 羅國(guó)仕, 虞井紅, 謝志勇, 鄒俊武 申請(qǐng)人:江西南昌桑海制藥廠