專利名稱：一種厚樸生物堿及其提取方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種厚樸活性成分生物堿的提取方法及其作 為α-葡萄糖苷酶抑制劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種以糖代謝紊亂為主要癥狀群的漸進(jìn)性的內(nèi)分泌病，基本病理生理是 體內(nèi)胰島素分泌功能相對(duì)不足或絕對(duì)不足或胰島素受體功能異常等原因，引起代謝紊亂， 包括糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水及電解質(zhì)等。一般表現(xiàn)為高血糖、糖尿及高脂血癥，嚴(yán)重病例可發(fā) 生酮性酸血癥，甚至循環(huán)衰減和昏迷而危及生命。糖尿病共分四類，其中最多的II型糖尿 病占糖尿病總數(shù)的90-95%。糖尿病的治療方法主要有直接補(bǔ)充胰島素、刺激胰島分泌胰島 素、增加對(duì)胰島素的利用、調(diào)節(jié)餐后血糖等方法。通過抑制小腸的α-葡萄糖苷酶活性就可 以降低餐后血糖的峰值，減少高血糖對(duì)機(jī)體的損害，能有效預(yù)防糖尿病的并發(fā)癥。目前機(jī)理 為抑制α -葡萄糖苷酶活性的藥物有阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖，市場呈上升趨勢(shì)。厚樸是一種常用中藥，為木蘭科木蘭屬植物凹葉厚樸(Magnolia officinalis Rehd.et Wils)的干皮、枝皮及根皮。分布較廣，產(chǎn)于浙江、江西湖南、湖北、四川、云南、 貴州、陜西、甘肅等地。其性溫，味苦、辛，具有溫中下氣，化濕引滯功效，用于消炎滅菌、胸 腹脹滿、腸梗阻、痰飲喘滿等癥，在臨床應(yīng)用上占有十分重要的位置。厚樸中已發(fā)現(xiàn)的化 學(xué)成分主要有厚樸酚、和厚樸酚、揮發(fā)油和生物堿，其厚樸酚與和厚樸酚是主要的成分， 也是目前研究得比較多的成分。其抑菌活性可用于口腔護(hù)理，如公開號(hào)為CN101321513， CN101321560, CN1723011, CN1318362, CN101222909 的專利報(bào)道了在口腔方面的應(yīng)用，到目 前為止，還未見關(guān)于厚樸中具有α -葡萄糖苷酶抑制活性成分的報(bào)道。本發(fā)明對(duì)厚樸提取物的α -葡萄糖苷酶抑制活性研究，通過活性追蹤發(fā)現(xiàn)一類生 物堿具有較強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制活性，波譜分析鑒定為一類異喹啉類生物堿，并對(duì)其 提取工藝進(jìn)行了研究。根據(jù)其對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制活性，這類生物堿可能在防治糖尿 病及其并發(fā)癥、肥胖和治療病毒性感冒方面有較好的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明首次從分布廣、資源豐富的厚樸中發(fā)現(xiàn)了具有抑制α -葡萄糖苷酶的活性 成分生物堿。所采取的方法是利用具有離子交換功能的離子交換樹脂或大孔陽離子交換樹 脂作為吸附劑來選擇性吸附有效成分生物堿，也可以用溶劑萃取的方法。本發(fā)明提取工藝 簡單，成本低，無環(huán)境污染，安全無毒，利于規(guī)模化提取生產(chǎn)。得到的總生物堿可作為α-葡 萄糖苷酶抑制劑，可能在防治糖尿病及其并發(fā)癥、肥胖和治療病毒性感冒方面有較好的應(yīng) 用。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案1)提取以厚樸的根或/和皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提??；2)吸附提取液通過強(qiáng)酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；3)洗脫先用水洗樹脂柱，然后用氨水/醇溶液洗脫，濃縮干燥得到總生物堿。提取用的溶液中酸的濃度范圍介于0.01-1%，提取液用量的總體積為厚樸原料重 量的5-15倍，加熱提取溫度為30-100°C;洗脫用的乙醇或甲醇的濃度，其范圍介于5-99%， 氨的含量介于0. 5% -15%;堿化用的堿為氨水或氫氧化鈉或氫氧化鉀或氫氧化鈣或碳酸鈉 或碳酸鉀。所用的強(qiáng)酸型或弱酸型離子交換樹脂，可采用只具有離子交換功能的樹脂如 001 X 7，或具有吸附和交換功能的大孔強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂，如D72樹脂，也可使用弱酸 型大孔交換樹脂?？偵飰A中主要成分為木蘭花堿，鵝掌楸堿，蕃荔枝堿，羅默堿和Lysicamine等 組成?？偵飰A可直接應(yīng)用，或者加入可食用的輔料，如淀粉、微晶纖維素、糊精、蔗糖、乳 糖、維生素C、檸檬酸和亞硫酸鈉中的任意一種或幾種，制備成為片劑、膠囊劑或沖劑等，用 作α-葡萄糖苷酶抑制劑，作為相關(guān)的藥品或功效食品使用。根據(jù)α-葡萄糖苷酶抑制劑 的特點(diǎn)，可能用于防治糖尿病及其并發(fā)癥、防治肥胖癥和治療病毒性感冒。本發(fā)明的特點(diǎn)在于，首次從資源巨大的厚樸中發(fā)現(xiàn)了具有α-葡萄糖苷酶抑制活 性的生物堿，提取制備工藝簡單，易于操作，成本低。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但是不局限于所列舉的例子。實(shí)施例1厚樸樹皮10kg，粉碎后用60L 0. 05%硫酸水滲漉提取。提取液通過D72大孔陽離 子交換樹脂柱(柱體積6L)，20L去離子水洗后用的氨/乙醇水(含乙醇70% )溶液 30L洗脫。洗脫液蒸干，得到總生物堿30g，收率0.3%。取總堿4. 0g，通過硅膠柱層析(氯仿_甲醇梯度洗脫)分離純化得到五個(gè)化 合物，通過質(zhì)譜、核磁共振碳譜和氫譜鑒定為木蘭花堿，鵝掌楸堿，蕃荔枝堿，羅默堿和 Lysicamine0取厚樸總堿50g，加入淀粉3000g，微晶纖維素30g，以50%乙醇制粒，壓片得片劑， 每片0. 6g，其中含總堿10mg，相當(dāng)于厚樸皮2g。上述厚樸提取物的α -葡萄糖苷酶抑制活性的測(cè)試α -葡萄糖苷酶溶液用Wister大鼠的空腸制備，然后測(cè)定蛋白濃度。將厚樸提 取物用水配制成0. 05g/ml的溶液備用。樣品組加空腸勻漿50 μ 1、蔗糖50 μ 1、備檢樣品 50 μ 1 (終濃度為5 μ g/ μ 1)、PBS 50 μ 1。陽性對(duì)照用拜唐蘋，終濃度為0. 5 μ g/ μ 1。另外設(shè) 置一個(gè)空白組，其中的糖苷酶被高溫滅活。標(biāo)準(zhǔn)組其他成分相同，只是不加樣品或拜糖蘋。 上述每組平行作7管，準(zhǔn)備完畢后37°C孵育25分鐘。孵育結(jié)束后加入0. lmol/L的Na2CO3 200 μ 1中止反應(yīng)。每管取樣50 μ 1，按血糖檢測(cè)試劑盒提供的方法測(cè)定所生成葡萄糖的量。
抑制率=〔1-(拜糖蘋組葡萄糖濃度-空白組葡萄糖濃度)/ (標(biāo)準(zhǔn)組葡萄糖濃 度-空白組葡萄糖濃度)〕X100% 根據(jù)上面公式，計(jì)算得到實(shí)施例1各化合物的α -葡萄糖苷酶抑制率分別為番荔 枝堿(60% )，鵝掌楸堿(46% )，羅默堿(51% ) ,Lysicamine (49% )，木蘭花堿為(51% )?？倝A為65%。
權(quán)利要求
一種厚樸生物堿，其特征是包含木蘭花堿，鵝掌楸堿，蕃荔枝堿，羅默堿和Lysicamine的總生物堿。
2.權(quán)利要求1所述的厚樸生物堿的提取方法，包括如下步驟1)提取以厚樸樹皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提??；2)吸附提取液通過強(qiáng)酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；3)洗脫先用水洗樹脂柱，然后用氨水/醇溶液洗脫，濃縮干燥得到厚樸總生物堿。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的厚樸生物堿的提取方法，其特征是提取用的溶液中酸的濃 度范圍介于0. 01-1 %，提取液用量的總體積為厚樸原料重量的5-15倍，加熱提取溫度為 30-100°C ；洗脫用的乙醇或甲醇的濃度，其范圍介于5-99%，氨的含量介于0. 5% -15% ；堿 化用的堿為氨水或氫氧化鈉或氫氧化鉀或氫氧化鈣或碳酸鈉或碳酸鉀。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的厚樸生物堿的提取方法，其特征是所用的強(qiáng)酸型或弱酸型 陽離子交換樹脂為只具有離子交換功能的樹脂如001 X 7，或具有吸附和交換功能的大孔強(qiáng) 酸型陽離子交換樹脂如D72樹脂或弱酸型大孔交換樹脂。
5.權(quán)利要求1所述的厚樸生物堿在生產(chǎn)與α-葡萄糖苷酶抑制劑相關(guān)的藥物或食品制 造中的用途。
6.權(quán)利要求5所述的厚樸生物堿的用途，其特征是直接應(yīng)用或者加入可食用的淀粉 或/和微晶纖維素或/和糊精或/和蔗糖或/和乳糖或/和維生素C或/和檸檬酸或/和 亞硫酸鈉輔料，制備成片劑或膠囊劑或沖劑的藥物或功效食品。
全文摘要
本發(fā)明屬于有機(jī)化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種厚樸活性成分生物堿的提取方法及其作為α-葡萄糖苷酶抑制劑的應(yīng)用。本發(fā)明厚樸生物堿包含木蘭花堿、鵝掌楸堿、蕃荔枝堿、羅默堿和Lysicamine的總生物堿；以厚樸樹皮為原料，用酸水溶液常溫或加熱提取；提取液通過強(qiáng)酸型或弱酸型陽離子交換樹脂，活性成分被吸附在樹脂上；先用水洗樹脂柱，然后用氨水/醇溶液洗脫，濃縮干燥得到厚樸總生物堿。本發(fā)明具有提取制備工藝簡單、易于操作、成本低等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K36/575GK101966228SQ20091006012
公開日2011年2月9日 申請(qǐng)日期2009年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月27日
發(fā)明者喻凱, 王明奎, 瞿慶喜 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院成都生物研究所