專利名稱：灰兜巴有效成份的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工藝方法，屬于中 草藥開發(fā)應(yīng)用領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
灰兜巴(又名閉口袋)是一種山蜘蛛寄生在海拔1500米以上的峨眉山老
茶樹頭部生長出來的菌科植物。性味平、淡。功能1、益氣健脾，滋補(bǔ) 腎陰、消除、緩解糖尿病癥狀。2、改善胰島B細(xì)胞性不足，促進(jìn)體內(nèi)血糖的 自然平衡。3、平衡陰陽，調(diào)和氣血，糾正代謝絮亂，防止糖尿病并發(fā)癥。 主治糖尿病。適用于T型E型糖尿病，當(dāng)血糖下降到正常值時(shí)，應(yīng)健康飲食，
堅(jiān)持運(yùn)動(dòng)，使其控制血糖穩(wěn)定，不需依賴藥物治療。稱為仙山靈藥、糖尿病 克星、天然純綠色的大自然珍寶。民間已有患者服用并顯示其免疫力增強(qiáng)， 血糖下降到正常值，且無毒副作用。但目前為止，人們對灰兜巴的理論研究 尚少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于從研究一種灰兜巴有效成份的提取方法，以進(jìn)一步開發(fā) 灰兜巴產(chǎn)品為目的。
本發(fā)明技術(shù)方案是將灰兜巴浸泡水提，抽濾分離，將濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 儀濃縮，然后用濃度不低于80。/。的乙醇沉淀，采用低溫超速離心，分離出多
糖沉淀，將沉淀出的多糖用有機(jī)溶劑洗滌，再經(jīng)真空干燥，得灰兜巴粗多糖。 本發(fā)明方法工藝簡單，不含游離的蛋白質(zhì)，無需三氯醋酸沉淀蛋白質(zhì)， 不必洗滌除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效?？蓪⒒叶蛋痛侄嗵亲?br> 為口服藥防治T型E型糖尿病使用，以提高藥物療效，可望該多糖有效成份 提取利用對增強(qiáng)人的免疫力，具有積極作用和深遠(yuǎn)意義。
本發(fā)明中，灰兜巴浸泡時(shí)，水為室溫，提取時(shí)水浴溫度6(TC 9(TC。如 溫度太低，有效成份溶出速率慢，如溫度太高，可能會造成有效成份部分氧 化。
為了將灰兜巴粗多糖盡可能完全地提取出來，按濃縮液體積3 4倍量的 無水乙醇沉淀出多糖，并依次用有機(jī)溶劑洗滌。
為了進(jìn)一步提純，獲得精制灰兜巴有成份，本發(fā)明還將粗多糖經(jīng)柱層析 分離得多糖產(chǎn)品。
為了充分利用灰兜巴，使有效成份盡可能完全溶解在水中，本發(fā)明先將 灰兜巴粉碎后再浸泡。
所述有機(jī)溶劑為乙醇或丙酮或乙醚或石油醚。
具體實(shí)施例方式
一、 灰兜巴有效成份的提取-
稱取一定質(zhì)量灰兜巴剪碎，投入圓底燒瓶中，加蒸餾水至剛好將藥品浸 沒，室溫浸泡1 3小時(shí)后，于水浴回流提取lh，水浴溫度6(TC 9(TC，抽 出提取液。用同樣的方法以蒸餾水再提取2次，每次lh，合并提取液。
將濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，再用濃縮液體積3 4倍量的無水乙醇沉淀 多糖，冰箱冷藏靜置12小時(shí)，采用低溫超速離心分離出固體多糖，然后依 次用無水乙醇、丙酮和乙醚等有機(jī)溶劑反復(fù)洗滌多糖沉淀(每種溶劑至少洗 3次)。真空干燥(由于最后用乙醚洗滌，所以真空干燥箱內(nèi)放置一定量的吸 水劑、抗氧劑，室溫抽真空12小時(shí)，)，得粉紅色粉末，此為灰兜巴粗多糖。
將粗多糖再經(jīng)柱層析分離得多糖產(chǎn)品。
洗滌多糖沉淀物時(shí)，可用的有機(jī)溶劑還有石油醚。
二、 多糖產(chǎn)品性能表征、特點(diǎn) 與鎂粉-濃鹽酸反應(yīng)不顯橙紅色，提示不含黃酮類。
加入中性鹽，三氯醋酸，未見絮狀物析出，表明無游離蛋白質(zhì)。
與茚三酮共熱，顯藍(lán)紫色，紫外光譜測定在波長280nm處有吸收，表明 提取物中有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)部分。
紅外光譜顯示此多糖含有a -和P -糖苷鍵。
毛細(xì)管電泳分析灰兜巴多糖中氨基酸的組成。色譜法測定多糖分子量。
灰兜巴多糖系肽多糖。
三、應(yīng)用
某患者，經(jīng)常感冒，血糖指數(shù)12mmol/L 。
服用經(jīng)本發(fā)明提取的灰兜巴粗多糖，每日30g灰兜巴的水提液，經(jīng)60 天后，其免疫力增強(qiáng)，與服用前的同季節(jié)相比，患感冒次數(shù)明顯下降，血糖 下降到正常值。
權(quán)利要求
1、灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于將灰兜巴浸泡水提，抽濾分離，將抽濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，然后用濃度不低于80％的乙醇沉淀，采用低溫超速離心分離出多糖沉淀，將沉淀出的多糖用有機(jī)溶劑洗滌，再經(jīng)真空干燥，得灰兜巴粗多糖。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于浸泡灰兜 巴時(shí)，水溫為室溫，提取時(shí)水浴溫度為6(TC 9(TC。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于所述有機(jī) 溶劑為乙醇或丙酮或乙醚或石油醚。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于先將 灰兜巴剪碎后再浸泡。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法，其特征在于沉淀多糖 時(shí)，按濃縮液體積3 4倍量的無水乙醇沉淀出多糖。
全文摘要
灰兜巴有效成份的提取方法，涉及從菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工藝方法，屬于中草藥開發(fā)應(yīng)用領(lǐng)域。將灰兜巴浸泡水提，抽濾分離，將濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，然后用濃度不低于80％的乙醇沉淀，采用低溫超速離心，分離出多糖沉淀，將沉淀出的多糖用有機(jī)溶劑洗滌，再經(jīng)真空干燥，得灰兜巴粗多糖。本方法工藝簡單，不含游離的蛋白質(zhì)，無需三氯醋酸沉淀蛋白質(zhì)，不必洗滌除酸，易于操作，能防止有效成份氧化失效?？蓪⒒叶蛋痛侄嗵亲鳛榭诜幏乐蜹型E型糖尿病使用，以提高藥物療效。
文檔編號A61K36/06GK101380339SQ200810154890
公開日2009年3月11日 申請日期2008年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月17日
發(fā)明者宋根萍 申請人:揚(yáng)州大學(xué)