專(zhuān)利名稱(chēng)：預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合脂多肽疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合脂多肽疫苗。屬生 物制藥技術(shù)領(lǐng)域。
技術(shù)背景丙型病毒性肝炎(HCV)是危害人們健康的全球性疾病。目前全球有 1.7億人感染HCV。在我國(guó)，HCV感染者3800萬(wàn)，且有逐年上升趨勢(shì)。 去年，我國(guó)HCV新發(fā)病例達(dá)10萬(wàn)人。HCV發(fā)病隱匿，易被忽略，不能得 到及時(shí)診治，故50X—85X的患者將演變?yōu)槁訦CV，最終發(fā)展成為肝硬 化和肝癌，成為肝病中病死率最高的疾病之一。HCV病毒的隨機(jī)復(fù)制RNA的結(jié)果，導(dǎo)致了眾多的HCV的亞型。不同 基因型HCV存在并分布于世界的不同區(qū)域。這些HCV亞型可以逃避人體 的免疫系統(tǒng)的監(jiān)控，導(dǎo)致了病毒的持續(xù)存在，發(fā)展成為慢性感染。由于病 毒的變異和多樣性，使得預(yù)防和治療性疫苗的研究遭遇到極大的困難。非洲黑猩猩的研究材料表明，HCV的不同基因性中，存在著一些共性， 有可能取得一定程度的交叉保護(hù)作用。對(duì)靜脈藥物使用者的研究中發(fā)現(xiàn)， 在HCV感染恢復(fù)后，再次感染HCV,能夠縮短病毒血癥的持續(xù)時(shí)間和嚴(yán)重 程度。這些發(fā)現(xiàn)支持了開(kāi)發(fā)預(yù)防和治療HCV疫苗的可能性?，F(xiàn)有證據(jù)表明強(qiáng)有力的持續(xù)的CD8+ T細(xì)胞的活性對(duì)于清除HCV 病毒是十分重要的，而CD8+ T細(xì)胞的活性則依賴(lài)于CD4+ T輔助細(xì)胞的 功能。1^^病毒對(duì)004+ T輔助細(xì)胞的抑制性作用，是導(dǎo)致機(jī)體對(duì)HCV 的免疫失敗。病毒感染后一般要經(jīng)歷吸附(宿主細(xì)胞)、穿入、脫殼、核酸復(fù)制，轉(zhuǎn) 錄翻譯，包裝等多個(gè)階段。阻止任一過(guò)程均可防止病毒復(fù)制。最有效的抗 病毒藥物應(yīng)該是作用在病毒吸附及核酸復(fù)制兩個(gè)階段，因此篩選抗病毒藥 物主要集中在病毒復(fù)制的這兩個(gè)階段。病毒通過(guò)與宿主細(xì)胞上的特異受體 結(jié)合吸附細(xì)胞，依賴(lài)其自身的特異蛋白酶進(jìn)行蛋白加工及核酸復(fù)制。因此 篩選與宿主細(xì)胞受體結(jié)合的多肽或能與病毒蛋白酶等活性位點(diǎn)結(jié)合的多肽 有助于病毒的預(yù)防和治療。人體有效的免疫應(yīng)答有助于HCV急性感染的恢復(fù)。T輔助淋巴細(xì)胞參 與控制HCV病毒的復(fù)制。通過(guò)CD4+的T淋巴細(xì)胞活性的激活，促進(jìn)分泌 細(xì)胞素，增加具有細(xì)胞毒的CD8+淋巴細(xì)胞和分泌抗體的B淋巴細(xì)胞，以 及樹(shù)突狀細(xì)胞，通過(guò)這些細(xì)胞分泌抗病毒的淋巴素，如IFN-[gamma] and TNF-[alpha]， Thl型淋巴細(xì)胞(分泌白介素2和IFN[gamma])有助于HCV 急性感染的自然恢復(fù)過(guò)程。HCV感染不僅引起很強(qiáng)的和持續(xù)的CD8+ T細(xì)胞反應(yīng)，同時(shí)也引起 CD4+T細(xì)胞的反應(yīng)。病毒的清除與細(xì)胞特異性免疫增強(qiáng)有關(guān)，而轉(zhuǎn)為慢性 HCV者，通常對(duì)抗原決定部位的免疫反應(yīng)低下。隨著HCV特異的CD4+T 淋巴細(xì)胞降低.HCV病毒血癥增加。這種重要的現(xiàn)象在非洲黑猩猩模型得到證實(shí)。小鼠的實(shí)驗(yàn)表明較強(qiáng)的T細(xì)胞反應(yīng)與抗原特異幼稚T細(xì)胞前體的出現(xiàn) 有關(guān)。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合脂多肽 疫苗。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的 一種預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合 脂多肽疫苗，其特征在于所述混合脂多肽至少包含兩個(gè)從丙型病毒性肝炎病毒(HCV)分離得到的多肽，其中至少有一個(gè)是來(lái)自HCV核心蛋白C, 脂多肽復(fù)合物至少與4個(gè)不同的MHCII分子結(jié)合。其活性高，結(jié)合濃度低 于1000nM;通過(guò)化學(xué)選擇性連接法得到的具有免疫原性的抗-HCV脂多肽； 疫苗包含有這些脂多肽的成分。脂多肽的原理目前對(duì)人類(lèi)危害極大的丙型病毒性肝炎尚無(wú)理想的疫苗。1999年美國(guó) NIH公布了兩種HIV-I病毒多肽疫苗，對(duì)人體進(jìn)行的I期臨床試驗(yàn)結(jié)果，證 實(shí)兩種多肽能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體和特異性細(xì)胞免疫，并有較好的安 全性。HCV多肽疫苗也顯示有良好的發(fā)展前景，有報(bào)道HCV外膜蛋白E2 內(nèi)篩選出一般多肽，它可刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體。HCV非結(jié)構(gòu)蛋白3區(qū)(NS3)是一個(gè)與病毒復(fù)制密切相關(guān)的蛋白酶，其 活性位點(diǎn)已被確定，并且加拿大、意大利等國(guó)家均從肽庫(kù)內(nèi)篩選到一個(gè)6 肽(DDIVPC)能顯著抑制該酶活性。同樣已從肽庫(kù)內(nèi)篩選到能與HIV復(fù)制必需的逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合的小肽，及能與HIV外膜蛋白結(jié)合防止病毒進(jìn)入細(xì)胞的小肽。這些部分小肽已進(jìn)入臨床試驗(yàn)。合成多肽疫苗具有常規(guī)疫苗不可比擬的優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)得到廣泛研究。研究表明，疫苗能夠刺激1111-加6€04+反應(yīng)，.直接對(duì)抗HCV感染。 但是，CD4+淋巴細(xì)胞只能認(rèn)識(shí)由HLA II分子提供的多肽抗原，這些多肽 是蛋白降解后由抗原提供細(xì)胞傳遞給HLAII分子的。這些多肽稱(chēng)為T(mén)抗 原決定基，常常有13到15個(gè)氨基酸，有一與HLAII分子結(jié)合的序列。決 定是否是T抗原決定基，是測(cè)量其能否刺激單核細(xì)胞的增殖。TH,和多特異性CD4+T細(xì)胞反應(yīng)與HCV的清除有關(guān)。因此，在今后 治療和預(yù)防性的HCV疫苗中應(yīng)該引入多樣T細(xì)胞表位，同時(shí)，提示，檢 測(cè)CD4+細(xì)胞也需要多種和適當(dāng)?shù)闹嚯膩?lái)評(píng)估其免疫應(yīng)答情況。我們的研究結(jié)果對(duì)于設(shè)計(jì)治療性和預(yù)防性HCV疫苗有著重要的貢獻(xiàn)。我們研究了志愿者HCV序列的HLAII分子對(duì)CD4+T細(xì)胞的反應(yīng)。 通過(guò)HLA-DR的結(jié)合實(shí)驗(yàn)，.我們確定了泛宿主性的NS3 and Core抗原的 結(jié)合部位。我們選用包含多個(gè)肽的長(zhǎng)片段用于體外的刺激實(shí)驗(yàn)，研究它們 刺激幼稚T細(xì)胞前體的能力。盡管它們都是雜亂的，但是顯示了刺激特異 T細(xì)胞的不同能力。此外，我們發(fā)現(xiàn)了8個(gè)最具免疫原性的多肽，在感染 HCV的人群，他們的目標(biāo)常針對(duì)T細(xì)胞抗原決定部位。HCV脂多肽的構(gòu)建脂多肽是肽以共價(jià)鍵與一個(gè)或多個(gè)脂肪酸結(jié)合，在活體外和活體內(nèi)的 實(shí)驗(yàn)表明，具有抗原性的多肽，或者具有生物學(xué)活性的序列，當(dāng)直接與脂質(zhì)連接后給藥，可引起特定的反應(yīng)。新的合成脂多肽策略是引入尾部帶有化學(xué)選擇的配位體的脂質(zhì)鏈。這 中方法可以聯(lián)結(jié)去保護(hù)性的分子片段，通過(guò)協(xié)同地或者單獨(dú)的發(fā)揮其功能 作用。合成每一個(gè)多肽的化學(xué)價(jià)，并分別純化，用常規(guī)的多肽純化方法， 在酸性的媒介中生成帶正電荷，具有特定的功能多肽，用這種方法，分子的大小不再受到限制。相應(yīng)的分子就像尼龍刺粘搭鏈(Vdcro)加到脂質(zhì)鏈 上。衍生的多肽序列通過(guò)化學(xué)選擇性連接法。


圖1為本發(fā)明脂多肽合成式。圖2為顯示細(xì)胞內(nèi)輸送HCV脂肽37°C (16)和25。C (ld)人體樹(shù) 突狀細(xì)胞對(duì)HCV衍生的脂多肽胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的胞吞區(qū)域(脂肽NS3 1250-1264 KVLVLNPSVAATLGF)。圖3為本發(fā)明所有供體的T細(xì)胞含有多個(gè)反應(yīng)表位圖。
具體實(shí)施方式
限制性作用于HLAII的核心蛋白C和NS3蛋白多肽的描述 為了鑒別HCV核心蛋白C和NS3蛋白中的泛宿主性的多肽，我們用 了 15-30氨基酸的片段進(jìn)行了 HLAII的結(jié)合測(cè)定，為了減少長(zhǎng)片段的數(shù)目， 我們僅僅考慮了核心蛋白C和NS3測(cè)序區(qū)的多肽，其中含有多個(gè)芳香和疏 水殘基，并能與HLA-DR分子結(jié)合。我們同時(shí)也研究了這些選擇的片段是 否包含有多個(gè)潛在的CD4+細(xì)胞的表位。其依據(jù)是TEPITOPE和PROPRED預(yù)測(cè)方法。最后，每一個(gè)片段的長(zhǎng)度和重疊部分分別根據(jù)核心蛋白C和NS-3序列進(jìn)行確定。用于本研究的各個(gè)HLAII分子在歐洲和北美的白種人群 中出現(xiàn)的等位基因頻率超過(guò)5% (表l)。綜合起來(lái)，超過(guò)85%的這批人群 攜帶有HLAII分子。表l衍生自HCV核心蛋白和NS3蛋白的HLA結(jié)合容量Fragments IC50 (nM)b) Number ofSequencesLengthDR1DR3DR4DR7DR11DR13DR1SDRB3DRB4DRB5bound(9%)c)(,(6%)(14%)(9%)(9%)(28%)HLAIICore 194729335>100000'670824445626S158>1000008000IS6Core 31-5727219>100000'3354148237316131>100000158"46Core 93-1071544725000060000648181>iooooo1 27386>100000493233541Core 104-13330S25013981123829>100000'1233173213107566sCore 127-14923>100000793714204>100000340>10000010774Core 148-1732610000343428173242549487497535004000059161NS3 1007-103731200987112253015000608NS3 1036-105520926000601225162>100000>100003500015010SNS3 1052-107221400212124200>100000279223639719MS3 1076-109318132>100000150012632>100000424600060000100NS3 1127-1153271025>100000'346414142963240>1000002500458NS3U 49-1172248>100000卯OO951754>1000001 806>，00000100566sNS3 1174-U952230000283240畫(huà)o鄰37429420NS3 1190-121223592273924358944726322500012257146NS3 1206-1239345325000418561529>1000001 >1000047433857321NS3 1246-12753012500S1540卿57>30000244912256NS3 1275-130430ISO>1000001 500mn>iooooo1 529141346412166NS3 1362-13872633212131620173000>100000'580316234000200NS3 1377-1403271277142828748611582475>10000089436NS3 1404-14322940>1000002150515001000002250025005205NS3 1495-151319155>1000001 1225310173>10000C1 ISO400001326NS3 1524-155330136912169798柳30168NS3 1552-15833147417321，871274100648125438891500324S注IC5。1000nM以黑體表示，符合有活性多肽，均值由至少三次不同根據(jù)其他研究者提出的lOOOnM IC5Q閾值界限，我們第一次區(qū)分了有 活性和無(wú)活性的多肽。核心蛋白的6個(gè)片段中，有重疊的兩個(gè)片段C19-47 和C31-57與6個(gè)HLAII分子結(jié)合；兩個(gè)片段(Core 104-133 and Core 127-149)與5個(gè)分子結(jié)合；其他兩個(gè)片段(Core 93-107 and Core 148-173) 僅與一個(gè)分子結(jié)合。在NS3蛋白，NS3 1007-1037和NS3 1524-1553多肽 對(duì)8 HLA分子有顯著的活性。我們也觀(guān)察到NS3蛋白中有多個(gè)多肽能與6 個(gè)以上的HLA分子結(jié)合(表2)。隨后，我們合成了49個(gè)重疊的15-mer, 來(lái)自泛宿主性的長(zhǎng)片段多肽。這些合成的多肽包含了所有能夠與6個(gè)HLA 分子結(jié)合的片段，和3個(gè)非泛宿主性的片段。然后用這些重疊15-mer的多 肽進(jìn)行HLA特異結(jié)合測(cè)定(表2)。表2僅僅報(bào)告了能夠與4個(gè)以上HLAII 分子結(jié)合的多肽。有3個(gè)泛宿主性的多肽衍生自核心蛋白C，21個(gè)有15-mer 重疊的多肽衍生自NS3蛋白。表2衍生自HCV核心C與NS3蛋白的15-mer多肽的HLA結(jié)合容P印tides IC50 (nM)b) NumberofboundDR1DR3DR4DR7DR11DR13DR1SDRB3DRB4DRB5HLACore31"4574>1000003464113674749324>100000391495Core 131-1450.5>100000256951250>10000016>10000054896Core 134-1481>100000300076柳>10000065>100000>1000008NS3 1007-102193245477150003107>10000024700008913424NS3 1015-1029〉10000042431372810000412>10000017500200NS3 1020-10340.4>100000133461>10000049>100000849NS3 1024-1037224>100000450048999251414100>10000094913964NS3 1036-105018>10000034624491095>1000001510>1000002832000NS3 1174-U884>10000010005247482000042>10000047922NS3 1192-1206132>100000574134ISO>1000001543>100000>10000014374NS3 1246-126061183216265521060713790000300002086NS3 1250-12648418320390100002104000064814476NS3 1261-1275648>100000161256182>100000632>100000>100000812NS3 12卯-13043464>1000002432995195>翻00133S36>10000030004NS3 138卜139523130432401483516134616>10000010459126NS3 1383-1397574183301710006536714148000030984177NS3 1495-1509105>難001949949352>10000050>10000031072NS3 1524-15383>10000027753200>10000013684>100000>100000219NS3 1528-15425486000193677S325>100000398>100000>10000089sNS3 1534-1548100>畫(huà)005358379710000>100000130S13NS3 1538-15522>畫(huà)00771016>100000920001872186NS3 1540-15539>10000042420265>1000008367>100000600001965NS3 1559-157327>1000003000166>,0030260000>10000025NS3 1563-157773742189714812418913>1000003464112注IC5()1000nM以黑體表示，有活性多肽，均值由至少三次不同的實(shí) 驗(yàn)數(shù)據(jù)求得。多肽的選擇選擇性脂多肽的HLA結(jié)合容量 、 T細(xì)胞對(duì)HCV多肽的反應(yīng)限制作用與多個(gè)HLA-DR分子，為了特征 性HLAII分子對(duì)HCV多肽的呈遞，根據(jù)供體的，我們采用轉(zhuǎn)染了HLA分子的L細(xì)胞作為APC。我們對(duì)來(lái)自4個(gè)不同供體的18株不同T細(xì)胞株進(jìn)行了評(píng)估。NS3多 肽1250-1264至少作用與11，DR15，DR7,DRB5,DRB4;NS31528-1553限制作 用與DR15和DRB5;NS31552-1583限制作用與DR11.我們也觀(guān)察到Core 27-51多肽通過(guò)DR7，DR15和DRB5被呈遞給T細(xì)胞。呈遞HCV多肽到T 細(xì)胞包括了多個(gè)HLA分子，這與它們不同分子所具有的較為廣泛的特異性 相一致。表3、 HCV核心蛋白C和NS3蛋白的泛宿主性的多肽Lipopeptides b)length,(nM)Number of boundDR1DR3DR4DR7DR11DR13DR1SDRB3DRB4DRB5HLAIICore 27-5125265196211622248S44368>1000003354316Core 131-14919>1000003347536鄰>畫(huà)005加>,00547712SNS3 1036-105520936000601250163>100000畫(huà)03500015010SNS3 11卯-1212 c)2360027502835卯45007002500012507256NS3 1250-1264 c)15841832073卯100002104000064814476NS3 138K14032325159691341634643鄰4255092>10000015811114NS3 1528-15532621225551956>100000259820036NS3 1552-1583324751750018752751006500鄰0412515003256本發(fā)明的選擇的脂多肽本發(fā)明的選擇的脂多肽如下Core 27-51 GGQIVGGVYLLPRRGPRLGVRATRK， Core 131-149 ADLMGYIPLVGAPLGGAAR， NS3 1036-1055 TRGLLGCIITSLTGRDKNQV，NS3 1190-1212 AKAVDFIP VENLETTMRSP WTD ，NS3 1250-1264 KVLVLNPSVAATLGF，NS3 1381-1403 PLEVIKGGRHLIFCHSKKKADEL，NS3 1528-1553 YELTPAETTVRLRAYMNTPGLPVAQD，NS3 15 52-15 83 QDHLEFWEGVFTGLTfflDAHFLSQTKQSGENL 。脂多肽的臨床前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果以脂多肽為基礎(chǔ)的HCV候選疫苗，己經(jīng)在相關(guān)的臨床前期模型進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。在對(duì)小鼠、松鼠猴屬、夜猴等動(dòng)物的研究中均未見(jiàn)急性毒性反應(yīng)(表4)。表4 HCV脂多肽混合物的臨床前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果AnalysesMethodsUnitsSpecificationsResultsAcute toxicityEP (mice), CERB/TranceNoneNegativeToxicity in micePasteur Institut / Paris / FranceNoneNegativeNegativeToxicity in iS"http://mWLaboratorio de Pesquisas Rio de Janeiro, RJ / BrasilNoneNegativeNegativeToxicity inLaboratorio de Pesquisas Rio de Janeiro, RJ / BrasilNoneNegativeNegative抗原特異性T細(xì)胞株的增殖培育及其與特異性幼稚和成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞由塑料黏附的PBMC經(jīng)過(guò)5天培養(yǎng)，培養(yǎng)液 為AIM-V培養(yǎng)液，成熟添加劑為1000 units/mL of rh-GmCSF (R&D System, Lille, France) and 1000 units/mL of rh-IL-4 (R&D Systems). LPS (Sigma) (1 pg/mL) 。 €04+淋巴細(xì)胞通過(guò)使用抗-CD4+單克隆抗體，通過(guò)監(jiān)護(hù)站系統(tǒng) (MACS)進(jìn)行正向選擇進(jìn)行分離，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞純度的評(píng)估。 這些細(xì)胞用IMDM培養(yǎng)液稀釋?zhuān)琁MDM添加有24 mM glutamine， 55'mM asparagine, 150 mM arginine (all amino acids from Sigma), 50 U/mL penicillin and 50 |ag/mL streptomycin (Invitrogen), and 10% human serum 。成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)， (5， 105)在37。C， 5。/。C02的培養(yǎng)箱中培 養(yǎng)4小時(shí)，培養(yǎng)為IMDM培養(yǎng)液與HCV多肽混合物lml，每一種多肽的 濃度為10ug/ml。不健康的細(xì)胞被洗脫，每個(gè)圓底微管加上200ul IMDM 含有104到105個(gè)自體CD4+淋巴細(xì)胞，培養(yǎng)液中含有1000U/ml IL-6和10 ng/mLIL-12。在第7、 14和21天，CD4+淋巴細(xì)胞用自體DC和新鮮加入的HCV混 合多肽再刺激，在IMDM添加有10 U/mL IL-2 (R&D Systems)和5 ng/mL IL-7 (R&D Systems)。在28和29天，使用Immunospot(Elicpot)測(cè)定法來(lái)檢 測(cè)這些經(jīng)過(guò)刺激的CD4+ T淋巴細(xì)胞的IFN表達(dá)，以評(píng)估脂多肽的特異性 (Fig.l)。泛宿主性HCV多肽刺激幼稚CD4T細(xì)胞的不同效果 最后，我們用最少量的脂多肽去最大限度地覆蓋HLA的結(jié)合區(qū)域，從 長(zhǎng)片段和15-mer多肽的結(jié)合測(cè)定法的實(shí)驗(yàn)資料中確定了 8個(gè)多肽(表3)。 NS3 1036-1055, NS31190-1212 andNS3 1552-1583S是原始設(shè)定的長(zhǎng)片段。 NS3 1250-1264 15-mer多肽優(yōu)于長(zhǎng)片段NS31246-1275，因?yàn)槠洳粌H長(zhǎng)度短， 且活性高。根據(jù)15-mer多肽測(cè)定法和評(píng)估其與HLA分子的結(jié)合力，研制了 4個(gè) 新片段(core27-51， Core 131-149, NS3 1381-1403, 1528-1553)，我們揚(yáng)棄 了多肽NS3 1007-1037和NS3 1174-1192，因?yàn)檫@些多肽不僅產(chǎn)量過(guò)低，而 且不容易溶解于培養(yǎng)液。我們檢測(cè)了所選擇的8個(gè)多肽在體外剌激人CD4+ 淋巴細(xì)胞的能力。這些淋巴細(xì)胞是從12位的HCV血清學(xué)陰性的供體中獲得。這些供體展示了HLA-DR分子的多樣性。包括了所有的我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室所考慮過(guò)的HLA-DR分子。每一供體的純 化的CD4+淋巴細(xì)胞被種植到48到60培養(yǎng)孔，培養(yǎng)液含有自體成熟的樹(shù)突 狀細(xì)胞，HCV脂多肽和細(xì)胞活素。用上述方法，每周刺激一次，允許稀少 的多肽特異性的T細(xì)胞前體的增殖。從這些實(shí)驗(yàn)和測(cè)定法中一共獲得了122 個(gè)多肽特異的T細(xì)胞株。通過(guò)這些供體所得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，所有供體 的T細(xì)胞含有多個(gè)反應(yīng)表位(圖3)。特殊的多肽來(lái)自HCV核心蛋白C和非結(jié)構(gòu)蛋白NS3。 (5)混合脂多 肽可以作為HCV的檢測(cè)試劑，作為預(yù)防和治療HCV的疫苗。
權(quán)利要求
1、一種預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合脂多肽疫苗，其特征在于所述混合脂多肽至少包含兩個(gè)從丙型病毒性肝炎病毒(HCV)分離得到的多肽，其中至少有一個(gè)是來(lái)自HCV核心蛋白C，脂多肽復(fù)合物至少與4個(gè)不同的MHC II分子結(jié)合。其活性高，結(jié)合濃度低于1000nM；通過(guò)化學(xué)選擇性連接法得到的具有免疫原性的抗-HCV脂多肽；疫苗包含有這些脂多肽的成分。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎的混合脂多肽疫苗，其特征在于所述混合脂多肽至少包含兩個(gè)從丙型病毒性肝炎病毒(HCV)分離得到的多肽，其中至少有一個(gè)是來(lái)自HCV核心蛋白C，脂多肽復(fù)合物至少與4個(gè)不同的MHC II分子結(jié)合。其活性高，結(jié)合濃度低于1000nM；通過(guò)化學(xué)選擇性連接法得到的具有免疫原性的抗-HCV脂多肽；疫苗包含有這些脂多肽的成分。本發(fā)明能預(yù)防和治療丙型病毒性肝炎。
文檔編號(hào)A61K39/29GK101596314SQ20081012384
公開(kāi)日2009年12月9日 申請(qǐng)日期2008年6月6日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月6日
發(fā)明者勒 梅, 阿邁德, 陳以旺 申請(qǐng)人:陳以旺;阿邁德;梅 勒