專利名稱：：一種含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物制劑領(lǐng)域，更具體涉及一種含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：腫瘤是機(jī)體在各種致瘤因素作用下，局部組織的細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長(zhǎng)的調(diào)控，導(dǎo)致單克隆性異常增生而形成，一般分為良性腫瘤和惡性腫瘤兩大類，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最嚴(yán)重的一類疾病，也就是我們通常意義上所稱的"癌癥"。目前常用的治疔癌癥和腫瘤的方法為化學(xué)療法和放射性療法，這些在殺死癌細(xì)胞的同時(shí)，對(duì)人體的健康細(xì)胞也有很大的危害，而且嚴(yán)重降低人體自身免疫力，引起并發(fā)癥。乳酸菌是一種對(duì)人體健康十分有益的微生物，其在發(fā)酵過(guò)程中能夠產(chǎn)生代謝產(chǎn)物如胞外多糖和肽聚糖，它們是免疫調(diào)節(jié)劑，能激活免疫受體，提高機(jī)體免疫功能，從而在促進(jìn)人體健康和防止疾病中發(fā)揮著重要作用，大豆皂甙是從大豆及豆粕、豆臍中經(jīng)過(guò)提取、分離而得的一種天然活性物質(zhì)，具有較多有益的生理功能，如降低血中膽固醇和甘油三酯含量，抗氧化、抗自由基、降低過(guò)氧化脂質(zhì)含量，抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，抑制血小板凝聚，抗病毒，免疫調(diào)節(jié)作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用，該復(fù)方制劑為活菌制劑或非活菌制劑，生物活性大，有效提高人體的免疫力，具有抗癌防癌的療效，制備方法簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng)，適合大規(guī)模推廣，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。本發(fā)明的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑，其特征在于所述復(fù)方制劑為活菌制劑或非活菌制劑，采用冷凍干燥或噴霧干燥制得，所述復(fù)方制劑的配方為按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)1098.5%乳酸菌發(fā)酵物，1.590%大豆皂甙。本發(fā)明的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于將乳酸菌菌種在3642'C接種乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在3742'C發(fā)酵552小時(shí)后濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥獲得活菌乳酸菌發(fā)酵物或者100115'C滅菌，噴霧干燥獲得非活菌乳酸菌發(fā)酵物；將所述乳酸菌發(fā)酵物與大豆皂甙按質(zhì)量配比混合，經(jīng)過(guò)40~100目篩，加入所述混合物總質(zhì)量0.5%的硬脂酸鎂，混合，經(jīng)過(guò)40100目篩，填裝膠囊，制備成復(fù)方制劑。本發(fā)明的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的應(yīng)用為所述復(fù)方制劑用于制備具有提高免疫力功能藥物或保健品的用途，或者直接作為具有提高免疫力功能藥物或保健品的用途。所述復(fù)方制劑用于制備具有抗腫瘤作用藥物或保健品的用途，或者直接作為具有抗腫瘤作用藥物或保健品的用途。所述復(fù)方制劑用于制備具有提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途，或者直接作為具有提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明采用乳酸菌發(fā)酵物和大豆皂甙為原料，充分利用了乳酸菌發(fā)酵物中含有的有益菌，如嗜酸乳桿菌等，能夠有效阻止病原菌、病毒的侵襲；刺激人體分泌抗體，提高人體免疫力；選擇性殺死某些致病菌，保護(hù)促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng)；調(diào)節(jié)人體電解質(zhì)、水分平衡；大豆皂武是類固醇或三萜系化合物的低聚配糖體的總稱，是一種具有廣泛應(yīng)用價(jià)值的天然生物活性物質(zhì)，可以提高LAK(淋巴因子激活的殺傷性細(xì)胞)細(xì)胞、NK(自然殺傷性細(xì)胞)細(xì)胞的活性，增加IL一2(白介素)的分泌及增強(qiáng)T、B淋巴細(xì)胞對(duì)ConA(刀豆蛋白A)、LPS01多糖)的增殖能力，說(shuō)明大豆皂甙在體內(nèi)對(duì)小鼠的免疫功能有廣泛的調(diào)節(jié)效應(yīng)。大豆皂式對(duì)T細(xì)胞功能的增強(qiáng)作用，特別是T細(xì)胞功能的增強(qiáng)使IL一2的分泌增強(qiáng)，而IL一2的功能是保持T細(xì)胞的存活與增殖，促進(jìn)T細(xì)胞產(chǎn)生淋巴因子，增加誘導(dǎo)殺傷性T細(xì)胞、NK細(xì)胞分化及提高LAK細(xì)胞活性，從而表現(xiàn)出較強(qiáng)的免疫功能，本發(fā)明將這兩種有益物質(zhì)有機(jī)的結(jié)合起來(lái)制成的復(fù)方制劑具有顯著的提高人體的免疫力，抗癌防癌的療效，抗腫瘤的效果，并且制備方法簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng)，適合大規(guī)模推廣，而且制作的復(fù)方制劑為活菌制劑或非活菌制劑，生物活性大，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。具體實(shí)施例方式活菌乳酸菌發(fā)酵物的制備方法為將乳酸菌菌種在3642'C接種乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在3742°C發(fā)酵552小時(shí)后濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥獲得活菌乳酸菌發(fā)酵物。非活菌乳酸菌發(fā)酵物的制備方法為將乳酸菌菌種在3642'C接種乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在3742'C發(fā)酵552小時(shí)后濃縮，100115'C滅菌，噴霧干燥獲得非活菌乳酸菌發(fā)酵物。將所述乳酸菌發(fā)酵物與大豆皂甙按質(zhì)量配比混合，過(guò)40100目篩，加入(上述混合物總質(zhì)量)0.5%的硬脂酸鎂，混合，過(guò)40100目篩，填裝膠囊，制備成復(fù)方制劑。所述的復(fù)方制劑可以為顆粒劑、片劑、膠囊劑、粉劑或任何其它藥物成品形態(tài)的制劑。所述乳酸菌菌種的接種量為按照菌種發(fā)酵劑容量(L)與培養(yǎng)基容量(L)比的3%;所述乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基是以大豆或大豆蛋白粉或乳粉為主，輔以酵母膏，糖及微量元素。本發(fā)明所采用的乳酸菌菌種可以是但不完全是嗜酸乳桿菌Lactobacillusacidophilus.嗜熱鏈球菌Streptococcusthermophilus、羅伊氏乳桿菌Lactobacillusreuteri、干酷學(xué)L桿菌Lactobacilluscaseisubsp.Casei、德氏孚L桿菌保加利亞禾中Lactobacillusdelbrueckiisubsp.Bulgaricus。本發(fā)明的復(fù)方制劑可以用于制備具有提高免疫力、抗腫瘤作用、提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途，或者直接作為具有提高免疫力、抗腫瘤作用、提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途。本發(fā)明所述的原料大豆皂甙是以大豆或豆粕或豆臍為原料，經(jīng)提取、分離結(jié)晶加工而成的固體，其含量為2090%。以下是本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例，但是本發(fā)明不僅限于此。實(shí)施例1乳酸菌發(fā)酵物的培養(yǎng)在斜面培養(yǎng)基中接入嗜酸乳桿菌，培養(yǎng)溫度37'C，培養(yǎng)時(shí)間48小時(shí)。將斜面菌種接入裝有l(wèi)OOmL培養(yǎng)基的500mL三角瓶中，40'C靜置培養(yǎng)24小時(shí)。然后該菌種接入裝有l(wèi)OOmL培養(yǎng)基的500mL三角瓶中4(TC靜置擴(kuò)大培養(yǎng)24小時(shí)，將擴(kuò)大培養(yǎng)后的菌種2000mL合并到5L的抽濾瓶中，把抽濾瓶中菌種接到裝有40L的GY345-SM三級(jí)液體菌種發(fā)酵罐(江蘇省工學(xué)院生物工程設(shè)備聯(lián)營(yíng)廠)中，4(TC靜置培養(yǎng)24小時(shí)。將菌種發(fā)酵罐中的發(fā)酵液轉(zhuǎn)接入裝有400L發(fā)酵培養(yǎng)基的1000L發(fā)酵罐中，37'C靜置培養(yǎng)48—56小時(shí)，檢測(cè)發(fā)酵液乳酸大于5.5mg/g、酸度大于10mg/g時(shí)終止發(fā)酵。接種量為3%(菌種發(fā)酵劑容量(L)/培養(yǎng)基容量(L)斜面培養(yǎng)基配方酪蛋白胨lO.Og，牛肉提取物10.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g,檸檬酸二胺2.0g，Tween801.0ml,K2HP042.0g，MgS04'7H200.2g，MnS04.H200.05g，CaC0320.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH6.8斜面轉(zhuǎn)接三角瓶培養(yǎng)基配方酪蛋白胨lO.Og，牛肉提取物lO.Og,酵母提取物5.0g,葡萄糖5.0g，乙酸鈉5.0g，檸檬酸二胺2.0g，Tween80l.Oml，K2HPO42.0g，MgS04.7H200.2g，MnS04-F^O0.05g，CaC0320.0g，瓊脂15.0g,蒸餾水l.OL，pH6.S菌種擴(kuò)大培養(yǎng)及發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方大豆蛋白粉10%、葡萄糖5%、酵母膏0.04%，飲用水84.96%。實(shí)施例2以嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、羅伊氏乳桿菌單獨(dú)斜面培養(yǎng)，培養(yǎng)后的菌種分別接入三角瓶液體培養(yǎng)基培養(yǎng)、接種量為3%(菌種發(fā)酵劑容量(l)膽?zhàn)B基容量(l),培養(yǎng)后的三種菌種按i:i:i的比例合并再接到三角瓶液體培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，接下如實(shí)施1中進(jìn)行擴(kuò)大發(fā)酵生產(chǎn)，最終發(fā)酵液的乳酸大于5.5mg/g，酸度大于10mg/g。本實(shí)施的培養(yǎng)基及培養(yǎng)溫度及時(shí)間同實(shí)施1。實(shí)施例3以嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、德氏乳桿菌保加利亞種按i:i:i比例按實(shí)施2進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)酵液的乳酸也大于5.5mg/g,酸度也大于10mg/g。實(shí)施例4取實(shí)施例l的發(fā)酵止液，經(jīng)105'C加熱滅菌，濃縮，真空度200—400Pa、蒸發(fā)溫度8085'C，濃縮液經(jīng)噴霧干燥，塔溫8095。C得到乳酸菌發(fā)酵物。將乳酸菌發(fā)酵物與含量80%大豆皂甙，按92.5:7.5比例混合，過(guò)篩，加入(上述混合物總質(zhì)量)0.5%的硬脂酸鎂，填裝膠囊，每粒250mg。每粒內(nèi)含大豆皂甙15mg、乳酸20mg實(shí)施例5取用實(shí)施例1的發(fā)酵終止液，噴霧干燥，塔溫S095'C，得到活菌乳酸菌發(fā)酵物。將乳酸菌發(fā)酵物與含量80%大豆皂甙，按92.5:7.5比例混合，過(guò)篩，加入(上述混合物總質(zhì)量)0.5%的硬脂酸鎂，混合，過(guò)篩，填裝膠囊，每粒250mg。每粒內(nèi)含大豆皂甙15mg、乳酸20mg實(shí)施例6取用實(shí)施例1的發(fā)酵終止液，冷凍干燥，溫度一45一55'C，得到活菌乳酸菌發(fā)酵物。將乳酸菌發(fā)酵物與含量80%大豆皂甙，按92.5:7.5比例混合，過(guò)篩，加入(上述混合物總質(zhì)量)0.5%的硬脂酸鎂，混合，過(guò)篩，填裝膠囊，每粒250mg。每粒內(nèi)含大豆皂甙15mg、乳酸20mg效果試驗(yàn)跟據(jù)"保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法"的判定標(biāo)準(zhǔn)，證明本發(fā)明的含有乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑具有提高免疫力作用。具體的實(shí)驗(yàn)和判斷方法如下材料和方法-1.1樣品由本發(fā)明的復(fù)方制劑，內(nèi)容物呈淡黃棕色粉末狀或顆料狀，臨用前用蒸餾水配至所需濃度。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供的清潔級(jí)ICR雌性小鼠200只，體重18~22g。許可證號(hào)SCXK(滬)2003-0003。1.3飼養(yǎng)環(huán)境福建省疾病預(yù)防控制中心SPF級(jí)(屏障系統(tǒng))動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，許可證號(hào)SYSK(閩)2005-0001。1.4分組及劑量設(shè)置851牌新益源膠囊成人(60kg計(jì))推薦用量為3.0g/60kg/d即0.05g/kgBW/d。試驗(yàn)動(dòng)物按體重隨機(jī)分成20組，每組10只，每四組為一實(shí)驗(yàn)組，分別為免疫一組空斑、溶血素測(cè)定；免疫二組臟器指數(shù)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)；免疫三組NK活性、淋轉(zhuǎn)試驗(yàn)；免疫四組DTH試驗(yàn)免疫五組小鼠碳廓清試驗(yàn)。每組實(shí)驗(yàn)按人日推薦量的5倍、10倍、30倍分別設(shè)0.25、0.50、1.50g/kgBW三個(gè)劑量組和蒸餾水對(duì)照組。1.5樣品的配制低劑量組稱取樣品0.5g加蒸餾水至40ml;中劑量組稱取樣品l.Og加蒸餾水至40ml;高劑量組稱取樣品3.0加蒸餾水至40ml。2.結(jié)果2.1樣品對(duì)小鼠體重的影響樣品各組小鼠的體重與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0"，見(jiàn)表1~5。表l樣品(免疫一組)對(duì)小鼠體重的影響(g，x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>與對(duì)照組相比P0.052.5血清溶血素試驗(yàn)-樣品高劑量組能明顯妃改小鼠抗體積數(shù)的生成，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PO.05),結(jié)果見(jiàn)表9。表9血清溶血素試驗(yàn)(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*與對(duì)照組相比？<0.052.6小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn):樣品各劑量組小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)分別與對(duì)照組相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),結(jié)果見(jiàn)表IO。表10巨噬細(xì)胞吞噬試驗(yàn)(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.7胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定樣品各劑量組脾指數(shù)與對(duì)照組相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PX).05);樣品高劑量組胸腺指數(shù)增加，與對(duì)照組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，結(jié)果見(jiàn)表ll。表ll胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的測(cè)定(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>'與對(duì)照組相比P0.052.8ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn):樣品高劑量組使ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力明顯增加，與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，結(jié)果見(jiàn)表12。表12ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>^與對(duì)照組相比P0.052.9NK細(xì)胞活性測(cè)定樣品高劑量組能顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，結(jié)果見(jiàn)表13。表13NK細(xì)胞活性測(cè)定(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>承與對(duì)照組相比PO,053.結(jié)論樣品組與對(duì)照組相比1)各劑量組對(duì)小鼠碳廓清能力、小鼠脾指數(shù)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2)中、高劑量組能明顯增強(qiáng)DNFB誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。3)高劑量組能明顯促進(jìn)抗體生成細(xì)胞的生成并提高血清溶血素水平及升高小鼠胸腺指數(shù)。4)高劑量組能使ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng)，并提高小鼠NK細(xì)胞活性。檢驗(yàn)結(jié)果及判定意見(jiàn)本發(fā)明的復(fù)方制劑成人推薦量為3.0g/d，即0.05g/kgBW/d(成人體重按60kg計(jì))。動(dòng)物采用清潔級(jí)ICR雌性小鼠。實(shí)驗(yàn)按人推薦用量的5倍、10倍、30倍、分別設(shè)0.25、0.50、1.50g/kgBW三個(gè)劑量組和蒸餾水對(duì)照組，試驗(yàn)結(jié)果表明，樣品各劑量組與對(duì)照組比較，本發(fā)明的復(fù)方制劑5)各劑量組對(duì)小鼠碳廓清能力、小鼠脾指數(shù)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6)中、高劑量組能明顯增強(qiáng)DNFB誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。7)高劑量組能明顯促進(jìn)抗體生成細(xì)胞的生成并提高血清溶血素水平及升高小鼠胸腺指數(shù)。8)高劑量組能使ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng)，并提高小鼠NK細(xì)胞活性。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(衛(wèi)生部2003),提示該樣品具有增強(qiáng)免疫力功能。2.本發(fā)明的復(fù)方制劑對(duì)肝癌荷瘤鼠存活率的影響跟據(jù)《新藥臨床前研究指導(dǎo)原則》進(jìn)行試驗(yàn)。一、試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)本發(fā)明的復(fù)方制劑對(duì)肝癌荷瘤鼠存活時(shí)間的影響，二、受試品本發(fā)明的復(fù)方制劑試驗(yàn)前以水為溶媒稀釋至適當(dāng)濃度供小鼠灌胃(ig)。三、試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌性，17.5~19.5g，四、試驗(yàn)方法和結(jié)果取健康小鼠100只，雌，體重17.5~19.5g，首先給每鼠腹腔注射腹水型肝癌細(xì)胞懸液(107/mm3)0.2ml。然后按體重隨機(jī)分為10組，每組10只。其中，3組分別ig25%本發(fā)明的復(fù)方制劑0.4、0.24以及0.144ml/10g;另1組做為單純模型對(duì)照組，ig水0.4ml/10g。以上均每日給藥1次，直至組內(nèi)試驗(yàn)小鼠死亡50%之日止。記錄各小鼠接種肝癌細(xì)胞懸液后的存活時(shí)間，計(jì)算各組存活平均日數(shù)(;)及標(biāo)準(zhǔn)差(SD)，以單純模型組為對(duì)照進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)下表。表三種制劑對(duì)肝癌荷瘤小鼠的生命延長(zhǎng)率<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)論在本試驗(yàn)中，本發(fā)明的復(fù)方制劑的中、小劑量組小鼠的生命延長(zhǎng)率分別達(dá)到20.97°/。和16.48%,與單純模型組比較在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異均有顯著意義(p值均小于0.05)，3.本發(fā)明的復(fù)方制劑對(duì)S180荷瘤鼠的作用研究一試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)觀察本發(fā)明的復(fù)方制劑對(duì)S180荷瘤鼠的抗腫瘤作用。二受試藥本發(fā)明的復(fù)方制劑試驗(yàn)前用水為溶媒稀釋至適當(dāng)濃度供小鼠灌胃給藥。三試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，18~21g，四試驗(yàn)方法與結(jié)果取健康小鼠，雄性，體重1821g，在嚴(yán)格無(wú)菌的條件F,抽取S180荷瘤鼠的瘤塊，磨成凝漿，按l:4稀釋，每只小鼠腋下注射0.2ml，禁食給水12小時(shí)，隨機(jī)分為14組，每組10只，對(duì)照組(生理鹽水0.2ml/10g)、環(huán)磷酰胺(30mg/kg,ld、5dig)，25%本發(fā)明的復(fù)方制劑(0.3、0.18、0.108ml/10g+環(huán)磷酰胺30mg/kg,ld、5dig)，每日給藥1次，共給藥11天。第13天處死動(dòng)物，剝?nèi)×鰤K，在扭力天平上稱重。環(huán)磷酰胺組與對(duì)照組比較，進(jìn)行t檢驗(yàn)。其余給藥組分別與環(huán)磷酰胺組比較，進(jìn)行t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)下表。表四種制劑對(duì)S180荷瘤鼠的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*與單用環(huán)磷酰胺(組2)比較；p<0.05五試驗(yàn)結(jié)論從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出，各組均比單用環(huán)磷酰胺治療組的抑瘤率高，但只有25。/。本發(fā)明的復(fù)方制劑0.3ml/10g組的抑瘤率顯著高于單用環(huán)磷酰胺組(p<0.05)，且該藥對(duì)S180荷廇鼠的抑瘤作用具有量效關(guān)系。權(quán)利要求1.一種含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑，其特征在于所述復(fù)方制劑為活菌制劑或非活菌制劑，采用冷凍干燥或噴霧干燥制得，所述復(fù)方制劑的配方為按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)10～98.5％乳酸菌發(fā)酵物，1.5～90％大豆皂甙。2.—種如權(quán)利要求1所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于將乳酸菌菌種在3642t:接種乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在3742'C發(fā)酵552小時(shí)后濃縮，冷凍干燥或噴霧干燥獲得活菌乳酸菌發(fā)酵物或者100115'C滅菌，噴霧干燥獲得非活菌乳酸菌發(fā)酵物；將所述乳酸菌發(fā)酵物與大豆皂甙按質(zhì)量配比混合，經(jīng)過(guò)40100目篩，加入所述混合物總質(zhì)量0.5%的硬脂酸鎂，混合，經(jīng)過(guò)40100目篩，填裝膠囊，制備成復(fù)方制劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述的復(fù)方制劑為顆粒劑、片劑、膠囊劑、粉劑或任何其它藥物、保健品成品形態(tài)的制劑。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述乳酸菌菌種的接種量為按照菌種發(fā)酵劑容量(L)與培養(yǎng)基容量(L)比的3%;所述乳酸菌發(fā)酵培養(yǎng)基是以大豆或大豆蛋白粉或乳粉為主，輔以酵母膏，糖及微量元素。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于所述乳酸菌菌種為乳酸菌屬下的嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、羅伊氏乳桿菌、干酪乳桿菌或德氏乳桿菌保加利亞種中的一種或多種。6.—種如權(quán)利要求l、2、3、4或5所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的應(yīng)用，其特征在于所述復(fù)方制劑用于制備具有提高免疫力功能藥物或保健品的用途，或者直接作為具有提高免疫力功能藥物或保健品的用途。7.—種如權(quán)利要求l、2、3、4或5所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的應(yīng)用，其特征在于-所述復(fù)方制劑用于制備具有抗腫瘤作用藥物或保健品的用途，或者直接作為具有抗腫瘤作用藥物或保健品的用途。8.—種如權(quán)利要求l、2、3、4或5所述的含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑的應(yīng)用，其特征在于所述復(fù)方制劑用于制備具有提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途，或者直接作為具有提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物或保健品的用途。全文摘要本發(fā)明提供一種含乳酸菌發(fā)酵物的復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用，該制劑復(fù)方制劑為活菌制劑或非活菌制劑，采用冷凍干燥或噴霧干燥制得，所述復(fù)方制劑的配方為按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)10～98.5％乳酸菌發(fā)酵物，1.5～90％大豆皂甙，制備方法為將所述乳酸菌發(fā)酵物與大豆皂甙按質(zhì)量配比混合，經(jīng)過(guò)混合，過(guò)篩，制粒，制備成復(fù)方制劑，該復(fù)方制劑制備具有提高免疫力功能、抗腫瘤作用藥物或者提高抗腫瘤藥物療效作用的藥物用途，或者直接作為該類藥物或保健品的用途。本發(fā)明的復(fù)方制劑為活菌或非活菌制劑，生物活性大，有效提高人體的免疫力，具有抗癌防癌的療效，制備方法簡(jiǎn)單、可操作性強(qiáng)，適合大規(guī)模推廣，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。文檔編號(hào)A61P35/00GK101301316SQ20081007127公開(kāi)日2008年11月12日申請(qǐng)日期2008年6月26日優(yōu)先權(quán)日2008年6月26日發(fā)明者吳斌秀,廖慶祿,張厚熙,勤李,陳彩萍,陳旭東申請(qǐng)人:福建楊振華851生物科技股份有限公司