專利名稱：：雜環(huán)fxr結(jié)合化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及與NR1H4受體(FXR)結(jié)合并充當NR1H4受體(FXR)的激動劑或者部分激動劑的化合物。本發(fā)明進一步涉及所述化合物用于制備藥劑的用途，該藥劑通過用所述化合物結(jié)合所述核受體來治療疾病和/或病癥，并且涉及合成所述化合物的方法。
背景技術(shù)：
：多細胞機體依賴于細胞和體室之間的高級信息傳輸機制。所傳輸?shù)男畔⒖梢允歉叨葟碗s的并且可以導致改變涉及細胞分化、增殖或者再生的基因程序。所述信號或者激素通常為低分子量分子，比如肽、脂肪酸或者膽固醇衍生物。這些信號中有許多通過最終改變特定基因的轉(zhuǎn)錄來產(chǎn)生其效果。一組已經(jīng)深入研究過的調(diào)節(jié)細胞對各種信號應答的蛋白質(zhì)為已知為核受體的轉(zhuǎn)錄因子家族，以下經(jīng)常稱為"NR"。該組成員包括甾類激素、維生素D、蛻皮激素、順式和反式維生素A酸、甲狀腺激素、膽汁酸、膽固醇-衍生物、脂肪酸(及其他過氧化物酶體增值物)的受體；以及所謂的孤兒受體(orphanreceptors),也即結(jié)構(gòu)類似于該組其他成員的蛋白質(zhì)，但是對其沒有已知的配體。孤兒受體可能指示細胞中未知的信號通道或者可能是不需要配體激活就可以起作用的核受體。用這些孤兒受體中的一些進行的轉(zhuǎn)錄激活可能在缺乏外源配體的情況下和/或通過起源自細胞表面的信號轉(zhuǎn)導途徑發(fā)生(D.Mangelsdorf等人，"Thenuclearreceptorsuperfamily:theseconddecade",Cell1995，83(6)，835-839;REvans"Thenuclearreceptorsuperfamily:arosettastoneforphysiology",Mol.Endocrinol.2005，19(6)，1429-1438)。通常，在NR中已經(jīng)限定了三個功能區(qū)域。氨基末端區(qū)域被認為是具有一些調(diào)節(jié)功能。DNA結(jié)合區(qū)域，以下簡稱為"DBD"，通常包括兩個鋅指單元并且識別在應答基因的啟動子中的特定激素應答元件(以下簡稱為"HRE")。在"DBD"中的特定氨基酸殘基已經(jīng)被DNA序列結(jié)合特異性(M.Schena，"Mammalianglucocorticoidreceptorderivativesenhancetranscriptioninliyeast",Science1988，241(4868)，965-967)。配體結(jié)合區(qū)域，以下簡稱為"LBD"，位于己知NR的羧基末端區(qū)域。在沒有激素的情況下，LBD顯示出會干擾DBD與其HRE的相互作用。激素結(jié)合似乎導致在NR中的構(gòu)象變化并由此開啟了這種干擾(A.Brzozowski等人，"Molecularbasisofagonismandantagonismintheoestrogenreceptor",Nature1997，389(6652)，753-758)。沒有LBD的NR持續(xù)激活轉(zhuǎn)錄，但是是在較低的水平下。已提出輔激活因子或者轉(zhuǎn)錄激活因子在序列特異轉(zhuǎn)錄因子和基礎(chǔ)轉(zhuǎn)錄機制之間建立連接，并且另外來影響靶細胞的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。幾種像SRC-l、ACTR和Grip1的蛋白質(zhì)以配體增強的方式與NR發(fā)生相互作用(D.Heery等人，"Asignaturemotifintranscriptionalco-activatorsmediatesbindingtonuclearreceptors",Nature1997，387(6634),733-6;T.Heinzel等人，"AcomplexcontainingN-CoR,mSin3andhistonedeacetylasemediatestranscriptionalrepression",Nature1997，387(6628)，16-17;K.Nettles,G.Greene,"Ligandcontrolofcoregulatorrecruitmenttonuclearreceptors",Annu.Rev.Physiol.2005，67，309-33)。像甾類激素的核受體調(diào)節(jié)劑通過結(jié)合到細胞內(nèi)受體上并形成核受體-配體復合物來影響特定細胞的生長與功能。然后核受體-激素復合物與特定基因的控制區(qū)域內(nèi)的激素應答元件(HRE)發(fā)生相互作用并且改變特定的基因表達(A.Aranda，A.Pascual，"Nuclearhormonereceptorsandgeneexpression",Physiol.Rev.2001，81(3)，1269-1304)。法尼酯X受體a(以下當指的是人類受體時也經(jīng)常稱為NR1H4)是一種原型2型核受體，其在以雜二聚體方式和法尼酯X受體一起結(jié)合到靶基因的啟動子區(qū)域時激活基因(B.Forman等人，"Identificationofanuclearreceptorthatisactivatedbyfarnesolmetabolites",Cell1995，81(5)，687-693)。NR1H4的相關(guān)生理性配體為膽汁酸(D.Parks等人，"Bileacids:naturalligandsforanorphannuclearreceptor",Science1999，284(5418》1365-1368;M.Makishima等人，"Identificationofanuclearreceptorforbileacids",Science1999，284(5418)，1362-1365)。最有潛力的一個是鵝脫氧膽酸(CDCA)，其調(diào)節(jié)參與膽汁酸體內(nèi)平衡的幾種基因的表達。法尼醇及其衍生物，一起被稱為法尼酯，最初描述為在高濃度時激活鼠類直向同源物，但是他們沒有激活人類或者鼠類受體。FXR在肝、小腸、結(jié)腸、卵巢、腎上腺和腎中表達。除了控制細胞內(nèi)的基因表達外，F(xiàn)XR似乎也參與旁分泌和內(nèi)分泌通信(J.Holt等人，"Definitionofanovelgrowthfactor-dependentsignalcascadeforthesuppressionofbileacidbiosynthesis",GenesDev.2003，17(13)，1581-91;T.Inagaki等人，"Fibroblastgrowthfactor15functionsasanenterohepaticsignaltoregulatebileacidhomeostasis",CellMetab.2005，2(4)，217-225)。有一篇論文提出了FXR激活通過向上調(diào)整巨噬細胞中的溶酶體命運/存活因子(lysosomalfate/survivalfactor)Taco-2來對例如細菌或者原生動物寄生蟲的感染有機體的存活的直接影響(P.Anand等人，"DownregulationofTACOgenetranscriptionrestrictsmycobacterialentry/survivalwithinhumanmacrophages",FEMSMicrobiol.Lett.2005，250(1)，137-144)。這為評價FXR作為治療例如肺結(jié)核、麻風病、利什曼蟲病或者例如美洲錐蟲病(ChagasDisease)的錐蟲病的細胞內(nèi)細菌性或者寄生蟲性感染的藥物耙標的適用性的進一步研究做了鋪墊。充當FXR調(diào)節(jié)劑的小分子化合物已經(jīng)公開在下列出版物中WO2004/048349、WO2003/015771和WO2000/037077。最近已經(jīng)綜述了更多的小分子FXR調(diào)節(jié)齊U(R.C.Buijsman等人，"Non畫SteroidalSteroidReceptorModulators",Curr.Med.Chem.2005，12，1017-1075)。許多候選藥物在開發(fā)程序中的失敗都是由于它們不合需要的藥物動力學特性，例如太長或者太短的&、吸收差和大量的首過代謝(first-passmetabolism)。在一項調(diào)查中，據(jù)報導，在人類中被調(diào)查的319個候選新藥中，198個候選藥物中的77個(40%)由于嚴重的藥物動力學問題而退出(R.Prentis等人，"PharmaceuticalinnovationbysevenUK-ownedpharmaceuticalcompanies(1964—1985)，，，Br.J.Clin.Pharmacol.1988，25，387—396)。這種高失敗率說明了藥物動力學在藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)中的重要性。為確保藥物開發(fā)的成功，候選藥物具有良好生物利用率和理想的t^是必不可少的。因此，對藥物動力學數(shù)據(jù)的精確估計和對影響藥物動力學的因素的良好理解將引導藥物設(shè)計(J.Lin，A.Lu，"Roleofpharmacokinetics'andMetabolisminDrugDiscoveryandDevelopment",Pharmacol.Rev.1997，49(4)，404-449)。以下將討論影響藥物吸收和配置的化學上可改變的因素。一些相關(guān)的物理化學和ADME參數(shù)包括，但不限于，水溶性、logD、13PAMPA滲透性、Caco-2滲透性、血漿蛋白結(jié)合、微粒體穩(wěn)定性和肝細胞穩(wěn)定性。較差的水溶性會限制化合物在胃腸(GI)道中的吸收，導致口服生物利用率的降低。它也使新型制劑策略成為必然，并由此增加了成本和延遲。而且，化合物的溶解性會影響其他體外評價。較差的水溶性是非理想的特征并且它是妨礙口服藥物活性的最大的物理化學問題(C.A.Lipinski，"Drug-likepropertiesandthecausesofpoorsolubilityandpoorpermeability"，J.Pharmacol.Toxicol.Methods2000，44，235-249)。親油性是藥物的藥物動力學行為的一個關(guān)鍵決定因素。它可以影響藥物在組織中的分布、吸收和結(jié)合特征，并且是決定化合物的溶解性的一個重要因素。logD(分配系數(shù))用作親油性的量度。測定這個參數(shù)的最常用方法之一是測量化合物在有機溶劑(一般為辛醇)和水溶液緩沖液之間的分配。如果該化合物具有03之間的logD值就傾向于被認為是親油性的最佳范圍。一般，這些化合物在和滲透性之間具有良好的平衡并且這個范圍對于口服吸收和細胞膜滲透傾向于是最佳的。親水化合物(logDO)—般是高度可溶的但是穿越胃腸道或者血腦屏障時表現(xiàn)出較低的滲透性。高度親油的化合物(logD>5)表現(xiàn)出的問題是代謝不穩(wěn)定、高血漿蛋白結(jié)合和導致易變和較差的口服吸收的低溶解度(L.Di，E.Kerns,"Profilingdrug-likepropertiesindiscoveryresearch",Curr.Opin.Chem.Biol.2003，7，402-408)。經(jīng)過細胞單層或者人工膜的藥物滲透性與腸內(nèi)的滲透性和口服生物利用率具有良好的相關(guān)性。具有較低膜滲透性(即較低親油性)的藥物一般在胃和小腸中從溶液中緩慢吸收。如果藥物將是口服傳送的，那么知道穿過腸道的吸收的速度和程度是至關(guān)重要的。因為存在許多藥物轉(zhuǎn)運通道，藥物滲透性不能單獨根據(jù)物理化學因素來進行精確的預計。一個公認的基于人類細胞的模型，人類結(jié)腸腺癌細胞系(Caco-2)，幫助預計腸內(nèi)的滲透性(A.M.Marino等人,"Validationofthe96-wellCaco-2cellculturemodelforhigh-throughputpermeabilityandassessmentofdiscoverycompounds",Int.J.Pharmaceutics2005，297，235-241)。這個評價通常使用在早期藥物發(fā)現(xiàn)過程中，特別是在先導化合物優(yōu)化中。一個更新的體外模型，被稱為平行人工膜滲透性評價(PAMPA)將化合物單獨按照它們的被動擴散速度來進行排列。PAMPA在先導化合物分析過程中被越來越多地用作第一線的滲透性篩選方法(F.14Wohnsland，B.Faller，"High-throughputPermeabilitypHProfileandHigh-throughputAlkaneAWaterLogP^VithArtificialMembranes",J.Med.Chem.2001，44，923—930)。血漿蛋白結(jié)合(PPB)可以顯著影響藥物的治療作用。它決定了作用的程度和持續(xù)時間，因為只有未結(jié)合的藥物才被認為是可以被動擴散到血管外的空間或者組織位置，而在這里產(chǎn)生治療學效果。PPB的水平對于預計一個藥物的藥物動力學特性和確定適當?shù)目诜┝渴侵匾摹？梢詮乃鶞y定的未結(jié)合藥物的分數(shù)(fu)來估計體內(nèi)劑量水平；如果一個藥物與血漿是高度結(jié)合的，那么可能需要增加齊U量(Y,Kwon，《Handbookofessentialpharmacokinetics,pharmacodynamicsanddrugmetabolismforindustrialscientists》，SpringerVerlag2001)。預計化合物代謝的體外模型已經(jīng)成為動物試驗的接受附件。早期藥物代謝模型幫助預計化合物的代謝穩(wěn)定性并且有好幾種方法來做這種工作。在這些研究中的酶源是由肝微粒體和肝細胞組成的大鼠或者人源系統(tǒng)。微粒體包含階段I氧化酶的全部補體，但是沒有完整的細胞膜。而且，微粒體要求向培養(yǎng)中加入輔因子。肝細胞更多地代表體外境況，因為它們包含細胞膜并且沒有要求另外的輔因子。肝細胞同時包含用于階段I(試驗化合物的氧化、還原和/或水解)和階段II(來自階段I的試驗化合物或者代謝物的結(jié)合)代謝的酶。微粒體的穩(wěn)定性篩選經(jīng)常用作在藥物發(fā)現(xiàn)過程中的早期進行的初步篩選。肝細胞穩(wěn)定性試驗用作對從初步篩選中發(fā)現(xiàn)的更滿意的化合物進行的二次篩選(T.Iwatsubo等人，"Predictionofinvivodrugmetabolisminthehumanliverfrominvitrometabolismdata"，Pharm.Ther.1997，73，147-171)?？傊?，有利的物理化學和體外ADME參數(shù)是藥物有利的藥物動力學(PK)分析的先決條件。獲得新化學實體的早期PK數(shù)據(jù)分析是成功的動物藥理學和毒理學研究的先決條件。藥物作用時間的定量測量是對臨床使用前的效力研究進行合理解釋所需的主要組成。PK數(shù)據(jù)也會有助于臨床使用前的毒理學研究的設(shè)計或者種類選擇。藥物動力學研究是調(diào)控藥物開發(fā)要求的一部分并且也已經(jīng)開始成為早期藥物發(fā)現(xiàn)過程的一個不可分割的部分。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供為FXR激動劑或者部分激動劑的新型化合物，其表15現(xiàn)出優(yōu)于已知FXR激動劑的物理化學、體外和/或體內(nèi)ADME(吸收、分布、代謝和排泄)特性和/或體內(nèi)更優(yōu)異的藥物動力學。物理化學和ADME特性影響藥物的藥物動力學并且可以用體外方法進行評價。出乎意料地，我們發(fā)現(xiàn)，與在現(xiàn)有技術(shù)中公開的化合物相比，在這里描述的FXR調(diào)節(jié)化合物顯示出體外改善的物理化學和/或ADME參數(shù)，導致先進的藥物動力學特性，也即，體內(nèi)更優(yōu)異的生物利用率和有利的半衰期。結(jié)果，本發(fā)明涉及根據(jù)通式(0的化合物，其與NR1H4受體(FXR)結(jié)合并充當NR1H4受體(FXR)的激動劑或者部分激動劑。本發(fā)明進一步涉及所述化合物用于制備藥劑的用途，該藥劑通過用所述化合物結(jié)合所述核受體來治療疾病和/或病癥。本發(fā)明又進一步描述了合成所述化合物的方法。本發(fā)明的化合物顯示出改善了的體外物理化學和/或ADME參數(shù)，最終導致先進的體內(nèi)藥物動力學特性。本發(fā)明的化合物由通式(i)限定包括其對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑化物和藥物學上可接受的鹽，W和f各自獨立地選自氫、氟、氰基、硝基、疊氮基、NR5R6、OR5、sr5、d-C6烷基、C2-Q鏈烯基、C2-Q炔基、CrC6環(huán)烷基；或者W和r2—起為=0或S;或者R1和W可以一起形成各自可為飽和或者不飽和的3-6元碳環(huán)或者雜環(huán)，其中各個垸基、鏈烯基、炔基、環(huán)垸基、碳環(huán)或者雜環(huán)為未取代的或者被1-5個取代基R11取代；W和RS各自獨立地選自氫、d-C6烷基和C3-C6環(huán)烷基；或者RS和R6可以一起形成3-6元的飽和雜環(huán)，其中所述烷基、環(huán)烷基和雜環(huán)為未取代的或者被l-5個取代基R"取代；16<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>在各X1、X2、x4中，W為氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、CVC6垸基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-Q環(huán)垸基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-NR19R2()、NR19S(0)raR2()、NR19C(O)OR20、NR19C(O)R20、NR19C(O)NR19R20、OR19、OC(O)R19、S(O)iR19、S02NR19C(0)R2Q、S(0)mNR19R2°、C(O)R19、C(O)OR20、C(0)NR19R20、C(NR19)NR19R2()，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被1-5個取代基RU取代；在各X3中，W為氫、Q-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-Q炔基、C3-Q環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、S02R19、C(O)R19、C(O)OR19、C(0)NR19R2Q，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)垸基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被1-5個取代基R"取代；RW和R2G各自獨立地選自氫、CrC6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-Q炔基、CVC6環(huán)烷基；或者R"和R"—起可以形成3-7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，并且其中所述CrC6垸基、C2-Q鏈烯基、C3-C6環(huán)垸基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被l-5個取代基R"取代；W獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、CrC6垸基、C2-C6鏈烯基、C2-Q炔基、C3-C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR15R16、NR15S02R16、NR15C(0)OR16、NR15C(0)R16、NR15C(0)NR15R16、NR15C(NCN)NR15R16、OR15、OC(O)R15、S(O)iR15、S02NR15C(0)R16、S(0)mNR15R16、SC(O)R15、C(O)R15、C(O)OR15、C(0)NR15R16、C(O)NHOR15、C(O)SR15、C(NR15)NR15R16，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)垸基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被l-5個取代基R"取代；并且進而兩個取代基W可以與和它們連接的原子一起形成4-7元碳環(huán)、芳基、雜芳基或者雜環(huán)，它們各自為未取代的或者被1-5個取代基RH取代;R"和R"各自獨立地選自氫、d-Q烷基、C2-Q鏈烯基、C2-CV炔基、CVC6環(huán)烷基；或者R"和R"—起可以形成3-7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，并且其中所述d-Q烷基、C2-C6鏈烯基、C3-C6環(huán)垸基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被l-5個取代基RH取代；RH獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、=0、=S、CrC6垸基、C2-C6鏈烯基、CVC6炔基、C3-C6環(huán)垸基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR12R13、NR12S(0)mR13、NR12C(0)OR13、NR12C(0)R13、NR12C(0)NR12R13、NR12C(NCN)NR12R13、=NOR12、-OR12、OC(O)R12、S(O)iR12、S02NR12C(0)R13、S(0)mNR12R13、SC(O)R12、C(O)R12、C(O)OR12、C(O)SR12、C(0)NR12R13、C(0)NOR，C(NR12)NR12R13;RU和R13各自獨立地選自氫、CrC6烷基或者C3-C6環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基可以是未取代的或者被1-5個氟和/或選自O(shè)H、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、=0、SCF3、NH2、NHCH3禾口N(CH3)2中的一個或兩個取代基取代；或者R^和R13可以與和它們連接的原子一起形成4-6元碳環(huán)、雜芳基或者雜環(huán)，它們各自為未取代的或者被l-5個氟和/或選自O(shè)H、OCH3、-OCH2F、OCHF2、OCF3、=0、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的一個或兩個取代基取代；Q為0或NR7;R"為氫、CrC3烷基或者CrC5環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被l-5個氟原子取代；T為-O-、-S-、—N(R")-、CH2或者CF2;R"為氫、d-C3烷基或者C3-Cs環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1-5個氟原子取代；y選自y^y618說明書第9/89頁RS獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、CrC6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C3-C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR12R13、NR12S(0)mR13、NR12C(0)OR13、NR12C(0)R13、NR12C(0)NR12R13、OR12,OC(O)R12、S(O)iR12、S02NR12C(0)R13、S(0)mNR12R13、C(O)R12、C(O)OR12、C(0)NR12R13,和C(NR12)NR12R13，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或者雜芳基為未取代的或者被1-5個取代基R11取代；L為鍵、-C(0)N(R1())<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>入A^\Nz\或者R"為氫、CrC3烷基或者Q-C5環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1-5個氟原子取代；G為亞甲基或者亞乙基，其為未取代的或者被.1-5個氟原子取代；Z為苯基-A-R9、吡啶基-A-R9、嘧啶基-A-R9或者噠嗪基-A-R9，其中苯基、吡啶基、嘧啶基或者噠嗪基為未取代的或者被一個、兩個或者三個選自卣素、CrC4烷基、C3-C5環(huán)烷基、C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、氰基、OH、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的基團取代；A為鍵、CH2、CHCH3、C(CH3)2或者CF2;R9為氫、COOR17、CONR17R18、C(0)NHS02R17、S02NHC(0)R17、S(0)mR17、C(NR17;>NR17R18、或者經(jīng)由C原子連接到A的四唑；R卩和R18各自獨立地選自氫、d-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-(V炔基和(VC6-環(huán)烷基；或者R^和R"—起可以形成3-7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，其中所述烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被1-5個取代基RH取代；a為0或者1;b為1、2或者3;C為l或者2;i為0、l或者2;以及m為1或者2。優(yōu)選地，R^和f各自獨立地選自氫、氟和Cw烷基，其中所述烷基為未取代的或者被1-5個取代基R11取代；或者R1和^一起為K)或者-S。更優(yōu)選，Ri和W各自獨立地選自氫和甲基。優(yōu)選在各個X1、X2和X4中，R3為氫、d-C6烷基、NR"R"或者C3-C6環(huán)垸基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基RU取代，并且在各個^中，W為氫、d，6垸基或者C3-C6環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基RU取代。進一步優(yōu)選R"和112()各自獨立地選自氫、d-Q烷基和C3-Q環(huán)垸基。在另外的實施方式中，1119和112()優(yōu)選一起形成3-7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)。所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)或者雜芳環(huán)基為未取代的或者被1-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基RU取代。在優(yōu)選的實施方式中，Q為O或者NH。在各個^至X"中，W優(yōu)選選自氫、鹵素、Cl6院基、0-d-C6垸基和CN，其中各個烷基為未取代的或者被l-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基R"取代。更優(yōu)選，W選自氫、鹵素和d—6垸基，其中各個烷基為未取代的或者被一個、兩個或者三個取代基RH取代。下標b優(yōu)選為l或者2，最優(yōu)選b為2?；鶊FW可以位于苯環(huán)的任何位置上。優(yōu)選地，尺4位于苯環(huán)的2-和/或4-和/或6-位上，最優(yōu)選地，114位于苯環(huán)的2-和/或6-位上。在一個優(yōu)選實施方式中，T為O、CH2或NR14，其中R"如上所定義。Y優(yōu)選選自Y1、￥2和￥3中，其中RS和c如上所定義。優(yōu)選地，R8獨立地選自氫、鹵素、CrC6垸基、OR12、NR12R13、C(O)R12和C(O)OR12，其中各個烷基為未取代的或者被1-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基RU取代，并且其中1112和^3如上所定義。更優(yōu)選地，R^和RU獨立選自氫和d-C6烷基。在一個進一步的優(yōu)選實施方式中，R8獨立選自氫、鹵素、Q-C6-烷基、或者0-d-C3-垸基，其中各個烷基為未取代的或者被1-5個取代基R11，優(yōu)選一個、兩個或者三個取代基RH取代。L優(yōu)選為鍵、-C(0)N(R1G)-、-S(0)iN(R1G)-、-G-N(R")-或者-N(R^)-G，其中R^為氫或者CrC6垸基以及i為2。優(yōu)選Z為苯基-A-R9，其中苯基為未取代的或者被選自鹵素、氰基、Q-4烷基、OH、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)220中的l-3個基團取代。在一個優(yōu)選的實施方式中，W選自COOR17、CONH2和CONR171118。其中R卩優(yōu)選獨立地選自d.6烷基和C3.6環(huán)垸基中，并且R18優(yōu)選選自氫、d-6烷基和(33.6環(huán)垸基中，或者1117和尺18—起形成5-6元雜環(huán)。進而，在所述實施方式中優(yōu)選所述CrC6垸基為未取代的或者被1-5個取代基RH取代，其中R11選自O(shè)H、NH2、NH(CrC6垸基)和N(d-C6垸基)2中。在另外一個優(yōu)選的實施方式中，^選自氫、COOH和經(jīng)由C原子連接到A的四唑。更優(yōu)選地，W選自COOH和經(jīng)由C原子連接到A的四唑。通式(I)的優(yōu)選化合物為這樣一些化合物，其中所含有的一個或多個基團具有上面所給出的定義。應當理解，所保護的化合物涵蓋通過結(jié)合在本說明書中公開的對于多種取代基的任何定義得到的任何化合物。對于通式(I)的所有化合物，本發(fā)明也包括全部互變異構(gòu)和立體異構(gòu)形式、溶劑化物和其所有比例的混合物，以及它們藥物學上可接受的鹽。在上文和下文中，所使用的術(shù)語獨立具有如下所述的意義芳基為優(yōu)選具有6-20個碳原子的芳香族單環(huán)或者多環(huán)部分，其優(yōu)選選自苯基、聯(lián)苯基、萘基、四氫萘基、芴基、茚基、菲基，更優(yōu)選苯基和萘基。雜芳基為具有5-20個碳原子的單環(huán)或者多環(huán)芳香族部分，其中至少一個環(huán)含有選自O(shè)、N和/或S中的雜原子，或者雜芳基為含有選自O(shè)、N和/或S中的雜原子中的至少一個雜原子和l-6個碳原子的芳香環(huán)。優(yōu)選地，雜芳基包含14，更優(yōu)選l、2或者3個選自0和/或N的雜原子，并且優(yōu)選選自吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、酞嗪基、噠嗪基、三嗪基、異氮雜茚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋吖基、苯并呋吖基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶。螺環(huán)部分也包括在該定義的范圍之內(nèi)。優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、異噁唑基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基和三唑基。雜環(huán)基是含有選自0、N和/或S中的至少一個雜原子和16個碳原子的310元飽和或者不飽和環(huán)。優(yōu)選地，雜環(huán)基包含14個，更優(yōu)選1、2或者3個選自0和/或N中的雜原子。雜環(huán)基包括單和雙環(huán)系統(tǒng)，并且優(yōu)選21選自吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基(piperidino)、嗎啉基、硫代嗎啉基(thiomorpholino)、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基(homopiperazinyl)、氮雜環(huán)丁烷基(azetidinyl)、氧雜環(huán)丁烷基(oxetanyl)、硫雜環(huán)丁垸基(thietanyl)、高哌啶基、氧雜環(huán)戊烷基(oxepanyl)、硫雜環(huán)戊垸基(thiepanyl)、氧氮雜卓基(oxazepinyl)、二氮雜卓基(diazepinyl)、硫氮雜卓基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧雜環(huán)己烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、吡唑啉基、二噻垸基、二硫戊環(huán)基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、氮雜環(huán)丁-2-酮-l-基、吡咯垸-2-酮-l-基、哌卩定-2-酮-l-基、氮雜環(huán)庚-2-酮-1-基、3-氮雜雙環(huán)[3丄0]己基、3-氮雜雙環(huán)[4丄0]庚基、氮雜雙環(huán)[2.2.2]己基、3H-口引哚基和喹嗪基。螺環(huán)部分也包括在這個定義的范圍之內(nèi)。CVC6烷基是飽和烴部分，也即具有16個碳原子，優(yōu)選14個碳原子的直鏈或者支鏈垸基，比如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基或者己基。C3-C6環(huán)烷基是具有36個碳原子的垸基環(huán)，比如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或者環(huán)己基。碳環(huán)是可為飽和或者不飽和的320個碳原子的單環(huán)或者多環(huán)系統(tǒng)。因此，術(shù)語"碳環(huán)"包括如上所限定的環(huán)烷基以及部分不飽和碳環(huán)基團，例如環(huán)戊烯、環(huán)戊二烯或者環(huán)己烯。C2-C6鏈烯基是具有一個或者多個雙鍵，優(yōu)選一個雙鍵的不飽和烴部分，也即具有26個碳原子的直鏈或者支鏈鏈烯基，比如乙烯基、烯丙基、甲代烯丙基、丁烯-2-基、丁烯-3-基、戊烯-2-基、戊烯-3-基、戊烯-4-基、3-甲基-丁-3-烯基、2-甲基-丁-3-烯基、l-甲基-丁-3-烯基或者己烯基。C2-CV炔基是具有一個或者多個三鍵，優(yōu)選一個三鍵的不飽和烴部分，也即具有26個碳原子的直鏈或者支鏈炔基，比如乙炔基、丙炔基、丁炔-2-基、丁炔-3-基、戊炔-2-基、戊炔-3-基、戊炔-4-基、2-甲基-丁-3-炔基、1-甲基-丁-3-炔基或者己炔基。鹵代或者鹵素為選自F、Cl、Br和I，優(yōu)選F、Cl和Br的鹵素原子。根據(jù)本發(fā)明的化合物的優(yōu)選實施方式在下面示出。22本發(fā)明的化合物可以為藥物前體化合物的形式。"藥物前體化合物"指的是一種衍生物，其在活體內(nèi)在生理條件下通過與酶、胃酸等的反應，例如通過氧化、還原、水解等(每一個反應都是在酶促下進行的)而轉(zhuǎn)變?yōu)楦鶕?jù)本發(fā)明的化合物。所述藥物前體的實例為這樣的化合物，其中在本發(fā)明的化合物中的氨基被?；⑼榛蛘吡姿峄纬?，例如，二十酰氨基、丙氨酰氨基、新戊酰氧甲氨基，或者其中羥基被?；?、烷基化、磷酸化或者被轉(zhuǎn)化為硼酸酯，例如乙酰氧基、棕櫚酰氧基、新戊酰氧基、琥珀酰氧基、富馬酰氧基、丙氨酰氧基，或者其中的羧基被酯化或者酰胺化。這些化合物可以根據(jù)公知的方法由本發(fā)明的化合物制備。所述藥物前體的其它實例為這樣的化合物，其中在本發(fā)明的化合物中的羧化物被轉(zhuǎn)化為，例如，垸基-、芳基-、膽堿-、氨基、酰氧甲基酯、亞麻?；?酯。本發(fā)明化合物的代謝物也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。當本發(fā)明的化合物或者他們的藥物前體可能發(fā)生互變異構(gòu)，例如酮-烯醇互變異構(gòu)時，則各種形式，例如酮式和烯醇式，以及它們?nèi)魏伪壤幕旌衔?3都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。相同的情形也適用于立體異構(gòu)體，例如對映異構(gòu)體、順式/反式異構(gòu)體、構(gòu)象異構(gòu)體等。如果需要，可以用在本領(lǐng)域中公知的方法，例如用液相色譜法，將異構(gòu)體分離。相同的情形適用于用例如手性固定相法分離對映異構(gòu)體。另外，可以通過將對映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化為非對映異構(gòu)體來將它們分離，也即，將它們和對映體純的輔助化合物結(jié)合，隨后分離所得到的非對映異構(gòu)體并裂解所述輔助殘基?；蛘撸梢杂衫霉鈱W純原材料的立體選擇性合成來獲得本發(fā)明化合物的任何對映異構(gòu)體。本發(fā)明的化合物可以是藥物學上可接受的鹽或者溶劑化物的形式。術(shù)語"藥物學上可接受的鹽"指的是由藥物學上可接受的無毒性堿或者酸，包括無機堿或者酸和有機堿或者酸，制備的鹽。當本發(fā)明的化合物包含一種或多種酸性或者堿性基團時，本發(fā)明也包括它們相應的藥物學上或者毒理學上可接受的鹽，特別是它們藥物學上可利用的鹽。因此，含有酸性基團的本發(fā)明的化合物可以用這些組表示并且可以根據(jù)本發(fā)明以例如堿金屬鹽、堿土金屬鹽或者銨鹽而使用。這些鹽的更具體實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、或者與氨或者有機胺，比如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或者氨基酸形成的鹽。含有一種或多種堿性基團(也即可以被質(zhì)子化的基團)的本發(fā)明化合物可以以它們與無機或者有機酸的加成鹽的形式存在并根據(jù)本發(fā)明而使用。適合的酸的實例包括氯化氫、溴化氫、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水楊酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、特戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、氨基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗壞血酸、異煙酸、檸檬酸、己二酸以及本領(lǐng)域中技術(shù)人員公知的其它酸。當本發(fā)明化合物在分子中同時含有酸性和堿性基團時，除了所提及的鹽形式之外，本發(fā)明還包括內(nèi)鹽或者內(nèi)銨鹽(兩性離子)。各個鹽可以用本領(lǐng)域中技術(shù)人員公知的常規(guī)方法來制備，例如，通過在溶劑或者分散劑中將這些化合物與有機或無機酸或者堿相接觸，或者通過與其它鹽的陰離子交換或者陽離子交換。本發(fā)明還包括本發(fā)明化合物的所有鹽，其由于較低的生理相容性不適合直接用在藥品中，但是其可用作，例如，化學反應或者制備藥物學上可接受的鹽的中間體。而且，本發(fā)明提供了藥物組合物，其包含作為活性成分的至少一種本發(fā)明的化合物，或者其藥物前體化合物，或者其藥物學上可接受的鹽或者溶劑24化物以及藥物學上可接受的載體。"藥物組合物"指的是一種或多種活性成分和一種或多種構(gòu)成載體的惰性成分以及任何產(chǎn)物，所述產(chǎn)物直接或者間接得自任何兩種或者多種所述成分的組合、絡(luò)合或者集合，或者一種或多種所述成分的分解，或者一種或者多種所述成分的其它類型的反應或者相互作用。因此，本發(fā)明的藥物組合物涵蓋了通過混合本發(fā)明的至少一種化合物和藥物學上可接受的載體而制備的任何組合物。本發(fā)明的藥物組合物可以另外包含作為活性成分的一種或多種其它的化合物，例如藥物前體化合物或者其它的核受體調(diào)節(jié)劑。雖然在任一給定的情況下最合適的給藥方法依賴于所治療病癥的性質(zhì)和嚴重程度以及所述活性成分的性質(zhì)，但是所述組合物適于經(jīng)口、經(jīng)直腸、經(jīng)局部、經(jīng)胃腸外(包括皮下、肌注和靜脈內(nèi))、經(jīng)眼睛(眼的)、經(jīng)肺(鼻或者口腔吸入)或者經(jīng)鼻給藥。它們可以方便地以單位劑型存在并用藥物領(lǐng)域中公知的任何方法制備。本發(fā)明化合物結(jié)合到NR1H4受體(FXR)上并充當所述NR1H4受體(FXR)的激動劑或者部分激動劑。FXR被認為是核膽汁酸敏感元件。因此，它同時調(diào)節(jié)在肝臟中膽汁酸合成產(chǎn)出和它們在腸內(nèi)的再循環(huán)(通過調(diào)節(jié)膽汁酸結(jié)合蛋白)。但是除了膽汁酸生理機能以外，F(xiàn)XR似乎涉及調(diào)節(jié)許多在病原學上相關(guān)的各種各樣的生理過程，并用于治療各種各樣的疾病，例如膽固醇膽結(jié)石；例如II型糖尿病、血脂異?；蛘叻逝值拇x紊亂；例如炎性腸病或者慢性肝內(nèi)形式的膽汁淤積的慢性炎性疾病和許多其它疾病(T.Claudel等人，"TheFamesoidXreceptor:amolecularlinkbetweenbileacidandlipidandglucosemetabolism",Arterioscler.Thromb.Vase.Biol.2005，25(10)，20202030;S.Westin等人，"FXR,atherapeutictargetforbileacidandlipiddisorders",MiniRev.Med.Chem.2005，5(8)，719727)。FXR在肝臟中調(diào)節(jié)應答基因的復雜模式(complexpattern)?；虍a(chǎn)物對多種生理過程都有影響。在FXR的功能分析的過程中，進行分析的第一個調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)是調(diào)節(jié)膽汁酸的合成。當經(jīng)由調(diào)節(jié)核受體LRH-1的誘導，LXR誘導將膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸的關(guān)鍵酶Cyp7Al時，F(xiàn)XR通過編碼SHP的mRNA的上調(diào)抑制Cyp7Al的誘導，SHP是顯性抑制LRH-1的另外的核受體。因為25FXR與這個通道的最終產(chǎn)物，初級膽汁酸，例如膽酸(CA)或者鵝脫氧膽酸(CDCA)結(jié)合，這可以被認為是在基因表達水平上反饋抑制的一個實例(B.Goodwin等人，"AregulatorycascadeofthenuclearreceptorsFXR，SHP-1,andLRH-1repressesbileacidbiosynthesis",Mol.Cell2000，6(3)，517526;T.Lu等人，"Molecularbasisforfeedbackregulationofbileacidsynthesisbynuclearreceptors",Mol.Cell2000，6(3)，507515)。除了經(jīng)由SHP抑制膽汁酸合成以外，F(xiàn)XR還誘導一系列所謂的ABC(ATP結(jié)合盒)轉(zhuǎn)運蛋白，所述轉(zhuǎn)運蛋白負責將有毒的膽汁酸從肝細胞細胞溶膠中輸出到小管(產(chǎn)生膽汁的小膽管分枝)中。通過對FXR基因敲除小鼠的分析，F(xiàn)XR的肝保護功能第一次變得明顯(C.Sinai等人，"TargeteddisruptionofthenuclearreceptorFXR/BARimpairsbileacidandlipidhomeostasis",Cell2000，102(6)，731744)，其中顯示了幾種ABC-轉(zhuǎn)運蛋白的表達不足或者超量表達。進一步的詳細分析揭示了主要的膽汁鹽排泄泵BSEP或者ABCB11(M.Ananthanarayanan等人，"HumanbilesaltexportpumppromoteristransactivatedbythefamesoidXreceptor/bileacidreceptor",J.Bio.l.Chem.2001，276(31)，2885728865;J.Plass等人，"FamesoidXreceptorandbilesaltsareinvolvedintranscriptionalregulationofthegeneencodingthehumanbilesaltexportpump"，Hepatology2002，35(3)，58996)以及介導從脂蛋白到磷脂的脂質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酉每PLTP(N.Urizar等人，"ThefamesoidX-activatedreceptormediatesbileacidactivationofphospholipidtransferproteingeneexpression",J.Biol.Chem.2000，275(50)，3931339317)，和用于磷脂的兩個關(guān)鍵小管膜轉(zhuǎn)運蛋白，MRP-2(ABCC4)(H.Kast等人，"Regulationofmultidrugresistance-associatedprotein2(ABCC2)bythenuclearreceptorspregnaneXreceptor,famesoidX隱activatedreceptor,andconstitutiveandrostanereceptor",J.Biol.Chem.2002，277(4)，29082915)和MDR-3(ABCB4)(LHuang等人，"FamesoidXreceptoractivatestranscriptionofthephospholipidpumpMDR3"，J.Biol.Chem.2003，278(51)，5108551090)是通過FXR的配體導向轉(zhuǎn)錄激活的直接靶標(概括在下歹U文獻中M.Miyata，"RoleoffamesoidXreceptorintheenhancementofcanalicularbileacidoutputandexcretionofunconjugatedbileacids:amechanismforprotectionagainstcholicacid-inducedlivertoxicity"，J.Pharmacol.Exp.Ther.2005，312(2)，759766;G.Rizzo等人，"RoleofFXRinregulatingbileacidhomeostasisandrelevanceforhumandiseases",Curr.DrugTargetsImmuneEndocr.Metabol.Disord.2005，5(3》289303)。FXR似乎是膽汁酸的合成、輸出和再循環(huán)的主要代謝敏感元件和調(diào)節(jié)子的事實使人想到使用FXR配體來誘導膽汁流并使膽汁酸組合物朝著更親水組合物的方向變化。隨著作為工具化合物的第一個合成的FXR配體GW4064(P.Maloney等人,"IdentificationofachemicaltoolfortheorphannuclearreceptorFXR"，J.Med.Chem.2000，43(16)，29712974;T.Willson等人，"Chemicalgenomics:functionalanalysisoforphannuclearreceptorsintheregulationofbileacidmetabolism",Med.Res.Rev.2001，21(6)，51322)禾口半合成人工膽汁酸配體6-a-乙基-CDCA的開發(fā)，可以分析由強力激動劑產(chǎn)生的FXR的超刺激效果。結(jié)果表明在膽管結(jié)扎的動物中兩種配體都誘導了膽汁流。此外，除了利膽效果以外，也顯示了肝保護效果(R.Pellicciari等人，"6alpha畫ethyl-chenodeoxycholicacid(6-ECDCA)，apotentandselectiveFXRagonistendowedwithanticholestaticactivity",J.Med.Chem.2002，45(17)，35693572;Y.Liu等人，"HepatoprotectionbythefamesoidXreceptoragonistGW4064inratmodelsofintra-andextrahepaticcholestasis",J.Clin.Invest.2003，112(11)，16781687)。這個肝保護效果被進一步縮小到抗纖維化效果，該抗纖維化效果來自于由FXR激動劑產(chǎn)生的基質(zhì)-金屬蛋白酶組織抑制劑TIMP-l和2的抑制、在肝星狀細胞中膠原沉淀解析基質(zhì)-金屬蛋白酶2(MMP-2)的誘導以及隨后的兩者均為促纖維化因子的a-膠原mRNA和轉(zhuǎn)化生長因子p(TGF-卩)mRNA的減少(S.Fiorucci等人，"ThenuclearreceptorSHPmediatesinhibitionofhepaticstellatecellsbyFXRandprotectsagainstliverfibrosis",Gastroenterology2004，127(5)，14971512;S.Fiorucci等人，"Afarnesoidxreceptor-smallheterodimerpartnerregulatorycascademodulatestissuemetalloproteinaseinhibitor-1andmatrixmetalloproteaseexpressioninhepaticstellatecellsandpromotesresolutionofliverfibrosis",J.Pharmacol.Exp.Ther.2005，314(2)，584595)。FXR的抗纖維化活性至少部分地通過PPARy(另外一種核受體，抗纖維化活性是與其相關(guān)聯(lián)的)的誘導來介導的(S.Fiorucci等人，"Cross-talkbetweenfarnesoid-X一receptor(FXR)andperoxisomeproliferator國activatedreceptorgammacontributestotheantifibroticactivityofFXRligandsinrodentmodelsoflivercirrhosis",J.Pharmacol.Exp.Ther.2005，27等人，""Antidiabeticthiazolidinedionesinhibitcollagensynthesisandhepaticstellatecellactivationinvivoandinvitro"，Gastroenterology2002，122(7)，19241940;I.PinedaTorra等人，"Bileacidsinducetheexpressionofthehumanperoxisomeproliferator畫activatedreceptoralphageneviaactivationofthefarnesoidXreceptor",Mol.Endocrinol.2003，17(2)，259272)。而且，在膽管結(jié)扎動物模型以及在雌激素誘導的膽汁淤積的動物模型中顯示了抗膽汁淤積活性(S.Fiomcci等人，"Protectiveeffectsof6-ethylchenodeoxycholicacid，afarnesoidXreceptorligand，inestrogen-inducedcholestasis",J.Pharmacol.Exp.Ther.2005，313(2》604612)?；蜓芯勘砻?，在膽汁淤積的遺傳類型(進行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積=PFIC，類型IIV)中，或者由于在FIC1基因中的突變減少了FXR自身的核定位(在PFIC類型I中，也稱為拜勒病(Byler，sDisease))(F.Chen等人，"Progressivefamilialintrahepaticcholestasis,type1,isassociatedwithdecreasedfarnesoidXreceptoractivity",Gastroenterology.2004，126(3)，75664;L.Alvarez等人，"ReducedhepaticexpressionoffarnesoidXreceptorinhereditarycholestasisassociatedtomutationinATP8B1"，Hum.Mol.Genet2004，13(20)，245160)或者減少了FXR耙基因編碼MDR-3磷脂輸出泵的水平(在PFIC類型III中)?？傊?，有不斷增加的證據(jù)表明FXR結(jié)合化合物將在慢性膽汁淤積病癥，例如原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)或者原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)的治療方法中顯示實際的臨床應用(綜述在G.Rizzo等人，Curr.DrugTargetsImmuneEndocr.Metabol.Disord.2005，5(3)，289303;G.Zollner,"Roleofnuclearreceptorsintheadaptiveresponsetobileacidsandcholestasis:.pathogeneticandtherapeuticconsiderations",Mol.Pharm.2006，3(3)，23151;S.Cai等人，"FXR:atargetforcholestaticsyndromes",ExpertOpin.Ther.Targets2006，10(3)，409421)。FXR激活對膽汁酸代謝和排泄的縱深影響不僅與膽汁淤積綜合癥相關(guān)并且甚至更直接地與膽結(jié)石形成的治療相關(guān)。由于膽固醇(其主動從肝細胞泵入到小管的內(nèi)腔中)的低溶解度而形成了膽固醇膽結(jié)石。三個主要組分，膽汁酸、磷脂和游離膽固醇的含量的相對百分數(shù)決定了混合膠束的形成并由此決定了游離膽固醇在膽汁中的表觀溶解度。FXR多態(tài)性經(jīng)數(shù)量性狀遺傳位28點分析而定位為導致膽結(jié)石疾病的一個因素(H.Wittenburg，"FXRandABCG5/ABCG8asdeterminantsofcholesterolgallstoneformationfrom■quantitativetraitlocusmappinginmice",Gastroenterology2003，125(3)，868881)。使用合成性FXR工具化合物GW4064,可以表明，F(xiàn)XR的激活導致膽固醇飽和指數(shù)(=CSI)的改善并直接導致C57L易成石小鼠中膽結(jié)石形成的停止，而在FXR基因敲除小鼠中的藥物治療顯示對膽結(jié)石形成沒有效果(A.Moschetta等人,"PreventionofcholesterolgallstonediseasebyFXRagonistsinamousemodel",NatureMedicine2004，10(12)，13521358)。這些結(jié)果證明FXR為一種良好的靶標，其可用于開發(fā)可用于防止膽固醇膽結(jié)石形成或者防止在手術(shù)切除或者震波碎石后膽結(jié)石重新形成的小分子激動齊ll(論述在S.Doggrell，"Newtargetsinandpotentialtreatmentsforcholesterolgallstonedisease",Curr.Opin.Investig.Drugs2006，7(4》344348)。自從發(fā)現(xiàn)第一個合成FXR激動劑并將其給藥嚙齒動物后，事實證明FXR是血清甘油三酸脂的關(guān)鍵調(diào)節(jié)子(P.Maloney等人，J.Med.Chem.2000，43(16)，297卜2974;T.Willson等人，Med.Res.Rev.2001，21(6)，51322)。在過去的六年里，已經(jīng)發(fā)表的累計證據(jù)表明通過合成激動劑產(chǎn)生的FXR激活不但導致血清甘油三酸脂的明顯減少，主要以減少的VLDL的形式，并且導致總血清膽固醇的減少(H.Kast等人，"FarnesoidX-activatedreceptorinducesapolipoproteinC-IItranscription:amolecularmechanismlinkingplasmatriglyceridelevelstobileacids",Mol.Endocrinol.2001，15(10)，17201728;N.Urizar等人，"AnaturalproductthatlowerscholesterolasanantagonistligandforFXR"，Science2002，296(5573)，17031706;G.Lambert等人，"ThefarnesoidX-receptorisanessentialregulatorofcholesterolhomeostasis",J.Biol.Chem.2003，278,25632570;M.Watanabe等人，"BileacidslowertriglyceridelevelsviaapathwayinvolvingFXR,SHP,andSREBP畫lc"，J.Clin.Invest2004，113(10)，14081418;A.Figge等人，"HepaticoverexpressionofmurineAbcbllincreaseshepatobiliarylipidsecretionandreduceshepaticsteatosis",J.Biol.Chem.2004，279(4)，27902799;S.Bilz等人，"ActivationofthefarnesoidXreceptorimproveslipidmetabolismincombinedhyperlipidemichamsters",Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.2006，290(4)，E71622)。但是血清甘油三酸脂的降低不是一個孤立的效果。用合成FXR激動劑GW4064治療db/db或者ob/ob小鼠導致血清甘油三酸脂、總膽固醇、游離脂肪酸、比如3-羥基丁酸鹽的酮體的顯著和聯(lián)合減少。此外，F(xiàn)XR激活涉及在肝細胞中的細胞內(nèi)胰島素信號通道，導致來自肝臟糖原異生的葡萄糖輸出的減少但是伴隨著肝臟糖原的增加。胰島素敏感度以及葡糖耐量受到FXR治療的正面影響(K.Stayrook等人，"RegulationofcarbohydratemetabolismbythefarnesoidXreceptor",Endocrinology2005，146(3)，98491;Y.Zhang等人，"ActivationofthenuclearreceptorFXRimproveshyperglycemiaandhyperlipidemiaindiabeticmice",Proc.Natl.Acad.Sci.USA2006，103(4》謂610U;B.Cariou等人，"ThefamesoidXreceptormodulatesadiposityandperipheralinsulinsensitivityinmice",J.Biol.Chem.2006，281，1103911049;K.Ma等人，"FarnesoidXreceptorisessentialfornormalglucosehomeostasis",J.Clin.Invest.2006，116(4)，U021109;D.Duran國Sandoval等人，"PotentialregulatoryroleofthefarnesoidXreceptorinthemetabolicsyndrome",Biochimie2005，87(1)，9398)。最近在用高脂飲食過度飼喂的小鼠中也觀察到體重減輕的效果(C.Lihong等人，"FXRAgonist,GW4064,ReversesMetabolicDefectsinHigh-FatDietFedMice",AmericanDiabetesAssociation(ADA)66thannualscientificsessions,June2006，AbstractNumber856-P)。這禾中體重減輕效果可能得自于FGF-19(—種已知導致體重減輕和運動表現(xiàn)型的成纖維細胞生長因子)的FXR誘導(J.Holt等人，GenesDev.2003，17(13)，15811591;E.Tomlinson等人，"Transgenicmiceexpressinghumanfibroblastgrowthfactor-19displayincreasedmetabolicrateand'decreasedadiposity"，Endocrinology2002，143(5)，17411747)。在新近的專利申請中，顯示了FXR激動劑在體重減輕上的效果(StoffelW.等人，"MethodsforinhibitingAdipogenesisandfortreatingType2Diabetes"，國際專禾U申請WO2004/087076;S.Jones等人，"MethodsofusingFXRAgonists",國際專利申請WO2003/080803)?？傊現(xiàn)XR激動劑的這些藥理學效果可以在不同的治療方法中使用由于FXR結(jié)合化合物的胰島素敏化、葡萄糖異生作用和降脂效果，它們被認為是治療II型糖尿病的良好候選。在一個實施方式中，根據(jù)本發(fā)明的化合物和包含所述化合物的藥物組合30物用在II型糖尿病的治療中，該疾病可以通過FXR-介導的在肝臟內(nèi)系統(tǒng)胰島素敏感度和細胞內(nèi)的胰島素信號的向上調(diào)整、增加周邊的葡萄糖吸收和代謝、增加肝臟中的糖原存儲、減少從肝臟負荷的糖原異生產(chǎn)生的葡萄糖向血清中的輸出而得到治療。在又一個實施方式中，所述化合物和藥物組合物用于制備藥劑，所述藥劑用于治療慢性肝內(nèi)膽汁淤積病癥的和有些形式的肝外膽汁淤積病癥，例如原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)、原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)、進行性家族性膽汁淤積(PFIC)、乙醇誘導的肝硬化和相關(guān)的膽汁淤積，或者由慢性膽汁淤積病癥或者急性肝內(nèi)膽汁淤積病癥例如雌激素或者藥物誘發(fā)的膽汁淤積導致的肝臟纖維化。本發(fā)明也涉及用于治療胃腸道病癥的通式(I)的化合物或者含有所述化合物的藥物組合物，所述病癥減少了對飲食中脂肪和脂溶性飲食維生素的吸收，其可通過增加腸內(nèi)膽汁酸和磷脂的水平而得到治療。在又一個實施方式中，所述化合物或者藥物組合物用于治療選自下組中的疾病脂質(zhì)和脂蛋白紊亂，例如作為臨床表現(xiàn)癥狀的高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥和動脈粥樣硬化，其可以通過FXR對升高HDL膽固醇、降低血清甘油三酸脂、增加肝臟膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化和增加在肝臟中的VLDL和其它脂蛋白的清除和代謝性轉(zhuǎn)化的有益效果而得到改善。在又一個實施方式中，所述化合物和藥物組合物用于制備藥劑，其中FXR-靶標藥劑的降脂、抗膽汁淤積和抗纖維化聯(lián)合效果可以用于治療肝臟脂肪變性和相關(guān)癥狀，例如非酒精性脂肪性肝炎("NASH")或者用于治療與乙醇誘導的肝硬化或者病毒負荷形式的肝炎相關(guān)的膽汁淤積和纖維化效果。結(jié)合降血脂效果，也表明功能性FXR的喪失導致在ApoE基因敲除小鼠中動脈粥樣硬化的增加(E.Hanniman等人，"LossoffunctionalfarnesoidXreceptorincreasesatheroscleroticlesionsinapolipoproteinE-deficientmice",J.LipidRes.2005，46(12)，25952604)。因此，F(xiàn)XR激動劑可能具有作為抗動脈粥樣硬化和保護心臟藥物的臨床用途。在血管平滑肌細胞中內(nèi)皮肽-1的向下調(diào)節(jié)也可能導致這樣的有益治療效果(F.He等人，"Downregulationofendothelin-1byfarnesoidXreceptorinvascularendothelialcells",Circ.Res.2006，98(2)，1929)。本發(fā)明也涉及根據(jù)通式(I)的化合物或者含有所述化合物的藥物組合物，其用于預防性和創(chuàng)傷后治療心血管紊亂，比如急性心肌梗塞、急性中風或者血栓形成，它們作為慢性梗阻性的動脈粥樣硬化的最終結(jié)果而發(fā)作。在一些選出的出版物中已經(jīng)評價了FXR和FXR激動劑對癌癥和非惡性細胞的增殖和凋亡的效果。從這些初步結(jié)果中可以看出，似乎FXR激動劑也可能影響在癌細胞系中(E.Niesor等人，"ThenuclearreceptorsFXRandLXRalpha:'potentialtargetsforthedevelopmentofdrugsaffectinglipidmetabolismandneoplasticdiseases",Curr.Pharm.Des.2001，7(4》23159)和在血管平滑肌細胞中(VSMC)(D.Bishop-Bailey等人，"ExpressionandactivationofthefamesoidXreceptorinthevasculature",Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2004，101(10)，36683673)的細胞凋亡。而且，F(xiàn)XR似乎在轉(zhuǎn)移性乳腺癌細胞和在結(jié)腸癌中表達(J.Silva，"Lipidsisolatedfromboneinducethemigrationofhumanbreastcancercells",J.LipidRes.2006，47(4)，724733;G.DeGottardi等人，"ThebileacidnuclearreceptorFXRandthebileacidbindingproteinIBABParedifferentlyexpressedincoloncancer",Dig.Dis.Sci.2004，49(6)，982989)。主要集中在FXR對代謝作用的影響上的其它出版物將經(jīng)由Forkhead/Wingless(FOXO)家族的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)子從FXR到類似于胰島素細胞內(nèi)信號以及腫瘤轉(zhuǎn)化細胞所使用的磷脂酰肌醇-三磷酸(PI3)激酶/Akt信號轉(zhuǎn)導途徑的細胞內(nèi)信號連接起來(D.Duran-Sandoval等人，J.Biol.Chem.2005，280(33),2997129979;YZhang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2006，103(4)，10061011)。這使得人們考慮FXR也可以作為治療增殖性疾病，尤其是過度表達FXR的轉(zhuǎn)移形式的癌癥或者FOXO/PI3-激酶/Akt通道為推動增殖的原因的那些疾病的潛在靶標。因此，根據(jù)通式(I)的化合物或者含有所述化合物的藥物組合物適于治療非惡性過增生紊亂，例如在充氣囊容器擴張和支架應用后由于增加的血管平滑肌細胞(VSMC)的增殖導致的增加的新生內(nèi)膜形成或者前列腺增生(BPH)(—種增殖過度的腫瘤發(fā)生前形式)、其它形式的瘢痕組織形成和纖維化，這些病癥可以用例如FXR-介導的對PI-3激酶/AKT/mTOR細胞內(nèi)信號通道的干預、減少基質(zhì)金屬蛋白酶活性和(x-膠原沉淀來得到治療。在又一個實施方式中，所述化合物和藥物組合物用于惡性增殖過度紊亂，例如所有形式的癌癥(例如某些形式的乳腺癌或者前列腺癌)，其中對PI-3-32預和/或p27kip的誘導和/或細胞凋亡的誘導將具有有益的影響。最后，F(xiàn)XR似乎也涉及調(diào)控在腸中的抗菌防御(T.Inagaki等人，"Regulationofantibacterialdefenseinthesmallintestinebythenuclearbileacidreceptor",Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2006,103(10)，39203905)，雖然沒有提供確切的作用機制。但是從這些發(fā)表的數(shù)據(jù)中，人們可以得出結(jié)論，采用FXR激動劑的治療可能在炎性腸道紊亂(IBD)，特別是影響腸道的上段(回腸)部分的那些形式的治療中具有有益的影響，因為這似乎是FXR調(diào)控細菌滋長的作用位置。在IBD中，適應性免疫反應的脫敏作用在腸內(nèi)免疫系統(tǒng)中不知何故被削弱了。細菌的過度生長由此可能造成觸發(fā)慢性炎性響應的建立。因此，由FXR-負荷機制抑制細菌滋長可能是防止急性炎性病癥的關(guān)鍵機制。因此，本發(fā)明也涉及根據(jù)通式(I)的化合物或者包含所述化合物的藥物組合物，其用于治療與炎性腸道疾病，例如克羅恩病或者潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)的疾病。FXR-介導的腸內(nèi)障礙功能的恢復和非共生細菌負荷量的減少被認為是有助于減少細菌性抗原在腸內(nèi)免疫系統(tǒng)的暴露并且因此可以減少炎性響應。本發(fā)明進一步涉及一種化合物或者藥物組合物，其用于治療肥胖癥和相關(guān)的紊亂，比如代謝性綜合征(血脂異常、糖尿病和不正常的高體重指標的組合病癥)，所述病癥可以通過FXR-介導的血清甘油三酸脂、血糖降低和胰島素敏感度的增加以及FXR-介導的體重減輕而得到治療。在一個實施方式中，所述化合物或者藥物組合物用于治療持續(xù)感染，所述持續(xù)感染是由細胞內(nèi)細菌或者寄生原生動物，比如分枝桿菌屬(肺結(jié)核或者麻風病的治療)、單核細胞增生李斯特菌(李氏桿菌病的治療)、利什曼原蟲屬(利什曼蟲病)、錐蟲屬(美洲錐蟲病、錐蟲病、非洲錐蟲病)導致的。在又一個實施方式中，本發(fā)明的化合物或者藥物組合物用于制備一種藥劑，所述藥劑用于治療i型和n型糖尿病的臨床并發(fā)癥。這些并發(fā)癥的實例包括糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性神經(jīng)病變、周圍組織動脈阻塞性疾病(PAOD)。本發(fā)明還包括糖尿病的其它臨床并發(fā)癥。此外，那些由于增強的脂質(zhì)和特別是甘油三酸脂的累積和隨后促纖維化通道的激活導致的器官的慢性肥胖和纖維化病變而產(chǎn)生的病癥和疾病也可以33通過施用本發(fā)明的化合物或者藥物組合物而得到治療。這樣的病癥和疾病包括在肝臟中的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和慢性膽汁淤積病癥、在腎臟中的腎小球硬化癥和糖尿病性腎病、在眼中的黃斑變性和糖尿病性視網(wǎng)膜病以及神經(jīng)變性疾病，比如在腦中的阿爾茨海默病或者在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的糖尿病性神經(jīng)病變。在實際用途中，本發(fā)明的化合物可以作為活性成分與根據(jù)常規(guī)藥物復合技術(shù)的藥物載體一起均勻結(jié)合在混合物中。根據(jù)給藥所要求的制劑形式，例如口服或者胃腸外的(包括靜脈內(nèi)的)，載體可以為各式各樣的形式。當制備用于口服劑型的組合物時，可以使用任何常規(guī)的藥物介質(zhì)，例如，在制備口服液體藥劑例如懸浮液、酏劑和溶液時使用水、乙二醇、油、醇、芳香劑、防腐劑、著色劑等等；或者在制備口服固體制劑例如粉末、硬膠囊和軟膠囊和片劑時使用例如淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、成粒劑、滑潤劑、粘合劑、崩解劑等等，其中固體口服制劑是比液體藥劑更優(yōu)選的。因為片劑和膠囊劑容易服用，所以它們代表了最有利的口服劑量單位形式，在這種情況下明顯使用固體藥物載體。如果需要的話，可以用標準水溶液或者非水溶液技術(shù)將片劑包衣。這樣的組合物和制劑應當含有至少百分之O.l的活性化合物。當然，可以改變在這些組合物中的活性化合物的百分比，并且該百分比可以方便地在單位重量的約2%約60%之間。在這樣的治療上使用的組合物中的活性化合物的量是這樣的以使得可以得到有效的劑量。也可以以例如液滴或者噴霧劑的形式經(jīng)鼻內(nèi)給藥該活性化合物。所述片劑、藥丸、膠囊劑等也可以包含粘合劑比如黃蓍樹膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或者明膠；賦形劑比如磷酸二鈣；崩解劑比如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、藻酸；滑潤劑比如硬脂酸鎂；和甜味劑比如蔗糖、乳糖或者糖精。當劑量單位形式是膠囊時，除了上述類型的材料以外，它可以包含液體載體比如脂肪油?？梢源嬖诟鞣N各樣的其它材料作為包衣或者來改變所述劑量單位的外形。例如，片劑可以用蟲膠、糖或者兩者進行包衣。除了所述活性成分以外，糖漿劑或者酏劑可以包含作為甜味劑的蔗糖、作為防腐劑的對羥基苯甲酸甲酯或丙酯、染料和例如櫻桃味或者橙味的調(diào)味劑。本發(fā)明的化合物也可以經(jīng)胃腸外給藥?？梢栽谒信c表面活性劑比如羥丙基纖維素適當?shù)鼗旌蟻碇苽溥@些活性物質(zhì)的溶液或者懸浮液。在甘油、液體聚乙二醇及其混合物中和在油中也可以制備分散劑。在貯存和使用的常規(guī)條件下，這些制劑含有防腐劑以防止微生物的生長。適于注射用途的藥品形式包括無菌水溶液或者分散劑和用于即時制備無菌可注射溶液或者分散劑的無菌粉末。在所有的情況下，所述藥品形式都必須是無菌的并且必須是以容易注射的形式存在的流體。它在制造和貯存的條件下必須是穩(wěn)定的并且必須在抗微生物比如細菌和真菌的污染作用的條件下保存。載體可以是溶劑或者分散介質(zhì)，其含有，例如，水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、它們適合的混合物和植物油?？梢允褂萌魏芜m合的給藥方法來向哺乳動物，尤其是人提供有效劑量的本發(fā)明化合物。例如，可以使用經(jīng)口、經(jīng)直腸、經(jīng)局部、經(jīng)胃腸外、經(jīng)眼、經(jīng)肺、經(jīng)鼻等給藥方法。劑型包括片劑、錠劑、分散劑、懸浮劑、溶液劑、膠囊劑、乳劑、軟膏劑、氣溶膠等。優(yōu)選本發(fā)明的化合物經(jīng)口服給藥。根據(jù)所使用的具體化合物、給藥方式、所治療的病癥和被治療的病癥的嚴重程度可以改變所使用的活性成分的有效劑量。這樣的劑量可由所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的專業(yè)人員容易地確定。當治療或者預防本發(fā)明化合物所指示的FXR介導的病癥時，當以約0.1毫克約100毫克/千克動物體重的每日劑量，優(yōu)選以單次日劑量、或者以兩到6次每天的分劑量、或者以連續(xù)釋放的形式施用給藥本發(fā)明的化合物時獲得了大致滿意的效果。對于大多數(shù)大型哺乳動物，總?cè)談┝繛榧s1.0毫克約1000毫克，優(yōu)選約1毫克約50毫克。對于70公斤的成年人，總?cè)談┝恳话銥?毫克約350毫克?？梢哉{(diào)整這個劑量方法以提供最佳治療效果。在本申請中的一些縮寫如下?？s寫縮寫名稱ADME吸收、分布、代謝、排泄CIMS化學電離質(zhì)譜d雙峰DCC二環(huán)己基碳二亞胺DEAD1，2-偶氮二甲酸二乙酯DIAD1,2-偶氮二甲酸二異丙酯35DIPEA二異丙基乙胺DMF;DMFAN,N-二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜EDCl-[3-(二甲基氨)丙蜀-3-乙基碳二亞胺FRET熒光共振能量轉(zhuǎn)移LC液相色譜HPLC高效液相色譜m多重峰M.p熔點MS質(zhì)譜NMR核磁共振PAMPA平行人工膜滲透性分析(Parallelartificialmembranepermeabilityassay)PyBop六氟磷酸(苯并三唑-l-基氧基)三吡咯烷基磷q四重峰Rf保留因子rt保留時間s單峰t三重峰TBTUO-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯THF四氫呋喃TLC薄層色譜本發(fā)明化合物可以根據(jù)下面的示意圖和實施例的步驟使用適當?shù)夭牧现苽洳⑶疫M一步通過下面的具體實施例來進行舉例說明。此外，通過使用在這里描述的步驟，結(jié)合在本領(lǐng)域中的常規(guī)技術(shù)，可以容易地制備在本申請中主張的其它本發(fā)明化合物。但是，在所述實施例中闡明的化合物不能被理解為是構(gòu)成被認為是本發(fā)明的唯一化合物。所述實施例進一步闡明了用于制備本發(fā)明化合物的細節(jié)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地理解下面制備步驟的條件和方法的已知變化可以用于制備這些化合物。本發(fā)明化合物一般以它們的藥物學上可接受的鹽(比如上面描述的那些)的形式進行分離。36相應于所分離的鹽的游離胺堿可以通過與適當堿，例如碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉和氫氧化鉀水溶液的中和，以及將釋放出的游離胺堿萃取到有機溶劑中，隨后蒸發(fā)來制備?？梢詫⒂眠@種方式分離的游離胺堿通過溶解在有機溶劑中，隨后加入適當?shù)乃岷秃罄m(xù)的蒸發(fā)、沉淀或者結(jié)晶進一步轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N藥物學上可接受的鹽。與所分離的鹽相對應的游離羧酸可以通過與適當?shù)乃?，比如鹽酸、硫酸氫鈉、磷酸二氫鈉水溶液中和，以及將釋放出的游離羧酸萃取到有機溶劑中，隨后蒸發(fā)來制備。可以將用這種方式分離的羧酸通過溶解在有機溶劑中，隨后加入適當?shù)膲A和后續(xù)的蒸發(fā)、沉淀或者結(jié)晶進一步轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N藥物學上可接受的鹽。下文中給出了制備本發(fā)明化合物的說明。除非另外在方法中指明，所述變量具有如上所述的相同意義。下面給出的實施例意圖解釋本發(fā)明的具體實施方式。在如下所述的合成中使用的適當起始原料、基本成分和試劑為市售的，可從下列公司購買到例如，德國慕尼黑的西格瑪奧德里奇化學品有限公司(Sigma-AldrichChemieGmbH，Munich,Germany)、比禾U時的AcrosOrganics或者德國58239施維爾特的飛世爾科技有限公司(FisherScientificGmbH，58239Schwerte,Germany),或者用在下列文獻中描述的步驟常規(guī)制備例如《March'sAdvancedOrganicChemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure》第5版，JohnWiley&Sons;或者TheophilEicher，SiegfriedHauptmann的《TheChemistryofHeterocycles;Structures,Reactions,SynthesisandApplication》，第2版，Wiley-VCH2003;Fieser等人的《Fiesers'ReagentsfororganicSynthesis》，JohnWiley&Sons2000。在下面描繪出的常規(guī)合成路線圖的結(jié)構(gòu)式中Et為卣素、OH、OC(O)烷基、OC(O)芳基、O-芳基、O-五氟苯基、O-磺酰基垸基、O-磺酰基芳基、O-琥珀酰亞胺基、O-苯并三唑基、硝基、疊氮基、S-垸基、so2垸基、so2芳基、sc(o)垸基、sc(o)芳基或者氰基；E『H為作為親核試劑的基團；例如OH、SH、NH2、N(R")H、NH(CO)O-烷基、NH(CO)O-芳基、NH(SO)2芳基、NH(SO)2烷基、CH3或者CF2H;U為卣素、NH2、N(R1Q)H、硝基、疊氮基、CN、CF3、COCl、COF、CHO、CH2OH、COOH、C(Q)NHNH2、C(O)O誦烷基、37說C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、SMe、S02C1、S03H、G-NH2、G-N(R1())H、OH、O-烷基、G-SH、G-OH、G-卣素、B(OMe)2、B(OH)2、BF3\4，4,5，5-四甲基-l,3,2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基(4，4，5,5-tetramethyl-l，3,2-dioxaborolan-2畫yl)或者乙炔基；U為卣素、NH2、N(R1Q)H、COCl、COF、CHO、CH2OH、COOH、C(0)NHNH2、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、S02C1、S03H、G-NH2、G-N(R10)H、OH、G-SH、G畫OH、G國卣素、B(OH)2、B(OMe)2、BF"4,4，5，5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基或者乙炔基；Lc為卣素、NH2、N(R1Q)H、COCl、COF、CHO、CH2OH、COOH、C(0)NHNH2、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、S02C1、S03H、G-NH2、G-N(R10)H、OH、G-SH、G隱OH、G誦鹵素、B(OMe)2、B(OH)2、BF/、4,4，5，5-四甲基-1,3，2-二氧雜環(huán)硼戊垸-2-基或者乙炔基。R1Q、R14和G和在權(quán)利要求中的限定相同。在合成方法的優(yōu)選實施方式中Et為鹵素、OH、OS02垸基或者OS02芳基；E『H為OH、SH、NH2或者CH3;U為鹵素、硝基、疊氮基、CN、CF3、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、SMe、S03H、G-NH2、G-N(R1())H、OH、O-烷基、G-SH、G-OH、G-卣素、B(OH)2、B(OMe)2、BF3\4,4，5，5-四甲基-1,3，2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基或者乙炔基；U為NH2、COCl、COOH、C(0)NHNH2、S02C1、B(OMe)2、B(OH)2、BF3—、4,4,5，5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基或者乙炔基；Lc為NH2、CHO、COCl、COOH、C(0)NHNH2、S02C1、B(OH)2、B(OMe)2、BF"4,4，5，5-四甲基-l,3，2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基或者乙炔基；在更優(yōu)選的合成方法中EL為氯或者OH;38E『H為OH或者NH2;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>Lc為NH2、CHO、COCl、COOH或者S02Cl。通式IVa的吡唑化合物在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用如示意圖1中所示的在本領(lǐng)域中常規(guī)使用的標準方法合成。當^和R"—起為羰基時，通式IVa的吡唑化合物可以通過在乙酸中在空氣存在下將通式VIIIa的乙炔化合物與通式IIa的腙結(jié)合來得到通式IIIa的叔丁基化的吡唑化合物來制備。隨后的脫丁基化反應最終得到通式IVa的化合物，如在文獻中所述(Kamitori等人，Heterocycles1994，38，2125;Kamitori等人，J.Heterocycl.Chem.1993，30，389391)。另一種制備通式IVa的化合物的方法包括用三氯乙酰肼處理通式Va的醛來得到三氯乙酰腙VIa，其隨后與通式Vila的1，3-二酮化合物結(jié)合得到通式IVa的產(chǎn)物，如在文獻中所舉例說明的(Kaim等人，Synlett2000，353355)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>(Vila)示意圖1在如上所示的示意圖l中，變量R1113、a和b和在權(quán)利要求中的限定相同。變量E包括變量EN-H和El，具有如上所限定的意義。通式IVb的異噁唑化合物在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用本領(lǐng)域中常規(guī)使用的標準方法(示意圖2)合成，例如，通過將通1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>式Villa的乙炔化合物與通式lib的a-氯肟化合物結(jié)合，如在Quilio等人，Gazz.Chim.Ital.1937，67，589中所述。另外，如果R1和112—起為羰基，化合物Ivb可以通過將通式lib的a-氯肟與1,3-二羰基化合物Vb反應而制備，如下列文獻中所述例如Maloney等人，J.Med.Chem.2000，43(16)，29712974和Doley等人，J.Chem.Soc.1963，58385845。當113為烷氨基時，另一種制備通式IVb的化合物的方法特別適合，并且包括將通式Villa的乙炔化合物與通式VIb的氧化腈結(jié)合，如在下列文獻中所舉例說明的Himbert等人，LiebigsAnn.Chem.1990，4，403407禾口Beyer等人，JustusLiebigsAnnChem1970，4554。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>示意圖2通式IVc的化合物(示意圖3)在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用本領(lǐng)域中常規(guī)使用的標準方法合成，例如，用描述在下列文獻中的方法Y.Chen,Heterocycles1995，41，175和B.Chantegral等人，J.Org,Chem.1984，49，44194424。通式IVd的化合物在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用本領(lǐng)域中常規(guī)使用的標準方法合成，例如，用描述在下列文獻中的方法J.Piet等人，Bull.Soc.Chim.Belg.，1996，105(1)，3344和A.Cwiklicki等人，Arch.Pharm.，2004，337(3)，156163。通式IVe的化合物在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用本領(lǐng)域例如，用描述在下列文獻中的方法G.Mitchell等人，J.Chem.Soc.PerkinTrans1，1987，413422和Y.Piterskaya等人，Russ.J.Gen.Chem.，1996，66(7),11501157。通過使用本領(lǐng)域中的技術(shù)人員公知的衍生反應可以選擇性地將通式IVaIVe的化合物的變量轉(zhuǎn)化為通式IVaIVe的化合物的其它變量，這些反應描述在文獻中，例如T.Eicher，S.Hauptmann《TheChemistryofHeterocycles;Structures,Reactions,SynthesisandApplication》，第2版，Wiley畫VCH2003(以下稱為五z'c/zw);《March'sAdvancedOrganicChemistry:Reactions,Mechanisms,andStructure》，第5版，JohnWiley&Sons(以下禾爾為Marc/z);Larock《ComprehensiveOrganicTransformations》，VCHPublishers,NewYork,N.Y.1989(以下稱為丄aracA:);Fieser等人，《Fiesers'ReagentsfororganicSynthesis》，JohnWiley&Sons2000(以下禾爾為Wayer)。如在示意圖4中所描繪的通式IXa和IXb的化合物在本領(lǐng)域中是公知的，并且當不能購買到時，很容易用本領(lǐng)域中常規(guī)使用的標準方法合成，例如，用描述在如上所引用的文獻中的方法。對于具體的制備方法，參見實施例121。通式IVaIVe、IXa、IXb、XII、XIII和XIV的化合物可以非必須的配置一個在其轉(zhuǎn)化后剩余在化合物中的暫時連接的保護基團。在合成程序的較后步驟中，脫除該保護基團，如在下面文獻中所教導的T.Greene，P.Wuts，《Protectivegroupsinorganicsynthesis》，第3版，Wiley&Sons1999(以下禾爾為Oeewe)。通式(I)的化合物的常規(guī)合成包括如在示意圖4和示意圖5中所描繪的多步合成程序。從通式IVaIVe的雜環(huán)中間體開始，為合成通式XII的中間體的第一步設(shè)計了兩個合成路線。意圖341在步驟Al中，將帶有選自EN-H的親核基團的通式IXa的適合化合物溶解或者懸浮在適合的溶劑中，優(yōu)選但并不限于二甲基甲酰胺、四氫呋喃、苯、甲苯、二氯甲垸或者醚，以及，如果有益的話，非必須地加入適當?shù)膲A，包括但并不限于甲醇鈉、甲醇鉀、碳酸鉀、六甲基二硅氮烷鈉、二異丙胺基鋰、正丁基鋰或者例如二異丙基乙胺的胺堿，然后加入帶有適合的離去基團El的通式IVaIVe的化合物。當需要堿時，一般使用的比例是l:l。但是，本領(lǐng)域中的技術(shù)人員會理解，摩爾過量，通常在約13倍摩爾過量范圍內(nèi)，是可接受的。反應物通常在約0r約10(TC的溫度，優(yōu)選在室溫下結(jié)合，并且所得到的混合物一般攪拌約5分鐘約48小時。當E^為一個較差的離去基團(例如OH)時，需要通過向反應混合物中加入活化試劑比如MeS02Cl、CF3(S02)20或者Mitsunobu試劑偶氮二甲酸二異丙酯和三苯基膦來將其激活，例如，如在實施例1中所示。優(yōu)選，在步驟A1中離去基團E^為氯或者OH。最優(yōu)選，在通式IXa的化合物中的親核基團E『H是OH。當E『H為OH而EL為氯時，將通式IXa的反應物溶解或者懸浮在適合的溶劑中，優(yōu)選四氫呋喃、DMF或者甲醇，并加入一般12當量的適合堿，例如氫化鈉或者甲醇鈉。然后加入通式IVaIVe的一種化合物，并通常將所得到的混合物攪拌約5分鐘48小時。反應溫度可以在-10。C+6(TC，一般在-l(TC+10。C的范圍內(nèi)。當E礦H為OH而El也是OH時，將通式IVaIVe和IXa的反應物溶解或者懸浮在適合的溶劑中，優(yōu)選苯或者甲苯，并在沒有加入堿的情況下加入12當量的三苯基膦和偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)。反應物一般在約0"C約5(TC的溫度，優(yōu)選在室溫下結(jié)合。反應時間一般為1小時12小時。溶劑通常用蒸餾一般在1050。C的溫度下除去。粗產(chǎn)物非必須地用在本領(lǐng)域中己知的柱色譜法和其它純化方法進行純化。在步驟A2中，將帶有適合的離去基團EL的通式IXb的適合的化合物與帶有選自EN-H的親核基團的通式IVaIVe的化合物在與在步驟Al中使用的相似條件下結(jié)合。最優(yōu)選地，在步驟A2中，在通式IXb的化合物中的離去基團EL為氯而在通式IVaIVe的化合物中的親核基團EN-H是OH或者NH2。在這種情況下，將通式IVaIVe的反應物溶解或者懸浮在適合的溶劑，優(yōu)選四氫呋喃、DMF或者甲醇中，并通常加入12當量的適合的堿，比如氫化鈉或者甲醇鈉。然后加入通式IXb的化合物，并通常將所得到的混合物攪拌約1小時12小時。反應溫度的范圍可以為-10'C+6(TC，通常為-10'C+l(TC。步驟A1和步驟A2的原材料和產(chǎn)物可以非必須地帶有剩余在化合物中的保護基團，其需要在額外的步驟中除去，如在0^^中所教導的。在非必須的步驟b中，通過使用本領(lǐng)域中技術(shù)人員公知的衍生反應可以將通式XII的化合物的變量非必須地轉(zhuǎn)化為通式XIV的化合物的其它變量，所述衍生反應描述在Oee"e、五/c/zw和丄"racA:中。這樣的衍生反應被認為將通式XII中的官能團LA轉(zhuǎn)化為在通式XIV中的官能團部分LB，其能夠與在通式XIII的化合物中的部分Lc進行反應，如在步驟C中所描述的(示意圖5)。用于官能團相互轉(zhuǎn)化的一般方法描述在Z"rad中。在步驟b的一個實例中，LA為硝基，其被還原為氨基LB。在另一個實例中，La是硝基，其通過還原反應，隨后的偶氮化反應以及后來的與溴化物的置換反應而轉(zhuǎn)化為溴。在又一個實例中，La是SH基団，其通過氧化反應而互變?yōu)閟o3h基團并用POCl3處理而得到S02Cl基團LB。在另一個實例中，LA是COO垸基酯基團，其被皂化為COOH基団Lb。步驟b的原材料和產(chǎn)物可以非必須地帶有剩余在化合物中的保護基團，其需要在額外的步驟中除去，如在G^e恥中所教導的。在步驟C中，將帶有官能團Lc的通式XIII的適合的化合物溶解或者懸浮在適合的溶劑中，優(yōu)選但并不限于二甲基甲酰胺、乙腈、四氫呋喃、苯、甲苯、二氯甲烷或者醚，并且，如果有利的話，非必須地加入適合的堿，包括但并不限于甲醇鈉、甲醇鉀、碳酸鉀、六甲基二硅氮垸鈉、二異丙胺基鋰、正丁基鋰或者例如二異丙基乙胺、三乙胺或者N-甲基嗎啉的胺堿。加入帶有官能團LB的通式XIV的化合物。預期以如下方式選擇通式XIII的化合物的R意圖443變量和通式XIV的化合物的變量以使得官能團Lc與官能團LB的合成性組合生成如上面描述中限定的部分L。如果需要堿，一般使用的比例為1:1。但是，本領(lǐng)域中的技術(shù)人員會理解，摩爾過量，通常在約13倍摩爾過量是可接受的。反應物通常在約0"C約10(TC的溫度，優(yōu)選在室溫下結(jié)合，并且所得到的混合物一般攪拌約5分鐘約48小時。當Lb和Lc為不能在上述條件下結(jié)合的較低反應性的基團時，可能需要使用活化試劑。在一個實施方式中，LB為COOH而U為NH2或者相反，并且可能需要偶合劑例如PyBOP、EDC或者DCC來使反應更容易。另外可以如在中所述將所述COOH基團轉(zhuǎn)化為活化的COC1基團。在另一個實施方式中，LB為乙炔基而LA為疊氮基或者相反，可能需要例如CnS(V抗壞血酸的催化劑，如在K.B.Sharpless等人，Angew.Chem.2002，114，27082711中所述。在又一個實施方式中，LB為B(OH)2而LA為鹵素或者相反，可能需要例如PdCl2(PPh3)2的Pd催化劑，如在A.Suzuki'"palladium-CatalyzedCross-CouplingReactionsofOrganoboronCompounds",Chem.Rev.1995，95，24572483中所述。步驟C的產(chǎn)物可以非必須地帶有剩余在化合物中的保護基團，其需要在額外的步驟中除去，如在0^^中所教導的。通過使用本領(lǐng)域中的技術(shù)人員公知的衍生反應可以非必須地將通式21縮化合物的變量進一步轉(zhuǎn)化為通式I的化合物的其它變量，這些反應描述在Oee"e、五/c/zw和i^racA:中。這些功能團相互轉(zhuǎn)化的具體實例可以在實施例部分找到。RlR2r1。2z、，+,/丫、t乂xZY乂LrLfTTX乙、畫/丫、t"^y(X川)cb(XIV)LTX(l)示意圖5非必須地，通過使用如在中描述的單步或者多步功能團相互轉(zhuǎn)化的常規(guī)方法可以將通式I的化合物的變量進一步轉(zhuǎn)化為通式I的化合物的其它變量。本領(lǐng)域中的技術(shù)人員將理解，上述合成步驟可以非必須地用另外的合成順序來進行，也即，通式XIII的化合物可以與通式IX的化合物用上述技術(shù)化合，隨后將所得到的中間體與通式通式IVaIVe的化合物化合來得到通式(I)的產(chǎn)物。在實施例部分的實施例19中舉例說明了這樣相反順序的合成44步驟。生產(chǎn)通式I的化合物所需要的具體步驟順序依賴于所合成的具體化合物、起始化合物和取代部分的相對易變性。合成方法的最優(yōu)選實例概括在示意圖6中，其中W為烷基或者二烷基氨基；R"為鹵素；b=2;EL為氯或者OH;LA為硝基；U為NH2;Lc為COCl或者S02Cl;y為y1、￥3或者￥5;R8為OMe、CH3或者CF3;C=1;L為-C(O)N(R10)-、-S(O)mN(R10)-、-G-N(R10)-;111()為氫或者甲基；m=2;G為-CH2-;Z為苯基-A-R9或者吡啶基-A-R9;A為鍵或者-CH2-;R9為COOH或者COOMe。示意圖6在本發(fā)明最優(yōu)選實施方式的步驟Al中，將通式(IVb)的適當化合物溶解或者懸浮在適當?shù)娜軇┲?，?yōu)選四氫呋喃、甲醇、苯或者甲苯。當EL為氯時，加入堿，例如氫化鈉或者甲醇鈉等。當EL為OH時，加入12當量的三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)代替堿。加入通式IXa的化合物，并且通常將反應物在約0"C約5(TC的溫度，優(yōu)選在室溫下化合。反應時間一般為124小時。溶劑通常在一般為1(TC5(TC的溫度下用蒸餾除去。通式XII的粗產(chǎn)物非必須地用萃取方法和/或柱色譜法和本領(lǐng)域中已知的其它純化方法進行純化。在本發(fā)明最優(yōu)選實施方式的步驟B中，還原在通式XII的化合物中的硝基得到為通式XIV的化合物的一部分的氨基。幾種適合的還原方法描述在i^odb中，例如在比如碳載鈀等的氫化催化劑的存在下的氫化反應，或者使用在甲醇中的硼氫化鈉和作為催化劑的氯化鎳的還原反應。可以如下進行使用鋅的還原反應將通式XII的適當化合物與鋅粉一起溶解或者懸浮在適當?shù)娜軇┲?，?yōu)選例如甲醇的醇，并加入一種酸，優(yōu)選乙酸。通常將反應物在約ox:約5(rc的溫度，優(yōu)選在室溫下化合，直到用本領(lǐng)域中已知的方法，例如TLC或者HPLC檢測到足夠的轉(zhuǎn)化率。反應時間一般為124小時。非必須地，然后將固體副產(chǎn)物用過濾除去。揮發(fā)物用本領(lǐng)域中己知的方法，例如蒸餾除去。通式XIV的粗產(chǎn)物非必須地用萃取方法和/或柱色譜法和本領(lǐng)域中已知的其它純化方法進行純化。在本發(fā)明最優(yōu)選實施方式的步驟C中，將通式XIV的化合物中的氨基與46在通式XIII的化合物中的磺酸或者羧酸部分或者相應的磺酰氯或者羧酰氯(carboxylicacidchloride)部分化合。適用于該轉(zhuǎn)化的幾種方法描述在丄aracA:中，包括使用DCC、EDC、PyBroP或者其它本領(lǐng)域中已知的其它適合偶合劑活化通式XIII的化合物的羧酸基團并將該活化的酸與通式XIV的化合物的胺功能團化合。當使用通式XIII的羧酰氯或者磺酰氯時，一般步驟如下將通式XIV的胺化合物與堿，優(yōu)選胺堿，例如DIPEA、三乙胺或者N-甲基嗎啉，和通式xm的酰氯化合物一起溶解或者懸浮在適當溶劑中，例如二氯甲烷、丙酮或者四氫呋喃等。通常將反應物在約0'C約5(TC的溫度，優(yōu)選在室溫下化合，直到用本領(lǐng)域中已知的方法，例如TLC或者HPLC檢測到足夠的轉(zhuǎn)化率。反應時間一般為124小時。通式I的粗產(chǎn)物非必須地用萃取方法和/或柱色譜法和本領(lǐng)域中已知的其它純化方法進行純化。如上所述，通過使用如在i^rad:中描述的單步或者多步功能團相互轉(zhuǎn)化反應可以將通式I的化合物進一步轉(zhuǎn)化為該通式的其它變量。在最優(yōu)選的實施方式中，使用鹵代垸，優(yōu)選碘甲烷將酰胺或者磺酰胺基團L進行N-垸基化反應。在一般方法中，在-10"t"3(TC，一般為0。C的溫度下將通式I的化合物溶解或者懸浮在適當溶劑中，例如THF，并加入堿，一般為NaH，并將混合物非必須地進行攪拌直到去質(zhì)子化作用足夠進行。加入鹵代垸并在-l(TC+8(TC，一般為室溫的溫度下繼續(xù)攪拌直到得到足夠的垸基化產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率。揮發(fā)物用本領(lǐng)域中已知的方法除去，并將粗產(chǎn)物非必須地用常規(guī)接受的方法，例如萃取和/或色譜法進行純化。在其它最優(yōu)選的實施方式中，將在通式I的化合物中的羧酸酯基團進行皂化來得到相應的通式I的羧酸。在一般方法中，將通式I的化合物與110當量，優(yōu)選12當量的堿，優(yōu)選NaOH或者LiOH—起溶解在非必須地含有050%的水的適當溶劑中，例如醇或者醚，優(yōu)選甲醇。通常將反應物在約0°。約80°C，優(yōu)選在室溫6(TC的溫度下化合，直到用本領(lǐng)域中己知的方法，例如TLC或者HPLC檢測到足夠的轉(zhuǎn)化率。反應時間一般為124小時。通式I的粗產(chǎn)物非必須地用萃取方法和/或柱色譜法和本領(lǐng)域中已知的其它純化方法進行純化。除非另外指出，所有的非水溶液反應都使用市售無水溶劑或者在氦氣或者在氮氣氣氛下進行。使用采用硅膠60(230400目)的快速柱色譜法(flashcolumnchromatography),或者使用如在合成方法中描述的條件的反相制備47HPLC將化合物進行純化。使用帶有APCI電離的SurveyorMSQ(ThermoFinnigan，美國)進行LC/MS分析，柱WatersXTerraMSC183.5nm2.1x30mm，注射體積1^1，流速1.0ml/min，流動相A:H2O-0.1%甲酸；B:乙腈。梯度表<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>檢測二極管陣列(PDA),190800nm;質(zhì)譜(APCI+或-)。^-NMR:400MHz光譜用^nVwM五/Ct/7rp/wW0M//z光譜儀測量，300MHz光譜用Bmker300MHz光譜儀測量，200MHz光譜用Varian光譜儀測量?；瘜W位移值相對于四甲基硅烷(TMS)以ppm給出，使用殘余溶劑質(zhì)子共振作為內(nèi)標。熔點用SanyoGallenkamp熔點儀(MPD350.BM3.5)進行測量。TLC使用Merck(硅膠Si-60F254，0.25mm)板和所指示的溶劑進行。實施例1^,6-/^2,6-二霧,萄-5-#厚碁#凝婆一基伊賓基/-2-伊碁欲虔^-鳶-浙賓伊y^,伊麼^V-f6-f3-〔2，6-of/cA7/ora-pAie/7y/>5-/sopropy/-/sojfazo/-4-y//Tef/7(Mfy7-2-rr7efAiy/-py〃'd/n_3"/i!/-terepAifha/amZcac/cf)o步驟l將金屬鈉(0.119g，5.1mmol)在0°C(冰浴)溶解在甲醇(6ml)中，加入6-氯-2-甲基-3-硝基-吡啶(0.30g，1.7mmol)并將混合物在0。C攪拌直到6-氯-2-甲基-3-硝基-P比啶完全消耗為止(4h)。加入乙酸(0.306g，5.1mmol)并將溶液在減壓下濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，用水沖洗(10ml)，以無水Na2S04干燥，過濾，并在減壓下除去溶劑得到0.28g(97%)的6-甲氧基-2-甲基-3-硝基-吡啶，為無色粉末。步驟2將來自步驟1的產(chǎn)物(0.796g，4.7mmol)加入到在乙酸(5ml)中的HBr(33%)溶液中，將混合物在6(TC攪拌2h并減壓濃縮。將殘余物溶解在乙醚(5ml)中，用5%氨水(3ml)和水(3ml)沖洗，將有機相蒸發(fā)得到0.63g(87%)的6-甲基-5-硝基-吡啶-2-酚，為無色粉末。步驟3向苯(12ml)中的6-甲基-5-硝基-卩比啶-2-酚(0.625g，4.1mmol)、[3-(2,6-二氯-苯萄-5-異丙基-異噁唑-4-蜀-甲醇(1.51g，5.3mmol)(制備參見P.Maloney等人，"IdentificationofachemicaltoolfortheorphannuclearreceptorFXR"，J.Med.Chem.2000，43(16)，2971-2974)和三苯基膦(1.91g，7.4mmol)的懸浮液中逐滴加入偶氮二甲酸二異丙酯(1.57g，7.8mmol)，并在室溫下將反應混合物攪拌12h。減壓濃縮該混合物并用反相HPLC純化(柱Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—純乙腈)得到1.53g(88%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2畫甲基-3-硝基-吡徒，為無色粉末。步驟4將鋅粉(0.156g，2.4mmol)加入到在甲醇(4ml)中劇烈攪拌的來自步驟3的產(chǎn)物(0.100g，0.240mmol)的懸浮液中，隨后逐滴加入乙酸(0.065g，l.lmmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h并通過一個2cm的硅膠層，隨后用甲醇淋洗。將洗脫液蒸發(fā)，并將殘余物溶液在乙酸乙酯(20ml)中并過濾。濾液用10。/。K2C03水溶液(5ml)、水(5ml)洗滌，以無水Na2S04干燥，并減壓除去溶劑得到0.088g(93%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基一異噁唑_4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基胺，為淡黃色油狀物。步驟6向CH2C12(5ml)中的6-[3-(2，6-二氯苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]_2_甲基_吡啶_3_基胺(0.137g，0.350mmol)溶液中加入三乙胺(0.106g，49L05mmo1)和4-氯甲?；郊姿峒柞?0,104g，0.530mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h，用10。/。K2C03水溶液(5ml)、水(5ml)洗滌，以無水Na2S04干燥。減壓除去揮發(fā)物以得到殘余物，將該殘余物用反相HPLC進行進一步純化(柱Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—純乙腈)得到0.126g(65%)的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基_異噁唑_4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯，為無色油狀物。向在甲醇(5ml)中的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-妣啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.055g，0.1mmol)溶液加入在水(0.15ml)中的NaOH(0.076g，1.9mmol)，并在室溫下將反應混合物攪拌22h。蒸發(fā)溶劑并用水(1.0ml)將殘余物溶解。所得混合物用乙酸酸化至pH6，導致生成沉淀。過濾沉淀，用水(3ml)沖洗并在空氣中干燥得到N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-卩比啶-3-基卜對氨甲酰苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0.033g.(61%)。!H畫NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.37(6H，d)，2.26(3H，s)，3.40(1H，br.s)，3.59(1H，sept)，5.13(2H，s)，6.43(1H，d)，7.50-7.62(4H，m),7.96(4H，q),9.85(1H，s)。LC畫MS:rt3.41min;m/z[M+H]+539.8(計算值539.1)。實施例2^"6-(TJ-P,6畫二^"孝基^)-5-,^"基,凝絲4-^)伊真基>2-伊基膽?zhàn)N-3-基乂伊萄賓基伊廣萄苯伊麼將NaH(60。/o在礦物油中，0.011g,0.28mmol)加入到在無水THF(5ml，新鮮蒸餾)中的由實施例1的步驟6制備的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯萄-5-異丙基_異噁唑_4_基甲氧基]_2一甲基_卩比啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.126g，步驟7500.23mmol)的0"C溶液中，并在0'C將反應混合物攪拌lh。加入碘甲烷(0.039g，0.28mmol)并在室溫下繼續(xù)攪拌17h。減壓除去溶劑并將殘余物溶解在甲醇(5ml)中，隨后加入NaOH(0.012g，0.3mmol)和水(0.15ml)。在50。C將所得到的混合物攪拌3h，并減壓除去溶劑。加入水(lml)并將所得混合物用乙酸酸化至pH6，導致生成沉淀。過濾固體，用水(3ml)沖洗并干燥得到N-《6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶—3-基)-N—甲基-對氨甲酰苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0.072g(56%)。iH-醒R(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.30(6H，d)，2.08(3H，s)，3.20(3H，s)，3.25(1H，br.s)，3.44(1H，sept)，5.06(2H，s)，6.30(1H，d)，7.22(2H，d)，7.44-7.65(4H，m)，7.70(2H，d)，9.85(1H，s)。LC-MS:rt3.38min;m/z[M+H]+553.9(計算值554.1)。實施例3修顯6-二霧孝萄-5-,藤-4國基伊禽萄層2-伊基-膽約-基鍵麟-孝伊麼步驟l向在CH2Cl2(5ml)中的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-卩比啶-3-基胺(由實施例3的步驟5制備，0.130g，0.330mmol)溶液中加入4-氯磺酰基-苯甲酸甲酯(0.113g，0.48mmo1)和吡啶(0.026g，0.330mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌16h并減壓濃縮。所得殘余物在硅膠上用制備TLC(洗脫液己烷:乙酸乙酯3:1)進一步純化得到0.096g(43%)的4-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-甲基-批啶-3-基氨磺?；鶀-苯甲酸甲酯，為無色油狀物。步驟2將4-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基氨磺?；繁郊姿峒柞?0.059g，O.lOmmol)溶解在甲醇(5ml)中，隨51后加入NaOH(0.076g，1.9mmol)和水(0.15ml),并將混合物在5(TC攪拌3h。減壓除去溶劑，并將殘余物溶在水(1.0ml)中并用乙酸酸化至pH6。過濾沉淀，用水(3ml)沖洗，并干燥得到4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基_異噁唑_4_基甲氧基]_2_甲基_批啶_3_基氨磺酰基}_苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量:0.045g(78%)。'H-NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.32(6H，d)，1.95(3H，s),3.30(1H，br.s)，3.50(1H，sept)，5.08(2H，s)，6.31(1H，d)，7.12(1H，d)，7.45-7.58(3H，m)，7.64(2H，d)，8.20(2H，d)。LC-MS:rt3.45min;m/z[M+HJ+575.8(計算值575.1)。實施例4^^V,60「2,6-二翥,基聲5-,丙基,綴辟一基」伊裒基>2-伊基膽齊-J-萄-7V畫伊基顏麟苯伊麼<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>在0'C將在實施例3的步驟1中制備的4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基_異噁唑_4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基氨磺酰基}-苯甲酸甲酯(0.096g，0.16mmol)溶解在無水THF(3ml)，加入NaH(60%在礦物油中的分散液，0.008g，0.192mmol)并在0。C繼續(xù)攪拌lh。加入碘甲烷(0.030g，0.192mmol)，并在室溫下攪拌反應17h。減壓除去揮發(fā)物，并將殘余物溶解在甲醇(5ml)中。加入固體NaOH(0.010g，0.25mmol)和水(0.15ml)，在5(TC攪拌該混合物3h。減壓除去溶劑，將所得到的殘余物溶解在水(1.0ml)中并通過加入乙酸將pH調(diào)節(jié)到6。過濾所得到的沉淀，用水(3ml)洗滌并干燥得到4-({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨磺?；?-苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0.068g(72%)。iH陽NMR(400MHz，DMSO-d6);5(ppm)1.35(6H，d)，2.21(3H，s)，3.08(3H，s)，3.30(1H，br.s)，3.54(1H，sept)，5.16(2H，s)，6.31(1H，d)，6.實施例5^/^^2,6-二霧孝萄-5-,席基-,凝辟-^基伊裒基/-2-三肅伊基-膽^^-基;-膽伊絲伊胖蘑將2-氯-6-甲氧基-3-硝基-吡啶(3g，15.9mmol)、CuI(3.63g，36.7mmo1)、無水KF(1.8g，31mmo1)和無水DMF(20ml)加入到反應容器中，隨后加入氯-二氟-乙酸甲酯(5.61g，38.8mmol)。在氮氣氣氛下在127-130。C將該混合物攪拌8h。將該混合物冷卻至室溫，傾倒入NH40H水溶液(25ml)和NH4C1(40g)的混合物中，攪拌0.5h并用乙酸乙酯萃取。萃取液以無水Na2S04干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘余物在硅膠上用柱色譜法(洗脫液己烷:氯仿10:9)將殘余物純化得到1.5g(42.5%)的6-甲氧基-2-三氟甲基-3-硝基-吡啶，為無色油狀物。將6-甲氧基-2-三氟甲基-3-硝基-吡啶(0.50g，2.3mmo1)加入到在乙酸中的HBr溶液(33%HBrw/w，5ml)中，并在80"C將混合物攪拌16h。濃縮反應混合物，并在硅膠上用柱色譜法(洗脫液己烷:乙酸乙酯10:1)將殘余物純化得到0.396g(83%)的6-三氟甲基-5-硝基-吡啶-2-酚，為淡黃色油狀物。將6-三氟甲基-5-硝基-吡啶-2-酚(0.396g,1.9mmol)、[3-(2，6-二氯畫苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基]-甲醇(0.653g，2.3mmo1)、三苯基膦(0.898g，3.4mmo1)和苯(15ml)加入到反應容器中，隨后逐滴加入偶氮二甲酸二異步驟1步驟2步驟353丙酯(0.74g，3.7mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌3h，并減壓除去溶劑得到粗產(chǎn)物，在硅膠上用柱色譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯10:1)將該粗產(chǎn)物進一步純化得到0.66g(73%)的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-3-硝基-吡啶，為淡黃色粉末。步驟4將鋅粉(0.21g，3.1mmol)加入到在甲醇(4ml)中的劇烈攪拌的6-[3-(2,6-二氯-苯萄-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-3-硝基-卩比啶(0.150g，0.310mmol)的懸浮液中，隨后逐滴加入乙酸(0.084g，1.4mmol)。在50"C將反應混合物攪拌2h，并通過2cm硅膠層(洗脫液甲醇)過濾。洗脫液減壓濃縮，并將殘余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中。將該溶液用濾紙過濾，用10°/。K2CO3水溶液(5ml)、水(5ml)洗滌，以無水Na2S04干燥并蒸發(fā)得到0.124g(產(chǎn)率90%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺，為淡黃色油狀物。步驟5將由步驟4制備的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺(0.125g，0.280mmo1)溶解在CH2C12(5ml)中，隨后加入三乙胺(0.085g，0.84mmol)和4-氯甲?；?苯甲酸甲酯(0.139g，0.70mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌12h，用10%K2CO3水溶液(5ml)、水(5ml)洗滌，以無水Na2S04干燥并蒸發(fā)揮發(fā)物得到粗產(chǎn)物，在硅膠上用柱色譜法(洗脫液己烷:乙酸乙酯3:1)將該粗產(chǎn)物進一步純化得到0.053g(31%)的N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯，為無色粉末。^-NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.42(6H，d)，3.44(1H，sept)，3.92(3H，s)，5.20(2H，s)，6.81(1H，d)，7.24-7.40(6H，m)，8.03(1H,bs)，8.18(1H，d)，8.43(1H，d)。LC-MS:rt3.66min;m/z[M+H]+608.0(計算值608.1)。實施例6^^"-(2，6-二翥-孝基>5-,兩基-^激絲"-基伊賓基/-2-三泉伊基-膽資國<5國基;-膽伊糜,伊麼將由實施例5制備的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.035g，0.058mmol)溶解在甲醇(3ml)中，加入在水(0.15ml)中的NaOH(0.046g，1.2mmol)溶液，并將反應混合物在室溫下攪拌50h。減壓除去溶劑并將殘余物溶解在水(1.5ml)中。所得溶液用乙酸酸化至pH6，導致產(chǎn)生沉淀并將該沉淀過濾，用水(3ml)沖洗，并干燥得到N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0扁g(87%)。!H-NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.37(6H，d)，3.40(1H，br.s)，3.53(1H，sept)，5.23(2H，s)，6.90(1H，d)，7.48-7.61(3H，m)，7.83(1H，d)，7.96(4H，q)，10.09(1H，s)。LC畫MS:rt3.56min;m/z[M+H]+594.1(計算值594.1)。實施例7^%-/5-口，6-二翥-,基>5-,席基-,凝絲一-基伊賓基/-2-三肅伊基-膽裙-3-基;扁AL伊碁膽伊絲伊麼將由實施例5制備的N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.046g，0.080mmol)在0°C(冰浴)溶解在無水THF(6ml)中，加入NaH(60%在礦物油中的分散55液，0.004g，O.lOmmol)，并將反應混合物在0。C攪拌30分鐘。加入碘甲垸(0.0142g，O.lOmmol)并將反應混合物在室溫下攪拌15h。減壓除去溶劑，所得殘余物溶解在甲醇(5ml)中，加入在水(0.2ml)中的NaOH(0.066g，1.7mmol)并將混合物在室溫下攪拌8h。減壓除去溶劑，在水(1.0ml)中溶解并用乙酸酸化至pH6。過濾沉淀，用水(3ml)沖洗并干燥得到N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶陽3-基^N—甲基-對氨甲酰苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0.036g(74%)。iH-NMR(400固z，DMSO-d6);5(ppm)1.30(6H，d)，3.20(4H，m)，3.43(1H，m)，5.15(2H，s)，6.82(1H，m)，7.05(1H，m)，7.30-7.60(4H，m)，7.65(1H，m)，7.94(2H，d)。LC畫MS:rt3.52min;m/z[M+H]+607.8(計算值608.1)。^/^/5-口，6-二霧,萄-5-,席基-,襟絲"-基伊賓基/-2-三廒伊基-膽膝3-基將由實施例5的步驟4制備的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-口比啶-3-基胺(0.132g，0.30mmo1)溶解在無水乙腈(5ml)中，隨后加入4-氯磺?；?苯甲酸甲酯(0.070g，0.33mmol)和吡啶(0.071g，0.90mmo1)。將反應混合物在50。C攪拌12h，加入N-甲基嗎啉(0.03g，0.3mmol)并繼續(xù)攪拌8h。將反應混合物減壓濃縮并用反相HPLC(柱Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—純乙腈)純化，隨后在硅膠上用柱色譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯3:1)純化得到0.060g(31%)的4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-吡啶-3-基氨磺?；鶀-苯甲酸甲酯，為無色油狀物。將4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-口比實施例8步驟1步驟256啶-3-基氨磺?；鶀-苯甲酸甲酯(0.060g，O.lOmmol)溶解在甲醇(5ml)中，加入在水(0.15ml)中的NaOH(0.076g，1.9mmo1)，并將反應混合物在50。C攪拌3h。蒸發(fā)揮發(fā)物并將殘余物溶解在水(1.0ml)中，用乙酸酸化至pH6并用乙酸乙酯(2x10ml)萃取。將合并后的萃取液用水(3ml)洗滌，以無水Na2S04干燥，過濾并減壓濃縮得到4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑_4_基甲氧基]_2_三氟甲基_吡啶_3-基氨磺?；鶀-苯甲酸，為無色油狀物。產(chǎn)量0.020g(32%)。iH-畫R(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.38(6H，d)，3.48(1H，sept)，5.23(2H，s)，6.74(1H，d)，7.35-7.46(3H，m)，7.62(1H，d)，7.77(2H，d)，8.12(2H，d)。LC-MS:rt3.30min;m/z[M+H]+630.2(計算值629.0)。￥層"6-/3-卩,6謹二粛-孝萄-5-,席基驛,綴絲一基伊賓基/-2-三肅伊基-膽?zhàn)N-3-基>伊碁赫麟-,伊激將由實施例8的步驟1制備的4-{6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基4匕啶-3-基氨磺?；鶀-苯甲酸甲酯(0.035g，0.050mmol)在(TC(冰浴)溶解在無水THF(3ml)中，加入NaH(60%在礦物油中的分散液，0.0026g，0.065mmol)并將反應混合物在0。C攪拌1h。加入碘甲垸(0.028g，0.20mmo1)并繼續(xù)攪拌20h。蒸發(fā)揮發(fā)物并將殘余物溶解在甲醇(5ml)中。加入NaOH(0.010g，0.25mmol)和水(0.15ml)，并將所得溶液在50。C攪拌3h。蒸發(fā)除去溶劑，加入水(l.Oml)和乙酸直至pH6。蒸發(fā)除去揮發(fā)物得到粗產(chǎn)物，將該粗產(chǎn)物用反相HPLC(柱:Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—純乙腈)純化得到4-({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-卩比啶-3-基}-甲基-氨磺酰基)-苯甲酸，為無色油狀物。產(chǎn)量0.010g(31%)。iH-畫R(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.42(6H，d)，3.12(3H，s)，實施例93.53(1H，sept)，5.32(2H，s)，6.73(1H，d)，7.22(1H，d)，7.38-7.48(3H，m)，7.86(2H，d)，8.24(2H，d)。LC-MS:rt2.34min;m/z[M+H]+644.2(計算值644.1)。實施例107\^6-/3-(2,6-二粛-孝萄-5-,^"基-^綴絲一基伊真基/-2-伊賓基-膽?zhàn)N-3-萄謹膽伊贗,伊虔齡成步驟l將2，6-二氯-3-硝基-卩比啶(2.0g，10mmol)在0"C溶解在無水THF(10ml)中，隨后分批加入甲醇(0.30g，9.0mmo1)和NaH(60%在礦物油中，0.40g，lOmmol)。將混合物攪拌lh并傾倒在冰(50g)上。將沉淀的黃色晶體6-氯-2-甲氧基-3-硝基-吡啶過濾并在空氣中干燥。產(chǎn)量1.8g(92%)。步驟2將6-氯-2-甲氧基-3-硝基-批啶(0.30g，1.0mmol)在(TC溶解在無水THF(5ml)，加入NaH(60%在礦物油中，0.050g，1.2mmo1)并在該溫度下將混合物攪拌lh，隨后加入[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基]-甲醇(0.20g，l.Ommol)。反應在室溫下攪拌16h。減壓除去揮發(fā)物，加入水(10ml)并將該混合物用乙酸乙酯(2x10ml)萃取。合并后的萃取液以無水Na2S04干燥，過濾并減壓除去溶劑。將粗產(chǎn)物經(jīng)反相HPLC(柱:Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—純乙腈)得到0.15g(33。/。)的6-[3-(2，6-二氯-苯萄-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-3-硝基-吡啶。步驟3將在步驟2中合成的產(chǎn)物(0.23g，0.50mmo1)溶解在甲醇(5ml)中，加入鋅粉(0.32g，5.0mmo1)，隨后加入乙酸(0.12g，2.0mmol)，并將反應混合物在5(TC攪拌30分鐘。將該混合物過濾，用甲醇(2x10ml)洗滌，并將合并后的濾液蒸發(fā)。將殘余物溶解在CH2C12(20ml)中，用10%K2CO3溶液(10ml)和水(10ml)洗滌，以無水Na2S04干燥并過濾。減壓除去溶劑得到0.20g(96%)的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2-甲氧基-吡啶-3-基胺。步驟4將由步驟3制備的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2-甲氧基-吡啶-3-基胺(0.150g，0.360mmol)溶解在CH2C12(5ml)中，隨后加入二異丙基乙胺(0.14g，l.lmmol)和4-氯甲?；?苯甲酸甲酯(0.090g，0.44mmol)。將該混合物反應6h，并減壓濃縮。將殘余物經(jīng)在硅膠上的柱色譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯1:2)得到0.12g(57%)的N-(6畫[3畫(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯。步驟5將在甲醇(2ml)中的由步驟4得到的產(chǎn)物(0.030g，0.05mmol)用NaOH(0.002g，0.05mmol)和水(0.2ml)處理。反應混合物在5(TC攪拌2h。蒸發(fā)除去溶解，加入水(10ml)，并將該混合物用乙酸酸化至pH6，導致生成沉淀，將該沉淀過濾，用水(3ml)洗滌并在空氣中干燥得到N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-口比啶-3-基)-對氨甲酰苯甲酸。產(chǎn)量0.020g(67%)。!H-NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.37(6H，d)，3.49(1H，sept)，3.80(3H，s)，5,16(2H，s)，6.16(1H，d)，7.41-7.62(3H，m)，7.80(1H，d)，8.01(4H，q)，9.42(1H，s)。LC曙MS:rt3.40min;m/z[M+H]+555.8(計算值555.1)。實施例117\^6-/5-(2，6-二翥-孝基>5-^厚基-^凝絲4-基伊賓基/-2-伊禽基-膽矩-3-基,AL伊碁膽伊棘，步驟l將在實施例9的步驟4中制備的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁59唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.070g，0.12mmol)溶解在無水THF(5ml)中并冷卻至0。C。加入NaH(60%在礦物油中的分散液，0.006g，0.15mmo1)并將反應混合物攪拌30min。加入碘甲垸(0.021g，0.15mmo1)并在室溫下繼續(xù)攪拌12h。減壓除去溶劑，將殘余物溶解在水(10ml)中并用乙酸中和。過濾所得沉淀并干燥得到0.050g(71%)的]^-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-吡啶-3-基)-N-甲基-對氨甲酰苯甲酸甲酯。步驟2將在甲醇(2ml)中的由步驟l得到的產(chǎn)物(0.030g，0.05mmo1)用水(0.2ml)和NaOH(0,002g，0.05mmol)處理，并將該混合物在50。C攪拌2h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，溶解在水(10ml)中并用乙酸中和。過濾所得沉淀，用水洗滌并干燥得到題述化合物。產(chǎn)量0.025g(85%)。!H-NMR(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.30(6H，d)，3.10(3H，s)，3.40(1H，sept)，3.61(3H，s)，5.10(2H，s)，5.96(1H，d)，7.04(2H，d)，7.39(1H，d)，7.41-7.49(3H，m)，7.62(2H，d)。LC-MS:rt3.29min;m/z[M+H]+569.9(計算值570.1)。實施例12^/^-(2,6-二,-,萄扁5扁,厗基-,綴絲一基伊禽基/-2-伊賓碁膽^^-基務(wù)薪麟-辨麟#成步驟1將在CH2C12(5ml)中的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-吡啶-3-基胺(實施例12，步驟2，0.190g，0.46mmol)用4-氯磺?；?苯甲酸甲酯(0.130g，0.55mmo1)和二異丙基乙胺(0.12g，0.92mmol)進行處理。將反應混合物攪拌10h并在真空中濃縮。粗產(chǎn)物用在硅膠上的柱色譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯1:2)純化得到0.070g(25%)的4-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-吡啶-3-基氨60磺?；鶀-苯甲酸甲酯。步驟2將在甲醇(2ml)中的步驟1的產(chǎn)物(0.030g，0.05mmol)用NaOH(0.002g，0.05mmol)和水(0.2ml)進行處理，并將反應混合物在5(TC攪拌2h。蒸發(fā)除去溶劑，溶解在水(10ml)中并用乙酸酸化至pH6，導致生成沉淀，將該沉淀過濾，用水(3ml)洗滌并干燥得到題述化合物。產(chǎn)量0.023g(77%)。!H畫謹R(400麗z，DMSO-d6);S(ppm)1.32(6H，d)，3.31(3H，s)，3.43(1H，sept)，5.11(2H，s)，6.07(1H，d)，7.36(1H，d)，7.42-7.58(3H，m)，7.73(2H，d)，8.05(2H，d)。LC-MS:rt3.34min;m/z[M+H]+591.9(計算值591.1)。實施例13"/6-/5-(2，6-二霧,萄-5-,巧碁,凝絲一基伊奢基/-2-伊賓基-膽資->-萄-伊碁翥繊萄-苯伊麼步驟1將在無水THF(3ml)中的來自實施例12的步驟1的產(chǎn)物(4-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-卩比啶-3-基氨磺酰棊}-苯甲酸甲酯(0.030g，0.05mmo1)冷卻到0。C，加入NaH(60%在礦物油中的分散液，0.0024g，0.06mmo1)并將反應混合物在(TC攪拌30分鐘。加入碘甲烷(0.009g，0.06mmo1)并在室溫下繼續(xù)攪拌12h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，加入甲醇(5ml)、NaOH(0.010g，0.25mmo1)和水(0.15ml)并將該混合物在50t:攪拌3h。在真空中除去溶劑，加入水(10ml)并將該混合物用乙酸酸化至pH6。過濾所得沉淀，用水(3ml)洗滌并干燥得到0.029g(98%)的4-({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-甲氧基-口比啶-3-基}-甲基-氨磺?；?-苯甲酸甲酯。步驟2將在甲醇(2ml)中的步驟1的產(chǎn)物(0.030g，0.05mmol)用NaOH(0.002g，0.05mmol)和水(0.2ml)進行處理，并在50。C加熱2h。蒸發(fā)除去溶劑，溶解在水(10ml)中并用乙酸酸化至pH6。將所得沉淀過濾，用水(3ml)洗滌并干燥得到題述化合物。產(chǎn)量0.025g(83%)。iH-畫R(400MHz，DMSO-d6);5(ppm)1.32(6H，d)，3.06(3H，s)，3.31(3H，s)，3.43(1H，sept)，5.15(2H，s)，6.09(1H,d)，7.38(1H，d)，7.42-7.61(3H，m)，7.68(2H，d)，8.08(2H，d)。LC-MS:rt3.37min;m/z[M+H]+606.2(計算值606.1)。實施例147VWX2，6-二翥-孝萄-5-,厚碁,綴絲一基伊賓基/一伊基-膽?zhàn)N-3-基/-浙賓伊糜,伊廢將金屬鈉(0.106g，4.6mmo1)在(TC溶解在甲醇(5ml)中，加入2-氯_4-甲基-5-硝基-吡啶(0.2g，l.Ommol)并將反應混合物在(TC攪拌1h并在室溫下lh。在真空中除去溶劑，加入水(5ml)，過濾所得到的晶體沉淀，用水洗滌并干燥得到0.13g(68%)的2-甲氧基-4-甲基-5-硝基-吡啶。將步驟l的產(chǎn)物(0.13g，0.77mmol)溶解在0°C的在乙酸中的HBr溶液(33。/。w/w，5ml)中，然后在60。C攪拌2h，冷卻至室溫并傾倒入乙醚(10ml)中。過濾晶體沉淀，用乙醚洗滌并干燥，得到0.155g(86%)的4-甲基-5-硝基-口比啶-2-酚。將在苯(10ml)中的由步驟2得到的產(chǎn)物(0.15g，l.Ommol)、[3畫(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基]-甲醇(0.28g，1.0mmol)和三苯基膦(0.29g，l.lmmol)用偶氮二甲酸二異丙酯(0.024g，1.2mmo1)逐滴進行處理，并將反應混合物在室溫下攪拌12h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，并用在硅膠上的柱色步驟l步驟2步驟362譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯3:1)將粗產(chǎn)物純化得到0.15g(56%)的2-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-4-甲基-5-硝基-吡啶。步驟4將在甲醇(5ml)中的由步驟3得到的產(chǎn)物(0.15g，0.35mmo1)用鋅粉(0.23g，3.5mmo1)和乙酸(0.10g，1.7mmo1)進行處理，并將反應混合物在50。C攪拌30分鐘。過濾固體并用甲醇(2x10ml)洗滌，蒸發(fā)濾液。殘余物溶解在CH2Cb(20ml)中，用10。/。K2CO3水溶液(10ml)和水(10ml)洗滌，以無水Na2S04干燥并濃縮得到0.147g(98。/。)的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-4-甲基-卩比啶-3-基胺。步驟5將由步驟4得到的產(chǎn)物(0.150g，0.380mmol)溶解在CH2C12(5ml)中，加入二異丙基乙胺(0.073g，0.57mmol)和4-氯甲酰基-苯甲酸甲酯(0.090g，0.45mmo1)并將反應混合物在室溫下攪拌6h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，并用在硅膠上的柱色譜法(洗脫液己垸:乙酸乙酯1:2)將粗產(chǎn)物純化得到0.085g(40%)的N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-4-甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯。步驟6將由前一步驟得到的產(chǎn)物(0.040g，0.072mmol)溶解在甲醇(2ml)中，用NaOH(0.003g，0.072mmol)和水(0.2ml)進行處理，并將反應混合物在50'C攪拌2h。減壓除去溶劑，并將殘余物重新溶解在水(10ml)中并用乙酸酸化至pH6。過濾所得沉淀，用水(3ml)洗滌并干燥得到N-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-4-甲基-吡啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸。產(chǎn)量0.030g(75%)。!H-NMR(400固z，DMSO-d6);3(ppm)1.37(6H，d)，2.15(3H，s)，3.53(1H，sept)，5.07(2H，s)，6.53(1H，s)，7.50-7.65(3H，m)，7.89(1H，s)，8.04(4H，s)，9.92(1H，s)。LC-MS:rt3.14min;m/z[M+H]+540.3(計算值539.1)。實施例153-^國^-(2,6-二翥求萄-5-伊基，綴絲一基J伊賓萄膽?zhàn)N-3-基賓基伊贗萄孝采用適當?shù)钠鹗疾牧鲜褂门c制備實施例1所使用的方法相類似的方法制備實施例15。!H畫畫R(400MHz，MeOH畫dt);5(ppm)2.57(3H，s)，5.08(2H，s)，6.53(1H，d)，7.33-7.45(3H，m)，7.54(1H，t)，7.84(1H，d)，8.05(1H，d)，8.14(1H，d)，8.26(1H，s)，8.50(1H，s)。LC-MS:rt3.38min;m/z[M+H]+497.8(計算值498.1)。實施例16一,0二#糊-5-伊基灘婆(萄伊禽萄膽約-基賓基伊麟,伊麼采用適當?shù)钠鹗疾牧鲜褂门c制備實施例1所使用的方法相類似的方法制備實施例16。^-畫R(400MHz，MeOH-d4);5(ppm)2.56(3H，s)，5.08(2H，s)，6.53(1H，d)，7.32-7.46(3H，m)，7.84(1H，t)，7.93(2H，d)，8.07(2H，d)，8.25(1H，s)。LC-MS:rt3.43min;m/z[M+H]+497.8(計算值498.1)。實施例17;p，6-:l^>5-伊基一萄伊裒萄膽約-萄鍵麟求伊麼<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>采用適當?shù)钠鹗疾牧鲜褂门c制備實施例3所使用方法的相類似的方法制備實施例17。iH-麗R(400MHz，MeOH-d4);S(ppm)2.72(3H,s)，5.22(2H，s)，6.62(1H，d)，7.50(1H，d)，7.55-7.65(3H，m)，7.76(2H，t)，8.05(1H，d)，8.38(1H，d)，8.50(1H，s)。LC隱MS:rt3.52min;m/z[M+H]+533.8(計算值534.0)。實施例184畫^^6-^畫(2，6畫二#孝基」-5-伊基,凝絲4謹基J伊奢基」欲餘-3-基J翥薪贗萄孝伊麼采用適當?shù)钠鹗疾牧鲜褂门c制備實施例3所使用的方法相類似的方法制備實施例18。iH-麗R(400固z，MeOH-d4);S(ppm)2.49(3H，s)，5.00(2H，s)，6.40(1H，d)，7,25(1H，d)，7.32-7.39(3H,m)，7.52(1H，s)，7.64(2H，d)，8.02(2H，d)。LC-MS:rt3.42min;m/z[M+H]+533.8(計算值534.0)。實施例197^/5-/5-^,6-二粛-,萄-5-#^"碁^綴絲-4-基伊賓基伊碁膽裙-2-基>^翥伊絲伊虔將3-甲基-吡啶-2-基胺(5.0g，46.2mmol)溶解在濃硫酸(24ml)中，將該混合物冷卻到0°C，并向該反應混合物中逐滴加入發(fā)煙硝酸((1=1.5，3.5ml)和濃硫酸(3.5ml)的混合物同時保持溫度低于20'C。將攪拌后的該混合物加溫到2(TC并以3-5ml分批轉(zhuǎn)入到加熱到35-40。C第二燒瓶中(溫度不能高步驟165于40°C-每次加入新的一批后都仔細監(jiān)控溫度)。將所得的反應混合物順次在5(TC另外攪拌30分鐘，冷卻至室溫并用濃氨水中和。這導致生成沉淀，將該沉淀過濾，用水和DMFA水溶液(50%,6ml)洗滌，并從DMFA中重結(jié)晶得到3-甲基-5-硝基-吡啶-2-基胺(2.52g，35%)。步驟2將步驟1的產(chǎn)物(0.96g，6.27mmo1)、4-氯甲?；?苯甲酸甲酯(2.49g，12.5mmo1)和三乙胺(1.27g，12.5mmo1)溶解在無水二氯甲烷(20ml)中，并將該混合物在室溫下攪拌96h。減壓除去溶劑并將所得的殘余物用在硅膠上的柱色譜法(洗脫液氯仿，然后氯仿-甲醇95:5)進一步純化得到雙?；a(chǎn)物4-[[4-(甲氧基-羰基)苯甲酰蜀(3-甲基-5-硝基-2-吡啶基嵐基]羰基苯甲酸甲酯(1.1g，37%)。步驟3將由步驟2得到的產(chǎn)物(0.5g，2.1mmo1)溶解在無水甲醇(20ml)中，并在4巴H2壓力下使用拉尼(Raney)鎳作為催化劑(5%w/w)進行氫化。粗產(chǎn)物用在硅膠上的柱色譜法使用氯仿-甲醇(40:1)作為洗脫液進行純化得到0.189g(20%)的N-(5-氨基-3-甲基-吡啶-2-基)-對氨甲酰苯甲酸甲酯。步驟4將從前一步驟中得到的產(chǎn)物(0.189g，0.66mmo1)懸浮在50%硫酸水溶液(2.3g)中并冷卻至0"C。向所得的混合物中逐滴加入在水(0.5ml)中的亞硝酸鈉(0.047g，0.68mmol)溶液，同時保持溫度在3-5°C，并在3°C另外攪拌30分鐘和在50"C攪拌2h。在冷卻至室溫后形成沉淀，將該沉淀過濾、干燥、用二氯甲烷洗滌并干燥得到N-(5-羥基-3-甲基-吡啶-2-基)-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.13g，58%)。步驟5將在苯(6ml)中的由步驟4得到的N-(5-羥基-3-甲基-吡啶-2-萄-對氨甲酰苯甲酸甲酯(0.135g，0.47mmo1)、[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基]-甲醇(0.124g，0.43mmo1)和三苯基膦(0.203g，0.77mmo1)的混合物逐滴加入偶氮二甲酸二異丙酯(0.165g，0.82mmo1)進行處理，并將反應混合物在室溫下攪拌3h。減壓除去溶劑，并將粗產(chǎn)物用反相HPLC(柱Reprosil-PurC18-A9，250x20mm，梯度洗脫乙腈:水(2:1)—乙腈)純化得到1^-{5-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-3-甲基-吡啶-2-基卜對氨甲酰苯甲酸甲酯，為黃色油狀物(0.025g，10%)。步驟6將由步驟5得到的產(chǎn)物(0.025g，0.045mmol)在二氧雜環(huán)己烷(1.5ml)中的溶液用在水(0.1ml)中的LiOH-H2。(0.004g，0.09mmol)進行處理，并將反應混合物在室溫下攪拌3天。將該混合物用乙酸進行處理(直到pH6)，蒸發(fā)除去溶劑，隨后加入水(lml)。過濾所得沉淀，用水(2xlml)洗滌并干燥得到^{5-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-3-甲基-吡啶-2-基}-對氨甲酰苯甲酸，為無色粉末，m.p.218°C。產(chǎn)量0.016g(66%)。'H國畫R(400麗z，CHC13);5(ppm)1.44(6H，d)，2.30(3H，s)，3.32(1H，sept)，4.81(2H，s)，7.15(1H，s)，7.30-7.45(4H，m)，7.77(1H，br.s)，8.18(4H，q)，10.40(1H，br.s)。LC-MS:rt2.02min;m/z[M+H]+540.0(計算值539,1)。實施例20^/^-(2，6-二粛-,萄-5-,厚基-,綴絲"-基伊奢基/-2-三簏伊基-膽裙-3-萄-/瞎伊廣,伊虔(7—麵畫'""VO伊磨將在CH2C12(5ml)中的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺(0.128g，0.290mmol)(用如實施例5的步驟4中的描述合成)溶液用三乙胺(0.029g，0.29mmol)和3-氯甲?；?苯甲酸甲酯(0.063g，0.32mmo1)進行處理。將反應混合物在室溫下攪拌16h，用10%&(:03水溶液(5ml)和水(5ml)洗滌，干燥(無水Na2S04)并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物用在硅膠上的柱色譜法(洗脫液己烷:乙酸乙酯3:1)純化得到^{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-口比啶-3-基H、司氨甲酰苯甲酸甲酯(0.13g，74%)，為無色油狀物。iH-畫R(400顧z，CHC13);S(ppm)1.40(6H，d),3.45(1H，sept)，3.96(3H，s)，5.19(2H，s)，6.80(1H，d),7.20-7.40(3H，m)，7.60(1H，67t)，8.03(1H,br.s)，8.05(1H，d)，8.25(1H，d)，8.41(1H,d)，8.50(1H，s)。LC國MS:rt2.38min;m/z[M+H]+608.3(計算值608,1)。實施例21^^/3-(2,6-二翥-孝基)-5-,厚基-,凝絲一基伊賓基/-2-三肅伊基-膽淀-3-基乂畫棘伊廣,伊歷將在甲醇(5ml)中的由實施例20制備的N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-卩比啶-3-基}-間氨甲酰苯甲酸甲酯(0.037g，0.061mmol)溶液用在水(0.15ml)中的NaOH(0.044g，1.1mmol)進行處理，并將反應混合物在室溫下攪拌50h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，溶解在水(1.0ml)中并用乙酸酸化至pH6，導致生成白色沉淀，將該沉淀過濾，用水(2xlml)洗滌并干燥得到N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-間氨甲酰苯甲酸，為無色粉末。產(chǎn)量0.032g(88%)。iH-NMR(400MHz，CHC13);S(ppm)1.38(6H，d)，3.40(1H，m)，5.15(2H，s)，6.65(1H，m)，7.15-7.40(4H，m)，7.50-8.50(6H，m)。LC-MS:rt2.22min;m/z[M+H]+594.1(計算值594.1)。m.p.153.8-154.8°C.實施例22J-(r6-(T3畫。，6-二翥孝萄-5-,可基,凝絲4畫萄伊裒萄廣三肅伊萄膽淀畫J-^)f伊萄賓基伊鷹萄孝伊麼68由實施例5的步驟4的產(chǎn)物(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺)通過按照實施例5的步驟5的程序與3-氯甲?；?苯甲酸甲酯化合和隨后按照實施例7描述的程序進行N-甲基化和酯水解而合成題述化合物。iH-畫R(400麗z，DMSO-d6);S(ppm)1.30(6H，d)，3.20(3H，m)，3.43(3H，m)，5.15(2H，s)，7.20-7.80(7H，m)，7.95(2H，d)。LC畫MS:rt2.20min;m/z[M+H]+608.2(計算值608.1)。實施例23匈，0二翥糊-5-,席基-4腳萄伊真三粛伊萄膽約-萄-,伊基棘二微向N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基)-N-甲基-對氨甲酰苯甲酸(實施例7)(0.05g，0.082mmol)在二氯甲烷(3ml)中的0'C溶液中加入草酰氯(0.021g,0.164mmol)和一滴二甲基甲酰胺，并將該反應混合物在0'C攪拌1h，然后在室溫下攪拌2h。蒸發(fā)該反應混合物，殘余物溶解在二氯甲烷(3ml)中，蒸發(fā)并重新溶解在二氧雜環(huán)己烷(3ml)中。將該溶液加入到在(TC的二氧雜環(huán)己垸(3ml)中的氨飽和溶液中，并將該反應混合物在0。C攪拌1h，在室溫下攪拌2h。蒸發(fā)該反應混合物，將殘余物與己垸一起研磨并過濾。將該沉淀用己烷(2x5ml)沖洗并干燥得到N、6-((3-(2，6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲氧萄-2-(三氟甲基)吡啶-3-基)-NL甲基對苯二酰胺(0.044g，88%產(chǎn)率)，為淡黃色粉末。M.p.229。C(分解)。'H-NMR(400顧z，DMSO-d6);S(ppm)1.30(6H，m)，3.30(3H，s)，3.40(1H，m)，5.15(2H，s)，7.10-8.10(IIH，m)。LC-MS:rt2.01min;m/z[M+H]+607.2(計算值607.1)。實施例247VV6-(TJ-卩，6-二翥孝萄-5-^厚基,綴絲"-萄伊賓萄-2—三嚴伊萄膽?zhàn)N-J-萄7\^畫三伊基辦微向N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基》-N-甲基-對氨甲酰苯甲酸(實施例7)(0.05g，0.082mmol)在二氯甲烷(3ml)中的0。C溶液中加入草酰氯(0.021g，0.164mmol)和一滴二甲基甲酰胺，并將該反應混合物在0X:攪拌1h，然后在室溫下攪拌2h。蒸發(fā)該反應混合物并重新溶解在二氯甲垸(3ml)中，再次蒸發(fā)并重新溶解在二氧雜環(huán)己垸(3ml)中。將該溶液冷卻到0。C，然后加入到在四氫呋喃(3ml)中的0'C的20Q/。二甲基胺溶液中，并將該反應混合物在0。C攪拌lh，在室溫下攪拌2h。蒸發(fā)該反應混合物，將粗產(chǎn)物在硅膠上用制備TLC進行純化得到題述化合物，為白色粉末。產(chǎn)量0.036g(69%)。M.p.166.8-167.8。C。'H-固R(權(quán)MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.35(6H，m),2.84(3H，s)，3.05(3H，s)，3.35(3H，s)，3.45(1H，m)，5.20(2H,s)，6.70-7.00(1H，m)，7,20-7.90(9H，m)。LC-MS:rt2.09min;m/z[M+H]+635.3(計算值635.1)。實施例25歸,0二翥,萄畫5-,尿基扁￥-萄伊奢萄-^三肅伊萄膽約-萄-TV-伊碁4-(7好-^絲-5-萄孝伊廣嚴70步驟l向在二氯甲烷(7ml)中的由實施例5的步驟4得到的6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺(0.30g，0.67mmol)和三乙胺(0.082g，0.81mmol)的溶液中加入在二氯甲烷(10ml)中的4-氰基-苯甲酰氯(0.133g，0.810mmo1)懸浮液。將反應混合物在室溫下攪拌1h并回流9h，蒸發(fā)除去揮發(fā)物。將粗產(chǎn)物用在硅膠上的柱色譜法(洗脫液二氯甲垸)分離得到0.12g的4-氰基-N-(6-[3-(2，6-二氯-苯萄-5-異丙基_異噁唑_4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}苯甲酰胺，產(chǎn)率31%。步驟2在氬氣氣氛下將氫化鈉(0.025g，0.5Ommo1)在礦物油中的60%懸浮液加入到在無水THF(10ml)中的步驟l的產(chǎn)物(0.17g，0.29mmo1)中，并將該混合物攪拌20分鐘。逐滴加入在無水THF(lml)中的碘甲烷(0.085g，0.60mmol)溶液，并將該混合物在室溫下攪拌16h。將反應混合物用水(5ml)稀釋，用二氯甲烷(3x10ml)萃取，以MgS04干燥并蒸發(fā)。殘余物用在硅膠上的快速色譜法純化得到4-氰基-N-(6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-卩比啶-3-基}-^甲基苯甲酰胺(0.11g，63%)。步驟3將疊氮化鈉(0.018g，0.27mmo1)和固體NH4C1(0.018g，0.33mmol)加入到在DMF(0.6ml)中的來自步驟2的產(chǎn)物(0.052g，0.088mmol)中。將反應混合物在75'C劇烈攪拌10h并在IOO'C攪拌8h。在冷卻至室溫后，將反應混合物用水(2ml)稀釋，用10。/。HCl水溶液酸化至pH5，并用二氯甲烷(3x5ml)萃取。將該有機萃取液干燥(MgS04)并蒸發(fā)。殘余物用硅膠上的快速色譜法(洗脫液甲醇-二氯甲烷1:3)純化得到0.02g(36%)的題述化合物。iH-NMR(400固z，DMSO-d6);5(ppm)1.15-1.45(6H，m)，3.30(3H，s)，3.45(1H，m)，5.20(2H，s)，6.75-6.95(1H,m)，7.10-7.30(1H，m)，717.30-7.60(4H，m)，7,75-7.90(1H，m)，7.90-8.15(2H，m)。LC-MS:rt2.13min;m/z[M+H]+631.8(計算值632.1)。實施例26^^5-"-口，6-二#,萄-5-,^基#綴絲一萄伊髯萄斗伊基欲矩-2-基乂伊萄翥基伊麟,伊廢向在(TC的在無水THF(5ml)中的N-(5-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑_4_基甲氧基]_3_甲基_批啶_2-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯(以實施例19的步驟5中所描述的方式合成，0.096g，0.176mmol)溶液中加入氫化鈉(0.01g，0.26mmo1)在礦物油中的60%懸浮液。繼續(xù)攪拌30分鐘，然后向該反應混合物中加入碘甲烷(0.037g，0.26mmo1)。5h后，加入氫氧化鈉(0.035g，0.87mmo1)和水(0.2ml)并繼續(xù)攪拌4h。蒸發(fā)該混合物，將該殘余物用水(lml)處理，用乙酸將該溶液酸化至pH6，用氯仿(3x20ml)萃取，合并后的萃取液以Na2S04干燥并在真空中除去溶劑。殘余物經(jīng)制備HPLC色譜用乙腈-水洗脫進行純化得到N-(5-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-3-甲基-吡啶-2-基)-N-甲基-對氨甲酰苯甲酸，為黃色油狀物。產(chǎn)量0.016g(17%)。iH-NMR(400MHz，CDC13);S(ppm)1.41(6H，d)，2.00(3H，s)，3.25-3.40(1H，m)，3.40(3H，s)，4.72(2H，s)，6.62(1H，s)，7.29-7.50(5H，m),7.78-7.92(3H，m)。CIMSm/z554(顧+)。實施例27付6，-(2，6-二翥苯萄-5層,蘇一萄伊賓萄-2畫口肅伊萄膽約畫錢萄伊萄,伊麼72步驟1將用實施例5的步驟4中描述的方法合成的產(chǎn)物{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-吡啶-3-基胺}(0.579g，1.3mmo1)和4-甲酰基-苯甲酸甲酯(0.639g，3.9mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(20ml)中并加入冰乙酸(0.468g，7.8mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌1h，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(L24g，5.9mmol)并繼續(xù)攪拌24h。加入碳酸氫鈉飽和水溶液(15ml)并將該水溶液層用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。合并后的萃取液用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并減壓濃縮。殘余物用HPLC(反相，洗脫液乙腈-水)純化得到0.38g(49%)4-({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基氨基}-甲基)-苯甲酸甲酯，，為白色粉末。步驟2將來自步驟1的產(chǎn)物(0.026g，0.044mmol)溶解在甲醇(5ml)中并加入在水(0.2ml)中的氫氧化鈉(0.018g，0.44mmol)溶液。將反應混合物在室溫下攪拌8h。在真空中除去溶劑并將殘余物用水(lml)處理。所得到的溶液用乙酸酸化至pH6。將所形成的沉淀過濾，用水(3xlml)洗滌并空氣干燥得到4-({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-吡啶-3-基氨基}-甲基)-苯甲酸，為白色粉末。產(chǎn)量0.017g(68%)。M.p.259.1-260.1°C.!H-麗R(400固z，DMSO-d6);5(ppm)1.27(6H，d)，3.35-3.55(1H，m)，4.44(2H，s)，5.02(2H，s)，6.06(1H，br.s)，6.54(1H，d)，7.06(1H，d)，7.38(2H，d)，7.40-7.50(3H，m)，7.87(2H，d)。LC-MS:rt2.12min;m/z[M+H]+580.1(計算值580.1)。實施例28^(WK^-(2，6畫二翥孝萄-5-,^基,凝婆4-^)伊賓萄-2丫三粛伊萄^Y伊萄翥萄伊萄苯伊虔步驟l將由實施例27的步驟1制得的產(chǎn)物，4-({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑_4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基氨基}-甲基)-苯甲酸甲酯(0.076g，0.128mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(5ml)中并加入低聚甲醛(0.023g，0.77mmol)、乙酸(0.046g，0.77mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(0.163g，0.77mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌24h。將混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋并用三部分乙酸乙酯萃取。合并后的萃取液用硫酸鈉干燥并減壓濃縮。殘余物用硅膠上的制備TLC(洗脫液己烷-乙酸乙酯5:1)純化得到0.046g(59%)的4-[({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨萄-甲蜀-苯甲酸甲酯，為無色油狀物。LC-MSm/z608(顧+)。步驟2將來自步驟1的產(chǎn)物(0.046g，0.076mmol)在甲醇(5ml)中的懸浮液用氫氧化鈉(0.03g，0.76mmol)和水(0.3ml)處理并將反應混合物在室溫下攪拌7h。在真空中除去溶劑并將殘余物用水(lml)稀釋。所得到的溶液用乙酸酸化至pH6并將所形成的沉淀過濾，用水(3x5ml)洗滌并空氣干燥得到題述產(chǎn)物，為白色粉末。產(chǎn)量0.030g(66%)。M.p.96.1-97.1。C.!H-NMR(400MHz，DMSO-d6);5(ppm)1.31(6H，d)，2.48(3H，s)，3.41-3.57(1H，m)，4.00(2H，s)，5.19(2H，s)，6.81(1H，d)，7.33(2H，d)，7.40-7.52(3H，m)，7.84(2H，d)，7.96(1H，d)。LC-MS:rt2.21min;m/z[M國H]-592.2(計算值592.1)。實施例29^《6-(T7-P,6-二粛,基^)一^^"基-7仏J，W-三絲-5-基」伊賓基)-2—三肅伊基)膽膝3-萄匸伊萄務(wù)基伊廣萄苯伊麼將在甲苯(500ml)中的2,6-二氯苯重氮(dichlorophenylazide)(25g，0.13mol)和4-甲基戊-2-炔-l-醇(52.1g，0.53mol)的混合物在氬氣氣氛下回流35小時。真空除去甲苯并將所得到的殘余物用柱色譜法使用硅膠(100-200目)并以在己垸中的14%乙酸乙酯洗脫純化得到所期望的(1-(2,6-二氯苯基)-4-異丙基-lH-l，2，3-三唑-5-基)甲醇(4.5g，23%產(chǎn)率)，接近作為副產(chǎn)物的區(qū)域異構(gòu)體(l-(2，6-二氯苯基)-5-異丙基-lH-l,2,3曙三唑-4-基)甲醇。iH-麗R(200固z，CDC13)S:1.4(d，6H)，3.15-3.25(m，1H)，4.57(s，2H)和7.4-7.6(m，3H)。將在實施例5的步驟2中合成的產(chǎn)物(5-硝基-6-三氟甲基-批啶-2-酚)(0.080g，0.38mmo1)和在這個實施例中的前一步驟中制得的(l-(2，6-二氯苯基)-4-異丙基-lH-l,2,3-三唑-5-基)甲醇(0.100g，0.35mmol)以及三苯基膦(0.165g，0.63mmo1)溶解在苯(10ml)中，并逐滴加入1，2-偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)(0.134g，0.67mmol)。將反應棍合物在室溫下攪拌8h并蒸發(fā)，將粗產(chǎn)物用制備HPLC(洗脫液乙腈-水)純化得到0.150g(90%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[l，2，3]三唑-4-基甲氧基]-3-硝基-2-三氟甲基-吡啶，為黃色粉末。LC-MSm/z476(固+)。將前一步驟的6-[3-(2,6-二氯國苯基)畫5-異丙基-3H畫[l,2,3]三唑-4-基甲氧基]-3-硝基-2-三氟甲基-卩比啶(0.159g，0.33mmol)和鋅粉(0.217g，3.3mmol)溶解在甲醇(lOml)中并逐滴加入冰乙酸(0.089g，1.49mmo1)，將反應混步驟l步驟2步驟375合物在室溫下攪拌7h。將反應混合物通過使用硅膠的短柱并將洗脫液蒸發(fā)。將殘余物溶解在乙酸乙酯(20ml)中，用10%碳酸鉀水溶液(5ml)和鹽水(2xl0ml)洗滌該溶液，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到0.138g(94%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[l，2，3]三唑-4-基甲氧蜀-2-三氟甲基-妣啶-3-基胺，為黃色油狀物，其直接用在下一步驟中，沒有進行進一步純化。CIMSm/z446(顧+)。步驟4將從前一步驟中制得的產(chǎn)物(0.138g，0.31mmol)溶解在二氯甲垸(5ml)中并加入三乙胺(0.031g，0.31mmo1)和4-氯甲?；?苯甲酸甲酯(0.062g，0.31mmo1)，將反應混合物在室溫下攪拌8h。加入二氯甲垸(20ml)并用10%碳酸鉀水溶液(5ml)和鹽水(2x5ml)洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物用制備HPLC(反相，洗脫液乙腈-水)純化得到0.050g(27%)的N-(6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[l，2，3]三唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-口比啶-3-基}-對氨甲酰苯甲酸甲酯，為白色粉末。CIMSm/z608(固+)。步驟5將從前一步驟中制得的產(chǎn)物(0.050g，0.082mmol)溶解在四氫呋喃(5ml)并在0。C用15分鐘加入氫化鈉(0.005g，0.123mmol)在礦物油中的60%懸浮液。加入碘甲烷(0.018g，0.123mmol)并將反應混合物在0。C攪拌1h并在室溫下再攪拌llh。加入氫氧化鈉(0.062g，1.6mmo1)和水(0.5ml)并將反應混合物在50。C攪拌16h并蒸發(fā)。將殘余物與水(1ml)混合并用乙酸中和至約pH6。將所形成的沉淀過濾，用水(2x3ml)、己垸(2x3ml)洗滌并干燥得到0.038g(76%)的題述化合物。M.p.218-219°C.iH-畫R(400MHz，DMSO-d6);S(ppm)1.10-1.45(6H，m)，3.22(3H，br.s)，3.40(1H，m)，5.40(2H，s)，6.80-6.95(1H，m)，7.15-7.32(1H，m)，7.42-7.70(4H，m)，7.70-7.85(1H，m)，7.90-8.15(2H，m)。LC-MS:rtl.86min;m/z[M+H]+608.2(計算值608.1)。76實施例30^,AL「6一(7-(2，6-二翥,萄4-,^"碁/好-i，2，^三絲-5-萄伊奢萄伊基膽矩-J-^)-7V-伊基翥薪贗萄苯伊麼步驟1向6-甲基-5-硝基-吡啶-2-酚(0.055g，0.36mmol)和用實施例29的步驟1中描述的方法制備的[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[l，2，3]三唑-4-基]-甲醇(0.100g，0.35mmo1)和三苯基膦(0.159g，0.61mmol)在苯(10ml)中的混合物中逐滴加入1，2-偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)(0.128g，0.63mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌7h。蒸發(fā)反應混合物并將殘余物用HPLC純化得到0.122g(83%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-311-[1，2，3]三唑-4-基甲氧基]-2-甲基-3-硝基-吡啶，為淺褐色粉末。CIMSm/z422(固+)。步驟2向來自步驟1的產(chǎn)物(0.124g，0.3Ommo1)和鋅粉(0.195g，3.0mmo1)在甲醇(6ml)中的混合物中逐滴加入冰乙酸(0.081g，1.35mmol)。將反應混合物在60。C攪拌16h,并通過一個使用硅膠的短柱，蒸發(fā)洗脫液，殘余物溶解在乙酸乙酯(30ml)中，用10%碳酸鉀水溶液(10ml)、鹽水(10ml)洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到0.107g(91%)的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[l，2,3]三唑-4-基甲氧蜀-2-甲基-卩比啶-3-基胺，為黃色油狀物。CIMSm/z392(固+)。步驟3將在前一步驟中合成的6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-311-[1,2,3]三唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-口比啶-3-基胺(0.107g，0.27mmo1)溶解在乙腈(6ml)中，并加入吡啶(0.021g，0.27mmol)、4-氯磺?；?苯甲酸甲酯(0.076g，0.32mmo1)。將反應混合物在室溫下攪拌16h，并蒸發(fā)揮發(fā)物。粗產(chǎn)物用制備HPLC純化得到0.038g(18%)的4-{6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基77-311-[1,2,3]三唑-4-基甲氧基]-2-甲基-吡啶-3-基氨磺酰基}-苯甲酸甲酯，為黃色油狀物。CIMSm/z590(顧+)。步驟4將在前一步驟中合成的產(chǎn)物(0.033g，0.056mmol)溶解在苯(5ml)中，加入甲醇(0.04g，1.3mmo1)和三苯基膦(0.047g，0.18mmo1)，隨后逐滴加入1,2-偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)(0.044g，0.22mmo1)。將反應混合物在室溫下攪拌24h并蒸發(fā)除去揮發(fā)物。粗產(chǎn)物用制備HPLC(洗脫液乙腈-水)純化得到0.022g(65%)的4-((6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-3H-[1,2,3]三唑_4-基甲氧蜀-2-甲基-卩比啶-3-基}-甲基-氨磺?；?-苯甲酸甲酯，為無色油狀物。CIMSm/z604(固+)。步驟5將在前一步驟中合成的化合物，4-({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-3&[1，2，3]三唑-4-基甲氧基]-2-甲基-卩比啶-3-基}-甲基-氨磺?；?-苯甲酸甲酯(0.022g，0.036mmol)溶解在甲醇(2ml)中，并加入氫氧化鈉(0.014g，0.36mmol)和水(0.25ml)，將反應混合物在5(TC攪拌8h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，加入水(lml)并用乙酸將該混合物中和至pH7。將所形成的沉淀過濾并干燥得到題述化合物。產(chǎn)量0.015g(71%)。M.p.127.8-128.8°C.iH-麗R(400固z，DMSO-d6);S(ppm)1.45(6H，d)，2.30(3H，s)，3.12(3H，s)，3.25-3.40(1H，m)，4.30(1H，br.s)，5.34(2H，s)，6.27(1H，d)，6.81(1H，d)，7.35-7.48(3H，m)，7.71(2H，d)，8.18(2H，d)。LC國MS:rtl.94min;m/z[M+H]+5卯.2(計算值590.1)。實施例314-(rn霧5-"3-卩，6-二翥孝萄誦5-,厚基,綴婆(萄伊裒萄膽宛-2-萄f伊萄錢伊萄孝伊麼O步驟l在室溫下向2，3-二氯-5-硝基吡啶(1.01g，5.22mmo1)和4-(氨基甲基)-苯甲酸甲酯鹽酸鹽(1.58g，7.83mmol，1.5當量)在2-丙醇(15ml)中的懸浮液中加入DIPEA(2.7ml，15.7mmol，3當量)，并將該混合物在60'C加熱1.25h。在冷卻回到室溫后，真空除去溶劑，并將殘余物懸浮在水(40ml)中。過濾固體并分幾批用水洗滌直至濾液保持無色(約100ml)，并將剩余固體用少量己烷洗滌。所得產(chǎn)物在高真空下干燥得到1.54g(4.79mmol，92%)的4-((3-氯-5-硝基吡啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸甲酯，為亮黃色固體。TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.15,iH誦畫R(DMSO-d6):8.87(d，J=2.4，1H)，8.62(t，J=6.2，1H)，8.42(d，J=2.4，1H)，7.91(d，J=8.4，2H)，7.44(d，J=8.5，2H)，4.79(d，J=6.0，2H)，3.83(s，3H)。步驟2將氫化鈉(60%)(230mg，5.74mmol，1.2當量)在DMF(5ml)中的懸浮液冷卻至0°C，并逐滴加入從步驟l制備的胺產(chǎn)物(1.54g，4.79mmol)在DMF(20ml)中的溶液。將該暗褐色混合物在(TC攪拌40min，并在0。C逐滴加入碘甲烷(0.42ml，6.70mmo1，1.4當量)。將該混合物在(TC攪拌lh并在在室溫下攪拌45分鐘，然后傾倒入鹽水、水和EtOAc(各80ml)的混合物中。水溶液層用EtOAc(2x30ml)萃取，合并后的有機層用％-飽和NaCl溶液(2x40ml)和鹽水(20ml)洗滌，干燥(Na2S04)，并真空除去溶劑。粗產(chǎn)物用快速色譜法(己烷/EtOAc6:l4:l)純化得到4-(((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(1.25g，3.73mmol，78%)，為黃色固體。C15H14C1N304，MW335.8.TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.23.丄H-畫R(DMSO-d6):8.95(d，J=2.4，1H)，8.44(d，J=2.4，1H)，7.91(d，J=8.4，2H)，7.44(d，J=8.5，2H)，5.01(s，2H)，3,85(s，3H)，793.23(s，3H)。步驟3向在步驟2合成的化合物(572mg，1.70mmo1)在甲醇(20ml)和水(4ml)的懸浮液中加入連二亞硫酸鈉(1.48g，8.52mmol，5當量)，并將該混合物在9(TC攪拌50分鐘。在冷卻至室溫后，蒸發(fā)除去甲醇，用&飽和NaCl溶液(50ml)和EtOAc(40ml)取下殘余物。分相，用EtOAc(3x50ml)萃取水溶液層，將合并后的有機層用鹽水洗滌，干燥(Na2S04)，并濃縮。粗產(chǎn)物用快速色譜法(己烷/EtOAc1:1)純化，得到205mg(0.67mmol，39%)的4-(((5-氨基-3-氯吡啶-2-萄(甲基)氨萄甲萄苯甲酸甲酯，為亮褐色固體。C15H16C1N302，MW305.8.TLC(己烷/EtOAc1:1)Rf:0.16.CI-MS:306，308([M+H]+)。丄H畫畫R(DMSO-d6):7.卯(d，J=8.3，2H)，7.61(d，J=2.5，1H)，7.48(d，J=8.6，2H)，7.07(d，J=2.5，1H)，5.17(s，2H)，4.24(s，2H)，3.84(s，3H)，2.60(s，3H)。步驟4在室溫下向由前一步驟中合成的4-(((5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸酯(76mg，0.25mmo1)在二碘甲垸(1.3ml)中的懸浮液中加入亞硝酸異戊酯(0.67ml，4.97mmol，5當量)。將所形成的暗褐色混合物在室溫下攪拌15分鐘，并加入兩滴50%氫碘酸溶液(氣體散出!)。將該黑色混合物在室溫下攪拌1.75h，加入濃氨水(5ml)，并將該混合物再劇烈攪拌15分鐘。用CH2C12(三次)萃取，干燥合并后的有機層(Na2S04)并蒸發(fā)除去溶劑得到黑色液體，將該黑色液體與甲醇/丙酮(10:1;3x20ml)共蒸發(fā)。殘余物用快速色譜法(己垸:己烷/EtOAc6:l)純化得到4-(((3-氯-5-碘代吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(49mg，0.12mmol，47°/。)，為淺黃色樹脂。C15H14C1IN202，MW416.6.TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.40.iH-NMR(DMSO-d6):8.34(d，J=2.1，1H)，8.11(d，J=2.0，1H)，7.93(d，J=8.4，2H)，7.45(d，J=8.5，2H)，4.62(s，2H)，3.84(s，3H)，2.88(s，3H)。步驟5將在前一步驟中合成的碘代吡啶(46mg，0.11mmol，1當量)、如在實施例1的步驟3中所描述的(3-(2,6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲醇(158mg，0.55mmol，5當量)、碘化亞銅(8.4mg，0.044mmol，0.4當量)、1,10-菲咯啉(16mg，0.088mmol，0.8當量)和Cs2C03(72mg，0.22mmol，2當量)在氬氣氣氛下放入一個螺旋蓋試管中，懸浮在無水甲苯(0.5ml)中，將該混合物用氬氣沖洗，并擰上螺旋蓋。將該混合物在12(TC攪拌14.5h。在冷卻至室溫后，用CH2C12(約1ml)稀釋該暗褐色懸浮液并直接進行快速色譜法(己烷:己烷/EtOAc6:l2:l)。得到67mg(0.081mmol，73%)的化合產(chǎn)物4-(((3-氯-5-((3-(2,6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲氧基)吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸(3-(2，6-二氯苯萄-5-異丙基異噁唑-4-萄甲酯，為黃綠色樹脂。C4GH35C15N405，MW:829.0.TLC(己烷/EtOAc1:1)Rf:0.56.CI-MS:576，574[M+MeOH]+，546，544，286，270.!H-NMR(DMSO-d6):7.73(d，J=2.7，1H)，7.66(d，J=8.3，2H)，7.63-7.48(m，6H)，7.42(d，J=2.7，1H)，7.39(d，J=8.4，2H)，5.09(s，2H)，4.89(s，2H)，4.35(s，2H)，3.53(假五重峰(pseudo-quint),J=7.0，1H)，3.44(假五重峰，J=6.8，1H)，2.69(s，3H)，1.36(d，J=7.0，6H)，1.31(d，J=7.0，6H)。步驟6將在前一步驟中合成的化合產(chǎn)物(65mg，0.078mmol)溶解在THF(2.1ml)、甲醇(0.7ml)和水(0.7ml)的混合物中，并加入LiOH'H20(33mg，0.78mmol，10當量)。將該混合物在室溫下攪拌5.5h。減壓除去THF和甲醇，剩下的溶液用水(0.5ml)稀釋，冷卻至0'C，并逐滴加入1NHC1直至達到pH5(約0.72ml)。將固體用EtOAc溶解，分層，水溶液層用少量EtOAc萃取兩次。將合并后的有機層干燥(Na2S04)，蒸發(fā)除去溶劑，并將殘余物用快速色譜法(EtOAc:EtOH使用EtOAc/EtOH-梯度)。得到32mg(0.058mmol，73%)的最終產(chǎn)物4-(((3-氯-5-((3-(2，6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑畫4-基)甲氧基)吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸，為淺黃色固體。C27H24C13N304，MW:560.9.TLC(EtOAc)Rf:0.16APCI畫MS:560，562([M+H]+)。iH畫畫R(DMSO-d6):7.77(d，J=7.9，2H)，7.75(d，J=2.7，1H)，7.64-7.52(m，3H)，7.40(d，J=2.7，1H)，7.19(d,J=8.0，2H)，4.90(s，2H)，4.28(s,2H)，3.52-3.36(m,1H)，2.66(s，3H)，1.33(d，J=7.0，6H)。實施例323-"0-霧5-W-P,6-二翥孝萄-5-;^厚基,綴賽^^)伊奢萄膽膝2-^f伊萄絲伊萄苯伊麼步驟1按照實施例31的步驟1的程序，將1.41g(7.31mmol)的2，3-二氯-5-硝基-吡啶和3-(氨基甲基)-苯甲酸甲酯鹽酸鹽(1.77g，8.78mmol，1.2當量)與3.0ml(17.6mmol，2.4當量)的DIPEA在2-丙醇(15ml)中在60。C反應1.5h。除去溶劑，加入水，過濾并再次萃取濾液得到3-((3-氯-5-硝基吡啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸甲酯(2.27g，7.04mmol，96%)，為黃褐色固體。C14H12C1N304，MW:321.7.TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.20.!H-畫R(DMSO-d6):8.88(d，J=2.4，1H)，8.63(t，J=6.1，1H)，8.41(d，J=2.4，1H)，7.94(s，1H)，7.84(dt，J=1.4，7.7，1H)，7.61(d，J=8.0，1H)，7.47(t，J=7.7，1H)，4.77(d，J=6.2，2H)，3.84(s，3H)。步驟2類似于在實施例31的步驟2中描述的程序，從前一步驟中制備的2.27g(7.04mmol)的3-((3-氯-5-硝基吡啶-2-基氨基)甲基)苯甲酸甲酯與氫化鈉(60%)(310mg，7.74mmo1，1.1當量)在DMF(35ml)中脫質(zhì)子化1h，然后將該混合物與碘甲烷(0.57ml，9.15mmol，1.3當量)在0"C反應0.5h并在室溫下反應1h。如所指出的那樣逐步進行處理，隨后將粗產(chǎn)物進行用快速色譜法得到3-(((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(2.26g，6.74mmol，96%)，為暗黃色油狀物。C15H14C1N304(MW335.8)。TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.24.82H-NMR(DMSO-d6):8.96(d，J=2.4，1H)，8.45(d，J=2.4，1H)，7.92(s，1H)，7.88(d，J=7.5，1H)，7.61(d，J=7.8，1H)，7.55(dd，J=7.6，1H)，5.00(s，2H)，3.85(s，3H)，3.20(s，3H)。步驟3采用在實施例31的步驟3中描述的程序。從前一步驟中制備的3-(((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(2.25g，6.71mmol)與連二亞硫酸鈉(3.51g，20.1mmol，3當量)在甲醇(80ml)和水(16ml)(5:1)的混合物中在9(TC反應1h。如所指出的那樣逐步進行處理，并用快速色譜法純化得到745mg(2.44mmol，36%)的3-(((5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯，為粘性暗褐色油狀物。C15H16C1N302，MW:305.8.TLC(己烷/EtOAc1:1)Rf:0.15.APCI-MS:306，308([M+H]+)。丄H-畫R(DMSO-d6):7.97(s，1H)，7.83(dt，J=1.4,7.7，1H)，7.64-7.58(m，2H)，7.46(dd，J=7.7，1H)，7.07(d，J=2.5，1H)，5.16(s，2H)，4.23(s，2H)，3.85(s，3H)，2.59(s，3H)。步驟4根據(jù)在實施例31的步驟4中描述的程序，399mg(1.31mmo1)的由實施例32的步驟3制備的3-(((5-氨基-3-氯吡啶-2-萄(甲基)氨萄甲萄苯甲酸甲酉旨和3.5ml(26.1mmol，20當量)的亞硝酸異戊酯在二碘甲垸(7ml)中在室溫下反應40分鐘。在O'C加入氫碘酸(25pl)，等到氣體散出停止后，在室溫下將該混合物再攪拌2h。如所描述的那樣逐步進行處理并純化得到239mg(0.57mmo1，44%)的3-(((3-氯-5-碘代吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯，為淺黃色油狀物。C15H14C1IN202，MW:416.6。TLC(己烷/EtOAc4:l)Rf:0.46。APCI-MS:417，419([M+H]+)。iH-畫R(DMSO-d6):8.35(d，J=2.0，1H)，8.12(d，J=2.0，1H)，7.93(s，lH)，7.86(d,J=7.7，1H)，7.59(d，J=7.9，1H)，7.50(dd，J=7.6，1H)，4.61(s，2H)，3.85(s，3H)，2.86(s，3H)。步驟5按照在實施例31的步驟5中描述的化合程序，將由步驟4中制備的3-(((3-氯-5-碘代吡啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(233mg，0.56mmol，831當量)、(3-(2,6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲醇(561mg，1.96mmol，3.5當量)、碘化亞銅(43mg，0.22mmol，0.4當量)、1,10-菲咯啉(81mg，0.45mmol，0.8當量)禾nCs2C03(365mg，1.12mmol，2當量)在無水甲苯(lml)中的懸浮液在氬氣氣氛下在12(TC加熱14.5h。對反應混合物進行直接快速色譜法得到化合產(chǎn)物3-(((3-氯-5-((3-(2，6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲氧基)卩比啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸(3-(2,6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑_4-基)甲酯(303mg，0.37mmol，65%),為淺黃綠色樹脂。C40H35Cl5N4O5，MW:829.0。TLC(己烷/EtOAc1:1)Rf:0.56。APCI-MS:576，574[M+MeOH]+，286，270。!H畫畫R(DMSO-d6):7.77(s，1H)，7.73(d，J=2.6，1H)，7.64-7.47(m，8H)，7.44-7.37(m，2H)，5.09(s，2H)，4.90(s，2H)，4.31(s，2H)，3.52(假五重峰，J=7.0，1H)，3.44(假五重峰，J=7.0，1H)，2.66(s，3H)，1.35(d，J=7.0，6H)，1.32(d，J=7.0，6H)。步驟6向在前一步驟中合成的化合產(chǎn)物(298mg，0.36mmol)在THF(7.5ml)、甲醇(2.5ml)和水(2.5ml)的3:l:l-混合物中的溶液中加入LiOH'H20(151mg，3.60mmol，10當量)。在室溫下攪拌該混合物4.5h。蒸發(fā)除去THF和甲醇，加入水(2-3ml),并將該混合物用1NHC1(3.2ml)在0。C中和。然后將pH值通過小心加入INHC1和飽和NaHC03溶液調(diào)節(jié)至pH5。將該粘性沉淀溶解在EtOAc中，分層，并用EtOAc(2x10ml)萃取水溶液層。合并后的有機層用^-飽和NaCl溶液和鹽水(各10ml)洗滌，干燥(Na2S04)，并濃縮。粗產(chǎn)物用快速色譜法(EtOAc，然后EtOAc/EtOH4:ll:4)純化得到題述化合物3-(((3-氯-5-((3-(2,6-二氯苯基)-5-異丙基異噁唑-4-基)甲氧基)口比啶-2-基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸(159mg，0.28mmol，79%)，為白色固體。C27H24C13N304(MW560.9)。TLC(EtOAc)Rf:0.22。APCI-MS:560，562([M+H]+)。!H-NMR(DMSO-d6):7.92(s，1H)，7.81(d，J=7.4，1H)，7.74(d，J=2.7，1H)，7.65-7.52(m，3H)，7.40(d，J=2.7，1H)，7.36(d，J=7.5，1H)，7.30(dd，J=7.5，1H)，4.90(s，2H)，4.31(s，2H)，3.31(sept，J84=7.0，1H)，2.66(s，3H)，1.32(d，J=7.0，6H)。實施例33^(^6-(^-口，6-二翥,萄-5-#厚基#綴絲一^)伊賓萄-2,三粛伊萄膽皮-3腳萄「伊萄翥萄伊萄苯伊麼2-麥基z;磨將TBTU(0.177g,0.55mmol)和三乙胺(0.056g，0.55mmol)加入到4-[({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-卩比啶-3-基}-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸(實施例28)(0.20g,0.34mmo1)在無水乙腈(6ml)中的溶液中。在室溫下攪拌lh后，向反應混合物中加入乙烷-1，2-二醇11(0.633g，10.2mmo1)并在50。C繼續(xù)攪拌7h。真空除去揮發(fā)物，殘余物用水(6ml)稀釋并用氯仿萃取，萃取液用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將殘余物用制備HPLC純化得到題述化合物，為無色油狀物。產(chǎn)量0.040g(18%)。^國NMR(400MHz，CDC13);5(ppm)1.39(6H，d)，2.05(1H,br.s)，2.53(3H，s)，3.47(1H，sept)，3.94(2H，t)，4.01(2H，s)，4.46(2H，q)，5.18(2H，s)，6.71(1H，d)，7.23-7.30(1H，m)，7.32-7.38(2H，m)，7.43(2H，d)，7.60(1H，d)，8.01(2H，d)。LC-MS:rt2.22min;m/z[M+H]+638.3(計算值638.1)。實施例34^(^60(2，6-二翥孝萄-5-,席基#綴絲-^萄伊賓萄-2^三肅伊萄膽矩-3-執(zhí)伊萄錢伊萄,伊麼；3-二縫鵬將TBTU(0.177g，0.55mmol)和三乙胺(0.056g，0.55mmol)加入85到4-[({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧萄-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸(實施例28)(0.20g，0.34mmo1)在無水乙腈(6ml)中的溶液中并在室溫下攪拌lh。將甘油(1.55g，16.8mmo1)加入到反應混合物中并將該混合物在7(TC攪拌24h。蒸發(fā)該反應混合物，殘余物用氯仿取下，用水洗滌該混合物，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物用制備HPLC純化得到題述化合物，產(chǎn)量0.039g(17%),為無色油狀物。!H-NMR(400顧z，CDC13);5(ppm)1.39(6H，d)，2.53(3H，s)，3.47(1H，sept)，3.63-3.72(1H，m)，3.72-3.80(1H，m)，4.00(2H，s)，4.01-4.10(1H，m)，4.41(2H，t)，5.18(2H，s)，6.71(1H，d)，7.23-7.31(1H，m)，7.32-7.38(2H，m)，7.44(2H，d)，7.60(1H，d),7.99(2H，d)。LC-MS:rt2.11min;m/z[M+H]+668.3(計算值668.2)。實施例354-^6-(^扁(2，6-二粛,萄-5-#厚基#綴絲一畫萄伊真萄-2<三廒伊萄膽裙-3-執(zhí)伊萄錢伊萄畫AW-二秀基彌,伊微步驟1在攪拌下將TBTU(0.177g，0.55mmol)和三乙胺(0.056g，0.55mmol)加入到4-[({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸(實施例28)(0.20g，0.34mmo1)在無水乙腈(6ml)中的溶液中并在室溫下攪拌lh。加入(2，2-二甲基-[1,3]二氧戊環(huán)_4-基)-甲基胺(0.054g，0.41mmo1)并在室溫下將反應混合物攪拌5h。蒸發(fā)除去揮發(fā)物，將殘余物重新溶解在氯仿中，用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物用制備HPLC純化得到0.112g(47。/。)的4-[({6-[3-(2,6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨基)-甲蜀-N-(2,3-二羥基丙萄-苯甲酰胺，為無色油狀物。步驟2在0。C將三氟乙酸(0.03ml)加入到在步驟1中合成的產(chǎn)物(0.112g，0.16mmol)在THF-水(0.742ml)的4:1混合物中的溶液中，并在室溫下將反應混合物攪拌8h，用25%氨水中和并蒸發(fā)。殘余物用水稀釋，用二氯甲烷萃取，萃取液用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)得到題述化合物，產(chǎn)量0.076g(71%)，為無色油狀物。'H-NMR(400麗z，CDC13);5(ppm)1.39(6H，d)，2.53(3H，s)，3,47(1H，sept)，3.54(2H，t)，3.72(2H，t)，3.88(1H，quint)，4.00(2H，s)，5.18(2H，s)，6.66(1H，br.s)，6.71(1H，d)，7.23-7.30(1H，m)，7.32-7.38(2H，m)，7.42(2H，d),7.60(1H，d)，7.73(2H，d)。LC-MS:rtl.99min;m/z[M+H]+667.3(計算值667.2)。實施例36"(^-(^-。，6-二翥孝萄-5-#厚基#凝絲-￥-^伊賓萄-2<三嚴伊萄膽膝3-^)r伊萄賓萄伊萄-iv-p-趕基z;基J孝伊贗嚴o在攪拌下將TBTU(0.088g，0.273mmol)和三乙胺(0.028g，0.273mmol)加入到4-[({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸(實施例28)(0.10g，0.168mmol)在無水乙腈(6ml)的溶液中。在室溫下攪拌1h后，加入2-氨基乙醇(0.012g，0.20mmo1)并將反應混合物在室溫下攪拌12h。將反應混合物用水(6ml)稀釋并在真空下除去乙腈。殘余物用乙酸乙酯萃取，萃取液用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物用制備HPLC純化得到題述化合物，產(chǎn)量0.065g(61%)，為無色油狀物。^-薩R(400MHz，CDC13);5(ppm)1.40(6H，d)，1.80(1H，br.s)，2.53(3H，s)，3.40-3.54(1H，m)，3.62(2H，q)，3.83(2H，t)，4.00(2H，s)，5.19(2H，s)，6.57(1H，s)，6.71(1H，d)，7.23-7.31(1H，m)，7.32-7.38(2H，m)，7.41(2H，d)，7.60(1H，d)，7.73(2H，d)。LC-MS:rt2.05min;m/z[M+H]+637.6(計算值637.2)。87實施例37踏6，-0二肅孝萄-5-辦基一萄伊錢-W三廬伊萄膽約-^)r伊萄翥萄伊萄-iv-卩-r二伊基翥萄2^苯伊鷹嚴在攪拌下將TBTU(0.088g，0.273mmol)和三乙胺(0.028g，0.273mmol)加入到4-[({6-[3-(2，6-二氯-苯基)-5-異丙基-異噁唑-4-基甲氧基]-2-三氟甲基-吡啶-3-基}-甲基-氨基)-甲基]-苯甲酸(實施例28)(0.10g，0.168mmol)在無水乙腈(6ml)中的溶液中。lh后，加入N、NL二甲基-乙烷-l,2-二胺(0.018g，0.20mmol)并繼續(xù)攪拌12h。將反應混合物用水(6ml)稀釋，在真空下除去乙腈，殘余物用乙酸乙酯萃取，萃取液用水和鹽水洗滌。用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物用制備HPLC純化得到題述化合物，產(chǎn)量0.035g(31%)，為無色油狀物。iH-NMR(400MHz，CDC13);S(ppm)1.42(6H，d)，2.32(6H，s)，2.50-2.63(5H，m)，3.42-3.61(3H，m)，4.01(2H，s)，5.21(2H，s)，6.73(1H，d)，6.84(1H，s)，7.23-7.32(1H，m)，7.33-7.40(2H，m)，7.43(2H，d)，7.61(1H，d)，7.77(2H，d)。LC畫MS:rt2.05min;m/z[M+H]+664.6(計算值664.2)。體分橋如下進行配體介導的輔因子肽相互作用的測量以量化結(jié)合到核受體法尼酯X受體(FXR)上的配體人法尼酯X受體(FXR)a配體結(jié)合區(qū)域的準備人FXRa配體結(jié)合區(qū)域(LBD)在大腸桿菌(E.coli)菌株BL21(DE3)中表達為N-末端谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)標記的融合蛋白。將編碼FXR配體結(jié)合區(qū)域的DNA克隆到載體pDEST15(Invitrogen)中。表達由IPTG可誘導的T7啟動子控制。配體結(jié)合區(qū)域的氨基酸邊界是數(shù)據(jù)庫登記項(Databaseentry)NM—005123(RefSeq)的氨基酸187472。FXR-LBD的表達和提純將整夜預培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株在LB—氨芐青霉素培養(yǎng)基中稀釋1:20并在3(TC生長到OD600=0.40.6的光密度。然后通過加入0.5mM的IPTG誘導基因表達。細胞在3(TC、180rpm另外培養(yǎng)6h。通過離心(7000Xg、7分鐘、室溫)收集細胞。將每升原始細胞培養(yǎng)液的細胞重新懸浮在10ml溶菌緩沖液(50mM葡萄糖，pH7.9的50mM三羥甲基氨基甲垸，1mMEDTA和4mg/ml溶菌酶)中并放置在冰上30分鐘。然后將細胞進行超聲處理并用離心(22000xg，30min，4°C)除去細胞殘骸。每10ml上清液加入0.5ml預洗過的谷胱苷肽4B瓊脂糖漿(Qiagen)并將該懸浮液在4。C保持緩慢旋轉(zhuǎn)1h。用離心(2000g，15秒，4°C)使谷胱苷肽4B瓊脂糖小珠成球并在洗滌緩沖液(25mM三羥甲基氨基甲烷，50mMKCl，4mMMgCl2和1MNaCl)中洗滌兩次。每升原始培養(yǎng)液，將該球重新懸浮在3ml洗脫緩沖液(洗脫緩沖液20mM三羥甲基氨基甲烷，60mMKCl，5mMMgCl2和80mM谷胱苷肽，在使用前以粉末形式直接加入)。將該懸浮液在4T:保持旋轉(zhuǎn)15分鐘，使小珠成球并用與第一次相比一半體積的洗脫緩沖液再次洗脫。將洗脫物集中并在含有60mMKC1、5mMMgCl2以及1mM二硫蘇糖醇和10%(v/v)甘油的20mM羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液(pH7.5)透析整夜。蛋白用SDS-Page進行分析。本方法測量假定配體對純化的細菌表達的FXR配體結(jié)合區(qū)域(LBD)和基于SRC-1(LCD2，676700)的殘基676700的合成生物素化的肽之間的相互作用的調(diào)節(jié)能力。所使用的肽序列是其中N-末端被生物素化的B-CPSSHSSLTERHKILHRLLQEGSPS-COOH。所述FXR配體結(jié)合區(qū)域(LBD)在BL-21細胞中使用載體pDEST15表達為帶有GST的融合蛋白。將細胞超聲裂解并將融合蛋白用谷胱苷肽瓊脂糖(Pharmacia)根據(jù)制造商的使用說明進行純化。為了根據(jù)他們對FXR-肽相互作用的影響篩選化合物，使用了PerkinElmerLANCE技術(shù)。這種方法依賴于從給體到連接到感興趣的結(jié)合分子上的受體熒光體的結(jié)合依賴性能量轉(zhuǎn)移(bindingdependentenergytmnsfer)。為了便于處理和減少來自化合物熒光的背景，LANCE技術(shù)使用一般熒光標記，并且在384孔板中，在基于三羥甲基氨基甲垸的緩沖液(pH7.5的20mM三羥甲基氨基甲烷-HCl、60mMKCl、5mMMgCl2、35ng/^lBSA)中以25pl的最終體積進行時間分辨檢測分析，所述基于三羥甲基氨基甲垸的緩沖液含有2060ng/孔融合到GST上的重組表達FXR-LBD、200600nM表示SRC1氨基酸676700的N-末端生物素化的肽、200ng/孔鏈霉抗生物素—xlAPC結(jié)合物(Prozyme)和610ng/孔EuW1024—antiGST(PerkinElmer)。將樣品的DMSO含量保持在1%。在產(chǎn)生分析混合物并稀釋假定FXR調(diào)節(jié)配體后，將被分析物在暗處在室溫下在黑色384孔FIA-板(Greiner)中平衡1小時。用PerkinElmerVICTOR2VTMMultilabelCounter檢測LANCE信號。通過將在665nm和615nm的發(fā)射光之間的比例作圖使結(jié)果可視化。在沒有加入配體的情況下觀察到FXR-肽形成的基線水平。促進復合物形成的配體在時間分辨熒光信號中誘導一個濃度依賴性的增加。預期與單體FXR和FXR-肽復合物兩者的結(jié)合都同樣好的化合物為在信號上沒有變化，而對單體受體優(yōu)先結(jié)合的配體被預期為將在觀察到的信號中誘導一個濃度依賴性的降低。為評價所述化合物的抑制潛力，測量了IC50-值。下面表1的化合物舉例說明了這樣的活性，其中"+"表示1pM<IC50S10而"++"表示IC50S1nM表1實施例號FRET活性實施例1++實施例2++實施例3++實施例4++實施例5+實施例6++實施例7++實施例8+實施例9++實施例10.++實施例11+實施例12++實施例13++實施例14++實施例15+90<table>tableseeoriginaldocumentpage91</column></row><table>測量了本發(fā)明實施例的物理化學和ADME參數(shù)并與下面示出的為現(xiàn)有技術(shù)并且不是本發(fā)明的一部分的FXR-調(diào)節(jié)化合物AD的測量結(jié)果進行了比較。在W。03015771禾口US7,034,046B2中舉例說明的化合物A在WO0037077中舉例說明的化合物B在WO2004048349中主張的化合物C在WO2004048349中主張的化合物D蕭雜藩如下用濁度法或者搖瓶法測量化合物的水溶解性方法A，濁度法在PBS(pH7.4)、5%DMSO中在23'C測量化合物的溶解性。使用NepheloskanAscent(ThermoElectronCorporation)濁度計測量光散射。將所測試的化合物溶解在DMSO中至10mM。在測量之前，將該化合物在孔中用PBS進一步稀釋至最終化合物濃度100、70、50、35、25、17、12和<10|ig/ml。將所述板在室溫下培養(yǎng)24小時以達到平衡并測量散射光。分析有效性:測量乙酰水楊酸的水溶解性以驗證所述分析。發(fā)現(xiàn)在實驗當天為>100嗎/ml，相應于至少2,17mg/ml的文獻報道值(TheMerckindex,第10版)。下述表2的化合物舉例說明了所述溶解度，其中"-"表示溶解度<2pM、"+"表示2S溶解度S100且"++"表示溶解度>100pM。92表2化合物水溶解性pH7.4實施例4++實施例6++實施例7++實施例21++實施例23+化合物A+化合物B—方法B，搖瓶法樣品制備通過混合等體積的含有內(nèi)標(1^M最終溶液)和樣品的乙腈和標定標準溶液(lOOpl)進行樣品和標準溶液的制備。在劇烈震蕩(10秒)后，在20'C將樣品離心(6000g)5分鐘。將無顆粒的上清液的等分部分轉(zhuǎn)入到200pl樣品瓶中，隨后進行LC-MS/MS。分析程序:在含有1%的最終MeOH濃度的pH7.4的10mMPBS緩沖液中，測試濃度為100^M。培養(yǎng)溶液的體積為500^1。根據(jù)各個化合物在MeOH中的溶解性，調(diào)整原液濃度和培養(yǎng)液的濃度。將一式四份的測試溶液在室溫下以300rpm震蕩20小時，隨后在20000g離心30分鐘分離固相。將100pl的無顆粒樣品加入到含有內(nèi)標的100pl乙腈中。通過用HPLC-MS/MS測量PBS緩沖液上清液的濃度來測量化合物的水溶解性。實施例和比較化合物的水溶解性列在下面的表3中。表3化合物水溶解性pH7.4(pM)(±標準偏差)，搖瓶法化合物A72.4(±2.6)化合物B17.7(±2.7)實施例32129(±7.7)尸贏/M滲遂絲分析如下測量人工膜滲透性將所測試的化合物溶解在100%DMSO中至10mM。在5°/。DMSO的PBS(pH7.4)中在23'C測量化合物的滲透性。使用93Safire(Tecan)板讀數(shù)器測量紫外/可見吸收。方法用移液管用PBS稀釋所測試化合物和比較化合物的原液至1.67mM并混合均勻，向受體板上加入5%DMSO的280plPBS，向給體板的膜上加入5pl的在十二烷中的2%L-a-磷脂酰膽堿懸浮液，立即向給體板中加入98pl的PBS并用受體板夾上成三明治型。向受體板中加入42)il所測試的化合物和比較化合物的稀釋液，將該板蓋上，放入暗室中并培養(yǎng)16小時。制備平衡板，向紫外板上加入225pl的3.7%DMSO的PBS和25pl的所測試化合物和比較化合物稀釋液。16小時后，將給體板抽出并從受體板中取250nl轉(zhuǎn)入UV板中。在Safire(Tecan)板讀數(shù)器上從245至450nM以5nM的增幅掃描UV板。滲透性報告為在培養(yǎng)期后在接收器隔室內(nèi)發(fā)現(xiàn)的化合物百分數(shù)(％)。采用這個方法，測量了實施例和比較化合物的PAMPA滲透性，如表4中所示表4化合物PAMPA滲透性實施例450%化合物A32%化合物B7%C卦2滲避雌定Caco-2細胞被廣泛用作預計人藥物吸收性的體外模型。Caco-2細胞系來源于人結(jié)腸直腸癌，并且當培養(yǎng)時，該細胞自發(fā)地分化成單層的極化腸細胞。在實驗前20天將該細胞種在TranswdlTM板上并形成鋪滿的單層。在第20天，將測試化合物加到該膜的頂面上，并在2小時的時間期內(nèi)監(jiān)視穿越該單層的化合物的傳輸。為了研究藥物的流出量，還需要檢測從底外側(cè)隔室到頂部隔室的化合物的傳輸。由下面的公式計算滲透性系數(shù)(Papp):Papp=(dQ/dt)/(C0xA)其中dQ/dt是藥物穿越細胞的滲透速度，C0是在時間零點的給體隔室濃度而A是細胞單層的面積。采用這個方法，測定了實施例和比較化合物的Caco-2滲透性，如表5中所示。94表5化合物Caco-2滲透性A-BPapp[IO-6cm/s]化合物c0.6實施例430實施例634實施例732實施例2446賄歪力辦微使用平衡透析測定化合物與血漿蛋白的結(jié)合程度。一個半透膜將含有蛋白質(zhì)的隔室與無蛋白質(zhì)的隔室區(qū)分開來。將系統(tǒng)在37"C進行平衡。用LC-MS/MS量化在各個隔室中存在的測試化合物。結(jié)合程度報告為未結(jié)合分數(shù)(fu)值，其以&=1-(PC-PF)/PC來計算。PC-在含有蛋白質(zhì)的隔室中的所測試化合物濃度。PF:在無蛋白質(zhì)的隔室中的所測試化合物濃度。除了使用全血漿以外，可以使用兩種其它比例的血漿(在緩沖液中的10%或者50%v/v血漿)來進行血漿蛋白結(jié)合分析。使用下面的方程將在10%或者50%的未結(jié)合分數(shù)轉(zhuǎn)換為在100%的未結(jié)合分數(shù)&腦％=fiii。o/o/(10-9fU腦)fill00%=f^50%/(2-ftl50%)。采用這種方法，測定了實施例和比較化合物的血漿蛋白結(jié)合，如表6中所示表6化合物血漿蛋白結(jié)合[外推％未結(jié)合分數(shù)]化合物c0.01實施例150.03實施例70.5實施例60,05實施例40.03實施例190.3實施例240.09實施例250.0495乂微雜定絲分析如下測量對人肝微粒體的化合物穩(wěn)定性將以0.5mg微粒體蛋白/ml的濃度在反應緩沖液中制備的人肝微粒體懸浮液(1ml)用NADPH-生成系統(tǒng)(10mM6-磷酸葡萄糖，1mMNADP+和1單位/ml酵母6-磷酸葡萄糖脫氫酶)在37"C預培養(yǎng)3分鐘。最終化合物濃度為10pM。煮沸過的微粒體(5分鐘)用作對照。然后在0、5、15、30、45、120分鐘后取樣品(50pl)放入200^乙腈中，以8000xg離心15分鐘以除去蛋白質(zhì)顆粒。用HPLC分析樣品尋找母體化合物。方法研究所有用于代謝穩(wěn)定性實驗的樣品都通過HPLC進行分析。僅對母體化合物進行了解析。數(shù)據(jù)解析剩余母體化合物的百分比定義為在特定點的母體化合物的峰面積與在第一個時間點的峰面積的比乘以100%。通過將剩余母體化合物的百分比的自然對數(shù)對時間作圖并進行線性回歸進行評價，并最終報告為清除率[pl/min/mg蛋白]，其與化合物穩(wěn)定性成反比。采用這種方法，測定了實施例和比較化合物的微粒體穩(wěn)定性。(表7)表7<table>tableseeoriginaldocumentpage96</column></row><table>大嵐微沐穩(wěn)定絲藩如下測定化合物對大鼠肝微粒體的穩(wěn)定性將微粒體與測試化合物在37'C在輔因子NADPH(其引發(fā)該反應)的存在下培養(yǎng)。反應通過加入甲醇終止。離心后，在LC-MS/MS上分析上清液。在45分鐘的時間期內(nèi)監(jiān)視測試化合物的消失。將峰面積比(化合物峰面積/內(nèi)標峰面積)對時間作圖并測定該直線的斜率。最后，用下面方程計算固有清除率CLint:消除速度常數(shù)(k)=-斜率；tl/2(分鐘)=0.693/k;V(pl/mg)=培養(yǎng)液體積(pl)/在培養(yǎng)液中的蛋白(mg);CLint(pl/min/mg蛋白)=V*0.693/11/2。實施例和比較化合物的化合物清除率列在下面表8中。表8化合物大鼠肝微粒體清除率[pl/min/mg蛋白]實施例745實施例15149實施例1957實施例25169實施例2655化合物B310v、腐微條定粉叛進行體外分析來評價所測試化合物在源自小鼠的肝微粒中的代謝穩(wěn)定性。測試化合物的工作標準溶液的準備根據(jù)各個化合物在乙腈或者乙腈/水中的溶解性，通過適當稀釋相應原液為每個標定濃度制備了工作溶液。通過混合196pi標準基質(zhì)和4pl相應的工作溶液制備標定標準溶液。所述標準基質(zhì)含有在磷酸鹽緩沖液(100mMpH7.4)中的0.15mg/ml的微粒體蛋白，最終的標準溶液含有2%乙腈。用乙酸乙酯萃取樣品和標準溶液，通過將含有內(nèi)標(0.1pM)的600pl乙酸乙酯加入200pl樣品和標定標準溶液中進行化合物的分離。在劇烈震蕩(10分鐘)和離心(5000g)后，通過在丙酮/干冰浴中冷凍分離水溶液相并使用真空離心將有機相蒸干。將樣品在200乙腈/水混合物(l:lv/v)中復原并隨后進行LC-MS/MS。培養(yǎng)溶液(180^1)由90pl在pH7.4、100mM的磷酸鹽緩沖液中的0.33mg/ml蛋白的微粒體懸浮液和90(ilNADP-再生系統(tǒng)組成。通過將20pl測試化合物(在20%乙腈中)加入到預培養(yǎng)過的微粒體/緩沖液混合物中在37'C引發(fā)反應。在0、5、10和30分鐘后，從培養(yǎng)液中取出200樣品并如上所述進行乙酸乙酯萃取處理。平行進行使用沒有再生系統(tǒng)的煮沸過的微粒體(沸水浴，25分鐘)的負對照試驗。在樣品中的化合物量表示為與時間點零(=100%)相比剩余化合物的百分比。將這些百分比對相應時間點作圖。使用母體消失速度和下面公式(1)和(2)測定固有清除率(CLint)和半衰期(t1/2)的估計值(1)CLint=(—k)xVxfo;(2)t1/2=ln2/-k;其中CLin「固有清除率[pl/min/mg蛋白]，tl/2=半衰期[分鐘]，]^=從log[測試化合物]對時間的曲線的線性回歸中得到97的斜率1/min]，V=6666.7,fU=在血液中的未結(jié)合分數(shù)。采用這種方法給出實施例和比較化合物的微粒體穩(wěn)定性，如在下表9中所列出的表9化合物t1/2(分鐘)CLint(nl/min/mg蛋白)化合物A22207實施例2838120乂餅潘虜譜定粉橋如下測定化合物對大鼠肝細胞的穩(wěn)定性將肝細胞與測試化合物在37°C培養(yǎng)。在適當時間點除去樣品，通過加入甲醇終止反應。離心后，在LC-MS/MS上分析上清液。在60分鐘的時間期內(nèi)監(jiān)到測試化合物的消失。將峰面積比(化合物峰面積/內(nèi)標峰面積)對時間作圖并測定該直線的斜率。最后，用下面方程計算半衰期tv2和固有清除率CLint:消除速度常數(shù)(k)=-斜率；t1/2(分鐘)=0.693/k;V(,6細胞)=培養(yǎng)液體積(piy細胞數(shù)目(*106);CLint(Hl/min/l(^細胞蛋白)=V*0.693/t1/2。采用這種方法，測定了實施例和比較化合物的微粒體肝細胞穩(wěn)定性，如表10中所示。表10化合物大鼠肝細胞清除率[pl/min/106細胞]化合物B45.0實施例70.7實施例47.1實施例252.5^參微動力學參資腿定使用兩種不同的動物模型C57/B1/6J和C57/BLKS/J(mLeprdb/db)小鼠產(chǎn)生關(guān)于測試化合物吸收的速度和程度的信息。通過管飼以10mg/kg將每種化合物經(jīng)口施用于雄性8周大的C57BL/6小鼠，并用LC-MS/MS測定測試化合物的血漿濃度(表ll)。另外，通過管飼以25mg/kg將每種化合物經(jīng)口施用于雄性16周大的C57/BLKS/J(mLeprdb/db)小鼠，并在管飼后120分鐘用98LC-MS/MS測定測試化合物的血漿濃度(表12)。通過將各個測試化合物在載體(在pH7.0的20mM磷酸鹽緩沖液中的30%HPBCD(羥丙基-P-環(huán)糊精)(v/w))中稀釋制備20mg/ml的各個測試化合物的溶液。將這些溶液在室溫下攪拌過夜并用10分鐘加熱到6(TC，實現(xiàn)完全溶解。通過將所述溶液口服給小鼠進行施用，施加體積為10ml/kg。對每一個時間點使用5只小鼠。通過對每一個時間點處死小鼠隨后進行心臟穿刺得到血樣。在收集過程中用Li-肝素對血樣進行處理并貯存在冰上直到以645g離心(5min，4°C)。收集血漿并保存在-20。C直到進行分析。向50pl的小鼠血漿樣品中，加入含有內(nèi)標的6pl乙腈。將樣品劇烈震蕩并在6000g和2(TC離心10分鐘。將無微粒的上清液等分轉(zhuǎn)移至200pl取樣小瓶中，隨后進行LC-MS/MS以量化。在各個時間點的血漿濃度在下面的表11和表12中給出。表ll<table>tableseeoriginaldocumentpage99</column></row><table>權(quán)利要求1、一種通式(I)的化合物和其對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑化物和藥物學上可接受的鹽，其中，R1和R2各自獨立地選自氫、氟、氰基、硝基、疊氮基、NR5R6、OR5、SR5、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基和C3～C6環(huán)烷基；或者R1和R2一起為＝O或＝S；或者R1和R2可以一起形成各自可為飽和或者不飽和的3～6元碳環(huán)或者雜環(huán)，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、碳環(huán)或者雜環(huán)為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；R5和R6各自獨立地選自氫、C1～C6烷基和C3～C6環(huán)烷基；或者R5和R6可以一起形成3～6元的飽和雜環(huán)，其中所述烷基、環(huán)烷基和雜環(huán)為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；X為或或或在各通式(X1)、(X2)、(X4)中，R3為氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、-NR19R20、NR19S(O)mR20、NR19C(O)OR20、NR19C(O)R20、NR19C(O)NR19R20、OR19、OC(O)R19、S(O)iR19、SO2NR19C(O)R20、S(O)mNR19R20、C(O)R19、C(O)OR20、C(O)NR19R20、C(NR19)NR19R20，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；在各(X3)中，R3為氫、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、SO2R19、C(O)R19、C(O)OR19、C(O)NR19R20，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；R19和R20各自獨立地選自氫、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基和C3～C6環(huán)烷基；或者R19和R20一起可以形成3～7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，其中所述C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；R4獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR15R16、NR15SO2R16、NR15C(O)OR16、NR15C(O)R16、NR15C(O)NR15R16、NR15C(NCN)NR15R16、OR15、OC(O)R15、S(O)iR15、SO2NR15C(O)R16、S(O)mNR15R16、SC(O)R15、C(O)R15、C(O)OR15、C(O)NR15R16、C(O)NHOR15、C(O)SR15和C(NR15)NR15R16，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；并且進而兩個取代基R4可以與和它們連接的原子一起形成4～7元碳環(huán)、芳基、雜芳基或者雜環(huán)，它們各自為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；R15和R16各自獨立地選自氫、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基和C3～C6環(huán)烷基；或者R15和R16一起可以形成3～7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，其中所述烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；R11獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、＝O、＝S、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR12R13、NR12S(O)mR13、NR12C(O)OR13、NR12C(O)R13、NR12C(O)NR12R13、NR12C(NCN)NR12R13、＝NOR12、-OR12、OC(O)R12、S(O)iR12、SO2NR12C(O)R13、S(O)mNR12R13、SC(O)R12、C(O)R12、C(O)OR12、C(O)SR12、C(O)NR12R13、C(O)NOR12和C(NR12)NR12R13；R12和R13各自獨立地選自氫、C1～C6烷基和C3～C6環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基可以是未取代的或者被1～5個氟和/或選自O(shè)H、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、＝O、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的一個或兩個取代基取代；或者R12和R13與和它們連接的原子一起形成4～6元碳環(huán)、雜芳基或者雜環(huán)，它們各自為未取代的或者被1～5個氟和/或選自O(shè)H、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、＝O、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的一個或兩個取代基取代；Q為O或者NR7；R7為氫、C1～C3烷基或者C3～C5環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1～5個氟原子取代；T為-O-、-S-、-N(R14)-、CH2或者CF2；R14為氫、C1～C3烷基或者C3～C5環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1～5個氟原子取代；Y選自中；R8獨立地選自氫、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、NR12R13、NR12S(O)mR13、NR12C(O)OR13、NR12C(O)R13、NR12C(O)NR12R13、OR12、OC(O)R12、S(O)iR12、SO2NR12C(O)R13、S(O)mNR12R13、C(O)R12、C(O)OR12、C(O)NR12R13和C(NR12)NR12R13，其中各個烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或者雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；L為鍵、-C(O)N(R10)-、-S(O)mN(R10)-、-G-N(R10)-、-N(R10)C(O)-、-N(R10)S(O)m-、-N(R10)-G-、-G-S-、-G-O-、-S-G-或者O-G；或者L為或者R10為氫、C1～C3烷基或者C3～C5環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被1～5個氟原子取代；G為亞甲基或者亞乙基，其為未取代的或者被1～5個氟原子取代；Z為苯基-A-R9、吡啶基-A-R9、嘧啶基-A-R9或者噠嗪基-A-R9，其中苯基、吡啶基、嘧啶基或者噠嗪基為未取代的或者被選自鹵素、C1～C4烷基、C3～C5環(huán)烷基、C2～C4鏈烯基、C2～C4炔基、氰基、OH、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的1～3個基團取代；A為鍵、CH2、CHCH3、C(CH3)2或者CF2；R9為氫、COOR17、CONR17R18、C(O)NHSO2R17、SO2NHC(O)R17、S(O)mR17、C(NR17)NR17R18或者經(jīng)由C原子連接到A的四唑；R17和R18各自獨立地選自氫、C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C2～C6炔基和C3～C6環(huán)烷基；或者R17和R18一起可以形成3～7元雜環(huán)或者雜芳環(huán)，其中所述C1～C6烷基、C2～C6鏈烯基、C3～C6環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基為未取代的或者被1～5個取代基R11取代；a為0或者1；b為1、2或者3；c為1或者2；i為0、1或者2；和m為1或者2。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R1和R2獨立地選自氫、氟和d~6垸基，其中該垸基為未取代的或者被15個取代基RU取代；或者Ri和W—起為0或者-S。3、根據(jù)權(quán)利要求1或者2所述的化合物，其中，Q為O或者NH。4、根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的化合物，其中，在各通式(x1)、(x2)和(x4)中，W為氫、QC6垸基、NR^R^或者C3C6環(huán)垸基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被15個取代基R11取代；以及在各通式(X3)中，W為氫、QC6烷基或者C3C6環(huán)烷基，其中各個烷基或者環(huán)烷基為未取代的或者被15個取代基RH取代。5、根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的化合物，其中，114為氫、鹵素、dQ垸基、0-dC6烷基或者CN，其中各個烷基為未取代的或者被15個取代基R11取代。6、根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的化合物，其中，T為O、CH2或者NR14。7、根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的化合物，其中，Y選自通式(Y1)、(Y2)和(Y3)。8、根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的化合物，其中，W為氫、鹵素、dQ垸基或者0-dC3垸基，其中各個垸基為未取代的或者被15個取代基RH取代。9、根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的化合物，其中，L為鍵、-C(0)N(R1。)-、畫S(0)jN(R1。)-、-G誦N(R^-或者-N(R,-G;R^為氫或者QQ烷基；和i為2。10、根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的化合物，其中，Z為苯基-A-R9，其中苯基為未取代的或者被選自鹵素、氰基、QC4烷基、OH、OCH3、OCH2F、OCHF2、OCF3、SCF3、NH2、NHCH3和N(CH3)2中的13基團取代。11、根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的化合物，其中，R9為COOR17或者CONR17R18。12、作為藥物的根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的化合物。13、一種藥物組合物，其含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的化合物和至少一種藥物學上可接受的賦形劑和/或載體。14、根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的化合物用于制備用于預防和/或治療由FXR介導的疾病的藥物的用途。15、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于慢性肝內(nèi)或者一些形式的肝外膽汁淤積病癥，或者由慢性膽汁淤積病癥或者急性肝內(nèi)膽汁淤積病癥導致的肝纖維化。16、根據(jù)權(quán)利要求15所述的用途，其中，所述慢性肝內(nèi)膽汁淤積病癥為原發(fā)性膽汁性肝硬變(PBC)、原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)、進行性家族性膽汁淤積(PFIC)、乙醇誘導的肝硬化和相關(guān)的膽汁淤積，以及所述肝纖維化為雌激素或者藥物誘發(fā)的膽汁淤積。17、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于由不正常的膽汁組成導致的梗阻性或者慢性炎性紊亂。18、根據(jù)權(quán)利要求17所述的用途，其中，所述梗阻性或者慢性炎性紊亂是膽結(jié)石(膽固醇膽結(jié)石)。19、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于減少了對飲食中脂肪和脂溶性飲食維生素的吸收的胃腸道病癥。20、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于炎性腸道疾病。21、根據(jù)權(quán)利要求20所述的用途，其中，所述炎性腸道疾病為克羅恩病或者潰瘍性結(jié)腸炎。22、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于脂質(zhì)和脂蛋白紊亂。23、根據(jù)權(quán)利要求22所述的用途，其中，所述脂質(zhì)和脂蛋白紊亂為作為臨床表現(xiàn)癥狀的高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥和動脈粥樣硬化。24、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于II型糖尿病。25、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于I型和II型糖尿病的臨床并發(fā)癥。26、根據(jù)權(quán)利要求25所述的用途，其中，所述I型和II型糖尿病的臨床并發(fā)癥為糖尿病性腎病、糖尿病性視網(wǎng)膜病、糖尿病性神經(jīng)病變、周圍組織動脈阻塞性疾病(PAOD)。27、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于由于增強的脂質(zhì)和特別是甘油三酸脂的累積和隨后促纖維化通道的激活導致的器官的慢性肥胖和纖維化病變而產(chǎn)生的病癥和疾病。28、根據(jù)權(quán)利要求27所述的用途，其中，所述病癥和疾病為在肝臟中的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和慢性膽汁淤積病癥、在腎臟中的腎小球硬化癥和糖尿病性腎病、在眼中的黃斑變性和糖尿病性視網(wǎng)膜病以及在腦中的神經(jīng)變性疾病或者在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的糖尿病性神經(jīng)病變。29、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于肥胖癥和代謝性綜合征(血脂異常、糖尿病和不正常的高體重指標的組合病癥)。30、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于作為慢性梗阻性的動脈粥樣硬化的最終結(jié)果而發(fā)作的急性心肌梗塞、急性中風或者血栓形成。31、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于由細胞內(nèi)細菌或者寄生原生動物導致的持續(xù)感染。32、根據(jù)權(quán)利要求31所述的用途，其中，所述細菌或者寄生原生動物選自分枝桿菌屬(肺結(jié)核或者麻風病的治療)、單核細胞增生李斯特菌(李氏桿菌病的治療)、利什曼原蟲屬(利什曼蟲病)、錐蟲屬(美洲錐蟲病、錐蟲病、非洲錐蟲病)。33、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于非惡性過增生紊亂。34、根據(jù)權(quán)利要求33所述的用途，其中，所述非惡性過增生紊亂為在充氣囊容器擴張和支架應用后由于增加的血管平滑肌細胞(VSMC)的增殖導致的增加的新生內(nèi)膜形成、前列腺增生(BPH)或者其它形式的瘢痕組織形成和纖維化。35、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于惡性增殖過度紊亂。36、根據(jù)權(quán)利要求35所述的用途，其中，所述惡性增殖過度紊亂為癌癥。37、根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，用于肝臟脂肪變性和相關(guān)癥，與乙醇誘導的肝硬化或者病毒負荷形式的肝炎相關(guān)的膽汁淤積和纖維化效果。38、根據(jù)權(quán)利要求37所述的用途，其中所述肝臟脂肪變性相關(guān)癥為非酒精性脂肪性肝炎("NASH")。39、一種制備根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的通式(I)的化合物的方法，其包括如下步驟將通式(xm)的化合物與通式(xiv)的化合物反應，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中，z與在權(quán)利要求i中的限定相同；以及Lc為卣素、NH2、N(R1())H、C0C1、COF、CHO、CH2OH、COOH、C(0)NHNH2、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、S02C1、S03H、G-NH2、G-N(R10)H、OH、G-SH、G畫OH、G-鹵素、B(OMe)2、B(OH)2、BF/、4,4，5，5-四甲基-1,3,2-二氧雜環(huán)硼戊垸-2-基或者乙炔基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(XIV)其中，Y、T、X、Ri和I^與在權(quán)利要求l中的限定相同，禾口LB為鹵素、NH2、N(R10)H、C0C1、COF、CHO、CH2OH、COOH、C(0)NHNH2、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、S02C1、S03H、G-NH2、G-N(R10)H、OH、G國SH、G-OH、G-卣素、B(OMe)2、B(OH)2、BF3—、4，4，5,5-四甲基-1,3，2-二氧雜環(huán)硼戊烷-2-基或者乙炔基。40、根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，其中，Z、L和Y與在權(quán)利要求1中的限定相同，T為O，W和R2為氫，和X為X1，且Q為O和a為O。41、根據(jù)權(quán)利要求39或者40所述的方法，其包括如下另外的步驟將通式(IXa)或者通式(IXb)的化合物分別與通式(IVa)或者(IVb)的化合物反應，以制得通式(XII)的化合物，通式(XII)的化合物進一步通過用LB部分代替LA部分而反應生成通式(XIV)的化合物，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(IXa)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(lXb)其中，LA為卣素、硝基、疊氮基、CN、CF3、C(O)O-烷基、C(O)O-芳基、C(O)O-雜芳基、SH、SMe、S03H、G-NH2、G-N(R1G)H、OH、O-烷基、G-SH、G-OH、G-鹵素、B(OH)2、B(0垸基)2或者乙炔基；EN-H為OH、SH、NH2、N(R")H、NH(CO)O-烷基、NH(CO)O-芳基、NH(SO)2芳基、NH(SO)2烷基、CH3或者CF2H;Et為鹵素、OH、OC(O)烷基、OC(O)芳基、O-芳基、O-五氟苯基、O-磺?；榛?、O-磺?；蓟-琥珀酰亞胺基、O-苯并三唑基、硝基、疊氮基、S-烷基、S02垸基、S02芳基、SC(O)烷基、SC(O)芳基或者氰基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中，R1、W和X與在權(quán)利要求1中的限定相同，禾口El和E『H如上所限定；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>A其中，Y、T、R1、le和X與在權(quán)利要求1中的限定相同,42、根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中，Y、R4、b和W與在權(quán)利要求l中的限定相同，T為O，Ri和RS為氫，和X為X1，同時Q為O且a為0。全文摘要本發(fā)明涉及與NR1H4受體(FXR)結(jié)合并充當NR1H4受體(FXR)的激動劑或者部分激動劑的化合物。本發(fā)明進一步涉及該化合物用于制備藥劑的用途，所述藥劑通過用該化合物結(jié)合所述核受體來治療疾病和/或病癥，并且涉及用于合成所述化合物的方法。文檔編號A61K31/4427GK101511813SQ200780032392公開日2009年8月19日申請日期2007年8月29日優(yōu)先權(quán)日2006年8月29日發(fā)明者烏爾里希·多伊施勒,烏爾里?！ぐ⒇悹?克洛·克倫默澤,安德烈亞斯·舒爾茨申請人:菲尼克斯藥品股份公司