專利名稱：：用于抑制粘連的組合物的制作方法用于抑制粘連的組合物相關(guān)申請的交叉參考本申請要求2006年2月1日提交的韓國專利申請10-2006-0009849的優(yōu)先權(quán)和權(quán)益，該申請引入本文供所有目的的參考，如同本文完整闡述一樣。
背景技術(shù)：
：(a)發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用于抑制粘連的組合物，其包含根據(jù)溫度而顯示溶膠-凝膠相變的水溶性和溫度敏感聚合物，其中聚合物溶液由于體溫而經(jīng)歷從溶膠狀態(tài)至凝膠狀態(tài)的相變，并因此穩(wěn)定地涂抹在組織內(nèi)，從而其起到抑制粘連的屏障的作用，并且隨著時間流逝，其降解成低分子量表面活性劑和可生物降解的單分子物質(zhì)，其中降解產(chǎn)物表現(xiàn)出二次粘連抑制效應(yīng)。(b)相關(guān)技術(shù)的描述粘連指這樣的現(xiàn)象，在炎癥、劃傷、擦傷、手術(shù)切口等的傷口恢復(fù)過程中，當(dāng)纖維組織過量產(chǎn)生或者血液滲出并凝結(jié)時，應(yīng)該彼此分開的周圍器官或組織粘連到一起。這種粘連引起嚴(yán)重的問題，尤其是在術(shù)后。粘連一般可由所有類型的手術(shù)所致，并且由于粘連，鄰近手術(shù)區(qū)域的器官或組織在術(shù)后恢復(fù)過程中彼此粘連并因此可能引發(fā)嚴(yán)重的臨床后遺癥。粘連可引起的后遺癥的種類是非常多樣的。根據(jù)美國的統(tǒng)計數(shù)字，已知由術(shù)后粘連產(chǎn)生的主要癥狀包括腸梗阻(49%至74°/。)、不育(15%至20%)、慢性骨盆癥狀(20%至50。/。)和后續(xù)手術(shù)中的腸穿孔(enterobrosia)(19%)等。作為用于抑制粘連的方法，可以提及的方法是遵循在手術(shù)過程中應(yīng)該注意的事項，例如使手術(shù)過程中的損傷最小化、在使用前洗掉手術(shù)手套表面上的淀粉、盡可能頻繁地洗手、使手術(shù)器械的使用頻率最小化、使手術(shù)操作最少化以使異物反應(yīng)最小化等，但這些行為事實上并不能完全防止術(shù)后粘連。作為基于稱作誘發(fā)粘連機理的抑制粘連的方法，可能的方法是為了防止纖維蛋白的形成而激活組織纖溶酶原激活物，此外，還有通過使用禾爾為另一種機理的屏障，在組織傷口恢復(fù)過程中形成類似于表面活性劑的物理屏障來防止在鄰近組織之間形成粘連的方法。在要利用這些屏障的情7兄下，在傷口恢復(fù)后，所用的屏障必須經(jīng)一定的時間通過降解或吸收而被除去，并且要求用于屏障本身的材料及其降解產(chǎn)物對人體無害。此外，從炎'性反應(yīng)以及通過使用抗炎藥和甾類抑制粘連來使粘連程度最小化的努力的角度，已用過的方法是剝離其上形成有粘連的表面。屏障要有效地抑制粘連，就要求它們在傷口恢復(fù)過程中起到組織或器官的物理保護壁的作用，同時還要求它們防止鄰近組織或器官之間形成粘連而不對傷口的恢復(fù)產(chǎn)生不利影響。而且，在治療后的一定的時間后，它們必須易于通過降解或吸收而被消除，并且用于粘連屏障本身的材料及其降解產(chǎn)生應(yīng)該對人體無害。已有作為保護壁的粘連屏障可以按它們的形狀分成兩類一類是溶液型，包括凝膠型，而另一類是膜型，包括薄膜、無紡布、海綿等等。已知用作粘連抑制劑材料的是包括泊洛沙姆的聚乙二醇、聚乙二醇、多糖如纖維素、硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸、聚乳酸(PLA)、膠原、纖維蛋白等等。到目前為止，基于使用上述材料的市售產(chǎn)品是氧化再生纖維素、羧甲基纖維素、(硫酸)葡聚糖、透明質(zhì)酸等(它們是多糖)和聚乙二醇、泊洛沙姆等(它們是合成聚合物)。在用于抑制粘連的材料中，已知纖維素和葡聚糖在插入活體中時可能產(chǎn)生異物反應(yīng)，因為它們盡管是天然聚合物，卻不是構(gòu)成活體的成分。此外，由于在活體內(nèi)沒有以這些材料為目標(biāo)的降解酶，因此它們的體內(nèi)降解是不可能的，已知要進行額外的處理如氧化或^C解以將它們在活體內(nèi)轉(zhuǎn)化成可吸收的形式。Balazs等的美國專利4,141,973公開了透明質(zhì)酸作為主要成分用于抑制粘連的用途。然而，由于透明質(zhì)酸在活體內(nèi)易于降解，相對易溶并且在活體內(nèi)的半衰期相對短暫(為1至3天)，因此它不能在體內(nèi)保留抑制粘連所必需的時間，作為粘連抑制劑具有嚴(yán)重局限。Bromberg等在美國專利5,939,485中描述，已開發(fā)了能響應(yīng)環(huán)境刺激如pH、溫度和離子強度的聚合物網(wǎng)絡(luò)。他們使用乙烯基聚合物、丙烯基聚合物和聚氨酯(它們是在活體內(nèi)不可生物降解的聚合物)作為所述聚合物網(wǎng)絡(luò)的結(jié)構(gòu)成分，并使用聚氧化烯聚合物和纖維素聚合物作為刺激敏感'性聚合物。然而，如果如上面例示的不可生物降解的聚合物被用作結(jié)構(gòu)成分，它們可能產(chǎn)生異物反應(yīng)，因為它們在活體內(nèi)不可降解并且它們具有低生物相容性。Flore等的美國專利6,280,745Bl描述了用于遞藥以防止粘連的組合物以及使用其防止術(shù)后粘連的方法。用于遞藥的組合物包含至少一種組成聚合物、改性聚合物和助表面活性劑，并還可以包含選自包括抗生素、抗炎藥等在內(nèi)的幾種藥物的一種藥物。在該專利文件中，將聚氧化烯嵌段共聚物例示為組成聚合物，將纖維素醚、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸酯例示為改性聚合物，并將脂肪酸皂如油酸鈉、月桂酸鈉、癸酸鈉和辛酸鈉例示為表面活性劑。在改性聚合物中，由于羧甲基纖維素鈉不是源自活體的物質(zhì)，而是通過處理獲自植物的纖維素制得的，因此已知它能夠在活體內(nèi)產(chǎn)生異物反應(yīng)，并且同樣，其它改性聚合物(包括聚丙烯酸酯類)也不是生物來、源的物質(zhì)，具有低生物相容性，所以它們可能產(chǎn)生異物反應(yīng)。作為用作粘連抑制劑的另一種物質(zhì)，可以提及泊洛沙姆。泊洛沙姆是由BASFCompany制造的聚合物，已知其為在低i^下以溶液狀態(tài)存在，而隨著溫度升高會膠凝的熱敏物質(zhì)(參見美國專利4,188,373、美國專利4,478,822和美國專利4,474,751)。Bromberg等的美國專利5,939,485描述，這些泊洛沙姆是通過pH、溫度、離子強度刺激能夠可逆膠凝的物質(zhì)。Jt匕外，Steinleitoer等公開了對包含泊洛沙姆作為基礎(chǔ)成分的流體凝膠的抗^^占連效能的評價[Fertilityandsterility57(2):305(1992)]。公知的泊洛沙姆具有聚環(huán)氧乙垸(PEO)-聚環(huán)氧丙垸(PPO)-聚環(huán)氧乙垸(PEO)的結(jié)構(gòu)。例如，泊洛沙姆407的膠凝溫度為25。C左右，并且其膠凝受諸如泊洛沙姆級別、濃度、pH和添加劑的因素的影響。此外，泊洛沙姆407的熔化溫度為56°C，而其比重為1.05。然而，由于這種泊洛沙姆在水溶液中形成聚合物凝膠，但易溶于水，所以它的缺點是不能在一定區(qū)域內(nèi)將其凝膠狀態(tài)維持足夠的時間以抑制粘連。Ron等的美國專利6，316，011Bl描述了熱可逆的組合物，其在末端部分具有用于修飾的聚合物或低聚物。所述熱可逆的組合物包括PPG-PEG-PPG嵌段共聚物，并使用生物相容的聚乙烯基羧酸作為位于末端的用于修飾的聚合物?？梢詫⒖捎糜谝种普尺B的幾種藥物添加并混合到所述組合物中。在該專利文件中，生物粘附聚乙烯基羧酸包括丙烯酸和甲基丙烯酸，它們具有低的生物降解性和生物相容性，因此可能在活體內(nèi)誘導(dǎo)異物反應(yīng)。到目前為止，已認真開展了關(guān)于使用各種材料的粘連抑制劑的研究，其中一些成功地進入了市場，但當(dāng)前的產(chǎn)品至多是EthiconCompany的Interceed和GenzymeCompany的Sepamfilm。然而，已報道，當(dāng)施用到內(nèi)部器官時，這些薄膜形式的粘連抑制劑不充分粘附到活體表面上，并且即使它們成功地附著，由于器官的移動，它們也不定位在其原始位置上，并且它們本身被組織識別為外來物質(zhì)，因此彼此聚結(jié)，因而顯示出令人不滿意的粘連抑制效應(yīng)。不過，到目前為止還沒有開發(fā)出能夠取代它們的替代材料。事實上，這些薄膜形式的產(chǎn)品只用于有限的領(lǐng)域如產(chǎn)科和婦科手術(shù)或脊柱手術(shù)。為了克服這些問題，已開發(fā)了包含羧甲基纖維素、葡聚糖70和泊洛沙姆407(由PEO-PPO-PEO組成)的凝膠形式的Flowgel(Mediventures)、基于聚乳酸的Adcon-L(Gliatech)、基于透明質(zhì)酸的Intergel(LifecoreBiomedical)、使用天然聚合物的AdbA(Amitie)和基于聚環(huán)氧乙烷的噴霧劑形式的Spraygel(ConfluentSurgical),并且其中一些已經(jīng)被投放市場上。傷口恢復(fù)所需的時間隨傷口程度不同而變，但通常為7天左右。然而，在上述所開發(fā)的凝膠形式的粘連抑制劑的情況下，由于它們在傷口恢復(fù)之前熔化并被棄去，也就是說它們不在受傷組織內(nèi)將其形狀維持足夠的時間，它們不能充分發(fā)揮粘連抑制效應(yīng)，而且它們的成分還引起異物反應(yīng)，使得難以將它們投入市場。如果開發(fā)了如下凝膠形式的粘連抑制劑，所述粘連抑制劑彌補了薄膜形式的粘連抑制劑的缺點并具有更理想的條件，則可以將目前以極有限的方式用于手術(shù)操作領(lǐng)域的粘連抑制劑的應(yīng)用領(lǐng)域擴展到薄膜形式的粘連抑制劑不能應(yīng)用的領(lǐng)域，而且預(yù)期它可以用于至今不能應(yīng)用粘連抑制劑的手術(shù)領(lǐng)域。此外，考慮到旨在最大程度地減少感染的手術(shù)方式的轉(zhuǎn)變趨勢，預(yù)期凝膠形式的粘連抑制劑至少可以使手術(shù)易于進行并減少與感染相關(guān)的危險，同時與基于薄膜形式的粘連抑制劑的局部治療相比，它們?nèi)跃哂袃?yōu)越的粘連抑制效應(yīng)。因此，可以說到目前為止，還沒有開發(fā)出具有理想條件和成功效應(yīng)的粘連抑制劑，并且急切需要開發(fā)這種理想和有效的粘連抑制劑。發(fā)明概述為了解決上述問題并符合要求，本發(fā)明的目的是提供凝膠形式的茅占連抑制劑，其包含具有生物相容性的溫度敏感的聚合物，所述聚合物可以在體內(nèi)被降解、吸收和排泄，并能夠由于體溫而膠凝，更具體地，本發(fā)明的目的是提供凝膠形式的理想的粘連抑制劑，其可以在合意的身體位置內(nèi)安全地保留一定的時間，當(dāng)其在體內(nèi)降解時，其降解產(chǎn)物能夠容易地被吸收和排泄，其中由降解過程產(chǎn)生的物質(zhì)起到表面活性劑的作用，賦予粘連抑制以協(xié)同效應(yīng)，并且所述粘連抑制劑可以長時間地發(fā)揮粘連抑制效應(yīng)。附圖簡述圖l(a)是顯示泊洛沙姆407的'H-NMR譜的圖，而圖l(b)是顯示制備例1的經(jīng)琥珀酰基連接的多嵌段共聚物的^-NMR譜的圖。圖2是用TMS-Cl/吡啶處理后的泊洛沙姆407的^-NMR譜。圖3是用琥珀酸取代泊洛沙姆407的末端并然后用TMS-Cl/吡啶處理后的泊洛沙姆407的^-NMR譜。圖4是用TMS-Cl/吡啶處理后的制備例1的多嵌段共聚物的'H-NMR譜。圖5是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定泊洛沙姆407的粘度的結(jié)果的圖。圖6是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定在制備例1中制備的MBP-36的粘度的結(jié)果的圖。圖7是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定在制備例5中制備的MBP-29的粘度的結(jié)果的圖。圖8是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定在制備例6中制備的MBP-22的粘度的結(jié)果的圖。圖9是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定在制備例7中制備的MBP-42的粘度的結(jié)果的圖。圖10是顯示用布魯克菲爾德粘度計測定MBP-77的粘度隨著混合溶劑中乙醇濃度的變化的結(jié)果的圖。圖11是顯示在術(shù)后未給予治療的對照組在術(shù)后7天的粘連的照片。圖12是顯示在用3重量％的量的本發(fā)明制備例1中制備的MBP-36治療的情況下，術(shù)后7天的粘連的照片。圖13是顯示在用5重量％的量的本發(fā)明制備例1中制備的MBP-36治療的情況下，術(shù)后7天的粘連的照片。圖14是顯示在用7重量％的量的本發(fā)明制備例1中制備的MBP-36治療的情況下，術(shù)后7天的粘連的照片。圖15是顯示在用本發(fā)明制備例1中制備的MBP-36的溶液治療的情況下的粘連的照片，所述溶液中添加有羧甲基纖維素。圖16是顯示在用1重量％的量的本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53治療的情況下的粘連的照片。圖17是顯示在用3重量％的量的本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53治療的情況下的粘連的照片。圖18是顯示在用5重量°/。的量的本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53治療的情況下的粘連的照片。圖19是顯示在用7重量％的量的本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53治療的情況下的粘連的照片。圖20是顯示在用10重量％的量的本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53治療的情況下的粘連的照片。圖21是顯示在用泊洛沙姆F-407溶液治療的情況下的粘連的照片。圖22是顯示用粘連抑制劑治療的動物在術(shù)后7天的體重變化的圖，所述粘連抑制劑含有在本發(fā)明制備例1中制備的MBP-36。圖23是顯示用粘連抑制劑治療的動物在術(shù)后7天的體重變化的圖，所述粘連抑制劑含有在本發(fā)明制備例4中制備的MBP-53。優(yōu)選實施方案詳述隨著通過參考下面的詳述更好地理解本發(fā)明，對本發(fā)明的完整認i只及其許多附屬優(yōu)點會是清楚的。本發(fā)明涉及用于抑制粘連的組合物，其包含根據(jù)溫度而顯示溶膠;疑膠相變的水溶性和溫度敏感的聚合物，其中所述聚合物由于體溫而經(jīng)歷從溶膠狀態(tài)至凝膠狀態(tài)的相變，并因此穩(wěn)定地涂抹在組織內(nèi)，從而其起到抑制粘連的屏障的作用，并且隨著時間流逝，其降解成低分子量表面活性劑和可生物降解的單分子物質(zhì)，其中降解產(chǎn)物表現(xiàn)出二次粘連抑制效應(yīng)。所述表面活性劑可以是構(gòu)成本發(fā)明聚合物的低分子量單元聚合物，而所述單分子物質(zhì)可以是連接所述低分子量單元聚合物的連接基。所述聚合物的含量優(yōu)選為總組合物的0.1-40重量％，且所述用于抑制粘連的組合物優(yōu)選以凝膠類型存在。理想的粘連抑制劑具有下列條件1)它應(yīng)該對傷口附近的組織或器官具有粘連抑制效應(yīng)。2)它應(yīng)該是水溶性的。3)它應(yīng)該對人體無害且易于在人體內(nèi)降解以便容易地被吸收和祠P泄。4)它應(yīng)該不產(chǎn)生任何異物反應(yīng)。5)它應(yīng)該在組織或器官內(nèi)保留傷口恢復(fù)所必需的一定的時間。6)其施用和治療應(yīng)該是容易的。為了滿足上面所列的條件，凝膠類型是最合適的。本發(fā)明的聚合物(對溫度敏感的凝膠型粘連抑制劑)由于體溫而膠凝，并在器官內(nèi)安全地保留一定的時間，從而不僅起到抑制粘連的作用，而且它們還能被吸收到體內(nèi)或降解，并且在活體內(nèi)降解后，降解產(chǎn)物也易于被吸收到體內(nèi)和排泄，而同時，由降解過程產(chǎn)生的物質(zhì)作為表面活性劑起到抑制粘連的作用，從而長時間地保持粘連抑制效應(yīng)。此外，它們能使活體內(nèi)的異物感最小化，并且能夠通過在手術(shù)過程中和/或術(shù)后局部噴霧或涂抹到受傷區(qū)域上來施用，因此它們能夠以容易和方便的方式操作。本發(fā)明的聚合物可以是具有任意組成的任何類型的聚合物，只要它們具有上述特性，例如它們可以是以PEO-PPO(或PBO)-PEO嵌段共聚物作為基礎(chǔ)單元并通過二羧基連接基連接的多嵌段共聚物。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物中所含的多嵌段共聚物是完全滿足作為粘連抑制劑的條件的多嵌段共聚物，它們的詳細描述如下。根據(jù)本發(fā)明的上下文，"嵌段共聚物"指基礎(chǔ)單元，其中聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段(親水嵌段)與聚環(huán)氧丙烷(PPO)或聚環(huán)氧丁烷(PBO)嵌段(疏水嵌段)連接，然后后者與聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段連接，將其表示為PEO-PPO-PEO嵌段共聚物或PEO-PBO-PEO嵌段共聚物。根據(jù)本發(fā)明的上下文，"多嵌段共聚物"指包含嵌段共聚物作為基礎(chǔ)單元的聚合物，在所述嵌段共聚物中，聚環(huán)氧乙烷(PEO)嵌段(親水嵌段)與聚環(huán)氧丙垸(PPO)或聚環(huán)氧丁烷(PBO)嵌段(疏水嵌段)連接，然后后者與聚環(huán)氧乙烷(PEO)嵌段連接，該兩個或多個嵌段共聚物通過二羧基連接基連接。例如，本發(fā)明涉及用于抑制粘連的組合物，其包含多嵌段共聚物，其中選自PEO-PPO-PEO嵌段共聚物和PEO-PBO-PEO嵌段共聚物的兩個或多個相同或不同的嵌段共聚物通過二羧基連接基連接，其中上述多嵌段共聚物是溫度敏感的聚合物，并且因為其相變溫度低于體溫，所以在體溫范圍內(nèi)以其凝膠狀態(tài)存在；因為其重均分子量相對高，所以其在低濃度聚合物水溶液環(huán)境中的保留期可以改善超過幾天；它是水溶性的；并且因為它是通過可生物降解的連接基連接的，所以它在活體內(nèi)易于降解以便被吸收和排泄。本發(fā)明提供包含PEO-PPO(或PBO)-PEO嵌段共聚物的溫度敏感的多嵌段共聚物作為有效的粘連抑制劑的新用途。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物中所含的多嵌段共聚物的重均分子量在1000-20000道爾頓的范圍內(nèi)，其形式為，其中通過二羧基連接基連接，使選自具有相同或不同分子量的PEO-PPO-PEO和PEO-PBO-PEO嵌段共聚物的兩個或多個相同或不同的嵌段共聚物多嵌段共聚到上述重量范圍內(nèi)，且其總重均分子量為25000-1000000道爾頓，優(yōu)選50000-500000道爾頓。通過用二羧基連接基多嵌段化而升高分子量，本發(fā)明的多嵌段共聚物可以在低濃度下表現(xiàn)出溶膠-凝膠相變，因此，它們的優(yōu)點是它們能夠在足夠的時間內(nèi)顯示保持。所述多嵌段共聚物中PEO與PPO或PBO的分子量之比可以在聚合物保持其水溶性的限度內(nèi)變化，可以為約0.2:1至約40:1,優(yōu)選1:1至7.5:1，更優(yōu)選1:1至5:1，并且PEO嵌段的含量可以為PEO-PPO或PBO-PEO單元的10-85重量％，優(yōu)選40-85重量％。所述嵌段共聚物中的聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段可以包含約2-200個，優(yōu)選約5-500個，更優(yōu)選約80-120個環(huán)氧乙垸，且構(gòu)成各嵌段共聚物中所含的兩個PEO嵌段的各環(huán)氧乙烷的數(shù)目可以相同或不同。所述聚環(huán)氧丙垸嵌段或聚環(huán)氧丁烷嵌段可以包含2-2000個，優(yōu)選約20-500個，更優(yōu)選約30-250個環(huán)氧丙烷或環(huán)氧丁烷。通過將隨機選自PEO-PPO-PEO嵌段共聚物和PEO-PBO-PEO嵌段共聚物的兩個或多個嵌段共聚物連接，形成本發(fā)明的多嵌段共聚物，所述兩個或多個嵌段共聚物可以彼此相同或不同。用于連接的二羧基連接基是藥學(xué)可接受的，其可以是選自下列的一種或多種二羧酸烷基二羧酸如草酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、癸二酸(sebacoylacid)、丙二酸、辛二酸和十二酸；不飽和二羧酸如富馬酸和馬來酸；和烯丙基二羧酸如鄰苯二甲酸和對苯二甲酸，其中草酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、癸二酸、富馬酸或馬來酸是優(yōu)選的。所述二羧基連接基經(jīng)酯鍵連接至嵌段共聚物的兩個末端羥基，這使得聚合物在水溶液或活體內(nèi)易于通過水解或酶的作用降解成羧酸和PEO-PPO(或PBO)-PEO嵌段共聚物，為多嵌段共聚物提供水溶性。降解的PEO-PPO(或PBO)-PEO嵌段共聚物起到表面活性劑的作用，并因此發(fā)揮二次粘連抑制效應(yīng)。因此，由于所述多嵌段共聚物通過水解在體內(nèi)降解成具有表面活性的低分子量嵌段共聚物和二羧酸，即使在具有高分子量的聚合物降解后，本發(fā)明仍可以通過持續(xù)釋放嵌段共聚物而提供持續(xù)粘連抑制效應(yīng)。更具體地，本發(fā)明的多嵌段共聚物可以具有下式1的結(jié)構(gòu)M-X-0-[PEO-Y-PEO-C(=0)-R-C(=0)-0]n-PEO-Y，-PEO-0-X-M其中，PEO為聚環(huán)氧乙烷，Y和Y'各自獨立地為聚環(huán)氧丙垸(PPO)、聚環(huán)氧丁烷(PBO)或者為PPO與PBO的組合，X為-H或陰離子基團，n為1-100的整數(shù)，R為-(CH2)m-或芳基Cm，，m為0-20的整數(shù)，且m，為6-12的整數(shù)，如果X不為H，則M為H或陽離子基團，優(yōu)選地，M選自Li、Na、K、Ag、Au、Ca、Mg、Zn、Fe、Cu、Co禾QNi，且如果X為H，則M不存在。優(yōu)選地，本發(fā)明的多嵌段共聚物可以由式2表示M-X-0-[PEO-Y-PEO-C(=0)-R-C(=0)-0]n-PEO-Y，-PEO-0-X-M其中，PEO為聚環(huán)氧乙烷，Y和Y，各自獨立地為聚環(huán)氧丙垸(PPO)、聚環(huán)氧丁垸(PBO)或者為PPO與PBO的組合，X為-H、-S03-、-PO,或-C(K))-R-C(O)-O-，n為1-100的整數(shù)，R為-(CH2)m-或芳基Cm'，m為0-20的整數(shù)，且m'為6-12的整數(shù)，如果X不為H，則M為H或者一價或二價陽離子基團，優(yōu)選地，M選自Li、Na、K、Ag、Au、Ca、Mg、Zn、Fe、Cu、Co和Ni，且如果X為H，則M不存在。本發(fā)明的多嵌段共聚物的兩個末端各自獨立地選自羥基和包含陰離子基團和陽離子基團的鹽。所述陰離子基團優(yōu)選為-S03'、-P032—或-C(K))-R-C(K))-CT,并且與所述陰離子基團對應(yīng)的成鹽陽離子基團可以是一價陽離子基團如Li、Na、K、Ag和Au以及二價陽離子基團如Ca、Mg、Zn、Fe、Cu、Co禾BNi。在本發(fā)明的實施方案中，所述多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元PEO-PPO(或PBO)-PEO可以是市售的泊洛沙姆。泊洛沙姆是這樣的化合物，其中親水嵌段聚環(huán)氧乙烷(PEO)與疏水嵌段聚環(huán)氧丙烷(PPO)經(jīng)醚鍵以三嵌段形式PEO-PPO-PEO連接，其重均分子量為1000-20000道爾頓，并且是在其末端具有羥基的嵌段共聚物。具體而言，可以使用泊洛沙姆188(PluronicF-68)、泊洛沙姆407(PluronicF-127)等等。尤其是，本發(fā)明提供用于抑制粘連的組合物，其為水溶液狀態(tài)，包含1-20重量％的多嵌段共聚物，在所述多嵌段共聚物中經(jīng)酯鍵通過二羧酸連接有泊洛沙姆407，其中所述多嵌段共聚物的重均分子量為50000-500000道爾頓，且其在15'C和更高的溫度下在水溶液中膠凝。泊洛沙姆可以在純化后或未經(jīng)純化用于制備本發(fā)明的聚合物，且如果進行純化，則易于制備具有高分子量的聚合物?？梢匀缑绹鴮＠?，800，711中所公開的，通過將泊洛沙姆溶于二氯甲烷中，然后在己烷中沉淀，或者通過在正丙醇/H20溶劑中的層分離方法，來進行泊洛沙姆的純化。在本發(fā)明的實施方案中，可以通過下列方法制備所述多嵌段共聚物。首先，根據(jù)聚合物兩個末端上存在的端基的類型，將適量的稀釋二羧酸二酰氯添加到PEO-PPO(或PBO)-PEO嵌段共聚物中，然后使偶聯(lián)反應(yīng)進行一定的時間，從而獲得具有升高的分子量的產(chǎn)物。如下純化所得產(chǎn)物將其添加到醚中以沉淀聚合物，然后溶于甲醇中，然后添加醚以沉淀聚合物。可以通過所有已知方法將多嵌段共聚物的兩個末端引入沉淀的聚合物中?？梢酝ㄟ^核磁共振(NMR)鑒定從泊洛沙姆合成的多嵌段嵌段共聚物。在使用二羧酸作為連接基合成的多嵌段共聚物中，在接近4.2ppm產(chǎn)生了峰，該峰在用于該反應(yīng)中的單獨的單體泊洛沙姆的NMR譜中不存在，它是羧酸與泊洛沙姆的兩個末端羥基鍵合而產(chǎn)生的末端-CH2CH2-的峰。此外，可以通過使合成的泊洛沙姆低聚物與三甲基甲硅垸基氯(TMS-C1)在三乙胺的存在下反應(yīng)，然后測定其NMR譜，來證實二羧酸的引入。如果端基為羥基，則在0.12ppm觀察到三甲基甲硅烷基質(zhì)子的信號，而如果為羧基端基，則在0.3ppm觀察到該峰?；谒鼈?，可以證實合成了泊洛沙姆低聚物。在本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物中，所述多嵌段共聚物的含量可以為0.1-40重量％，優(yōu)選1-30重量％，最優(yōu)選1-20重量％。如果所述多嵌段共聚物的含量小于上述范圍，則難以獲得有效的粘連抑制效應(yīng)，且難以在體溫范圍內(nèi)保持凝膠狀態(tài)，而如果所述含量超過上述范圍，則不易操作，且效果增加相對于含量而言是輕微的，由于其包含大量聚合物的事實，所以是成本無效的。在0.1-40重量％濃度的水溶液的狀態(tài)下，用于本發(fā)明中的多嵌段共聚物的溶膠-凝膠相變溫度在10-35'C的范圍內(nèi)，因此它們可以在體溫范圍內(nèi)保持其凝膠狀態(tài)。在這點上，由于在施用到受傷區(qū)域時，它們能夠按需要在7天或更長時間內(nèi)保持附著到所述區(qū)域上，因此其優(yōu)點是可以在活體內(nèi)保留足夠的時間。通常，考慮到器官和/或組織之間的粘連發(fā)生在術(shù)后7天以內(nèi)，所述多嵌段共聚物可以在期望的體內(nèi)位置保留7天或更長的時間，這一事實對于抑制粘連是極為重要的。當(dāng)現(xiàn)有的泊洛沙姆(PEO-PPO-PEO)在水溶液中的濃度為20-40重量％時，泊洛沙姆在低于2(TC的溫度下變?yōu)槿苣z狀態(tài)，在2(TC或更高的溫度下變成凝膠狀態(tài)，并且可以在體溫范圍內(nèi)以凝膠狀態(tài)存在。相反，由于即使在1-20重量％的相對低濃度的水溶液的狀態(tài)，本發(fā)明的多嵌段共聚物在低于2(TC的溫度下也會變?yōu)槿苣z狀態(tài)，并在2(TC或更高的^^度下保持凝膠狀態(tài)，所以它能夠以低濃度在體溫范圍內(nèi)保持凝膠狀態(tài)。這些特性符合粘連抑制劑的要求，即一次給藥應(yīng)該保留3天或更長的時間。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物中所含的溶劑是能夠溶解所述多嵌段共聚物的溶劑，可以使用選自蒸餾水、注射用水、生理鹽水、0.1-50v/v%醇水溶液、天然腹膜內(nèi)液和具有天然腹膜內(nèi)液組成的人造腹膜內(nèi)液的溶劑。所述醇為乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇300或聚乙二醇400。優(yōu)選地，本發(fā)明使用0.1-50v/v。/。醇水溶液作為溶劑。盡管不含乙醇的水溶液顯示出優(yōu)異的粘連抑制效應(yīng)，但要考慮關(guān)于聚合物濃度和相變變化模式的問題。如果聚合物的濃度高，則粘連抑制效應(yīng)得到改善，但由于它們的高粘度，它們在狹窄的范圍內(nèi)發(fā)生相變，因此在作為粘連抑制溶液操作時，它們易于變成凝膠，從而它們的操作可能是困難的。相反，在具有低濃度的溶液的情況下，由于它們的相變范圍寬泛，它們可能是易于操作的，但它們的粘連抑制功能可能是低的。同時，在不含乙醇的水溶液的情況下，隨著溫度上升，溶液的粘度在一定溫度表現(xiàn)出突然相變，而在使用醇水溶液作為溶劑的情況下，隨著乙醇含量上升，溶液的粘度在一些寬泛的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出相變。也就是說，當(dāng)在室溫下長期貯存或處理時，不含乙醇的水溶液在冰容器中貯存會遇到麻煩，因為溶液的粘度上升并且它們可能難以操作。尤其是，當(dāng)在接近相變的溫度下操作時，溶液由于突然相變現(xiàn)象而難以操作。因此，由于與乙醇的混合溶劑提供在寬泛的溫度范圍內(nèi)的相變，所以操作聚合物溶液極為容易。而且，使用含有乙醇的水溶液可以彌補粘度太高以至于不能操作的溶液缺點。因此，通過包含乙醇，可以容易地操作相同量的聚合物溶液，從而降低溶液的粘度。此外，當(dāng)涂抹到體內(nèi)時，所述溶液由于乙醇的吸收和蒸發(fā)而容易地膠凝。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物中所含的多嵌段共聚物的特征在于，它們可以只包括單一物質(zhì)PEO-PPO-PEO或PEO-PBO-PEO嵌段共聚物，它們不一定包含除所述嵌段共聚物以外的活性成分，它們降解成單一物質(zhì)PEO-PPO-PEO或PEO-PBO-PEO嵌段共聚物和連接基二羧酸，且降解產(chǎn)物起到另一種粘連抑制機制的作用。如上所述，由于本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物包含僅僅以這些單一物質(zhì)就表現(xiàn)出足夠的溫度敏感性的多嵌段共聚物，所以所述組合物的特征在于，只使用所述多嵌段共聚物而不用表現(xiàn)出異物感的其它天然聚合物成分，就能在體溫范圍內(nèi)發(fā)生溶膠-凝膠相變。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物的特征在于，僅僅使用所述多嵌段共聚物而不添加消炎藥和其它添加劑，其就表現(xiàn)出對組織和/或器官的粘連抑制作用，并且即使當(dāng)它們在體內(nèi)被降解后，降解產(chǎn)物仍起到具有二次粘連抑制效應(yīng)的表面活性劑的作用。本發(fā)明的包含所述多嵌段共聚物的用于抑制粘連的組合物還可以包含具有獨立藥理學(xué)效應(yīng)的藥物。這些藥物可以是下列藥物，它們調(diào)整要涂抹到受傷區(qū)域的組合物的膠凝性質(zhì)，或者起到用于治療傷口的活性成分的作用?？捎玫乃幬锸强寡ㄐ纬伤幦绺嗡鼗蚪M織纖溶酶原激活物，非甾體抗炎藥如阿司匹林、布洛芬和酮洛芬，激素趨化因子(hormonechemostaticfactor),鎮(zhèn)痛藥或麻醉藥。本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物適用于剖腹手術(shù)和腹腔鏡手術(shù)，也可以用于普通手術(shù)領(lǐng)域，所述手術(shù)不僅包括現(xiàn)有的腹膜手術(shù)、膀胱或婦科手術(shù)和脊柱手術(shù)，而且包括心臟手術(shù)、直腸手術(shù)、牙科手術(shù)和各種類型的整形外科手術(shù)。本發(fā)明的組合物可以根據(jù)其用途而以各種形式使用，例如管、乳膏、注射器和噴霧劑，它可以通過注射、涂抹或噴霧到受傷區(qū)域，然后膠凝，來抑制組織的粘連。本發(fā)明的水溶液組合物是可生物降解的聚合物，因此不能以其水溶液狀態(tài)貯存。因此，將包含多嵌段共聚物的容器和包含水溶液的容器分開包裝，然后在使用時，將它們混合并分散，以變成聚合物水溶液。填充到容器內(nèi)的多嵌段共聚物可以是通過凍干法制備的多嵌段共聚物。要適用的本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物的量可以根據(jù)聚合物組成、分子量、濃度、所需的粘連抑制期、要施用的身體區(qū)域、患者的狀況等等而變化。將通過具體實施方案進一步描述本發(fā)明，提供這些實施方案只為例示本發(fā)明，而不應(yīng)解釋為限制本發(fā)明的范圍。實施例制備例1.使用琥珀酰氯合成由泊洛沙姆407組成的多嵌段共聚物將10g泊洛沙姆407(PIuronic⑧F-127，BASF，分子量12500道爾頓，PE0:PPO101:56)倒入100-ml單頸圓底燒瓶中，并在12(TC下加熱的油浴中加熱，然后，在2小時內(nèi)消除聚合物中所含的水分，同時減壓。在除去減壓后，將反應(yīng)溫度設(shè)置為100°C，同時使氮流動，然后將100ml乙腈添加到燒瓶中。反應(yīng)燒瓶配有迪安-斯達克裝置(deanstark)和冷卻裝置。在通過經(jīng)由迪安-斯達克裝置蒸出而消除20ml乙腈以完全除去反應(yīng)物中的水分后，將1當(dāng)量琥珀酰氯添加到迪安-斯達克裝置的貯器內(nèi)并反應(yīng)24小時。24小時后，再向迪安-斯達克裝置中添加96ul琥珀酰氯，以用羧基取代合成的泊洛沙姆低聚物的端基，將反應(yīng)進行24小時。在1L乙醚中沉淀合成的泊洛沙姆低聚物并將其過濾，從而獲得產(chǎn)物。將所得產(chǎn)物再次溶于16ml甲醇中，然后在乙醚中沉淀并將其過濾。將這種純化過程進行兩次。將經(jīng)純化的產(chǎn)物真空干燥，得到具有狹窄分子量分布的泊洛沙姆低聚物。為了鑒定所制備的物質(zhì)是否是泊洛沙姆的多嵌段共聚物，使用核磁共振(NMR)。結(jié)果是，在使用二羧酸作為連接基合成的多嵌段共聚物中，在接近4.2ppm產(chǎn)生了峰，該峰在用于該反應(yīng)的單獨的單體泊洛沙姆的NMR譜中不存在，它是羧酸與泊洛沙姆的兩個末端羥基鍵合而產(chǎn)生的末端-012042-的峰(圖1)。此外，通過使合成的泊洛沙姆低聚物與三甲基甲硅烷基氯(TMS-C1)在三乙胺的存在下反應(yīng)，然后測定其NMR譜，鑒定了二羧酸的引入。如果端基為羥基，則在0.12ppm觀察到三甲基甲硅烷基質(zhì)子的信號，而如果為羧基端基，則在0.3ppm觀察到該峰。因此，可以鑒定所合成的泊洛沙姆低聚物的合成(圖2至圖4)。這樣獲得的產(chǎn)物被命名為MBP-36，其重均分子量為230000道爾頓。本發(fā)明的全部實施例(包括本實施例)中的所有平均分子量均通過凝膠滲透色譜法(GPC)測定。制備例2.使用己二酰二氯合成由泊洛沙姆188組成的多嵌段共聚物除了使用泊洛沙姆188(Pluronic⑧F-68,BASF，分子量8000道爾頓，PEO:PPO-80:27)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元并使用己二酰二氯作為二羧酸連接基外，根據(jù)與制備例1中所用相同的方法，合成平均分子量為160000的多嵌段共聚物。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例3.使用琥珀酰氯合成由泊洛沙姆237組成的多嵌段共聚物除了使用泊洛沙姆237(BASF，分子量7000道爾頓，PE0:PPO64:37)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元外，使用琥珀酰氯作為二羧酸連接基，根據(jù)與制備例1中所用相同的方法,合成平均分子量為150000的多嵌段共聚物。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例4.使用琥珀酰氯合成由泊洛沙姆407組成的多嵌段共聚物使用泊洛沙姆407(分子量12500道爾頓，PEO:PPO-101:56)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元，并使用琥珀酰氯作為二羧酸連接基，進行與制備例1中所用相同的方法，從而合成平均分子量為130000的多嵌段共聚物，將其命名為MBP-53。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例5.使用草酰氯合成由泊洛沙姆407組成的多嵌段共聚物除了使用泊洛沙姆407(分子量12500道爾頓，PEO:PP0101:56)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元，并使用草酰氯作為二羧酸連接基外，根據(jù)與制備例1中所用相同的方法，合成平均分子量為98000的多嵌段共聚物并命名為MBP-29。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例6.使用癸二酰二氯合成由泊洛沙姆188組成的多嵌段共聚物除了使用泊洛沙姆188(分子量8000道爾頓，PEO:PPC^80:27)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元，并使用癸二酰二氯作為二羧酸連接基外，根據(jù)與制備例1中所用相同的方法，合成平均分子量為124000的多嵌段共聚物并命名為MBP-22。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例7.使用十二酰二氯Wodecandichloride)合成由泊洛沙姆407組成的多嵌段共聚物除了使用泊洛沙姆407(分子量12500道爾頓，PEO:PP0101:56)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元，并使用十二酰二氯(dodecandioylchloride)作為二羧酸連接基外，根據(jù)與制備例1中所用相同的方法，合成平均分子量為110000的多嵌段共聚物并命名為MBP-42。通過使用核磁共振在接近4.2ppm的峰產(chǎn)生和因二羧酸的引入的末端峰分析，將所制備的多嵌段共聚物鑒定為通過二羧酸連接的泊洛沙姆。制備例8.使用琥珀酰氯合成由泊洛沙姆407組成的多嵌段共聚物使用泊洛沙姆407(分子量12500道爾頓，PEO:PP0101:56)作為多嵌段共聚物的基礎(chǔ)單元，并使用琥珀酰氯作為二羧酸連接基，進行與制備例1中所用相同的方法，從而合成平均分子量為120000的多嵌段共聚物，將其命名為MBP-77。實施例l:測定多嵌段共聚物的性質(zhì)(1)根據(jù)聚合物的類型測定膠凝溫度將在制備例1至8中合成的多嵌段共聚物溶于蒸餾水中，以制備具有下表1所述濃度的溶液。作為對照，制備泊洛沙姆407(PluronicF-127)和泊洛沙姆188(PluronicF-68)溶液。表1顯示在制備例1至8中制備的多嵌段共聚物溶液和對照溶液的膠凝溫度隨著濃度的變化。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>從上表l中的結(jié)果看到，在對照組的情況下，在濃度小于25%時，幾乎沒有發(fā)現(xiàn)表示相變溫度的性質(zhì)如明顯的膠凝點，然而，即使在濃度小于20%時，本發(fā)明的多嵌段共聚物溶液也顯示出表示明顯相變的膠凝點。而且，使用布魯克菲爾德粘度計測定了對照組溶液的泊洛沙姆407溶液和在制備例1、5和7中制備的多嵌段共聚物溶液的粘度隨著濃度的變化，結(jié)果分別示于圖5至圖9。從上面可以看到，獲自布魯克菲爾德(Brookfidd)的粘度確定結(jié)果顯示與使用梯度法獲得的膠凝點是相關(guān)的。(2)根據(jù)溶劑的類型測定膠凝溫度為了檢查在使用乙醇與蒸餾水的混合溶劑作為水溶液的溶劑的情況下，聚合物水溶液的性質(zhì)，制備具有表2所示組成的溶劑。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>圖IO顯示上面制備的含乙醇的水溶液的粘度測定結(jié)果。在不含乙醇的水溶液中，溶液的粘度隨著溫度上升而在特定的溫度顯示突然相變，而在含乙醇的溶劑中，觀察到溶液的粘度具有相變曲線，該曲線顯示隨著乙醇含量上升，在一些寬泛的溫度范圍內(nèi)顯示膠凝點。實施例2:測定包含多嵌段共聚物的粘連抑制劑的粘連程度為了檢查上面制備的多嵌段共聚物溶液的粘連抑制效應(yīng)，使用SD大鼠作為動物模型，通過動物實驗研究粘連程度。本實驗所用的大鼠為6周或更大，它們在相互獨立的環(huán)境中喂養(yǎng)，在所述環(huán)境中保持溫度為16-22'C，相對濕度為50-70%左右。在將大鼠麻醉后，切開麻醉大鼠的腹部，使用解剖刀，在腹壁的表皮部分人工形成1.5cmxl.5cm的傷口，將接觸該傷口的闌尾損傷至其表皮輕微剝離的程度，并用手術(shù)線縫合受傷的部分。在根據(jù)其濃度以0.5~5ml的量，將上面制備的多嵌段共聚物溶液涂抹到縫合區(qū)域后，在第7天測定組織粘連的程度和大鼠的體重。使用未經(jīng)溶液治療的大鼠作為對照，并比較粘連抑制效應(yīng)。使用以下方法評價組織粘連程度[Rodgers等(1990)]。**:用于腱粘連級別評價的半定量分級標(biāo)準(zhǔn)l:沒有觀察到粘連2:可分離的膜狀粘連3:不可分離的輕度粘連4:中度粘連(在35-60%的受傷區(qū)域上粘連)5:嚴(yán)重粘連(在超過60%的受傷區(qū)域上粘連)(1)包含制備例1的多嵌段共聚物fMBP-36)的溶液將在制備例1中合成的多嵌段共聚物MBP-36溶于生理鹽水中，以制備具有下表3所示濃度的溶液，然后測定粘連程度，結(jié)果示于表3和圖12至圖14中。未用聚合物治療的對照在其有傷口的腹部和闌尾處顯示嚴(yán)重的粘連(圖ll)，而本發(fā)明的多嵌段共聚物顯示改善的粘連抑制效應(yīng)(圖12至圖14)。盡管在低濃度下獲得了部分粘連抑制效應(yīng)，但在5%或更高的濃度下100%抑制了粘連。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>f2)包含制備例4的多嵌段共聚物MBP-53的溶液將在制備例4中合成的多嵌段共聚物MBP-53溶于生理鹽水中，以制備具有下表4所示濃度的溶液，然后測定粘連程度，結(jié)果示于表4和圖16至圖20中(圖16(1%)，圖17(3%)，圖18(5%)，圖19(7%)和圖20(10%))。在10%或更高的濃度下，多嵌段共聚物MBP-53100。/。抑制了粘連，從沒有觀察到剩余MBP-53的事實可以看出，所施用的MBP-53全部被吸收(圖20)，即使在低濃度下也觀察到了粘連抑制效應(yīng)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>(3)包含制備例8的多嵌段共聚物MBP-77的含乙醇水溶液根據(jù)表5所示的組成，將在制備例8中制備的多嵌段共聚物MBP-77溶于乙醇與蒸餾水的混合溶劑中，然后測定粘連程度，結(jié)果示于表5中。溶于混合溶劑的MBP-77顯示100%的粘連抑制效應(yīng)，普遍顯示出抑制粘連的可能性。此外，隨著乙醇含量上升，溶液易于在治療過程中操作。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>比較例l:泊洛沙姆407溶液的制備將泊洛沙姆407溶于下面所示的生理鹽水中，以制備具有下表6所示濃度的溶液。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>圖21顯示使用含泊洛沙姆407的溶液，從動物試驗獲得的粘連抑制測定結(jié)果。在圖21中看到，當(dāng)用泊洛沙姆407溶液治療動物時，由于它們粘度低，不像凝膠，而是像水一樣流動，不太保留在預(yù)定的位置，所以它們沒有固定在腹壁內(nèi)，并且重要的是，它們沒有顯示出粘連抑制效應(yīng)。比較例2:制備添加有羧甲基纖維素的多嵌段共聚物溶液將在制備例1中制備的多嵌段共聚物MBP-36溶于生理鹽水，以1重量。/。的量向其中添加羧甲基纖維素(CMC)，從而制備具有下表7所示濃度的溶液。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>根據(jù)與實施例2所用相同的方法，使用上述溶液，在大鼠中測定粘連的程度，結(jié)果示于表8中。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>將在制備例1中制備的多嵌段共聚物MBP-36和被報告具有優(yōu)異生物粘附性的羧甲基纖維素溶于生理鹽水中，從而制備其中MBP-36濃度為5重量％和10重量％且羧甲基纖維素濃度為1重量％的溶液，然后，按照與實施例2所用相同的方法，在大鼠中測定粘連抑制效應(yīng)，結(jié)果示于圖15中。當(dāng)添加少量羧甲基纖維素時，獲得了部分粘連抑制效應(yīng)，但它具有副作用，即脾表現(xiàn)出明顯的過度生長，而且一些動物死亡。這些結(jié)果提示，羧甲基纖維素誘導(dǎo)了一些異物反應(yīng)。實施例3.用粘連抑制溶液治療的動物的體重變化作為證實本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物的有效性的另一個試驗，在一周內(nèi)觀察使用與實施例2(1)和(2)所用相同的溶液和方法治療的大鼠的體重，結(jié)果示于圖22(MBP-36)和圖23(MBP-53沖。未用溶液治療的大鼠用作對照。用本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物治療的動物的體重像對照一樣穩(wěn)定地上升，這表明本發(fā)明的用于抑制粘連的組合物對于在活體內(nèi)使用是合適和安全的。本發(fā)明的聚合物由于體溫而膠凝并在器官內(nèi)安全地保留一定的時間，起到粘連抑制劑的作用，而且它們能被吸收到體內(nèi)或降解，并且在活體內(nèi)降解后，降解產(chǎn)物也能夠容易地被吸收到體內(nèi)和排泄，同時，由降解過程產(chǎn)生的物質(zhì)作為表面活性劑起到抑制粘連的作用，從而能夠長時間地發(fā)揮持續(xù)的粘連抑制效應(yīng)。此外，可以使活體內(nèi)的異物感最小化，而且它們操作簡單方便，因為它們可以通過在手術(shù)過程中和/或術(shù)后噴霧或涂抹而局部施用到受傷區(qū)域上。權(quán)利要求1.用于抑制粘連的組合物，其包含根據(jù)溫度而顯示溶膠-凝膠相變的水溶性和溫度敏感的聚合物，其中所述聚合物由于體溫而經(jīng)歷從溶膠狀態(tài)至凝膠狀態(tài)的相變，穩(wěn)定地涂抹在組織內(nèi)，從而起到抑制粘連的屏障的作用，并且隨著時間流逝，降解成低分子量表面活性劑和可生物降解的單分子物質(zhì)，其中降解產(chǎn)物表現(xiàn)出二次粘連抑制效應(yīng)。2.權(quán)利要求1的用于抑制粘連的組合物，其中所述聚合物是溫度敏感的多嵌段共聚物，其中選自聚環(huán)氧乙烷(PEO)-聚環(huán)氧丙烷(PPO)-聚環(huán)氧乙烷(PEO)嵌段共聚物和聚環(huán)氧乙垸(PEO)-聚環(huán)氧丁烷(PBO)-聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段共聚物的兩個或多個相同或不同的嵌段共聚物通過二羧基連接基連接。3.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述嵌段共聚物的重均分子量為1000-20000道爾頓，且所述多嵌段共聚物的總重均分子量為25000-1000000道爾頓。4.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述嵌段共聚物的重均分子量為1000-20000道爾頓，且所述多嵌段共聚物的總重均分子量為50000-500000道爾頓。5.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中在0.1-40重量％的濃度下，所述多嵌段共聚物的溶膠-凝膠相變溫度在10-35'C的范圍內(nèi)。6.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述多嵌段共聚物的含量為0.1-40重量％。7.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述多嵌段共聚物的含量為1-20重量％。8.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述組合物包含選自蒸餾水、注射用水、生理鹽水、0.1-50v/vM醇水溶液、天然腹膜內(nèi)液和具有所述天然腹膜內(nèi)液組成的人造腹膜內(nèi)液中的一種。9.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中在所述嵌段共聚物中，所述聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段包含2-2000個環(huán)氧乙垸,構(gòu)成各嵌段共聚物內(nèi)所含的兩個聚環(huán)氧乙垸的每個環(huán)氧乙烷的數(shù)目彼此相同或不同，所述聚環(huán)氧丙烷(PPO)嵌段包含2-2000個環(huán)氧丙垸，且所述聚環(huán)氧丁烷(PBO)嵌段包含2-2000個環(huán)氧丁烷。10.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述二羧基連接基是選自草酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、癸二酸、丙二酸、辛二酸、十二酸、富馬酸、馬來酸、鄰苯二甲酸和對苯二甲酸的一種或多種。11.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述多嵌段共聚物具有式1的結(jié)構(gòu)<式1><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，PEO為聚環(huán)氧乙烷；Y和Y，各自獨立地為聚環(huán)氧丙烷(PPO)、聚環(huán)氧丁垸(PBO)或者為PPO與PBO的組合；X為-H或陰離子基團；n為1-100的整數(shù)；R為-(CH2)nr或芳基Cm';m為0-20的整數(shù)，且m，為6-12的整數(shù)；如果X不為H，則M為H或陽離子基團；且如果X為H，則M不存在。12.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述多嵌段共聚物具有式2的結(jié)構(gòu)<式2><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，PEO為聚環(huán)氧乙垸；Y和Y，各自獨立地為聚環(huán)氧丙垸(PPO)、聚環(huán)氧丁垸(PBO)或者為PPO與PBO的組合；x為-H、-so3-、孑032-或-(:(=0)-11-€:(=0)-0-;n為1-100的整數(shù)；R為-(CH2)m-或芳基Cm，；m為0-20的整數(shù)，且m，為6-12的整數(shù)；如果X不為H，則M為H或者一價或二價陽離子基團；且如果X為H，則M不存在。13.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其還包含選自抗血栓形成藥、非甾體抗炎藥、激素趨化因子、鎮(zhèn)痛藥和麻醉藥的一種或多種藥物。14.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中其在剖腹手術(shù)、腹腔鏡手術(shù)、腹膜手術(shù)、膀胱手術(shù)、婦科手術(shù)、脊柱手術(shù)、心臟手術(shù)、直腸手術(shù)、牙科手術(shù)或整形外科手術(shù)后施用。15.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中其被配制為管、乳膏、注射器或噴霧劑的形式。16.權(quán)利要求2的用于抑制粘連的組合物，其中所述多嵌段共聚物在體內(nèi)降解并持續(xù)釋放聚環(huán)氧乙烷(PEO)-聚環(huán)氧丙垸(PPO)-聚環(huán)氧乙垸(PEO)嵌段共聚物或聚環(huán)氧乙垸(PEO)-聚環(huán)氧丁烷(PBO)-聚環(huán)氧乙烷(PEO)嵌段共聚物，從而表現(xiàn)出二次粘連抑制效應(yīng)。17.用于抑制粘連的組合物，其為水溶液狀態(tài)，包含1-20重量％的多嵌段共聚物，在所述多嵌段共聚物中經(jīng)酯鍵通過二羧酸連接有泊洛沙姆407，其中所述多嵌段共聚物的重均分子量為50000-500000道爾頓，且其在15'C和更高的溫度下膠凝。18.權(quán)利要求17的組合物，其中所述組合物在被用于手術(shù)區(qū)域時膠凝，其中抑制組織的粘連。19.權(quán)利要求17的組合物，其中所述組合物中的多嵌段共聚物溶于選自蒸餾水、注射用水、生理鹽水和0.1-50v/v。/。醇水溶液的溶劑中。20.權(quán)利要求19的組合物，其中所述醇選自乙醇、1,2-丙二醇、丙三醇、聚乙二醇300和聚乙二醇400。21.權(quán)利要求17的組合物，其中在使用所述水溶液時，其是通過將各自包含在單獨的容器內(nèi)的多嵌段共聚物和溶劑混合來制備的。22.權(quán)利要求21的組合物，其中在單獨的容器內(nèi)的所述多嵌段共聚物通過凍干法制備。23.權(quán)利要求17的組合物，其中其被配制成管、乳膏、注射器或噴霧劑的形式。全文摘要本發(fā)明提供了用于抑制粘連的組合物，其包含溶于水溶液中并具有根據(jù)溫度而顯示溶膠-凝膠相變的溫度敏感性的聚合物，其中溶膠狀態(tài)的聚合物溶液由于體溫而變?yōu)槟z狀態(tài)，并因此穩(wěn)定地涂抹在組織內(nèi)，從而其起到抑制粘連的膜的作用，并且隨著時間流逝，其降解成低分子量表面活性劑和可生物降解的單分子物質(zhì)，其中它們可以被吸收到體內(nèi)，而降解產(chǎn)物可以帶來二次粘連抑制效應(yīng)。文檔編號A61K31/765GK101378766SQ200780004370公開日2009年3月4日申請日期2007年2月1日優(yōu)先權(quán)日2006年2月1日發(fā)明者崔仁子,徐敏孝,沈明燮,金峯五申請人:株式會社三養(yǎng)社