專利名稱：：包含天然生物可降解的多糖的涂層和物品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含天然生物可降解的聚合物材料在原位形成的生物可降解的包含體(occlusion)。
背景技術(shù)：
：栓塞性組合物可用于在原位形成基質(zhì)和具有栓子性質(zhì)的涂層。栓塞性組合物可用于自身或與表面結(jié)合形成栓塞塊來(lái)控制流體運(yùn)動(dòng)。這類組合物可用于封閉動(dòng)脈瘤中的內(nèi)漏，填充動(dòng)脈瘤囊，處理動(dòng)靜脈瘺和動(dòng)靜脈畸形，阻塞血管和阻塞輸卵管。栓塞性組合物可被遞送至機(jī)體的期望部位，然后在此部位聚合以提供在原位形成的水凝膠。許多非生物可降解的大分子單體系統(tǒng)已被描述，并被提議作為栓塞劑用于機(jī)體中。參見，例如，美國(guó)專利第5，410，016、5,626,863和6,676,971號(hào)。然而，現(xiàn)有的大分子單體技術(shù)較不理想。許多大分子單體系統(tǒng)是基于非-生物可降解的聚合物系統(tǒng)，如聚乙烯醇(PVA)。由這些大分子單體系統(tǒng)形成的基質(zhì)通常不能被機(jī)體降解和重吸收。由于動(dòng)脈瘤對(duì)與動(dòng)脈瘤接觸的組織或器官產(chǎn)生壓力，所以由非-生物可降解的基質(zhì)形成的栓塞性包含體通常將不能使動(dòng)脈瘤縮小和減輕對(duì)鄰近組織的壓力。聚乙交酯材料已被廣泛用于制備在體內(nèi)使用的物品。聚乙交酯是pH敏感的，并通過(guò)水解被降解。這可能存在穩(wěn)定性擔(dān)憂。另外，由聚乙交酯形成的物品出現(xiàn)主體降解，而不是表面降解。在體內(nèi)，這可導(dǎo)致降解物品的部分移動(dòng)并通過(guò)體液被重新配置到機(jī)體的不同部分，這在此第二位點(diǎn)可引起問題。此外，聚乙交酯材料不能很好地與組織結(jié)合。不能粘附可在栓塞塊形成的部位處產(chǎn)生不希望的流動(dòng)的局限區(qū)域，如動(dòng)脈瘤中。聚乙交酯也降解成為酸性化合物。已報(bào)道這些酸性降解產(chǎn)物與不希望有的非感染性炎癥反應(yīng)相關(guān)。這些酸性降解產(chǎn)物還可通過(guò)與多肽部分上的堿性殘基相互作用對(duì)多肽的功能產(chǎn)生影響。如果所述的生物可降解的物品與由多肽提供的生物活性相關(guān)，則這類相互作用是不希望有的。栓塞性組合物還可能是以聚合物涂層的形式，所述涂層可給醫(yī)療物品提供封閉劑功能。生物可降解的封閉劑組合物已經(jīng)用在了有多孔表面的物品上，如與可植入醫(yī)療物品有關(guān)的織物。封閉劑涂層最初賦予多孔表面對(duì)流體不滲透達(dá)一段時(shí)間。然而，由于封閉劑材料降解，被機(jī)體吸收，參與組織修復(fù)的細(xì)胞浸潤(rùn)多孔材料并取代封閉劑材料。因此，在一段時(shí)間期間，新形成的組織取代了涂敷的封閉劑的原始功能。從動(dòng)物中得到的封閉劑材料如膠原蛋白和明膠通常用于涂敷紡織的移植物。這些材料在體內(nèi)可以被吸收。血凝固蛋白質(zhì)血纖蛋白也可以用作封閉劑材料。盡管它們的用途，但使用這些類型的封閉劑材料存在缺點(diǎn)和擔(dān)心。一個(gè)特別的問題是，由于在它們生產(chǎn)中固有的批次和批次間的變化，難以生產(chǎn)出一致的封閉劑組合物。在很多情況下，封閉劑技術(shù)中所用的膠原蛋白是從非人類動(dòng)物源如牛源中獲得的。在這些情況下，存在這樣的可能牛膠原蛋白制備物可能含有不需要的污染物，該污染物對(duì)于引入人受試者中是不合乎需要的。不需要的污染物的一個(gè)實(shí)例是導(dǎo)致牛海綿樣腦病(BSE)的朊病毒顆粒。BSE，也稱為瘋牛病，是一類被稱為可傳染的海綿樣腦病，或TSEs(因?yàn)槟X部的變質(zhì)部位看起來(lái)像海綿而命名)進(jìn)行性神經(jīng)學(xué)疾病之一。已經(jīng)報(bào)道了不同形式的TSE，包括綿羊中的綿羊瘙癢病以及麋鹿和長(zhǎng)耳鹿中的慢性消耗性疾病。通常認(rèn)為再循環(huán)動(dòng)物部分的使用導(dǎo)致綿羊中綿羊瘙癢病與瘋牛病的交叉物種污染，并且攝食被污染的牛肉和牛制品導(dǎo)致這種疾病的人類變體，克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病(CJD)。另外的擔(dān)心是來(lái)自動(dòng)物源的制備物可能提供其它不需要的污染物，如抗原因子。這些抗原因子可能在植入物品的附近促進(jìn)局部化的免疫反應(yīng)，并妨害其功能。這些因子還可以引起感染以及局部的炎癥。盡管合成材料可以用于制備封閉劑組合物，但這些合成材料具有降解成非天然存在的產(chǎn)物的可能。在植入位點(diǎn)處或植入位點(diǎn)周圍，這些非天然存在的產(chǎn)物對(duì)生物可能至少部分有毒或致免疫，并且引起炎癥，以及感染。發(fā)明概述在本發(fā)明的一方面，天然生物可降解的多糖用于制備物品，如可在機(jī)體內(nèi)形成(例如，通過(guò)原位形成)的物品。一些方面，所述物品可能是無(wú)定形的，如通過(guò)使用形成基質(zhì)的組合物，在機(jī)體的一部分之內(nèi)或其上形成的天然生物可降解的多糖的聚合塊。天然生物可降解的多糖的聚合塊可用于阻塞機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)，如動(dòng)脈瘤或管腔。在一些方面，所述物品，如原位形成的基質(zhì)，用于治療許多醫(yī)學(xué)病癥或適應(yīng)癥中的任何一種或多種的方法中，包括恢復(fù)、改善和/或促進(jìn)組織生長(zhǎng)或功能，尤其是用于矯形、牙齒和骨移植物應(yīng)用的方法中。這些功能可通過(guò)將生物可降解的多糖聚合基質(zhì)放置與宿主組織接觸而提供。該基質(zhì)可恢復(fù)或改善組織生長(zhǎng)或功能，通過(guò)例如促進(jìn)或允許在基質(zhì)之間和基質(zhì)內(nèi)形成新的組織。對(duì)組織的效應(yīng)可通過(guò)生物可降解的多糖本身或生物可降解的多糖與一種或多種可存在于基質(zhì)中和/或從基質(zhì)釋放的生物活性劑聯(lián)合所引起?？捎绊懡M織功能的示范性生物活性劑包括肽，如參與組織^"復(fù)過(guò)程中的和屬于EGF、FGF、PDGF、TGF-卩、VEGF、PD-ECGF或IGF族的肽，并且還包括衍生自骨形態(tài)發(fā)生蛋白2或BMP-2的肽。所述生物活性劑還可能是細(xì)胞，如血小板。在一些方面，所述物品可包括防輻射透過(guò)劑。例如，包含碟的防輻射透過(guò)劑可與天然生物可降解的多糖結(jié)合。碘被認(rèn)為與多糖(如直鏈淀粉或麥芽糖糊精)絡(luò)合，其充當(dāng)?shù)饨Y(jié)合性化合物。這可有利地改善其中進(jìn)行成像步驟的醫(yī)療操作。例如，基于與包含體結(jié)合的碘的密度，容易地被顯影。在制備物品中，眾多的天然生物可降解的多糖通過(guò)偶合基團(tuán)相互交聯(lián)，所述偶合基團(tuán)懸垂在天然生物可降解的多糖上(即，一個(gè)或多個(gè)偶合基團(tuán)化學(xué)結(jié)合至多糖上)。在一些方面，天然生物可降解的多糖上的偶合基團(tuán)是可聚合的基團(tuán)。在自由基聚合反應(yīng)中，組合物中可聚合的基團(tuán)可以使天然生物可降解的多糖交聯(lián)在一起，由此形成天然生物可降解的多糖基質(zhì)，其可能是一種在體內(nèi)形成的基質(zhì)。本文所述的天然生物可降解的多糖是可相互締合形成基質(zhì)的非合成的多糖，其可用作原位形成的基質(zhì)。天然生物可降解的多糖還可以被酶降解，但是提供了一般為非酶水解穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。這特別有利于生物活性劑遞送，如在一些方面中本發(fā)明提供了在酶介導(dǎo)的降解條件下而不是通過(guò)擴(kuò)散，能夠釋放生物活性劑的物品。因此，從本發(fā)明的物品釋放的生物活性劑的動(dòng)力學(xué)根本不同于由合成的生物可降解材料如聚(交酯類)制備的物品釋放的生物活性劑的動(dòng)力學(xué)。天然生物可降解的多糖包括多糖和/或多糖衍生物，其由天然源如植物或動(dòng)物得到。示范性的天然生物可降解的多糖包括麥芽糖糊精、直鏈淀粉、環(huán)糊精、聚糖醇、透明質(zhì)酸、葡聚糖、肝素、硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、硫酸角質(zhì)素、葡聚糖、硫酸葡聚糖、多硫酸戊聚糖和脫乙酰殼多糖。優(yōu)選的多糖是幾乎沒有或無(wú)分支的低分子量聚合物，如衍生自淀粉制備物和/或在淀粉制備物中發(fā)現(xiàn)的那些，例如直鏈淀粉和麥芽糖糊精。因?yàn)橹辨湹矸酆望溠刻呛酆衔锏奶厥庑в?，在一些方面可使用平均分子量?00,000Da或更小、250,000Da或更小、IOO，OOODa或更小，或者50,000Da或更小的天然生物可降解的多糖。在一些方面，天然生物可降解的多糖具有的平均分子量為500Da或更大。在一些方面，天然生物可降解的多糖具有的平均分子量為約1000Da至約10,000Da。特定分子量的天然生物可降解的多糖可以商業(yè)上購(gòu)得或可以制備，例如，通過(guò)天然生物可降解的多糖制備物如淀粉的酸水解和/或酶降解。使用特定大小范圍的天然生物可降解的多糖的決定可取決于多種因素，如組合物的物理特征(例如，粘度)、期望的基質(zhì)的降解的速率、組合物中存在的其它任選的部分(例如，生物活性劑等)，等等。按照本發(fā)明方法和組合物中所用的天然生物可降解的多糖是可容易以低成本獲得的和/或可以采用確定的技術(shù)容易制得的。當(dāng)用于形成物品如可在體內(nèi)使用的物品的組合物中時(shí)，使用天然生物可降解的多糖如麥芽糖糊精或直鏈淀粉，提供了很多優(yōu)點(diǎn)。含天然生物可降解的多糖的物品的降解可導(dǎo)致釋放例如天然存在的單-或二糖如葡萄糖，其是普通血清成分。而且，同使用合成的生物可降解的多糖相比，使用降解成普通血清組分如葡萄糖的天然生物可降解的多糖可以認(rèn)為是更可接受的，合成的生物可降解的多糖降解成非天然化合物或在體內(nèi)以非常低濃度存在的化合物。本發(fā)明的一些方面，這種有利特征反映在使用不是從動(dòng)物中得到的天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉和麥芽糖糊精，并且其降解成對(duì)個(gè)體幾乎不存在或無(wú)致免疫或毒性風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)物。本發(fā)明提供了改良的、成本有效的天然生物可降解的多糖組合物，該組合物用于可以用于多種醫(yī)學(xué)治療中的物品。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是包含天然生物可降解的多糖的基質(zhì)比其它由生物可降解的聚合物如聚(交酯類)制備的基質(zhì)更抵抗水解的降解。本發(fā)明的天然生物可降解的多糖的降解主要是酶介導(dǎo)的，在環(huán)境條件下有最少或沒有天然生物可降解的多糖的水解發(fā)生。這允許在體內(nèi)形成基質(zhì)之前，天然生物可降解的多糖保持相當(dāng)?shù)胤€(wěn)定(例如，抵抗降解)。其它生物可降解的聚合物如聚(丙交酯)或聚(丙交酯-共-乙交酯)，甚至在相對(duì)中性pH范圍下(例如，pH6.5-7.5)發(fā)生水解，因此不提供這種益處。因此，本發(fā)明包括含天然生物可降解的多糖的組合物、物品以及制備它們的方法，它們?cè)诤h(huán)境存在下具有提供穩(wěn)定性的優(yōu)點(diǎn)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于制備生物可降解的物品的貯存穩(wěn)定的組合物，貯存穩(wěn)定的組合物包含含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。根據(jù)在本文提供的詳述，可以獲得或制得這些組合物，然后在用于形成生物可降解的物品之前貯存一段時(shí)間，在貯存期間天然生物可降解的多糖沒有發(fā)生顯著的降解。因此，本發(fā)明還提供制備生物可降解的物品的方法，包括制備生物可降解的物品組合物，該物品組合物包含含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖；貯存物品組合物一段時(shí)間；然后使用物品組合物來(lái)制備生物可降解的物品。在一些方面，生物可降解的物品在原位形成，例如，通過(guò)促進(jìn)天然生物可降解的多糖在體內(nèi)的聚合。任選地，一種或多種生物活性劑和/或微?？梢栽趈i!i存物品組合物之前或之后加入。在相關(guān)的方面，本發(fā)明還提供能夠進(jìn)行方法的優(yōu)點(diǎn)，在該方法中天然生物可降解的多糖經(jīng)歷接觸水溶液，沒有天然生物可降解的多糖顯著降解的風(fēng)險(xiǎn)。例如，天然生物可降解的多糖可以在合成步驟或合成后步驟，包括加成合成反應(yīng)和純化步驟中接觸水溶液，或者包含天然生物可降解的多糖的物品可以在例如滅菌步驟或涉及將生物活性劑摻進(jìn)生物可降解的物品中的步驟中接觸水溶液。當(dāng)將含有天然生物可降解的多糖的物品放置與體液接觸時(shí)，其降解可開始，體液中可能包括降解天然生物可降解的多糖的酶，如糖酶。本發(fā)明還提供了從生物可降解的物品遞送較大的親水生物活性劑的有用的方法，所述親水生物活性劑如多肽、核酸和多糖，以及病毒顆粒和細(xì)胞。比較地，如果它們太大以至于不能擴(kuò)散至基質(zhì)外，非降解藥物遞送基質(zhì)的使用對(duì)于這些較大的生物活性劑的遞送可能是沒用的。然而，根據(jù)本發(fā)明的一些方面，包括具有生物活性劑的天然生物可降解的多糖基質(zhì)的物品可被放置于體內(nèi)或在體內(nèi)形成，并且當(dāng)基質(zhì)降解時(shí)，生物活性劑逐漸從基質(zhì)中釋放。在本發(fā)明的一方面，生物活性劑具有的分子量為約10,000Da或更大。在一些方面，本發(fā)明提供了釋放藥物的生物可降解的物品，其包含(i)天然生物可降解的多糖，優(yōu)選選自包含烯型(ethylenically)不飽和基團(tuán)的直鏈淀粉和麥芽糖糊精；(ii)引發(fā)劑和(iii)生物活性劑，選自多肽、多聚核苷酸和多糖。在本發(fā)明的另一方面，天然生物可降解的多糖用疏水部分修飾，以便提供具有疏水性質(zhì)的生物可降解的基質(zhì)。因此，生物可降解的物品可由包含一個(gè)或多個(gè)懸垂的偶合基團(tuán)和一個(gè)或多個(gè)懸垂的疏水部分的天然生物可降解的多糖形成。示范性的疏水部分包括脂肪酸及其衍生物，以及C2-ds烷基鏈。因此，本發(fā)明的一些方面，天然生物可降解的多糖的修飾允許制備生物可降解的和可釋放疏水性生物活性劑的物品。在其它方面，從天然生物可降解物懸垂的疏水部分具有生物活性劑的性質(zhì)?；|(zhì)降解時(shí)，疏水部分可從天然生物可降解的聚合物中水解并釋放以產(chǎn)生治療效應(yīng)。治療上有用的疏水部分的一個(gè)實(shí)例是丁酸。在再另一方面，本發(fā)明提供了用于改善由天然生物可降解的非還原性多糖形成的物品遞送的生物活性劑的穩(wěn)定性的方法和物品。非還原性多糖可提供惰性基質(zhì)，并由此改善敏感生物活性劑如蛋白質(zhì)和酶的穩(wěn)定性。物品可包括含有眾多天然生物可降解的非還原性多糖和生物活性劑如多肽的基質(zhì)。示范性的非還原性多糖包括聚糖醇。生物,性劑的物本發(fā)明也證明了包括適于體內(nèi)使用的天然生物可降解多糖的物品的制備。這些產(chǎn)品顯示優(yōu)異的物理特性，并適于在應(yīng)用中使用，其中特殊的功能，如生物活性劑遞送或封閉劑功能是想要的。例如，可制備具有粘彈性質(zhì)的物品。在本發(fā)明的一方面，物品具有的彈性模量數(shù)值為27kPa~30kPa。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，制備用于制造基質(zhì)的組合物的方法不需要使用有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑的使用可能是身體上有害的。有機(jī)溶劑的使用可潛在地破壞任選包括在基于天然生物可降解的多糖的組合物中的生物活性劑的活性。本發(fā)明含有天然生物可降解的多糖的物品的許多有利特征被認(rèn)為是由原料提供的，尤其是由具有懸垂的偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖提供的。在一些方面，天然生物可降解的多糖具有懸垂的可聚合基團(tuán)，如烯型式不飽和基團(tuán)。在優(yōu)選的方面，這些可降解的可聚合的聚合物(大分子單體)是由天然生物可降解的多糖和含烯型不飽和基團(tuán)的化合物的反應(yīng)形成的。例如，在一些情況下，天然生物可降解的多糖與包含烯型不飽和基團(tuán)和異氰酸酯基團(tuán)的化合物反應(yīng)。在另一個(gè)合成的實(shí)例中，天然生物可降解的多糖用氧化劑處理形成多糖上的反應(yīng)性醛類，然后與含有烯型不飽和基團(tuán)和胺基的化合物反應(yīng)。多糖大分子單體表現(xiàn)出具有極好的基質(zhì)形成能力?？梢赃M(jìn)行合成來(lái)提供具有期望量的懸垂偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。已發(fā)現(xiàn)，使用具有預(yù)定量偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，允許形成具有期望的物理特性的物品。因此，在一些方面，本發(fā)明提供了具有一定量懸垂的偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，該量為每亳克天然生物可降解的多糖含約0.7微摩爾的偶合基團(tuán)。優(yōu)選每毫克天然生物可降解的多糖中偶合基團(tuán)的量是約0，3微摩爾至約0.7孩史摩爾。例如，直鏈淀粉或麥芽糖糊精可以經(jīng)受與具有烯型不飽和基團(tuán)的化合物的合成反應(yīng)來(lái)提供直鏈淀粉或麥芽糖糊精大分子單體，其具有約0.3nmol/mg至約0.7nmol/mg的烯型不飽和基團(tuán)荷載水平。在本發(fā)明的一些方面，引發(fā)劑用于促進(jìn)用于物品形成的天然生物可降解的多糖基質(zhì)的形成。引發(fā)劑可以是獨(dú)立的化合物或懸垂的化學(xué)基團(tuán)，其用于激活從天然生物可降解的聚合物上懸垂的偶合基團(tuán)并促進(jìn)眾多的天然生物可降解的聚合物的偶合。當(dāng)從天然生物可降解的多糖上懸垂的偶合基團(tuán)是可聚合的基團(tuán)時(shí)，引發(fā)劑可以用在自由基聚合反應(yīng)中促進(jìn)組合物中天然生物可降解的多糖交聯(lián)在一起。在一方面，引發(fā)劑包括氧化劑/還原劑對(duì)，"氧化還原對(duì)"，以推動(dòng)生物可降解的多糖的聚合作用。在生物可降解的物品的制備中，在生物可降解的多糖存在下，將氧化劑和還原劑合并。使用氧化還原對(duì)的一個(gè)好處是當(dāng)聯(lián)用時(shí)，氧化劑和還原劑可提供一個(gè)非常強(qiáng)的啟動(dòng)系統(tǒng)。由于其可促進(jìn)從具有相對(duì)低粘度的生物可降解的組合物形成基質(zhì)，例如，用于制備物品，所以這是有利的。這在許多應(yīng)用中是特別有用的，尤其是當(dāng)生物可降解的多糖組合物用于形成在原位聚合的物品時(shí)。例如，低粘度組合物可通過(guò)小號(hào)遞送管道，其相對(duì)易于提供可在原位聚合的組合物。本發(fā)明的一些方面，組合物的粘度在約5厘泊(cP)以上，或約10cP或更大。在本發(fā)明的其它方面，組合物的粘度為約5cP或10cP至約700cP，且在一些方面中為約5cP或10cP至約250cP，以及在一些方面中為約5cP或10cP至約45cP。在一些方面，組合物的粘度在約5cP或10cP以上，并且組合物中的生物可降解的多糖具有的平均分子量為500，000Da或更小，250,000Da或更小，IOO，OOODa或更小，或者50,000Da或更小。另外，本發(fā)明顯示了可用于原位形成可降解的基質(zhì)的氧化還原組分是生物相容的，如被細(xì)胞存活力研究所證實(shí)的。一種用于制備物品的方法可包括以下步驟(a)提供第一組合物，它包含含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和氧化還原對(duì)的第一成員(例如，氧化劑)，以及然后(b)將第一組合物和包含氧化還原對(duì)的第二成員(例如，還原劑)的第二組合物混合。在一些方面，第二組合物包含天然生物可降解的多糖。例如，第一組合物可包含(a)含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和氧化劑，并且第二組合物可包含(b)含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和還原劑。一些方面，當(dāng)?shù)谝唤M合物與第二組合物混合時(shí)，最終的組合物可能是約5cP或更大。在一些方面，本發(fā)明提供了一種在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處形成生物可降解的包含體的方法。在一些情況下，靶位點(diǎn)與脈管系統(tǒng)如動(dòng)脈瘤相關(guān)聯(lián)。所述方法包括以下步驟(a)提供包含含有聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和氧化還原對(duì)的第一成員的組合物；(b)在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)遞送第一組合物；以及(c)將所述組合物與氧化還原對(duì)的第二成員接觸。在接觸步驟中。氧化還原對(duì)使天然生物可降解的多糖的聚合開始，以在靶位點(diǎn)處形成生物可降解的包含體。在一些方面，所述的接觸步驟包括遞送包含氧化還原對(duì)第二成員的第二組合物。在靼位點(diǎn)處混合將第一組合物和第二組合物混合導(dǎo)致氧化還原反應(yīng)和通過(guò)可聚合的基團(tuán)交聯(lián)天然生物可降解的多糖，由此形成生物可降解的包含體。在一些方面，在所述接觸的步驟中，被成形用于遞送至靶位點(diǎn)的物品與氧化還原對(duì)的第二成員結(jié)合。一些方面，所述物品選自線圏、絲和線。在一些方面，如為了動(dòng)脈瘤靶位點(diǎn)的治療，所述物品可選自被置于動(dòng)脈瘤之內(nèi)或附近的物品。第二成員可能是可從物品釋放或不釋放的氧化劑。在接觸步驟中，天然生物可降解的多糖的聚合形成生物可降解的包含體，其與插入動(dòng)脈瘤的物品結(jié)合而發(fā)生。與例如，神經(jīng)動(dòng)脈瘤線圏結(jié)合形成生物可降解的包含體，表示對(duì)單獨(dú)用線團(tuán)處理的顯著改善，由于動(dòng)脈瘤可用形成的基質(zhì)基本上被阻塞?？删酆系慕M合物可與常規(guī)的神經(jīng)動(dòng)脈瘤線圏一起使用，而且也可與生物可降解的物品一起使用。在一些方面，將第一組合物遞送至靶位點(diǎn)(如神經(jīng)動(dòng)脈瘤)的步驟使用直徑小于2.3french的微型導(dǎo)管(microcatheter)進(jìn)行。本發(fā)明的創(chuàng)造性天然生物可降解的多糖允許制備粘度非常低的組合物，該組合物可穿過(guò)這些小直徑微型導(dǎo)管并仍聚合形成具有希望的物理性質(zhì)的生物可降解的包含體。在其它方面，氧化還原對(duì)的第一和第二成員在組合物被遞送至靶位點(diǎn)之前混合。本發(fā)明還顯示了可在氧化還原對(duì)的第一和第二成員在天然生物可降解的多糖存在下混合之后有效的時(shí)間形成具有希望物理性質(zhì)的基質(zhì)。由于遞送組合物至靶位點(diǎn)可在沒有組合物將聚合和阻塞遞送載體的風(fēng)險(xiǎn)下進(jìn)行，這充足的準(zhǔn)備時(shí)間是有利的。此方法包括以下步驟(a)提供包含含有聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖、氧化還原對(duì)的第一成員和氧化還原對(duì)的第二成員的組合物；(b)在機(jī)體內(nèi)的靼位點(diǎn)遞送組合物；(c)讓生物可降解的包含體在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處形成。本發(fā)明提供了可在與氧化還原對(duì)的成員結(jié)合后約20秒至約10分鐘的時(shí)間段內(nèi)形成具有半堅(jiān)固或軟凝膠性質(zhì)的基質(zhì)的組合物。在一些方面，可聚合的組合物還可包括促-纖維變性(pro-fibrotic)劑。包括促-纖維變性劑的生物可降解的包含體可在包含體附近促進(jìn)快速且局限的纖維變性反應(yīng)。這導(dǎo)致與包含體相關(guān)的凝固因子的蓄積和血纖蛋白凝塊的形成。依次地，這提高了動(dòng)脈瘤治愈的可能性。在一些方面，促-纖維變性劑是一種聚合物。該聚合物可基于天然高分子，如膠原，或者合成的聚合物。本發(fā)明的天然生物可降解多糖的使用提供了使機(jī)體希望的部位阻塞的許多優(yōu)點(diǎn)。具有希望程度的生物降解能力的包含體可通過(guò)控制多糖之間的交聯(lián)程度在原位形成。這使得可控制包含體的體內(nèi)壽命。這還可促進(jìn)愈合反應(yīng)。另外，由于與對(duì)其它生物可降解的聚合物常見的主體侵蝕相反，包含體通過(guò)表面侵蝕降解。依次地，這通過(guò)消除包含體的降解微粒的可能性提高了安全性，所述包含體使從包含體形成的部位至機(jī)體的不同部位發(fā)生栓塞。此外，在原位過(guò)程期間從靶位點(diǎn)失去的未聚合的材料在第二部位被分解成為無(wú)害的產(chǎn)物。所述氧化劑可選自無(wú)機(jī)或有機(jī)氧化劑，包括酶類；所述還原劑可選自無(wú)機(jī)或有機(jī)還原劑，包括酶類。示范性的氧化劑包括過(guò)氧化物，包括過(guò)氧化氬，金屬氧化物和氧化酶，如葡萄糖氧化酶。示范性的還原劑包括正電性元素金屬如Li、Na、Mg、Fe、Zn、Al的鹽和衍生物，以及還原酶。在一方面，當(dāng)與氧化劑混合時(shí)，所述還原劑以2.5mM或更高的濃度存在于組合物中。其它試劑，如過(guò)硫酸的金屬或銨鹽，可存在于組合物中，以促進(jìn)生物可降解的多糖的聚合作用。因此，使用氧化還原聚合作用形成的物品，如生物可降解的包含體，可包含眾多的通過(guò)聚合基團(tuán)締合的天然生物可降解的多糖、還原的氧化劑和氧化的還原劑。本發(fā)明還提供了另一種制備生物可降解的并能釋放生物活性劑的物品的方法。物品可通過(guò)包括以下步驟的方法形成使(a)包含第一偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖與(b)包含與第一偶合基團(tuán)反應(yīng)的第二偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，以及(c)生物活性劑混合。當(dāng)試劑(a)和(b)反應(yīng)以將天然生物可降解的多糖連接在一起形成物品時(shí)，所述物品可被部分或完全形成，其包括試劑(c)，生物活性劑。在一些方面，本發(fā)明利用生物可降解的微粒的用途，所述微粒包含生物活性劑和具有懸垂的偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉和麥芽糖糊精。微粒還可包括在由天然生物可降解的多糖形成的物品中。例如，微粒可被包括在由本發(fā)明的天然生物可降解的多糖形成的可植入的醫(yī)療物品中，或者可包括在原位形成的物品中。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了制備封閉劑材料的組合物和方法，所述封閉劑材料特別適用于連結(jié)具有多孔表面的可植入的醫(yī)療物品，如移植物、貼片和傷口敷料。在一些方面，本發(fā)明的組合物可以用于制備可植入的醫(yī)療物品的封閉劑涂層，特別是可植入的含多孔表面的醫(yī)療物品。封閉劑涂層可在接近涂敷的物品的表面上提供體液如血液的移動(dòng)的屏障。例如，通過(guò)形成緊密的封閉物，基于天然生物可降解的多糖的封閉劑涂層可以在物品表面提供止血。逐漸地，隨著封閉劑涂層被參與組織修復(fù)的細(xì)胞和其它因子取代，封閉劑涂層中的天然生物可降解的多糖降解，并形成組織層。在降解的過(guò)程中，天然生物可降解的多糖的降解產(chǎn)物如天然存在的單-或二糖例如葡萄糖，從封閉劑涂層中釋放，其被認(rèn)為是理想的體內(nèi)降解產(chǎn)物，因?yàn)槠湓隗w內(nèi)常常發(fā)現(xiàn)而且在降解/浸潤(rùn)的過(guò)程中還可以被參與組織修復(fù)的細(xì)胞利用。逐漸地，浸潤(rùn)的組織生長(zhǎng)代替了含天然生物可降解的多糖的封閉劑涂層的功能。本發(fā)明的另一個(gè)特別的優(yōu)點(diǎn)是，葡萄糖的釋放降低了天然生物可降解的多糖降解和組織浸潤(rùn)的過(guò)程將促進(jìn)強(qiáng)的炎癥反應(yīng)的可能性。這是因?yàn)榛谔烊簧锟山到獾亩嗵堑姆忾]劑涂層可以降解成非抗原性的或具有低抗原性的物質(zhì)。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是降解產(chǎn)物不含可以引起疾病的其它物質(zhì)，如潛在地存在于從動(dòng)物中得到的制品(如牛膠原制品)的孩吏生物、病毒或朊病毒物質(zhì)。本發(fā)明的封閉劑組合物，包含天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉或麥芽糖糊精聚合物，可以偶合在一起在醫(yī)療物品上形成基質(zhì)(至少是封閉劑涂層的一部分)，可以包含生物活性劑，隨著封閉劑涂層降解，釋放該生物活性劑。在一些方面，本發(fā)明提供了生物可降解的封閉劑組合物，它含有(i)含偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，以及(ii)引發(fā)劑，其中偶合基團(tuán)能夠被引發(fā)劑激活并促進(jìn)眾多天然生物可降解的多糖的偶合。優(yōu)選天然生物可降解的多糖是聚合物如直鏈淀粉或麥芽糖糊精。在一些方面，封閉劑組合物還可以包含生物活性劑。引發(fā)劑可獨(dú)立于天然生物可降解的多糖，懸垂在天然生物可降解的多糖聚合物上，或既懸垂在天然生物可降解的多糖聚合物上，又獨(dú)立于天然生物可降解的多糖聚合物。因此，本發(fā)明還提供了制備具有封閉劑涂層的表面的方法。封閉劑涂敷的表面在醫(yī)療物品或具有多孔表面的物品上制得。該方法包括以一步或多步在表面上處置以下的試劑(a)引發(fā)劑，以及(b)含偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。在一些方面，生物活性劑也被處置于表面上。在一個(gè)優(yōu)選的方面，生物活性劑是促血栓形成因子或促凝血因子。在這些方面，在組分被處置于表面上之后，激活引發(fā)劑來(lái)偶合存在于組合物中的天然生物可降解的多糖，由此在含生物活性劑的表面上形成天然生物可降解的多糖涂層。在激活的步驟中，天然生物可降解的多糖接觸引發(fā)劑，引發(fā)劑被激活促進(jìn)兩個(gè)或更多個(gè)天然生物可降解的多糖通過(guò)它們的偶合基團(tuán)來(lái)偶合。在優(yōu)選的方面，天然生物可降解的多糖包括可聚合的基團(tuán)如烯型不飽和基團(tuán)，并且引發(fā)劑能夠引發(fā)可聚合的基團(tuán)的自由基聚合反應(yīng)。發(fā)明詳述本文描述的本發(fā)明的實(shí)施方案不打算是窮盡的或也不將本發(fā)明限制為以下的詳細(xì)說(shuō)明中公開的精確形式。相反地，選擇和描述這些實(shí)施方案，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以理解和領(lǐng)會(huì)本發(fā)明的原理和實(shí)施。通過(guò)引用將本文提及的所有出版物和專利并入本文。提供本文公開的出版物和專利僅僅是為了它們的公開。在本文中不應(yīng)將任何東西解釋為承認(rèn)發(fā)明人沒有將任何出版物和/或?qū)＠ㄔ诒疚囊玫娜魏纬霭嫖锖?或?qū)＠崆暗臋?quán)利。在一方面，本發(fā)明提供了制備生物可降解的物品如醫(yī)療植入物或在體內(nèi)形成的基質(zhì)的方法。生物可降解的物品還可用于釋放生物活性劑，并且在這種方法中可作為釋放生物活性劑的植入物或儲(chǔ)庫(kù)而起作用。在一些方面，本發(fā)明生物可降解的物品在希望的應(yīng)用可接受的期限之內(nèi)生物降解。在一些方面，生物可降解的物品是一種醫(yī)療植入物，其在植入位點(diǎn)提供機(jī)械性質(zhì)，并維持這些機(jī)械性質(zhì)直至它們不再被需要為止。這段時(shí)間過(guò)去后，醫(yī)療植入物降解至醫(yī)療植入物不再提供該性質(zhì)和生物可降解的組分可被吸收和/或由機(jī)體排泄的程度。在一些實(shí)施方案中，醫(yī)療植入物緩慢降解并以適當(dāng)?shù)乃俾兽D(zhuǎn)移壓力至周圍組織，由于一旦被醫(yī)療器械負(fù)荷時(shí)這些組織愈合并能調(diào)節(jié)壓力。所述生物可降解的物品包括含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。示范性的天然生物可降解的多糖包括直鏈淀粉和麥芽糖糊精。在本發(fā)明的再其它實(shí)施方案中，封閉劑涂層在器械上形成。封閉劑涂層包含生物可降解的基質(zhì)和任選包含一種或多種生物活性劑如促血栓形成劑。本發(fā)明的封閉劑涂層可以(至少最初)在多孔的表面上提供屏障，其在體內(nèi)不能透過(guò)流體。逐漸地，封閉劑涂層降解，其功能由浸潤(rùn)多孔表面的組織代替。因此，封閉劑涂層具有特殊的性質(zhì)，如生物可降解性和相對(duì)的不滲透性(即，相對(duì)于封閉劑涂層的降解)。封閉劑涂層還可以是順應(yīng)性和/或共形的(conformal)，并可以具有如柔性、彈性和可彎曲性等性質(zhì)。如本文所使用的，不可滲透的，與封閉劑涂層的功能有關(guān)而使用的，是指大量液體或流體通過(guò)與封閉劑涂層締合的基底的傳送顯著地減少。例如，封閉劑涂層可以對(duì)遞送血液不可滲透。當(dāng)基于天然生物可降解的多糖的封閉劑涂層降解并被組織所代替時(shí)，可以維持不可滲透性。如本文所涉及的，"天然生物可降解的多糖，，是指非合成的多糖，其能夠被酶降解，但是通常是非酶水解穩(wěn)定的。天然生物可降解的多糖包括多糖和/或多糖衍生物，其可以從天然源如植物或動(dòng)物中獲得。天然生物可降解的多糖包括由天然生物可降解的多糖加工或修飾的任何多糖(例如，麥芽糖糊精是由淀粉加工的天然生物可降解的多糖)。示范性的天然生物可降解的多糖包括直鏈淀粉、麥芽糖糊精、環(huán)糊精、聚糖醇、透明質(zhì)酸、淀粉、葡聚糖、肝素、硫酸軟骨素、疏酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、硫酸角質(zhì)素、硫酸葡聚糖、多硫酸戊聚糖和脫乙酰殼多糖。優(yōu)選的多糖是幾乎沒有或沒有分支的低分子量的聚合物，如衍生自淀粉制品和/或在其中發(fā)現(xiàn)的聚合物，如直鏈淀粉和麥芽糖糊精。因此，天然生物可降解的多糖可以是基本上非支鏈的或非支鏈的聚(吡喃型葡萄糖)聚合物。因?yàn)橹辨湹矸酆望溠刻呛酆衔锏奶厥庑в?，具有平均分子?00,000Da或更小、250,000Da或更小、IOO，OOODa或更小或50,000Da或更小的天然生物可降解的多糖是優(yōu)選的。具有平均分子量500Da或更大的天然生物可降解的多糖也是優(yōu)選的。對(duì)于天然生物可降解的多糖，特別優(yōu)選的大小范圍是約1000Da至約10,000Da。特定分子量的天然生物可降解的多糖可以商業(yè)上購(gòu)得或可以制備。使用特定大小范圍的天然生物可降解的多糖的決定可取決于多因素，如組合物的物理特征(例如，粘度)、期望的基質(zhì)的降解速率、組合物中存在的其它任選部分，例如生物活性劑，等等。如本文所使用的，"直鏈淀粉"或"直鏈淀粉聚合物"是指具有重復(fù)吡喃型葡萄糖單元的線性聚合物，所述單元通過(guò)a-l，4鍵連結(jié)。一些直鏈淀粉聚合物可以具有非常少量的通過(guò)a-l，6鍵連接的分支(約少于鍵的0.5%)，但是仍證明了與線性(無(wú)支鏈的)直鏈淀粉聚合物具有相同的物理性質(zhì)。通常衍生自植物源的直鏈淀粉聚合物具有約lxl06Da或更小的分子量。相比較，支鏈淀粉是具有重復(fù)吡喃型葡萄糖單元的支鏈聚合物，所述單元通過(guò)a-l，4鍵連結(jié)形成線性部分，并且線性部分通過(guò)a-l，6鍵連結(jié)在一起。分支點(diǎn)鍵通常大于總鍵的1%，通常為總鍵的4%-5%。一般衍生自植物源的支鏈淀粉具有約1x107Da或更大的分子量。直鏈淀粉可從多種來(lái)源獲得，或存在于多種來(lái)源中。通常，直鏈淀粉從非動(dòng)物源獲得，如植物源。在一些方面，直鏈淀粉的純化制品用作制備具有偶合基團(tuán)的直鏈淀粉聚合物的原料。在其它方面，作為原料，直鏈淀粉可以用在含其它多糖的混合物中。例如，一些方面，具有高直鏈淀粉含量的淀粉制品、純化的直鏈淀粉、合成制備的直鏈淀粉或富集的直鏈淀粉制品可以用于制備含有偶合基團(tuán)的直鏈淀粉。在淀粉源中，直鏈淀粉通常與支鏈淀粉一起存在，支鏈淀粉是支化多糖。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選使用含直鏈淀粉的組合物，如果支鏈淀粉存在于組合物中，其中直鏈淀粉以大于支鏈淀粉的量存在于組合物中。例如，在一些方面，具有高直鏈淀粉含量的淀粉制品、純化的直鏈淀粉、合成制備的直鏈淀粉或富集的直鏈淀粉制品可以用于制備含有偶合基團(tuán)的直鏈淀粉聚合物。在一些實(shí)施方案中，組合物包含含有直鏈淀粉的多糖的混合物，其中在多糖混合物中直鏈淀粉的含量按重量計(jì)是50%或更多、60%或更多、70%或更多、80%或更多，或85%或更多。在其它實(shí)施方案中，組合物包含含有直鏈淀粉和支鏈淀粉的多糖的混合物，其中多糖混合物中支鏈淀粉的含量是30%或更少、或15%或更少。在一些情況下，在當(dāng)前的發(fā)明中，使用非退化的淀粉如蠟質(zhì)的淀粉可能是令人期望的。通過(guò)用支鏈淀粉酶處理淀粉，淀粉中存在的支鏈淀粉量還可以減少，支鏈淀粉酶分裂a(bǔ)-l，6鍵，導(dǎo)致支鏈淀粉去支鏈成為直鏈淀粉。在一些情況下，可以實(shí)施合成反應(yīng)來(lái)制備含有懸垂的偶合基團(tuán)的直鏈淀粉聚合物(例如，具有懸垂的烯型不飽和基團(tuán)的直鏈淀粉)，并且富集直鏈淀粉的量或提純直鏈淀粉的步驟可以在合成之前、之中和/或之后進(jìn)行。可以使用特定大小的或特定大小的組合的直鏈淀粉。特定大小范圍的直鏈淀粉選擇可取決于應(yīng)用。在一些實(shí)施方案中，使用具有平均分子量500,000Da或更小、250,000Da或更小、100,000Da或更小、50,000Da或更小，優(yōu)選大于500Da或者優(yōu)選在約1000Da至約10,000Da范圍內(nèi)的直鏈淀粉。特定分子量的直鏈淀粉可以商業(yè)上購(gòu)得或制得。例如，具有平均分子量70、110和320的合成的直鏈淀粉可以從NakanoVinegarCo.，Ltd.(Aichi，日本)購(gòu)得。使用特定大小范圍的直鏈淀粉的決定可能取決于多因素如組合物的物理特征(例如，粘度)、期望的基質(zhì)的降解的速率、組合物中其它任選的部分的存在(例如，生物活性劑等)等等。麥芽糖糊精通常通過(guò)用熱穩(wěn)定的a-淀粉酶在溫度85-90°C水解淀粉漿直至達(dá)到需要的水解程度，然后通過(guò)再次熱處理滅活a-淀粉酶來(lái)產(chǎn)生。麥芽糖糊精可通過(guò)過(guò)濾純化，然后噴霧干燥至最終的產(chǎn)物。麥芽糖糊精通常以其右旋糖當(dāng)量(DE)值為特征，該值與根據(jù)下式定義的水解程度相關(guān)DE=MW右旋糖/數(shù)目-平均MW淀粉水解產(chǎn)物x100。已被完全水解為右旋糖(葡萄糖)的淀粉制備物具有的DE為100,而淀粉具有的DE為約0。超過(guò)0而低于100的DE是平均分子量淀粉水解產(chǎn)物的特征，并且麥芽糖糊精被認(rèn)為具有的DE低于20。各種分子量的麥芽糖糊精，例如，在約500-5000Da范圍中，是市售可得的(例如，從CarboMer，SanDiego,CA)得到。另一類經(jīng)仔細(xì)考慮的天然生物可降解的多糖是天然生物可降解的非還原性多糖。非還原性多糖可提供惰性基質(zhì)，從而改善敏感生物活性劑如蛋白質(zhì)和酶的穩(wěn)定性。非還原性多糖是指非還原性二糖(通過(guò)其端基異構(gòu)中心相聯(lián)的兩個(gè)單糖)如海藻糖(a-D-吡喃型葡萄糖基a-D-吡喃型葡萄糖苷)和蔗糖(p-D-呋喃型果糖基a-D-吡喃型葡萄糖苷)的聚合物。示范性的非還原性多糖包含可由GPC(Muscarine,Iowa)得到的聚糖醇。在另一方面，所述多糖是吡喃型葡萄糖基聚合物，如包括重復(fù)的(1—3)0-p-D-吡喃型葡萄糖基單元的聚合物。在一些方面，組合物可以包含天然生物可降解的多糖，其包括懸垂的偶合基團(tuán)之外的化學(xué)修飾。為了說(shuō)明這個(gè)方面，可以制得具有酯化的幾基的改性直鏈淀粉，并將其用于和本發(fā)明方法有關(guān)的組合物中。其它具有羥基的天然生物可降解的多糖可以相同的方式修飾。這些類型的修飾可以改變或改進(jìn)用于制造組合物的天然生物可降解的多糖的性質(zhì)，其特別適于期望的應(yīng)用。很多化學(xué)上修飾的直鏈淀粉聚合物如化學(xué)上修飾的淀粉，至少被認(rèn)為是可接受的食物添加劑。如本文所使用的，"修飾的天然生物可降解的多糖，，是指對(duì)天然生物可降解的多糖的化學(xué)修飾，其不同于通過(guò)偶合基團(tuán)或引發(fā)劑基團(tuán)提供的那些。含有偶合基團(tuán)(和/或引發(fā)劑基團(tuán))的改性直鏈淀粉聚合物可以用于本發(fā)明的組合物和方法中。為了舉例說(shuō)明這個(gè)方面，描述了改性直鏈淀粉。通過(guò)化學(xué)上修飾直鏈淀粉的羥基，改變了直鏈淀粉的物理性質(zhì)。直鏈淀粉的羥基允許溶液中直鏈淀粉聚合物之間的大量氫鍵，并可以產(chǎn)生粘性溶液，當(dāng)加熱然后冷卻溶液中的含直鏈淀粉的組合物如淀粉(退化)時(shí)，觀察到該粘性溶液。直鏈淀粉的羥基可被修飾，以減少或消除分子之間的氫鍵，由此改變?nèi)芤褐兄辨湹矸鄣奈锢硇再|(zhì)。因此，在一些實(shí)施方案中，天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉，可以包括對(duì)羥基的一種或多種修飾，其中修飾不同于由偶合基團(tuán)提供的修飾。修飾包括用乙酸酐(和己二酸)、琥珀酸酐、1-辛烯基琥珀酸酐、磷酰氯、三偏磷酸鈉、三聚磷酸鈉和一磷酸鈉酯化；用環(huán)氧丙烷醚化、用鹽酸和硫酸的酸修飾；以及用過(guò)氧化氫、過(guò)乙酸、高錳酸鉀和次氯酸鈉漂白或氧化。改性直鏈淀粉聚合物的實(shí)例包括羧曱基直鏈淀粉、羧乙基直鏈淀粉、乙基直鏈淀粉、甲基直鏈淀粉、羥乙基直鏈淀粉、羥丙基直鏈淀粉、乙酰基直鏈淀粉、氨基烷基直鏈淀粉、烷基直鏈淀粉和氧化的直鏈淀粉。其它改性直鏈淀粉聚合物包括琥珀酸酯直鏈淀粉和辛烯基琥珀酸酯直鏈淀粉。在本發(fā)明的另一方面，天然生物可降解的多糖用疏水部分修飾，以便提供具有疏水性質(zhì)的生物可降解的基質(zhì)。示范性的疏水部分包括那些前文所列出的部分，脂肪酸及其衍生物，以及C2-ds烷基鏈。多糖，如直鏈淀粉或麥芽糖糊精，可用含有疏水部分的化合物修飾，如脂肪酸酸肝。多糖的羥基基團(tuán)還可引起內(nèi)酯開環(huán)以提供懸垂的開鏈羥基酯。在一些方面，懸垂于天然生物可降解物的疏水部分具有生物活性劑的性質(zhì)。所述疏水部分可從天然生物可降解的聚合物水解并從基質(zhì)釋放以產(chǎn)生治療效應(yīng)。治療上有用的疏水部分的一個(gè)實(shí)例是丁酸，其已顯示引發(fā)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡，并被認(rèn)為對(duì)于癌癥和其它血液疾病的治療是有用的。提供治療效應(yīng)的疏水部分還可能是天然的化合物(如丁酸)。因此，含有偶合的治療劑的基質(zhì)的降解可導(dǎo)致全天然的降解產(chǎn)物。根據(jù)本發(fā)明，將包含偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖用于形成物品。其它多糖也可以存在于組合物中。例如，將兩種或更多種天然生物可降解的多糖用于形成物品。實(shí)例包括直鏈淀粉和一種或多種其它的天然生物可降解的多糖，以及麥芽糖糊精和一種或多種其它的天然生物可降解的多糖；在一個(gè)方面，組合物包含直鏈淀粉和麥芽糖糊精的混合物，任選地含有另外的天然生物可降解的多糖。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，直鏈淀粉或麥芽糖糊精是主要的多糖。在一些實(shí)施方案中，組合物包含含有直鏈淀粉或麥芽糖糊精的多糖的混合物，并且在多糖混合物中直鏈淀粉或麥芽糖糊精的含量按重量計(jì)是50%或更多、60%或更多、70%或更多，或者80%或更多，或者85%或更多。提純或富集的直鏈淀粉制品可以商業(yè)上購(gòu)得或可以采用標(biāo)準(zhǔn)的生化技術(shù)如色鐠法制得。在一些方面，可以使用高-直鏈淀粉玉米淀粉。如本文所使用的，"偶合基團(tuán)"可以包括(l)能夠形成反應(yīng)性物類的化學(xué)基團(tuán)，該反應(yīng)性物類可以與相同或相似的化學(xué)基團(tuán)反應(yīng)形成能夠使天然生物可降解的多糖偶合在一起的鍵(例如，其中引發(fā)劑可以促進(jìn)反應(yīng)性物類的形成)；或(2)—對(duì)兩種不同的化學(xué)基團(tuán)，其能夠特異性地反應(yīng)形成能夠使天然生物可降解的多糖偶合在一起的鍵。偶合基團(tuán)可以連結(jié)至任何適合的天然生物可降解的多糖，包括在本文舉例說(shuō)明的直鏈淀粉和麥芽糖糊精聚合物。關(guān)注的反應(yīng)性對(duì)包括如下表l所示的反應(yīng)基團(tuán)A和對(duì)應(yīng)的反應(yīng)基團(tuán)B。就組合物的制備而言，可以選擇源自基團(tuán)A的反應(yīng)基團(tuán)并結(jié)合第一組的天然生物可降解的多糖，可以選擇對(duì)應(yīng)的反應(yīng)基團(tuán)B并結(jié)合第二組的天然生物可降解的多糖。反應(yīng)基團(tuán)A和B可以分別表示第一和第二偶合基團(tuán)。至少一個(gè)和優(yōu)選兩個(gè)或多于兩個(gè)的反應(yīng)基團(tuán)偶合至單個(gè)的天然生物可降解的多糖聚合物。第一和第二組的天然生物可降解的多糖可以組合并反應(yīng)，例如熱化學(xué)反應(yīng)(如果需要)，以促進(jìn)天然生物可降解的多糖的偶合以及天然生物可降解的多糖基質(zhì)的形成。表l反應(yīng)基團(tuán)A反應(yīng)基團(tuán)B胺、羥基、巰基............N-氧基琥珀酰亞胺("NOS，，)*..............................^胺..............................異石克氰酸酯胺、巰基.....................溴乙酰基胺、巰基.....................氯乙酰基胺、巰基.....................碘乙酰基胺、羥基.....................酸酐醛..............................酰肼胺、羥基、羧酸............異氰酸酯胺、巰基.....................馬來(lái)酰亞胺巰基...........................。烯基砜胺還包括酰肼(R-NH-NH2)例如，適合的偶合對(duì)將是具有親電基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和具有親核基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。適合的親電-親核對(duì)的實(shí)例分別是N-羥基琥珀酰亞胺-胺對(duì)。另外的適合的對(duì)將是環(huán)氧乙烷-胺對(duì)。在一些方面，本發(fā)明的天然生物可降解的多糖包含，每個(gè)天然生物可降解的多糖中至少一個(gè)，且更典型地是多于一個(gè)的偶合基團(tuán)，其允許眾多的天然生物可降解的多糖以直鏈和/或支鏈的方式偶合。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，天然生物可降解的多糖包含兩種或更多種懸垂的偶合基團(tuán)。在一些方面，天然的生物可解的多糖上的偶合基團(tuán)是可聚合的基團(tuán)。在自由基聚合反應(yīng)中，可聚合的基團(tuán)可以使組合物中的天然生物可降解的多糖偶合在一起，借此形成生物可降解的天然生物可降解的多糖基質(zhì)。優(yōu)選的可聚合的基團(tuán)是烯型不飽和基團(tuán)。適合的烯型不飽和基團(tuán)包括乙烯基、丙烯酸酯基團(tuán)、甲基丙烯酸酯基團(tuán)、乙基丙烯酸酯基團(tuán)、2-苯基丙烯酸酯基團(tuán)、丙烯酰胺基團(tuán)、甲基丙烯酰胺基團(tuán)、衣康酸酯基團(tuán)和苯乙烯基團(tuán)。不同的烯型不飽和基團(tuán)的組合可以存在于天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉或麥芽糖糊精上。在制備含有懸垂的偶合基團(tuán)天然生物可降解的多糖時(shí)，可以采用任何適合的合成程序。適合的合成方案通常包括例如，天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉或麥芽糖糊精上羥基的反應(yīng)?？梢愿倪M(jìn)合成程序生產(chǎn)期望數(shù)量的從天然生物可降解的多糖主鏈上懸垂的偶合基團(tuán)。例如，羥基可以和含偶合基團(tuán)的化合物反應(yīng)或可以修飾與含偶合基團(tuán)的化合物反應(yīng)。使用本方法可以控制丙烯酸酯基團(tuán)的數(shù)量和/或密度，例如，通過(guò)控制反應(yīng)性部分對(duì)糖類基團(tuán)含量的相對(duì)濃度。在一些實(shí)踐模式中，生物可降解的多糖具有懸垂的偶合基團(tuán)的量為，每毫克天然生物可降解的多糖約0.7nmol的偶合基團(tuán)。在優(yōu)選的方面，每毫克天然生物可降解的多糖中偶合基團(tuán)的量是約0.3jmiol至約0.7nmo1。例如，直鏈淀粉或麥芽糖糊精可以和含丙烯酸酯基團(tuán)的化合物反應(yīng)得到直鏈淀粉或麥芽糖糊精大分子單體，其具有約0.3Hmol/mg至約0.7nmol/mg的丙烯酸酯基團(tuán)的荷載水平。如本文所使用的，"引發(fā)劑"是指能夠促進(jìn)由偶合基團(tuán)形成反應(yīng)性物類的一種化合物或多種化合物。例如，引發(fā)劑可以促進(jìn)含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖的自由基反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，引發(fā)劑是光反應(yīng)性基團(tuán)(光引發(fā)劑)，其被輻射激活。在一些實(shí)施方案中，引發(fā)劑可以是"引發(fā)劑聚合物"，其包含具有主鏈和一個(gè)或多個(gè)引發(fā)劑基團(tuán)的聚合物，所述引發(fā)劑基團(tuán)從聚合物的主鏈上懸垂。在一些方面，引發(fā)劑是一種化合物，其是光敏感的并可以被激活，以通過(guò)自由基聚合反應(yīng)來(lái)促進(jìn)直鏈淀粉聚合物的偶合。這些類型的引發(fā)劑在此被稱作為"光引發(fā)劑"。在一些方面，優(yōu)選使用光引發(fā)劑，其被光波長(zhǎng)激活，所述光波長(zhǎng)對(duì)于生物活性劑(如果其存在于組合物中)沒有或有最少的影響。光引發(fā)劑可以存在于封閉劑組合物中，獨(dú)立于直鏈淀粉聚合物或從直鏈淀粉聚合物上懸垂。在一些實(shí)施方案中，使用促進(jìn)分子內(nèi)或分子間的氫奪取反應(yīng)的基團(tuán)發(fā)生光引發(fā)作用?？梢允褂眠@種引發(fā)系統(tǒng)，無(wú)需另外的能量轉(zhuǎn)移接納體，并利用非特異性氫奪取，但是更常見的是與能量轉(zhuǎn)移接納體，通常為叔胺一起使用，其導(dǎo)致氨基烷基和羰游基的形成。表現(xiàn)出氫奪取反應(yīng)性并在聚合引發(fā)系統(tǒng)中有用的分子的實(shí)例包括二苯曱酮、噻噸酮和樟腦醌的類似物。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，光引發(fā)劑包括一種或多種帶電基團(tuán)。帶電基團(tuán)的存在可以增加含水系統(tǒng)中光引發(fā)劑(其可以含光反應(yīng)性基團(tuán)如芳基酮)的溶解度，由此提供了改良的組合物。適合的帶電基團(tuán)包括，例如有機(jī)酸的鹽，如磺酸鹽、膦酸鹽、羧酸鹽等，以及鎮(zhèn)(onium)基團(tuán)如季銨、锍、磷鎮(zhèn)、質(zhì)子化胺等。根據(jù)這個(gè)實(shí)施方案，適合的光引發(fā)劑可以包括，例如一種或多種芳基酮光基團(tuán)，選自苯乙酮、二曱苯酮、蒽醌、蒽酮、類似蒽酮的雜環(huán)及其衍生物，以及一種或多種帶電基團(tuán)，例如在本文描述的。這些類型的水溶性光引發(fā)劑的實(shí)例已經(jīng)在美國(guó)專利6,077,698中描述了。在一些方面，光引發(fā)劑是一種化合物，其由長(zhǎng)波長(zhǎng)紫外線(uv)和可見光波長(zhǎng)激活。例如，引發(fā)劑包括光可還原或光可氧化的染料。光可還原的染料還可以結(jié)合化合物如叔胺使用。所述叔胺阻止誘導(dǎo)的三聯(lián)體產(chǎn)生染料的自由基負(fù)離子和叔胺的自由基正離子。顯現(xiàn)出光敏化作用反應(yīng)性和適用作引發(fā)劑的分子的實(shí)例包括吖啶橙、樟腦醌、乙曙紅、曙紅Y、赤蘚紅、熒光素、亞甲綠、亞曱藍(lán)、根皮紅(phloxime)、核黃素、玫瑰紅、硫堇和黃嘌呤染料。當(dāng)光敏感的生物活性劑包含在組合物時(shí)，這些類型的光引發(fā)劑的使用可以是特別有利的。因此，在再另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種組合物，它含有(i)含有烯型不飽和基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，(ii)光引發(fā)劑，選自吖啶橙、樟腦醌、乙曙紅、曙紅Y、赤蘚紅、熒光素、亞甲綠、亞甲藍(lán)、根皮紅、核黃素、玫瑰紅、硫堇和黃嘌呤染料，以及(iii)生物活性劑。還可以用熱反應(yīng)性引發(fā)劑促進(jìn)含有懸垂偶合基團(tuán)的天然生物可降解的聚合物的聚合。熱反應(yīng)性引發(fā)劑的實(shí)例包括4,4，-偶氮二(4-氰基戊酸)、2，2-偶氮二[2-(2-咪唑啉-2-基)丙烷二鹽酸鹽和苯甲酰過(guò)氧化物的類似物。還可以用氧化還原引發(fā)劑促進(jìn)含有懸垂偶合基團(tuán)的天然生物可降解的聚合物的聚合。一般地，使用有機(jī)和無(wú)機(jī)氧化劑的組合，有機(jī)和無(wú)機(jī)還原劑的組合生成聚合的基團(tuán)。氧化還原引發(fā)的描述可以在PrinciplesofPolymerization,第二版，OdianG"JohnWiley和Sons第201-204頁(yè)，(1981年)中找到。在一些情況下，引發(fā)劑可以包含在底涂層中，天然生物可降解的多糖或含有天然生物可降解的多糖的組合物可以被處置于底涂層上。例如，包括天然生物可降解的多糖的涂敷層可在包括合成聚合物的涂敷層上形成。所述合成的聚合物可能是親水聚合物，如聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(丙烯酰胺)或其共聚物。在一些方面，合成的聚合物使用光敏基團(tuán)形成，如從所述合成聚合物上懸垂的光敏基團(tuán)，其可用于將合成聚合物以共價(jià)鍵結(jié)合至物品的表面上。在一些方面，聚合引發(fā)劑是含有引發(fā)劑基團(tuán)的聚合物(本文是指"引發(fā)劑聚合物")?？梢垣@得或制備引發(fā)劑聚合物的聚合部分，其具有理想與組合物如封閉劑組合物一起使用的特定的性質(zhì)或特征。例如，引發(fā)劑聚合物的聚合部分可以含有親水或兩性的性質(zhì)，其可以包含懸垂的帶電基團(tuán)或它可具有使其與特定表面相互作用的基團(tuán)。任選地或另外地，聚合物可以改變或改善基質(zhì)的性質(zhì)，所述基質(zhì)由含有偶合基團(tuán)的直鏈淀粉聚合物形成。例如，引發(fā)劑聚合物可以改變基質(zhì)的彈性、柔性、潤(rùn)濕性或柔軟性(或其組合)。如本文所述的某些聚合物作為基質(zhì)的增塑劑是有用的，所述基質(zhì)含有天然生物可降解的多糖?？梢詫⒁l(fā)劑基團(tuán)加到這些增塑聚合物中并用在本發(fā)明的組合物和方法中。例如，在一些方面，引發(fā)劑可以是從天然生物可降解的多糖上懸垂的。因此，天然生物可降解的多糖能夠促進(jìn)可聚合基團(tuán)的活化，所述可聚合的基團(tuán)是從其它天然生物可降解的多糖上懸垂的，并促進(jìn)天然生物可降解的多糖基質(zhì)的形成。在其它情況下，引發(fā)劑聚合物的聚合部分可以包括，例如丙烯酰胺和甲基丙烯酰胺單體單元或其衍生物。在一些實(shí)施方案中，組合物包含含有光反應(yīng)性基團(tuán)和選自丙烯酰胺和甲基丙烯酰胺聚合物和共聚物的聚合部分的引發(fā)劑聚合物。在一些方面，所述引發(fā)劑包括氧化劑/還原劑對(duì)，"氧化還原對(duì)"，以推動(dòng)生物可降解的多糖的聚合作用。在這種情況中，生物可降解的多糖的聚合作用通過(guò)組合一種或多種氧化劑與一種或多種還原劑來(lái)進(jìn)行。其它化合物可包括在組合物中以促進(jìn)生物可降解的多糖的聚合作用。當(dāng)組合時(shí)，所述氧化劑和還原劑可提供特別強(qiáng)的啟動(dòng)系統(tǒng)，并可推動(dòng)從具有低粘度的組合物形成多糖的聚合基質(zhì)。具有低粘度的多糖組合物可能是由于組合物中多糖的低濃度，具有低平均分子量的多糖，或其組合所致。由具有低粘度的多糖組合物形成基質(zhì)在許多應(yīng)用中是特別有利的，尤其是在原位聚合。在本發(fā)明的一些方面，低粘度多糖組合物穿過(guò)小號(hào)遞送管道，如針或?qū)Ч?，其中氧化還原對(duì)在原位引起多糖的聚合。在本發(fā)明的一些方面，組合物的粘度在約5cP以上，或約10cP或更高。在本發(fā)明的其它方面，組合物的粘度在約5cP或10cP至約700cP，或者約5cP或10cP至約250cP，或者約5cP或10cP至約45cP。在一些實(shí)踐模式中，為了促進(jìn)組合物中的生物可降解多糖的聚合以形成基質(zhì)，將氧化劑在一種或多種生物可降解的多糖存在下加至還原劑中。例如，將包括生物可降解的多糖和還原劑的組合物加入包括氧化劑的組合物中，或者將包括生物可降解的多糖和氧化劑的組合物加入包含還原劑的組合物中。制備基質(zhì)的一種理想的方法是將包括生的組合物合并。為了描述此方法，可使用術(shù)語(yǔ)"第一組合物"和"第二組合物"。所述氧化劑可選自無(wú)機(jī)或有機(jī)氧化劑，包括酶；所述還原劑可選自無(wú)機(jī)或有機(jī)還原劑，包括酶。示范性的氧化劑包括過(guò)氧化物，包括過(guò)氧化氫和二叔丁基過(guò)氧化物，金屬氧化物和氧化酶，包括葡萄糖氧化酵。示范性的還原劑和共還原劑包括正電性元素金屬Li、Na、Mg、Fe、Zn、Al的鹽和衍生物，包括亞鐵鹽如乳酸亞鐵、葡萄糖酸鐵和乙酸亞鐵，有機(jī)酸及其衍生物如抗壞血酸、葉酸和泛酸，還原酶以及胺化合物。共還原劑的其它還原劑包括erythrobate和a-生育酚。在一些方面，所述氧化還原對(duì)包括氧化酶:還原劑組合。示范性的氧化酶:還原劑組合包括(a)羥基乙酸氧化酶:羥乙酸/L-乳酸/D-乳酸/(+)-扁桃體酸；(b)乳酸氧化酶:L-乳酸；(c)葡萄糖氧化酶:p-D-葡萄糖/2-二氧基-D-葡萄糖/6-甲基-D-葡萄糖；(d)己糖氧化酶:p-D-葡萄糖/D-半乳糖/D-甘露糖；(e)半乳糖氧化酶:D-半乳糖/乳糖；(f)L-2-羥酸氧化酶:L-2-羥酸；(g)醛氧化酶:甲醛/乙醛；(h)黃嘌呤氧化酶:嘌呤/次黃嘌呤/黃噪呤；(i)丙酮酸氧化酶:丙酮酸；(J)草酸氧化酶:草酸；(k)二氫-乳清酸-脫氫酶:L-4，5-二氫-乳清酸/NAD;(1)D-天冬氨酸氧化酶:D-天冬氨酸/D-谷氨酸；(m)L-氨基酸氧化酶:L-/2-羥基酸/L-乳酸；(n)D-氨基酸氧化酶:D.(o)單胺氧化酶:單胺/千胺/辛胺；(p)二胺氧化酶:二胺/亞精胺/酪胺；(q)醇氧化酶乙醇/曱醇；(r)糖類氧化酶:D-葡萄糖/D-吡喃型葡萄糖/D-吡喃木糖/l-山梨糖/a-D-葡萄糖酸內(nèi)酯；(s)NADH氧化酶:NADH;(t)蘋果酸氧化酶:L-蘋果酸；(u)膽固醇氧化酶:膽固醇；(v)疏醇氧化酶:石危醇；以及(w)抗壞血酸氧化酶:L-抗壞血酸。在一個(gè)實(shí)踐模式中，當(dāng)還原劑與氧化劑混合時(shí)，還原劑以約2.5mM或更高的濃度存在?；旌现?，還原劑可以例如，5mM或更高濃度存在于組合物中。其它試劑可存在于組合物中以促進(jìn)生物可降解的多糖聚合。其它促進(jìn)聚合的化合物可包括在組合物中，如過(guò)硫酸的金屬鹽或銨鹽。任選地，本發(fā)明組合物和方法可以包含可以改進(jìn)聚合效率的聚合促進(jìn)劑。有用的促進(jìn)劑的實(shí)例包括N-乙烯基化合物，特別是N-乙烯基吡咯烷酮和N-乙烯基己內(nèi)酰胺。例如，這樣的促進(jìn)劑可以基于組合物的量按重量計(jì)約0.01%至約5%的濃度使用，優(yōu)選約0.05%至約0.5%。第一和第二組合物中生物可降解的多糖的粘度可能是相同的，或者可能是不同的。通常，雖然，當(dāng)組合物具有相同或相似的粘度時(shí)，已觀察到得到了良好的混合和隨后的基質(zhì)形成。在這點(diǎn)上，如果在第一和第二聚合物中使用相同的生物可降解的聚合物，生物可降解的聚合物的濃度可以是相同的或不同的。在一些使用的方法中，為了與材料的聚合塊形成生物可降解的包含體，組合物的聚合作用在原位被促進(jìn)，如在靶位點(diǎn)。為說(shuō)明此方面，對(duì)于動(dòng)脈瘤靶位點(diǎn)的治療進(jìn)行了此方法。用本發(fā)明的生物可降解的材料填充動(dòng)脈瘤至少可使動(dòng)脈瘤穩(wěn)定，因此減少動(dòng)脈瘤由于大小進(jìn)一步增加而破裂的可能性。在此過(guò)程中，第一和第二組合物通過(guò)微型導(dǎo)管被遞送至動(dòng)脈瘤靶位點(diǎn)。微型導(dǎo)管通常具有非常小的直徑，如約5french(fr)或更小。("French大小，，通常是指導(dǎo)管外徑的單位；Fr大小X0.33=以mm表示的導(dǎo)管外徑)。在一些方面，導(dǎo)管被操控穿過(guò)其中的神經(jīng)動(dòng)脈瘤靶位點(diǎn)和脈管系統(tǒng)需要使用非常小的微型導(dǎo)管，例如具有的尺寸為約2.3french或更小，如在約1.7french至約2.3french范圍內(nèi)(市售可得，例如，從BostonScientificExcelsiorSL-10#168189)。本發(fā)明的組合物(其可在低粘度時(shí)使用以形成生物可降解的包含體)可通過(guò)這些尺寸的微型導(dǎo)管以可接受的流速遞送，而沒有堵塞導(dǎo)管管腔的風(fēng)險(xiǎn)。實(shí)際上，雙腔微型導(dǎo)管可被插入受試者的脈管系統(tǒng)中，并被操縱放置在神經(jīng)動(dòng)脈瘤靶位點(diǎn)的微型導(dǎo)管的遠(yuǎn)端。包括天然生物可降解的多糖，并且單獨(dú)地包含氧化劑和還原劑的第一和第二組合物可被遞送至動(dòng)脈瘤之內(nèi)并在其中混合?；诒景l(fā)明的可聚合組合物，已發(fā)現(xiàn)這些組合物可被遞送穿過(guò)非常小的導(dǎo)管。例如，所述組合物可被遞送通過(guò)1.7fr導(dǎo)管。(內(nèi)徑為1.7fr的導(dǎo)管是0.42mm，且外徑為0.56mm)。此外，該組合物可以非常好的流速被遞送。例如，流速可以直到約40nL/sec至約50nL/sec。鑒于此，本發(fā)明組合物的使用可使得以非常有效的方法治療通過(guò)較小的脈管系統(tǒng)可接近的動(dòng)脈瘤。在另一實(shí)踐模式中，氧化還原對(duì)的笫一和第二成員可以在組合物被遞送至靶位點(diǎn)之前混合。制備組合物，該組合物允許在組合物聚合成基質(zhì)之前混合并將組合物遞送至靶位點(diǎn)。在這些方面，優(yōu)選的氧化還原對(duì)包括選自過(guò)硫酸的金屬鹽、鉀鹽或銨鹽以及胺化合物的氧化劑，如N，N，N，，N，-四甲基乙二胺(TEMED)。希望氧化劑在組合物中以約5mg/mL或更高，約10mg/mL或更高，約15mg/mL或更高，約30mg/mL或更高的濃度存在。胺化合物，如TEMED，希望以約20c:L/mL或更高的量存在于組合物中。示范性的存在于組合物中的天然生物可降解的多糖，如聚糖醇丙烯酸酯的量為約500mg/mL或更高。將氧化還原對(duì)的成員混合后，將組合物建立進(jìn)入基質(zhì)之前過(guò)去一段時(shí)間，該基質(zhì)可具有半堅(jiān)固或溶膠的性質(zhì)。這段時(shí)間可以是約20秒或更長(zhǎng)，30秒或更長(zhǎng)，45秒或更長(zhǎng)，50秒或更長(zhǎng)，60秒或更長(zhǎng)，120秒或更長(zhǎng)，240秒或更長(zhǎng)，360秒或更長(zhǎng)，或者至多約600秒。在這段時(shí)間中，組合物可被混合，并遞送至機(jī)體中的靶位點(diǎn)，如動(dòng)脈瘤。將組合物遞送至靶位點(diǎn)后，形成生物可降解的包含體形式的基質(zhì)。盡管本發(fā)明的組合物特別適宜于通過(guò)小直徑導(dǎo)管被遞送，但是組合物也可通過(guò)較大直徑的導(dǎo)管被遞送。較大直徑的導(dǎo)管可用于將本發(fā)明的組合物遞送至泌尿生殖系統(tǒng)的一個(gè)或多個(gè)部位。被遞送至動(dòng)脈瘤的組合物的量可變化，并取決于動(dòng)脈瘤的大小?？山到獾陌w。此^;體可封閉動(dòng)脈瘤并阻止進(jìn)二步擴(kuò)大/'作為促進(jìn)聚合作用的另一種方法，包括生物可降解的多糖和氧化還原對(duì)第一成員如還原劑的組合物，可與和氧化還原對(duì)的第二成員如氧化劑結(jié)合的物品接觸。所述物品可以是醫(yī)療器械的一部分，如本文所述的器械，或者是任何一種可用于醫(yī)療操作的物品。在一些情況中，氧化還原對(duì)的第二成員可從物品釋放。第二成員可通過(guò)從物品本身擴(kuò)散釋放，例如，如果該物品用第二成員浸漬?；蛘?，第二成員可從在第二成員上形成的涂層中釋放。可降解的材料還可用于形成包括第二成員的物品。第二成員可從生物可降解的物品或者從在物品上形成的可降解的涂層釋放。物品或涂層可由如本文所述的天然生物可降解的多糖連同第二成員一起形成。在其它情況中，第二成員非釋放性地與物品結(jié)合。例如，第二成員可共價(jià)結(jié)合于物品的表面。當(dāng)將物品放置與含有天然生物可降解的多糖的組合物接觸時(shí)，氧化還原反應(yīng)可在物品表面的附近發(fā)生，并從表面?zhèn)鞑ザ嗵堑木酆献饔?，以形成與物品結(jié)合的基質(zhì)。在一些希望的實(shí)踐模式中，第二成員是有機(jī)氧化性化合物，如二叔丁基過(guò)氧化物，其被固定于物品上。在一些方面，包括天然生物可降解的多糖的組合物與屬于可植入的器械的物品結(jié)合使用。在一些情況中，可植入的器械也是阻塞器械?？芍踩氲钠餍悼稍谟糜诖龠M(jìn)機(jī)體內(nèi)任何一類靶位點(diǎn)的阻塞的方法中使用。例如，可植入的器械可被置于受試者脈管系統(tǒng)之內(nèi)的一個(gè)部位。作為另一個(gè)實(shí)例，可植入的器械可被置于受試者的泌尿生殖系統(tǒng)的一個(gè)或多個(gè)部分內(nèi)的部位(如雌性受試者的輸卵管)。組合物可用于改善可植入器械在乾位點(diǎn)的功能。例如，生物可降解的基質(zhì)可在靶位點(diǎn)與可植入的器械締合形成?？芍踩氲钠餍悼捎米鞔龠M(jìn)多糖組合物聚合的一種方法。例如，氧化還原對(duì)的成員可與可植入器械的一個(gè)或多個(gè)部位結(jié)合。所述成員可從可植入的器械釋放或不釋放。可植入的器械或其一部分，可被成形放置于維管結(jié)構(gòu)之內(nèi)(可植入的維管器械)，如在動(dòng)脈、靜脈、瘺管或動(dòng)脈瘤中。在一些情況中，可植入的器械是一種阻塞器械，選自可插入動(dòng)脈瘤中的維管阻塞線圏、絲或線。一些特殊的維管阻塞器械包括可拆卸的栓子形成線圏。在一些情況中，可植入的器械是支架?；蛘?，可植入的器械或其一部分，可被成形it置于其它機(jī)體管腔之內(nèi)，如輸卵管、膽管等。例如，可植入的器械可被放置于泌尿生殖系統(tǒng)的一個(gè)或多個(gè)部位。一些示范性的可植入的泌尿生殖器械用于節(jié)制生育，例如，通過(guò)宮腔鏡檢查(Conceptus，MountainView,CA)插入輸卵管內(nèi)的含織物的阻塞線圏。維管阻塞器械可以是絲、線圏、編織物、線等形式；一些維管阻塞器械具有螺旋纏繞形狀。示范性的線圍直徑通常為2.2mm或更小，更特別地為0.2mm~2.2mm，并可由直徑為1.25mm或更小的絲組成，例如0.125mm~1.25mm。維管阻塞器械的長(zhǎng)度通常為0.5~100厘米。盡管可使用其它金屬如錸、鈀、銠、釕、鈦、鎳和這些金屬的合金，如不銹鋼、鈦/鎳和鎳鈦記憶(nitinol)合金，但是維管阻塞器械通常由金屬如鉑、金或鎢制備。維管阻塞器械還可包括聚合物材料。特別有用的器械包括具有水凝膠性質(zhì)的聚合物。示范性的聚合物包括聚(氨基曱酸酯)、聚(丙烯酸酯)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(乙烯吡咯烷酮)、乙酸纖維素、乙烯乙烯醇共聚物、聚(丙烯腈)、聚(醋酸乙烯酯)、醋酸丁酸纖維素、硝化纖維素、氨基甲酸酯/碳酸酯的共聚物、苯乙烯/馬來(lái)酸的共聚物，或其混合物。與維管阻塞器械相結(jié)合形成生物可降解的包含體通過(guò)以下程序說(shuō)明。包括氧化劑的具有遠(yuǎn)端線圏部分的神經(jīng)動(dòng)脈瘤阻塞器械通過(guò)維管結(jié)構(gòu)前進(jìn)至動(dòng)脈瘤。微型導(dǎo)管也前進(jìn)至動(dòng)脈瘤。線圏和微型導(dǎo)管可同時(shí)前進(jìn)至動(dòng)脈瘤，或者一個(gè)可先于另一個(gè)。如果氧化劑是可釋放的，在遞送可聚合的組合物之前，線圍可于動(dòng)脈瘤中存在一段足以使氧化劑在動(dòng)脈瘤空間之內(nèi)釋放并擴(kuò)散的時(shí)間。然后，將包括多糖和還原劑的組合物通過(guò)微型導(dǎo)管遞送至動(dòng)脈瘤。線團(tuán)的遠(yuǎn)端部分可通過(guò)與GugliemiDetachableCoils(GDCs)使用的那些相似的方法與近端部分分離?？蛇f送靜電荷以將插入動(dòng)脈瘤的線團(tuán)部分分開。在另外的方法中，生物可降解的包含體可通過(guò)包括以下步驟的方法形成(a)將包含含有第一偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖的第一組合物遞送至靶位點(diǎn)以及(b)遞送包含含有第二偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖的第二組合物，該第二偶合基團(tuán)與第一偶合基團(tuán)反應(yīng)。第一和第二組合物在乾位點(diǎn)的混合導(dǎo)致生物可降解的包含體的交聯(lián)和形成。適宜的第一和第二偶合基團(tuán)在本文描述。在一些方面，可聚合的組合物還可包括促-纖維變性劑。所述促-纖維變性劑在形成的包含體附近可促進(jìn)快速和局限的纖維變性反應(yīng)。這可導(dǎo)致凝固因子的蓄積，如通過(guò)血小板的粘著，以及與包含體結(jié)合的血纖蛋白塊的形成。與由材料的聚合塊提供的空間填充功能組合，形成的凝塊可進(jìn)一步封閉動(dòng)脈瘤。由于包含體降解和在包含體附近形成組織，可發(fā)生愈合過(guò)程，其中動(dòng)脈瘤尺寸縮小或者完全消失。促纖維變性(profibrotic)劑在阻塞的動(dòng)脈瘤頸部可促進(jìn)新內(nèi)膜的形成。逐漸地，這可導(dǎo)致組織向內(nèi)生長(zhǎng)進(jìn)入基質(zhì)中，導(dǎo)致形成天然組織的包含體。這一愈合過(guò)程將使受試者很受益。促纖維變性劑可以足以在形成的包含體附近提供希望的促纖維變性反應(yīng)的量存在。本發(fā)明的一些方面，促纖維變性劑是聚合物。促纖維變性的聚合物可以是天然聚合物，如肽或蛋白質(zhì)。促纖維變性的肽或蛋白質(zhì)的實(shí)例包括，但不限于，例如凝血酶和膠原，如重組人膠原(FibroGen，SouthSanFrancisco,CA)。膠原肽和修飾的膠原可用于制備促纖維變性的基質(zhì)。其它考慮到的促纖維變性多肽在本文描述。在一個(gè)實(shí)施方案中，促纖維變性的基質(zhì)包括不是從動(dòng)物中得到的促纖維變性多肽。如本文所使用的，"動(dòng)物"是指通常用作家畜的非人類的動(dòng)物，并包括如母牛(牛)、豬(豬)和雞的動(dòng)物，膠原通常是從它們中提取的。其它有用的促纖維變性劑可包括血小板因子1-4、血小板活化因子(乙?；视兔蚜柞Ｄ憠A)；P-選擇蛋白和遺傳性假血友病因子(vWF);組織因子；纖溶酶原激活物引發(fā)劑-l;血栓烷；包括cerastotin和afaacytin的促凝血凝血酶樣酶；磷脂酶A2;032+-依賴的凝集素(0型凝集素)；結(jié)合糖蛋白受體和誘發(fā)聚集的因子，包括集蛋白(aggretin)、rhodocytin、aggregoserpentin、triwaglerin和?？舅兀惶堑鞍譏b激動(dòng)劑,包括mamushigin和alboaggregin;vWF相互作用因子，包括botrocetin、bitiscetin、cerastotin和ecarin。參與凝固級(jí)聯(lián)的包括蛋白質(zhì)因子在內(nèi)的其它因子包括凝血因子i-xin(例如，血纖蛋白原、凝血酶原、組織促凝血酶原激酶、鈣、前加速素(促凝血球蛋白)、轉(zhuǎn)變加速因子前體(血清凝血酶原轉(zhuǎn)變加速因子)、血友病因子、血漿促凝血酶原激酶組分、司徒(Stuart)因子(自凝血酶原C)、血漿促凝血酶原激酶前體(PTA)、哈格曼因子和血纖蛋白穩(wěn)定因子(FSF，血纖維形成酶，轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶原)。在一些方面，促纖維變性劑是促纖維變性的陽(yáng)離子聚合物。促纖維變性的陽(yáng)離子聚合物優(yōu)選是一種輸送足以吸引血小板和凝固因子的正電荷的聚合物。促纖維變性的陽(yáng)離子聚合物可包括，例如，伯胺基團(tuán)。示范性的陽(yáng)離子聚合物包括葡聚糖和具有胺基團(tuán)的聚亞胺，例如DEAE葡聚糖(二乙烯氨基乙基葡聚糖)和聚乙烯亞胺(PEI)。優(yōu)選的合成的促纖維變性的陽(yáng)離子聚合物是聚乙烯亞胺。示范性的天然存在的陽(yáng)離子聚合物包括曱殼質(zhì)和脫乙酰殼多糖(D-乙?；讱べ|(zhì))。促纖維變性的陽(yáng)離子聚合物可能是一種同聚物或共聚物。促-纖維變性的基質(zhì)還可包括可促進(jìn)促-纖維變性反應(yīng)的不同陽(yáng)離子聚合物的摻合物。如果使用促纖維變性的多肽，則可制備改善與多糖結(jié)合的多肽的穩(wěn)定性的生物可降解的組合物，其呈未聚合的和/或聚合形式。例如，促纖維變性的蛋白質(zhì)如膠原可被包括具有聚糖醇大分子單體的組合物中，聚糖醇大分子單體是非還原性多糖。在一些方法中，穩(wěn)定性可通過(guò)在具有半胱氨酸(cystiene)殘基的蛋白質(zhì)中維持適當(dāng)?shù)亩蜴I來(lái)提高。生物可降解的組合物還可使用促纖維變性的大分子單體制備。例如，促纖維變性的多肽大分子單體可包括在組合物中，并與天然生物可降解的多糖一起聚合。大分子單體形式的多肽可以大于天然形式的多肽的濃度被包括在組合物中。膠原大分子單體可通過(guò)各種技術(shù)，包括本文中所述的技術(shù)制備。在組合物的遞送期間，盡管進(jìn)行了維持靶位點(diǎn)處遞送的聚合物材料的努力，但是可以想象可發(fā)生一些未聚合的或者部分聚合的材料的滲漏。本發(fā)明的組合物非常有利于從靶位點(diǎn)損失的任何未聚合的或部分聚合的材料在機(jī)體的其它部位降解成為無(wú)害產(chǎn)物。防輻射透過(guò)劑可包括在天然生物可降解的多糖的組合物中。防輻射透過(guò)劑可改善機(jī)體內(nèi)植入的、插入或形成的物品的成像。例如，顯像劑可包括在使用天然生物可降解的多糖形成的生物可降解的器械中。這可改善插入機(jī)體希望的部位期間和/或之后器械的檢出。顯像劑可包括在生物可降解的基質(zhì)中，如包含體中，其在機(jī)體中的靶部位形成，如動(dòng)脈瘤。顯像劑可用于確定包含體的形成，以及與天然生物可降解的多糖接觸的組織的方面。在一些特殊的方面，防輻射透過(guò)劑包含碘。已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的多糖組合物絡(luò)合碘，由此提供一種改善機(jī)體中的物品顯像的有用方法。多糖基質(zhì)降解期間或之后碘的釋放是無(wú)毒的。防輻射透過(guò)劑可能是碘或者次級(jí)化合物，如市售可得的含碘的防輻射透過(guò)劑。防輻射透過(guò)劑也可能是放射性同位素，如I125。該放射性同位素也可作為次級(jí)功能，如與聚合的天然生物可降解的多糖接觸的組織的放射療法的治療。在一些方面，獲得包含具有懸垂的偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉或麥芽糖糊精以及生物活性劑的含水組合物，并將其用于形成物品的方法中。這種組合物可以通過(guò)將生物活性劑如水溶性小分子、蛋白質(zhì)或核酸，與天然生物可降解的多糖混合制得。根據(jù)本發(fā)明的一些方面，含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖用于形成物品。其它多糖也可以存在于組合物中。例如，組合物可以包含兩種不同的天然生物可降解的多糖或多于兩種的不同天然生物可降解的多糖。例如，在一些情況下，天然生物可降解的多糖(如直鏈淀粉或麥芽糖糊精)可以和另一種生物可降解的聚合物(即第二聚合物)或多于一種的其它生物可降解的聚合物一起存在于物品組合物中，另外的聚合物可以用于改變基質(zhì)的性質(zhì)或用作本體聚合物來(lái)改變基質(zhì)的體積。例如，其它的生物可降解的多糖可以與直鏈淀粉聚合物組合使用。這些包括透明質(zhì)酸、葡聚糖、淀粉、直鏈淀粉(例如，非衍生的)、支鏈淀粉、纖維素、黃原膠、普魯蘭、脫乙酰殼多糖、果膠、菊糖、藻酸鹽和肝素。在本發(fā)明的再其它實(shí)施方案中，將封閉劑組合物處置于多孔的表面上，所述封閉劑組合物至少包含含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖。可以選擇組合物中天然生物可降解的多糖的濃度來(lái)提供具有期望的交聯(lián)的天然生物可降解的多糖的密度的物品。在一些實(shí)施方案中，組合物中天然生物可降解的多糖的濃度可取決于組合物中所含的生物活性劑的類型或性能。在一些實(shí)施方案中，含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖存在于組合物中，濃度為5-100%(w/v)和5-50%(w/v)，在更特定的實(shí)施方案中為10-20%(w/v)，在其它的實(shí)施方案中為20-50%(w/v)。例如，在醫(yī)療植入物的形成中，天然生物可降解的多糖的濃度可較高以提供結(jié)構(gòu)上更剛性的植入物。其它聚合物或非聚合的化合物可以包含在組合物中，改變基質(zhì)的彈性、柔性、潤(rùn)濕性或粘附性(或其組合)，所述組合物可以改變或改善由含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖形成的基質(zhì)的性質(zhì)。例如，為了改善基質(zhì)的性質(zhì)，混合物中有可能包含一種增塑劑或增塑劑的組合。適合的增塑劑包括甘油、二甘醇、山梨糖醇、山梨糖醇酯、麥芽糖醇、蔗糖、果糖、轉(zhuǎn)化糖、玉米糖漿及其混合物。使用已知的標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)很容易確定增塑劑的量和類型。在本發(fā)明的一些方面，封閉劑涂層提供于醫(yī)療物品的多孔的表面上。醫(yī)療物品可以是引入哺乳動(dòng)物體內(nèi)用于預(yù)防或治療醫(yī)學(xué)病癥的任何物品，其中醫(yī)療物品包含封閉劑涂層(至少在最初)和具有封閉劑的功能。具有封閉劑涂層的醫(yī)療物品可以提供一種或多種功能，包括提供體液如血液的流動(dòng)的屏障。封閉劑涂層可以在具有多孔結(jié)構(gòu)的物品表面上形成，其中期望封閉多孔結(jié)構(gòu)，提供體液流動(dòng)的屏障。在很多情況下，期望形成這些人工的屏障來(lái)確保植入物品發(fā)揮如其在體內(nèi)的預(yù)期的功能。然而，逐漸地，期望通過(guò)用源自機(jī)體的天然物質(zhì)代替封閉劑屏障材料，使機(jī)體維持封閉劑涂層的功能。封閉劑組合物可以制備和/或以這樣的方式應(yīng)用，如用封閉劑材料填充物品表面上的孔隙。例如，這可以通過(guò)控制因素如組合物的粘度和形成涂層過(guò)程中天然生物可降解的多糖的偶合來(lái)完成。具有"多孔表面，，的物品是指有具有孔隙的表面的任何物品，可以在其上面形成基于天然生物可降解的多糖的封閉劑涂層?？紫秲?yōu)選具有這樣的物理尺寸，隨著封閉劑涂層降解，其允許組織向內(nèi)生長(zhǎng)進(jìn)入孔隙。多孔表面可以結(jié)合非-多孔表面，如可以對(duì)多孔表面提供支持的骨架。醫(yī)療物品可以包含可以提供有封閉劑涂層的多孔表面以及不用封閉劑涂層進(jìn)行涂敷的非多孔表面，其任選地用封閉劑涂層來(lái)涂敷或用不同于封閉劑涂層的材料來(lái)涂敷。多孔表面的全部或部分可以用封閉劑涂層來(lái)涂敷。在一些情況下，不同于基于天然生物可降解的多糖劑材料結(jié)合使用對(duì)于具有內(nèi)部和外部多孔表面的物品而言，可以涂敷內(nèi)部部分或外部部分，或者可以涂敷內(nèi)部和/或外部的部分。涂敷的物品的一部分或多部分可取決于涂敷的物品的特定期望應(yīng)用或功能。例如，在一些情況下，可以期望的是通過(guò)醫(yī)療物品多孔部分，流體如血液的流量有差異。還有，還可以通過(guò)在期望的位置沉積封閉劑涂層來(lái)促進(jìn)在選擇的物品部分上的組織向內(nèi)生長(zhǎng)。物品的多孔表面還可以包含材料，其是血栓形成的和/或提供表面阻塞區(qū)域(最少化或沒有血液流動(dòng)的區(qū)域)。根據(jù)應(yīng)用，獲得具有期望孔隙率程度的表面。該表面將具有足以使細(xì)胞和組織形成因子適當(dāng)?shù)叵騼?nèi)生長(zhǎng)的孔隙率程度。當(dāng)組織向內(nèi)生長(zhǎng)時(shí)，該表面可以提供不滲透流體的屏障。在很多情況下，物品的多孔表面是織物或具有織物樣的品質(zhì)。多孔表面可以由紡織品形成，其包括編織材料、針織材料和編結(jié)材料。特別有用的紡織品是編織材料，其可以使用本領(lǐng)域已知的任何適合的編織方式形成。多孔表面可以是移植物、鞘、蓋、貼片、套筒、包裹物、套等的多孔表面。這些類型的物品可以作為醫(yī)療物品本身起作用或與另外的醫(yī)療物品的部分結(jié)合使用(本文描述了其實(shí)施例)。多孔表面可以包含任何適合類型的生物材料。有用的生物材料可以編織成纖維用于制備本文所述的織物。有用的材料包括合成的加成或縮合聚合物如聚酯、聚丙烯、聚乙烯、聚氨酯和聚四氟乙烯。聚對(duì)苯二甲酸乙二酯(PET)是在織物中通常使用的聚合物。這些聚合物的摻合物也可以用于制備構(gòu)建織物的纖維如單絲或復(fù)絲纖維。通常使用的織物包括如尼龍、絨和DACRONTM等織物?？椢锟梢匀芜x地包含硬化材料來(lái)改善物品的物理性質(zhì)，例如改進(jìn)移植物的強(qiáng)度。這樣的材料可以改進(jìn)植入的物品的功能。例如，強(qiáng)化材料可以改進(jìn)移植物的不閉合(patency)。多孔表面還可以通過(guò)在這些類型聚合物中浸入夾軸針來(lái)形成。其它特別考慮到的多孔表面包括心臟貼片的表面。這些可以用于減少與心血管再造有關(guān)的縫合線出血。該貼片可以用于封閉穿透的縫合周圍。用在心臟貼片中常用的材料包括PTFE和DACRONTM。根據(jù)應(yīng)用可以選擇用作多孔表面的材料的厚度。然而，通常的是這些厚度平均約1.0mm或更薄，典型地是約0.10mm至約1.0mm。其它特別考慮到的多孔表面包括移植物，特別是具有織地結(jié)構(gòu)的外部部分的移植物?？椀亟Y(jié)構(gòu)的移植物的實(shí)例包括具有絨構(gòu)造的外部和織地結(jié)構(gòu)或光滑的內(nèi)部的那些。由編織紡織物產(chǎn)品構(gòu)建的移植物是現(xiàn)有技術(shù)中熟知的，并在眾多的文獻(xiàn)中描述了，例如美國(guó)專利第4，047，252號(hào)、美國(guó)專利第5,178,630號(hào)、美國(guó)專利第5，282，848號(hào)和美國(guó)專利第5,800,514號(hào)。天然生物可降解的多糖可以用于為廣泛多種的物品提供封閉劑涂層。如本文所使用的"物品，，以其最寬泛的意思使用，包括物體如器械。這類物品包括，但不限于維管植入物和移植物、移植物、手術(shù)器械、合成的假體；包括內(nèi)涵管的維管假體、支架移植物和維管內(nèi)支架組合；小直徑移植物、腹主動(dòng)脈動(dòng)脈瘤移植物；傷口敷料和傷口處理器械；止血屏障；網(wǎng)眼和病塞；貼片包括子宮出血貼片、房間隔缺損(ASD)貼片、卵園孔未閉(PFO)貼片、室間隔缺損(VSD)貼片和其它一般的心臟貼片；ASD、PFO和VSD閉合物；經(jīng)皮閉合器械、二尖瓣修復(fù)器械；左心耳濾過(guò)器；瓣膜成形術(shù)器械、導(dǎo)管；中央靜脈輸入導(dǎo)管、血管輸入導(dǎo)管、膿腫引流導(dǎo)管、藥物輸注導(dǎo)管、親代喂養(yǎng)導(dǎo)管、靜脈內(nèi)導(dǎo)管(例如，用抗凝血藥處理過(guò)的)、中風(fēng)治療導(dǎo)管、血壓和支架移植物導(dǎo)管；吻合器械和吻合閉合物；動(dòng)脈瘤分離器械；包括葡萄糖傳感器的生物傳感器；節(jié)育器械；乳房植入物；心臟傳感器；控制感染器械；膜；組織支架；組織有關(guān)的材料；包括腦脊液(CSF)分流器的分流器、青光眼導(dǎo)液分流器；牙科器械和牙科植入物；耳科器械如耳引流導(dǎo)管、鼓膜造孔術(shù)通氣導(dǎo)管；眼科器械；包括引流導(dǎo)管套的器械的套和套嚢部分、植入的藥物輸注導(dǎo)管套、導(dǎo)管套、縫合套；脊推和神經(jīng)學(xué)器械；神經(jīng)再生管道；神經(jīng)學(xué)導(dǎo)管；神經(jīng)貼片；矯形器械如矯形關(guān)節(jié)植入物、骨修復(fù)/增強(qiáng)器械、軟骨修復(fù)器械；泌尿科器械和尿道器械如泌尿科植入物、膀胱器械、腎臟器械和血液透析器械、結(jié)腸造口術(shù)袋附著器械；膽汁引流產(chǎn)品。在本發(fā)明的許多方面，生物可降解的物品包含一種或多種生物活性劑。生物活性劑可以分散在生物可降解的物品本身之中?；蛘撸锘钚詣┐嬖谟谖⒘Ｖ?。當(dāng)天然生物可降解的多糖和/或微粒降解時(shí)，生物活性劑可被遞送。術(shù)語(yǔ)"生物活性劑"是指肽、蛋白質(zhì)、糖類、核酸、脂質(zhì)、多糖、合成的無(wú)機(jī)或有機(jī)分子、病毒顆粒、細(xì)胞，或其組合，當(dāng)體內(nèi)給予動(dòng)物時(shí)，其產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)，所述動(dòng)物包括但不限于禽類和哺乳動(dòng)物，包括人。非限制性的實(shí)例是抗原、酶、激素、受體、肽和基因治療劑。適合的基因治療劑的實(shí)例包括(a)治療用核酸，包括反義DNA、反義RNA和干擾RNA，以及(b)編碼治療基因產(chǎn)品的核酸，包括質(zhì)粒DNA和病毒碎片，連同相關(guān)的啟動(dòng)子和輔料?？梢該饺氲钠渌肿拥膶?shí)例包括核苷、核普酸、維生素、礦物質(zhì)和類固醇類。盡管不限于這些，這可用于遞送生物活性劑，所述生物活性劑是大的親水分子如多肽(包括蛋白質(zhì)和肽)、核酸(包括DNA和RNA)、多糖(包括肝素)，以及顆粒如病毒顆粒，以及細(xì)胞。在一個(gè)方面，生物活性劑具有約IO，OOO或更大的分子量?？梢該饺氡景l(fā)明的生物可降解的基質(zhì)(天然生物可降解的基質(zhì)和/或生物可降解的微粒)中的生物活性劑的種類，包括但不限于ACE抑制劑、肌動(dòng)蛋白抑制劑、鎮(zhèn)痛藥、麻醉藥、抗高血壓藥、抗聚合酶劑、抗分泌藥、抗-AIDS物質(zhì)、抗生素、抗癌物質(zhì)、抗膽堿能藥、抗凝血?jiǎng)?、抗驚厥藥、抗抑郁藥、止吐藥、抗真菌藥、抗青光眼溶質(zhì)、抗組胺劑、抗高血壓劑、抗炎藥(如NSAIDs)、抗代謝物、抗有絲分裂物質(zhì)、抗氧化劑、抗寄生蟲藥和/或抗帕金森物質(zhì)、抗增殖劑(包括抗血管生成劑)、抗原生動(dòng)物溶質(zhì)、抗精神病物質(zhì)、解熱藥、防腐劑、鎮(zhèn)痙劑、抗病毒藥、鉀通道阻滯劑、細(xì)胞應(yīng)答調(diào)節(jié)劑、螯合劑、化療藥、多巴胺激動(dòng)劑、細(xì)胞外基質(zhì)組分、溶纖維蛋白藥、自由基清除劑、生長(zhǎng)激素拮抗劑、安眠藥、免疫抑制劑、免疫毒素、表面糖蛋白受體抑制劑、微管抑制劑、縮瞳藥、肌肉收縮藥、肌肉松弛藥、神經(jīng)毒素、神經(jīng)遞質(zhì)、阿片樣物質(zhì)、光動(dòng)力治療藥、前列腺素、再建抑制劑、他汀類、類固醇類、溶血栓藥、安定藥、血管擴(kuò)張劑和血管痙車抑制劑?？股貫楸绢I(lǐng)域公認(rèn)的并且是抑制微生物生長(zhǎng)或殺傷它們的物質(zhì)?？股氐膶?shí)例包括青霉素、四環(huán)素、氯霉素、二甲胺四環(huán)素、多西環(huán)素、萬(wàn)古霉素、桿菌肽、卡那霉素、新霉素、慶大霉素、紅霉素、頭孢菌素類、格爾德霉素及其類似物。頭孢菌素類的實(shí)例包括頭孢噻吩、頭孢匹林、頭孢唑林、頭孢氨千、頭孢拉定、頭孢羥氨千、頭孢孟多、頭孢西丁、頭孢克洛、頭孢呋辛、頭孢尼西、頭孢雷特、頭孢噢將、拉氧頭孢、頭孢唑肝、頭孢曲+>和頭孢哌酮。防腐劑被認(rèn)為是一般以非特異性方式，例如通過(guò)抑制微生物活性或破壞它們來(lái)預(yù)防或阻止微生物生長(zhǎng)或作用的物質(zhì)。防腐劑的實(shí)例包括磺胺嘧啶銀、氯己定、戊二醛、過(guò)氧乙酸、次氯酸鈉、酚類、酚類化合物、碘附化合物、季銨化合物和氯化合物?？共《舅帪槟軌蚱茐幕蛞种撇《緩?fù)制的物質(zhì)?？共《舅幍膶?shí)例包括a-甲基-P-金剛烷甲胺、羥基-乙氧基甲基鳥嘌呤、金剛烷胺、5-碘-2，-脫氧尿苷、三氟胸苷、千擾素和阿糖腺苷。酶抑制劑為抑制酶反應(yīng)的物質(zhì)。酶抑制劑的實(shí)例包括依酚氯銨、N-曱基毒扁豆堿、溴新斯的明、硫酸毒扁豆堿、他克林HC1鹽、他克林、1-羥基馬來(lái)酸鹽、碘殺結(jié)核菌素、對(duì)-溴四咪唑、10-(a-二乙氨基丙?；?-吩瘞溱鹽酸鹽、氯化卡米達(dá)佐、密膽堿-3、3，5-二硝基兒茶酚、二?；视图っ敢种苿?、二?；视图っ敢种苿﹏、3-苯基炔丙基胺、N-—甲基-L-精氨酸乙酸鹽、卡比多巴、3-羥基芐基肼HCl鹽、肼屈嗪HC1鹽、氯吉蘭HC1鹽、L(-)-司來(lái)吉蘭HC1鹽、D(+)-司來(lái)吉蘭HCl鹽、羥胺HC1鹽、磷酸異丙異煙肼、6-MeO-四氫-9H-吡啶并-吲哚、尼亞拉胺、帕吉林HC1鹽、米帕林HC1鹽、氨基脲HC1鹽、反苯環(huán)丙胺HC1鹽、N，N-二乙氨基乙基-2，2-二苯基戊酸酯鹽酸鹽、3-異丁基-l-甲基黃嘌呤、罌粟堿HC1鹽、吲哚美辛、2-環(huán)辛基-2-羥基乙胺鹽酸鹽、2，3-二氯-a-甲基節(jié)胺(DCMB)、8，9-二氯-2，3，4，5-四氫-lH-2-苯并吖庚因鹽酸鹽、對(duì)-氨魯米特、R(+)-對(duì)-氨魯米特酒石酸鹽、S(-)-對(duì)-氨魯米特酒石酸鹽、3-碘酪氨酸、L(-)-a-甲基酪氨酸、DL(-)-a-曱基酪氨酸、cetazolamide、二氯磺胺、6-羥基-2-苯并噢唑磺酰胺和別嘌醇。解熱藥為能夠緩解或減輕發(fā)熱的物質(zhì)。抗炎藥為能夠抵抗或抑制炎癥的物質(zhì)。這類藥劑的實(shí)例包括阿司匹林(水楊酸)、吲哚美辛、吲哚美辛鈉三水合物、水楊酰胺、萘普生、秋水仙堿、非諾洛芬、舒林酸、二氟尼柳、雙氯芬酸、吲哚洛芬和水楊酰胺鈉。局部麻醉藥為在局部區(qū)域中具有麻醉作用的物質(zhì)。這類麻醉藥的實(shí)例包括普魯卡因、利多卡因、丁卡因和地布卡因。細(xì)胞應(yīng)答調(diào)節(jié)劑為趨化因子，諸如血小板衍生生長(zhǎng)因子(pDGF)。其它趨化因子包括嗜中性白細(xì)胞活化蛋白、單核細(xì)胞趨化蛋白、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白、SIS(小誘導(dǎo)型分泌的)蛋白、血小板因子、血小板堿性蛋白、黑素瘤生長(zhǎng)刺激活性、表皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(a)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血小板衍生內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子和骨生長(zhǎng)/軟骨誘導(dǎo)因子(a和p)。其它細(xì)胞應(yīng)答調(diào)節(jié)劑為白細(xì)胞介素、白細(xì)胞介素抑制劑或白細(xì)胞介素受體，包括白細(xì)胞介素1至白細(xì)胞介素10;干擾素，包括a、p和y;造血因子，包括紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞集落刺激因子、巨噬細(xì)胞集落刺激因子和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子；腫瘤壞死因子，包括a和p;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(p)，包括p-l、p-2、p-3、抑制素、激活蛋白和編碼生產(chǎn)這些蛋白質(zhì)中任一種的DNA。他汀類的實(shí)例包括洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、瑞舒伐他汀和蘇普他汀。顯像劑是能夠使期望位點(diǎn)例如腫瘤在體內(nèi)成像的試劑，也可以包含在組合物中。顯像劑的實(shí)例包括含有在體內(nèi)可以探測(cè)的標(biāo)記的物質(zhì)，例如，連接熒光標(biāo)記的抗體。術(shù)語(yǔ)抗體包括全抗體或其片段。示范性的配體或受體包括抗體、抗原、抗生物素蛋白、鏈霉抗生物素、生物素、肝素、IV型膠原、蛋白質(zhì)A和蛋白質(zhì)G。示范性的抗生素包括抗生肽類。在一些方面，可以選擇生物活性劑來(lái)改善醫(yī)療器械表面的相容性(例如，與血液和/或周圍的組織)。這些物質(zhì)，在本文被稱為"生物相容性物質(zhì)"，當(dāng)締合醫(yī)療器械表面時(shí)，可以起屏蔽血液以免接觸下面的醫(yī)療器械材料的作用。適合的生物相容性物質(zhì)優(yōu)選降低血液組分粘附至醫(yī)療器械的可能性，因此減少血栓或栓子(釋放并轉(zhuǎn)移到下游的血凝塊)的形成。生物活性劑可以提供抗再狹窄效應(yīng)，如抗增殖、抗血小板和/或抗血栓形成效應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，生物活性劑可包括抗炎藥、免疫抑制劑、細(xì)胞附著因子、受體、配體、生長(zhǎng)因子、抗生素、酶、核酸等等。具有抗增殖效應(yīng)的化合物包括，例如放線菌素D、血管肽素(angi叩eptin)、c-myc反義物、紫杉醇、紫杉烷等等。具有抗血栓形成效應(yīng)的生物活性劑的典型實(shí)例包括，肝素、肝素衍生物、肝素鈉、低分子量肝素、蛭素、賴氨酸、前列腺素、阿加曲班、毛喉素、伐哌前列素、前列環(huán)素和前列環(huán)素類似物、D-苯丙氨?；?L-脯氨?；?L-精氨酰基-氯曱基酮(合成的抗凝血酶藥)、雙嘧達(dá)莫、糖蛋白1Ib/IIIa血小板膜受體抗體、輔蛋白(coprotein)Hb/IIIa血小板膜受體抗體、重組蛭素、凝血酶抑制劑(如可從Biogen商業(yè)上購(gòu)得)、硫酸軟骨素、修飾的葡聚糖、白蛋白、鏈激酶、組織血纖蛋白溶解酶原激活劑(TPA)、尿激酶、一氧化氮抑制劑等等。生物活性劑也可以是GPIIb-IIIa血小板受體復(fù)合體的抑制劑，其介導(dǎo)血小板的聚集。GPIIb/IIIa抑制劑可以包括單克隆抗體Fab片段c7E3，也稱為阿昔單抗(ReoPrc)TM)，以及合成的肽類或肽模擬物如依替巴肽(IntegrilinTM)或替羅非班(AgrastatT,。生物活性劑可以是免疫抑制劑，例如環(huán)孢霉素、CD-34抗體、依維莫司、麥考酚酸、西羅莫司、他克莫司等等。其它示范性的治療抗體包括曲妥單抗(HerceptinTM)，人源化抗-HER2單克隆抗體(moAb);阿侖單抗(CampathTM)，人源化抗-CD52moAb;吉姆單抗(MylotargTM)，人源化抗-CD33moAb;利妥昔單抗(RituxanTM)，嵌合體抗-CD20moAb;替伊莫單抗(ZevalinTM)，與P-發(fā)射性放射性同位素結(jié)合的鼠moAb;托西莫單抗(BexxarTM)，鼠抗-CD20moAb;依決可單抗(PanorexTM)，鼠抗-上皮細(xì)胞粘著分子moAb;西妥昔單抗(ErbituxTM)，嵌合體抗-EGFRmoAb;以及貝伐單抗(AvastinTM)，人源化抗-VEGFmoAb。此外，生物活性劑可以是表面粘附分子或細(xì)胞或細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子。示范性的細(xì)胞粘附分子或粘附蛋白(如細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，包括纖連蛋白、層粘連蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白、玻連蛋白、生腱蛋白、血纖蛋白原、血小板反應(yīng)蛋白、骨橋蛋白、遺傳性假血友病因子、骨唾液蛋白(及其活性結(jié)構(gòu)域)、或親水聚合物如透明質(zhì)酸、脫乙酰殼多糖或甲基纖維素，以及其它蛋白質(zhì)、糖類和脂肪酸。示范性的細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子包括N-鈣粘蛋白和P-鈣粘蛋白及其活性結(jié)構(gòu)域。示范性的生長(zhǎng)因子包括成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板衍生的生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)和其它骨生長(zhǎng)因子、以及神經(jīng)生長(zhǎng)因子。生物活性劑還可以選自單-2-(羧甲基)十六酰氨基聚(乙二醇)細(xì)單-4-苯曱酰苯曱基醚、單-3-羧基十七酰氨基聚(乙二醇)2。0單-4-苯甲酰苯甲基醚、單-2-(羧甲基)十六酰氨基四(乙二醇)單-4-苯甲酰苯甲基醚、單-3-羧基十七酰氨基四(乙二醇)單-4-苯曱酰苯甲基醚、N-[2-(4-苯甲酰苯甲氧基)乙基-2-(羧甲基)十六酰胺、N-[2-W-苯曱酰苯甲氧基)乙基-3-羧基十七酰胺、N-12-(苯曱酰苯甲氧基)十二烷基卜2-(羧甲基)十六酰胺、N-[12-(苯甲酰苯甲氧基)十二烷基l-3-羧基-十七酰胺、N-[3-(4-苯甲?；郊柞０被?丙基I-2-(羧曱基)十六酰胺、N-[3-(4-苯曱?；綍貂０被?丙基-3-羧基十七酰胺、N-(3-苯曱酰苯基)-2-(羧甲基)十六酰胺、N-(3-苯甲酰苯基)-3-羧基十七酰胺、N-(4-苯甲酰苯基)-2-(羧甲基)十六酰胺、聚(乙二醇)2()。單-15-羧基十五烷基單-4-苯甲酰苯甲基醚和單-15-羧基十五酰氨基聚(乙二醇)20。單-4-苯甲酰苯曱基醚?？紤]到的生物活性劑和/或生物活性劑的其它實(shí)例包括，雷怕霉素的類似物("rapalogs，，)、雅培的ABT-578、地塞米松、倍他米松、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春瑞濱、泊苷(poside)、替尼泊苷、柔紅霉素、多柔比星、伊達(dá)比星、蒽環(huán)類抗生素、米托蒽醌、博來(lái)霉素、普卡霉素(光神霉素)、絲裂霉素、氮芥、環(huán)磷酰胺及其類似物、美法侖、苯丁酸氮芥、氮丙啶和安乃近、烷基磺酸酯-白消安、亞硝(基)脲、卡莫司汀(BCNU)及類似物、鏈佐星、trazenes-dacarbazinine、曱氨蝶呤、氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷、巰嘌呤、硫鳥嘌呤、噴司他丁、2-氯脫氧腺苷、順鉑、卡鉑、丙卡巴肼、羥基脲、米托坦、雌激素、噻氯匹定、氯吡格雷、阿昔單抗、breveldin、皮質(zhì)醇、可的松、氟氫可的松、潑尼松、潑尼松龍、6U-甲基氫化潑尼松、曲安西龍、樸熱息痛、依托度酸、托美丁、酮咯酸、布洛芬及衍生物、甲滅酸、甲氯芬那酸、吡羅昔康、替諾昔康、保泰術(shù)》、oxyphenthatrazone、萘丁美酮、金諾芬、金硫葡糖、硫代蘋果酸金鈉、疏唑嘌呤、霉酚酸酯、血管緊張素受體阻滯劑、一氧化氮供體和mTOR抑制劑。病毒顆粒和病毒包括那些在治療上有用的病毒顆粒和病毒，如用于基因治療的病毒顆粒和病毒，還包括可促進(jìn)免疫反應(yīng)和免疫產(chǎn)生的衰減病毒顆粒和病毒。有用的病毒顆粒包括天然的和合成的類型。病毒顆粒包括，但不限于，腺病毒、桿狀病毒、細(xì)小病毒、皰滲病毒、痘病毒、腺伴隨病毒、痘苗病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒?？捎糜诟淖兓蚬δ艿钠渌锘钚詣┌ㄙ|(zhì)粒、噬菌體、粘粒、游離基因和可整合的DNA片段、反義寡核苷酸、反義DNA和RNA、修飾的DNA和RNA、iRNA、核酶、siRNA和shRNA，其它生物活性劑包括細(xì)胞如血小板、干細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、嗜酸細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、上皮細(xì)胞、樹突、內(nèi)分泌(endrocrine)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、紅細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、濾泡細(xì)胞、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、實(shí)質(zhì)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、溶菌酶-分泌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨核細(xì)胞、黑素細(xì)胞、單核細(xì)胞、肌樣細(xì)胞、頸神經(jīng)細(xì)胞、中性白細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞、卵母細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨破軟骨細(xì)胞(osteochondroclasts)、破骨細(xì)胞、骨細(xì)胞、漿細(xì)胞、精母細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞、施萬(wàn)細(xì)胞、支持細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。生物活性劑還可包括遺傳學(xué)修飾的、重組的、雜交的、突變細(xì)胞，及具有其它變化的細(xì)胞。添加劑如無(wú)機(jī)鹽、BSA(牛血清白蛋白)和無(wú)活性的有機(jī)化合物可以用于改變生物活性劑釋放的特性，其對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的。溶解或懸浮于組合物中的生物活性劑的濃度按重量計(jì)可以是約0.01至約90%，基于最終組合物的重量。特定的生物活性劑或生物活性劑的組合可以視以下的一種或多種因素而選擇受控的遞送器械的應(yīng)用、治療的醫(yī)學(xué)病癥、預(yù)期的治療持續(xù)時(shí)間、植入位點(diǎn)的特征、利用的生物活性劑數(shù)目和類型，等等。本文所述的任何聚合物組合物可以提供給醫(yī)療物品的表面，并根據(jù)醫(yī)療器械的最終應(yīng)用可以包括任何數(shù)量的所需生物活性劑。生物活性劑的綜合列表可以在默克索引(TheMerckIndex)第13版Merck&Co.(2001)中找到。生物活性劑可從SigmaAldrichFineChemicals,Milwaukee,WI商購(gòu)。在本發(fā)明的一些方面，生物活性劑可以用于促進(jìn)與基于天然生物可降解的多糖的基質(zhì)有關(guān)的血栓形成，當(dāng)期望具有封閉劑功能的涂層時(shí)，其可以具有特殊的用途。在封閉劑涂層材料降解時(shí)，包含血栓形成劑的封閉劑涂層可以促進(jìn)組織的向內(nèi)生長(zhǎng)。血栓形成的程度可以通過(guò)不同的因素來(lái)控制，包括例如，一種或多種促進(jìn)血栓形成的生物活性劑的存在。本文描述了適合的血栓形成劑。在一些方面，可以選擇血栓形成劑用于對(duì)接觸醫(yī)療物品表面的血液和/或周圍組織有作用。在一些情況下，根據(jù)影響血液成分粘附醫(yī)療物品能力的能力來(lái)選擇血栓形成劑。在一些情況下，可以選擇血栓形成劑用于促進(jìn)涂敷的制品的表面的血栓形成。因此，在一些實(shí)施方案中，封閉劑涂層可以包含血栓形成劑如凝血酶、膠原(例如(合成的)重組人膠原(FibroGen,SouthSanFrancisco,CA))、ADP或蛇毒蛋白(convulxin)，用于促進(jìn)物品的涂敷的表面的血栓形成。其它的促血栓形成因子或促凝血因子包括血小板因子1-4、血小板激活因子(乙?；视突蚜柞Ｄ憠A)；P-選擇蛋白和遺傳性假血友病因子(vWF);組織因子；血纖蛋白溶解酶原激活劑引發(fā)劑-l;血栓烷；促凝血的凝血酶樣酶類包括cerastotin和afaacytin;磷月旨酶A2;依賴C的外源凝集素(C-型外源凝集素)；結(jié)合糖蛋白受體并誘導(dǎo)聚集的因子包括aggretin、rhodocytin、aggregoserpentin、triwaglerin和海葵毒素；糖蛋白Ib激動(dòng)劑包括mamushigin和白功擊素(alboaggregin);vWF相互作用因子包括波托菌素(botrocetin)、bitiscetin、cerastotin和ecarin。包括蛋白質(zhì)因子的參與凝固級(jí)聯(lián)的其它因子，包括凝血因子i-xin(例如，血纖蛋白原、凝血酶原、組織促凝血酶原激酶、鈣、前加速素(促凝血球蛋白)、前轉(zhuǎn)化素(血清凝血酶原轉(zhuǎn)變加速因子)、抗血友病因子、血漿促凝血酶原激酶成分、司徒因子(自凝血酶原c)、血漿促凝血酶原激酶前體(PTA)、哈格曼(Hageman)因子和血纖蛋白穩(wěn)定因子(FSF、血纖維形成酶、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶原))。一些表面粘附分子或細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子還可以發(fā)揮促進(jìn)凝血或血栓形成的作用。示范性的細(xì)胞粘附分子或粘附蛋白(如細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì))包括纖連蛋白、層粘連蛋白、膠原、彈性蛋白、玻連蛋白、生踺蛋白、血纖蛋白原、血小板反應(yīng)蛋白、骨橋蛋白、遺傳性假血友病因子、骨唾液蛋白(及其活性結(jié)構(gòu)域)，或親水聚合物如透明質(zhì)酸、脫乙酰殼多糖或甲基纖維素，以及其它蛋白質(zhì)、糖類和脂肪酸。示范性的細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子包括N-鈣粘蛋白和P-鈣粘蛋白及其活性結(jié)構(gòu)域。特定的血栓形成劑或血栓形成劑與其它生物活性劑的組合可以才艮據(jù)以下的一種或多種因素而選擇醫(yī)療物品的應(yīng)用、治療的醫(yī)學(xué)病癥、預(yù)期的治療持續(xù)時(shí)間、植入位點(diǎn)的特征、利用的血栓形成/生物活性劑數(shù)目和類型、封閉劑涂層的化學(xué)組成(如直鏈淀粉、選擇的添加劑等)、形成的封閉劑涂層中偶合程度，等等。本文所述的任何封閉劑組合物可以提供給醫(yī)療物品的表面。在一些實(shí)施方案中，根據(jù)醫(yī)療物品的最終應(yīng)用，封閉劑涂層可以包含任何數(shù)量的期望的血栓形成劑/生物活性劑。封閉劑材料(含或不含血栓形成劑/生物活性劑)的涂層可以使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)療物品，覆蓋制品的全部表面，或制品表面的一部分。進(jìn)一步地，封閉劑組合物材料可以作為單一的涂敷層(含或不含有血栓形成劑/生物活性劑)，或作為多層涂敷層(含或不含血栓形成劑/生物活性劑)提供。當(dāng)在表面上提供多層涂敷層時(shí)，可以選擇每一涂敷層的材料來(lái)提供期望的效果。在本發(fā)明的一些方面，微粒用于從基于天然生物可降解的多糖的基質(zhì)中釋放生物活性劑。本發(fā)明的微?？梢园魏稳S的結(jié)構(gòu)，其可以固定在締合直鏈淀粉聚合物形成的基質(zhì)的基底上。術(shù)語(yǔ)"微粒"欲反映的是三維結(jié)構(gòu)是非常小的(但并不限于)特定的大小范圍，或者為(不限于)具有特定形狀的結(jié)構(gòu)。根據(jù)本發(fā)明，微粒通常具有5nm-100pm的直徑的尺寸。一般微粒在形狀上是球狀的或稍微是球狀的，但是也可以是其它形狀。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，生物可降解的微粒具有100nm-20Jim的直徑的尺寸，甚至更優(yōu)選地是400nm國(guó)20拜的直徑。"生物可降解的"微粒是指在微粒中存在一種或多種生物可降解的材料。生物可降解的微粒至少包含一種生物可降解的材料(如生物可降解的聚合物)和生物活性劑。當(dāng)接觸含水環(huán)境如體液時(shí)，生物可降解的微?？梢灾饾u地分解并釋放出生物活性劑。生物可降解的微粒還可以包含一種或多種生物可降解的聚合物?？梢园谏锟山到獾奈⒘Ｖ械纳锟山到獾木酆衔锏膶?shí)例包括，例如聚乳酸、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚己內(nèi)酯、聚磷腈、聚亞甲基丙二酸酯、多原酯類、聚羥基丁酸酯、聚烯烴酸酐、多肽、聚酐和聚酯等?？梢允褂蒙锟山到獾木勖氧ス簿畚?。一般來(lái)講，聚醚酯共聚物是兩親的嵌段共聚物，包括親水的嵌段(例如，聚亞烷基二醇如聚乙二醇)和疏水嵌段(例如，聚對(duì)苯二甲酸乙二酯)。嵌段共聚物的實(shí)例包括基于聚(乙二醇)和基于聚(對(duì)苯二甲酸丁二酯)的嵌段(PEG/PBT聚合物)。這些類型的多嵌段共聚物的實(shí)例描述在，例如美國(guó)專利第5,980,948號(hào)中。PEG/PBT聚合物可從OctoplusBV以商品名PolyActiveTM購(gòu)得。還可以使用具有生物可降解的分節(jié)段的分子結(jié)構(gòu)的生物可降解的共聚物，所述分子結(jié)構(gòu)包括至少兩種不同的酯鍵。生物可降解的聚合物可以是嵌段共聚物(AB或ABA型)或(AB)n型的分節(jié)段(還稱為多嵌段或無(wú)規(guī)嵌段)共聚物。這些共聚物是以兩個(gè)(或更多個(gè))階段開環(huán)共聚合，釆用在具有非常不同的酯交換敏感性的共聚物中形成鍵的兩個(gè)(或更多個(gè))環(huán)狀的酯單體形成的，例如，這些聚合物的實(shí)例描述在美國(guó)專利第5,252,701(Jarrett等人"SegmentedAbsorbableCopolymer")中。其它適合的生物可降解的聚合物材料包括生物可降解的對(duì)苯二曱酸酯共聚物，其包含含磷的鍵。含有磷酸酯鍵的聚合物是已知的，其被稱為聚(磷酸酯)、聚(膦酸酯)和聚(亞磷酸酯)。例如，參見Penczek等人，HandbookofPolymerSynthesis,第17章"Phosphorus-ContainingPolymers,"1077-1132頁(yè)(HansR.Kricheldorf編輯，1992年)以及美國(guó)專利第6，153，212、6，485，737、6,322,797、6,600,010、6,419,709號(hào)。還可以4吏用生物可降解的對(duì)苯二甲酸酯聚酯，其包含的磷酸酯鍵是亞磷酸酯。例如，適合的對(duì)苯二甲酸酯聚酯-聚亞磷酸酯共聚物描述在美國(guó)專利第6，419，709號(hào)(Mao等人"BiodegradableTerephthalatePolyester國(guó)Poly(Phosphite)Compositions,Articles,andMethodsofUsingtheSame)中。還可以使用生物可降解的對(duì)苯二甲酸酯聚酯，其包含的磷酸酯鍵是膦酸酯。例如，適合的對(duì)苯二甲酸酯聚酯-聚(膦酸酯)共聚物描述在美國(guó)專利第6，485，737和6,153,212號(hào)(Mao等人，"BiodegradableTerephthalatePolyester-Poly(Phosphonate)Compositions,ArticlesandMethodsofUsingtheSame)中。還可以使用包含的磷酸酯鍵是磷酸酯的生物可降解的對(duì)苯二甲酸酯聚酯。例如，適合的對(duì)苯二甲酸酯聚酯-聚(磷醵辱旨)共聚物描述在美國(guó)專利第6，322，797和6，600，010號(hào)(Mao等人，"BiodegradableTerephthalatePolyester-Poly(Phosphate)Polymers,Compositions,Articles,andMethodsforMakingandUsingtheSame)中。還可以使用生物可降解的多元醇酯類(參見美國(guó)專利第6，592，895號(hào))。這個(gè)專利描述了生物可降解的星狀的聚合物，其是由酯化多元醇得到?；糠謥?lái)制得，該酰基部分源自脂肪族均聚合物或共聚物聚酯。生物可降解的聚合物可以是三維交聯(lián)聚合物網(wǎng)，其含有形成具有交聯(lián)的聚合物結(jié)構(gòu)的水凝膠的疏水和親水成分，如美國(guó)專利第6，583，219號(hào)中所述的。疏水的成分是具有不飽和基團(tuán)終止末端的疏水的大分子單體，而親水的聚合物是含有羥基的多糖，所述羥基與不飽和基團(tuán)導(dǎo)入性化合物反應(yīng)。通過(guò)自由基聚合，所述成分可轉(zhuǎn)變成單相交聯(lián)聚合物網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。而在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，生物可降解的聚合物可以含有以a-氨基酸為基礎(chǔ)的聚合物(如高彈體共聚酯酰胺或共聚酯氨基甲酸酯，如在美國(guó)專利第6，503，538號(hào)中描述的)。生物可降解的微?？梢园环N或多種由天然來(lái)源獲得的生物可降解的聚合物。在一些優(yōu)選的方面，生物可降解的聚合物選自透明質(zhì)酸、葡聚糖、淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、纖維素、黃原膠、普魯蘭、脫乙酰殼多糖、果膠、菊糖、藻酸鹽和肝素?？梢允褂眠@些生物可降解的聚合物的一種或多種的組合。還可以基于存在于微粒中的生物活性劑的類型，選擇特定的生物可降解的聚合物。因此，在本發(fā)明的一些方面，生物可降解的基質(zhì)可以包含天然生物可降解的多糖基質(zhì)和含天然生物可降解的多糖的微粒。因此，在一些實(shí)施方案中，微粒包含天然生物可降解的多糖如直鏈淀粉或麥芽糖糊精。在一些實(shí)施方案中，天然生物可降解的多糖可以是微粒中主要的生物可降解的組分。在一些實(shí)施方案中，基質(zhì)和微粒兩者都含有作為組分的直鏈淀粉和/或麥芽糖糊精?；谄暇厶堑奈⒘?duì)于摻入生物活性劑如蛋白質(zhì)、肽和核酸是特別有用的。制備基于葡聚糖的微粒的實(shí)例描述在美國(guó)專利第6,303,148號(hào)中。直鏈淀粉和其它的基于淀粉的微粒的制備已經(jīng)描述在多種參考文獻(xiàn)中，例如美國(guó)專利第4，713，249號(hào)、美國(guó)專利第6，692，770號(hào)和美國(guó)專利第6，703，048號(hào)。生物可降解的聚合物及其合成也已經(jīng)描述在多種參考文獻(xiàn)中，包括Mayer，J.M和Kaplan,D.L.(1994)TrendsinPolymerScience2:第227-235頁(yè)；和Jagur誦Grodzinski，J.(1999年)ReactiveandFunctionalPolymers:BiomedicalApplicationofFunctionalPolymers,第39巻，第99-138頁(yè)。在本發(fā)明的一些方面，生物可降解的微粒含有生物學(xué)上的活性劑("生物活性劑")，如藥物或前藥。微粒可以通過(guò)建立的技術(shù)摻合多種生物活性劑來(lái)制備，例如通過(guò)溶劑蒸發(fā)(參見，例如Wichert，B.和Rohdewald，P.JMicroencapsul.(1993年)10:195)。當(dāng)生物可降解的微粒在體內(nèi)降解時(shí)，生物活性劑可以從生物可降解的微粒(微粒存在于天然生物可降解的多糖基質(zhì)中)中釋放。含有生物活性劑的微粒可在預(yù)定的時(shí)間周期來(lái)釋放期望量的活性劑。應(yīng)當(dāng)理解的是影響生物活性劑的釋放和釋放量的因素可以被微粒的大小、摻入微粒中的生物活性劑的量、用于制造微粒的可降解材料的類型、在基底上每單位面積固定的生物可降解的微粒的量等改變。微粒還可以用致孔劑如鹽、蔗糖、PEG或醇來(lái)處理，來(lái)產(chǎn)生期望面積的孔，用于摻入生物活性劑。提供于生物可降解的微粒中的生物活性劑的數(shù)量可以通過(guò)使用者來(lái)調(diào)節(jié)從而取得期望的效果。生物活性化合物可以通過(guò)適于應(yīng)用的范圍內(nèi)的微粒來(lái)提供。在另一個(gè)實(shí)例中，蛋白質(zhì)分子可以通過(guò)生物可降解的微粒提供。例如，存在的蛋白質(zhì)分子的量可以是每l微米直徑微粒有1-250,000個(gè)分子的范圍。一般地，存在于生物可降解的微粒中的生物活性劑的濃度可以根據(jù)多種因素中的任何一種或組合來(lái)選擇，包括但不限于從基質(zhì)中的釋放速率、基質(zhì)中生物活性劑的類型、期望的釋放后生物活性劑局部或全身濃度，以及生物活性劑的半衰期。在一些情況下，微粒中生物活性劑的濃度基于微粒的重量按重量計(jì)可以是約0.001%或更高，或者是約0.001%-約50%，或者更高。包含在生物可降解的微粒中的特定的生物活性劑或微粒中的生物活性劑組合可以根據(jù)以下因素選擇，如涂敷器械的應(yīng)用、治療的醫(yī)學(xué)病癥、治療的預(yù)期持續(xù)時(shí)間、植入位點(diǎn)的特征、利用的生物活性劑的數(shù)量和類型、微粒的化學(xué)組成、微粒的大小、交聯(lián)等等?？梢灾频煤羞m于疏水或親水藥物的組合物的生物可降解的微粒。例如，對(duì)于制備含有疏水藥物的生物可降解的微粒，聚合物如聚丙交酯或聚己內(nèi)酯可以是有用的；然而對(duì)于制備含有親水藥物的微粒，聚合物如直鏈淀粉或乙交酯可以是有用的。在以下方法中優(yōu)選的方面，天然生物可降解的多糖選自直鏈淀粉和麥芽糖糊精。在以下方法的其它優(yōu)選方面，天然生物可降解的多糖具有平均分子量500,000Da或更小、250,000Da或更小、100,000Da或更小或50,000Da或更小。具有平均分子量500Da或更大的天然生物可降解的多糖也是優(yōu)選的。對(duì)于天然生物可降解的多糖，特別優(yōu)選的大小范圍是約1000Da至約IO，OOODa。在激活的步驟過(guò)程中，含天然生物可降解的多糖和生物活性劑的組合物接觸引發(fā)劑，并且激活引發(fā)劑來(lái)促進(jìn)兩個(gè)或更多個(gè)天然生物可降解的多糖通過(guò)它們的偶合基團(tuán)的交聯(lián)。在優(yōu)選的方面，天然生物可降解的多糖包含可聚合的基團(tuán)，如烯型不飽和基團(tuán)，并且引發(fā)劑能夠開始可聚合的基團(tuán)的自由基聚合。這些方法還可用于原位形成基質(zhì),其中在受試者中分別處置組合物，而不是在表面上。本發(fā)明還提供了制備生物可降解的封閉劑涂層的方法，所述涂層包含含有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖；任選地將生物活性劑包含在封閉劑涂層中。在一些實(shí)施方案中，所述方法包括如下步驟(i)處置含有(a)具有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖和(b)引發(fā)劑的封閉劑組合物，并且(ii)激活引發(fā)劑來(lái)形成封閉劑涂層。本發(fā)明的這個(gè)方面包括涂層方法，其中進(jìn)行本體聚合方法。例如，在一些實(shí)施方案中，將包含聚合引發(fā)劑和具有可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖的組合物處置在表面上。然后激活引發(fā)劑以促進(jìn)本體聚合以及締合表面的天然生物可降解的多糖的偶合。在其它方面，所述方法包括如下步驟(i)在表面處置引發(fā)劑，(ii)處置具有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，(iii)激活引發(fā)劑提供含有直鏈淀粉聚合物的涂敷的組合物。天然生物可降解的多糖可以隨同其它的試劑(如果期望)一起處置在表面上。本發(fā)明的這個(gè)方面包括涂敷方法，其中進(jìn)行接枝聚合方法。例如，在一些實(shí)施方案中，首先將聚合引發(fā)劑置于表面上，然后將具有可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖置于具有引發(fā)劑的表面上。引發(fā)劑被激活來(lái)促進(jìn)自由基聚合以及表面上天然生物可降解的多糖的偶合。在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，獲得了包含具有偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖以及生物活性劑的含水組合物，并將其用于為表面提供封閉劑涂層的方法中。這種組合物可以通過(guò)混合天然生物可降解的多糖和生物活性劑，例如水溶性小分子、蛋白質(zhì)或核酸來(lái)制得。在本發(fā)明優(yōu)選的方面，生物活性劑是促凝血因子或促血栓形成因子。例如，生物活性劑可以是蛋白質(zhì)如重組膠原，或者是與血小板上的受體結(jié)合誘導(dǎo)血小板聚集的其它蛋白質(zhì)。在一些方面，本發(fā)明提供了一種通過(guò)將基質(zhì)暴露于酶中，使生物活性劑從生物可降解的基質(zhì)中釋放的方法，所述的酶引起基質(zhì)的降解。在進(jìn)行此方法的過(guò)程中，把基質(zhì)提供給受試者。基質(zhì)包含具有懸垂的偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，其中通過(guò)偶合基團(tuán)的反應(yīng)形成大量天然生物可降解的多糖的交聯(lián)基質(zhì)來(lái)形成基質(zhì)，并且其中所述基質(zhì)包括生物活性劑。然后再將基質(zhì)暴露于糖酶中，該糖酶可以促進(jìn)基質(zhì)的降解。淀粉酶的血清濃度被評(píng)估為約50-100U/L，并且玻璃體(vitreal)濃度也落在這一范圍之內(nèi)(Varela，R.A.，和Bossart，G.D.(2005)JAmVetMedAssoc226:88-92)。在一些方面，糖酶可以給予受試者來(lái)增加例如血清或基質(zhì)周圍組織中的局部濃度，以便糖酶可以促進(jìn)基質(zhì)的降解。示例性的引入糖酶的途徑包括局部注射、靜脈內(nèi)(IV)途徑等?；蛘?，通過(guò)間接增加基質(zhì)附近的糖酶濃度來(lái)促進(jìn)降解，例如通過(guò)飲食方法或通過(guò)攝取或給予增加糖酶全身水平的化合物。參照以下的非限制性的實(shí)施例，進(jìn)一步地描述本發(fā)明。對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)明顯的是，在不偏離本發(fā)明的范圍的情況下，在所述實(shí)施方案中可以進(jìn)行多種改變。因此，本發(fā)明的范圍應(yīng)當(dāng)不限于本申請(qǐng)描述的實(shí)施方案，只限于權(quán)利要求語(yǔ)言描述的實(shí)施方案和這些實(shí)施方案的等同方案。除非另有說(shuō)明，所有百分比都是按重量計(jì)。實(shí)施例1丙烯酸酯化的直鏈淀粉的合成通過(guò)在攪拌下在250mL琥珀色瓶中混合0.75g直鏈淀粉(A0512;Aldrich)和100mL的二曱亞砜(JTBaker)，制得具有可聚合的乙烯基的直鏈淀粉。一小時(shí)后，加入2mL三乙胺(TEA;Aldrich)，所得混合物在室溫下攪動(dòng)5分鐘。隨后，加入2mL的丙烯酸縮水甘油酯(Polysciences)，讓直鏈淀粉和丙烯酸縮水甘油酯在室溫?cái)嚢柘路磻?yīng)過(guò)夜。含有直鏈淀粉-丙烯酸縮水甘油酯反應(yīng)產(chǎn)物的混合物用DI水，釆用連續(xù)流動(dòng)透析來(lái)透析3天。將得到的丙烯酸酯化的直鏈淀粉(0.50g;產(chǎn)率71.4%)凍干并在室溫下干燥避光保存。實(shí)施例2MTA-PAAm的合成聚合引發(fā)劑是通過(guò)使具有光敏基團(tuán)的甲基丙烯酰胺與丙烯酰胺共聚合化制得的。首先制備甲基丙烯酰胺-氧代噻噸單體(1\-[3-(7-甲基-9-氧代噻噸J-甲酰氨基)丙基甲基丙烯酰胺(MTA-APMA))。在配備干燥管的250mL圓底燒瓶中，將按照美國(guó)專利第5，858，653號(hào)實(shí)施例2中描述方法制備得到的N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酰胺鹽酸鹽(APMA)4.53g(25.4mmo1)，懸浮于100mL無(wú)水氯仿中。按照美國(guó)專利第4,506,083號(hào)實(shí)施例D中描述的方法制備7-甲基-9-氧代噻噸-3-甲酸(MTA)。MTA-氯化物(MTA-C1)按照美國(guó)專利第6，007,833號(hào)實(shí)施例1中描述的方法制備。在冰浴中將漿液冷卻后，在攪拌下將固體MTA-Cl(7.69g;26.6mmol)加入APMA-氯仿的混懸液中。然后用1.5小時(shí)加入含7.42mL(53.2mmol)TEA的20mL氯仿中的溶液，之后緩慢升溫至室溫?；旌衔镌诟稍锕芟掠谑覝?cái)嚢?6小時(shí)。之后，將反應(yīng)用0.1NHC1洗滌并在加入少量的作為抑制劑的吩噻喚后在真空中除去溶劑。所得產(chǎn)物在四氫呋喃(THF)/甲苯(3/l)中重結(jié)晶并風(fēng)干后得到8.87g(88.7%產(chǎn)率)產(chǎn)物。MTA-APMA的結(jié)構(gòu)用NMR分析得到確認(rèn)。然后使MTA-APMA在存在2-巰基乙醇(鏈轉(zhuǎn)移劑)、N，N，N'，N'-四甲基乙二胺(共催化劑)和2，2'-偶氮二(2-甲基-丙腈)(自由基引發(fā)劑)下在DMSO中于室溫下與丙烯酰胺共聚合。溶液用氮?dú)鈬娚?0分鐘，密封，并在55'C下保溫20小時(shí)。溶液用DI水使用連續(xù)流動(dòng)透析透析3天。將得到的MTA-PAAm凍干、干燥貯存并在室溫下避光保存。實(shí)施例3溴曱基二苯甲酮(BMBP)的制備將4-曱基二苯甲酮(750g;3.82mol)加入頂部裝有攪拌器的5升Morton燒瓶中，并溶解于2850mL的苯中。然后加熱溶液至回流，接著滴加含610g(3.82mol)溴的330mL苯溶液。滴加的速度大約為1.5mL/min，并且燒瓶用90瓦特(90焦耳/sec)的g素聚光燈光照使反應(yīng)開始。在燈上使用定時(shí)器，提供10%工作周期(開5秒，關(guān)40秒)，1小時(shí)后為20%工作期(開10秒，關(guān)40秒)。在加入結(jié)束時(shí)，用氣相色譜法分析產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)其含有71%的期望的4-溴甲基二苯甲酮，8%的二溴代產(chǎn)物，以及20%未反應(yīng)的4-甲基二苯甲酮。冷卻后，反應(yīng)混合物用含10g亞硫酸氫鈉的lOOmL水溶液洗滌，接著用3X200mL的水洗滌。產(chǎn)物通過(guò)^5克酸鈉干燥，并從1:3的甲苯:己烷重結(jié)晶兩次。真空干燥后，分離出635g4-溴甲基二苯甲酮，產(chǎn)率為60%,熔點(diǎn)為112°C-114。C。核磁共振("NMR")分析(111NMR(CDCls))與期望的產(chǎn)物一致芳香族質(zhì)子7.20-7.80(m，9H)和亞甲基質(zhì)子4.48(s，2H)。所有化學(xué)位移值是用ppm表示，來(lái)自四曱基硅烷內(nèi)標(biāo)物的低磁場(chǎng)。實(shí)施例4亞乙基雙(4-苯曱酰爺基二甲銨)二溴化物的制備將N，N，N'，N'-四甲基乙二胺(6g;51.7mmol)在攪拌下溶解于225mL的氯仿中。加入如實(shí)施例3所述的固體BMBP(29.15g;106.0mmo1)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌72小時(shí)。此后，得到的固體過(guò)濾分離，并用冷氯仿漂洗白色固體。在真空中除去殘余溶劑，分離出34.4g固體，產(chǎn)率為99.7%，熔點(diǎn)為218。C-220。C。NMR分光計(jì)分析與期望的產(chǎn)物一致&NMR(DMSO-d6)芳香族質(zhì)子7.20-7.80(m，18H)，芐基亞曱基4.80(br.s，4H),胺亞甲基4.15(br.s，4H)和曱基(br.s，12H)。實(shí)施例5在PET篩網(wǎng)上形成直鏈淀粉基質(zhì)將如實(shí)施例1所述的丙烯酸酯化的直鏈淀粉(100mg)放置于8mL琥珀色瓶中。向丙烯酸酯化的直鏈淀粉中加入如實(shí)施例5所述的亞乙基雙(4-苯甲酰千基二甲銨)二溴化物(3mg)、2nL的2-NVP、以及l(fā)mL的1X磷酸鹽緩沖鹽水(1XPBS)，并在振蕩器上于37。C下混合2小時(shí)。將混合物(250nL)涂敷在3cmx2cm聚對(duì)苯二甲酸乙二酯(PET)篩網(wǎng)基底(41nm單絲直徑；GoodfellowCambridgeLtd.，英國(guó))上。將涂有直鏈淀粉混合物的PET基底放置于DymaxLightweldPC-2光照系統(tǒng)(DymaxCorp.;光強(qiáng)度6.5mW/cm2)+，距離光源15cm，照射60秒。光照后，發(fā)現(xiàn)涂布的直鏈淀粉混合物在PET基底上形成具有明顯橡膠彈性的半堅(jiān)固凝膠。實(shí)施例6l-(6-氣代-6-羥基己基)馬來(lái)酰亞胺(Mal-EACA)的制備以下列方法制備馬來(lái)酰亞胺功能性酸，并且將該酸用于實(shí)施例7。在配備頂置攪拌器和干燥管的3升三頸燒瓶中，將EACA(6-氨基己酸)，(100g;0.762mol)溶解于300mL的乙酸中。將馬來(lái)酸酐(78.5g;0.801mol)溶解于200mL的乙酸中，并加入到EACA溶液中。將混合物在沸水浴中加熱的同時(shí)攪拌l小時(shí)，使產(chǎn)生白色固體。在室溫下冷卻過(guò)夜后，過(guò)濾收集固體，用己烷漂洗兩次，每次漂洗用50mL。干燥后，(z)-4-氧代-5-氮雜-十一-2-烯二酸(化合物l)的產(chǎn)率為158-165g(90-95%)，熔點(diǎn)為160°C-165°C。NMR分光計(jì)的分析與期望的產(chǎn)物一致力NMR(DMSO-d6，400MHz)86.41，6.24(d，2H，J=12.6Hz;乙烯基質(zhì)子)，3.6-3.2(b,1H;酰胺質(zhì)子)，3.20-3.14(m，2H;鄰近氮原子的亞曱基)，2.20(t，2H，J=7.3;鄰近羰基的亞甲基)，1.53-1.44(m，4H;鄰近中心亞甲基的亞甲基)，以及1.32-1.26(m，2H;中心的亞甲基)。向裝備有頂置攪拌器、冷凝器、熱電偶、添加漏斗、惰性氣體入口以及加熱套管的2升圓底燒瓶中，加入(z)-4-氧代-5-氮雜-十一-2-烯二酸(160g;0.698mol)、氯化鋅280g(2.05mol)、以及吩噻嗪0.15g。將氯仿(CHCl3)320mL加入2升反應(yīng)燒瓶，開始攪拌混合物。用1小時(shí)加入三乙胺(480mL;348g，3.44摩爾(TEA))。之后用2小時(shí)加入氯三甲基硅烷(600mL;510g，4.69mol)。使反應(yīng)至回流，并回流整夜(16小時(shí))。冷卻反應(yīng)物，并用15分鐘將其加入裝有CHCl3(500mL)、水(l.O升)、水(300g)和12N鹽酸(240mL)的混合物的20升容器中。攪拌15分鐘后，檢測(cè)水層確保其pH小于5。分離有機(jī)層，水層用CHCl3萃取三次，每次萃取(700mL)。合并有機(jī)層，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)。然后將殘余物放置于20升的容器中。將含碳酸氫鈉(192g)的水(2.4升)溶液加入殘余物。攪拌碳酸氫鈉溶液直到固體溶解。在5分鐘內(nèi)用鹽酸溶液(26升1.1N)處理碳酸氫鹽溶液，使其pH低于2。然后將酸化的混合物用CHCb萃取兩次，每次用(1.2升和0.8升)。通過(guò)疏酸鈉千燥合并的萃取物并蒸發(fā)。殘余物用甲苯和己烷重結(jié)晶。然后過(guò)濾分離得到結(jié)晶產(chǎn)物并干燥得到85.6g白色的N-(6-氧代-6-羥基己基)馬來(lái)酰亞胺(Mal-EACA;化合物2)。NMR分光計(jì)的分析與期望的產(chǎn)物一致&NMR(CDC13，400MHz)S6.72(s，2H;馬來(lái)酰亞胺質(zhì)子)，3.52(t，2H，J=7.2Hz;鄰近馬來(lái)酰亞胺的亞甲基)，2.35(t，2H，J-7.4;鄰近羰基的亞甲基)，1.69-1.57(m，4H;鄰近中心亞甲基的亞甲基)，以及1.39-1.30(m，2H;中心亞甲基)。該產(chǎn)物的DSC(差示掃描量熱計(jì))熔點(diǎn)峰為89.9。C。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>化合物2實(shí)施例7N"5-異氰酸根合戊基)馬來(lái)酰亞胺(1Mal-C5-NCO)的制備把來(lái)自實(shí)施例6的Mal畫EACA(5.0g;23.5mmol)和CHCl3(25mL)放置于100mL圓底燒瓶中，并在冰浴中冷卻下用磁棒攪拌。加入草酰氯(10.3mL;15g;118mmo1)，使反應(yīng)回到室溫并攪拌整夜。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去揮發(fā)物，殘余物與CHCb共沸三次，每次用10mL。將中間產(chǎn)物Mal-EAC-Cl[]\-(6-氧代-6-氯己基)馬來(lái)酰亞胺(化合物3)溶解于丙酮(l&mL)中，并加入冷的(水浴)攪動(dòng)的含疊氮化鈉(2.23g;34.3mmol)的7jC(10mL)溶液中。使用水浴攪動(dòng)該混合物1小時(shí)。在水浴中撇開有機(jī)層，水層用CHCl3萃取三次，每次10mL。?；B氮化物的所有操作均在水浴溫度下進(jìn)行。合并的疊氮化物反應(yīng)的有機(jī)溶液，通過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥l小時(shí)。N-(6-氧代-6-疊氮己基)馬來(lái)酰亞胺(化合物4)溶液通過(guò)在分子篩上輕輕旋轉(zhuǎn)過(guò)夜，進(jìn)行進(jìn)一步干燥。過(guò)濾冷的疊氮化物溶液，加入回流的CHCl3中，在10分鐘內(nèi)加入5mL。疊氮化物溶液回流2小時(shí)。得到的Mal-C5-NCO(化合物5)溶液重量為55.5g，避濕保存。取異氰酸酯溶液樣品136mg，經(jīng)蒸發(fā)，并用DBB(1，4-二溴苯)7.54mg和氯仿-d,0.9mL處理if!NMR(CDC13，400MHz)56.72(s，2H)，3.55(t，2H，J=7.2Hz)，3.32(t，2H，J=6.6Hz)，1.70-1.59(m，4H)，1.44-1.35(m，2H)。NMR光語(yǔ)與期望的產(chǎn)物一致。DBB內(nèi)標(biāo)8在7.38(積分值為2.0，4H;每摩爾產(chǎn)物)用于估計(jì)溶液中Mal-C5-NCO的摩爾數(shù)。理論上計(jì)算出的溶液中的產(chǎn)物量為23.2mmo1,產(chǎn)率為98%。NCO試劑(濃度為0.42mmol/g)用于在實(shí)施例13中制備大分子單體。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>實(shí)施例83"丙烯?；鶜饣?丙酸(丙烯酸2-羧乙基酯CEA)的制備將丙烯酸(100g;1.39mol)和吩噻嗪(0.1g)放置于500mL的圓底燒瓶中。將反應(yīng)物在92。C下攪拌14個(gè)小時(shí)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上用機(jī)械真空泵于25。C下除去過(guò)量的丙烯酸。得到的殘余物的量為51.3g。CEA(化合物6)不經(jīng)純化用于實(shí)施例9。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>化合物6實(shí)施例9丙烯酸3-氯-3-氧代丙酯fCEA-C1)的制備將來(lái)自實(shí)施例8的CEA(51g;0.35mol)和二甲基甲酰胺(DMF;0.2mL;0.26mmol)溶解于CH2C13(lOOmL)中。在200mm壓力下，在水浴中，將CEA溶液緩慢地(用2個(gè)小時(shí))加入裝有草酰氯(53mL;0.61mol)、DMF(0.2mL;2.6mmo1)、蒽親(0.5g;2.4mmo1)、吩漆喚(0.1g，0.5mmol)和CH2C13(75mL)的攪拌溶液的500mL圓底燒瓶中。用干冰冷凝器將CH2Cb保留在反應(yīng)燒瓶中。加入完成后，反應(yīng)在室溫下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)溶液的重量為369g。CEA-C1(化合物7)反應(yīng)溶液樣品(124mg)用1，4-二溴苯(DBB，6.85mg)處理蒸發(fā)，并溶于CDCl3中力醒R(CDC13，400MHz)S7.38(s，4H;DBB內(nèi)標(biāo))，6.45(d，1H，J-17.4Hz)，6.13(dd，1H，J=17.4，10.4Hz)，5.90(d,1H，J=10.4Hz)，4.47(t,2H,J=5.9Hz)，3.28(t，2H，J=5.9)。光i脊與期望的產(chǎn)物一致。通過(guò)積分，0.394摩爾的DBB對(duì)應(yīng)于1.0摩爾的CEA-C1，得到計(jì)算產(chǎn)率61%。市場(chǎng)上可購(gòu)得的CEA(426g;Aldrich)按照與上述相似的程序與草酰氯(532mL)反應(yīng)。將殘余物CEA-C1(490g)采用油浴于140。C下，在18mmHg壓力下蒸餾。餾出物的溫度達(dá)到98'C，收集得150g餾出物。餾出物在120。C的最高浴溫度，18mmHg壓力下重蒸餾。餾出物的溫度為30。C至70。C，得到llg物質(zhì)。餾出物似乎為3-氯-3-氧代丙基3-氯丙酸酯。第二次蒸餾的殘余物(125g;理論值26%)用于實(shí)施例10。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>化合物實(shí)施例10丙烯酸3-疊氮基-3-氧代丙酯(CEA-N3)的制備將來(lái)自實(shí)施例9的CEA-C1(109.2g;0.671mol)溶解于丙酮(135mL)。將疊氮化鈉(57.2g;0.806mol)溶解于水(135mL)并冷卻。然后在冰浴中，在強(qiáng)烈攪拌1.5小時(shí)下將CEA-C1溶液加入冷卻的疊氮化物溶液。反應(yīng)混合物萃取兩次，每次萃取用150mL的CHC13。把CHCl3溶液通過(guò)直徑為40mm，長(zhǎng)為127mm的硅膠柱。丙烯酸3-疊氮基-3-氧代丙酯(化合物8)溶液在4。C下，通過(guò)干燥的分子篩輕輕地?cái)噭?dòng)過(guò)夜。干燥的溶液不經(jīng)純化用于實(shí)施例11。化合物8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>實(shí)施例11丙烯酸2-異氰酸根合乙酯(EA-NCO)的制備將干燥的疊氮化物溶液(得自實(shí)施例IO)緩慢加入回流的CHC13，75mL中。加入完畢后，繼續(xù)回流2小時(shí)。EA-NCO(化合物9)溶液(594.3g)避濕保存。取EA-NCO溶液樣品(283.4mg)與DBB(8.6mg)混合并蒸發(fā)。將殘余物溶解于CDC13:力NMR(CDCb，400MHz)37.38(s，4H;DBB內(nèi)標(biāo))，6.50(d，1H，J=17.3Hz),6.19(dd，1H，J=17.3,10.5Hz),5.93(d，1H，J=10.5Hz)，4.32(t，2H，J=5.3Hz)，3.59(t，2H，J=5.3)。光譜與期望EA-NCO—致。通過(guò)積分，0.165摩爾DBB對(duì)應(yīng)于1.0摩爾的EA-NCO，得到的計(jì)算濃度為110mgEA-NCO/g溶液。EA-NCO溶液用于制備實(shí)施例12中的大分子單體。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>化合物9實(shí)施例12制備麥芽糖糊精-丙烯酸酯大分子單體nVlD-丙烯酸酯)將麥芽糖糊精(MD;Aldrich;9.64g;3.2mmol;DE(右旋糖當(dāng)量)4.0國(guó)7.0)溶解于60mL的二曱亞砜(DMSO)中。計(jì)算麥芽糖糊精的大小為2,000Da-4,000Da。實(shí)施例12的EA-NCO(24.73g;19.3mmo1)溶液經(jīng)蒸發(fā)并溶解于干燥的DMSO(7.5mL)中。將這兩個(gè)DMSO溶液混合并加熱至55'C過(guò)夜。將DMSO溶液放置于透析袋(IOOOMWCO，45mm平展寬度x50cm長(zhǎng)度)中，并用水透析3天。將大分子單體溶液過(guò)濾并凍干得到7.91g白色固體。將大分子單體樣品(49mg)和DBB(4.84mg)溶解于0.8mLDMSO-d6中力NMR(DMSO-d6，400MHz)S7.38(s，4H;內(nèi)標(biāo)物積分值2.7815)，6.50，6.19，和5.93(雙重峰,3H;乙烯基質(zhì)子積分值3.0696)。計(jì)算的大分子單體的丙烯酸酯負(fù)荷量為0.616jimol/mg聚合物。實(shí)施例13制備麥芽糖糊精-馬來(lái)酰亞胺大分子單體(MD-Mal)用與實(shí)施例12相似的程序制備MD-Mal大分子單體。將實(shí)施例8的Mal-C5-NCO(0.412g;1.98mmol)溶液蒸發(fā)并溶解于干燥的DMSO(2mL)中。將MD(0,991g;0.33mmol)溶解于DMSO(5mL)。將DMSO溶液合并，并在55'C下攪動(dòng)16小時(shí)。經(jīng)透析和凍干得到0.566g產(chǎn)物。將大分子單體樣品(44mg)和DBB(2.74mg)溶解于0.8mLDMSO-d6:^NMR(DMSO-d6，400MHz)37.38(s，4H;內(nèi)標(biāo)物積分值2.3832)，6.9(s，2H;馬來(lái)酰亞胺質(zhì)子積分值1.000)。計(jì)算出的大分子單體的丙烯酸酯負(fù)荷量為0.222junol/mg聚合物。測(cè)定大分子單體制備基質(zhì)的能力(見實(shí)施例17)。實(shí)施例14使用MTA-PAAm形成麥芽糖糊精-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)將按照實(shí)施例12制備的250mgMD-丙烯酸酯放置于8mL琥珀色瓶中。向MD-丙烯酸酯中加入3mgMTA-PAAm(凍干的)、2jiL2-NVP和lmL的1X磷酸鹽緩沖鹽水(1XPBS)，提供具有250mg/mLMD-丙烯酸酯的組合物。然后將試劑在振蕩器上于37。C下混合1小時(shí)。將量為50nL的混合物放置于載玻片上，并用裝備400-500nm濾光片的EFOS100SS光照系統(tǒng)光照40秒。光照后，發(fā)現(xiàn)聚合物形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固凝膠。實(shí)施例15使用樟腦醌形成MD-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)將按照實(shí)施例12制備的250mgMD-丙烯酸酯放置于8mL的琥珀色瓶中。向MD-丙烯酸酯中加入14mg的樟腦醌-10-磺酸水合物(TorontoResearchChemicals,Inc.)、3jiL2畫NVP和lmL蒸餾水。然后將試劑在振蕩器上于37'C混合1小時(shí)。將量為50fiL的混合物放置于載玻片上，并用SmartliteIQTMLED固化光(DentsplyCaulk)光照40秒。光照后，發(fā)現(xiàn)聚合物形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固凝膠。實(shí)施例164吏用MTA-PAAm形成MD-Mal生物可降解的基質(zhì)將按照實(shí)施例13制備的250mgMD-Mal放置于8mL琥珀色瓶中。向MD-Mal中加入3mgMTA隱PAAm(凍干的)、2jiL2-NVP和lmL的1X磷酸鹽緩沖鹽水(1XPBS)。然后將試劑在振蕩器上于37。C下混合l小時(shí)。將量為50jiL的混合物放置于栽玻片上，并用裝備400-500nm濾光片的EFOS100SS光照系統(tǒng)光照40秒。光照后，發(fā)現(xiàn)聚合物形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固凝膠。實(shí)施例17生物活性劑摻入/從MD-丙烯酸酯基質(zhì)中釋放將按照實(shí)施例12制備的500mg的MD-丙烯酸酯放置于8mL的琥珀色瓶中。向MD-丙烯酸酯中加入3mg的MTA-PAAm(凍干的)、2jnL2-NVP以及l(fā)mLIX磷酸鹽緩沖鹽水(1XPBS)。然后將試劑在振蕩器上于37。C下混合1小時(shí)。向該混合物加入5mg的70kDFITC-葡聚糖或5mg10kDFITC-葡聚糖(Sigma)并渦旋30秒。將量為200pL的混合物放置在聚四氟乙烯孔板(直徑8mm，深4mm)中，并用裝備400-500nm濾光片的EFOS100SS光照系統(tǒng)照射40秒。形成的基質(zhì)是松散的，不是如實(shí)施例17中形成的MD-丙烯酸酯基質(zhì)那樣充分交聯(lián)的。照射后，將基質(zhì)轉(zhuǎn)移至于12孔板(Falcon)并放在含有0.6mL的PBS的孔中。6天每次間隔一天，從每個(gè)孔中取去150fiLPBS并放入96孔板。將剩余的850nL從樣品中除去，并用lmL新鮮PBS代替。將96孔板在分光光度計(jì)(Shimadzu)上以4卯吸光度分析FITC-葡聚糖。結(jié)果顯示至少70%可檢測(cè)的10kd或70kDFITC-葡聚糖在2天后從基質(zhì)中釋放出來(lái)。肉眼觀察顯示非量化量的10kd或70kDFITC-葡聚糖在6天后仍留在基質(zhì)中。實(shí)施例18聚糖醇-丙烯酸酯的合成將醛糖醇(PA;gPC;9.64g;3.21mmol)溶解于二甲基亞砜(DMSO)60mL中。聚糖醇的大小計(jì)算為2，000Da4，000Da。將來(lái)自實(shí)施例12的EA-NCO(24.73g;19.3mmol)溶液蒸發(fā)并溶解于干燥的DMSO(7.5mL)中。將兩份DMSO溶液混合，并加熱至55。C過(guò)夜。將DMSO溶液放置于透析袋(1000MWCO，45mm平疊寬度x50cm長(zhǎng))中，并以水透析3天。將聚糖醇大分子單體溶液過(guò)濾并凍干得到7.91g白色固體。將大分子單體的樣品(49mg)和DBB(4.84mg)溶解于0.8mLDMSO-d6:NMR(DMSO-d6，400MHz)37.38(s，4H;內(nèi)標(biāo)積分值2.7815)，6.50，6.19,以及5.93(雙重峰，3H;乙烯基質(zhì)子積分值3.0696)中。計(jì)算的大分子單體的丙烯酸酯負(fù)荷為0.616nmol/mg聚合物。實(shí)施例19利用REDOX化學(xué)形成麥芽糖糊精-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)制備兩種溶液。溶液#1如下制備將如實(shí)施例13制備的250mg的MD-丙烯酸酯置于8mL瓶中。向MD-丙烯酸酯中加入15mg葡萄糖酸鐵水合物(Sigma)、30mg抗壞血酸(Sigma)、67fiL的AMPS(Lubrizol)和1,000jiL去離子水。溶液弁2如下制備將如實(shí)施例13制備的250mg的MD-丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入30jiL的AMPS、80fiL的過(guò)氧化氳(Sigma)和890jiL的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50fiL的溶液#1加到載玻片上。將50jiL的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液#1中?；旌?秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例20利用REDOX化學(xué)形成麥芽糖糊精-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)與實(shí)施例31相似，制備兩種溶液，但是在本實(shí)施例溶液#1中，使用不同濃度的葡萄糖酸鐵水合物(Sigma)和抗壞血酸。溶液#1如下制備將250mg的MD-丙烯酸酯(如實(shí)施例13所制備)置于8mL瓶中。向MD-丙烯酸酯中加入5mg葡萄糖酸鐵水合物(Sigma)、40mg抗壞血酸(Sigma)、67pL的AMPS(Lubrizol)和l，OOO去離子水。溶液#2如下制備將如實(shí)施例7制備的250mg的MD-丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入30jiL的AMPS、80,jiL過(guò)氧化氬(Sigma)和890的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50jiL的溶液#1加到栽玻片上。將50jiL的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液#1中?；旌?秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例21利用REDOX化學(xué)形成麥芽糖糊精-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)制備兩種溶液。溶液#1如下制備將250mg的MD-丙烯酸酯(如實(shí)施例13所制備)置于8mL瓶中。向MD-丙晞酸酯中加入15mg的L-抗壞血酸鐵(II)(Sigma)、30mg抗壞血酸(Sigma)、61的AMPS(Lubrizol)和l，OOOnL去離子水。溶液#2如下制備將如實(shí)施例7制備的250mg的MD-丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入30nL的AMPS、80過(guò)氧化氫(Sigma)和890jiL的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50nL的溶液#1加到栽玻片上。將50nL的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液#1中?；旌?秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例22利用REDOX化學(xué)形成聚糖醇-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)制備兩種溶液。溶液#1如下制備將如實(shí)施例21所制備的1，000mg的聚糖醇-丙烯酸酯置于8mL瓶中。向該聚糖醇-丙烯酸酯中加入15mg石危酸亞4失七水合物(Sigma)、30mg抗壞血酸(Sigma)、67jiL的AMPS(Lubrizol)和l，000jiL去離子水；溶液#2如下制備將如實(shí)施例中所制備的1，000mg的聚糖醇-丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該聚糖醇-丙烯酸酯中加入30nL的AMPS、80jiL過(guò)氧化氫(Sigma)和890的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50jiL的溶液#1加到栽玻片上。將50nL的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液糾中。混合2秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例23生物活性劑并入MD-丙烯酸酯基質(zhì)中制備兩種溶液。溶液#1如下制備將250mg的MD-丙烯酸酯(如實(shí)施例13所制備)置于8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入15mg醋酸鐵(II)(Sigma)、30mg抗壞血酸(Sigma)、67jiL的AMPS(Lubrizol)、75mg牛血清白蛋白(BSA;代表生物活性劑)和l，OOOnL去離子水。溶液#1如下制備將250mg的MD-丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入30nL的AMPS、80過(guò)氧化氫(Sigma)、75mg的BSA和890pL醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50jiL的溶液#1加到載玻片上。將50nL的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液#1中?；旌?秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例24制備?；柠溠刻呛玣丁?；?MD)通過(guò)以變化的摩爾比率偶合丁酸酐，制備具有懸垂丁?；柠溠刻呛樘峁┒□；?MD(1丁基/4葡萄糖單位，1:4B/GU)，進(jìn)行以下操作。將麥芽糖糊精(MD;Aldrich;ll.Og;3.67mmol;DE(右旋糖當(dāng)量)4,0-7.0)在攪拌下溶解于二甲基亞砜(DMSO)600mL中。計(jì)算麥芽糖糊精的大小為2,000Da-4,000Da。一旦反應(yīng)溶液完成，在攪拌下加入l-曱基咪唑(Aldrich;2.0g,1.9mL)和丁酸酐(Aldrich;5.0g,5.2mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。此后，用水將反應(yīng)混合物幹滅，并用DI水，釆用l，OOOMWCO透析袋透析。將丁?；牡矸弁ㄟ^(guò)凍干分離，得到9.315g(85%收率)。NMR證實(shí)丁?；癁?:3B/GU(1,99mmo1丁基/克樣品)。為提供丁?；?'MD(1:8B/GU)，用2.5g(2.6mL)丁酸酐替代上述量的丁酸酐。得到的收率為79%(8.741g)。NMR證實(shí)丁?；癁?:5B/GU(1.31mmo1丁基/克樣品)。為提供丁酰化-MD(l:2B/GU),用10.0g(10.4mL)丁酸酐替代上述量的丁酸酐。得到的收率為96%(10.536g)。NMR證實(shí)丁?；癁?:2B/GU(3.42mmol丁基/克樣品)。實(shí)施例25制備丙烯酸酯化?；溠刻呛玶r?；?MD-丙烯酸酯)具有懸垂的丁?；捅┧狨セ鶊F(tuán)的?；溠刻呛蠓肿訂误w的制備通過(guò)以變化的摩爾比率偶合丁酸酐制備。為提供丁?；?MD-丙烯酸酯(l丁基/4葡萄糖單位，1:4B/GU)，進(jìn)行以下操作。將MD-丙烯酸酯(實(shí)施例13;l.lg;0.367mmol)在攪拌下溶解于二甲基亞砜(DMSO)60mL中。一旦反應(yīng)溶液完成，在攪拌下加入l-甲基咪唑(0.20g，0.19mL)和丁酸酐(0.50g，0.52mL)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。此后，用水將反應(yīng)混合物猝滅，并用DI水，采用1,000MWCO透析袋透析。丁?；矸郾┧狨ネㄟ^(guò)凍干分離，得到821mg(75。/。收率，分離期間物料損失)。NMR證實(shí)丁?；癁?:3B/GU(2.38mmo1丁基/克樣品)。實(shí)施例26制備丙烯酸酯化?；溠刻呛?丁酰化-MD-丙烯酸酯)具有懸垂丁?；捅┧狨セ鶊F(tuán)的麥芽糖糊精通過(guò)以變化的摩爾比率偶合丁酸酐制備。為提供丁?；?MD-丙烯酸酯，進(jìn)行以下操作。將丁?；?MD(實(shí)施例43;l.Og;0.333mmol)在攪拌下溶解于二甲基亞砜(DMSO)60mL中。一旦反應(yīng)溶液完成，將來(lái)自實(shí)施例12的EA-NCO(353mg;2.50mmol)溶液蒸發(fā)，并溶解于干燥的DMSO(l.OmL)中。將兩DMSO溶液混合，并加熱至55°C過(guò)夜。將DMSO溶液置于透析袋(1000MWCO)中，并經(jīng)水透析3天。將大分子單體溶液過(guò)濾并凍干，得到白色固體。實(shí)施例27制備麥芽糖糊精-曱基丙烯酸酯大分子單體(MD-甲基丙烯酸酯)為提供MD-甲基丙烯酸酯，進(jìn)行以下操作。將麥芽糖糊精(MD;Aldrich;lOOg;3.67mmol;DE:4.0-7.0)在攪拌下溶解于二曱基亞砜(DMSO)1,000mL中。計(jì)算麥芽糖糊精的大小為2,000Da-4,000Da。一旦反應(yīng)溶液完成，在攪拌下加入l-甲基咪唑(Aldrich;2.0g，1.9mL)，隨后加入甲基丙烯酸酐(Aldrich;38.5g)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。此后，用水將反應(yīng)混合物摔滅，并用DI水，釆用1，000MWCO透析袋透析。通過(guò)凍干分離MD-甲基丙烯酸酯，得到63.283g(63。/。收率)。計(jì)算的大分子單體的甲基丙烯酸酯負(fù)荷為0.33jimol/mg聚合物。實(shí)施例28利用REDOX化學(xué)形成MD-甲基丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)制備兩種溶液。溶液#1如下制備將如實(shí)施例47中所制備的250mg的MD-甲基丙烯酸酯置于8mL瓶中。向該MD-甲基丙烯酸酯中加入9mg葡萄糖酸鐵水合物(Sigma)、30mg抗壞血酸(Sigma)和l，OOOHL去離子水。溶液#2如下制備將如實(shí)施例47中所制備的250mg的MD-甲基丙烯酸酯置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-甲基丙烯酸酯中加入80卞L過(guò)氧化氬(Sigma)和920的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將50nL的溶液#1加到載玻片上。將50的溶液#2在輕度渦旋下加入溶液#1中?；旌?秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。實(shí)施例29利用REDOX化學(xué)/微型導(dǎo)管遞送系統(tǒng)形成MD-甲基丙烯黢酯生物可降解的基質(zhì)制備具有變化的MD-甲基丙烯酸酯濃度和氧化還原組分的MD-曱基丙烯酸酯氧化還原組合物。這些組合物通過(guò)微型導(dǎo)管遞送至靶位點(diǎn)，在耙位點(diǎn)混合后發(fā)生基質(zhì)形成。表2顯示了試驗(yàn)的結(jié)果。制備包括不同濃度的MD-丙烯酸酯(MD-A)的還原劑溶液和氧化劑溶液(見表10，行A和B)。溶液1A和IB如下制備將250mg或500mg的MD-丙烯酸酯(如實(shí)施例13中所制備)置于8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入10mg的L-抗壞血酸鐵(II)(Sigma)、20mg抗壞血酸(Sigma)和l，OOOnL去離子水。溶液2A和2B如下制備將250mg或500mg的MD-丙烯酸酯(如實(shí)施例13中所制備)置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-丙烯酸酯中加入80jiL過(guò)氧化氫(Sigma)和920jiL的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。制備包括不同濃度的MD-甲基丙烯酸酯(MD-MA)的還原劑溶液和氧化劑溶液(見表IO，行C-G)。溶液1C-1G如下制備將250mg、350mg或500mg的MD-甲基丙烯酸酯(如實(shí)施例47中所制備)各自置于8mL的瓶中。向MD-甲基丙烯酸酯中加入10mg的L-抗壞血酸鐵(II)(Sigma)、20mg抗壞血酸(Sigma)和l，OOOjiL去離子水。溶液2C-2G如下制備將250mg、350mg或500mg的MD-甲基丙烯酸酯(如實(shí)施例47中所制備)置于第二個(gè)8mL瓶中。向該MD-甲基丙烯酸酯中加入80nL過(guò)氧化氫(Sigma)和920nL的0.1M醋酸鹽緩沖液(pH5.5)。將溶液1(單獨(dú)為A-G)加入3mL注射器(Becton-Dickinson)中，并將注射器與微型導(dǎo)管(ExcelsiorSL-10;2.4-1.7fr;BostonScientific或Renegdae;3.0-2.5fr;BostonScientific)相連。向注射器施加適當(dāng)?shù)膲毫?，使大約50^L的溶液1(單獨(dú)為A-G)被置于載玻片上。將溶液2(單獨(dú)為A-G)加入第二個(gè)3mL注射器(Becton-Dickinson)中，并將注射器與第二個(gè)微型導(dǎo)管相連。握住載玻片上第一溶液上的導(dǎo)管末端，并向注射器施用適當(dāng)?shù)膲毫?，使大約50nL的溶液2被加入到栽玻片上的溶液1中。混合2-5秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage73</column></row><table>實(shí)施例30利用REDOX化學(xué)形成聚糖醇-丙烯酸酯生物可降解的基質(zhì)制備包括聚糖醇-丙烯酸酯(PD-A)的還原劑溶液和氧化劑溶液(見表3)。氧化劑溶液如下制備將500mg的PD-A(如實(shí)施例18中所制備)單獨(dú)置于8mL瓶中。向PD-A中加入不同量的過(guò)硫酸銨(Sigma)(見表3，行A-H)、過(guò)硫酸鉀(見表3，行M-P)或過(guò)硫酸鈉(見表3，行I-L)和1,000jiL的PBS。還原劑溶液如下制備將500mg的PD-A置于第二個(gè)8mL瓶中。向該P(yáng)D-A中加入20fiL或40jiL的TEMED、40jiL的IN鹽酸(VWR)和960nL磷酸鹽緩沖鹽水(Sigma;pH7.4)。各項(xiàng)聚合實(shí)驗(yàn)如下進(jìn)行:將50pL的氧化劑溶液轉(zhuǎn)移至載玻片上；隨后向氧化劑溶液中加入50nL還原劑溶液。在23°C或37°C混合5秒鐘后，混合物聚合并形成具有橡膠彈性的半堅(jiān)固的凝膠。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table>實(shí)施例31聚糖醇-丙烯酸酯REDOX組分內(nèi)的細(xì)胞存活力制備具有表4中所示濃度的溶液。細(xì)胞懸液如下制備使用胰蛋白酶-EDTA從T-75燒瓶收獲PC-12細(xì)胞(ATCC;5代；75%匯合)2分鐘。將細(xì)胞置于15mL聚乙烯錐形瓶(VWR)中，并以500rpm在無(wú)血清的F-12k培養(yǎng)基中離心4分鐘。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器將細(xì)胞計(jì)數(shù)，在500rpm離心4分鐘，并在無(wú)菌PBS中以600,000細(xì)胞/mL再懸浮。為了測(cè)定基質(zhì)形成性組合物的各個(gè)成分對(duì)細(xì)胞存活力的影響，將溶液A-G單獨(dú)地與PC-12細(xì)胞混合。將50fiL的細(xì)胞懸液加入350pL的溶液A-G中(表4)。孵育15分鐘后，使用Live/Dead成活力/細(xì)胞毒性試劑盒(目錄#L3224;MolecularProbes,Eugene,OR)評(píng)估細(xì)胞存活力。還檢測(cè)了形成的基質(zhì)對(duì)細(xì)胞存活力的影響。為形成PD-A基質(zhì)，將溶液#1(200mgPD-A，10pLTEMED，201NHC1，470PBS)以200jiL的量加入1.6mL的eppendorf中(VWR)。將溶液#2(400mgPD-A，10mg過(guò)硫酸鉀，75KPC-12細(xì)胞，500jiLPBS)以200的量加入在eppendorf中的溶液#1中，并混合10秒鐘。孵育15分鐘后，使用Live/DeadTM成活力/細(xì)胞毒性試劑盒評(píng)估細(xì)胞存活力。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage75</column></row><table>權(quán)利要求1.一種在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)形成生物可降解的包含體的方法，該方法包括以下步驟提供包含以下物質(zhì)的組合物包含懸垂的可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，以及氧化還原對(duì)的第一成員；在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處遞送所述組合物；并且將所述組合物與氧化還原對(duì)的第二成員接觸，在該接觸的步驟中，所述氧化還原對(duì)使天然生物可降解的多糖的聚合開始，以形成生物可降解的包含體。2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的接觸步驟包括遞送第二組合物，該組合物包含以下物質(zhì)包含懸垂的可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，以及氧化還原對(duì)的第二成員。3.權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述組合物具有的粘度低于45cP。4.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的遞送步驟包括使用直徑為2.3fr或更小的微型導(dǎo)管遞送所述組合物至靶位點(diǎn)。5.權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述的遞送步驟中，所述的靶位點(diǎn)是動(dòng)脈瘤。6.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的接觸步驟包括將所述組合物與被配置插入靶位點(diǎn)內(nèi)的物品接觸，其中所述物品與氧化還原對(duì)的第二成員結(jié)合。7.權(quán)利要求6所述的方法，其中在所述的接觸步驟中，所述物品選自動(dòng)脈瘤線圏、絲或線。8.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的接觸步驟包含遞送第二組合物，該組合物包含氧化還原對(duì)的第二成員。9.權(quán)利要求1所述的方法，其中在所述的提供步驟中，氧化還原對(duì)的第一成員是還原劑。10.權(quán)利要求l所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述天然生物可降解的多糖具有的分子量為IOO，OOODa或更小。11.權(quán)利要求10所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述天然生物可降解的多糖具有的分子量為50,000Da或更小。12.權(quán)利要求11所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述天然生物可降解的多糖具有的分子量為1000Da~10,000Da。13.權(quán)利要求l所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述生物可降解的多糖選自直鏈淀粉、麥芽糖糊精、環(huán)糊精和聚糖醇。14.權(quán)利要求l所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述生物可降解的多糖包含非還原性天然生物可降解的多糖。15.權(quán)利要求l所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述的生物可降解的多糖選自聚糖醇。16.權(quán)利要求l所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述組合物包含促纖維變性劑。17.權(quán)利要求16所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述的促纖維變性劑包含膠原或其活性結(jié)構(gòu)域。18.權(quán)利要求17所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述膠原是膠原I或其活性結(jié)構(gòu)域。19.權(quán)利要求16所述的方法，其中在所述的提供步驟中，所述促纖維變性劑包含可聚合的基團(tuán)。20.—種在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)形成生物可降解的包含體的試劑盒，該試劑盒包含包含懸垂的可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖；氧化還原對(duì)的第一成員；被配置遞送至靶位點(diǎn)的物品；以及氧化還原對(duì)的第二成員。21.權(quán)利要求20所述的試劑盒，其包含第一組合物，該組合物含有天然生物可降解的多糖和氧化還原對(duì)的第一成員。22.權(quán)利要求21所述的試劑盒，其中所述物品包含神經(jīng)動(dòng)脈瘤線團(tuán)。23.權(quán)利要求20所述的試劑盒，其中所述氧化還原對(duì)的第二成員與所述物品結(jié)合。24.—種在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處形成生物可降解的包含體的方法，該方法包括以下步驟提供包含以下物質(zhì)的組合物包含懸垂的可聚合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，氧化還原對(duì)的第一成員；以及氧化還原對(duì)的第二成員；將所述組合物遞送至機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)；并且讓生物可降解的包含體在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處形成。25.權(quán)利要求24所述的方法，其中所述的生物可降解的包含體在所述提供組合物的步驟后至少20秒形成。26.—種在機(jī)體內(nèi)的靶位點(diǎn)處形成生物可降解的包含體的方法，該方法包括以下步驟將第一組合物遞送至靶位點(diǎn)，所述第一組合物包含包含第一偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖；并且將第二組合物遞送至靶位點(diǎn)，所述第二組合物包含包含第二偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖，其中所述的第二偶合基團(tuán)與所述第一偶合基團(tuán)反應(yīng)；其中，在所述的遞送步驟期間或之后，第一偶合基團(tuán)和第二偶合基團(tuán)之間的反應(yīng)促進(jìn)生物可降解的包含體的形成。全文摘要描述了在原位形成的包含天然生物可降解的多糖的生物可降解的包含體。所述基質(zhì)由眾多具有懸垂偶合基團(tuán)的天然生物可降解的多糖形成。文檔編號(hào)A61L27/20GK101300036SQ200680041232公開日2008年11月5日申請(qǐng)日期2006年9月21日優(yōu)先權(quán)日2005年9月21日發(fā)明者D·G·斯旺,J·A·欽,M·J·伯克斯特蘭德,P·H·杜凱特,S·J·胡齊克申請(qǐng)人:蘇爾莫迪克斯公司