專利名稱：低血糖癥狀抑制用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進 劑，所述組合物或促進劑含有支鏈氨基酸、其可藥用的鹽或者它們的衍生物 作為有效成分。
背景技術(shù)：
低血糖癥狀是指隨著血中的葡萄糖水平的減少，腦內(nèi)的葡萄糖水平降 低，由此引起的疲勞感、全身不適、不安感、倦怠感、神經(jīng)過敏、發(fā)抖、頭 痛、無力感、冷汗和心悸癥狀，進一步地引起意識障礙和昏迷，嚴(yán)重時也可 能導(dǎo)致死亡。
51起低血糖癥的原因主要包括下述情況
(1) 向糖尿病患者給予過量的降血糖藥(胰島素等)；
(2) 某種藥物產(chǎn)生副作用的情況；
(3) 長期持續(xù)攝取大量糖類的飲食習(xí)慣；
(4) 攝取過量的醇；以及
(5) 在飲食不足的狀態(tài)下長時間持續(xù)過激的運動。
特別是情況(1)或(2)中，由于血糖被藥物強制性地降低，癥狀變得 嚴(yán)重的可能性高，因此非常危險。
以往，為了簡單地預(yù)防或治療低血糖癥狀，通常攝取葡萄糖、砂糖或碳 水化合物。但是，攝取糖類不僅對糖尿病患者的治療帶來不良影響，而且對 于健康者來說，甚至可能引起卡路里攝入過量。
作為含有本發(fā)明的有效成分支鏈氨基酸的藥物，已知通過口服攝取支鏈 氨基酸緩解肌肉痛、肌肉勞損和肌強直的藥物(參照專利文獻1: JP-A2000-26289 )和通過口服攝取支鏈氨基酸在運動時維持瞬間或持久的肌肉力 量的藥物(參照專利文獻2: JP-A 2000-26290)。著眼于例如亮氨酸、異亮 氨酸和纈氨酸等支鏈氨基酸具有器官特異性的事實，即主要用于肌肉和諸 如腎組織的肝組織以外的組織中，發(fā)現(xiàn)所述支《連氨基酸用于改善對月幾肉痛和 肌強直、或者運動時維持瞬間或持久的肌肉力量。此外，已知以含有支鏈氨 基酸為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疲勞緩解劑(參照專利文獻3 : WO2002/034257 )等。其闡明了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疲勞的機理的同時證明了血 腦屏障上的L-系統(tǒng)轉(zhuǎn)運體的特異性抑制劑2-氨基二環(huán)[2,2,l]庚烷-2-羧酸可 以抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疲勞，特別是在與例如亮氨酸、異亮氨酸或者纈氨酸 等支鏈氨基酸并用下可以幾乎完全抑制。已知改善腦細(xì)胞代謝的組合物(參 照專利文獻7: JP-A 2-172915 )和抗癡呆藥(參照專利文獻8: JP陽A 3-275631 ) 都含有支鏈氨基酸。但是，這些文獻中未提及支鏈氨基酸在低血糖癥狀中促 進諸如腦細(xì)胞等的細(xì)胞攝取葡萄糖。
已知含有支鏈氨基酸的藥物制劑包括服藥量較少、風(fēng)味和吞咽方面優(yōu) 異的僅將支鏈氨基酸作為有效成分的藥用果凍劑(參照專利文獻4: JP-A 2003-221330 );改善了風(fēng)味和飲用感覺，懸浮時可以保持優(yōu)異的懸浮性的 含有支鏈氨基酸、懸浮劑和表面活性劑的藥用干糖漿劑(參照專利文獻5: JP-A 2003-221329);和將保存時不著色、保存穩(wěn)定性優(yōu)異的支鏈氨基酸作 為有效成分的咀嚼片劑(參照專利文獻6: JP-A 2003-221327)。但是，這 些文獻中都未記載對腦細(xì)胞攝取糖類的促進或者對低血糖癥狀的抑制。
專利文獻1:特開JP-A 2000-26289
專利文獻2:特開JP-A 2000-26290
專利文獻3: WO2002/034257
專利文獻4:特開JP-A 2003-221330
專利文獻5:特開JP-A 2003-221329
專利文獻6:特開JP-A 2003-221327
專利文獻7:特開JP-A 2-172915專利文獻8:特開平JP-A 3-27563
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的問題
本發(fā)明的目的在于提供一種能夠通過促進腦細(xì)胞攝取糖類而抑制低血 糖癥狀的組合物。
解決上述問題的手段
本發(fā)明人為了解決上述課題進行了深入研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，支鏈氨基酸、 其可藥用的鹽或者它們的衍生物具有促進腦細(xì)胞攝取糖類的作用，因此可以 抑制低血糖癥狀，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明涉及
(1 ) 一種低血糖癥狀抑制用組合物，其特征在于，含有選自支鏈氨基 酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一種化合物作為有效成分；
(2) 上述(1 )所述的組合物，其特征在于，所述支鏈氨基酸為選自 L-纈氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸中的至少一種化合物；
(3) 上述(2)所述的組合物，其特征在于，至少含有L-異亮氨酸；
(4) 上述(3)所述的組合物，其特征在于，L-異亮氨酸、L-亮氨酸和 L-纈氨酸的含有比例按照摩爾比換算為1: (0~3) : (0~2);
(5) 上述(1) ~ (4)中任一項所述的組合物，其特征在于，進一步 含有糖類；
(6) 上述(5)所述的組合物，其特征在于，所述糖類為葡萄糖；
(7) 上述(1) ~ (6)中任一項所述的組合物，其特征在于，所述低 血糖癥狀為交感神經(jīng)刺激癥狀和/或腦癥狀；
(8) —種腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，含有選自支鏈氨基 酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一種化合物作為有效成分；
(9) 上述(8)所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，所述支 鏈氨基酸為選自L-纈氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸中的至少一種化合物；(10) 上述(9)所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，至少 含有L-異亮氨酸；
(11) 上述(8)所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，L-異 亮氨酸、L-亮氨酸和L-纈氨酸的含有比例按照摩爾比換算為1: ( 0 ~ 3 ):( 0 ~ 2);
(12) 上述(8) ~ (11)中任一項所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑， 其特征在于，進一步含有糖類；
(13) 上述(12)所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，所述 糖類為葡萄糖；
(14) 上述(1) ~ (7)中任一項所述的組合物，其特征在于，其為注 射劑或顆粒的形態(tài)；
(15) 上述(8) ~ (13)中任一項所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑， 其特征在于，其為注射劑或顆粒的形態(tài)；
(16) —種食品，其特征在于，含有選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和 它們的衍生物中的至少 一種化合物，抑制低血糖癥狀或者促進腦細(xì)胞攝取糖 類；
(17) 上述(16)所述的食品，其特征在于，所述食品為果凍；
(18) —種低血糖癥狀的抑制方法，其特征在于，包括向哺乳動物給予 選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一 種化合物；
(19) 一種促進腦細(xì)胞攝取糖類的方法，其特征在于，包括向哺乳動物 給予選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一種化合物；
(20 )選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化 合物在制備抑制低血糖癥狀的組合物中的應(yīng)用；以及
(21 )選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化 合物在制備腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑中的應(yīng)用。 發(fā)明效果
根據(jù)本發(fā)明，由于可以促進腦細(xì)胞攝取糖類，所以可以防止腦細(xì)胞內(nèi)的糖類水平的降低，從而可以抑制伴隨著低血糖的癥狀。
本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑由于 幾乎不改變血中的血糖水平，特別是對糖尿病患者的治療沒有影響，因此可 以有效地用于易于因胰島素注射或抗糖尿病藥而引起低血糖癥狀的患者。
本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑促進 腦細(xì)胞的能量源葡萄糖的攝取，所以不僅可以抑制上述低血糖引起的癥狀， 而且可以抑制即使血糖水平正常、由于腦內(nèi)的糖水平降低引起的低血糖癥狀 才羊癥狀。


圖1為表示以對照組作為對比例，口服給予L-亮氨酸或L-異亮氨酸1 小時后大鼠腦細(xì)胞攝取糖類的量的圖。圖中，縱坐標(biāo)表示2DG-6P量，*表 示與對照組相比有顯著性差異(p<0.05)。各柱的值表示平均值(n=6) ±標(biāo)
準(zhǔn)誤差。
圖2為表示以對照組作為對比例，靜脈給予混合氨基酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸或L-纈氨酸24小時后大鼠腦細(xì)胞攝取糖類的量的圖。圖中，縱坐 標(biāo)表示2DG-6P量。各柱的值表示平均值(n=4) 土標(biāo)準(zhǔn)誤差。
具體實施例方式
下文對本發(fā)明中的以含有選自支鏈氨基酸、支鏈氨基酸的可藥用的鹽以 及支鏈氨基酸或其可藥用的鹽的衍生物中的至少一種化合物作為有效成分 為特征的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑進行具體 的說明。
本發(fā)明中使用的支鏈氨基酸只要滿足日本藥典的標(biāo)準(zhǔn)就不特別限定，該 支鏈氨基酸的例子包括例如L-氨基酸、D-氨基酸、a-氨基酸、(3-氨基酸、y-氨基酸、天然氨基酸、合成氨基酸等任意支鏈氨基酸，優(yōu)選為天然的L-氨基 酸或a-氨基酸。本發(fā)明中使用的支鏈氨基酸的特別優(yōu)選的例子包括L-纈氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸。此外，上述支鏈氨基酸可以通過利用蛋白酶水 解來源于植物或者動物的蛋白質(zhì)，或通過微生物發(fā)酵法來制備，或者為通過 向有機酸中引入氨基基團得到的合成氨基酸等。
本發(fā)明中的支鏈氨基酸的可藥用的鹽，為酸或堿的鹽，對其不特別限定， 其例子包括例如鈉鹽和鉀鹽等堿金屬鹽，鉤鹽等堿土金屬鹽，鹽酸鹽等無機
酸鹽和醋酸鹽等有機酸鹽，其中優(yōu)選為鹽酸鹽。具體的例子包括L-纈氨酸鹽 酸鹽、L-亮氨酸鹽酸鹽和L-異亮氨酸鹽酸鹽。
對本發(fā)明中使用的支鏈氨基酸或其可藥用的鹽的衍生物不特別限定，其 例子包括例如酯類和肽類。所述酯類只要為例如曱酯、乙酯、丙酯或異丙酯 等低級烷基酯就不特別限定。此情況下的低級烷基優(yōu)選為含有1~6個碳原 子的烷基基團。所述酯類的優(yōu)選例子包括L-纈氨酸乙酯、L-亮氨酸乙酯和 L-異亮氨酸乙酯。所述肽類只要為例如二肽和三肽的寡肽就不特別限定，所 述肽類的優(yōu)選例子包括L-異亮氨酰基-L-亮氨酸、L-丙氨?；?L-亮氨酸、L-亮氨酰基-L-丙氨酸、甘氨?；?L-亮氨酸和L-丙氨酰基-L-谷氨酰胺。因此， 構(gòu)成寡肽的支鏈氨基酸以外的氨基酸可以為包括L-氨基酸、D-氨基酸、a-氨基酸、卩-氨基酸、i氨基酸、天然氨基酸、合成氨基酸等的任意氨基酸。
這些支鏈氨基酸、其可藥用的鹽或者它們的衍生物可以單獨使用，或以 兩種或更多種的混合物使用，但是優(yōu)選至少含有L-異亮氨酸、其鹽或者其衍 生物，特別優(yōu)選至少含有L-異亮氨酸。
本發(fā)明的組合物中的支鏈氨基酸、其可藥用的鹽或者它們的衍生物可以 單獨使用，或以兩種或更多種的混合物使用。當(dāng)使用其中的兩種或更多種的 混合物時，并不特別限定其混合比例。具體地說，當(dāng)使用支鏈氨基酸、其可 藥用的鹽或者它們的衍生物，例如L-異亮氨酸、L-亮氨酸或L-纈氨酸時， 這些化合物可以單獨^使用或以兩種或更多種的混合物使用，這些化合物的混 合比例按照摩爾比換算為L-異亮氨酸丄-亮氨酸:L-纈氨酸二約1:(0~3):(0~ 2),更優(yōu)選為約1: (0-2.5) : (0~ 1.5)。例如使用L-異亮氨酸、L-亮氨 酸或L-纈氨酸的鹽或其衍生物時，優(yōu)選以L-異亮氨酸、L-亮氨酸或L-纈氨酸分別換算為上述摩爾比的比例使用。
本發(fā)明中的低血糖癥狀指的是由于血中的葡萄糖水平降低而產(chǎn)生的癥 狀。葡萄糖對于所有細(xì)胞來說都是最重要的能量源，特別是腦的能量僅依賴 于葡萄糖。肌肉和其它組織的機能也離不開葡萄糖。因此，血中的葡萄糖水 平降低時，在腦、肌肉和其它組織的機能中產(chǎn)生不希望產(chǎn)生的癥狀。所述癥 狀包括但不限于交感神經(jīng)刺激癥狀和腦癥狀。所述交感神經(jīng)刺激癥狀包括例 如，不安感、饑餓、蹣跚、眩暈、貧血、無力、虛弱、倦怠、輕微困倦、易 怒、發(fā)抖、心悸、顏面蒼白、心動過速、發(fā)汗和震顫，所述腦癥狀包括例如
頭痛、視覺障礙、復(fù)視、眼翳、集中力和計算能力減退、健忘、嗜睡、意識 障礙、痙攣、神經(jīng)異常、身體異常行為和昏迷。
其中，低血糖包括血糖水平為約60mg/dL以下的狀態(tài)，但是不限定為 該血糖水平。例如，由于糖尿病等造成的血糖高的人通過胰島素注射或者服 用抗糖尿病藥降低血糖水平時、或者健康人由于空腹或快速激烈的運動迅速 降低血糖水平時，即使在約100mg/dL也顯示出與低血糖相同的癥狀，這種 與低血糖相同的癥狀也包含在本發(fā)明中。
本發(fā)明中的低血糖癥狀抑制用組合物指的是用于抑制或改善由于血糖 水平降低所引起的癥狀的組合物。
根據(jù)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物不僅可以在低血糖癥狀中使用、 而且即使在非低血糖癥的狀態(tài)下也可以預(yù)防性地使用。
根據(jù)本發(fā)明的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑促進腦細(xì)胞攝取糖類，特別是腦 內(nèi)唯 一 的能量源葡萄糖，因此可以抑制腦內(nèi)的葡萄糖的攝取被抑制的癥狀， 例如上述低血糖癥狀，或者由于某種除了低血糖以外的理由.引起與低血糖相 同的癥^1犬的癥狀。
而且，預(yù)期腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑可以促進腦以外的細(xì)胞攝取糖類， 例如肌肉細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和其它的細(xì)胞中，因此可以期待其激活上述肌肉細(xì) 胞、神經(jīng)細(xì)胞和其它的細(xì)胞。
優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑中進一步含有糖類。所述糖類包括但不限于，例如核糖、脫氧核糖、葡
萄糖、果糖和半乳糖等的單糖；例如麥芽糖、蔗糖和乳糖等的二糖；以及例 如直鏈淀粉、支鏈淀粉和糖原等的多糖。在所述糖類中，更優(yōu)選為單糖，特 別優(yōu)選為可以用于活體內(nèi)作為即時能量源的葡萄糖。
此時，糖類的含量比例不特別限定，但是優(yōu)選為例如相對于每摩爾支鏈 氨基酸、計算出葡萄糖含量為約0.1 ~50摩爾。
根據(jù)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑 可以含有可藥用的添加劑的藥物的方式或含有食品衛(wèi)生法上認(rèn)可的添加劑 的食品的方式提供。
根據(jù)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑 當(dāng)以藥物制劑的方式形成時，可用作例如口服給藥用固體制劑、口服給藥用 液體制劑或者腸胃外給藥用注射劑(皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)注射等)。 口服給藥用固體制劑包括例如片劑、丸劑、膠嚢劑、散劑和顆粒劑。
可以在上述口服給藥用固體制劑中使用的添加劑包括例如賦形劑、粘合
劑、崩解劑、潤滑劑、穩(wěn)定劑和潤濕劑。所述賦形劑包括但不限于蔗糖、乳
糖、葡萄糖、淀粉和甘露醇。所述粘合劑包括但不限于阿拉伯膠、羧曱基纖
維素、明膠、微晶纖維素、羥丙基纖維素、曱基纖維素和聚維酮。崩解劑包
括但不限于羧曱基纖維素、淀粉、微晶纖維素和低取代羥丙基纖維素。潤滑
劑包括但不限于滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣和二氧化硅。穩(wěn)定劑和潤濕劑包
括但不限于檸檬酸酐、月桂酸鈉和甘油。這些添加劑可以單獨使用或者兩種
以上混合并用。口服給藥用固體制劑可以根據(jù)常規(guī)方法，例如第14次修改
的曰本藥典制劑總則中記載的方法等制備，例如將支鏈氨基酸、其鹽或者它
們的衍生物與添加劑混合，并將該混合物制成藥物制劑來得到。具體地說，
顆粒劑可以如下制備向支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物中加入上述賦
形劑、粘合劑、崩解劑等并均勻地混煉所述混合物后，優(yōu)選通過壓縮造粒、
轉(zhuǎn)鼓造粒、噴霧干燥造粒、擠出造粒、研磨造粒、流動層造?；驍嚢柙炝Ｖ?br> 成粒狀。片劑可以如下制備例如，向支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物中加入上述賦形劑、粘合劑、崩解劑等并均勻地混煉所述混合物后，將混合
物直接壓縮成型制成片劑；或者預(yù)先用支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物 與賦形劑、粘合劑、崩解劑等制成顆粒，將該顆粒直接制成片劑，或者將活 性成分與添加劑均勻地混合后、將混合物壓縮成型制成片劑。顆粒劑或片劑 按照需要可以通過適當(dāng)?shù)陌聞?明膠、蔗糖、阿拉伯膠、巴西棕櫚蠟等) 或者腸溶包衣劑(例如，醋酸鄰苯二曱酸纖維素、曱基丙烯酸共聚物、羥丙 基纖維素鄰苯二曱酸酯、羧甲基乙基纖維素等)進行包衣。膠嚢劑可以如下 制備例如，向支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物中加入上述賦形劑、粘 合劑、崩解劑等并將混合物均勻地混煉后隨意地制成顆粒，或者對制成的顆 粒用包衣劑包衣，然后填充到膠嚢中。
口服給藥用固體制劑中的支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物的含量比 例不特別限定，但是優(yōu)選支鏈氨基酸的總量以質(zhì)量計為基于固體制劑整體的 約1 ~ 90%。
口服給藥用液體制劑包括例如，水劑、懸浮劑、乳劑、糖漿劑和酏劑。 可以在該液體制劑中使用的添加劑包括例如，純化水、乙醇和例如它們的混 合液的溶劑。該口服給藥用液體制劑還可以含有助懸劑(例如，阿拉伯膠、 瓊脂、羧曱基纖維素、羥丙基纖維素等)、乳化劑(例如，聚山梨酯80、 阿拉伯膠等)，調(diào)味劑(例如，單糖漿、蜂蜜、蔗糖、酒石酸等)，芳香劑 (例如，水楊酸曱酯、小茴香油、橙油、薄荷醇等)，防腐劑(例如，芳香 酸、苯曱酸鈉等)和緩沖劑(例如，檸檬酸、碳酸氫鹽等)。這些添加劑可 以單獨使用或者兩種以上并用。
可以用于腸胃外給藥用注射劑的添加劑包括例如，溶劑、穩(wěn)定劑、增溶 劑、助懸劑、表面活性劑、乳化劑、無痛劑、緩沖劑和防腐劑。所述溶劑包 括但不限于注射用蒸餾水、生理鹽水、例如芝麻油的植物油、乙醇、異丙醇、 丙二醇、1，3-丁二醇和聚乙二醇。所述穩(wěn)定劑和增溶劑包括但不限于谷氨酸、 天冬氨酸和聚山梨酯80。所述助懸劑包括但不限于例如羧曱基纖維素鈉和 曱基纖維素的纖維素衍生物，和例如西黃蓍膠和阿拉伯膠的天然膠類。所述表面活性劑包括但不限于脫水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂 肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、氫化蓖麻油的聚氧乙烯醚和卵磷脂。所述乳化 劑包括但不限于硬脂酸聚烴氧基酯、聚桂醇、聚山梨酯80和阿拉伯膠。所 述無痛劑包括但不限于氨基苯甲酸乙酯、肌醇、鹽酸美普卡因、鹽酸利多卡 因、三氯叔丁醇、丙二醇和苯曱醇。所述緩沖劑包括但不限于種檬酸或其鹽、 葡萄糖、磷酸或其鹽和乙酸或其鹽。所述防腐劑包括但不限于對羥基苯曱酸 酯、苯扎氯銨和脫水山梨糖醇酸鹽。這些添加劑可以單獨使用或者兩種以上 并用。
所述注射劑可以根據(jù)常規(guī)方法，例如通過無菌操作法適當(dāng)溶解支鏈氨基 酸、其鹽或者它們的衍生物與添加劑等來進行制備。制備的注射劑被填充到 安瓿、西林瓶、或者玻璃或聚乙烯制輸液容器(包括袋)中，然后進行滅菌。 聚乙烯制輸液容器(包括袋)可以，例如，與脫氧劑一起包裝于阻氣性包裝 材料中。所述注射劑可以制成無菌的固體制劑、例如凍千制品，在其使用前 溶解于已滅菌或無菌的注射用蒸餾水或其它的溶劑中來使用。
支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物的含量比例不特別限定，但是在輸 液制劑的情況下，支鏈氨基酸的總量優(yōu)選為基于注射劑整體的約0.1 ~
10w/v%。
根據(jù)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑 中可以進一步含有例如維生素(例如，維生素A,維生素B!、 B2、 B6、 B12, 維生素C,維生素D,維生素E,煙酸，泛酸，葉酸，生物素，維生素F, 維生素P，維生素Q,維生素U,膽堿，肌醇，對氨基苯甲酸等)和支鏈氨 基酸以外的氨基酸(例如，賴氨酸，苯丙氨酸，蛋氨酸，蘇氨酸，纈氨酸， 組氨酸，色氨酸，丙氨酸，脯氨酸，精氨酸，谷氨酸，絲氨酸等)的營養(yǎng)素。
含有本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑 的上述藥物的給藥量不特別限定、可以根據(jù)劑型、給藥途徑、患者的年齡和 體重、疾病的嚴(yán)重程度任意地決定。通常給藥量為約1 ~ 1000mg/日/kg成人 體重、優(yōu)選為約1 500mg的范圍的量，按照需要可以適當(dāng)增減。該藥物也可以每天分?jǐn)?shù)次給藥。
當(dāng)本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑為 食品形式時，將支鏈氨基酸、其鹽或者它們的衍生物中的至少一種，優(yōu)選至 少L-異亮氨酸與食品衛(wèi)生法上認(rèn)可的添加物和其它食品中使用的各種成分 混合制備食品或飲品。所制備的食品的形式不特別限定，可以為例如片劑、 膠嚢劑、散劑、顆粒劑、口服給藥用液體藥物、固體食品、膏狀或果醬狀的 半流體食品、凝膠狀食品和飲料的任何可能的食品形式。食品的具體例子包 括例如，軟飲料、例如果汁或乳酸菌飲料的飲料、果凍、糖果、餅干和曲奇。 該食品的制備方法不特別限定，可以使用公知的任何方法。
可除了使用食品衛(wèi)生法中認(rèn)可的添加物(例如，羥丙曱基纖維素、微晶 纖維素、酒石酸、甘露醇、糖精鈉、甜菊、二甲基聚硅氧烷、對羥基苯曱酸 酯等)來替代上述藥物中的片劑、膠嚢劑、散劑、顆粒劑或口服給藥用液體 制劑中的添加物之外，用與上述藥物的制備方法同樣的方式制備所述片劑、 膠囊劑、散劑、顆粒劑或口服給藥用液體制劑。
制備飲料時，按照需要可以含有例如，諸如香料、著色料、天然果汁、 果肉、千酪和巧克力的風(fēng)味物質(zhì)和合成甜味劑的添加劑。該添加劑可以單獨 使用或者兩種以上組合使用。
制備的膏狀或果醬狀的半流體食品、或者例如果凍的凝膠狀食品，除了 上述飲料中的成分之外，優(yōu)選進一步含有一種或更多種選自瓊脂、明膠、角 叉菜膠、結(jié)冷膠、黃原膠、刺槐豆膠、果膠、藻酸鈉、藻酸鉀和其它通常使
用的多糖增稠劑中的凝膠化劑。凝膠化劑的混合量為每100質(zhì)量份果凍中含 有約2質(zhì)量份以下，優(yōu)選為約0.2~2質(zhì)量份。
食品中的支鏈氨基酸、其鹽或它們的衍生物的含量比例不特別限定，但 是優(yōu)選支鏈氨基酸的總量以質(zhì)量計約為1~60%。
如此制備的食品可以用作抑制低血糖癥狀或者促進腦細(xì)胞^t聶取糖類的 機能性食品。優(yōu)選在所述食品的包裝上帶有說明其抑制低血糖癥狀或者促進 腦細(xì)胞攝取糖類的功能的表示。上述食品的優(yōu)選日攝取量為每成人(約60kg)約0.1 20g的支鏈氨 基酸、其鹽或者它們的衍生物。 實施例
下文參考制劑實施例和試驗例對本發(fā)明進行更具體的說明，但是本發(fā)明 不被這些實施例所限定。 <制備實施例1〉
將300g L-異亮氨酸溶解于注射用蒸餾水中，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH 6.50,進一步加入注射用蒸餾水調(diào)至總體積為IOL。將得到的溶液通過濾膜 過濾，以500mL/袋向聚乙烯制輸液袋中填充，密封并在105。C下進行40分 鐘高壓蒸氣滅菌。將該袋與脫氧劑(商品名Ageless,三菱氣體化學(xué)有限公 司Mitsubishi Gas Chemical Co., Inc.生產(chǎn)) 一起用聚乙烯醇多層膜制成的阻 氣包裝材料包裝，得到注射劑。
<制備實施例2>
將150g的L-異亮氨酸和150g的L-纈氨酸溶解于注射用蒸餾水中，然 后用氬氧化鈉調(diào)節(jié)至pH6.50，進一步加入注射用蒸餾水調(diào)至總體積為IOL。 將得到的溶液通過濾膜過濾，以500mL/袋向聚乙烯制輸液袋中填充，密封， 并在105。C下進行40分鐘高壓蒸氣滅菌。將該袋與脫氧劑(商品名Ageless, 三菱氣體化學(xué)有限公司(Mitsubishi Gas Chemical Co., Inc.)生產(chǎn)) 一起用聚 乙烯醇多層膜制的阻氣包裝材料包裝，得到注射劑。
<制備實施例3>
將300g L-異亮氨酸溶解于注射用蒸餾水中，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH 6.50,進一步加入注射用蒸餾水調(diào)至總體積為IOL并通過濾膜過濾。
另一方面，將lOOOg葡萄糖溶解于注射用蒸餾水中，然后加入注射用蒸 餾水調(diào)至總體積為10L并通過濾膜過濾。
將這些溶液各自取500mL分別填充于聚乙烯制兩室輸液袋的室中，每 室中一種溶液，密封，并在105。C下進行40分鐘高壓蒸氣滅菌。將該袋與 脫氧劑(商品名Ageless,三菱氣體化學(xué)有限公司生產(chǎn)) 一起用聚乙烯醇多層膜制的阻氣包裝材料包裝，得到注射劑。
使用該注射劑時，必須擠壓其中一室或者擠壓兩室，從而將兩室相連制 成混合溶液，用作注射液。
<制備實施例4>
將L-丙氨?；?L-亮氨酸1000g、 L-異亮氨酸300g和L-纈氨酸240g溶 解于注射用蒸餾水中，然后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH 6.50,進一步加入注射用 蒸餾水調(diào)至總體積為lOL。將得到的溶液通過濾膜過濾，以100mL/袋向聚 乙烯制輸液袋中填充，密封，并在105。C下進行40分鐘高壓蒸氣滅菌。將 該袋與脫氧劑(商品名Ageless,三菱氣體化學(xué)有限公司生產(chǎn)) 一起用聚乙 烯醇多層膜制的阻氣包裝材料包裝，得到注射劑。
<制備實施例5>
向IOL純化水中加入并分散羥丙曱基纖維素120g和微晶纖維素羧曱基 纖維素鈉10g。然后，向該分散液中加入并溶解酒石酸100g、甘露醇1000g、 糖精鈉10g、甜菊5g、 二曱基聚硅氧烷40g、對羥基苯曱酸丙酯2g和對羥 基苯曱酸曱酯5g。接著，向其中加入L-異亮氨酸950g、 L-亮氨酸1900g和 L-纈氨酸1150g,用均化器懸浮，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)至pH6.50,用均化器均勻 地懸浮，制備懸浮液。
另一方面，向2L純化水中加入瓊脂粉末40g、在約80。C下加溫溶解， 并向得到的溶液中加入上述懸浮液6000g和菠蘿香料40g并與之混合。以 1 OOg/容器的量向容器中填充得到的混合液，密封并冷卻以制備果凍。
<制備實施例6>
將L-異亮氨酸500g、 L-亮氨酸1000g、纈氨酸600g、擰檬酸酐100g和 羥丙基纖維素50g均勻地混合，然后向混合物中添加蒸餾水300g進行造粒。
在60。C下干燥造粒產(chǎn)物2小時，并通過24目的篩得到顆粒。將得到的 顆粒以4.5g/袋的量向鋁層壓粘性袋中填充，密封得到最終產(chǎn)品。
<試驗例1>口服給予支鏈氨基酸(下文也稱為BCAA)在腦攝取糖類中 的促進作用(1) 檢測溶液的制備
亮氨酸組將L-亮氨酸3g加入到100mL生理鹽水中并用均化器懸浮得 到的L -亮氨酸懸浮液用作亮氨酸組的檢測溶液。
異亮氨酸組將L-異亮氨酸3g加入到100mL生理鹽水中并用均化器懸 浮得到的L -異亮氨酸懸浮液用作異亮氨酸組的檢測溶液。
(2) 檢測方法
對雄性6周齡Wistar大鼠(Charles River Japan, Inc.)在自由攝食(精 制飼料AIN-93G, Nippon Nosan Kogyo Co., Ltd.制)和自由飲水下祠養(yǎng)14 天。8周齡時，按照體重將該大鼠分為三組(對照組、亮氨酸組、異亮氨酸 組)。分組后，在乙醚麻醉下切開各大鼠的頸部，將導(dǎo)管插入到頸靜脈內(nèi)。 導(dǎo)管的另一端從皮下穿過，暴露于背部并通過固定裝置連接并固定到旋轉(zhuǎn)裝 置上。然后將各個大鼠收容在單獨的代謝籠中。通過導(dǎo)管以lmL/hr/機體的 速度向大鼠持續(xù)給以生理鹽水。第二天，對對照組大鼠以15mL/kgBW (體 重)的用量口服給予生理鹽水，而對亮氨酸組和異亮氨酸組大鼠以 0.45g/15mL/kg BW的用量口服給予其相應(yīng)的檢測溶液、即L-亮氨酸懸浮液 和L-異亮氨酸懸浮液。給予檢測溶液20分鐘后，用約3秒鐘通過導(dǎo)管靜脈 內(nèi)給予30(iCi/kg的2-[1,2-3印-脫氧葡萄糖(2DG)。靜脈內(nèi)給藥后2、 10、 20、 30和40分鐘時通過導(dǎo)管各采取300(iL的血，用肝素處理血液后分離血 漿。分離的血漿用于測定2DG水平和血糖水平。將20pL血漿加入液體閃爍 計數(shù)器測定用的西林瓶中，然后，向其中加入5mL閃爍體并進行混合后， 用液體閃爍計數(shù)器測定血漿中的氚水平(計數(shù))以確定2DG的量。血糖水 平通過葡糖氧化酶染料法測定。
給予檢測溶液1小時后，用約3秒鐘對大鼠以50mg/kg的給藥量靜脈內(nèi) 給予戊巴比妥鈉，麻醉下通過從腹主動脈進行肝素采血來除血。除血后取出 腦組織，向該腦組織中混合其重量四倍量的1N NaOH，然后在水浴中于60 。C下加熱1小時#_腦組織裂解。向腦組織的裂解液中加入與上述1N NaOH 等量的1NHC1,從而中和該溶液，得到腦組織的中和勻漿。中和勻漿中的2DG量向400jiL的0.15N ZnS04中加入400pL的中和 勻漿，然后加入400nL的0.15N Ba(OH)2并進行混合。離心(6000rpm, 20 分鐘)后，分離上清液。將900pL分離的上清液加入液體閃爍計數(shù)器測定用 的西林瓶中，然后，向其中加入5mL閃爍體并與之進行混合后，用液體閃 爍計數(shù)器測定氚水平(計數(shù))來確定2DG量。
中和勻漿中的2DG和2DG-6P( 2-[l,2」H]-脫氧葡萄糖-6-磷酸鹽)的量 向400pL的中和勻漿中加入800pL的6wt%PCA (高氯酸)并進行混合。離 心(6000rpm, 20分鐘)后，分離上清液。將900pL分離的上清液加入液體 閃爍計數(shù)器測定用的西林瓶中，然后，向其中加入10mL閃爍體并與之進行 混合后，用液體閃爍計數(shù)器測定氚水平(計數(shù))來測定2DG和2DG-6P的 量。
中和勻漿中的2DG-6P量從2DG和2DG-6P的量中減去2DG量，從 而算出2DG-6P量。該2DG-6P量用血中2DG量和血糖水平進行校正，來確 定腦攝取的糖類的量。
統(tǒng)計處理時，在方差分析后，進行以對照組為對照的Dunnett，s多重比 較，并且將pO.05視為有顯著性差異。 (3)試驗結(jié)果
結(jié)果如圖1所示。
由結(jié)果可知，通過口服給予檢測溶液，即L-亮氨酸懸浮液或L-異亮氨 酸懸浮液1小時后的腦細(xì)胞攝取的糖類量高于對照組的該攝取量。特別是， 異亮氨酸組與對照組相比顯著地促進了腦細(xì)胞攝取糖類。
<試驗例2>靜脈給予BCAA在腦攝取糖類中的促進作用
(1) 4企測溶液的制備
對照組將葡萄糖以質(zhì)量計5%的濃度溶解于純化水中得到的溶液用作 對照組的檢測溶液。
混合氨基酸組在含有以質(zhì)量計5%的葡萄糖的純化水中，以質(zhì)量計 1.5%的濃度溶解Amiparen (注冊商標(biāo)，Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.制)制得的溶液用作混合氨基酸組的檢測溶液。
亮氨酸組在含有以質(zhì)量計5%的葡萄糖的純化水中，以質(zhì)量計1.5%的 濃度溶解L-亮氨酸制得的溶液用作亮氨酸組的檢測溶液。
異亮氨酸組在含有以質(zhì)量計5%的葡萄糖的純化水中，以質(zhì)量計1.5% 的濃度溶解L-異亮氨酸制得的溶液用作異亮氨酸組的檢測溶液。
纈氨酸組在含有以質(zhì)量計5%的葡萄糖的純化水中，以質(zhì)量計1.5%的 濃度溶解L-纈氨酸制得的溶液用作纈氨酸組的檢測溶液。 (2) 試驗方法
對雄性7周齡SD大鼠(Nippon Clare )在自由攝食(精制飼料AIN-WG， Nippon Nosan Kogyo Co., Ltd.制)和自由飲水下飼養(yǎng)14天。8周齡時，按照 體重將該大鼠分為五組(對照組、混合氨基酸組、亮氨酸組、異亮氨酸組、 纈氨酸組)。分組后，在乙醚麻醉下切開各大鼠的頸部，將導(dǎo)管插入到頸靜 脈內(nèi)。導(dǎo)管的另一端從皮下穿過，暴露于背部并通過固定裝置連接并固定到 旋轉(zhuǎn)裝置上。然后將各個大鼠收容在單獨的代謝籠中。通過導(dǎo)管以 10mL/kg/hr的速度向?qū)φ战M大鼠給予以質(zhì)量計為5%的葡萄糖溶液，以 10mL/kg/hr的速度向混合氨基酸組、亮氨酸組、異亮氨酸組和纈氨酸組給予 其相應(yīng)的試液。給予檢測溶液23小時后，用約3秒鐘通過導(dǎo)管靜脈給予 30pCi/kg的2-[1,2-3司-脫氧葡萄糖(2DG)。靜脈內(nèi)給藥后2、 10、 20、 30、 40和60分鐘，通過導(dǎo)管各采取300fiL的血，用肝素處理血液后分離血漿。 用與試驗例1同樣的試驗方法，測量分離的血漿的2DG水平和血糖水平。
給予2-[l，2」H]-脫氧葡萄糖1小時后，在約3秒鐘內(nèi)對大鼠以50mg/kg 的給藥量靜脈給予戊巴比妥鈉，麻醉下通過從腹主動脈進行肝素采血來除 血。除血后取出腦組織，向該腦組織中混合其重量四倍量的1N NaOH,然 后在水浴中于60。C下加熱1小時使腦組織裂解。向腦組織的裂解液中加入 與上述lNNaOH等量的1NHC1,對溶液進行中和得到腦組織的中和勻漿。 使用與試驗例1的檢測方法同樣的方法對中和勻漿中的2DG-6P量進行測 定，確定腦細(xì)胞攝取的糖類量。統(tǒng)計處理時，在方差分析后，進行以對照組為對照的Dunnett，s多重比 較來檢驗顯著性差異。 (3) 試驗結(jié)果
結(jié)果如圖2所示。由結(jié)果可知，給予L-亮氨酸、L-異亮氨酸或L-纈氨 酸24小時后的腦細(xì)胞攝取的糖類量高于對照組和混合氨基酸組的該攝取 量。特別是異亮氨酸組和纈氨酸組中發(fā)現(xiàn)與對照組相比促進腦細(xì)胞攝取糖類 的趨勢。
工業(yè)實用性
根據(jù)本發(fā)明，由于可以促進腦細(xì)胞攝取糖類，所以可以防止腦細(xì)胞內(nèi)的 糖類水平的降低，從而可以抑制低血糖癥狀，因此本發(fā)明作為藥物或機能性 食品是有用的。此外，本發(fā)明的低血糖癥狀抑制用組合物或者將糖類攝取到 腦細(xì)胞內(nèi)的促進劑能夠幾乎不改變血中的血糖水平，而可以增加腦細(xì)胞內(nèi)的 糖量，可以有效地用于易于由于胰島素注射或給予抗糖尿病藥而陷入低血糖 的糖尿病患者中。
權(quán)利要求
1. 一種低血糖癥狀抑制用組合物，其特征在于，含有選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化合物作為有效成分。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述支鏈氨基酸為選自 L-纈氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸中的至少 一種化合物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于，至少含有L-異亮氨酸。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其特征在于，L-異亮氨酸、L-亮氨酸和 L-纈氨酸的含量比例按照摩爾比換算為1: (0~3) : (0-2)。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1~4中任一項所述的組合物，其特征在于，進一步含有 糖類。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于，所述糖類為葡萄糖。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1 ~6中任一項所述的組合物，其特征在于，所述低血糖 癥狀為交感神經(jīng)刺激癥狀和/或腦癥狀。
8、 一種腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，含有選自支鏈氨基酸、其 可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一種化合物作為有效成分。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，所述支 鏈氨基酸為選自L-纈氨酸、L-亮氨酸和L-異亮氨酸中的至少一種化合物。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，至少 含有L-異亮氨酸。
11、 根據(jù)權(quán)利要求10所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，L-異亮氨酸、L-亮氨酸和L-纈氨酸的含量比例按照摩爾比換算為1:(0~3):(0~2)。
12、 根據(jù)權(quán)利要求8 11中任一項所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特 征在于，進一步含有糖類。
13、 根據(jù)權(quán)利要求12所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特征在于，所述 糖類為葡萄糖。
14、 根據(jù)權(quán)利要求1~7中任一項所述的組合物，其特征在于，其為注射劑或顆粒的形態(tài)。
15、 根據(jù)權(quán)利要求8~ 13中任一項所述的腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑，其特 征在于，其為注射劑或顆粒的形態(tài)。
16、 一種食品，其特征在于，含有選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們 的衍生物中的至少一種化合物，其抑制低血糖癥狀或者促進腦細(xì)胞攝取糖類。
17、 根據(jù)權(quán)利要求16所述的食品，其特征在于，所述食品為果凍。
18、 一種抑制低血糖癥狀的方法，其特征在于，包括向哺乳動物給予選自 支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少 一種化合物。
19、 一種促進腦細(xì)胞攝取糖類的方法，其特征在于，包括向哺乳動物給予 選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化合物。
20、 選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化合物 在制備抑制低血糖癥狀的組合物中的應(yīng)用。
21、 選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化合物 在制備腦細(xì)胞攝取糖類的促進劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低血糖癥狀抑制用組合物，其特征在于，含有選自支鏈氨基酸、其可藥用的鹽和它們的衍生物中的至少一種化合物作為有效成分。該組合物能夠促進腦細(xì)胞攝取糖類，從而預(yù)防低血糖癥狀。
文檔編號A61P25/02GK101287458SQ20068003790
公開日2008年10月15日 申請日期2006年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月12日
發(fā)明者土居雅子, 山岡一平 申請人:株式會社大塚制藥工場