專利名稱：9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備蠶藥中的應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤的用途，尤其涉及9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備蠶藥中的用途；屬于生物和醫(yī)藥領域。
背景技術(shù)：
家蠶病毒病的危害一直困擾著養(yǎng)蠶業(yè)，往往造成重大損失，是當前養(yǎng)蠶業(yè)影響產(chǎn)量和繭質(zhì)的主要原因。多年來，人們通過加強蠶窒蠶具消毒、蠶體蠶座消毒、桑葉葉面消毒、改善飼養(yǎng)管理等綜合措施預防，雖有成效，但總不滿意。醫(yī)藥和獸藥領域開發(fā)的藥物為我們提供了基礎條件，篩選現(xiàn)有的藥物，尋找能防治家蠶病毒病的藥物，十分重要，且必須滿足下列條件1、溶于水，才能噴灑桑葉給蠶添食，滿足家蠶給藥途徑單一的要求。
2、無異味、蠶不拒食，食下才能產(chǎn)生藥效，滿足蠶藥只能靠其自主食下的特性。
3、療效確切，通過人工發(fā)病模型對蠶病有確切的預防和治療效果，且效果優(yōu)于已在國內(nèi)上市銷售的同類蠶藥，滿足防治蠶病的要求。
4、對家蠶安全無毒副作用，不影響其生理發(fā)育，不影響蠶繭產(chǎn)量。
5、對家蠶的繭質(zhì)、絲質(zhì)無不良影響。
6、對家蠶的種卵無不良影響。
9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤通用名為阿昔洛韋，分子式C8H11N5O3，它能選擇性抑制DNA多聚酶，阻止DNA合成。抗病毒譜較窄，對I型和II型單純皰疹作用最強，對帶狀皰疹病毒及乙型肝炎病毒也有抑制作用；雖然阿昔洛韋在醫(yī)藥上是一個成熟產(chǎn)品，但是應用于蠶藥尚未報道過。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤的新用途，即在防治家蠶病毒病中的新應用。
實際上，本發(fā)明涉及9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備蠶藥中的應用。
尤其涉及9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備防治家蠶病毒病藥物中的應用，更具體的說所述的蠶病毒性病為核型多角體病。
在上述用9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤制備的藥劑可以是任何一種藥劑學中所述的劑型。作為優(yōu)選，所述的藥劑為膠囊劑。
在上述的應用過程中，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤的濃度為25ppm～100ppm。
作為優(yōu)選，9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤的濃度為50ppm。
為了更好的理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面將用9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)的藥理試驗結(jié)果來說明其在制備蠶藥中的新用途。同樣用以來說明在本發(fā)明的應用過程中9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤使用劑量的不同對蠶病的的治療效果也有所區(qū)別。
1、9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶核型多角體(NPV)病的預防效果試驗樣品9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(白色粉末)使用時分別配成100ppm、75ppm、50ppm、25ppm四種濃度。
大青葉合劑市售，按使用說明，每支加水500ml強力碘溶液市售，按使用說明5支加水1000ml試驗動物家蠶箐松×皓月(由江蘇省蠶種公司提供)；病毒家蠶核型多角體病毒(NPB)(蘇州大學蠶桑研究所生理病理室保存)，-20℃保存，使用前復壯后多次離心純化，血球計數(shù)板計數(shù)，配成2×108母液。
試驗方法分別給5齡起蠶添食9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤、大青葉、強力碘溶液8小時，再以2×106、2×107、2×108NPB添食攻毒8小時，正常飼養(yǎng)一周調(diào)查發(fā)病率；結(jié)果見下表1表19-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶NPV病的預防試驗結(jié)果
結(jié)果表明9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤100ppm、75ppm、50ppm、25ppm濃度相對于已上市蠶藥和清水對照區(qū)，對家蠶NPV病有顯著的預防效果。
2、9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶NPV病的治療效果試驗樣品9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(白色粉末)使用時分別配成100ppm、75ppm、50ppm、25ppm四種濃度。
大青葉合劑市售，按使用說明，每支加水500ml強力碘溶液市售，按使用說明5支加水1000ml
試驗動物家蠶箐松×皓月(由江蘇省蠶種公司提供)；病毒家蠶核型多角體病毒(NPB)(蘇州大學蠶桑研究所生理病理室保存)，-20℃保存，使用前復壯后多次離心純化，血球計數(shù)板計數(shù)，配成2×108母液。
試驗方法分別給5齡起蠶添食攻毒2×108、2×107、2×106NPB8小時，再給家蠶連續(xù)不同濃度添食藥物，正常飼養(yǎng)一周，對照大青葉、強力碘和清水，調(diào)查發(fā)病率，結(jié)果見表2。
表29-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶NPV病的治療試驗結(jié)果
結(jié)論9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤100ppm、75ppm、50ppm、25ppm濃度相對于已上市蠶藥和清水對照區(qū)，對家蠶NPV病有一定的治療效果。
3、9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶的安全性試驗試驗樣品9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(白色粉末)使用時分別配成500ppm濃度試驗動物家蠶原蠶蘇菊、明虎(由江蘇省蠶種公司提供)；試驗方法a)材料9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤用雙蒸水配成500ppm濃度b)家蠶飼養(yǎng)設二區(qū)，一區(qū)為添藥區(qū)，一區(qū)為添水對照區(qū)，每區(qū)飼養(yǎng)家蠶100頭，3齡起蠶開始，每天連續(xù)添食9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤500ppm8小時，對照區(qū)添食清水，飼養(yǎng)至上山，制種，調(diào)查各項指標。
c)對經(jīng)濟指標的影響試驗方法將收獲的蠶繭，剝?nèi)ダO衣，充分混勻，一分為二，調(diào)查50粒蠶繭的參數(shù)，試驗結(jié)果見表3。
表39-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶的各項經(jīng)濟指標的影響
結(jié)果用Excel軟件進行方差分析和假設檢驗，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤500ppm添食對家蠶的各項經(jīng)濟指標無顯著性影響。
d)、對絲質(zhì)影響試驗方法將剝好的另一半蠶繭，隨機分成五份，抽取一份，進行一粒繅絲，繅絲工藝如下高溫置換100℃1min浸沒蠶繭；低溫吸水65℃2min；煮熟調(diào)整97～80℃9min；保護70℃2min。
強伸力鑒定每百回繭絲作一個檢測樣品。檢測結(jié)果如表4所示表49-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶絲質(zhì)的影響
結(jié)果用Excel軟件進行方差分析和假設檢驗，9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤500ppm添食對家蠶的絲質(zhì)無顯著性影響。
e)對下一代的影響對試驗蠶進行正常制種，即時浸酸，選取三個產(chǎn)卵最好的卵圈，調(diào)查對下一代的影響參數(shù)，結(jié)果見表5表59-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤對家蠶繼代的影響
結(jié)果用Excel軟件進行方差分析和假設檢驗，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤500ppm添食對家蠶的下一代無顯著性影響4、發(fā)明所用的9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤穩(wěn)定性試驗試驗目的9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤進行溫加速穩(wěn)定性試驗，方法參考江蘇省農(nóng)林廳蘇農(nóng)牧函 9號文“關于轉(zhuǎn)發(fā)農(nóng)業(yè)獸藥穩(wěn)定性試驗技術(shù)規(guī)范(試行)的通知”，將9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤制成膠囊劑，置于40℃恒溫箱六個月，每個月取出一粒，精密稱取0.05g，用超純水定溶100ml，紫外分光光度計在254nm處測OD值，以0個月9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤作標準對照，確定其具體含量。
結(jié)果如表6所示表69-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤的穩(wěn)定性試驗結(jié)果
結(jié)果表明對9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤進行溫加速試驗，結(jié)果用Excel軟件進行分析，9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤的含量未見顯著性下降。
5、9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)的藥物動力學試驗試驗動物家蠶蘇菊×明虎(由江蘇省蠶種公司提供)試驗方法1、一次性大量口服試驗給5齡第3天家蠶口腔一次性注射100μl500ppm9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤，按0、10min、20min、40min、80min、120min、240min、480min、720min、960min、1440min，2400min、3600min、分別取蠶血，稀釋25倍，用高效液相色譜分析儀(島津LC-6A)進行含量分析，結(jié)果見表7。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑，甲醇∶水(10∶90)為流動相，檢測波長為254nm，理論板數(shù)按供試9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤計算，應不低于1500。
表7一次性口腔注射50μl 500ppm9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)的含量變化
2、桑葉添食試驗9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤經(jīng)口食下后的變化規(guī)律5齡起蠶添食500ppm9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤3小時后改喂正常葉，繼續(xù)按一定時間取蠶血，用高效液相色譜分析儀進行含量分析，結(jié)果見表8。
表8500ppm9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤桑葉添食家蠶，在蠶體內(nèi)的含量變化
3、9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)殘留試驗從家蠶5齡起蠶開始每天連續(xù)添食500ppm9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤8小時，正常飼養(yǎng)，結(jié)繭，至化蛹后分不同時期取蛹血，用高效液相色譜分析儀(島津LC-6A)進行含量分析，結(jié)果見表9表9、9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)殘留試驗結(jié)果
結(jié)果表明9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤口腔注射給家蠶，10分鐘后血液中9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤含量達到高峰，高峰持續(xù)時間12小時左右，24小時后處于半衰期以下；添食家蠶，停止給藥，20小時后藥物在血液中含量開始下降，至40小時處于微量期；9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶蛹體內(nèi)到化蛹兩天有一定含量，至5天后處于微量期。
從以上結(jié)果，可以得出本發(fā)明的優(yōu)點在于(1)本發(fā)明對已有藥物9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤用于治療蠶病，發(fā)掘了該藥的新用途，開拓了一個新的應用領域。
(2)本發(fā)明的蠶藥9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤制成的藥劑穩(wěn)定性好，安全無毒，對家蠶的各項經(jīng)濟指標、蠶絲以及下一代無影響，。
(3)本發(fā)明的蠶藥9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤的藥劑在不同的濃度的情況下，對蠶的核型多角體(NPV)病具有顯著的預防和治療效果。
(4)本發(fā)明的蠶藥9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)的藥效持續(xù)時間較長，從而表明對蠶病的治療具有顯著的效果。
圖1是本發(fā)明制備9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤膠囊劑的工藝流程圖具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不限于此。在下述實施例中9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)購自具于合法生產(chǎn)權(quán)的制藥廠，其質(zhì)量符合藥典的標準，含C8H11N5O3不得少于98.0％。
實施例19-(羥乙氧甲基)鳥嘌呤膠囊劑的制備9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤原藥 510.20g水溶性淀粉 1489.80g
分成10000粒(每粒200mg)采用常規(guī)制備膠囊藥劑的方法來制備，制備的工藝流程圖如圖1所示。處方及依據(jù)經(jīng)反復試驗證實，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)對家蠶血液型膿病的預防和治療的最佳濃度為50ppm。經(jīng)測算，2#膠囊可裝200mg藥粉，如果裝51.02mg9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤原藥，使用時正好每粒膠囊兌1000ml的水，所以增加148.98mg的水溶性淀粉將膠囊填滿。這樣也便于蠶農(nóng)使用。
實施例29-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤片劑的制備稱取9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤原藥1020.41g，乳糖320g，羧甲基纖維素鈉80g，混勻，用10％淀粉漿制成軟材，過篩制粒，60℃干燥，整粒，加入硬脂酸鎂60g，與顆粒混勻，壓片，制得成品10000片。處方及依據(jù)經(jīng)反復試驗證實，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)對家蠶血液型膿病的預防和治療的有效濃度為100ppm。經(jīng)測算，每片劑中的9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)為102.04mg，使用時正好每片兌1000ml的水。
實施例39-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤溶液的制備稱取9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤原藥255.10g，采用常規(guī)方法溶于蒸餾水，制成產(chǎn)品10000支溶液劑。處方及依據(jù)經(jīng)反復試驗證實，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)對家蠶血液型膿病的預防和治療的有效濃度為25ppm。經(jīng)測算，每支溶液劑中的9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)為25.51mg，使用時預防每支溶液劑兌1000ml的水、治療2支溶液劑兌1000ml的水噴灑桑葉添食。
實施例49-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤膠囊劑的制備9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤原藥 765.31g水溶性淀粉 1234.69g
分成10000粒(每粒200mg)采用現(xiàn)有制備膠囊藥劑的方法來制備；制備的工藝流程圖如圖1所示。處方及依據(jù)經(jīng)反復試驗證實，9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)對家蠶血液型膿病的預防和治療濃度為75ppm。經(jīng)測算，2#膠囊可裝200mg藥粉，如果裝76.53mg9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋)，使用時正好每粒膠囊兌1000ml的水，所以增加123.47mg的水溶性淀粉將膠囊填滿。這樣也便于蠶農(nóng)使用。
本發(fā)明中所描述的具體實施例僅僅是對本發(fā)明精神作舉例說明。本發(fā)明所屬技術(shù)領域的技術(shù)人員可以對所描述的具體實施例做各種各樣的修改或補充或采用類似的方式替代，但并不會偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書所定義的范圍。
盡管對本發(fā)明已作出了詳細的說明并引證了一些具體實例，但是對本領域熟練技術(shù)人員來說，只要不離開本發(fā)明的精神和范圍可作各種變化或修正是顯然的。
權(quán)利要求
1.9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備防治蠶病藥中的應用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于所述的蠶病為病毒性蠶病。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于所述的蠶病毒性病為家蠶核型多角體病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的應用，其特征在于9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤制備的藥劑是任何一種藥劑學中所述的劑型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應用，其特征在于9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤制備的藥劑為膠囊劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于該應用過程中9-(2-羥乙氧甲基)鳥嘌呤的濃度為25ppm～100ppm。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應用，其特征在于該應用過程中9-(羥基乙氧甲基)鳥嘌呤的濃度為50ppm。
全文摘要
本發(fā)明9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤的用途，尤其涉及9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤在制備蠶藥中的用途；本發(fā)明的優(yōu)點在于(1)本發(fā)明對已有藥物9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤用于治療蠶病，發(fā)掘了該藥新用途，開拓了一個新的應用領域；(2)本發(fā)明的蠶藥9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤的藥劑在適當?shù)臐舛鹊南?，對家蠶的核型多角體(NPV)病(血液性膿病)具有顯著的預防和治療效果，(3)本發(fā)明的蠶藥9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤在蠶體內(nèi)的藥效持續(xù)時間較長，從而表明對蠶病的治療具有顯著的效果；(4)本發(fā)明的蠶藥9－(2－羥乙氧甲基)鳥嘌呤制成的藥劑穩(wěn)定性好，安全無毒，對家蠶的各項經(jīng)濟指標、蠶絲以及下一代無影響；(5)本發(fā)明的制備容易，生產(chǎn)成本低，制成品使用方便。
文檔編號A61P31/00GK101091712SQ20061008811
公開日2007年12月26日 申請日期2006年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月24日
發(fā)明者周元鐸 申請人:周元鐸