專利名稱：一種腦肽注射劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種腦肽注射劑及其制備方法，更具體地說是一類記憶增強(qiáng)肽注射劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
有關(guān)影響記憶的多肽的研究及應(yīng)用在醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域用途廣泛，但有關(guān)的報(bào)道較少。
中國發(fā)明專利93112493.X(記憶增強(qiáng)肽及其應(yīng)用)公開了一種能促進(jìn)學(xué)習(xí)和記憶功能的合成多肽，即記憶增強(qiáng)肽(MEP)。經(jīng)過化學(xué)模擬設(shè)計(jì)，分子動(dòng)力學(xué)推算和結(jié)合合成肽的活性動(dòng)能測定，該合成肽可制成各種形式的藥物和飲料食品，用于保健或治療學(xué)習(xí)記憶障礙，例如促進(jìn)大腦早期發(fā)育，加強(qiáng)成年學(xué)習(xí)記憶和治療老年病癡呆癥等。
中國發(fā)明專利00116876.2(一類記憶增強(qiáng)肽和它們的用途)在上述專利的基礎(chǔ)上，繼續(xù)對(duì)合成多肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，進(jìn)行藥理試驗(yàn)，改進(jìn)已有多肽存在的缺陷；該多肽可通過固相多肽合成法或液相多肽合成法制得，合成步驟如下 反應(yīng)過夜。

同上1，2處理。
該專利公開的新記憶增強(qiáng)肽結(jié)構(gòu)簡單、生產(chǎn)便利、藥理作用更強(qiáng)，并能在臨床上對(duì)未成年兒童智力發(fā)育、成年人智力障礙及健忘癥、人的記憶功能改善起到促進(jìn)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種腦肽注射劑。
本發(fā)明的另一目的是提供上述腦肽注射劑的制備方法。
本發(fā)明所述的腦肽注射劑中包含有溶于藥用溶劑的有效量的記憶增強(qiáng)肽，該記憶增強(qiáng)肽的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為 其中，所述的X為Ala、Leu、Ile、Cys、Phe、Tyr或Val；所述的R1為PyroGlu或H；所述的R2為S-S-C(CH3)3或S-C(CH3)3。
本發(fā)明所述的腦肽注射劑中，記憶增強(qiáng)肽的用量按無水醋酸鹽計(jì)。所述的腦肽注射劑，它可以是主要由下列重量份的原料制成記憶增強(qiáng)肽4-12份氯化鈉6000-13000份水500000-1500000記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。
所述的腦肽注射劑，它可以是主要由下列重量份的原料制成記憶增強(qiáng)肽8份氯化鈉9000份水1000000份記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。
本發(fā)明所述的腦肽注射劑的制備方法包括如下步驟(1)稱取氯化鈉，加入水，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽，加入水，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/LHCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
所述的腦肽注射劑，當(dāng)它主要由下列重量份的原料制成時(shí)記憶增強(qiáng)肽8份氯化鈉9000份水1000000份記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)；它可以包括如下步驟(1)稱取氯化鈉9000份，加入水800000份，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽8份，加入水200000份，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/LHCl和1mol/LnaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
上述的腦肽注射劑無需輔劑，但也可添加氨基酸或糖類等營養(yǎng)物、蛋白穩(wěn)定劑和pH緩沖液等，酸堿度維持在pH4.0-7.5之間。一般不需緩沖液，腦肽本身酸堿度維持在pH4.5-6.5之間。
本發(fā)明經(jīng)試驗(yàn)證明，腦肽皮下注射給藥，對(duì)小鼠避暗實(shí)驗(yàn)中氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙有改善作用。在小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)中有對(duì)抗東莨菪堿所造成的記憶障礙的作用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1取以下原料記憶增強(qiáng)肽4mg氯化鈉6.5g水1400ml記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。
按如下步驟操作(1)稱取上述氯化鈉，加入水1000ml，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽，加入水400ml，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/LHCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
共制得2800支，每支規(guī)格0.0014mg/0.5ml/支實(shí)施例2
取以下各原料的重量份為記憶增強(qiáng)肽8mg氯化鈉9g水1000ml記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。
按如下步驟操作(1)稱取上述氯化鈉，加入水800ml，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽，加入水200ml，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/LHCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
共制得2000支，每支規(guī)格0.004mg/0.5ml/支實(shí)施例3取以下各原料的重量份為記憶增強(qiáng)肽11mg 氯化鈉12g 水600ml記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。
按如下步驟操作(1)稱取上述氯化鈉，加入水400ml，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽，加入水200ml，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/LHCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
共制得1200支，每支規(guī)格0.0081mg/0.5ml/支實(shí)施例4本例為應(yīng)用實(shí)施例2所制得產(chǎn)品進(jìn)行的動(dòng)物有效性試驗(yàn)。
大鼠皮下注射和鼻腔噴霧時(shí)，腦肽給入(0.1、0.5和2.0mg/Kg)的藥時(shí)曲線規(guī)律十分相似，尾靜脈注射(0.5mg/Kg)藥-時(shí)曲線符合小分子易溶類藥物的房室規(guī)律。藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)藥物表現(xiàn)吸收相快，消除相慢的規(guī)律，皮下注射腦肽的血藥濃度隨給藥劑量的增加而增多。給藥劑量相同(0.5mg/kg)鼻腔噴霧和皮下注射藥物在大鼠體內(nèi)的代謝規(guī)律基上相似A164.08/172.36，ke0.0070/0.0058，ka2.748/2.240，T(peak)2.177/2.665，C(max)161.178/169.281，皮下注射比鼻腔噴霧時(shí)的血藥濃度高出21.32％。
本項(xiàng)研究確證了腦肽水溶液通過鼻腔噴霧給藥，藥物不僅能夠被吸收，而吸收的速率、吸收量和吸收規(guī)律接近于皮下注射給藥的結(jié)果，三種給藥劑量(0.1、0.5和2.0mg/Kg)藥后10min的血漿藥物濃度均呈良好的線性關(guān)系。在0.5mg/kg時(shí)皮下給藥的絕對(duì)生物利用度為75.8％。鼻腔噴霧給藥的絕對(duì)生物利用度為78.7％。表明這兩種途徑給藥均有很高的生物利用度，而且它們的生物利用度基本一致。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)有效皮下注射腦肽皮下注射臨床前藥效研究依據(jù)新藥藥效指導(dǎo)原則要求記憶障礙動(dòng)物模型，主要觀察藥物腦肽給藥對(duì)氫溴酸東莨菪堿所致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響、觀察腦肽給藥對(duì)東莨菪堿引起小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響、觀察藥物腦肽給藥，對(duì)側(cè)腦室注射凝聚態(tài)的Aβ(25-35)造成大鼠空間學(xué)習(xí)記憶障礙的影響。和給藥對(duì)東莨菪堿引起小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響(水迷宮、避暗法)結(jié)果如下避暗法實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較各組正常小鼠進(jìn)入暗箱的時(shí)間即潛伏期以及鉆入暗室的次數(shù)即錯(cuò)誤次數(shù)。
結(jié)果見下表1表1腦肽對(duì)氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙的作用(避暗法)

N＝12與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01從上表結(jié)果可以看出各組與模型組相比，在小鼠避暗實(shí)驗(yàn)中，腦肽皮下注射給藥，可以延長潛伏期，對(duì)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù)也有顯著性差異。
正常小鼠，水迷宮法，結(jié)果見下表2、3表2腦肽對(duì)氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙的作用(水迷宮)

N＝12*與模型組比較P＜0.05，**P＜0.01表3腦肽對(duì)氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙的作用(水迷宮)

N＝12*與模型組比較P＜0.05從表2、3中可以看出在訓(xùn)練的第2天小劑量腦肽組與東莨菪堿模型組在潛伏期方面有顯著差異。在訓(xùn)練的第3天正常對(duì)照組、腦肽皮下注射給藥各組與東莨菪堿模型組相比在潛伏期及錯(cuò)誤次數(shù)方面都有顯著差異。
結(jié)論腦肽皮下注射給藥，對(duì)小鼠避暗實(shí)驗(yàn)中氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙有改善作用。在小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)中有對(duì)抗東莨菪堿所造成的記憶障礙的作用。
權(quán)利要求
1.一種腦肽注射劑，其特征在于該腦肽注射劑包含有溶于生理鹽水的記憶增強(qiáng)肽，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為 其中，所述的X為Ala、Leu、Ile、Cys、Phe、Tyr或Val；所述的R1為PyroGlu或H；所述的R2為S-S-C(CH3)3或S-C(CH3)3；所述的腦肽注射劑中，記憶增強(qiáng)肽的用量按無水醋酸鹽計(jì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦肽注射劑，其特征在于，所述的注射劑由下列重量份的原料制成記憶增強(qiáng)肽4-12份氯化鈉6000-13000份水500000-1500000。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腦肽注射劑，其特征在于，所述的注射劑由下列重量份的原料制成記憶增強(qiáng)肽8份氯化鈉9000份水1000000份。
4.權(quán)利要求1-3所述腦肽注射劑的制備方法，其特征在于，所述的方法包括如下步驟(1)稱取氯化鈉，加入水，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽，加入水，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/L HCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟(1)稱取氯化鈉9000份，加入水800000份，攪拌使溶解；(2)取所述記憶增強(qiáng)肽8份，加入水200000，攪拌使溶解；(3)將(2)中所得溶液加入(1)中所得溶液，攪拌均勻；(4)將(3)中所得溶液用1mol/L HCl和1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至4.0-6.5；(5)用0.22μm微孔濾膜過濾，分裝于安瓿中，每支0.5ml，封口；(6)100℃流通蒸氣滅菌30分鐘，即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種腦肽注射劑及其制備方法。該腦肽注射劑包含有溶于生理鹽水的記憶增強(qiáng)肽，記憶增強(qiáng)肽按無水醋酸鹽計(jì)。主要由下列重量份的原料制成記憶增強(qiáng)肽4－12份、氯化鈉6000－13000份、水500000－1500000份，經(jīng)試驗(yàn)證明，腦肽皮下注射給藥，對(duì)小鼠避暗實(shí)驗(yàn)中氫溴酸東莨菪堿引起的記憶獲得障礙有改善作用。在小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)中有對(duì)抗東莨菪堿所造成的記憶障礙的作用。
文檔編號(hào)A61P25/00GK101091791SQ20061008641
公開日2007年12月26日 申請日期2006年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月19日
發(fā)明者杜雨蒼 申請人:上海中科英泰生物技術(shù)有限公司