專利名稱：一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑及其制備方法涉及一種可活血化瘀、通絡(luò)止痛、開竅醒腦，用于治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥等心腦血管疾病的藥物制劑，尤其是關(guān)于燈盞花素和冰片組成的中藥復方注射制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
心腦血管疾病是危害人類生命和健康最主要的疾病，根據(jù)近年有關(guān)資料統(tǒng)計，我國每年因心腦血管疾病死亡者占死亡病因的半數(shù)左右。而高血壓、腦卒中和冠心病是心腦血管疾病的代表性疾病。隨著社會生活水平的提高和工作節(jié)奏的加快，心腦血管疾病已成為威脅中老年人健康和長壽的第一號殺手。據(jù)衛(wèi)生部統(tǒng)計我國心腦血管疾病患者的首次發(fā)病年齡1/3在60歲以下，特別是心腦血管疾病的發(fā)病率、死亡率、致殘率、復發(fā)率都很高，并且并發(fā)癥多的特點即發(fā)病率高達13.6％，每天以兩萬人的速度遞增；死亡率高達45％，占總死亡人數(shù)的50％；致殘率高；腦中風病人致殘率高達75％、冠心病病人成為半勞力；復發(fā)率高心腦血管疾病(心梗、腦梗)五年之內(nèi)復發(fā)率高達42％；并發(fā)癥等由心腦血管意外引發(fā)的(呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng))病癥較多。
燈盞花素是從天然植物燈盞花燈盞細辛(習稱燈盞花，多生于海拔1200～3500米的山坡草地或林緣，分布于我國云南、湖南、廣西、四川、貴州、西藏等省區(qū)，尚未見國外有分布的報道，主產(chǎn)于云南省文山壯族自治州)中提取的黃酮類活性成份，為燈盞花甲素、燈盞花乙素的混合物，主要為燈盞花乙素。現(xiàn)代藥物研究證明，燈盞花素具有增加血流量，改善微循環(huán)、擴張血管、降低血粘度、降血脂、促纖溶、抗血栓、抗血小板聚集等作用。上世紀從70年代起燈盞花素制劑就開始應用于臨床。燈盞細辛自有文獻記載以來，主要是單味用藥，復方鮮見；而目前燈盞花素應用于臨床的注射制劑，也僅為單味用藥，臨床的療效有限。
冰片的本草名為龍腦香，作為中藥應用已有上千年的歷史。中醫(yī)認為冰片辛苦微寒，具有開竅醒神，清熱止痛的功效。冰片的藥理研究是近來國內(nèi)外學者研究的熱點之一，冰片有抗心肌梗死的作用，且有“藥引”作用。研究發(fā)現(xiàn)冰片能改變血腦屏障的通透性，增加某些水溶性藥物，如磺胺嘧啶、慶大霉素等向腦內(nèi)的轉(zhuǎn)運。
燈盞花素和冰片以及其他藥物的配伍，目前僅見口服制劑，如銀盞心脈滴丸、銀丹心腦通軟膠囊等，由于口服制劑起效慢，不能適用于心腦血管的急性期，故臨床使用范圍小。燈盞花素和冰片兩者的配伍，目前未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的針對上述不足之處提供一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，可活血化瘀、通絡(luò)止痛、開竅醒腦，用于治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥等心腦血管疾病，由冰片和燈盞花素組成的中藥復方注射制劑(含小容量注射液、粉針和大容量注射液)。本發(fā)明將燈盞花素和冰片兩味中藥配伍制成注射劑，不但起效快，而且兩者的協(xié)同作用明顯，臨床治療效果好。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種由燈盞花素和冰片組成的中藥復方注射制劑的制備方法。
一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑及其制備方法是采取以下方案實現(xiàn)一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑由有效成分燈盞花素和冰片、注射用藥物允許使用的輔料，按配比配制而成；藥用原料有效成分燈盞花素與冰片重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑為小容量注射液、大容量注射液、粉針劑。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑中的冰片是人工冰片，或者是天然冰片；燈盞花素是從中藥材燈盞細辛中提取的黃酮類成分，主要為燈盞花乙素。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑中的注射用藥物允許使用的輔料為溶媒、助溶劑、等滲調(diào)節(jié)劑、賦形劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑中的一種或混合物。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑中的注射用藥物允許使用的輔料溶媒選用注射用水或乙醇，助溶劑選用羥丙基-β-環(huán)糊精、吐溫-80、甘油、乙醇中的一種或混合物，等滲調(diào)節(jié)劑選用葡萄糖、氯化鈉中的一種或混合物，賦形劑選用甘露醇、左旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、蔗糖、乳糖中的一種或混合物，穩(wěn)定劑選用乙二胺四醋酸二鈉、亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸中的一種或混合物，pH調(diào)節(jié)劑選用氫氧化鈉、鹽酸、碳酸氫鈉、枸櫞酸鈉中的一種或混合物。
一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法，采取如下步驟按制劑處方配料有效成分燈盞花素、冰片、注射用藥物允許使用的輔料，藥用原料有效成分冰片與燈盞花素重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量；取上述配置的冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，即得小容量注射液(水針)；取等滲調(diào)節(jié)劑，用注射用水溶解，加入針用活性炭加熱吸附20分鐘，過濾脫炭；取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述三液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，即得大容量注射液(輸液)；取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加入賦形劑，再加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，無菌過濾，灌裝，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得粉針劑。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法中采用微孔濾膜進行精濾或無菌過濾，或者采用超濾膜超濾后再進行精濾或無菌過濾。
所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法中注射用藥物允許使用的輔料溶媒選用注射用水或乙醇，助溶劑選用羥丙基-β-環(huán)糊精、吐溫-80、甘油、乙醇中的一種或混合物，等滲調(diào)節(jié)劑選用葡萄糖、氯化鈉中的一種或混合物，賦形劑選用甘露醇、左旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、蔗糖、乳糖中的一種或混合物，穩(wěn)定劑選用乙二胺四醋酸二鈉、亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸中的一種或混合物，pH調(diào)節(jié)劑選用氫氧化鈉、鹽酸、碳酸氫鈉、枸櫞酸鈉中的一種或混合物。
上述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑在治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥類心腦血管疾病藥物中的應用。
燈盞花素是從天然植物燈盞花燈盞細辛中提取的黃酮類活性成份，為燈盞花甲素、燈盞花乙素的混合物，主要為燈盞花乙素。現(xiàn)代藥物研究證明，燈盞花素具有增加血流量，改善微循環(huán)、擴張血管、降低血粘度、降血脂、促纖溶、抗血栓、抗血小板聚集等作用。
冰片的本草名為龍腦香，作為中藥應用已有上千年的歷史。中醫(yī)認為冰片辛苦微寒，具有開竅醒神，清熱止痛的功效。冰片的藥理研究是近來國內(nèi)外學者研究的熱點之一，冰片有抗心肌梗死的作用，且有“藥引”作用。研究發(fā)現(xiàn)冰片能改變血腦屏障的通透性，增加某些水溶性藥物，如磺胺嘧啶、慶大霉素等向腦內(nèi)的轉(zhuǎn)運。
本發(fā)明為臨床提供了安全、可控、有效的急救用中藥注射劑。本發(fā)明由于其處方中以燈盞花素和冰片為有效成份(活性成份)，處方中加入具有開竅醒神、清熱止痛作用的冰片，對燈盞花素作用于心腦血管的作用有增強作用，故本發(fā)明的臨床效果比單方更好。本發(fā)明為注射劑，可適用于心腦血管疾病的急性發(fā)作期，克服了口服給藥起效慢的缺點。且本發(fā)明還提供了制備由燈盞花素和冰片組成的中藥復方注射制劑的小容量注射液(水針)、大容量注射液(輸液)、粉針劑的工藝處方，為臨床使用提供了更多的選擇。
具體實施例方式
本發(fā)明一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑由有效成分燈盞花素和冰片、注射用藥物允許使用的輔料，按配比配制而成；藥用原料有效成分冰片與燈盞花素重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量。
本發(fā)明所說的燈盞花素，是指從燈盞細辛中提取所得的黃酮類成分，按干燥品計算，含燈盞花乙素(C21H18O12)應≥95.0％，可用于注射制劑的制備。
本發(fā)明所說的冰片，可以為人工冰片，也可以是天然冰片，均符合注射制劑使用。
本發(fā)明燈盞花素和冰片組成的中藥復方注射制劑，其特征是包括冰片1份，燈盞花素1～20份，加入了注射用藥物允許使用的輔料(包括溶媒、助溶劑，或者等滲調(diào)節(jié)劑，或者賦形劑，或者穩(wěn)定劑，或者pH調(diào)節(jié)劑，或者上述輔料的混合物)制備而成。
助溶劑是吐溫-80，或者是甘油，或者是羥丙基-β-環(huán)糊精，或者是乙醇，或者上述輔料的混合物，其用量為10～30份；穩(wěn)定劑是0.1～1份的乙二胺四醋酸二鈉，或者是亞硫酸氫鈉，或者是無水亞硫酸鈉，或者是鹽酸半胱氨酸，或者上述輔料的混合物，其用量為0.1～1份；等滲調(diào)節(jié)劑是葡萄糖，或者是氯化鈉，或者上述輔料的混合物，其用量可使制得的樣品達到等滲或略高滲；pH調(diào)節(jié)劑是碳酸氫鈉，或者是氫氧化鈉，或者是鹽酸，或者是枸櫞酸鈉等；賦形劑是甘露醇，或者是左旋糖酐，或者是葡萄糖，或者是氯化鈉，或者是蔗糖，或者是乳糖，或者上述輔料的混合物，其用量為1～200份。
本發(fā)明提供的中藥復方注射制劑，其制型可以是小容量注射液(水針)、粉針劑、大容量注射液(輸液)，具體制備方法分別為小容量注射液(水針)制備方法取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，即得。
大容量注射液(輸液)制備方法取等滲調(diào)節(jié)劑，用注射用水溶解，加入針用活性炭加熱吸附15～30分鐘，過濾脫炭；取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述三液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑。
粉針劑制備方法取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入注射用水攪拌，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加入賦形劑后，再加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，無菌過濾，灌裝，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑。
本發(fā)明冰片和燈盞花素組成的中藥復方注射制劑，可注射(肌注或靜脈)給藥，充分發(fā)揮了兩藥的藥效；藥效試驗表明，兩者合并使用后可產(chǎn)生協(xié)同作用，其療效優(yōu)于單方給藥。本發(fā)明能活血化瘀、通絡(luò)止痛、開竅醒腦，可用于治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥等心腦血管疾病。
以下通過幾個具體實施例描述，結(jié)合藥效學試驗結(jié)果，進一步說明本發(fā)明，下述實施例僅用于說明本發(fā)明而對本發(fā)明沒有限制。
實施例1取冰片10g，加入100g乙醇溶解后，加注射用水至1000ml；取1000ml注射用水，加入2.5g乙二胺四醋酸二鈉作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素10g攪拌，滴加氫氧化鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加注射用水并定量到10000ml，加入針用活性炭5g吸附20分鐘，過濾脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH3.7，用0.22μm微孔濾膜精濾至澄明，通氮灌裝至5ml玻璃安瓿中，封口，100℃30分鐘滅菌，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方小容量注射劑。
實施例2取冰片10g，加入200g甘油溶解后，加注射用水至1000ml；取5000ml注射用水，加入10g鹽酸半胱氨酸作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素200g攪拌，滴加碳酸氫鈉鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加注射用水并定量到10000ml，加入針用活性炭5g吸附20分鐘，過濾脫炭，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至pH8.3，用0.22μm微孔濾膜精濾至澄明，通氮灌裝至2ml玻璃安瓿中，封口，100℃30分鐘滅菌，燈檢，即得一種小容量注射劑。
實施例3取冰片10g，加入200g吐溫-80，加注射用水至1000ml，攪拌溶解；取3000ml注射用水，加入5g亞硫酸氫鈉作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素100g攪拌，滴加氫氧化鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加注射用水并定量到10000ml，加入針用活性炭10g吸附20分鐘，脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH6.5，用0.22μm微孔濾膜無菌過濾至澄明，灌裝至5ml玻璃安瓿中，封口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方小容量注射劑。
實施例4取熱注射用水500000ml，加入葡萄糖50000g、針用活性炭250g，攪拌使溶解均勻并煮沸30分鐘。閉汽后，開啟冷卻水，使葡萄糖濃配液冷卻40～50℃，回濾10min，脫炭備用；取冰片10g，加20g乙醇溶解后，加入到300g羥丙基-β-環(huán)糊精配成的飽和水溶液中，攪拌或超聲至澄清；取1000ml注射用水，加入10g乙二胺四醋酸二鈉作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素10g攪拌，滴加枸櫞酸鈉溶液使溶解；將上述三液混合，加注射用水并定量到1000000ml，加入針用活性炭250g吸附20分鐘，過濾脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH4.7，用0.22μm微孔濾膜精濾至澄明，通氮灌裝至500ml輸液瓶中，115℃30分鐘滅菌，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方大容量注射劑。
實施例5取熱注射用水500000ml，加入氯化鈉9000g、針用活性炭250g，攪拌使溶解均勻并煮沸30分鐘。閉汽后，開啟冷卻水，使氯化鈉濃配液冷卻40～50℃，回濾10min，脫炭備用；取冰片10g，加300g甘油溶解后，加注射用水至1000ml；取1000ml注射用水，加入8g無水亞硫酸鈉作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素200g攪拌，滴加碳酸氫鈉溶液使溶解；將上述三液混合，加注射用水并定量到1000000ml，加入針用活性炭500g吸附20分鐘，過濾脫炭，用碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH6.7，用0.22μm微孔濾膜精濾至澄明，通氮灌裝至100ml輸液瓶中，115℃30分鐘滅菌，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方大容量注射劑。
實施例6取熱注射用水500000ml，加入氯化鈉4500g、葡萄糖25000g、針用活性炭250g，攪拌使溶解均勻并煮沸30分鐘。閉汽后，開啟冷卻水，使?jié)馀湟豪鋮s40～50℃，回濾10min，脫炭備用；取冰片10g，加50g乙醇溶解后，加注射用水至1000ml；取1000ml注射用水，加入10g鹽酸半胱氨酸作穩(wěn)定劑，再加入燈盞花素100g攪拌，滴加氫氧化鈉溶液使溶解；將上述三液混合，加注射用水并定量到1000000ml，加入針用活性炭250g吸附20分鐘，過濾脫炭，用氫氧化溶液調(diào)節(jié)至pH7.8，用0.22μm微孔濾膜精濾至澄明，通氮灌裝至250ml輸液瓶中，115℃30分鐘滅菌，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方大容量注射劑。
實施例7取冰片10g，加入300g甘油溶解，加注射用水至1000ml，攪拌均勻；取1000ml注射用水加入燈盞花素10g攪拌，滴加氫氧化鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加入甘露醇200g，加注射用水攪拌至完全溶解并定量到10000ml，加入針用活性10g炭吸附20分鐘，過濾脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH3.8，用0.22μm微孔濾膜無菌過濾至澄明，灌裝至西林瓶中，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射粉針劑。
實施例8取冰片10g，加入300g羥丙基-β-環(huán)糊精配成的飽和水溶液中，攪拌或超聲至澄清；取1000ml注射用水加入燈盞花素10g攪拌，滴加氫氧化鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加入乳糖200g，加注射用水攪拌至完全溶解并定量到10000ml，加入針用活性10g炭吸附20分鐘，過濾脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH4.0，用0.22μm微孔濾膜無菌過濾至澄明，灌裝至西林瓶中，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射粉針劑。
實施例9
取冰片10g，加入10g乙醇溶解，加注射用水至1000ml；取1000ml注射用水加入燈盞花素100g攪拌，滴加碳酸氫鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加入左旋糖酐100g，加注射用水攪拌至完全溶解并定量到10000ml，加入針用活性15g炭吸附20分鐘，過濾脫炭，用碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)至pH8.0，用0.22μm微孔濾膜無菌過濾至澄明，灌裝至西林瓶中，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射粉針劑。
實施例10取冰片10g，加入10g吐溫和注射用水200ml攪拌溶解，添加注射用水至1000ml；取1000ml注射用水加入燈盞花素200g攪拌，滴加碳酸氫鈉溶液使溶解；將上述兩液混合，加入蔗糖100g、甘露醇200g，加注射用水攪拌至完全溶解并定量到10000ml，加入針用活性25g炭吸附20分鐘，過濾脫炭，用鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH68.0，用0.22μm微孔濾膜無菌過濾至澄明，灌裝至西林瓶中，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，即得一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射粉針劑。
一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的藥效學試驗研究(1)健康雄性SD大鼠，體重250～300g，10周齡(SPF級)，隨機均分為7組溶劑對照組(生理鹽水)、由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑、冰片組、燈盞花素組。阻塞前20min給藥，給藥體積1ml/kg，速度0.2ml/min。
大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷模型制備將直徑2.8mm的尼龍線一端仔細打磨光滑，在距此端18mm、20mm、22mm處做標志。采用改良Koizumi法制作大腦中動脈阻斷(MACO)模型，手術(shù)過程中監(jiān)測肛溫，使之保持在37±0.5℃。大鼠用水合氯醛麻醉(300mg/kg，ip)，頸部腹側(cè)正中切口，暴露氣管和右側(cè)頸總動脈，在頸內(nèi)動脈和頸外動脈分支點，從近心端結(jié)扎頸總動脈，從分支處分離結(jié)扎頸外動脈，距分支處2mm在頸總動脈上剪一小切口，由切口處向頸內(nèi)動脈放入栓塞線約20mm或遇到阻力后，縫合頸部皮膚切口，約10mm栓塞線留置在頸部切口外。缺血2h后拔出栓塞線約10mm，使血流再通。再灌注22h，剔除死亡的大鼠。
再灌注末將大鼠斷頭處死，迅速取出大腦，置于-20℃環(huán)境下保留10min后，取出腦，從前端開始冠狀面連續(xù)切腦片厚度約2mm，每腦切5片，切下腦片立即放入2％TTC溶液，溶液置于37℃密閉不透光環(huán)境下15min后，用10％甲醛溶液固定24h，梗死區(qū)為白色，正常區(qū)為紅色。將梗死區(qū)和正常區(qū)分離，分別稱重，用梗死區(qū)所占全腦重量的百分比表示梗死區(qū)范圍。
對大鼠腦局灶性缺血再灌注損傷后腦梗死體積的影響。X±s。

試驗表明，燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)可顯著減小大鼠局灶性腦缺血2h再灌注22h后的腦梗死體積，燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶30)、冰片組、燈盞花素組似有減小腦梗死體積的作用，但較燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)的作用低，說明冰片與燈盞花素配伍在一定范圍內(nèi)(1∶1，1∶10，1∶20)具有協(xié)同作用，在此范圍內(nèi)配伍使用可增強藥效。
一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的藥效學試驗研究(2)根據(jù)隨機、雙盲、對照和平行的原則，并根據(jù)統(tǒng)計學專家的編盲表將SD大鼠分成5組，每組8只。分別為溶劑對照組(生理鹽水)、缺血再灌組(模型對照組)、川芎嗪組(陽性藥對照組，30mg/kg)、燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，2mg/kg；1∶10，11mg/kg；1∶20，21mg/kg)。各組靜脈給藥1次，給藥后進行麻醉并施手術(shù)。
動物模型制備及血流動力學測定按Baines CP等在體抗心肌缺血復灌損傷作用方法進行。大鼠在麻醉下(烏拉坦1.0g·k-1，ip)切開頸部皮膚，氣管內(nèi)插管，管接人工呼吸機，呼吸頻率55～65次/分，潮氣量1.5～2ml.100g-1，呼∶吸時比為1.5∶1。根據(jù)呼吸頻率及深度調(diào)整呼吸參數(shù)。分離左、右頸總動脈，左頸總動脈插入一含0.1％肝素生理鹽水的PE管，另取一個充滿0.1％肝素生理鹽水的PE管經(jīng)右頸總動脈插入左心室，根據(jù)顯示器所示壓力圖形改變判斷插管是否進入心室腔。兩導管均連壓力換能器分別將信號輸入到生物信號采集處理系統(tǒng)，以監(jiān)測大鼠血壓和左心室血流動力學變化。觀察指標包括收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolicblood pressure，DBP)和平均動脈壓(mean arterial blood pressure，MBP)。左心室收縮壓(left ventricular systolic pressure，LVSP)、左心室等容期壓力最大變化速率(±dp/dt max)、左心室舒張壓(left ventricular diastolic pressure，LVDP)、左心室舒張末壓(left ventricular end-diastolic pressure，LVEDP)、心率(heart rate，HR)。左心室發(fā)展壓(left ventricular developed pressure，LVDP’)系LVSP與LVDP的差值。將針式電極固定于大鼠四肢皮下以監(jiān)測肢體II導聯(lián)心電圖變化。沿胸骨左緣剪開3、4、5肋骨，暴露心臟，剪開心包膜。以左冠狀動脈為標志，用3/8圓3×10不銹鋼圓針，在左冠狀動脈下穿一絲線。進針深度穿過心肌1mm左右，進出針間寬度在動脈周圍1.5～2mm左右。穩(wěn)定15分鐘，待各指標穩(wěn)定后記錄藥前心電圖及血壓等血流動力學各值。將一細小乳膠管墊于血管與結(jié)扎線之間，拉緊結(jié)扎線使細小乳膠管壓迫左冠狀動脈而致閉塞。以結(jié)扎后心臟局部發(fā)紺伴隨T波高聳或ST段抬高，作為結(jié)扎成功的標準。結(jié)扎30min后，松開結(jié)扎線再灌注90min，以局部發(fā)紺逐漸變?yōu)榧t潤、心電圖ST段逐漸恢復為復灌成功的標志。在缺血期及復灌期每隔15分鐘記錄一次上述指標。
實驗結(jié)果麻醉大鼠冠脈結(jié)扎前LVSP、LVDP、±dp/dtmax、LVDP’、LVEDP、MBP、HR基礎(chǔ)值各相近，組間無明顯差異。大鼠心肌缺血期LVEDP值有意義高于偽手術(shù)組對應值，燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)和川芎嗪組給藥組有意義低于模型對照組；而再灌期LVEDP各組間無統(tǒng)計學意義差異。缺血再灌前給予燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)LVDP’、±dp/dtmax等值均有意義高于模型對照組各時間對應值(P＜0.05)。除偽手術(shù)組外，在整個觀察的130min內(nèi)各組MBP、HR有下降趨勢，但燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)與模型對照組間比較缺血末值有意義低于對照組，而復灌末值有意義高于對照組(表1，表2)。缺血末左室收縮壓(LVSP)燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)和川芎嗪組有意義高于模型對照組(表3)。缺血末和復灌末左室發(fā)展壓(LVSP-LVEDP、±dp/dt max)燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)和川芎嗪組有意義模型對照組(表4，6，7)。結(jié)果提示燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)有改善心肌缺血再灌注后大鼠心功能損傷作用和輕度降低血壓作用，而對心率影響不明顯。燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)和川芎嗪組缺血末和復灌末LVEDP有意義低于模型對照組，提示燈盞花素和冰片復方注射劑組(1∶1，1∶10，1∶20)可降低大鼠心臟前負荷作用(表5)。
表1 對大鼠缺血再灌注后的MBP(mmhg)影響(每組8只)

注與模型對照組比較，P＜0.05
表2 對大鼠缺血再灌注后的HR(beat/min)影響(每組8只)

表3 對大鼠缺血再灌注后的LVSP(mmHg)影響

注與模型對照組比較，P＜0.05表4 對大鼠缺血再灌注后的LVDP’(mmHg)影響

注與模型對照組比較，P＜0.05
表5 對大鼠缺血再灌注后的LVEDP(mmHg)的影響

注與模型對照組比較，P＜0.05表6 對大鼠缺血再灌注后的+dp/dtmax(mm Hg·s-1)影響

注與模型對照組比較，P＜0.05表7 對大鼠缺血再灌注后的-dp/dtmax(mmHg·s-1)影響

注與模型對照組比較，P＜0.0權(quán)利要求
1.一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，其特征在于由有效成分燈盞花素和冰片、注射用藥物允許使用的輔料，按配比配制而成；藥用原料有效成分冰片與燈盞花素重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，其特征在于該注射制劑為小容量注射液、大容量注射液、粉針劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，其特征在于冰片是人工冰片，或者是天然冰片；燈盞花素是從中藥材燈盞細辛中提取的黃酮類成分，主要為燈盞花乙素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，其特征在于注射用藥物允許使用的輔料為溶媒、助溶劑、等滲調(diào)節(jié)劑、賦形劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑中的一種或混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑，其特征在于注射用藥物允許使用的輔料溶媒選用注射用水或乙醇，助溶劑選用羥丙基-β-環(huán)糊精、吐溫-80、甘油、乙醇中的一種或混合物，等滲調(diào)節(jié)劑選用葡萄糖、氯化鈉中的一種或混合物，賦形劑選用甘露醇、左旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、蔗糖、乳糖中的一種或混合物，穩(wěn)定劑選用乙二胺四醋酸二鈉、亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸中的一種或混合物，pH調(diào)節(jié)劑選用氫氧化鈉、鹽酸、碳酸氫鈉、枸櫞酸鈉中的一種或混合物。
6.一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法，其特征在于采取如下步驟按制劑處方配料有效成分燈盞花素、冰片、注射用藥物允許使用的輔料，藥用原料有效成分冰片與燈盞花素重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量；取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，得小容量注射液；取等滲調(diào)節(jié)劑，用注射用水溶解，加入針用活性炭加熱吸附20分鐘，過濾脫炭；取冰片1份，加入助溶劑和注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述三液混合，加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，精濾灌裝后滅菌，或無菌過濾后灌裝，燈檢，得大容量注射液；取冰片1份，加入助溶劑和適量注射用水溶解；取燈盞花素1～20份，加入含穩(wěn)定劑的注射用水，滴加pH調(diào)節(jié)劑使溶解；將上述兩液混合，加入賦形劑，再加注射用水到一定體積，加入針用活性炭吸附15～30分鐘，過濾脫炭，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至pH3.5～8.5，無菌過濾，灌裝，加塞，冷凍干燥，鋁蓋壓口，燈檢，得粉針劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法，其特征在于采用微孔濾膜進行精濾或無菌過濾，或者采用超濾膜超濾后再進行精濾或無菌過濾。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑的制備方法，其特征在于注射用藥物允許使用的輔料溶媒選用注射用水或乙醇，助溶劑選用羥丙基-β-環(huán)糊精、吐溫-80、甘油、乙醇中的一種或混合物，等滲調(diào)節(jié)劑選用葡萄糖、氯化鈉中的一種或混合物，賦形劑選用甘露醇、左旋糖酐、葡萄糖、氯化鈉、蔗糖、乳糖中的一種或混合物，穩(wěn)定劑選用乙二胺四醋酸二鈉、亞硫酸氫鈉、無水亞硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸中的一種或混合物，pH調(diào)節(jié)劑選用氫氧化鈉、鹽酸、碳酸氫鈉、枸櫞酸鈉中的一種或混合物。
9.權(quán)利要求1或6所述的一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑在治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥類心腦血管疾病藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑及其制備方法涉及一種可活血化瘀、通絡(luò)止痛、開竅醒腦，尤其是關(guān)于燈盞花素和冰片組成的中藥復方注射制劑及其制備方法。由有效成分燈盞花素和冰片、注射用藥物允許使用的輔料，按配比配制而成；藥用原料有效成分冰片與燈盞花素重量比為1∶1～20，注射用藥物允許使用的輔料余量。注射用藥物允許使用的輔料為溶媒、助溶劑、等滲調(diào)節(jié)劑、賦形劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑中的一種或混合物。注射制劑為小容量注射液、大容量注射液、粉針劑。一種由燈盞花素和冰片組成的復方注射制劑在治療冠心病、心絞痛、腦缺血、腦梗塞、中風后遺癥類心腦血管疾病藥物中的應用。
文檔編號A61K9/19GK1806795SQ200610038268
公開日2006年7月26日 申請日期2006年2月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月14日
發(fā)明者薛洪發(fā), 張國清, 王軍 申請人:南京康瑯醫(yī)藥科技有限公司