專利名稱：一種遠(yuǎn)志提取物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種遠(yuǎn)志提取物，具體地，是以中藥遠(yuǎn)志為原料制備而成的提取物，屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
失眠是最常見的睡眠障礙，又稱為睡眠開始和維持障礙。Rosekind認(rèn)為(1992)失眠癥是指患者正常的睡眠被擾亂，并對(duì)患者白天的活動(dòng)具有明顯的不良影響(疲勞、注意力下降、打盹等)，同時(shí)客觀檢測(cè)(如多導(dǎo)睡眠圖)出現(xiàn)異常的綜合癥。中醫(yī)對(duì)失眠癥稱“不寐”、“不得眠”、“不得臥”等，以入睡困難，睡后易醒，醒后不再入睡，即睡眠時(shí)間縮短為特點(diǎn)。
目前治療失眠癥的藥物有中藥、西藥。西藥一般均有不同程度的副作用和依賴性。對(duì)失眠癥的中藥治療，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)許多中藥成分具有良好鎮(zhèn)靜催眠作用，且不良反應(yīng)較少，具有廣闊的應(yīng)用前景，如陜西利威爾制藥有限公司生產(chǎn)的利威神衰康沖劑、安神健腦液(北京同仁堂藥廠生產(chǎn))、甜夢(mèng)口服液等，但失眠癥臨床缺乏真正有效的治療藥物。目前，尚未有以有效部位為原料的中藥新藥。
遠(yuǎn)志為傳統(tǒng)的安神中藥，有安神定志之功，主要用于心神不安，驚悸失眠，健忘等證的治療，遠(yuǎn)志用治不寐均見于歷代本草記載。現(xiàn)代藥理研究表明，遠(yuǎn)志提取物對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有鎮(zhèn)靜、抗驚厥作用，其根皮、全根及木心灌喂給予小鼠，有鎮(zhèn)靜安神作用。對(duì)鎮(zhèn)靜作用物質(zhì)基礎(chǔ)及藥代動(dòng)力學(xué)研究表明，遠(yuǎn)志糖酯A、C(tenuifoliside A、C)是鎮(zhèn)靜作用物質(zhì)基礎(chǔ)，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成具有鎮(zhèn)靜活性的3，4，5-三甲氧基桂皮酸(TMCA)而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜安神作用，研究結(jié)果表明凡具有TMCA的蔗糖多酯衍生物均可能是TMCA的天然前體藥物，認(rèn)為遠(yuǎn)志具有持續(xù)的鎮(zhèn)靜作用主要是含TMCA的天然前體藥物所致。目前遠(yuǎn)志治療心神不寧，驚悸，失眠，健忘等以單用或與其它安神藥配合應(yīng)用，針對(duì)不同病因，亦可與相應(yīng)的藥物進(jìn)行配伍。如《陜西中草藥》單用遠(yuǎn)志研粉，每服3克，每日2次，米湯沖服。治療神經(jīng)衰弱，健忘，心悸，多夢(mèng)，失眠者?！稄埵厢t(yī)通》遠(yuǎn)志丸，以本發(fā)明藥物膠囊同茯神、龍齒、朱砂等鎮(zhèn)靜安神藥同用，以加強(qiáng)寧心安神作用?！肚Ы鹨健烽_心散，以本發(fā)明藥物膠囊同人參、茯苓、石菖蒲同用，治健忘證。上述使用方式適應(yīng)證寬，針對(duì)性差，服用劑量大，用遠(yuǎn)志中提取的遠(yuǎn)志皂苷，毒性高，如田徽、武云、王建、夏厚林，生遠(yuǎn)志中總皂苷、生物堿、酮、脂肪油的急性毒性研究，中藥藥理與臨床，2005年第4期；王建，吳暉暉，武云，鮑薈竹.遠(yuǎn)志及其總皂苷與蜜遠(yuǎn)志的急性毒性比較研究[J].中藥藥理與臨床，2004，(6).報(bào)道了如下內(nèi)容1、采用有機(jī)溶劑回流提取法提取遠(yuǎn)志中的總皂苷、總生物堿、總酮、總脂肪油，并采用改良寇氏法測(cè)定其半數(shù)致死量(LD50)。結(jié)果總皂苷的LD50為1.36±0.27g/kg，折合原生藥遠(yuǎn)志的LD50為5.88±1.27g/kg，未測(cè)出生物堿、酮、脂肪油的LD50。結(jié)論總皂苷為遠(yuǎn)志的大類毒性成分。2、生遠(yuǎn)志灌服對(duì)小鼠的LD50為15.31±1.45g/kg，等生藥量蜜遠(yuǎn)志的LD50為19.67±1.92g/kg(P＜0.05)；遠(yuǎn)志總皂苷的LD50為212±31mg/kg，表明遠(yuǎn)志生品的毒性較大，蜜炙品的毒性較小，其所含皂苷可能為該品的主要毒性成分。臨床使用安全性低。目前尚無針對(duì)遠(yuǎn)志有效部位制備安全、有效、穩(wěn)定、可控的產(chǎn)品報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種遠(yuǎn)志提取物，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提供了提取物的制備方法。
本發(fā)明提供了一種遠(yuǎn)志提取物，它是以中藥材遠(yuǎn)志為原料制備而成的提取物，其中，含有遠(yuǎn)志皂苷元，以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，重量百分含量不得少于55.0％；含遠(yuǎn)志酸C29H44O6的重量百分含量不得少于12.0％。
所述的遠(yuǎn)志來源于遠(yuǎn)志Polygala tenuifolia Wild.或卵葉遠(yuǎn)志Polygala sibirica L.的根。
進(jìn)一步地，它含有遠(yuǎn)志皂苷元，以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，重量百分含量為55.0％～95％；含遠(yuǎn)志酸C29H44O6的重量百分含量為12.0％～90％。
本發(fā)明還提供了該遠(yuǎn)志提取物的方法，它包括如下步驟a、取藥材遠(yuǎn)志，提取遠(yuǎn)志總皂苷；b、將a步驟制備的遠(yuǎn)志總皂苷，加入7.5～12.5％w/w鹽酸溶解，煮沸水解1.5～2.5小時(shí)，冷卻，濾過，取沉淀，水洗至中性，干燥，粉碎，得本發(fā)明遠(yuǎn)志提取物，即遠(yuǎn)志總皂苷元。
其中，a步驟所述的提取遠(yuǎn)志總皂苷的步驟如下a、取遠(yuǎn)志藥材，浸泡，煎煮，濃縮，靜置，濾過，藥液通過已處理好的大孔吸附樹脂柱；所述的大孔吸附樹脂為D101、D201、D301、D140、D141A或制藥技術(shù)中的常規(guī)選擇；b、水洗脫，棄去水洗脫液，再用30％乙醇洗脫，棄去洗脫液；繼續(xù)用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮、干燥，得遠(yuǎn)志總皂苷。
或采用現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的方法提取遠(yuǎn)志總皂苷。
其中，步驟b所述的鹽酸濃度為10％w/w；煮沸水解時(shí)間為2小時(shí)。
本發(fā)明還提供了該遠(yuǎn)志提取物在制備用于鎮(zhèn)靜安神的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了該遠(yuǎn)志提取物在制備用于祛痰藥物中的用途。
本發(fā)明提供了一種用于鎮(zhèn)靜安神的藥物組合物，它是由有效量的遠(yuǎn)志提取物為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
其中，所述的制劑的膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、口服液。
其中，所述的膠囊劑中每粒膠囊含總皂苷元以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，不得少于130mg，含遠(yuǎn)志酸C29H44O6不得少于30mg。根據(jù)膠囊劑的質(zhì)量限定，其它同類型口服制劑均可確定相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
本發(fā)明藥物采用藥材遠(yuǎn)志中有效部位遠(yuǎn)志總皂苷元為活性成分，藥效明確，服用劑量小，可控性強(qiáng)，安全性高，為臨床提供了一種安全、有效的藥物選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 本發(fā)明遠(yuǎn)志提取物的制備取遠(yuǎn)志藥材粗粉，用8倍量水煎煮提取3次，每次2小時(shí)，濾過，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.03～1.05(50℃熱測(cè))的溶液，放冷，加水調(diào)節(jié)其濃度為0.25g/L(每1L藥液中含生藥遠(yuǎn)志量為0.25g)，靜置過夜，濾過，通過已處理好D101型大孔吸附樹脂柱(樹脂量與生藥量之比為3∶10)，以水3BV洗脫，棄去水液，再用30％乙醇3BV洗脫，棄去30％乙醇洗脫液，繼用70％乙醇3BV洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1.15(50℃熱測(cè))的清膏，噴霧干燥，得遠(yuǎn)志總皂苷。遠(yuǎn)志總皂苷以15倍量10％鹽酸溶解，煮沸水解2小時(shí)，放置冷卻，濾過，沉淀以蒸餾水洗至中性，80℃干燥，粉碎，制得本發(fā)明遠(yuǎn)志提取物，即遠(yuǎn)志總皂苷元。
實(shí)施例2 本發(fā)明藥物膠囊劑的制備a、原料及輔料用量遠(yuǎn)志總皂苷元(按實(shí)施例1的方法制備)225g、淀粉25g，制成1000粒；b、遠(yuǎn)志提取物得率為3％，提取物與輔料混勻，過60目篩，填入1號(hào)膠囊，制得膠囊1000粒，規(guī)格為每粒0.25g，每次服2粒。
實(shí)施例3 本發(fā)明藥物片劑的制備a、原料及輔料用量遠(yuǎn)志總皂苷元(按實(shí)施例1的方法制備)225g、微晶纖維素25g，制成1000片；b、遠(yuǎn)志提取物得率為3％，提取物與輔料混勻，過40目篩，直接壓片即得，制得片劑1000粒，規(guī)格為每片0.25g，每次服2片?；?qū)⑻崛∥锓鬯槌杉?xì)粉，與輔料混勻，用乙醇潤(rùn)濕制粒，制成顆粒后壓片即得。
實(shí)施例4 本發(fā)明顆粒劑的制備a、原料及輔料用量遠(yuǎn)志總皂苷元(按實(shí)施例1的方法制備)450g、糖粉550g，制成1000袋；b、遠(yuǎn)志提取物得率為3％，將提取物粉碎成細(xì)粉，與輔料混勻，用乙醇潤(rùn)濕制成軟材，將軟材擠壓過14目篩，干燥，即制成均勻的顆粒。規(guī)格為每袋1g，每次服1袋。
實(shí)施例5 本發(fā)明藥物提取物中遠(yuǎn)志酸、遠(yuǎn)志總皂苷的測(cè)定方法一、遠(yuǎn)志酸的含量測(cè)定照高效液相色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(體積比70∶30∶0.02)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm。理論塔板數(shù)按遠(yuǎn)志酸峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取遠(yuǎn)志酸對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含遠(yuǎn)志酸0.2mg的溶液，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取實(shí)施例1制備的本發(fā)明藥物提取物，精密稱取適量約40mg[同時(shí)另取本品粉末測(cè)定水分(《中國(guó)藥典》2005版一部附錄IXH第一法)]，精密稱定，至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
測(cè)定法 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
二、遠(yuǎn)志皂苷含量測(cè)定儀器與材料 UV-1100紫外-可見分光光度計(jì)(上海天美科技有限公司)，BP211D電子天平(十萬分之一，德國(guó)Sartorius股份有限公司)，齊墩果酸(含量測(cè)定用，批號(hào)0709-9803，中國(guó)藥品生物制品檢定所)；所用試劑均為分析純(成都化學(xué)試劑廠)。
①對(duì)照品溶液的制備 精密稱取齊墩果酸10.98mg，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1mL含齊墩果酸1.098mg)。
②標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取對(duì)照品溶液10、30、50、70、90μL于5支具塞磨口試管中，水浴加熱揮去溶劑，于每支試管中分別精密加入1.0mL5％香蘭素試劑、4.0mL高氯酸，密塞，搖勻，于70℃水浴恒溫加熱60min，取出立即用冰水浴冷卻2～3min，于530nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，隨行試劑作空白參比，以吸收度A為縱坐標(biāo)，齊墩果酸的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得回歸方程A＝0.073X-0.0578(r＝0.9998)，吸收度A與齊墩果酸濃度在2.196～19.764μg/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。測(cè)定數(shù)據(jù)見表1。
5％香蘭素試劑配制稱取0.5g香蘭素溶于10mL冰醋酸，即得，臨用新配。
表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

③供試品溶液的制備及含量測(cè)定 取水提取液，濾過，定容至1000mL，取15mL稀釋至50ml，搖勻，即得供試品溶液。精密吸取30μL于具塞磨口試管中，按上述“標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備”項(xiàng)下操作，測(cè)得吸收度，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算，即得皂苷含量。
按上述方稱測(cè)定本發(fā)明藥物提取物，按干燥品計(jì)算，含遠(yuǎn)志酸(C29H44O6)，不得少于12.0％；含遠(yuǎn)志皂苷元以齊墩果酸(C30H48O3)計(jì)，不得少于55.0％。
不同批次遠(yuǎn)志提取物遠(yuǎn)志酸的含量測(cè)定取本發(fā)明藥物膠囊約30mg，精密稱定，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，照本發(fā)明藥物膠囊[含量測(cè)定](1)項(xiàng)下方法測(cè)定，即得。按正文規(guī)定方法制備各供試品溶液，按正文色譜條件測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果見表2。
表2 不同批次遠(yuǎn)志提取物中遠(yuǎn)志酸含量測(cè)定結(jié)果(n＝3)

根據(jù)三批中試樣品含量測(cè)定結(jié)果，暫定中間體遠(yuǎn)志提取物中遠(yuǎn)志酸的含量不低于12.0％。
不同批次遠(yuǎn)志提取物中總皂苷元含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液10、20、40、60、80、100μl于6支具塞試管中，水浴蒸干，分別精密加入1ml 5％香草醛冰醋酸溶液、4ml高氯酸試液，密塞，搖勻，于70℃水浴恒溫加熱60min，取出后立即用冰水浴冷卻2～3min，以相應(yīng)試劑作空白，照比色法，在530nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
以吸光度A為縱坐標(biāo)，齊墩果酸的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得直線回歸方程A＝0.0721C-0.0496，R＝0.9993。吸光度A與齊墩果酸的濃度在2.236μg/ml～22.36μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。
供試品溶液的制備 取遠(yuǎn)志提取物約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密吸取50μl于具塞試管中，按“標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備”項(xiàng)下的方法操作，測(cè)得吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中總皂苷元含量，計(jì)算，即得，結(jié)果見表3。
表3 不同批次遠(yuǎn)志提取物中總皂苷元含量測(cè)定結(jié)果(n＝3)

根據(jù)3批中試樣品含量測(cè)定結(jié)果，暫規(guī)定中間體遠(yuǎn)志提取物中三萜酸類成分的含量以齊墩果酸計(jì)，不得低于55.0％。
綜上，將本發(fā)明遠(yuǎn)志皂苷元的質(zhì)量限定為以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，重量百分含量為55.0％～95％；含遠(yuǎn)志酸C29H44O6的重量百分含量12.0％～90％。
實(shí)施例6 本發(fā)明藥物膠囊劑的質(zhì)量控制方法按實(shí)施例所述方法測(cè)定不同批次的膠囊劑中遠(yuǎn)志酸、遠(yuǎn)志總皂苷元的含量，結(jié)果見表4。
表4 樣品的遠(yuǎn)志酸含量測(cè)定

表5 總皂苷元含量測(cè)定結(jié)果

根據(jù)本發(fā)明藥物膠囊三批中試樣品含量測(cè)定結(jié)果，限定本發(fā)明藥物膠囊遠(yuǎn)志酸含量每粒不低于30mg/粒，總皂苷元含量每粒不低于130mg。
實(shí)施例7 本發(fā)明藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)遠(yuǎn)志總皂苷元三批中試樣品，分別在常溫下存放30個(gè)月，參照《中藥新藥研究的技術(shù)要求》及本發(fā)明藥物膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定各項(xiàng)進(jìn)行試驗(yàn)，各項(xiàng)目均符合規(guī)定。結(jié)果表明，遠(yuǎn)志總皂苷元生產(chǎn)工藝合理，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。根據(jù)穩(wěn)定性研究結(jié)果，暫定本發(fā)明藥物膠囊有效期為2年。
以下通過具體藥效學(xué)、毒理學(xué)試驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。
試驗(yàn)例1 本發(fā)明藥物提取物藥效學(xué)試驗(yàn)1、本發(fā)明藥物提取物對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響1.1實(shí)驗(yàn)材料(1)藥物受試藥物遠(yuǎn)志總皂苷元，由實(shí)施例1制備，每1克遠(yuǎn)志總皂苷元相當(dāng)于原生藥33.33g。用蒸餾水分別配制成含藥粉1.125％、0.5625％、0.01875％的藥液(g/v)(每ml含原生藥分別為0.375g、0.1875g、0.0625g)備用。
陽性藥物舒樂安定，常州四藥制藥有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào)蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1982)第280801號(hào)。生產(chǎn)批號(hào)020107。規(guī)格1mg×20片/板。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.00667％的藥液備用。
(2)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22克。由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。動(dòng)物使用許可證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)(99)第7號(hào)。檢疫后備用。
1.2實(shí)驗(yàn)方法(1)對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響取昆明小鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組(N＝10)、陽性對(duì)照組(N＝10)、遠(yuǎn)志總皂苷元高劑量組(N＝10)、中劑量組(N＝10)、低劑量組(N＝10)。除空白對(duì)照組外，按組分別灌胃蒸餾水、0.00667％舒樂安定藥液、1.125％、0.5625％、0.01875％的遠(yuǎn)志總皂苷元藥液10ml/kg。觀察給藥后動(dòng)物的一般行為表現(xiàn)、姿勢(shì)、步態(tài)有無異常等變化。給藥60分鐘后，用小動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)測(cè)定儀測(cè)定小鼠10分鐘內(nèi)自發(fā)活動(dòng)的次數(shù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
1.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果遠(yuǎn)志總皂苷元各劑量組給藥后，動(dòng)物均未出現(xiàn)抽搐、麻痹、肌顫，無異常步態(tài)，對(duì)外界反應(yīng)靈敏，瞳孔無擴(kuò)大或縮小，眼球無突出，眼瞼無下垂，呼吸正常，無明顯興奮或抑制，自發(fā)活動(dòng)減少。與空白對(duì)照組比較，高劑量組有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)果詳見表6。
表6 遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響(X±SD)

注與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
2、戊巴比妥鈉協(xié)同催眠試驗(yàn)2.1實(shí)驗(yàn)材料(1)藥物受試藥物遠(yuǎn)志總皂苷元，按實(shí)施例1的方法制備，每1克遠(yuǎn)志總皂苷元相當(dāng)于原生藥33.33g。用蒸餾水分別配制成含藥粉1.125％、0.5625％、0.01875％的藥液(g/v)(每ml含原生藥分別為0.375g、0.1875g、0.0625g)備用。
陽性藥物舒樂安定，常州四藥制藥有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào)蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1982)第280801號(hào)。生產(chǎn)批號(hào)020107。規(guī)格1mg×20片/板。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.00667％的藥液備用。
(2)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22克。由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。動(dòng)物使用許可證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)(99)第7號(hào)。檢疫后備用。
2.2實(shí)驗(yàn)方法取昆明小鼠50只，隨機(jī)分為模型對(duì)照組(N＝10)、陽性對(duì)照組(N＝10)、遠(yuǎn)志總皂苷元高劑量組(N＝10)、中劑量組(N＝10)、低劑量組(N＝10)。按組分別灌胃蒸餾水、0.00667％舒樂安定藥液、1.125％、0.5625％、0.01875％的遠(yuǎn)志總皂苷元藥液10ml/kg。給藥60分鐘后，每只小鼠均腹腔注射1％戊巴比妥鈉50mg/kg，記錄小鼠睡眠時(shí)間(翻正反射消失持續(xù)時(shí)間)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果遠(yuǎn)志總皂苷元高、中劑量組與模型組比較，均能延長(zhǎng)小鼠睡眠時(shí)間；其中，高劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，中、低劑量組無顯著性差異。結(jié)果詳見表7。
表7 遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)小鼠戊巴比妥鈉協(xié)同催眠睡眠的影響(X±SD)

注與模型對(duì)照比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
3、戊巴比妥鈉閾下催眠試驗(yàn)3.1實(shí)驗(yàn)材料(1)藥物受試藥物遠(yuǎn)志總皂苷元，由實(shí)施例1的方法制備，每1克遠(yuǎn)志總皂苷元相當(dāng)于原生藥33.33g。用蒸餾水分別配制成含藥粉1.125％、0.5625％、0.01875％的藥液(g/v)(每ml含原生藥分別為0.375g、0.1875g、0.0625g)備用。
陽性藥物舒樂安定，常州四藥制藥有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào)蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1982)第280801號(hào)。生產(chǎn)批號(hào)020107。規(guī)格1mg×20片/板。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.00667％的藥液備用。
(2)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22克。由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。動(dòng)物使用許可證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)(99)第7號(hào)。檢疫后備用。
3.2實(shí)驗(yàn)方法取昆明小鼠50只，隨機(jī)分為模型對(duì)照組(N＝10)、陽性對(duì)照組(N＝10)、遠(yuǎn)志總皂苷元高劑量組(N＝10)、中劑量組(N＝10)、低劑量組(N＝10)。按組分別灌胃蒸餾水、0.00667％舒樂安定藥液、1.125％、0.5625％、0.01875％的遠(yuǎn)志總皂苷元藥液10ml/kg。給藥60分鐘后，腹腔注射1％戊巴比妥鈉30mg/kg，記錄小鼠睡眠只數(shù)(翻正反射消失)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果模型小鼠給予戊巴比妥鈉閾下量后，除一只外，其余均未見翻正反射消失；遠(yuǎn)志總皂苷元高劑量組能明顯促進(jìn)閾下小鼠睡眠，與模型組比較，有極顯著性差異(P＜0.01)。結(jié)果詳見表8。
表8 遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠的影響

注與模型對(duì)照組比較，**P＜0.01。
4、戊巴比妥鈉再入睡試驗(yàn)4.1實(shí)驗(yàn)材料(1)藥物受試藥物遠(yuǎn)志總皂苷元，由實(shí)施例1制備，每1克遠(yuǎn)志總皂苷元相當(dāng)于原生藥33.33g。用蒸餾水分別配制成含藥粉1.125％、0.5625％、0.01875％的藥液(g/v)(每ml含原生藥分別為0.375g、0.1875g、0.0625g)備用。
陽性藥物舒樂安定，常州四藥制藥有限公司生產(chǎn)。批準(zhǔn)文號(hào)蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1982)第280801號(hào)。生產(chǎn)批號(hào)020107。規(guī)格1mg×20片/板。實(shí)驗(yàn)時(shí)用蒸餾水配制成0.00667％的藥液備用。
(2)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22克。由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。動(dòng)物使用許可證號(hào)川實(shí)動(dòng)管質(zhì)(99)第7號(hào)。檢疫后備用。
4.2、實(shí)驗(yàn)方法取昆明小鼠50只，隨機(jī)分為模型對(duì)照組(N＝10)、陽性對(duì)照組(N＝10)、遠(yuǎn)志總皂苷元高劑量組(N＝10)、中劑量組(N＝10)、低劑量組(N＝10)。腹腔注射1％戊巴比妥鈉35mg/kg，小鼠出現(xiàn)睡眠；待小鼠醒來后按組分別灌胃蒸餾水、0.00667％舒樂安定藥液、1.125％、0.5625％、0.01875％的遠(yuǎn)志總皂苷元藥液10ml/kg。記錄小鼠再次睡眠只數(shù)(翻正反射消失)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
4.3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果模型小鼠給予戊巴比妥鈉睡眠量后，均出現(xiàn)翻正反射消失，醒后灌胃蒸餾水未出現(xiàn)再次睡眠；遠(yuǎn)志總皂苷元高、中劑量組能明顯促進(jìn)醒來的睡眠小鼠再次入睡，且高劑量組與模型組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)果詳見表9。
表9 遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)戊巴比妥鈉睡眠小鼠再入睡的影響

注與模型對(duì)照比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
通過遠(yuǎn)志總皂苷元主要藥效學(xué)的研究，結(jié)論遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)小鼠的自發(fā)活動(dòng)有明顯的抑制作用；遠(yuǎn)志總皂苷元能使延長(zhǎng)戊巴比妥鈉所致睡眠小鼠的睡眠時(shí)間；遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠小鼠有明顯促進(jìn)睡眠作用；遠(yuǎn)志總皂苷元具有使戊巴比妥鈉催眠醒來的睡眠小鼠再次入睡作用。
試驗(yàn)例2 本發(fā)明藥物提取物毒理實(shí)驗(yàn)1.急性毒性試驗(yàn)1.1小鼠灌胃給藥急性毒性試驗(yàn)經(jīng)預(yù)試，遠(yuǎn)志總皂苷元灌胃不能測(cè)定LD50，即測(cè)定遠(yuǎn)志總皂苷元的最大耐受量。昆明種小鼠灌胃遠(yuǎn)志總皂苷元140.05g原生藥/kg·體重，動(dòng)物未出現(xiàn)死亡和異常中毒反應(yīng)，相當(dāng)于臨床人日用量的560.15倍。
1.2小鼠腹腔注射給藥急性毒性試驗(yàn)經(jīng)預(yù)試，遠(yuǎn)志總皂苷元腹腔注射不能測(cè)定LD50，即測(cè)定遠(yuǎn)志總皂苷元的最大耐受量。昆明種小鼠腹腔注射遠(yuǎn)志總皂苷元30.42g原生藥/kg·體重，動(dòng)物均未出現(xiàn)死亡和異常中毒反應(yīng)，相當(dāng)于臨床人日用量的121.66倍。
2、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)2.1大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)大鼠灌胃遠(yuǎn)志總皂苷元藥液24.99g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的100倍)、12.49g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的50倍)、2.499g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的10倍)連續(xù)13周；其外觀狀態(tài)正常，攝食量正常，體重逐周增加；血液學(xué)指標(biāo)(RBC、Hb、PLT、WBC、HCT、N、L等)、血液生化學(xué)指標(biāo)(AST、ALT、ALP、TP、ALB、GLU、T-BIL、T-CHO、Crea、Bun)、系統(tǒng)尸解和主要臟器(心、肝、脾、肺、腎、腦、甲狀腺、胸腺、腎上腺、前列腺、睪丸、子宮、卵巢)病理組織學(xué)檢查，未見有意義的毒副改變。可逆性觀察，動(dòng)物一般狀態(tài)、血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)、系統(tǒng)尸解和主要臟器病理組織學(xué)檢查，亦未見有意義的毒副改變。遠(yuǎn)志總皂苷元為單味中藥遠(yuǎn)志的有效提取物，經(jīng)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)表明，大鼠灌胃24.99g原生藥/kg.d-1，連續(xù)13周，未見明顯毒性。結(jié)果提示，遠(yuǎn)志總皂苷元在有效劑量有效療程內(nèi)應(yīng)用安全。
2.2犬長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)Beagle犬給予遠(yuǎn)志總皂苷元藥液20g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的80倍)、10g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的40倍)、5g原生藥/kg.d-1(約相當(dāng)于臨床用量的20倍)，連續(xù)90天，逐日觀察記錄，受試動(dòng)物除高劑量組部分動(dòng)物出現(xiàn)流涎外，一般狀態(tài)正常，攝食正常，體重增加，未見明顯毒副改變。經(jīng)心電圖學(xué)、血液學(xué)、血液生化學(xué)多指標(biāo)檢測(cè)、骨髓涂片，系統(tǒng)尸解和主要臟器病理組織學(xué)檢查，除高劑量組肝臟酶學(xué)及組織病檢出現(xiàn)可逆性異常外，其余未見有意義的毒副反應(yīng)。
綜上，經(jīng)一般藥理、主要藥效學(xué)試驗(yàn)研究，結(jié)果表明遠(yuǎn)志總皂苷元對(duì)精神神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的影響，能明顯抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，具有較好的鎮(zhèn)靜催眠作用。經(jīng)急性毒性試驗(yàn)研究表明，遠(yuǎn)志總皂苷元人日服15g/60kg無急性毒性反應(yīng)。經(jīng)動(dòng)物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)研究表明，遠(yuǎn)志總皂苷元在有效劑量有效療程內(nèi)應(yīng)用安全。
權(quán)利要求
1.一種遠(yuǎn)志提取物，其特征在于它是以中藥材遠(yuǎn)志為原料制備而成的提取物，其中，含有遠(yuǎn)志皂苷元，以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，重量百分含量不得少于55.0％；含遠(yuǎn)志酸C29H44O6的重量百分含量不得少于12.0％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的遠(yuǎn)志提取物，其特征在于所述的遠(yuǎn)志來源于遠(yuǎn)志Polygala tenuifolia Wild.或卵葉遠(yuǎn)志Polygala sibirica L.的根。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的遠(yuǎn)志提取物，其特征在于它含有遠(yuǎn)志皂苷元，以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，重量百分含量為55.0％～95％；含遠(yuǎn)志酸C29H44O6的重量百分含量為12.0％～90％。
4.一種制備權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的遠(yuǎn)志提取物的方法，它包括如下步驟a、取藥材遠(yuǎn)志，提取遠(yuǎn)志總皂苷；b、將a步驟制備的遠(yuǎn)志總皂苷，加入7.5～12.5％w/w鹽酸溶解，煮沸水解1.5～2.5小時(shí)，冷卻，濾過，取沉淀，水洗至中性，干燥，粉碎，得本發(fā)明遠(yuǎn)志提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的遠(yuǎn)志提取物的制備方法，其特征在于步驟b所述的鹽酸濃度為10％w/w；煮沸水解時(shí)間為2小時(shí)。
6.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的遠(yuǎn)志提取物在制備用于鎮(zhèn)靜安神的藥物中的用途。
7.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的遠(yuǎn)志提取物在制備用于祛痰的藥物中的用途。
8.一種用于鎮(zhèn)靜安神的藥物組合物，它是由有效量的權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的遠(yuǎn)志提取物為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物組合物，其特征在于所述的制劑的膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、口服液。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于所述的膠囊劑中每粒膠囊含總皂苷元以齊墩果酸C30H48O3計(jì)，不得少于130mg，含遠(yuǎn)志酸C29H44O6不得少于30mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種遠(yuǎn)志提取物，它是以中藥材遠(yuǎn)志為原料制備而成的提取物，其中，含有遠(yuǎn)志皂苷元，以齊墩果酸C
文檔編號(hào)A61K125/00GK101062113SQ200610020789
公開日2007年10月31日 申請(qǐng)日期2006年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月25日
發(fā)明者萬德光, 劉友平, 彭成 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué), 四川綠色藥物研究所