專利名稱：：草藥組合物phy906及其在化學(xué)治療中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于提高藥物治療指數(shù)的草藥組合物和草藥提取物，所述藥物包括那些用于治療疾病，尤其是治療病毒感染和癌瘤的藥物。本發(fā)明的方法能用于改善正經(jīng)歷化學(xué)治療的個體的生活質(zhì)量。具體地，本發(fā)明涉及通過用草藥組合物PHY906來提高化學(xué)治療藥物的治療指數(shù)以治療疾病。更具體地，本發(fā)明涉及通過用草藥組合物PHY906提高癌癥化學(xué)治療藥物的治療指數(shù)以治療癌癥。
背景技術(shù)：
：本文中的所有公開和專利申請均被引入作為參考，就如同特別和分別指出的將各公開或?qū)＠暾堃胱鳛閰⒖嫉某潭认嗤?。草藥亞洲和歐洲人已經(jīng)使用草藥達(dá)幾百年。在美國(US)，草藥在食物增補劑工業(yè)以及全身治療的藥物中己變得有商業(yè)價值。大約三分之一的美國人口已經(jīng)至少嘗試過一次一些形式的替代藥物(Eisenberg等人，N.Engl.J,Med"328:246-252(1993))。植物藥也已成為鑒定治療疾病的新型活性劑的焦點。來自植物提取物的活性化合物受到制藥工業(yè)的持續(xù)關(guān)注。例如已經(jīng)發(fā)現(xiàn)獲自短葉紫杉樹樹皮的抗腫瘤藥物紫杉醇可用于治療乳腺癌(Gomez-Espuch等人，BoneMarrowTransplant,25(3):231-235(2000》。在全世界存在許多草藥分支，例如印度醫(yī)藥(Ayurvedamedicine)、尤納里醫(yī)藥(Unanimedicine)、Sida醫(yī)藥和中藥(TCM)。盡管現(xiàn)代西藥典型地由給藥能夠介入特定生化途徑的單一化學(xué)實體組成，但每種TCM處方均包含來自幾種草藥的數(shù)百種化學(xué)實體，它們被設(shè)計為以協(xié)調(diào)的方式與體內(nèi)的多種靶相互作用。雖然實踐經(jīng)驗明顯促成了草藥組合物和這些古老的草藥處方，但是它們也不同程度地受到一套理論的支持，這些理論在解剖學(xué)、藥理學(xué)、病理學(xué)、診斷治療等方面均不同于現(xiàn)代西醫(yī)的理論。在不同的草藥領(lǐng)域中，TCM已經(jīng)在數(shù)百年間發(fā)展出了一套更完整的理論，該理論己經(jīng)由當(dāng)?shù)蒯t(yī)師進行了充分記錄和實踐，治療大中國和包括韓國與日本在內(nèi)的東亞的龐大人口(>13億人)。中藥西藥通常使用天然或合成的純化的化合物，大部分定向于單一的生理學(xué)靶。然而，TCM中所用的組合物通常由多種草藥和化合物組成，它們基于獨特的和整體的概念定向于體內(nèi)多種靶。TCM主要以不同組合和制劑使用經(jīng)加工的粗天然產(chǎn)物來處理不同的結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致更少的副作用。TCM的巨大潛力還未被世界上大多數(shù)人認(rèn)識到。植物提取物的混合物而非單一化合物正在世界范圍內(nèi)廣泛用于治療疾病，并在西方國家獲得的逐步提高認(rèn)可(Okada,F.,Lancet348:5-6(1996);XiaoPG,XingST和WangLW,JournalofEthnopharmacol38:167-175(1993))。中藥的應(yīng)用基于草藥制劑中許多化學(xué)成分的相互作用，這些成分同時并協(xié)同地作用于多種分子靶和細(xì)胞機制。這些成分具有不同的功能；一些成分或許是產(chǎn)生功效的原因，而其他成分可以降低毒性或增加生物利用度。中草藥制劑可能是已知最好的植物藥，源自歷經(jīng)千年的人類中的觀察經(jīng)驗。在許多情況中，指定中藥制劑主張的適應(yīng)癥是多種而非單一的。這并不令人意外，因為在一種制劑中許多植化成分可以對多個靶發(fā)揮作用。可能的是，一種中藥制劑可以緩解一種以上與應(yīng)用癌癥化學(xué)治療藥物相關(guān)的副作用。在典型的TCM處方中，草藥被指定作為君藥和包括臣藥、佐藥和使藥在內(nèi)的輔藥(thesecondaryherb)。君藥在治療疾病病因或主要癥狀方面產(chǎn)生主導(dǎo)作用。臣藥幫助增強君藥的作用并在治療附隨的癥狀方面起主導(dǎo)作用。存在三種類型的佐藥l)那些提高君藥和臣藥的治療作用或治療第三位的癥狀的佐藥；2)那些減少或消除君藥和臣藥的毒性和其他副作用的佐藥；和3)那些對不特異性地受君藥影響的互補性靶組織起作用的佐藥。使藥將其他草藥的作用引導(dǎo)至受侵襲的部位和/或協(xié)調(diào)并介導(dǎo)處方或制劑中其他草藥的作用。與由單一植物的一個或多個部位組成的大多數(shù)草藥或增補劑相反，TCM的預(yù)期作用是指向多個組織。例如著名的TCM處方"麻黃湯"用于治療哮喘，它由麻黃、桂枝、苦杏仁和甘草組成。作為君藥的麻黃散寒、誘發(fā)發(fā)汗并促使肺氣流動以緩解哮喘的主要癥狀。作為臣藥的桂枝提高麻黃的誘發(fā)發(fā)汗作用并溫筋以確保陽氣流動，用于減輕頭痛和全身痛。作為佐藥的苦杏仁促進肺氣的反向流動并增強麻黃緩解哮喘的作用。作為使藥的甘草緩和麻黃與桂皮的作用以確保正氣(vitalQi)的體內(nèi)平衡。盡管四種草藥中的每一種均明確顯示出其相應(yīng)的活性，但當(dāng)組合起來時，它們彼此互補和補充。在實踐中，可以將君藥與一種或多種輔藥一起開據(jù)處方，這取決于患者描述的癥狀(PrescriptionsofTraditionalChinesem6dicin6.ChapterOne,pplO-16,E.Zhang,首席編輯,PublishingHouse,ShanghaiUniversityofTraditionalChinesemedicine,1998)。氣指身體內(nèi)的總能量。草藥用于實現(xiàn)氣的最佳平衡；認(rèn)為這種平衡本身在患者的總體健康與活力中顯示(K.C.Huang,ThePharmacologyofChinsesHerbs,第二版，Page2,1999,CRCPress)。指導(dǎo)用草藥和其他方式如針灸治療疾病的TCM的主要理論是1)陰陽學(xué)說；2)五行學(xué)說；3)臟腑學(xué)說；4)氣、血和津液學(xué)說；以及5)經(jīng)絡(luò)學(xué)說。在TCM中，得出恰當(dāng)診斷的首位重要方面是確定疾病屬陰還是屬陽，中國人認(rèn)為這兩種力量控制著宇宙的運轉(zhuǎn)。陰代表自然的陰性面，包括暗、靜、深、寒和濕；而陽代表陽性成分，包括光、活力、高、熱和干(K.C.Huang,ThePharmacologyofChineseHerbs,第二版，P2，1999，CRCPress)。通常將陰解釋為負(fù)面力量，而陽代表正面力量。這兩種力量互補，缺一不可。因此，TCM試圖實現(xiàn)陰與陽之間的平衡。在基于陰陽哲學(xué)對患者的診斷中，那些患有發(fā)熱、口干、便秘或具有疾脈脈象(rapidpulsecondition)的患者具有陽性特征。具有惡寒、不口干且腹瀉并表現(xiàn)出遲脈脈象的個體具有陰性特征。還可根據(jù)陰陽學(xué)說將草藥的性、味和功能分類。例加寒性與涼性的草藥屬陰，而溫性與熱性的草藥屬陽。具有酸、苦和咸味的草藥屬陰，而具有辛、甜和淡(bland)味的草藥屬陽。具有收斂和沉降(subsiding)功能的草藥屬陰，而具有發(fā)散、上行和上浮(floating)功能的草藥屬陽。在TCM中，治療機理基于陰和陽的盛或虛。根據(jù)草藥的陰陽特性及其使陰陽失衡復(fù)原的功能開據(jù)處方。在這樣做的過程中獲得治療益處。根據(jù)五行學(xué)說，由五種基本物質(zhì)(即木、火、土、金和水)組成物質(zhì)世界。在TCM中，已將該理論用于解釋人體生理學(xué)和病理學(xué)并用于指導(dǎo)臨床診斷和治療。中醫(yī)大夫(herbalphysician)已應(yīng)用五行相生、相克、相乘和相侮的法則作出了許多有效且特效的治療方案，例如培土生金(增強脾的功能以益于肺)、滋水涵木(滋養(yǎng)腎精以益于肝)、扶土克木(補充脾的功能以治療肝機能亢進)和強水控火(補充腎精以治療心臟機能亢進)。特別地，為了指導(dǎo)開據(jù)TCM處方，五行的每一種賦予了一些草藥特性。.在TCM中，將人體的內(nèi)臟器官分成三組五臟(心、肝、脾、肺和腎)；六腑(膽囊、胃、大腸、小腸、膀胱和三焦)；特別器官(腦、骨髓、骨、血管、膽囊和子宮)。在TCM中，臟或腑不僅是解剖學(xué)單位，而且是涉及不同器官間相互作用的生理學(xué)和病理學(xué)的概念。例如心臟也涉及一些精神功能并影響血液、毛發(fā)、舌和皮膚的功能。陰陽五行影響這些內(nèi)部器官、臟、腑和特別器官間的相互作用。理論的相互影響的復(fù)雜性被用于解釋開據(jù)草藥處方的疾病病理學(xué)，如下所述。在TCM中，草藥處方從診斷開始，所述診斷由四個主要項目組成問診、望診、聽診和聞診、脈診和捫診。在問診階段，收集大量信息，包括主要癥狀的特征。例如如果主要癥狀的特征在于上腹部中有可以通過溫暖和壓迫來減輕的鈍痛，則這提示脾陽不足。腰膝酸軟、畏寒肢冷顯示腎陽虛。在望診階段，觀察活力、皮膚顏色、以及一般表象和舌的情況。例如面無血色在體內(nèi)對應(yīng)秋肺，其氣燥。在缺乏陽氣和氣血循環(huán)受阻或經(jīng)絡(luò)寒導(dǎo)致它們收縮時，可能發(fā)生這種情況。在TCM中，正是由氣、血和津液帶來了五臟六腑、經(jīng)絡(luò)、組織和其他用于執(zhí)行它們的生理功能的器官所需的能量；而氣、血和津液的形成與代謝又依賴于這些器官。TCM的處方考慮草藥對氣和血的作用來用于治療。TCM認(rèn)為經(jīng)絡(luò)及其分支部分遍布全身。認(rèn)為草藥正是通過它們發(fā)揮對病理學(xué)耙的影響并實現(xiàn)疾病改善。例如麻黃對肺經(jīng)和膀胱經(jīng)起作用以誘發(fā)發(fā)汗，從而緩解哮喘和促進利尿。如上所述，針灸的臨床應(yīng)用也受經(jīng)絡(luò)學(xué)說的指導(dǎo)?？傊?，盡管可以將TCM中各草藥的性質(zhì)和特性歸于五行之一和陰或陽，但是它們通過經(jīng)絡(luò)起作用并通過氣、血和津液介導(dǎo)，以在靶如臟腑上獲得治療作用。致病因素可以通過非常相同的經(jīng)絡(luò)系統(tǒng)偽裝誘騙，以損害臟腑功能并由此導(dǎo)致疾病。草藥組合物在美國的專利情況已經(jīng)授權(quán)關(guān)于草藥組合物的美國專利，用于治療折磨哺乳動物，包括人類的多種疾病和其他涉及健康的問題。例如已經(jīng)發(fā)現(xiàn)包括牡丹(尸aeow'a^^^/cwa)的草藥組合物用于治療病毒感染，包括皰疹病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒的感染(美國專利5,411,733)?？捎冒参锷飰A漢防己甲素的藥物組合物治療眼部炎癥(美國專利5，627，195)。美國專利5，683，697公開了具有抗炎、抗發(fā)熱、祛痰或止咳作用的藥物組合物，其中所述組合物包括來自楝屬(^1^//力、Angepica、石斛屬(Z)e"&o6/歸)、鳳仙花屬(/w戸f/e"力、柑桔屬(C/^7/力、桑寄生屬(丄ora"/Z2z/力、青葙屬(Ce/ow'of)、白前屬(Cy"awc/z"w)和瑚珊菜屬(G/W"fa)的植物部位。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，包括山姜屬(J/;^/"/fl)、菝葜屬(<^//0^)、青牛膽屬(77"o5^ora)、蒺藜屬(7W6M/w)、睡茄屬(肌/;^"/a)和姜屬(Z/"g/6e"的根、根莖和/或植物(vegetation)的提取物的草藥制劑可減輕或緩解與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎和反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的癥狀，可以減少致炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生(美國專利5,683,698)。已經(jīng)證實包含滑石、蠶糞便和十二種不同草藥成分的組合物可有效減輕哺乳動物的炎癥、疼痛和發(fā)熱(美國專利5,908,628)。還授權(quán)了用于治療癌癥及癌癥相關(guān)的健康問題的草藥組合物的專利。例如美國專利5,437，866公開了包含草藥混合物的組合物，所述草藥包括半枝蓮(50^//"/^Zw6flto)種及其提取物，所述組合物用于改善人類中的惡性病的影響。美國專利5,665,393公開了包括洋甘草(G(yc^77"/z/zag/a6ra^.)禾卩黃零(5^"&//(^/<36a/ca/eraz,sGeorgz')、碎米極(i^6^w/an^"cms)和鋸齒棕CSew"oa"/em)的多種草藥組合物用于治療前列腺癌。此外，抗腫瘤草藥組合物包括黃芪屬的根M^mga/z'radix)、茍藥屬的根CP"eo"z'aradix:)、棒屬的樹皮(C/w"a/wo附,corfex)、/^e/7W"m'a的根和甘草屬的根(G/少c;^T/2/zaeradix)，用于提高絲裂霉素D和多柔比星的抗腫瘤活性(美國專利4,613,591和美國專利4,618,495)。癌癥和癌癥化學(xué)治療的不良作用在美國，癌癥仍是死亡的第二大原因。人們對用于治療胃腸癌，包括結(jié)腸直腸癌、肝癌和胰腺癌的方法感興趣，不是因為它們的更高的發(fā)病率，而是因為它們的高死亡率，尤其是胰腺癌和肝癌患者(Bergsland等人CurrentOpinioninOncology,12:357-361(2000);Fernandez-等人CurrOpinGastroenterol,18:563-567(2002);Jemal等人CancerJClin,52:23-47(2002);Skolnick等人，TheJournaloftheAMericanMedicalAssociation,276:1457-1458(1996))。從1992-1999年，研究顯示結(jié)腸直腸癌的五年相對存活率為62.3%，而肝癌為6.9%，胰腺癌為4.4%。肝癌的中位生存期為3.5周至6個月，而胰腺癌為4至6個月(Jemal等人CancerJClin，52:23-47(2002))。由于僅有非常差的化學(xué)治療方案，胰腺癌在美國的所有癌癥中死亡率最高，自診斷后5年的存活率小于5%(Jemal等人CancerJClin，52:23-47(2002))。盡管目前在臨床試驗中使用幾種方案治療肝細(xì)胞癌，但沒有可利用的經(jīng)FDA批準(zhǔn)的化學(xué)治療藥物。胰腺癌和肝細(xì)胞癌兩者的低存活率是因為診斷困難、腫瘤生長非常旺盛、手術(shù)切除腫瘤的可能性低以及腫瘤具有高比率的化學(xué)治療耐受性。吉西他濱是唯一的臨床批準(zhǔn)用于胰腺癌的化學(xué)治療藥物；但是，患者對吉西他濱的響應(yīng)率僅為6-11%，總體存活時間通常為4-6個月。吉西他濱是核苷類似物，具有兩種作用機理，包括抑制核苷酸還原酶，該酶能將核苷酸二磷酸轉(zhuǎn)化為脫氧核苷酸三磷酸，后者是DNA合成所需的并在DNA合成中作為欺騙性底物與脫氧胞苷三磷酸競爭(Jemal等人，CACancerJClin,52:23-47，2002;Abbruzzese等人，CancerSupplement,95:941-945，2002;Hertel等人，CancerRes"50:4417-4422，1990;Pettersson等人，Pancreas,23:273-279，2001;Philip等人，CancerSupplement,95:908-911，2002;Schultz等人，OncologyResearch,5:223-228,1993;VonHoff等人，CurrentOpinioninOncology,14:621-627，2002)。由于吉西他濱單一治療的低響應(yīng)率和存活率，臨床已測試了幾種吉西他濱組合藥物方案，用于改善治療功效。這些試驗包括吉西他濱與其他通用和FDA批準(zhǔn)的抗癌藥，包括CPT-ll、卡培他濱和奧沙利鉬(Bmns等人，ClinicalCancerResearch,6:1936-1948，2000;Jacobs等人:CancerSupplement,95:923-927,2002;Mcginn等人，CancerSupplement,95:933-940,2002;Oettle等人，CancerSupplement,95:912-922，2002)。不幸的是，沒有發(fā)現(xiàn)滿意的組合藥物方案，仍然迫切需要用于胰腺癌的有效方案。目前通過手術(shù)操作和化學(xué)治療來治療肝細(xì)胞癌。對于一些患者，手術(shù)切除和術(shù)后治療可改善外觀。不幸的是，絕大多數(shù)肝細(xì)胞癌患者會患有不能切除的癌癥。盡管目前正在臨床試驗中使用幾種方案治療肝細(xì)胞癌，但沒有可用的經(jīng)FDA批準(zhǔn)的化學(xué)治療藥物。在歷史上，全身化學(xué)治療具有很少價值或沒有價值，盡管己經(jīng)證實5-氟尿嘧啶(5-FU)和多柔比星(ADM)的響應(yīng)率為從10至20%(Suart等人，Am.J.Clin.Oncol.，19:136-139，1996)?？ㄅ嗨麨I(Xeloda⑧)被合理地設(shè)計成作為口服前藥從胃腸道有效吸收，并優(yōu)先在瘤組織中轉(zhuǎn)化為5-FU。目前，卡培他濱被批準(zhǔn)作為用于結(jié)腸直腸癌和乳腺癌的一線治療，具有減少的毒性(Berg等人，Semin.Oncol.，25:53-59，1998;Schwetz等人，JAMA，286:2085，2001)。卡培他濱是潛在的令人興奮的新的治療藥物。盡管在肝癌中與5-FU或ADM享有相似的臨床響應(yīng)(13。/。)，但卡培他濱具有明顯的優(yōu)點，例如是具有相對低毒性的口服給藥藥物，這將改善肝細(xì)胞癌患者的生活質(zhì)量(Aguayo等人，SeminarsInOncology,28:503-513,2001;Leung等人，SeminarsInOncology,28514-520，2001，Lozanoaa/,OralCapecitabine(Xeloda)fortheTreatmentofHepatobiliaryCancers(HepatocellularCarcinoma,Cholangiocarcinoma，andGallbladderCancer).19.2000.ProceedingsofASCO)。在美國，己報道結(jié)腸直腸癌是第三常見的癌癥死亡原因(ACSCancerFactsandFigures.AmericanCancerSociety,2004)。最近，F(xiàn)DA批準(zhǔn)使用奧沙利鉑/5-FU/LV的三聯(lián)組合作為晚期結(jié)腸直腸癌患者的一線治療。奧沙利鉑是合成的二氨基環(huán)己垸鉑化合物，其類似于順鉑，能引起鉑-DNA加合物的形成并破壞DNA的完整性(EricRaymond等人，MolecularCancerTherapeutics,1:227-235,2002)。其他類型的化學(xué)治療藥物如5-FU、CPT-ll是結(jié)腸直腸癌治療中常用的化學(xué)治療藥物。不幸的是，在用化學(xué)療法治療的患者中，已確定嚴(yán)重腹瀉是限制劑量的毒性之一。在過去幾十年中，醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)對改變藥物實踐具有巨大影響，因為己經(jīng)確定了用于各種前述致命惡性病的藥物根治療法。然而，與抗腫瘤藥物相比，常用的少數(shù)幾類藥物具有更窄的治療指數(shù)，且引起不良副作用的可能性更大(Calabresi和Chabner,1996)。像僅具有中等選擇性的許多其他有效藥物一樣，抗癌藥可以產(chǎn)生嚴(yán)重的毒性。與癌癥化學(xué)治療的相關(guān)的常見不良作用包括但不限于胃腸道并發(fā)癥(例如腹瀉、惡心、嘔吐、厭食和粘膜炎)、疼痛、食欲缺乏、骨髓/血液并發(fā)癥(例如白細(xì)胞減少、中性白細(xì)胞減少、貧血、出血、血小板減少)、疲勞和睡眠障礙。本發(fā)明的發(fā)明人對已用于治療與癌癥化學(xué)治療相關(guān)的癥狀的中藥制劑進行了文獻檢索。據(jù)報道，包含七種草藥的植物制劑TJ-14有效預(yù)防癌癥患者中由CPT-11引起的腹瀉(Kase，Y，HayakawaT和AburadaM.等人，Jpn.J.Pharmacol.75，407-413(1997);MaritaM.,NagaiE和HagiwaraH.等人，Xenobiotica.23，5-10(1993))。推測腹瀉是因SN-38的蓄積而發(fā)生，SN-38是由腸微生物產(chǎn)生的CPT-ll的活性代謝物。本發(fā)明人認(rèn)為，P-葡糖醛酸糖苷酶抑制劑貝加靈是TJ-14中的活性成分，其緩解由CPT-ll引起的腹瀉(Kase,Y，HayakawaT和AburadaM.等人，Jpn.J.Pharmacol.75，407-413(1997);MaritaM.，NagaiE和HagiwaraH.等人，Xenobiotica.23，5-10(1993);TakasunaK，TakehiroH,HirohashiM，等人，CancerChemotherPharmacol.42:280-286(1998);TakasunaK，TakehiroH,HirohashiM，KatoM,等人，CancerRes.56:3752-3757(1996))。因此，評價了包含黃芩(Sc認(rèn)〃an'a6m'ca/ms/sGewg^根的幾種中草藥制劑，其富含在貝加靈中。在實驗室檢驗的幾種制劑中，本發(fā)明人選擇了PHY906。在1500多年前就已確定，這種特定制劑可用于治療腹瀉、腹部痙攣、發(fā)熱、頭痛、嘔吐、惡心、劇渴和下賁門擴張(subcardialdistentio)(ShangHanLunoftheHanDynasty;Hong-YenHsu禾卩Chau-ShinHsu，CommonlyusedChineseHerbFormulaswithIllustrations,OrientalHealingArtInstitute,California,(1980))。PHY906由一定比例的四禾中草藥黃苳(5"cMfe//￡znVare6a/a7/e"5^Georg/)(scute)、芍藥(戶"eo"/a/a"i/7orapa/Z)(白芍根)、甘草(G(vc;rW^aewra/e"s/si^c/)(甘草)禾卩大麥(/^mc加z/2^/w')(海棗)的果實組成，其混合比例分別為1.5:1.0:1.0:1.0(干重)。應(yīng)注意各草藥具有不同的藥理學(xué)特征(profile)，其包括抗癌和抗病毒活性、血液學(xué)和免疫學(xué)刺激、止痛活性、血管舒張、保肝、抗氧化及改善食欲，如表1所示。表1.PHY906制劑中各草藥的推定生物活性抗癌免疫調(diào)節(jié)抗菌消炎神經(jīng)系統(tǒng)其他黃芩++++-抗病毒、抗菌、止瀉、利1M淋巴細(xì)胞與巨尿、血管舒張、丄脂、抗噬細(xì)胞活性凝、抗氧化、止吐、保肝雙功能芍藥+++++血管舒張、保肝、利尿、個i巨噬細(xì)胞活性止痛抗凝、丄腸運動雙功能調(diào)節(jié)劑大棗++--+保肝、肌耐力、抗IgE作用個睡眠改善食欲甘草++++抗利尿個巨噬細(xì)胞活性止痛丄腸運動個干擾素個IL"1W旨(LDL、TC)t淋巴細(xì)胞抗氧化個干擾素和卞L-2抗病毒個NK活性抗凝丄IgE抗補體:增加丄下降tU下降或增加+:有效-:無效到目前為止，僅將PHY906作為單一藥物而非與合成藥物組合開據(jù)處方。然而，可以理解，文獻記載的PHY906應(yīng)用之一實際上可用于緩解因化學(xué)治療誘發(fā)的副作用。盡管已經(jīng)驗明了PHY906的四種草藥中每一種的一些主要化學(xué)成分，并且已經(jīng)檢驗了它們的藥理學(xué)活性(ChineseBotanyShanghaiScienceandTechnologyPublishingCompany(1999);Huang，H-C,Wang，H-R和Hsieh,L-M.，EurJofPharmacol251:91-93(1994);Lin,C-C和Shieh，AmJChineseMed1:31-36(1996);Tang:W.禾卩Eisenbrand，G.，ChineseDrugsofPlantOrigin:Chemistry,PharmacologyandUseinTraditionalandModernMedicinepp.919-929.Springer-VerlagPress,NewYork,(1992))，但不可能通過所驗明的成分完全預(yù)計PHY906的生物學(xué)特性。發(fā)明概述本發(fā)明人已經(jīng)意外地發(fā)現(xiàn)，草藥組合物PHY906能被用于各種方法，來提高一種或多種化學(xué)治療化合物的治療指數(shù)和調(diào)節(jié)造血活性。當(dāng)化學(xué)治療藥物與PHY906—起給藥時，本文公開的方法通過提高所述化學(xué)治療藥物的功效并降低所述藥物的毒性，能夠用于改善化學(xué)治療的患者的生活質(zhì)量。本發(fā)明提供了草藥組合物PHY906，其與藥學(xué)可接受的載體組合并任選地包含一種或多種化學(xué)治療化合物或抗病毒劑。選擇用于制備特定PHY906制劑的四種植物種各自選自下列四種不同屬(group)的草藥之一黃苳屬(Scutellaria)、甘草(Licorice)、白芍藥(PeonyAlba)和麥屬果實(ZiziphiFruit)。選擇草藥以獲得PHY906的一種或多種所需屬性，其中這樣的屬性包括但不限于提高一種或多種化學(xué)治療化合物的治療指數(shù)、增強一種或多種化學(xué)治療化合物的抗腫瘤活性或增強一種或多種抗病毒劑的抗病毒活性、調(diào)節(jié)造血活性、調(diào)節(jié)血液學(xué)和免疫學(xué)活性及改善正經(jīng)歷化學(xué)治療或抗病毒治療的哺乳動物的生活質(zhì)量。本發(fā)明包括的化學(xué)治療化合物或化學(xué)治療藥物包括但不限于用于治療癌癥、寄生蟲感染和微生物感染的化學(xué)治療化合物或化學(xué)治療藥物。本發(fā)明包括的抗病毒化合物或抗病毒劑包括用于治療病毒感染、疾病或病癥的化合物或抗病毒劑。本發(fā)明的組合物和方法用于治療任何哺乳動物。更具體地，本發(fā)明的方法用于治療人類。本發(fā)明還提供了組合物，其包含藥學(xué)可接受的載體；來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品黃苳屬、甘草屬(G/yc;7r/^za)、麥屬(Z&;p/ms)和芍藥屬CPaeow/fl);以及一種或多種化學(xué)治療化合物。優(yōu)選地，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體；草藥制劑，其包含黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬；以及化學(xué)治療制劑，其包含一種或多種化學(xué)治療藥物或抗病毒劑。更優(yōu)選地，所述草藥制劑包含來自黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬的材料或化學(xué)品。最優(yōu)選地，本發(fā)明提供了包括黃芩(5(^&/&;^Z)a/ca/e/w/力、甘草(G^ott/7/加wra/eww'力、麥(Zizz;p/zMS^6a)和芍藥(尸aeoma/acftyora)的這樣的組合物。本發(fā)明的草藥組合物特別用于癌癥化學(xué)治療，例如但不限于使用伊立替康(CPT-ll，Camptosar)、5-氟尿嘧啶(FU或5-FU)、亞葉酸(LV)、VP-16、p-L-二氧戊環(huán)胞苷(L-OddC)、卡培他濱、吉西他濱、奧沙利鉑、多柔比星、沙立度胺及其組合進行治療，所述組合例如但不限于FU/LV、CPT-11/FU/LV、奧沙利鉑/FU/LV以及吉西他濱/奧沙利鉑。本發(fā)明提供了包括PHY906和一種或多種化學(xué)治療藥物的組合物，所述化學(xué)治療藥物例如但不限于CPT-ll、5-FU、VP-16、L-OddC、卡培他濱、吉西他濱、奧沙利鉑及其組合，所述組合例如但不限于FU/LV、CPT-11/FU/LV和奧沙利鉑/FU/LV。本發(fā)明還提供了組合物，其包含PHY906和化學(xué)治療藥物的一種或多種類似物和衍生物，所述化學(xué)治療藥物例如CPT-ll、5-FU、VP-16、L-OddC、LV、卡培他濱、吉西他濱、多柔比星、沙立度胺和奧沙利鉑。本發(fā)明的草藥組合物特別用于抗病毒治療。優(yōu)選地，將所述草藥組合物與用于治療AIDS的抗病毒劑一起給藥。更優(yōu)選地，將所述草藥組合物與選自AZT、D4T和DDI、3TC、ddC和FTG的抗病毒劑一起給藥。本發(fā)明提供了提高用于治療癌癥的癌癥治療化合物的治療指數(shù)的方法。本發(fā)明還提供了提高用于抗病毒疾病治療的抗病毒劑的治療指數(shù)的方法。更具體地，本發(fā)明提供了如下方法，該方法包括聯(lián)合給藥一種或多種抗癌或抗病毒劑和治療有效量的組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體和來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品或包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明的方法提供了來自這樣的草藥的材料或化學(xué)品的用途，或包含這樣的草藥的草藥制劑的用途，其中所述材料或化學(xué)品或草藥制劑為出自水溶液的粒狀提取物，所述水溶液包括但不限于水和醇。這樣的組合物可為可攝取的形式，例如但不限于散劑、膠囊、液體和片劑?；蛘?，本發(fā)明的方法使用栓劑形式的這樣的組合物。本發(fā)明還提供了治療需要這樣的治療的哺乳動物中的疾病的方法，其包括給藥治療有效量的組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體；來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品或包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬；和一種或多種化學(xué)治療化合物。本發(fā)明還提供了治療需要這樣的治療的哺乳動物中的疾病的方法，其包括給藥治療有效量的一種或多種化學(xué)治療化合物或抗病毒劑和組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體；來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品或包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑-黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明包括這樣的方法，其中在給藥一種或多種化學(xué)治療化合物之前給藥所述組合物。本發(fā)明還包括這樣的方法，其中在給藥一種或多種化學(xué)治療化合物之后給藥所述組合物。本發(fā)明通過向需要這樣的治療的哺乳動物給藥治療有效量的組合物，提供了調(diào)節(jié)造血活性來治療疾病的方法，所述組合物基本上由藥學(xué)可接受的載體和來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品或包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑組成黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明提供了這樣的方法，其中來自草藥的所述材料或化學(xué)品以出自水溶液的粒狀提取物形式，所述水溶液包括但不限于水和醇。具體地，本發(fā)明提供了這樣的方法，其中所述組合物為可攝取的形式，例如但不限于散劑、膠囊、液體和片劑?；蛘撸景l(fā)明提供了這樣的方法，其中所述組合物是栓劑的形式。本發(fā)明還提供了改善正經(jīng)歷化學(xué)治療或抗病毒治療的哺乳動物的生活質(zhì)量的方法，其包括給藥治療有效量的一種或多種化學(xué)治療化合物和組合物，所述組合物包含-i)藥學(xué)可接受的載體；和ii)材料或化學(xué)品，其來自下列各草藥屬的植物種黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明關(guān)注聯(lián)合給藥包含一種或多種化學(xué)治療藥物的化學(xué)治療制劑和一種組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體和包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明還關(guān)注聯(lián)合給藥包含一種或多種抗病毒劑的抗病毒制劑和一種組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體和包含下列各草藥屬的植物種的草藥制劑黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明使用所公開的草藥組合物來提高化學(xué)治療藥物的抗腫瘤活性、提高抗病毒劑的抗病毒活性、降低化學(xué)治療藥物或抗病毒劑的毒性、調(diào)節(jié)哺乳動物的血液學(xué)和免疫學(xué)活性并改善正經(jīng)歷化學(xué)治療或抗病毒治療的哺乳動物的生活質(zhì)量。在一方面，本發(fā)明公開了包括化學(xué)治療方案的治療方法，所述方案包括一種或多種化學(xué)治療化合物和一種組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體和包含黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬的草藥制劑。在另一方面，本發(fā)明公開了包括抗病毒方案的治療方法，所述方案包括一種或多種抗病毒劑和一種組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體和包含黃芩屬、甘草屬,棗屬和芍藥屬的草藥制劑。此外，本發(fā)明提供了一種治療方案，所述方案包括一種或多種化學(xué)治療化合物或抗病毒化合物和一種組合物，所述組合物包含藥學(xué)可接受的載體及包含黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬的草藥制劑。另外，本發(fā)明公開了化學(xué)治療方案和組合物，其包括三種化學(xué)治療化合物，優(yōu)選CPT-11/FU/LV或奧沙利鉑/CPT-11/FU/LV和包含黃苓屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬的草藥制劑或來自下列各草藥屬的植物種的材料或化學(xué)品黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬。本發(fā)明關(guān)注包含一種或多種抗病毒劑的抗病毒治療。附圖簡述圖1.不同劑量的CPT-ll對非荷瘤BDF-1小鼠的作用。僅在第0天腹膜內(nèi)(i.p.)給藥CPT-11(各組中N=5)。圖2.PHY卯6對CPT-ll治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠體重的作用。僅在第0天腹膜內(nèi)給藥CPT-11(400mg/kg)。從第0天開始以指示的劑量每天口服兩次PHY906,持續(xù)8天(各組中N=5)。圖3.PHY906對CPT-ll治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠腫瘤生長的作用。僅在第0天腹膜內(nèi)給予CPT-11(400mg/kg)。從第0天開始每天口服兩次PHY906(500mg/kg)，持續(xù)8天。使用斯氏配對t-檢驗(Student，spairedt-test)計算p值。(各組中N=5)圖4.PHY906對CPT-ll治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠血液學(xué)變化的作用(各組中N=S)。僅在第0天腹膜內(nèi)給予CPT-11(400mg/kg)。從第0天開始每天口服兩次PHY906(500mg/kg)，持續(xù)4天(各組中N-5)。圖5.PHY卯6對FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠體重的作用。如材料和方法中所述，僅在第O天的l小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(100mg/kg)和FU(100mg/kg)。在第O天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N二5)。圖6.PHY906對FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠腫瘤生長的作用。如材料和方法中所述，僅在第O天的l小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(100mg/kg)和FU(100mg/kg)。在第0天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N-5)。圖7.PHY906對FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠血液學(xué)變化的作用。如材料和方法中所述，僅在第0天的1小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(100mg/kg)和FU(100mg/kg)。在第0天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N=5)。圖8.PHY906對CPT-11/FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠腫瘤生長的作用。如材料和方法中所述，僅在第O天的1小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(IOOmg/kg)、CPT-11(200mg/kg)和FU(IOOmg/kg)。在第0天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N=5)。圖9.PHY906對CPT-11/FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠腫瘤生長的作用。如材料和方法中所述，僅在第0天的1小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(IOOmg/kg)、CPT-11(300mg/kg)和FU(IOOmg/kg)。在第0天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY卯6，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N-5)。圖10.PHY卯6對CPT-11/FU/LV治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-l小鼠體重變化的作用。如材料和方法中所述，僅在第0天的1小時期限內(nèi)腹膜內(nèi)依次給藥LV(IOOmg/kg)、CPT-11(300mg/kg)和FU(IOOmg/kg)。在第0天，在LV的初始劑量后30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在4天中每天服用兩次(各組中N=5)。圖11.PHY906對CPT-ll治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠腫瘤生長的作用。僅在第0天腹膜內(nèi)給藥CPT-11(200mg/kg)。在第0天，在給予CPT-ll之前30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在8天中每天給予兩次(各組中N=5)。圖12.PHY906對CPT-ll治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠體重的作用。僅在第0天腹膜內(nèi)給予CPT-11(200mg/kg)。在第0天，在給予CPT-ll之前30min，以500mg/kg口服給予PHY906，并繼續(xù)在8天中每天服用兩次(各組中N=5)。圖13.LOddC和PHY卯6對具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠的抗腫瘤作用。給雌性BDF-1小鼠(8-10周齡，平均重量約20g)皮下注射結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。從第0天開始連續(xù)5天，腹膜內(nèi)注射L-OddC(P-L-二氧戊環(huán)胞苷25mg/kg，q.d,X5)。在第0天并每天口服給藥PHY卯6(1g/kg，b丄d.),直到完成本實驗(q.d.是"每天"的縮寫，它指每天一次；q.d.X5指在連續(xù)5天中，五只小鼠中每一只均接受每天一次的劑量；b丄d.是"每天兩次"的縮寫，它指一天兩次)。(各組中N二5)。圖14.VP-16和PHY906對具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠的抗腫瘤作用。給雌性BDF-1小鼠(8-10周齡，平均重量約20g)皮下注射結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在第0天并連續(xù)5天，每天腹膜內(nèi)注射一次VP-16(依托泊苷25mg/kg，q.d.X5)。在第0天并每天口服給藥PHY卯6(1g/kg，b丄d.)，直到完成本實驗。(各組中N-5)。圖15.5-氟尿嘧啶(FU)和PHY906的抗腫瘤作用。給五只雌性BDF-1小鼠(8-10周齡，平均重量約20g)皮下注射結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。僅在第0天腹膜內(nèi)注射一次劑量的FU(250mg/kg)。在第0天并每天口服給藥PHY906(1g/kg，b丄d.),直到完成本實驗。(各組中N-5)。圖16.5-氟尿嘧啶(FU)與PHY卯6的抗腫瘤作用。給每組的雌性BDF-1小鼠(8-10周齡，平均重量約20g)皮下注射結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。從第O天開始，在連續(xù)5天中每天腹膜內(nèi)注射FU(30mg/kg，q.d.X5)。在第0天并每天口服給藥PHY906(1g/kg，b.i.d.)，直到完成本實驗。(各組中N-5)。圖17.CPT-ll和PHY906與洛哌丁胺相比對具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠的抗腫瘤作用。給雌性BDF-1小鼠(8-10周齡，平均重量約20g)皮下注射結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。小鼠或者不接受治療、單獨給予PHY906、單獨給予CPT-ll、給予CPT-ll和PHY906，或單獨給予洛哌丁胺。如圖3中所述給藥PHY906和CPT-ll。僅在第O天口服給予—次劑量的洛哌丁胺(2mg/kg，p.o.(口服給藥)，b.i.d.)。(各組中N^)。圖18A-C.CPT-11/FU/LV在血漿中的藥物動力學(xué)。PHY卯6-6為PHY卯6的臨床批次。SN-38是CPT-ll的活性代謝物。FUR+FUMP是FU的核苷和核苷酸代謝物。圖19A-C.CPT-11/FU/LV在肝中的藥物動力學(xué)。PHY906-6為PHY906的臨床批次。SN-38是CPT-ll的活性代謝物。FUR+FUMP是FU的核苷和核苷酸代謝物。圖20A-B.CPT-11/FU/LV在腫瘤中的藥物動力學(xué)。PHY卯6-6為PHY卯6的臨床批次。SN-38是CPT-11的活性代謝物。圖21.在吉西他濱(150mg/kg,qd,Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的C57/BL6小鼠中，PHY卯6(500mg/kg,bid,Dl-4和8-ll)對腫瘤生長的作用。在第1天和第8天，每天腹膜內(nèi)給予一次吉西他濱(150mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖22.在吉西他濱(300mg/kg,qd,Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的C57/BL6小鼠中，PHY卯6(500mg/kg，bid,Dl-4和8-ll)對腫瘤生長的作用。在第l天和第8天，每天腹膜內(nèi)給藥一次吉西他濱(300mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖23.在吉西他濱(600mg/kg,qd，Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的C57/BL6小鼠中，PHY906(500mg/kg，bid,Dl-4和8-ll)對腫瘤生長的作用。在第1天和第8天，每天腹膜內(nèi)給藥一次吉西他濱(600mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖24.在吉西他濱(300mg/kg，qd，Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY卯6(500mg/kg，bid,Dl-4和8-11)對腫瘤生長的作用。在第1天和第8天，每天腹膜內(nèi)給藥一次吉西他濱(300mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖25.在吉西他濱(600mg/kg,qd,Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY卯6(500mg/kg,bid,Dl-4和8國11)對腫瘤生長的作用。在第1天和第8天，每天腹膜內(nèi)給予一次吉西他濱(600mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖26.在吉西他濱(300mg/kg,qd，Dl、8、26和33)治療的人類PANC-1腫瘤異種移植物中，PHY卯6(500mg/kg,bid，Dl-4、8-11、26-29和33-36)對腫瘤生長的作用。在第1天、第8天、第26天和第33天，每天腹膜內(nèi)給予一次吉西他濱(300mg/kg)。在第1-4天、第8-ll天、第26-29天和第33-36天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖27.在吉西他濱(300mg/kg，qd，Dl、8、26和33)治療的人類PANC-1腫瘤異種移植物中，PHY卯6(500mg/kg,bid,Dl-4、8-11、26-29和33-36)對體重變化的作用。在第1天、第8天、第26天和第33天，每天腹膜內(nèi)給予一次吉西他濱(300mg/kg)。在第1-4天、第8-ll天、第26-29天和第33-36天，在吉西他濱之前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖28.在吉西他濱(300mg/kg,qd，Dl和8)治療的具有小鼠PAN02腫瘤的BDF-1小鼠中，906MT(lg/kg*，bid，Dl-4和8-ll)對腫瘤生長的作用。在第1天和第8天，每天腹膜內(nèi)給予一次吉西他濱(300mg/kg)。在第1-4天和第8-11天，在給予吉西他濱之前30min，每天口服兩次906MT(1g/k^)(各組中N=5)。906MT是從市場上獲得的常規(guī)制劑。因此所用的數(shù)量(lg/kg"是近似的。圖29.(A)吉西他濱(dFdC)及(B)其代謝物(dFdU)在血漿中的藥物動力學(xué)?？诜淮蝿┝康募魉麨I(600mg/kg)或/和PHY906(500mg/kg)。在給予吉西他濱前30min給予PHY906。每只小鼠在不同的時間點取血兩次，每個時間點取血三只小鼠。圖30.PHY卯6對吉西他濱+奧沙利鉑治療的具有人類PANC-1腫瘤的NCr-裸鼠的抗腫瘤作用。在第1天，在一天一次腹膜內(nèi)給予吉西他濱(300mg/kg)前30min，腹膜內(nèi)給予奧沙利鉑(IOmg/kg)。在第1-4天，在給予奧沙利鉑前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖31.PHY906對CPT-ll治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠腫瘤生長的作用。僅在第O天腹膜內(nèi)給予CPT-11(200mg/kg)。在第0天，在給予CPT-ll前30min，以500mg/kg口服PHY906，并繼續(xù)在8天中每天口服兩次(各組中N=5)。圖32.PHY卯6對卡培他濱治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠腫瘤生長的作用。從第O天開始到連續(xù)14天，每天口服兩次卡培他濱(360mg/kg)。間斷地在第0-3天和第7-10天，在給卡培他濱前30min，以500mg/kg每天口服兩次PHY906(各組中N=5)。圖33.PHY卯6對多柔比星治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠的抗腫瘤作用。在第1、4和7天，每天腹膜內(nèi)給藥一次多柔比星(7.5mg/kg)。在第1-4天和8-11天，在給予多柔比星前30min，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖34.PHY卯6對沙立度胺治療的具有人類HepG2腫瘤的NCr-裸鼠的抗腫瘤作用。在第1-14天，連續(xù)每天腹膜內(nèi)給藥一次沙立度胺(lg/kg)。在第1-4天，在給予沙立度胺前3小時，每天口服兩次PHY906(500mg/kg)(各組中N=5)。圖35.PHY卯6對奧沙利鉑在具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠中的抗腫瘤活性的作用。在第l天腹膜內(nèi)給予奧沙利鉑(10mg/kg，Dl)。在第l-4天，在給予奧沙利鉑前30min，以500mg/kg每天口服兩次PHY906(各組中N-5)。圖36.PHY卯6對奧沙利鉑/5-FU/LV在具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠中的抗腫瘤活性的作用。在第1天、第2天、第8天和第9天，腹膜內(nèi)給予5-FU和LV(分別為50mg/kg)。在第1天和第8天，腹膜內(nèi)給予奧沙利鉑(5mg/kg)。在第1-4天和第8-11天，在給予5-FU/LV前30min，以500mg/kg每天口服兩次PHY906(各組中N=5)。圖37.用(A)載體；(B)奧沙利鉑/5-FU/LV;或(C)PHY906加奧沙利鉬/5-FU/LV治療的具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠的卡-邁生存曲線。從第1天開始，腹膜內(nèi)給予奧沙利鉑(IOmg/kg，Dl)和5-FU/LV(分別為50mg/kg，Dl-2)。在第1-4天，在給予奧沙利鉑/5-FU/LV前30min，以500mg/kg每天口服兩次PHY906(各組中N=5)。圖38.PHY卯6對奧沙利鉬、5-FU/LV和奧沙利鉑/5-FU/LV治療的具有結(jié)腸38的BDF-1小鼠體重的作用。在第1天腹膜內(nèi)給予奧沙利鉑(5mg/kg，Dl)。在第l、2、8和9天，腹膜內(nèi)給予5-FU和LV(分別為50mg/kg)。在第1-4天和第8-11天，在給予5-FU/LV或奧沙利鉑前30min，以500mg/kg每天口服兩次PHY906(各組中N-5)。優(yōu)選實施方案詳述I.總述本發(fā)明部分地基于如下發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)動物模型中，PHY906降低化學(xué)治療誘發(fā)的毒性，包括體重下降和死亡，PHY906還能增強許多抗腫瘤藥如CPT-ll、5-FU、VP-16、L-OddC、卡培他濱、吉西他濱、奧沙利鉑、多柔比星、沙立度胺、CPT-ll/5-FU/LV、吉西他濱/奧沙利鉑和奧沙利鉑/5-FU/LV的抗腫瘤功效。PHY906是傳統(tǒng)中草藥制劑，由4種不同的草藥組成，它已經(jīng)持續(xù)約1800年被用于治療胃腸疾病，它們中的一些是通常在正經(jīng)歷化學(xué)治療的癌癥患者中觀察到的副作用。本發(fā)明還部分地基于如下發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞癌和胰腺癌模型中，PHY906都顯著增強所研究的化學(xué)治療藥物的治療指數(shù)。在人肝細(xì)胞異種移植小鼠模型中，PHY906與口服的5-FU前藥卡培他濱、CPT-ll、多柔比星或沙立度胺共同給藥，在小鼠胰腺癌模型中，PHY906與吉西他濱、奧沙利鉑、吉西他濱/奧沙利鉑共同給藥。在動物模型中，PHY906與卡培他濱或吉西他濱的共同給藥沒有改變卡培他濱、吉西他濱或其各自代謝物的藥物動力學(xué)曲線。還在結(jié)腸直腸癌小鼠模型中檢査了PHY906對奧沙利鉑、5-FU/LV和奧沙利鉑/5-FU/LV抗腫瘤活性的作用。本發(fā)明部分基于如下發(fā)現(xiàn)PHY906增強奧沙利鉑和奧沙利鉑/5-FU/LV的抗腫瘤活性，如圖35和36所示。PHY906不僅能將死亡率減少至60%,而且能延遲由奧沙利鉑/5-FU/LV引起的動物死亡的發(fā)生，如圖37所示。生化研究揭示，PHY906制劑具有廣泛的藥理學(xué)活性。PHY906可能的作用機理包括(l)通過抑制腸CYP3A4，增強藥理學(xué)活性劑的口服攝??；(2)抑制NF-kB活性；(3)抑制MMP活性；和(4)破壞肝臟腫瘤中血竇的完整性。這些臨床前的體內(nèi)研究為臨床環(huán)境中開發(fā)PHY906提供了理論。啟動PHY906的miA期雙盲、安慰劑對照的、劑量遞增研究，以評價PHY906在調(diào)節(jié)CPT-ll誘導(dǎo)腹瀉的潛在作用，所述腹瀉與晚期結(jié)腸直腸癌患者每周推注CPT-ll/5-FU/LV相關(guān)。獲益的患者加入第二個I/II期開放標(biāo)記、劑量遞增臨床試驗，以評價PHY906與卡培他濱的組合在治療肝細(xì)胞癌中的作用。還已顯示PHY906在小鼠模型中通過加強治療藥的抗腫瘤作用以及減少多種宿主毒性而增加幾種抗癌藥如伊立替康(CPT-11)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、伊立替康/5-氟尿嘧啶/亞葉酸(LV)、伊托泊苷(VP-16)和L-OddC的治療指數(shù)。為研究是否需要全部四種植物藥以獲得觀察到的全部生物學(xué)活性，研究了五種制劑具有全部四種植物藥的完整制劑和各自缺少一種植物藥成分的四種制劑(A二黃芩，B^芍藥，C二麥，D=甘草)。在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠模型中，當(dāng)從PHY906制劑中除去植物藥A或植物藥B時，CPT-ll抗腫瘤作用的強度受到損害。相反，沒有發(fā)現(xiàn)植物藥C和D有助于增強CPT-ll的抗腫瘤作用。但是，當(dāng)檢查體重下降作為CPT-ll的不良毒副作用時，除了B，所有植物藥均有助于保護體重下降。因此，所觀察到的PHY906生物學(xué)活性需要全部四種植物藥。還在體外研究了植物藥對細(xì)胞色素P450同工酶(CYP1A2、2C9、2C19、2D6和3A4)的作用，以檢査植物藥對分離的酶靶的潛在作用。已知這些酶中的一種，即CYP3A4是CPT-ll的主要的引起代謝的酶。盡管在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠模型中的研究顯示，PHY906對CPT-ll的藥物動力學(xué)或藥效學(xué)沒有影響，但觀察發(fā)現(xiàn)PHY卯6是具有不同功效的個體的細(xì)胞色素P450同工酶的抑制劑。對單個植物藥以及三種植物藥的四種獨立制劑進行個體P450抑制的研究顯示在調(diào)節(jié)個體酶抑制作用的特定植物藥之間存在相互作用。這些研究顯示在體內(nèi)和體外研究中，植物藥作用的復(fù)雜性、補償性和多因素性與來源于中藥的原理一致。PHY906正處于作為結(jié)腸直腸癌患者的CPT-ll/5-FU/LV調(diào)節(jié)劑的1//1Ia期臨床試驗中?？傊?，本發(fā)明部分基于如下發(fā)現(xiàn)1.在不同小鼠模型中，PHY906增加各種化學(xué)治療藥物在人類胰腺癌、肝細(xì)胞癌和結(jié)腸直腸癌中的治療指數(shù)。具體地，通過增強抗腫瘤活性、減少死亡率和避免體重下降，PHY906能提高多種化學(xué)治療藥物的治療指數(shù)。2.PHY906不改變這些化學(xué)治療藥物在小鼠模型中的藥物動力學(xué)。3.PHY906增強所研究的癌癥化學(xué)治療藥物的藥物作用機理可能在于但不限于抑制NF-kB、MMP或破壞肝細(xì)胞癌血竇的完整性。4.需要PHY906制劑中的全部四種草藥(A-黃芩，B二芍藥，C=冬，D二甘草)來獲得觀察到的最大范圍的功效；*在PHY906制劑中，草藥A促成避免體重下降和增強抗腫瘤作用(p<0.05)。*草藥B促成增強PHY906的抗腫瘤活性(p0.05)，但不能避免由癌癥化學(xué)治療藥物誘發(fā)的體重下降。草藥C和D避免由癌癥化學(xué)治療藥物誘發(fā)的體重下降。5.不同批次的PHY906在人類CYP450抑制和細(xì)胞生長抑制方面顯示出一致性；*草藥A是人類CYP450以及細(xì)胞生長的有效抑制劑。*草藥D在所檢查的細(xì)胞系中顯示出極低的細(xì)胞毒性，是極弱的人類CYP450抑制劑。6.PHY906顯示出對人類CYP450的強大體外抑制活性。但是，動物數(shù)據(jù)顯示，PHY卯6不影響CPT-ll代謝，或不損害化學(xué)治療藥物的抗癌活性。癌癥化學(xué)治療藥物經(jīng)常誘發(fā)嚴(yán)重的不良副作用，這些副作用會影響患者的生活質(zhì)量，并且干擾治療方案。本發(fā)明部分地基于如下發(fā)現(xiàn)中草藥與標(biāo)準(zhǔn)抗癌藥的組合可用于減少癌癥化學(xué)治療藥物的不良副作用，改善正經(jīng)歷化學(xué)治療的患者的生活質(zhì)量。PHY906是由四種不同草藥組成的植物藥制劑，在中國，已經(jīng)在數(shù)百年中將它用于治療各種胃腸疾病和其他疾病。本發(fā)明基于在動物模型中進行的實驗結(jié)果，所述實驗評價在結(jié)腸直腸癌患者中，PHY906在減少由癌癥化學(xué)治療藥物誘發(fā)的副作用方面的潛在功效。具體地，本發(fā)明部分地基于如下發(fā)現(xiàn)PHY906能減少由CPT-ll、FU、FU/LV、CPT-11/FU/LV、L-OddC、VP-16、沙立度胺、多柔比星、卡培他濱、吉西他濱、奧沙利鉑、吉西他濱/奧沙利鉑或奧沙利鉑/FU/LV治療所誘發(fā)的各種宿主毒性，并且能保持甚至增強化學(xué)治療藥物的抗腫瘤活性。更具體地，通過增強化學(xué)治療藥物的抗腫瘤作用并減少各種宿主毒性，PHY906可增強CPT-ll、5-FU、卡培他濱、奧沙利鉑、多柔比星、沙立度胺、VP-16、L-OddC、以及CPT-11/FU/LV和奧沙利鉑/FU/LV三聯(lián)組合的治療指數(shù)。這些發(fā)現(xiàn)不限于一種特定的抗癌藥或一種特定的腫瘤模型。本發(fā)明還部分地基于對如下方案的發(fā)現(xiàn)，所述方案可與各種抗癌藥組合使用，以降低限制劑量的毒性并增強藥物的功效。對于用于人類癌癥治療方法的物質(zhì)，這個發(fā)現(xiàn)是極為重要的補充。II.定義除非另有說明，本文所用的所有技術(shù)術(shù)語和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解相同的含義。盡管在本發(fā)明的實施或檢測過程中可能使用與本文所述相似或等同的任何方法和材料，但仍然描述了優(yōu)選的方法和材料。本文所用的"癌癥化學(xué)治療的"或"癌癥化學(xué)治療藥物"指用于治療腫瘤疾病或癌癥的化學(xué)治療藥物。本文所用的"化學(xué)治療的"指通過化學(xué)品或藥物治療疾病。本文所用的術(shù)語"化學(xué)治療制劑"指包括化學(xué)治療藥物的組合物。本文所用的術(shù)語"提取物"指按如下獲得的植物藥或動物藥的濃縮制品使用適宜的溶媒(溶劑)從中提取出活性成分，蒸發(fā)掉全部或接近全部的溶劑，將殘余物或粉末調(diào)節(jié)至規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。制備三種形式的提取物半固體或具有糖漿狀稠度的物質(zhì)、丸藥或固體，以及作為干粉(參見http:〃www.graylab.ac.uk/cgi-bin/omdquery=extract)。在一個實施方案中，提取物是各種固體和半固體劑型中所用粗制藥物的濃縮形式(Remington'sPharmaceuticalSciences第17版.(Ge"""ra,ed),Chapter84,pp.1516-1517,MackPublishingCo，Easton，PA(1985》。例如，丸藥(艮卩塑性體(plasticmass))提取物具有的稠度使得它們適合于丸藥塊并將其制成丸劑(例如純甘草屬提取物USP)。此外，丸藥塊很好地適用于軟膏劑和栓劑。粉狀提取物更適合粉狀制劑如膠囊、散劑和片劑。此外，具有糖漿狀稠度的半固體或提取物能夠用于制備藥物制齊U(Remington'sPharmaceuticalSciences,1985)。在一個相關(guān)方面，可認(rèn)為提取物是按如下獲得的活性成分溶液將植物或動物原料藥浸泡或浸漬在液體中(浸解)，或者使這類原料藥通過多孔物質(zhì)(滲濾)，作為藥劑供使用。此外，這種類型的藥劑可以是酊劑或流浸膏齊U[sic]的形式(Remington'sPharmaceuticalSciences,1985)。在一個實施方案中，所述提取物是酊劑形式。例如，酊劑可以包括但不限于由植物或由化學(xué)品制備的醇或水醇溶液?？梢酝ㄟ^滲濾或浸漬制備酊劑，一般以特定活性藥物的重量(按克計)/100ml酊劑表示功效(Remington'sPharmaceuticalSciences,1985)。例如，甜桔皮釘劑包含50g甜桔皮/100ml酊劑。在另一個實施方案中，所述提取物是流浸膏劑[sic]形式。例如，液體提取物包括但不限于植物藥的液體制劑，其中包括醇作為溶劑或作為防腐劑或兩者兼而有之，其中通常每ml包含1克治療成分所代表的藥物。通過作為常規(guī)方法的滲濾法能夠制備流浸膏劑(Remington'sPharmaceuticalSciences,1985)。本文所用的術(shù)語"血液學(xué)活性"指與血液和造血器官相關(guān)的活性。從技術(shù)上講，術(shù)語"草藥"指小的非木本(即帶有新鮮莖的)的一年生或多年生有種子的植物，其中所有氣生部位均在各生長季節(jié)結(jié)束時死亡。草藥具有醫(yī)療、調(diào)味(savory)或芳香性質(zhì)。當(dāng)更一般地使用該術(shù)語和當(dāng)本文使用該術(shù)語時，"草藥"指具有食物增補、醫(yī)學(xué)、藥物、治療或延長生命的用途的任何植物或植物部位。因此，本文所用的草藥不限于草藥的植物學(xué)定義，而是用于這類目的的任何植物性藥材、植物或植物部位，包括Metaphyta界中的任何植物種或亞種的任何植物或植物部位，包括草藥、灌木、半灌木和樹。草藥組合物中所用的植物部位包括但不限于種子、葉、莖、嫩枝、枝(branch)、芽、花、球莖、谷粒、塊莖、根莖、長匐枝、根、果實、球果、漿果、形成層和樹皮。本文所用的"草藥組合物或制劑"指包括草藥、草藥植物、草藥植物部位和/或草藥提取物的任何組合物或制劑。因此，本文所用的草藥組合物或制劑包括包含草藥食物增補劑、草藥和藥用食物的草藥制劑。草藥組合物的例子包括但不限于下列成分單一植物種的完整植物或植物部位；多植物種的完整植物或植物部位；來源于單一植物種的多種成分；來源于多種植物種的多種成分；草藥提取物；或這些不同成分的任何組合。本發(fā)明還關(guān)注包括來源于單一或多植物種的一種或多種化學(xué)品的草藥組合物。關(guān)于不同草藥組合物的充分綜述，例如參見KeeChangHuang,ThePharmacologyofChineseHerbs,CRCPress(1993)，該文獻被全文引入本文。本文所用的術(shù)語"免疫學(xué)活性"指與免疫系統(tǒng)、免疫性、誘發(fā)的敏感性和變態(tài)反應(yīng)相關(guān)的活性。本文所用的術(shù)語"死亡率"指人口或特定人口數(shù)量中的死亡比例，其中將死亡率定義為死亡比例或總死亡數(shù)量與總?cè)丝谥?。例如，缺血性中風(fēng)癥狀發(fā)作后30天的死亡率可能為約13.3%(例如在用組織型纖溶酶原激活物治療后，參見Albers等人(2000)283(9):1145-1150)至大于約65%(例如出血性中風(fēng)，參見Mahaffey等人，///(1999)138(3Ptl):493-499)。本文所用的術(shù)語"生活質(zhì)量(QOL)"指動物，尤其是哺乳動物、更具體地是人的一般健康。能夠基于任一參數(shù)、一組兩個或多個參數(shù)或基于一般總體評價或評分來評價個體的QOL。用于評價QOL的有用指標(biāo)的例子包括但不限于與下列內(nèi)容相關(guān)的指標(biāo)睡眠模式；進食模式；飲用模式；靈活性可動性；皮膚色澤；視覺；毛發(fā)保留/缺失/生長；肌肉色澤；肌肉質(zhì)量；力量；體重；竇健康；存在或不存在炎癥，或其程度；不適感；完成特定任務(wù)的能力；焦慮程度；響應(yīng)時間；集中能力；記憶保留；語言能力；聲覺；存在或不存在頭痛，或其程度；肌肉痙攣；神經(jīng)損害；味覺；觸覺；嗅覺；機會性疾病的存在或不存在；寄生蟲的存在或不存在。本文所用的術(shù)語"方案"指治療程序。本文所用的術(shù)語"治療指數(shù)"指產(chǎn)生所需療效時藥物選擇性如何。治療指數(shù)是LDs。與EDs。的比例。半數(shù)有效量EDso是在50%人群中產(chǎn)生特定療效所需的藥物劑量。LD5()是在實驗動物中測定的半數(shù)致死量。III.具體實施方案A.化學(xué)治療通常，化學(xué)治療指用化學(xué)劑治療疾病、尤其是腫瘤、寄生蟲感染和微生物疾病，這些化學(xué)劑以一定的方式作用于感染性的有機體或腫瘤。l.癌癥化學(xué)治療介努化學(xué)治療仍舊為用于治療癌癥患者的最有效方式之一。盡管十分有效，但也眾所周知化學(xué)治療藥物不良地破壞患者的生活質(zhì)量。一些通常觀察到的副作用包括骨髓抑制和免疫抑制、腹瀉、外周神經(jīng)病、惡心和嘔吐、發(fā)熱、肝功能障礙和心臟毒性等("PhysiciansDeskReference"(1999)MedicalEconomicsCompany)。在許多情況下，這些不良副作用妨礙患者接受遞增劑量或追加的治療過程，由此限制了這些藥劑的功效。減輕這些副作用中的一些或全部、而不損害化學(xué)治療藥物的抗癌活性，這樣不僅可以改善癌癥患者的生活質(zhì)量(QOL)，而且允許使用更強力的治療方案，導(dǎo)致可能的改善的臨床成功。目前，大多數(shù)支持療法使用單一藥劑如止吐藥、抗粘膜炎藥和集落生長因子，它們以個別的副作用為靶，但不對應(yīng)與癌癥化學(xué)治療的相關(guān)的多種副作用(BleibergH和CvitkovicE.,EurJCancer32A(Suppl3):S18-S23(1996);WierdaD.和MatamorosM.，Toxicol&AppliedPharmacol75:25-34(1984);GoldberR.M.和ErlichmanC.，Oncology12:59-63(1988》。用于治療癌癥的藥物包括更常規(guī)的天然產(chǎn)物，如紫杉醇(TAXOL);半合成藥物，如依托泊苷；以及許多較新的不同藥劑，如白介素-2和全反式維甲酸。關(guān)于用于治療腫瘤疾病的化學(xué)治療藥物的綜合目錄，參見例如Calabresi和Chabner(1996)1227-1229頁表X-l。表2提供了與通常給藥的癌癥化學(xué)治療相關(guān)的主要不良作用。表2.癌癥化學(xué)治療的主要不良作用<table>complextableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>5-顏^尿發(fā)裙氟嘧啶類似物5-氟尿嘧啶(5-FU或FU)表現(xiàn)出多種臨床活性。在輔助的和重病環(huán)境中，在結(jié)腸直腸癌的治療以及在其他GI惡性病方面，它仍是最具活性的藥劑之一(Pinedo和Peters，1988)。此外，該藥還有效抗乳腺癌和頭頸癌。結(jié)腸直腸癌治療的近期發(fā)展已經(jīng)使用生化調(diào)節(jié)來選擇性激活特定的嘧啶代謝途徑。還原的葉酸鹽，即亞葉酸(LV)是有效的生化調(diào)節(jié)劑，已經(jīng)與FU組合用于臨床治療(Peters和VanGroeningen,1991;Joulia，等人1999)。在臨床試驗中，已經(jīng)證實添加LV形式的外源性葉酸鹽可提高對FU的響應(yīng)(Calabresi和Chabner,P1250,1996)。LV相互作用的假設(shè)機制是胸苷酸合酶抑制。在晚期疾病患者中，對FU的響應(yīng)率由10%-12%(單獨FU治療)改善至20%-30%(FU/LV治療)?？撗残?*卡培他濱(Xdoda⑧)是用于治療癌癥的口服藥物。在1998年，卡培他濱被FDA批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌，這種癌癥耐受其他藥物如紫杉醇(Taxo1⑧)、多柔比星和adriamycin。在2001年，它被FDA批準(zhǔn)用于治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌，其常用5-FU治療。在每21天的周期中，卡培他濱一般給藥14天，然后是7天的休息期?？ㄅ嗨麨I是具有抗腫瘤活性的氟嘧啶氨基甲酸鹽?？ㄅ嗨麨I的化學(xué)名為5'-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]胞苷。卡培他濱描述于美國專利5,472,949中，該文獻被全文引入本文作為參考。卡培他濱屬于稱為抗代謝物的化學(xué)治療藥物組。它是5'-脫氧-5-氟胞苷(5'-DFUR)的前藥，具有獨特的激活機理?？ㄅ嗨麨I被位于肝的羧酸酯酶或胞苷脫氨酶轉(zhuǎn)化為5'-DFUR。5'-DFUR被腫瘤中的胸苷磷酸化酶(dThdPase)轉(zhuǎn)化為活性形式5-FU。與健康組織相比，卡培他濱可利用腫瘤組織中高濃度的dThdPase，導(dǎo)致腫瘤選擇性地產(chǎn)生5-FU。在正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中，5-FU進一步被代謝成兩種活性代謝物5-氟-2-脫氧尿苷一磷酸(FdUMP)和5-氟尿苷三磷酸(FUTP)。FdUMP通過減少正常胸苷的制備來抑制DNA合成，而FUTP通過與尿苷三磷酸競爭來抑制RNA和蛋白質(zhì)合成?？ㄅ嗨麨I的活性部分5-FU是細(xì)胞周期階段特異性的(S期)。研究顯示，與靜脈內(nèi)給藥(i.v.)的5-FU/LV相比，卡培他濱具有更好的響應(yīng)。在一項研究中，與5-FU/LV的11%響應(yīng)率相比，用卡培他濱治療的患者獲得了顯著性(P-0.0014)更好的響應(yīng)率，為21%。用卡培他濱和5-FU/LV治療的疾病進展中位時間分別為128天和131天(非顯著性(NS))，中位生存時間分別為380天和407天(NS)(Hoff等人JClinOncol.19:2282-2292,2001)。在另一項研究中，與5-FU/LV的14%響應(yīng)率相比，用卡培他濱治療的患者也獲得顯著性(P-0.027)更好的響應(yīng)率，為21%。疾病進展中位時間分別為137天和131天(NS)，中位生存時間分別為404天和369天(NS)(VanCutsem等人JClinOncol.19:4097-4106,2001)。與i.v.5-FU/LV相比，卡培他濱還具有改善的安全曲線。與單獨的5-FU/LV相比，使用卡培他濱與5-FU/LV的聯(lián)合治療來治療結(jié)腸直腸癌已經(jīng)顯示出存活益處。用于治療結(jié)腸直腸癌的其他卡培他濱潛在聯(lián)合治療包括但不限于卡培他濱/奧沙利鉑、卡培他濱/伊立替康、卡培他濱/奧沙利鉑/gefitimib、卡培他濱/奧沙利鉑/5-FU/LV和卡培他濱/放射治療。對于乳腺癌治療，聯(lián)合治療包括但不限于卡培他濱/伊立替康、卡培他濱/多西紫杉醇(Taxotere⑧)、卡培他濱/紫杉醇和卡培他濱/5'-DFUR。像其他化學(xué)治療一樣，服用卡培他濱也伴有副作用?？ㄅ嗨麨I最常見的副作用包括腹瀉、惡心、嘔吐、口的疼痛性腫脹、疲勞、手或足的疼痛性皮疹和腫脹、白細(xì)胞計數(shù)低(這可能導(dǎo)致感染)、血小板計數(shù)低(這可能導(dǎo)致出血)和貧血。在接受卡培他濱的患者中，約每三個人就有一個人具有嚴(yán)重的副作用，但是當(dāng)停止藥物或當(dāng)降低劑量時，這些副作用通常是可逆的。對于氟嘧啶類似物，包括5-FU和卡培他濱的治療用途的詳細(xì)描述，參見例如Chabner等人，1996。C尸7Wh伊立替康(CPT-11)是半合成的喜樹堿類似物，其抑制復(fù)制細(xì)胞中的拓?fù)洚悩?gòu)酶I。在用一線FU/LV治療失敗的癌癥患者中，它表現(xiàn)出抗腫瘤活性(Bleiberg，1999;Stueky-Marshall,1999)。盡管CPT-ll為FDA批準(zhǔn)的作為晚期結(jié)腸直腸癌患者的二線治療，但觀察到的響應(yīng)率級別僅為10%-15%。與該藥劑相關(guān)的主要副作用包括白細(xì)胞減少、貧血、惡心/嘔吐、食欲缺乏和腹瀉。因此，期望開發(fā)一種調(diào)節(jié)劑，其能提高CPT-ll的抗腫瘤活性的功效和/或緩解與CPT-ll治療相關(guān)的一些毒副作用，從而使癌癥患者的總體生活質(zhì)量和體力狀態(tài)得到改善。a>r-〃/Fc/^a37V7/pt//i^^^.*據(jù)報道，結(jié)腸直腸癌是北美地區(qū)死于癌癥的第二位主導(dǎo)原因。目前FDA批準(zhǔn)用于治療結(jié)腸直腸癌的兩種藥物是伊立替康(CPT-ll，Camptosar⑧)和5-氟尿嘧啶(FU)。FU是抗代謝藥物，它抑制合成DNA所需的胸苷酸合酶。通常將FU與還原葉酸鹽LV—起給藥，LV能增加FU對胸苷酸合酶的親合性。目前將這種治療用作轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的一線治療(MurakamiK,Sakukawa,Sano:M,等人，ClinCancerRes.5:2304-2310(1999);vanderWiltC丄，vanGroeningen,C.J，PinedoH.M，等人，J.CancerRes.Clin.Oncol,123:595-601(1997))。CPT-11是拓?fù)洚悩?gòu)酶I的有效抑制劑，這種核酶參與DNA在復(fù)制過程中的解旋。己經(jīng)證實CPT-11作為FU失敗后的二線治療，對轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌的抗腫瘤活性(Kase,Y,Hayakaw^T,Togashi,Y，等人，JpnJPharmacol,75:399-405(1997);ArakiE,IshikawaM，IigoM:等人，JpnJCancerRes84:697-702(1993);BisseryMC，VrignaudP,LavelleF，等人，Anti-CancerDrugs7:437-460(1996);SaltzL.B,CoxJ.V，BlankeC,等人New.Eng丄Med.343:905-914(2000))。最近，F(xiàn)DA批準(zhǔn)將CPT-11/FU/LV的三聯(lián)組合用作晚期結(jié)腸直腸癌的一線治療。不幸的是，在使用該聯(lián)合治療治療的患者中，已經(jīng)將嚴(yán)重腹瀉鑒定為限制劑量的毒性之一(SaltzL.B,CoxJ.V，BlankeC,等人，New.Eng丄Med.343:905-914(2000);MurakamiK，Sakukawa^Sano，M，等人，ClinCancerRes.5:2304-2310(1999);vanderWiltC丄，vanGroeningen,C.J,PinedoH.M，等人，J.CancerRes.Clin.Oncol.,123:595-601(1997)。KP-7^銀范^藥，VP-16也稱作依托泊苷，它顯示出對抗小細(xì)胞肺癌、睪丸癌、淋巴瘤和白血病(O'Dwyer，P.,等人，Etoposide(VP-16-213)，CurrentStatusofanActiveAnti-cancerDrug,NewEngl.J.Med丄312:692-700(1985))和包括在霍奇金病、乳頭瘤病毒和彌漫性組織細(xì)胞淋巴瘤中所見的腫瘤的顯著臨床活性。據(jù)信依托泊苷通過穩(wěn)定酶-DNA復(fù)合物來阻斷DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II的催化活性，在所述復(fù)合物中DNA裂解并與所述酶共價連接。參見Chen,G.L.,Yang,L,,RoweT.C.,Halligan,B.D.，Tewey,K.,和Liu，L.,J,Biol.Chem.,259:13560(1984);Ross,W.,Rowe，T.,Glisson,B.,Yalowich:J.，和Liu,L.，CancerRes.,44:5857(1984);Rowe,T.，Kuppfer,G.，和Ross,W.，Biochem.Pharmacol.,34:2483(1985)，特別將這些文獻引入本文作為參考。作為
背景技術(shù)：
，拓?fù)洚悩?gòu)酶是控制DNA拓?fù)鋵W(xué)狀態(tài)的酶。II型拓?fù)洚悩?gòu)酶催化DNA鏈通過DNA中短暫的雙鏈斷裂處。所得DNA連接數(shù)量的改變使得這些酶介導(dǎo)DNA的互變，例如超螺旋和超螺旋松弛、鏈狀排列和脫鏈狀排列、打結(jié)和不打結(jié)。參見Wang，J.C.，Annu.Rev.Biochem.，54:665(1985)和Maxwell,A,，和Gellert，M.,Adv.ProteinChem.,38:69(1986)，特別將這些文獻引入本文作為參考。已經(jīng)證實II型拓?fù)洚悩?gòu)酶參與許多重要的細(xì)胞過程，包括DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，以及染色體分離。因此，這些酶是許多抗癌藥，包括依托泊苷和替尼泊苷的關(guān)鍵作用靶。導(dǎo)致細(xì)胞死亡的關(guān)鍵步驟可能是這些藥物能夠阻斷DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II的催化活性，如上所述。^丄一二奪^界應(yīng),(X-OWq;(3-L-二氧戊環(huán)胞苷[L-OddC]是顯示具有抗癌活性的非天然L構(gòu)象的第一種核苷類似物(Grove等人，CancerRes(1996)56(18):4187-4191)。在人前列腺和肝細(xì)胞異種移植腫瘤模型中，已顯示該化合物具有有效的抗腫瘤活性(Grove等人，CancerRes(1995)55:3008-3011)。此外，已顯示L-OddC在體外有效對抗人角質(zhì)細(xì)胞的過度增殖活性(Schwartz等人，SkinPharmacolApplSkinPhysiol(1998)11(4-5):207-213)。通過平衡敏感性和平衡不敏感性核苷轉(zhuǎn)運體系，該化合物快速轉(zhuǎn)移進入細(xì)胞而起作用，在所述體系中它被結(jié)合到細(xì)胞的DNA中。DNA結(jié)合導(dǎo)致DNA降解成大片段，而沒有產(chǎn)生核小體間梯化。吉西勉翁..在1996年，吉西他濱(Gemzar⑧)被FDA批準(zhǔn)用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移性胰腺癌，作為最初治療或在用化學(xué)治療藥物氟尿嘧啶治療之后使用。它還被批準(zhǔn)與化學(xué)治療藥物順鉑(Platinol⑧)組合，用于治療局部晚期或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌。吉西他濱是靜脈內(nèi)給藥(i.v.)的，其劑量取決于幾個因素，包括所治療的病癥、患者的身高、所使用的具體治療方案和患者的整體健康。吉西他濱是2'-脫氧-2'，2'-二氟胞苷的通用名。也知道其化學(xué)名為1-(4-氨基-2-氧代-lH-嘧啶-l-基)-2-脫氧-2,2-二氟核糖。吉西他濱公開于美國專利4,808,614和5,464,826，這些文獻被引入本文，參考它們關(guān)于如何合成、配制和使用吉西他濱來治療敏感腫瘤的教導(dǎo)。吉西他濱作為一鹽酸鹽和作為P-異構(gòu)體出售。吉西他濱屬于稱為抗代謝物的藥物組。通常，抗代謝物通過抑制細(xì)胞產(chǎn)生或修復(fù)DNA的能力，從而使得細(xì)胞不能復(fù)制或修復(fù)自身，最終引起細(xì)胞死亡，來產(chǎn)生其抗癌作用。吉西他濱顯示細(xì)胞階段特異性，主要殺滅進行DNA合成(S期)的細(xì)胞，還能阻斷細(xì)胞通過Gl/S期邊界的進程。吉西他濱被核苷激酶在細(xì)胞內(nèi)代謝成活性二磷酸(dFdCDP)和三磷酸(dFdCTP)核苷。吉西他濱的細(xì)胞毒性作用來自二磷酸和三磷酸核苷的兩種作用的組合，這導(dǎo)致抑制DNA合成。首先，吉西他濱二磷酸抑制核糖核苷酸還原酶，該酶負(fù)責(zé)催化產(chǎn)生脫氧核苷三磷酸用于DNA合成的反應(yīng)。二磷酸核苷對該酶的抑制引起脫氧核苷酸，包括dCTP的濃度減少。其次，吉西他濱三磷酸與dCTP競爭進入DNA。細(xì)胞內(nèi)dCTP濃度的減少(通過二磷酸的作用)促進吉西他濱三磷酸進入DNA(自身增強)。在吉西他濱核苷酸進入DNA后，僅有一種額外的核苷酸進入DNA。在此加入后，即可抑制DNA的進一步合成。像其他化學(xué)治療藥物一樣，吉西他濱可引起不良副作用。使用吉西他濱的更常見副作用包括但不限于白細(xì)胞數(shù)計減少導(dǎo)致感染危險增加、血小板計數(shù)減少導(dǎo)致出血危險增加、惡心、嘔吐、肝功血液檢査增加和疲勞。較不常見的副作用是腹瀉；口唇瘡；流感樣癥狀；皮膚皮疹；手、踝和面部腫脹、毛頭稀少和發(fā)癢。^沙務(wù)舒在2002年，奧沙利鉑(Eloxatin⑧)被FDA批準(zhǔn)用于轉(zhuǎn)移性結(jié)腸直腸癌患者的二線治療。在2005年2月，它被批準(zhǔn)用于晚期結(jié)腸直腸癌的一線治療。這個較近的批準(zhǔn)推薦將奧沙利鉑與5-氟尿嘧啶和亞葉酸(5-FU/LV)組合使用。奧沙利鉑是靜脈內(nèi)給藥的，其劑量取決于幾個因素，包括所治療的病癥、患者的身高、所使用的具體方案和患者的整體健康。奧沙利鉑是二氨基環(huán)己烷化合物，已知在與順鉑相同的加成物形成位置引起DNA損壞。它還被稱為L-OHP，是第三代鉑絡(luò)合物。奧沙利鉑的化學(xué)名為順式草酸(反式-1-1，2-環(huán)己烷二胺)鉑(11)。奧沙利鉬公開于美國專利4，169，846和相關(guān)專利美國專利5,290,961、美國專利5,298,642、美國專利5,338,874、美國專利5,420,319和PCT/IB/00614，這些文獻被全文弓I入本文作為參考。本文所用的術(shù)語"奧沙利鉑"包括順式草斷反式-l-l,2-環(huán)己垸二胺)鉑(II)、其光學(xué)對映異構(gòu)體順式草酸(反式-d-l,2-環(huán)己烷二胺)鉑(II)及其任何外消旋混合物。術(shù)語"奧沙利鉑"還包括具有高光學(xué)純度的順式草酸(反式-l-l,2-環(huán)己垸二胺)鉑(n),即光學(xué)純度等于或高于約99.5%，例如根據(jù)美國專利5,338，874(該文獻被全文引入本文作為參考)所述的程序獲得的順式草酸(反式-l-l,2-環(huán)己垸二胺)鉬(n)，其熔點為約198t:至約292t:，尤其是根據(jù)美國專利5,420,319公開的程序獲得的順式草酸(反式-1-1，2-環(huán)己烷二胺)斷11)，其光學(xué)純度為約99.94%或更高，熔點為約198.3'C至約199.7。C，該文獻被全文引入本文作為參考。奧沙利鉑的衍生物包括但不限于卡鉑和順鉑。奧沙利鉑屬于新一類鉑試劑。它包含與草酸鹽和二氨基環(huán)己垸(DACH)絡(luò)合的鉑原子。認(rèn)為與順鉑和卡鉑相比，龐大的DACH導(dǎo)致更大的細(xì)胞毒性(Wiseman等人，DrugsAging1999;14(6):459-75)。奧沙利鉑的確切作用機理是未知的。奧沙利鉑形成活性鉑絡(luò)合物，認(rèn)為該絡(luò)合物通過形成DNA分子的鏈間交聯(lián)來抑制DNA合成。奧沙利鉑通常不與順鉑或卡鉑交叉耐受，可能是由于DACH基團和對DNA錯配修復(fù)的抵抗(Wiseman等人，DrugsAging1999，14(6):459-75;Misset等人，CriticalReviewsinOncology誦Hematology2000,35(2):75-93)。臨床前研究顯示，奧沙利鉑與氟尿嘧啶和伊立替康的活性代謝物SN-38是協(xié)同的(Cvitkovic等人，SeminOncol1999，26(6):647-62)。奧沙利鉑是放射敏感劑(Freyer等人，ProcAmSocClinOncol2000，19:260a;Carraro等人，ProcAmSocClinOncol2000,19:291a)。它是細(xì)胞周期相非特異性的(Sanofi-Synthelabo.Eloxatin:Summaryofproductcharacteristics(Europe):France;1October1999)。像其他化學(xué)治療藥物一樣，使用奧沙利鉑也有副作用。較常見的副作用包括惡心、嘔吐、由于神經(jīng)刺激而使手和/或足麻木和刺痛、嘴唇麻木、腹瀉、腹痛、口瘡、呼吸困難和疲勞。較少見的副作用包括行走困難、白細(xì)胞計數(shù)減少導(dǎo)致感染危險增加、血小板計數(shù)減少導(dǎo)致出血危險增加、難以吞咽或呼吸、對寒冷溫度的耐受性差和具有皮疹的變態(tài)反應(yīng)、發(fā)癢、唇舌腫脹或突然咳嗽。^、i2^r^^沙立度胺是谷氨酸的衍生物，在20世紀(jì)50年代最早被開據(jù)處方作為止吐藥。不幸的是，發(fā)現(xiàn)沙立度胺在胎兒形成中具有致畸作用。因此，沙立度胺退出了市場。近些年，在其他藥物領(lǐng)域中研究了沙立度胺。發(fā)現(xiàn)沙立度胺能顯著減少新血管的形成并抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)誘發(fā)的血管發(fā)生，血管發(fā)生是血液學(xué)惡性病的重要進程。幾項臨床試驗暗示沙立度胺可能也具有抗腫瘤性質(zhì)。沙立度胺存在兩種異構(gòu)體形式，將它們稱為右手性的和左手性的。這兩種異構(gòu)體自然互換，形成外消旋混合物。沙立度胺衍生的類似物包括免疫調(diào)節(jié)藥(IMiD)和SdCID(選擇性細(xì)胞因子抑制藥)。IMiD的例子包括但不限于CC-4047和CC-5013。SelCID的例子包括但不限于CC-7034和CC-卯88。沙立度胺的其他衍生物包括但不限于lenalidomide、a-EM12、|3-EM12和鄰苯二甲酰鄰苯二甲酰亞胺。在近些年，已發(fā)現(xiàn)沙立度胺在各種疾病，包括但不限于AIDS、麻瘋病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和癌癥的治療中具有一些作用。具體地，在HIV患者中，沙立度胺有助于減少cashexia(身體和肌肉質(zhì)量的進行性減少)的作用和治療aphothous潰瘍(口咽中的瘡生長)。沙立度胺還能有效地停止HIV復(fù)制。還顯示沙立度胺具有抗炎和免疫抑制性質(zhì)，這使得其可能有效地治療貝切赫特病(Behcet'sdisease)、肉瘤、硬皮病和克羅恩病。此外，已經(jīng)確定沙立度胺為用于治療晚期復(fù)發(fā)和難控的多發(fā)性骨髓瘤(MM)的有效的療法(Singhal等人1999N.Engl.J.Med.341:1565-1571)。已研究證實，沙立度胺和IMiD兩者不僅抑制血管發(fā)生，而且直接誘發(fā)耐受骨髓瘤細(xì)胞中的凋亡和生長抑制。它們還阻斷骨髓瘤細(xì)胞與骨髓間質(zhì)細(xì)胞的結(jié)合以及對凋亡的相關(guān)保護，阻斷骨髓瘤細(xì)胞生長、存活和遷移因子如白介素-6、腫瘤壞死因子a(TNF-a)和血管內(nèi)皮生長因子的分泌增加，這種分泌的增加是由骨髓瘤細(xì)胞與骨髓間質(zhì)細(xì)胞的結(jié)合引發(fā)的。而且，它們在體內(nèi)擴大天然殺傷細(xì)胞和T細(xì)胞的數(shù)量，改善對抗人骨髓瘤細(xì)胞的功能，增強這些細(xì)胞對抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性的敏感性。(參見例如Anderson等人2001SeminHematol38:6-10;Hideshima等人2000Blood96:2943-2950;Gupta"a/2001Leukemia15:1950-1961;Davies等人2001Blood98:210-216;Treon等人2001JImmunother24:236-271;Lentzsch等人2003Leukemia17:41-44)。但是，沙立度胺的功效明顯受到不良作用的限制，不良作用包括鎮(zhèn)靜、神經(jīng)病、便秘和深靜脈血栓癥。多柔比產(chǎn).*多柔比星(阿霉素、DOX、ADM)是由真菌streptomycespeucetius產(chǎn)生的蒽環(huán)類抗生素，已經(jīng)被批準(zhǔn)用于治療各種癌癥。多柔比星是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II的抑制劑；它通過蒽環(huán)部分的插入、金屬離子的螯合或者通過產(chǎn)生自由基來損害DNA。盡管沒有經(jīng)FDA批準(zhǔn)的化學(xué)治療藥物可用于治療肝細(xì)胞癌，但多柔比星現(xiàn)在被用作"標(biāo)準(zhǔn)的"化學(xué)治療。在包括475名可評價患者的八項試驗中報告的響應(yīng)率為16%(范圍為0-35%)(EngstromPF等人，(1993)inCancerMedicineHollandJF，F(xiàn)reiE(eds)pp.1430-1441.London:Lea和Febiger)。^薪^^jy^oz^癌癥治療成功的標(biāo)準(zhǔn)評價措施包括但不限于腫瘤塊和類型以及腫瘤擴散速率和數(shù)量的變化(被評價腫瘤的局部和遠(yuǎn)端)?；瘜W(xué)治療的領(lǐng)域的技術(shù)人員還能夠確定特定的治療方法是否可提高患者的預(yù)期壽命和生活質(zhì)量(即使對那些對通常治療沒有響應(yīng)的患者)。例如，可以通過幾種標(biāo)準(zhǔn)來確定對胃腸疾病的有效治療，這些標(biāo)準(zhǔn)包括但不限于腸炎評分(基于臨床癥狀如腹痛、痛性痙攣、糞便中的愈創(chuàng)木脂和腹瀉的綜合評分)、以及相關(guān)終點如所遞送的化學(xué)治療的劑量百分比、住院天數(shù)、輸血、靜脈輸液治療、抗運動劑和飲食能力。關(guān)于治療作用，患者的自覺癥狀并非始終符合醫(yī)生所進行試驗的結(jié)果。例如即使在獲得不利測試結(jié)果的情況下，當(dāng)尿失禁和排泄的發(fā)生減少時，患者也相信治療已經(jīng)起作用，其結(jié)果是生活質(zhì)量(QOL)得到改善。在化學(xué)治療的過程中，患者生命中的負(fù)面副作用如脫發(fā)、體重下降、食欲減退、疲勞、腹瀉、惡心、嘔吐等可能會持續(xù)并且導(dǎo)致曰夜不停的緩慢折磨，這從身體上和精神上對于患者均是無法忍受的。因此，本發(fā)明方法的治療效力是指不僅部分或完全免除疼痛或者減少腫瘤生長或癌癥進程，而且減少或消除通常與治療相關(guān)的副作用，其總體結(jié)果是提高了生活質(zhì)量?？梢园ɑ€評價作為治療方案的組成部分，由此測量各種標(biāo)準(zhǔn)并使這些標(biāo)準(zhǔn)與QOL關(guān)聯(lián)。此外，患者可以報告患者每日情況如感覺"平靜"或經(jīng)受"中度"疼痛。然后在治療過程之中和之后使用這些測量，以評價患者是否感覺生活質(zhì)量已經(jīng)得到改善。2.寄生蟲感染的化學(xué)治療寄生原生動物在人和動物中導(dǎo)致各種感染，由寄生原生動物導(dǎo)致的許多疾病對宿主是致命的。例如，盡管國際上作了巨大努力來根除瘧疾，但是它仍然對人體健康有明顯的威脅；錐蟲病如由克氏錐蟲(7Vy/a"oso卿mc/)導(dǎo)致的恰加斯病和由布氏錐蟲(r.6ram〕導(dǎo)致的非洲睡眠病在非洲和南美中并不罕見；在無免疫應(yīng)答的宿主中，由卡氏肺囊蟲(戶weMmoc;AS^scan'w'0、鼠弓形國體(7b:to;7/as7wagow&0、1^、抱子蟲(Co^加/^誠腦柳.)導(dǎo)致的機會性感染在發(fā)達(dá)國家中正在日益變得顯著。在一些原生動物病如恰加斯病中，沒有令人滿意的治療；在其他疾病中，可能產(chǎn)生原生動物的耐藥株。因此，仍需要確定新的且有效的抗原生動物藥物。然而，就大部分情況而言，通過抗一組寄生蟲的天然產(chǎn)物和合成化合物的生物篩選來發(fā)現(xiàn)抗寄生蟲藥物，這是隨機和費時的方法。盡管在疫苗開發(fā)中有令人鼓舞的進展，但是化學(xué)治療仍然是控制大多數(shù)寄生蟲感染的單一最有效、有效率和廉價的方式(Tmcy和Webster,ChemotherapyofParasiticInfections,inGoodman&Gilman，sThePharmacologicalBasisofTherapeutics,NinthEdition,pages955-985，1996)。目前可用的藥物在治療由吸蟲和腸寄生蟲導(dǎo)致的人體感染方面特別有效。但是迫切需要新型或更好的藥物來抵抗全身感染如囊尾幼蟲病、絲蟲病、利什曼病、旋毛蟲病和錐蟲病，阻止特別由瘧疾和其他原生動物寄生蟲表現(xiàn)出的耐藥性的形成。原生動物寄生蟲對藥物產(chǎn)生耐藥性遠(yuǎn)易于蠕蟲對藥物產(chǎn)生耐藥性，這與其在宿主中更迅速增殖的情況一致?？辜纳x藥物在患者中應(yīng)安全而有效，這是必需的?？辜纳x藥物的治療功效是復(fù)雜的，取決于宿主、寄生蟲和環(huán)境因素。因此，通常通過試驗和誤差來決定最佳藥物和最佳劑量方案，而非來自對患地方病感染的患者進行細(xì)致的藥物動力學(xué)和藥效學(xué)研究。為了進行正確的評價，僅應(yīng)在適當(dāng)?shù)牧餍胁W(xué)研究公開了傳播模式和年齡特異性流行性與疾病感染強度之間的關(guān)系之后，再制定基于人群的化學(xué)治療方案。為了得到最佳結(jié)果，應(yīng)將化學(xué)治療與其他適合于特定感染、環(huán)境和宿主人群的公眾健康措施聯(lián)用。用于群體化學(xué)治療的理想藥劑應(yīng)該對感染性寄生蟲的所有發(fā)育階段具有廣泛活性。在僅口服一天的高治療劑量下，它也應(yīng)是安全的在使用條件下保持化學(xué)穩(wěn)定性；作為耐藥性的誘發(fā)物是有效的；并且是廉價的。目前幾乎沒有可用的抗寄生蟲藥物滿足這些標(biāo)準(zhǔn)。對無性生殖紅細(xì)胞瘧疾寄生蟲有效的化學(xué)治療藥物包括氯奎、奎寧、甲氟奎和鹵泛群。其他藥物如乙胺嘧啶、磺胺類、砜類和四環(huán)素類作用緩慢且療效低于上述藥劑，由此通常將它們與其他化學(xué)治療藥物聯(lián)用。藥劑如阿托伐醌、氯奎、糠酸二氯尼特、依氟鳥氨酸、依米丁和去氫依米丁、8-羥基喹啉類、美拉胂醇、甲硝唑、硝呋替莫、噴他脒、米帕林、銻酰葡糖酸鈉和舒拉明可有效地治療寄生蟲感染，包括錐蟲病、利什曼病、阿米巴病、甲第蟲病和毛滴蟲病。最終，通常用驅(qū)腸蟲藥如苯并咪唑、乙胺嗪、伊維菌素、美曲膦酯、氯硝柳胺、奧沙尼喹、哌嗪、吡喹酮和雙羥萘酸噻嘧啶治療帶有寄生蟲蠕蟲、蠕蟲病的感染。關(guān)于寄生蟲感染化學(xué)治療的綜述，參見Tmcy和Webster的，文獻同上。3.微生物疾病的化學(xué)治療在1936年，由Colebrook和Kenny以及Buttle和合作者報道了使用磺胺在產(chǎn)后膿毒病和腦膜炎球菌感染中的有利臨床結(jié)果，這使醫(yī)學(xué)領(lǐng)域人員意識到了抗菌化學(xué)治療的新領(lǐng)域。在1941年，青霉素大量生產(chǎn)并首次用于有限的臨床試驗。目前，全部住院患者中至少30%接受使用抗生素的一個或多個療程，己經(jīng)治愈了數(shù)以百萬計可能致命的感染?？股厥怯筛鞣N微生物(細(xì)菌、真菌、放線菌)產(chǎn)生的物質(zhì)，它們可抑制其他微生物的生長，最終可以消滅它們。然而，通常將該術(shù)語擴展至包括合成的細(xì)菌活性劑，例如磺胺類和喹諾酮類，它們并非微生物的產(chǎn)物?？股卦谖锢?、化學(xué)和藥理學(xué)特性、抗菌譜以及作用機理方面各不相同?；诨瘜W(xué)結(jié)構(gòu)和提示作用機理的最常見抗菌劑分類如下(l)抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成的藥劑；例如結(jié)構(gòu)相似的青霉素類和頭抱菌素類、不相似的藥劑如環(huán)絲氨酸、萬古霉素、桿菌肽，以及咪唑類抗真菌藥如咪康唑、酮康唑和克霉唑；(2)直接對微生物細(xì)胞膜起作用的藥劑，從而影響滲透性并導(dǎo)致胞內(nèi)化合物泄漏；它們包括洗滌劑、多粘菌素和多粘菌素E甲磺酸，以及與細(xì)胞壁固醇類結(jié)合的多烯類抗真菌藥；(3)影響30S或50S核糖體亞基功能，導(dǎo)致對蛋白質(zhì)合成的可逆抑制的藥劑；這些制菌藥物包括氯霉素、四環(huán)素類、紅霉素和克林霉素；(4)與30S核糖體亞基結(jié)合并改變蛋白質(zhì)合成(其最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡)的藥劑；它們包括氨基糖苷類；(5)影響核酸代謝的藥劑，如抑制DNA-依賴性RNA聚合酶的利福霉素(例如利福平)，和抑制回旋酶的喹諾酮類；(6)抗代謝物，包括甲氧芐啶和磺胺類，它們阻斷微生物必需的特定代謝步驟；(7)核酸類似物，如齊多夫定、更昔洛韋、阿糖腺苷和阿昔洛韋，它們抑制DNA合成必需的病毒酶，從而終止病毒復(fù)制。(參見Chambers禾口Sande,SectionIXChemotherapyofMicrobialDiseases:AntimicrobialAgents,inGoodman&Gilman，sThePharmacologicalBasisofTherapeutics,NinthEdition,page1029，1996.)抗生素在治療感染方面是否有效取決于幾個因素。要使抗生素有效，必須在感染部位獲得足夠的抗生素濃度以抑制細(xì)菌生長。然而，藥物的濃度必須保持在對人體細(xì)胞具有毒性的濃度以下。如果抑制或殺滅微生物所需的抗生素濃度大于可以獲得安全性的濃度，則認(rèn)為微生物對該抗生素具有耐藥性。細(xì)菌可能對抗菌劑產(chǎn)生耐藥性，這是因為該藥劑不能達(dá)到其靶、該藥劑失活或所述靶已改變。一些細(xì)菌產(chǎn)生保留在細(xì)胞表面上或細(xì)胞表面內(nèi)的酶而使藥物失活。其他細(xì)菌具有防止藥物進入的不透性細(xì)胞膜。一些細(xì)菌缺乏由孔蛋白構(gòu)成的水通道，親水藥劑使用該通道跨過細(xì)菌的外膜，而其他細(xì)菌缺乏藥物進入細(xì)菌細(xì)胞所需的轉(zhuǎn)運體系?？股乜剐圆≡w的出現(xiàn)導(dǎo)致對治療抗微生物疾病的新型藥物和新型方法存在持久增加的需求。B.抗病毒治療l.病毒和病毒性疾病病毒是不能由其自身再生的微生物。然而，通過感染宿主細(xì)胞，病毒利用宿主細(xì)胞的代謝機質(zhì)產(chǎn)生更多的病毒物質(zhì)。宿主細(xì)胞內(nèi)的病毒感染和復(fù)制通常導(dǎo)致疾病，無論該宿主是動物還是植物。由病毒感染導(dǎo)致的人體疾病包括例如獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)和肝炎。對該領(lǐng)域的一般性討論列于FundamentalVirology,SecondEdition,(ed.B.N.Fields,D.M.Knipe，R.M.Chanock，M.S.Hirsh，J.L.Mebiick，T.P.Monath，andB.Roizman,RavenPress,Ltd.,NewYork,N.Y.1991)。下面討論幾種病毒和它們導(dǎo)致的疾病例子。逆^^;^瘋毒逆轉(zhuǎn)錄病毒包括主要感染脊椎動物的病毒大家族。許多疾病，包括一些腫瘤的誘發(fā)與逆轉(zhuǎn)錄病毒感染有關(guān)(參見同上FundamentalVirology,pp.645-708)。逆轉(zhuǎn)錄病毒包含通過DNA中間體復(fù)制的RNA基因組。在逆轉(zhuǎn)錄病毒生命周期早期，RNA基因組通過病毒編碼的逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)被拷貝到DNA中。該酶能夠使用RNA和DNA模板，從而由感染性RNA基因組產(chǎn)生第一鏈DNA(負(fù)鏈)，使用第一鏈DNA作為模板產(chǎn)生DNA的互補第二鏈(正鏈)。為了合成這些DNA鏈，RT利用稱作脫氧核苷三磷酸(dNTP)的細(xì)胞底物。能夠?qū)⑷四孓D(zhuǎn)錄病毒分類成白血病病毒(HTLV型病毒)和免疫缺陷病毒(fflV型病毒)。HTLV感染可以導(dǎo)致一種形式的白血病。HIV感染導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)。存在兩種相關(guān)的人免疫缺陷病毒fflV-1和fflV-2。fflV-1的毒力超過HIV-2。HTLV和fflV均感染外周血液淋巴細(xì)胞(PBL)。其他動物逆轉(zhuǎn)錄病毒包括貓白血病毒(FeLV)和慢病毒屬。有毒力的FeLV感染一般導(dǎo)致貓致死性再生障礙性貧血。慢病毒屬導(dǎo)致各種神經(jīng)和免疫疾病，例如綿羊的綿羊脫髓鞘性腦白質(zhì)炎和馬的感染性貧血。感染人、動物和植物的幾種其他病毒也依賴逆轉(zhuǎn)錄酶進行復(fù)制。它們包括逆轉(zhuǎn)錄病毒如已知存在于幾個種類中的白血病病毒，包括人體HTLV-1，以及逆轉(zhuǎn)錄酶依賴性DNA病毒，例如花椰菜花葉病毒(植物病毒)。瘋毒性^^炎肝炎是人體肝的疾病。它的表現(xiàn)為肝發(fā)炎，通常由病毒感染引起，有時來自毒性劑。肝炎可以發(fā)展成肝硬化、肝癌，并最終導(dǎo)致死亡。已知幾種病毒如甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒和己型肝炎病毒可導(dǎo)致不同類型的病毒性肝炎。其中，HBV和HCV最為嚴(yán)重。乙型肝炎由DNA病毒引起。它具有50-160天的長潛伏期。它通常通過注射受感染的血液或血液衍生物或通過使用受污染的針頭、刺血針或其他器械而傳播。乙型肝炎病毒感染導(dǎo)致肝廣泛損傷。此外，慢性乙型肝炎感染與隨后發(fā)展成屬于主要死亡原因的肝細(xì)胞癌相關(guān)。丙型肝炎由RNA病毒引起。潛伏期為6-8周，其中約75%為亞臨床感染，并產(chǎn)生慢性持久性感染。很高的百分比發(fā)展成慢性肝病，從而導(dǎo)致肝硬化和可能的肝細(xì)胞癌。丙型肝炎難以治療，據(jù)估計全世界有5億人感染它(約為感染HIV的15倍)。^^;^諒毒分離自人體的皰疹病毒包括但不限于單純皰疹l型病毒("HSV-1")、單純皰疹2型病毒("HSV-2")、人巨細(xì)胞病毒("HCMV")、水痘-帶狀皰疹病毒("VZV")、EB病毒("EBV")、人6型皰疹病毒("HHV6")、單純皰疹7型病毒("HSV-7")、單純皰疹8型病毒("HSV-8")。還從馬、牛、豬(假狂犬病病毒("PSV")和豬巨細(xì)胞病毒)、雞(感染中性喉氣管炎)、黑猩猩、鳥類(馬立克氏病1型和2型皰疹病毒)、火雞和魚中分離出皰疹病毒(參見"Herpesviridae:ABriefIntroduction",Virology,SecondEdition,editedbyB.N.Fields,Chapter64,1787(19%))。單純皰疹病毒("HSV")感染一般是復(fù)發(fā)性病毒感染，其特征在于在炎癥輕度增加的基礎(chǔ)上，皮膚或粘膜上出現(xiàn)充滿澄清液體的單一或多簇小泡。單純皰疹病毒是相對大尺寸的病毒。HSV-2通常產(chǎn)生唇單純性皰疹。通常但并不總能從生殖器損害中回收HSV-2。一般來說，HSV-2通過性交傳播。由水痘-帶狀皰疹病毒(人3型皰疹病毒)導(dǎo)致的疾病包括水痘(水痘)和帶狀皰疹(帶狀皰疹)。巨細(xì)胞病毒(人5型皰疹病毒)導(dǎo)致嬰兒中的巨細(xì)胞包含體疾病。EB病毒(人4型皰疹病毒)是傳染性單核細(xì)胞增多的病原體，與伯基特淋巴瘤和鼻咽癌有關(guān)?？梢詫θ嗽斐呻y題的動物皰疹病毒包括B病毒(OldWorld猴子的皰疹病毒)和絨猴皰疹病毒(NewWorld猴子的皰疹病毒)。2.抗病毒劑抗病毒劑包括治療生殖器皰疹的藥物如阿昔洛韋(ACV)到治療AIDS的藥物如齊多夫定(AZT)和雙脫氧肌苷(DDI)。下面討論幾種抗病毒劑的例子。在許多年中，開發(fā)了抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的藥物來治療AIDS。抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物包括例如Abacavir(ABC)、Adefovir(ADV)、Amprenavir(APV)、齊多夫定(AZT)、去羥肌苷(ddl)、扎西他濱(ddC)、Stavudine(d4T)、Efavirenz(EFV)、拉米夫定(3TC)、沙奎那韋(SQV)、Indinavir(IDV)、Ritonavir(RTV)、Delavirdine(DLV)、Nelfinavir(NFV)、奈韋拉平(NVP)。然而，用抗病毒劑物治療AIDS的嘗試沒有滿足所需的成功程度。盡管一些抗病毒劑物的功效較高，但是最初體外/體內(nèi)測試的特征在于迅速產(chǎn)生耐受這些藥物的HIV-1變體。另外，使用抗病毒藥物存在潛在的毒性。需要有效而安全的方式來治療AIDS。沒有局部或全身化學(xué)治療藥物被證實對治療單純皰疹病毒有效，但可能不包括在表淺皰疹性角膜炎中使用的局部用碘苷(IDU)。對該化合物在皮膚皰疹中作用的報道是不一致的。已經(jīng)用于治療HSV的其他藥物包括三氟胸苷、阿糖胸苷(阿糖胸普，ara-A)、阿昔洛韋，其他病毒DNA合成抑制劑可能對皰疹性角膜炎有效。這些藥物抑制單純皰疹病毒的復(fù)制，可以抑制臨床表現(xiàn)。然而，單獨皰疹病毒仍然隱藏在感覺神經(jīng)節(jié)中，復(fù)發(fā)的比例在藥物治療和未治療的個體中相似。此外，己經(jīng)出現(xiàn)了一些耐藥性皰疹病毒菌株。因此，還需要開發(fā)更有效的方式來治療與單純皰疹病毒相關(guān)的疾病。目前，乙型肝炎病毒(HBV)感染的預(yù)防方法是安全有效地接種乙型肝炎疫苗。然而，接種疫苗對那些已經(jīng)感染的個體(即攜帶者和患者)無效。許多藥物已經(jīng)用于治療慢性乙型肝炎，除了干擾素，無一被證明是有效的。對于丙型肝炎，目前沒有可用的有效免疫方法，僅能通過其他預(yù)防措施如改善衛(wèi)生保健和衛(wèi)生條件并阻斷傳播途徑來控制丙型肝炎。目前，唯一可接受的慢性丙型肝炎治療是干擾素和/或利巴韋林，前者需要至少六(6)個月的治療，后者能夠抑制受感染細(xì)胞中的病毒復(fù)制，并改善一些人的肝功。然而，用干擾素、用或不用利巴韋林治療具有有限的長期功效，其響應(yīng)率約為25%。C.PHY906PHY906是傳統(tǒng)中草藥制劑，由四味分別選自四種草藥屬之一的草藥組成。所述四種草藥屬通常稱作黃苳屬(有時稱作Scute)、甘草、芍藥和棗屬果實(表3)。因此，為了制備本發(fā)明所需的草藥組合物，從表3提供的四種植物屬的每一種中選擇一種植物種。盡管提供了所列植物種的特定組合作為優(yōu)選PHY906制劑的例子，但是本發(fā)明的組合物和方法包括四種植物種的任何組合，其中植物種選自表3中四組的每一種。本發(fā)明包括這類草藥的任何這類組合，所述的草藥具有至少一種本文所述的PHY906產(chǎn)生的生物活性或所需作用。表3.能夠用于制備PHY卯6的四個屬的特定種的例子<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>這種草藥制劑已經(jīng)在亞洲長期用于治療各種疾病，如心臟擴張、腹部痙攣、發(fā)熱、頭痛、嘔吐、干嘔、口渴和粘樣糞便(HaniOka和TakiNo,1998)。將優(yōu)選的PHY906制劑列在表4中。表4.TCM制劑PHY906的草藥成分<table>complextableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>替代PHY906制劑具有黃芩屬、甘草屬、棗屬和芍藥屬草藥，其相對比例分別如下4/14:3/14:4/14:3/14。盡管提供了PHY906草藥的特定比例作為例子，但本發(fā)明的組合物和方法包括具有本文所述的所需生物活性的任何比例的四種草藥成分。目前，由SunTenLaboratories,Inc.,inIrvine,CA(臺灣SunTenPharmaceuticalCo.Ltd.的子公司)使用表4提供的制劑生產(chǎn)PHY卯6明膠膠囊和顆粒藥袋。自1983年以來，這種PHY906制劑由BrionHerbsCorporation(12020BCentraliaRoad，HawaiianGarden,CA，90716)作為食物增補劑分配和銷售。主產(chǎn)提供了對能夠用于生產(chǎn)PHY906的工藝的簡單綜述。首先，將適當(dāng)比例的草藥粗原料成分置于夾套反應(yīng)器中，在升高的恒溫下用水萃取，同時攪拌。所述配比列于由專家制劑記錄再現(xiàn)的生產(chǎn)說明。然后用120目篩從所述液體中分離固體物質(zhì)。收集濾液，然后通過減壓蒸發(fā)水而濃縮。在升溫下將濃縮的液體噴霧干燥，以得到干粉，接著處理干粉，以得到成粒的粉末。然后將這種松散的物質(zhì)配制成所需的劑型。利用工藝控制確保產(chǎn)品的均勻性和完整性。這類工藝控制包括但不限于檢査加工液體的體積、確定HPLC以建立化學(xué)指紋分析，鑒定所述原料的特性和對中間體和終產(chǎn)品的檢查和測定。為所進行的每種分析以及制備和生產(chǎn)控制的每一步驟建立可接受的質(zhì)量水平(AQL)限度。在生產(chǎn)說明記錄中，為生產(chǎn)過程所用的所有成分指定特定批號。在批量投料前復(fù)查質(zhì)量控制記錄。使用純標(biāo)記物來鑒定和控制原料以及草藥物質(zhì)的質(zhì)量。表5列出了用于制備PHY-06草藥的各原料的標(biāo)記物。表5.用于PHY卯6草藥成分的標(biāo)記物<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>D.PHY906的藥物制劑可以通過非腸道、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)皮或含服途徑給藥本發(fā)明的組合物。作為替代或同時，可以通過口服途徑給藥。所給藥的劑量將取決于受體的年齡、健康和體重、同時進行的治療類型(如果有的話)、治療頻率和所需作用的性質(zhì)?？梢詫⒈景l(fā)明用于全身給藥的藥物制劑配制成用于腸道、非腸道或局部給藥。實際上，可以同時使用所有這三種類型的制劑，以實現(xiàn)活性成分的全身給藥。本發(fā)明還提供了包含一種或多種治療藥的組合物，該組合物可治療各種類型癌癥和/或調(diào)節(jié)造血活性，例如肺結(jié)核(T.B.)、天然殺傷細(xì)胞(NK)、單核細(xì)胞和樹突細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)。盡管個體需要不同，但是確定各成分有效量的最佳范圍在現(xiàn)有技術(shù)范圍內(nèi)。除藥用活性劑外，本發(fā)明的組合物還可以包含合適的可藥用載體，包括賦形劑和助劑，它們有利于將所述活性化合物加工成制劑，該制劑能夠用于將藥物遞送至作用部位。PHY906能夠以藥物制劑的形式使用，例如為固體、半固體或液體的形式，其中包含作為活性成分的PHY906，并混有適合外用、腸道或非腸道應(yīng)用的有機或無機載體或賦形劑。可以將所述活性成分與例如常用的無毒可藥用載體混合成片劑、丸劑、膠囊、栓劑、溶液、乳劑、混懸劑和適合應(yīng)用的任何其他形式。本發(fā)明的制劑包括如下制劑，其包含滑石、水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯樹膠、明膠、甘露醇、淀粉糊、三硅酸鎂、玉米淀粉、角蛋白、膠體二氧化硅、馬鈴薯淀粉、尿素和適用于生產(chǎn)固體、半固體或液體形式制劑的其他載體，還可以使用助劑、穩(wěn)定劑、增稠劑、著色劑和香料。為了制備固體組合物如片劑或膠囊，將PHY906與藥物載體(例如常用片劑成分，如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸氫二鈣或樹膠)和其他藥用稀釋劑(例如水)混合，以形成固體預(yù)配制組合物，它包含基本上均勻的PHY906混合物或其無毒藥學(xué)可接受的鹽。當(dāng)將預(yù)配制組合物稱為基本上均勻時，是指將活性成分均勻分散在組合物中，使得可以方便地將該組合物再分成等效的單位劑型，如片劑、丸劑和膠囊。然后將這種固體預(yù)配制組合物再分成包含有效量本發(fā)明組合物的上述單位劑型類型，優(yōu)選膠囊。能夠給包含PHY906的片劑或丸劑包衣或以其他方式復(fù)合，以提供具有延長作用優(yōu)點的劑型。例如，所述片劑或丸劑能夠包括內(nèi)層劑量和外層劑量成分，后者作為前者的外部封蓋的形式。兩種成分能夠被腸溶層隔開，該層用于阻止在胃中崩解，使內(nèi)部成分完整無缺地進入十二指腸，或用于延遲釋放。能夠?qū)⒏鞣N材料用于這類腸溶層或衣料，這類材料包括許多聚合酸以及聚合酸與如下材料如蟲膠、鯨蠟醇和乙酸纖維素的混合物。可以包括PHY906用于口服或通過注射給藥的液體形式包括水溶液、適當(dāng)調(diào)味的糖漿、水或油混懸劑和包含食用油如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的調(diào)味乳劑以及酏劑和類似的藥物載體。適用于水混懸劑的分散劑或助懸劑包括合成的天然樹膠，如黃芪膠、阿拉伯膠、藻酸鹽、右旋糖酐、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、聚乙烯吡咯垸酮或明膠。用于口服給藥的液體制劑可以采用例如溶液、糖漿或混懸劑的形式，或者它們可以作為在使用前用水或其他合適載體再溶解的干燥產(chǎn)品?？梢酝ㄟ^常規(guī)方式，使用藥學(xué)可接受的添加劑制備這類液體制劑，所述添加劑為例如助懸劑(例如山梨醇糖漿、甲基纖維素或氫化的可食用脂肪)；乳化劑(例如卵磷脂或阿拉伯膠)；非水載體(例如杏仁油、油酯類或乙醇)；防腐劑(例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)；和人工或天然著色劑和/或甜味劑。對于口腔給藥，本發(fā)明的組合物可以采用以常規(guī)方式配制成的片劑或錠劑形式。還可以將PHY906配制成通過注射給藥的非腸道制劑，注射包括使用常規(guī)的導(dǎo)管插入技術(shù)或輸注。注射用制劑可以存在于單元劑型中，例如在安瓿或多劑量容器中，包含添加的防腐劑。所述組合物可以采用如下形式，例如在油或水性載體中的混懸劑、溶液或乳劑，可以包含配制劑如助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘?，所述活性成分可以是粉末形式，用于在使用前以合適的載體例如無菌無熱原的水再溶解。用于非腸道給藥的合適制劑包括可水溶形式的活性化合物的溶液，例如水溶性鹽的溶液。此外，可以將活性化合物的懸浮液作為適當(dāng)?shù)挠托宰⑸浠鞈覄┙o藥。合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油，例如芝麻油或合成的脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯。含水注射混懸劑可以包含增加所述混懸劑粘度的物質(zhì)，包括例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇和/或右旋糖酐。任選地，該混懸劑還可以包含穩(wěn)定劑。還能夠使用脂質(zhì)體包封藥劑，用于遞送至細(xì)胞中。在實踐本發(fā)明的方法時，可以單獨或組合使用PHY906，或者與其他治療劑或診斷劑組合。在某些優(yōu)選實施方案中，可以根據(jù)通常接受的醫(yī)學(xué)實踐，將本發(fā)明的化合物與用于癌癥化學(xué)治療的典型處方的其他化合物共同給藥?？梢詫⒈景l(fā)明的化合物在體內(nèi)，一般為哺乳動物如人、綿羊、馬、牛、豬、狗、貓、大鼠和小鼠體內(nèi)使用，或在體外使用。用于制備可給藥組合物的實際方法和給藥至受體所必需的調(diào)整對本領(lǐng)域技術(shù)人員將是己知或顯而易見的，詳細(xì)描述于例如Remington'sPharmaceuticalScience,17thEd.，MackPublishingCompany,Eastern,Pa.(1985)中，該文獻被引入本文作為參考。"治療指數(shù)"用于表示在比較治療作用和不良作用時，對藥物選擇性的定性描述。例如，如果將不良作用標(biāo)為r(就毒性而言)，將治療作用標(biāo)為￡，則治療指數(shù)可以定義為TD50/ED50，或者在一些其他任何響應(yīng)水平下的近似比。E.使用PHY906的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供了聯(lián)合使用PHY906和治療劑來治療各種疾病、癥狀或病癥的方法。具體地，本發(fā)明提供了聯(lián)合使用PHY906和化學(xué)治療藥物來治療疾病、癥狀或病癥的方法。優(yōu)選地，本發(fā)明提供了治療癌癥的方法，該方法包括向患者聯(lián)合給藥一種或多種癌癥化學(xué)治療藥物和PHY906。所述化學(xué)治療藥物包括但不限于CPT-ll、5-FU/LV、VP-16、L-OddC、卡培他濱、吉西他濱、奧沙利鉑、沙立度胺、多柔比星、及其組合。更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了治療結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌的方法，該方法包括聯(lián)合給藥CPT-11/FU/LV、奧沙利鉑/FU/LV或奧沙利鉑/吉西他濱和PHY906。本發(fā)明關(guān)注聯(lián)合使用PHY906和抗病毒劑來治療疾病、癥狀或病癥的方法。優(yōu)選地，本發(fā)明提供了治療與病毒感染相關(guān)的疾病的方法，該方法包括向患者聯(lián)合給藥一種或多種抗病毒劑和PHY906。更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了治療AIDS的方法，該方法包括聯(lián)合給藥一種或多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥和PHY906。甚至更優(yōu)選地，所述抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥選自AZT、D4T、DDC、3TC和DDI。最優(yōu)選地，向患者給藥包括三種抗病毒劑和PHY906的組合。三種抗病毒劑的優(yōu)選組合包括但不限于1)D4T、3TC和蛋白酶抑制劑；2)AZT、3TC和蛋白酶抑制劑；和3)AZT、DDI和蛋白酶抑制劑。用于治療HIV的優(yōu)選蛋白酶抑制劑包括但不限于奈非那韋、茚地那韋、沙奎那韋和利托那韋。在本發(fā)明的一個方面，向細(xì)胞系如癌癥或癌細(xì)胞系和HIV細(xì)胞系給藥PHY卯6，以評價PHY906對不同細(xì)胞系的毒性。優(yōu)選地，所述癌癥或癌細(xì)胞系包括但不限于Jurkat、KB、HepG2、HepG1.6、T-細(xì)胞淋巴瘤(CEM)、結(jié)腸26、結(jié)腸38、HCT116、PANC01、PANC02、HPAC，所述HIV細(xì)胞系包括但不限于H9細(xì)胞和MT-2細(xì)胞。在本發(fā)明的另一個方面，向動物聯(lián)合給藥PHY906與一種或多種化學(xué)治療藥物或抗病毒劑，以確定PHY906是否可以有效地提高所述活性劑的治療指數(shù)和正經(jīng)歷化學(xué)治療的或抗病毒治療的動物的生活質(zhì)量。優(yōu)選地，所述動物是哺乳動物。更優(yōu)選地，所述哺乳動物是人。動物可能是用于特定癌癥或病毒性疾病的動物模型。此外，動物可能具有缺陷型免疫系統(tǒng)。這類動物模型在本領(lǐng)域中是公知的。已經(jīng)將天然免疫缺陷的小鼠用于研究免疫系統(tǒng)、癌癥和感染性疾病，包括獲得性免疫缺陷綜合征或AIDS。例如，裸(NU)鼠是無胸腺的，所以不能發(fā)生T細(xì)胞分化和成熟。作為異種移植、尤其是人腫瘤宿主和抗癌藥的測試，裸鼠已經(jīng)被使用了許多年。嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷綜合征(SCID)小鼠表現(xiàn)出TCR(T細(xì)胞受體)和免疫球蛋白基因均為有缺陷的重排，表現(xiàn)出嚴(yán)重的免疫缺陷。beige(BG)小鼠攜帶有功能性天然殺傷細(xì)胞缺陷，而X-連接的免疫缺陷(XID)小鼠在產(chǎn)生B細(xì)胞方面存在缺陷。此外，已經(jīng)在各種品系中進行了雜交，以產(chǎn)生帶有更廣泛免疫缺陷表型的品系(例如BG/NU和BG/NU/XID)?？梢钥紤]將其他實驗動物作為用于本發(fā)明的實驗室動物候選者，它們幾乎沒有或沒有自身免疫系統(tǒng)，或者己經(jīng)用藥物或放射處理，或者是通過傳統(tǒng)遺傳發(fā)育或遺傳工程產(chǎn)生的，以具有受抑制的免疫系統(tǒng)、弱化的免疫系統(tǒng)或變性的免疫系統(tǒng)或者根本沒有免疫系統(tǒng)，例如SCID馬和其他SCID動物以及甚至潛在AIDS感染的動物，其中在動物的免疫系統(tǒng)被破壞或失活后，AIDS已經(jīng)被抑制((PerrymanL.E.，McGuire，T.C.，Torbeck，R.L.，andMagnuson,N.S.,Clin.Immunol.Immunopath.,23(l):1-9,1982)。用于研究經(jīng)胎盤或產(chǎn)期抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療的鼠模型是公知的(Sharpe等人(1987)Science236:167卜1674;Sharpe等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)85:9792-9796;Sharpe等人(1989)J.Virol.63:1049-1053)。此外，已經(jīng)確定應(yīng)用獼猴作為哺乳動物模型，來研究由猿猴巨細(xì)胞病毒、Venezuelan和西方馬腦炎病毒、以及腮腺炎病毒導(dǎo)致的非逆轉(zhuǎn)錄病毒胎兒感染的過程(London等人(1986)Teratology33:323-331;London等人(1977)Teratology16:285-296;London等人(1982)Teratology25:71-79;London等人(1979)J.Inf.Diseases139:324-328)。用猿猴免疫缺陷病毒(SIV)感染獼猴(Macacamulatta)近似地模擬了人中的HIV-1感染。HIV-1和SIV都是具有相似分子結(jié)構(gòu)的慢病毒屬病毒(Chakrabarti等人(1987)Nature328:543-547)，均引起免疫缺陷，從而導(dǎo)致機會致病菌感染以及中樞神經(jīng)體系損害(Letvin等人(1985)Science230:71-73)。己經(jīng)報道將所產(chǎn)生的動物模型用于研究AIDS和骨髓細(xì)胞分化，其中在將人胎兒肝、胸腺和淋巴節(jié)共植入SCID小鼠以形成SCID/nu小鼠時，人淋巴細(xì)胞短暫增殖(McCune等人(1988)Science241:1632-1686)。這些小鼠中的人免疫組織對人免疫缺陷病毒(fflV)感染敏感(Namikawa等人(1988)Science242:1684-1686)，近來已經(jīng)將該模型用于測試AZT在延緩AIDS病毒復(fù)制中的效力。美國專利6,184,436公開了用作AIDS小動物模型的轉(zhuǎn)基因小鼠。該小鼠包括轉(zhuǎn)基因，轉(zhuǎn)基因包括在與人CD4啟動子的可操作連接中編碼HIV-1的DNA序列，位于小鼠CD4基因增強子的側(cè)翼。該小鼠發(fā)生了嚴(yán)重的AIDS疾病并導(dǎo)致早期死亡。在優(yōu)選實施方案中，對于用一種或多種化學(xué)治療藥物或抗病毒劑與PHY906聯(lián)合治療的動物，評價其體重下降和存活率，并與僅給藥所述一種或多種化學(xué)治療藥物或抗病毒劑的對照動物比較。還可能評價PHY906對抗腫瘤或抗病毒活性的作用，以確定PHY906的功效。具體地，可能將PHY906評價為抗病毒治療如AIDS的調(diào)節(jié)劑。能夠使用上述用于AIDS的任何動物模型。第一步包括通過評價動物的體重下降，確定對健康動物給藥的抗病毒劑或抗病毒劑組合的最大耐受劑量。第二步包括對診斷為AIDS的動物給藥抗病毒劑或抗病毒劑與PHY906的組合。評價動物的體重，與在治療過程中不接受PHY906的對照動物進行比較。此外，通過測定紅細(xì)胞計數(shù)或血小板計數(shù)，評價PHY906與抗病毒劑或多種抗病毒劑的組合的血液學(xué)毒性。評價動物的白細(xì)胞計數(shù)，以確定PHY906與抗病毒劑或多種抗病毒劑的組合在治療AIDS動物中的效力。將各試驗的結(jié)果與不給藥PHY906的對照動物進行比較。F.用于聯(lián)合治療的制劑本發(fā)明提供了包括組合物的聯(lián)合治療，所述組合物包含一種或多種化合物和PHY906，用于治療癌癥，尤其是結(jié)腸直腸癌、胰腺癌和肝細(xì)胞癌。優(yōu)選地，所述化合物為化學(xué)治療藥物，例如CPT-ll、5-FU、LV、VP-16、L-OddC、卡培他濱、吉西他濱、沙立度胺、多柔比星和奧沙利鉑。所述化合物也可以是抗病毒劑如AZT、DDI、3TC和D4T。聯(lián)合治療可以將所述化合物與PHY906作為組合物一起給藥，或者與PHY906的給藥分離地給藥所述化合物?？梢詥为毷褂帽景l(fā)明的組合物或與另一種治療(例如手術(shù)、放射、生物學(xué)治療)組合進行治療。能夠獨立控制每種組合物成分的給藥劑量和頻率。例如，一種成分可以每天口服給藥三次，而第二種成分可以每天靜脈內(nèi)給藥一次。也可以將所述化合物和PHY906配制到一起，從而一次給藥遞送兩種成分。制劑和劑量如下所述。藥激資合激游衝激可以通過任何合適的手段給藥組合物的每種化學(xué)治療藥物和PHY906，所述手段導(dǎo)致化合物的濃度、連同其他成分在到達(dá)耙區(qū)域時是特別抗腫瘤的。可以將任何適當(dāng)量的化學(xué)治療藥物包括在任何合適的載體物質(zhì)中，.通常含量為組合物總重的l-95wt%?？梢允顾峁┑慕M合物劑型適合口服、非腸道(例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi))、直腸、皮膚、鼻內(nèi)、陰道、吸入、皮膚(貼片)或眼科給藥途徑。因此，組合物的形式可以為例如片劑、膠囊、丸劑、散劑、顆粒劑、混懸劑、乳劑、溶液、包括水凝膠的凝膠劑、糊劑、軟膏劑、乳膏、橡皮膏、drenches、遞藥裝置、栓劑、灌腸劑、可注射劑、植入物、噴霧或氣霧劑?？梢愿鶕?jù)常規(guī)藥學(xué)實踐配制藥物組合物(參見例如Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,(19thed.)ed.A.R.Gennaro,1995,MackPublishingCompany,Easton，Pa.andEncyclopediaofPharmaceuticalTechnology,eds.J.S'warbrickandJ.C.Boyl叫1988-1999,MarcelDekker，NewYork)?？梢詫⒈景l(fā)明的藥物組合物配制成基本上就在給藥時或在給藥后的任何預(yù)定時間或時間段釋放活性化合物。后一類組合物通常被稱為控釋制劑，其包括(i)隨著時間段延長，在體內(nèi)產(chǎn)生基本上恒定的藥物濃度的制劑；(ii)在預(yù)定的遲滯時間后，隨著時間段延長，在體內(nèi)產(chǎn)生基本上恒定的藥物濃度的制劑；(iii)通過在體內(nèi)保持相對恒定有效的藥物水平，同時使與活性藥物血漿水平波動(鋸齒動力學(xué)模型)相關(guān)的不良副作用最小化，從而在預(yù)定的時間段內(nèi)維持藥物作用的制劑；(iv)通過例如將控釋組合物空間安置到患病組組織或器官的附近或內(nèi)部，從而定位藥物作用的制劑；和(V)通過使用載體或化學(xué)衍生物將藥物遞送到特定的靶細(xì)胞類型，從而靶向藥物作用的制劑。當(dāng)化合物單獨或與PHY906組合時，給藥控釋制劑形式的化合物是特別優(yōu)選的，這樣具有(i)窄治療指數(shù)(即導(dǎo)致有害副作用或毒性反應(yīng)的血漿濃度與導(dǎo)致治療作用的血漿濃度之間的差值很小；通常，將治療指數(shù)TI定義為半數(shù)致死劑量(LD5o)與半數(shù)有效劑量(ED^的比率)；(ii)在胃腸道中具有窄吸收窗；或(iii)非常短的生物學(xué)半衰期，從而為了將血漿水平維持在治療水平，需要在一天中頻繁給藥。為了獲得其中釋放速率超過所述化合物代謝速率的控釋制劑，可能應(yīng)用許多策略中的任何一種。在一個實施例中，通過適當(dāng)選擇各種制劑參數(shù)和成分，包括例如各種類型的控釋組合物和衣料，來獲得控釋。因此，將藥物與適當(dāng)?shù)馁x形劑配制到藥物組合物中，在給藥至有機體后，該藥物組合物能以受控的方式釋放活性物質(zhì)。例子包括單個或多單元的片劑或膠囊組合物、油溶液、懸浮液、乳劑、微囊、微球、納米粒、貼片和脂質(zhì)體。Ifnjr游腐沐^/歪用于口服的包含PHY卯6和一種或多種化合物的組合物制劑包括片劑，片劑中包含活性成分，并混有無毒藥學(xué)可接受的賦形劑。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑或填充劑(例如蔗糖、山梨醇、糖、甘露醇、微晶纖維素、淀粉，包括馬鈴薯淀粉、碳酸鈣、氯化鈉、乳糖、磷酸鈣、硫酸鈣或磷酸鈉)；造粒劑和崩解劑(例如纖維素衍生物，包括微晶纖維素、淀粉，包括馬鈴薯淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、藻酸鹽或海藻酸)；粘合劑(例如蔗糖、葡萄糖、甘露醇、阿拉伯膠、海藻酸、藻酸鈉、明膠、淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、硅酸鎂鋁、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；和潤滑劑、助流劑和抗粘劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、硬脂酸、硅石、氫化植物油或滑石)。其他藥學(xué)可接受的賦形劑可能是著色劑、調(diào)味劑、增塑劑、保濕劑、緩沖劑等。或者，可以將所述化合物獨立于PHY906配制成供口服使用。片劑可以是未包衣的，或者可以通過已知的技術(shù)將它們包衣，以任選地延遲在胃腸道中的崩解和吸收，從而在更長時間內(nèi)提供緩釋作用。衣料可以用于以預(yù)定的模式釋放活性藥物(例如為了獲得控釋制劑)，或者它可以用于不釋放活性藥物，直到通過胃以后(腸溶包衣)。衣料可以是糖衣、薄膜衣(例如，基于羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、甲基羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素、丙烯酸脂共聚物、聚乙二醇和減聚乙烯吡咯烷酮)，或者腸溶衣(例如，基于甲基丙烯酸共聚物、醋酞纖維素、羥丙基甲基纖維素酞酸酯、羥丙基甲基纖維素乙酸琥珀酸酯、聚醋酸乙烯鄰苯二甲酸酯、蟲膠和/或乙基纖維素)。此外，可以使用延時材料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。固體片劑組合物可以包括衣料，用于保護組合物避免有害的化學(xué)變化(例如，在釋放活性藥物前發(fā)生化學(xué)降解)?？梢园凑张c上面EncyclopediaofPharmaceuticalTechnology中所述類似的方式，將衣料應(yīng)用到固體劑型上。化合物和PHY906可以一起混合在片劑中，或者可以被分開。在一個實施例中，將第一藥物包含在片劑的內(nèi)部，而第二藥物在外部，從而使大部分第二藥物在釋放第一藥物前被釋放。用于口服使用的制劑也可以作為咀嚼片出現(xiàn)，或者作為硬明膠膠囊，其中將活性成分與惰性固體稀釋劑(例如馬鈴薯淀粉、乳糖、微晶纖維素、碳酸鈣、碳酸鈣或高嶺土)混合，或者作為軟明膠膠囊，其中活性成分與水或油媒介混合，例如花生油、液體石蠟或橄欖油?？梢允褂蒙厦嫫瑒┖湍z囊項下所述的成分，使用例如混合器、流化床裝置或噴霧干燥裝置，以常規(guī)方式制備散劑和顆粒劑。控釋/7贗淑壟々只包含所述化合物或與PHY906組合的口服使用控釋組合物可以例如被構(gòu)造成通過控制活性藥物的溶出度和/或擴散來釋放活性藥物。通過將化合物的片劑、膠囊、丸劑或顆粒制劑進行適當(dāng)包衣，或者通過將所述化合物摻入合適的骨架中，能夠獲得溶出度或擴散控釋。控釋衣料可以包括上述一種或多種衣料物質(zhì)，和/或例如蟲膠、蜂蠟、glycowax、蓖麻蠟、巴西棕櫚蠟、硬脂醇、單硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、棕櫚硬脂酸甘油酯、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、dl-聚乳酸、醋酸-丁酸纖維素、聚氯乙烯、聚醋酸乙烯、乙烯基吡咯垸酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸2-羥基酯、甲基丙烯酸酯水凝膠、1,3-丁二醇、甲基丙烯酸乙二酯和/或聚乙二醇。在控釋骨架制劑中，骨架材料還可以包括例如水化的甲基纖維素、巴西棕櫚蠟和硬脂醇、卡波沬934、硅酮、三硬脂酸甘油酯、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯、聚氯乙烯、聚乙烯和/或鹵化碳氟化合物。包含一種或多種請求保護的化合物組合的控釋組合物還可以是漂浮片或膠囊(即在口服后，片劑或膠囊在胃內(nèi)容物的頂部漂浮特定的時間段)。通過將藥物與賦形劑的混合物和20-75%w/w水狀膠體如羥乙基纖維素、羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素造粒，能夠制備化合物的漂浮片制劑。然后能夠?qū)⑺妙w粒壓制成片劑。在與胃液接觸后，片劑圍繞其表面形成基本上不透水的凝膠屏障。該凝膠屏障參與將密度保持為小于一，從而允許片劑在胃液中保持漂浮。If/7J^^^^"游,沐,.可以將單獨的化合物或與PHY906的組合配制成用于口服給藥的液體。適合通過添加水來制備水懸浮液的散劑、可分散散劑或顆粒劑是用于口服給藥的方便劑型。作為混懸劑的制劑所提供的活性成分與分散劑或潤濕劑、助懸劑和一種或多種防腐劑摻混在一起。合適的分散劑或潤濕劑為例如天然磷脂(例如卵磷脂或氧化乙烯與脂肪酸的縮合產(chǎn)物、長鏈脂肪醇或源自脂肪酸的部分酯)和己糖醇或己糖醇酐(例如聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨醇單油酸酯、聚氧乙烯山梨坦單油酸酯等)。合適的助懸劑為例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、藻酸鈉等。#厲^蘊合激.*也可以在劑型、制劑中，通過注射、輸液或植入(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下等)，或通過包含常規(guī)無毒可藥物載體和輔劑的合適遞藥裝置或植入物，非腸道地給藥只包括化合物或與PHY906組合的本發(fā)明藥物組合物。這些組合物的制劑和制品對藥物制劑領(lǐng)域的技術(shù)人員是公知的。具體的制劑能夠在上述Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy中找至廿。用于非腸道使用的組合物可以存在于單元劑型(例如單劑量安瓿)中，或存在于包含幾個劑量的小瓶中，其中可以添加合適的防腐劑(參見下面)。組合物可以是溶液、混懸劑、乳劑、輸液裝置或用于植入的遞藥裝置的形式，或者它可以作為在使用前用水或另一種合適載體溶解的干粉。除了活性藥物，所述組合物還可以包括合適的非腸道可接受的載體和/或賦形劑?？梢詫⑺龌衔飺饺胛⑶?、微囊、納米粒、脂質(zhì)體等中，用于控釋。此外，所述組合物可以包含助懸劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑和/或分散劑。如上所述，本發(fā)明的藥物組合物可以是適于無菌注射的形式。要制備這樣的組合物，將合適的化合物溶解或懸浮在非腸道可接受的液體載體中。在可接受的載體和溶劑中，可以使用的是水、通過添加適當(dāng)量的鹽酸調(diào)整至合適pH的水、氫氧化鈉或合適的緩沖劑、1,3-丁二醇、林格氏液和等張氯化鈉溶液。水性制劑還可以包含一種或多種防腐劑(例如對羥苯甲酸甲酯、對羥苯甲酸乙酯或?qū)αu苯甲酸正丙酯)。當(dāng)所述化合物之一僅難溶或微溶于水時，可能添加溶出度增強劑或增溶齊U，或者溶劑可以包含10-60%w/w丙二醇等。^^獰#應(yīng)_^資合激.*控釋非腸道組合物可以是水懸浮液、微球、微囊、磁性微球、油溶液、油懸浮液或乳劑的形式。或者，可以將所述化合物摻入可生物相容的載體、脂質(zhì)體、納米粒、植入物或輸液裝置中。用于制備微球和/或微囊的材料為例如可生物降解/可生物溶蝕的聚合物，例如羥乙酸乳酸聚酯、聚-(氰基丙烯酸異丁酯)、聚(2-羥乙基-L-谷氨酸)和聚(乳酸)。當(dāng)配制控釋非腸道制劑時，可以使用的可生物相容載體為碳水化合物(如右旋糖酐)、蛋白質(zhì)(如白蛋白)、脂蛋白或抗體。用于植入物中的材料可能是不可生物降解的(如聚二甲基硅氧烷)或可生物降解的(如聚(己內(nèi)酯)、聚(乳酸)、聚(乙醇酸)或聚(原酸酯))。^"應(yīng)資合欽.'可以將單獨的化合物或與PHY906組合配制用于直腸給藥。對于直腸應(yīng)用，組合物的合適劑型包括栓劑(乳劑或混懸劑類型)和直腸明膠膠囊(溶液或混懸劑)。在典型的栓劑制劑中，將活性藥物與適當(dāng)?shù)目伤幱盟▌┗|(zhì)如可可脂、酯化脂肪酸、甘油化明膠、以及各種可溶性或可分散基質(zhì)如聚乙二醇和聚氧乙烯山梨坦脂肪酸酯組合?？梢該饺敫鞣N添加劑、增強劑或表面活性劑。席f級乂^^逮合欽，可以將單獨的化合物或與PHY906組合配制成用于吸入。對于通過吸入給藥，典型的劑型包括鼻腔噴霧和氣霧劑。在典型的鼻腔制劑中，將活性成分溶解或分散在合適的載體中。以藥物制劑領(lǐng)域技術(shù)人員理解的方式，根據(jù)常規(guī)藥物實踐選擇藥學(xué)可接受的載體和賦形劑(以及組合物所含的其他可藥用材料，如稀釋劑、增強劑、調(diào)味劑和防腐劑)。經(jīng)皮^7^^T邀合激；可以將單獨的化合物或與PHY906組合配制成用于經(jīng)皮和局部給藥。所述藥物組合物還可以局部給藥在皮膚上供經(jīng)皮吸收，其劑型或制劑包含常規(guī)的無毒可藥用載體和賦形劑，包括微球和脂質(zhì)體。所述制劑包括乳膏、軟膏劑、洗劑、擦劑、凝膠、水凝膠、溶液、混懸劑、棒、噴霧劑、糊劑、橡皮膏和其他各類透皮遞藥體系。藥學(xué)可接受的載體或賦形劑可以包括乳化劑、抗氧化劑、緩沖劑、防腐劑、保濕劑、促滲劑、螯合劑、凝膠成型劑、軟膏劑基質(zhì)、香料和皮膚保護劑。乳化劑的例子是天然樹膠(例如阿拉伯樹脂或黃芪樹膠)和天然磷脂(例如大豆卵磷脂和山梨坦單油酸衍生物)?？寡趸瘎┑睦邮嵌×u茴醚(BHA)、抗壞血酸及其衍生物、生育酚及其衍生物、丁羥茴醚和半胱氨酸。防腐劑的例子是對羥基苯甲酸甲酯類，例如對羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯和苯扎氯銨。保濕劑的例子是甘油、丙二醇、山梨醇和尿素。促滲劑的例子是是丙二醇、DMSO、三乙醇胺、N，N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、2-吡咯烷酮及其衍生物、四氫糠醇和Azone.TM.。螯合劑的例子為EDTA鈉、檸檬酸和磷酸。凝膠成型劑的例子是Carbopol.TM.、纖維素衍生物、斑脫土、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯烷酮。軟膏劑基質(zhì)的例子是蜂蠟、石蠟、棕櫚酸十六酯、植物油、脂肪酸的山梨坦酯(Span)、聚乙二醇和脂肪酸山梨坦酯與氧化乙烯之間的縮合產(chǎn)物(例如聚氧乙烯山梨坦單油酸酯(Tween))。關(guān)于局部給藥，還可以將上述用于局部給藥在皮膚上的藥物組合物使用到待治療身體部分的上面或附近。組合物可以用于直接給藥，或者用于引入身體的相關(guān)孔中(例如直腸、尿道、陰道或口腔)。可以通過特定的遞藥裝置給藥組合物，如敷料或者糊劑、襯墊、紗布、帶或其他合適的柔韌材料形式。j^釋經(jīng)2^^7^^T資合激.'可以將單獨的化合物或與PHY906組合配制成用于控釋經(jīng)皮和局部給藥。有幾種方式控制藥物釋放和透皮滲透的速率，包括膜介導(dǎo)的體系、粘合劑擴散控制體系、骨架分散型體系和微貯庫體系。通過使用上述方法的合適混合，可以獲得控釋的經(jīng)皮和/或局部組合物。在膜介導(dǎo)的體系中，活性藥物存在于貯庫內(nèi)，C庫完全包封在由不可滲透藥物的薄層如金屬塑料薄層模制的淺室中，和控速聚合物膜如微孔聚合物膜或無孔聚合物膜(例如乙烯-醋酸乙烯酯共聚物)中。僅允許活性化合物通過控速聚合物膜釋放。在藥物貯庫中，活性藥物被分散在固體聚合物骨架中，或者懸浮在粘性液體媒介如硅酮液體中。在聚合物膜的外表面，應(yīng)用一薄層粘性聚合物，以使透皮體系與皮膚表面密切接觸。粘性聚合物優(yōu)選為與活性藥物相容的低變應(yīng)原聚合物。在粘合劑擴散控制體系中，通過將活性藥物直接分散在粘性聚合物中，然后將包含活性藥物的粘合劑鋪展到基本上不滲透藥物的金屬塑料背襯平片上，以形成藥物貯庫薄層，來形成活性藥物的貯庫。骨架分散型體系的特征在于，通過將活性藥物基本上均勻地分散在親水或親脂聚合物骨架上，然后將含藥聚合物模制到具有基本上充分限定表面積和厚度的圓盤中，來形成活性藥物的貯庫。將粘性聚合物沿著圓周鋪展，以形成圍繞圓盤的粘合劑帶。在微貯庫體系中，通過首先將藥物固體懸浮在水溶性聚合物的水溶液中，然后將藥物懸浮液分散在親脂聚合物中，以形成藥物貯庫的多個顯微球，來形成活性物質(zhì)的貯庫。^/量每種化合物的劑量取決于幾個因素，包括給藥方法、待治療的疾病、疾病的嚴(yán)重性、要治療還是要預(yù)防疾病和待治療者的年齡、體重和健康?；衔锏膬?yōu)選給藥量為約0.1-30mg/kg體重/天，更優(yōu)選的量為約0.5-15mg/kg體重/天。如上所述，可以以片劑、膠囊、酏劑或糖漿的形式口服所述化合物，或者以栓劑的形式直腸給藥所述化合物?；衔锏姆悄c道給藥適合以鹽水溶液的形式或?qū)⒒衔飺饺胫|(zhì)體中進行。當(dāng)化合物本身的溶解性不足以溶解時，可能應(yīng)用增溶劑如乙醇。根據(jù)上述一般性討論，下列特定的實施例僅是說明性的，并非用于限定本發(fā)明的范圍。其他類型和特定的構(gòu)造對本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見的。實施例材料和方法CPT-11(伊立替康，Camptosar)購自Pharmacia&UpjohnCo(Kalamazoo,MI)。5-氟尿嘧啶(5-FU或FU)、亞葉酸(亞葉酸，LV)、洛哌丁胺、大腸桿菌P-葡糖醛酸糖苷酶、亞甲藍(lán)和酚酞葡糖苷酸購自Sigma,Co.(St.Louis，MO)。在YaleUniversityCanCerCenter按照標(biāo)準(zhǔn)步驟制備MEME培養(yǎng)基。RPMI1640培養(yǎng)基購自JRHCo.?？敲顾?、胰酶制劑和錐蟲藍(lán)購自GibcoCo.(GrandIsland,NY)。PHY906、PHY-915、PHY-14ST和PHY-15ST植物制劑由SunTenPharmaceuticalInc.(臺北，臺灣)提供。以前稱作TJ-14ST的PHY-14ST由七種草藥組成半夏&/77afa5/"e".)、黃吝、黃連(Co/^sc/z/"e;w/sFra"cA)、甘草、大棗、人參(尸a"axg/似e"gC)和姜。以前稱作TJ-15ST的PHY-15ST由野葛(尸weran'a/o6afaOZwz')、黃連、黃芩和甘草組成。PHY-915由五種草藥組成人參、姜、白術(shù)、防風(fēng)和桔。A于粉劍備享藥遠(yuǎn)教欽.將一克(A)包含50%(研究批次)或10%(臨床批次)淀粉賦形劑的PHY906干粉或(B)包含未知量賦形劑的PHY-915、PHY-14ST或PHY-15ST草藥制劑添加到10ml80°CH20中，在8CTC下保溫30min。通過離心(2060g，15min)從殘渣中分離上清液，立即使用。基于粗草藥水提取物的干重，計算PHY906上清液的濃度為50mg/ml(來自研究批次)或90mg/ml(來自臨床批次)。基于粉末的干重，將其他草藥制劑的濃度看作100mg/ml。使用0.45pm無菌Acrodisc過濾器(GelmanSciences)滅菌上清液，用于組織培養(yǎng)中的生長抑制研究。嚴(yán)雌性BDF-1小鼠(4-6周齡)購自CharlesRiverLaboratories(Wilmington,MA)。雄性無胸腺NCr裸鼠(4周齡)購自TaconicFarms(Garmantown,NY)。將重量為16g至20g的這兩種小鼠用于本研究。分別將鼠結(jié)腸38(l-2xl(^個細(xì)胞的0.1mlPBS溶液)或人類HepG2細(xì)胞(l-2xl(^個細(xì)胞的0.1mlPBS溶液)皮下移植到BDF1或NCr無胸腺裸鼠中。每天用滑動卡鉗測量腫瘤的長度和寬度。按照下列公式估算腫瘤重量(PizzornoG，WiegandR,LentzS，等人，CancerRes.52:1660-1665(1992)):腫瘤重量(mg)-長度(mm)X寬度(mm)2/2。在10至14天后，選擇腫瘤重量為150-200mg的小鼠(五只動物/組)用于藥物研究(GuoX,Lemer-TungM,ChenHX，等人，BiochemPharmacol49:1111-1116(1995))。當(dāng)腫瘤尺寸達(dá)到體重的10%時，處死小鼠。單獨或與抗癌化學(xué)治療藥物一起口服給藥PHY906。評價PHY906對所述活性劑的抗腫瘤功效的作用和對其毒性的減輕。在給藥選擇劑量的PHY906后30min，腹膜內(nèi)(i.p.)給藥CPT-ll。如下給藥FU/LV聯(lián)合治療的方案(A)單獨用FU/LV治療首次劑量的LV(50mg/kg，i.p.)，1小時后是二次劑量的LV(50mg/kg;i.p.)，然后即刻給藥FU(IOOmg/kg，i.P.);(B)用FU/LV+PHY906治療首次劑量的LV(50mg/kg，i.p.)，30min后給藥PHY906(500mg/kg，口服)，30min后給藥二次劑量的LV(50mg/kg，i.p.)，然后即刻給藥FU劑量(100mg/kg，i.p.)。如下給藥CPT-11/FU/LV三聯(lián)藥物組合(A)組僅用CPT-11/FU/LV:小鼠服用首次劑量的LV(50mg/kg，i.p.)，一時后給藥CPT-ll,然后即刻給藥LV(50mg/kg，i.p.)和FU(100mg/kg，i.p.);(B)組為CPT-11/FU/LV+PHY906:小鼠服用首次劑量的LV(50mg/kg，i.p.)，30min后給藥PHY906(500mg/kg,口服)。接著在第0天，在給藥PHY906后30min，用CPT-ll、隨后立即用LV(50mg/kg，i.p.)禾口FU(IOOmg/kg，i.p.)治療小鼠。將治療的第1天定為第0天。從第0天開始每天口服給藥兩次PHY906(10am和3pm)，持續(xù)4天或8天。對于對照組，給小鼠服用載體i.p.給藥PBS或p.o.給藥&0(口服給藥)。每天監(jiān)測動物的死亡率、體重下降和腫瘤尺寸。虛一智蘑7￥"數(shù)，在第O、3、6、9和12天，用微量毛細(xì)管從小鼠取血(20pl)。然后用生理鹽水(0.85%氯化鈉)將血液稀釋到200nl。通過BAKERSYSTEM9100HEMATOLOGYANALYZER(BiochemImmunoSystemsInc.,Allentown,PA18103-9562)對WBC、RBC和血小板進行計數(shù)o潘應(yīng)系浙潛養(yǎng)條伴.*人類HepG2(肝細(xì)胞癌)、HCT116(結(jié)腸癌)、CEM(白血病)和KB(口腔表皮樣瘤)細(xì)胞系和鼠結(jié)腸38細(xì)胞系購自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(Rockville，MD)。通常使HepG2細(xì)胞系生長在補充有10。/。胎牛血清(FBS)和100pg/ml卡那霉素的MEME培養(yǎng)基中。使結(jié)腸38、HCT116、KB和CEM細(xì)胞系生長在包含10%FBS和100pg/ml卡那霉素的RPMI1640培養(yǎng)基中。在37'C和5%C02:95%空氣的濕潤氣氛下培育細(xì)胞。^71或^、廣^"^^^系^游-智應(yīng)毒絲.*使用亞甲藍(lán)吸收試驗測定細(xì)胞生長抑制。在第0天，將癌細(xì)胞(lxl0"接種到24-孔平板中，在具有10%FBS和100pg/ml卡那霉素的lmlMEME培養(yǎng)基或RPMI1640內(nèi)。在第1天，將新鮮制備和無菌的PHY906提取物以不同濃度加入到細(xì)胞中，在37。C培育3天。然后除去培養(yǎng)基，用0.3ml0.5。/。(w/v)亞甲藍(lán)溶液(50%乙醇溶液)將細(xì)胞層染色30min。用自來水將平板洗滌3次，干燥，用1ml"/。肌氨酰溶液(PBS溶液)將細(xì)胞層細(xì)胞溶解。在Elx800動態(tài)微量平板讀數(shù)器(Bio-TekInstruments,Inc.)上，在595nm處讀取溶解產(chǎn)物的溶液。實施例1:PHY906對不同細(xì)胞系的毒性評價簡單地說，將一克各批次PHY906加入到10ml水中(lmg/ml)。就各批次的特性而言，參見表6。表6.PHY906的批次特性<table>tableseeoriginaldocumentpage69</column></row><table>在離心后收集上清液，通過0.22pm過濾器過濾。將四種細(xì)胞類型用于測試各批次PHY906的生物學(xué)作用a)KB細(xì)胞(ATCC號為CCL-17);b)HepG2細(xì)胞(ATCC號為HB-8065);c)T-細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系(CEM細(xì)胞)；d)結(jié)腸38;和e)HCT116(ATCC號為CCL-247)。在第0天，將癌細(xì)胞(lxl(^個)接種到24-孔平板中，在包含10%FBS和100嗎/ml卡那霉素的lmlMEME培養(yǎng)基或RPMI1640內(nèi)。24小時后，將PHY906提取物以不同濃度添加到細(xì)胞中，在37t下培育3天。然后除去培養(yǎng)基，用0.3ml0.5。/。(w/v)亞甲藍(lán)溶液(50。/。EtOH溶液)將細(xì)胞層染色30min。用自來水將平板洗滌3次，干燥，用1ml1%肌氨酰溶液(PBS溶液)將細(xì)胞層細(xì)胞溶解。在Elx800動態(tài)微量平板讀數(shù)器(Bio-TecInstruments,Inc.)上，在595nrn處讀取溶解產(chǎn)物的溶液。使用人T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系(CEM)進行細(xì)胞毒性研究。使CEM細(xì)胞(5xl04個)生長在包含20%展示胎牛血清的lmlRPMI1640培養(yǎng)基中。在第0天添加PHY906提取物。在添加PHY906后3天，評價細(xì)胞的生長情況。使用血細(xì)胞計數(shù)器評估細(xì)胞數(shù)量。將使用兩(2)批樣品進行的試驗結(jié)果列在表7中?；谶@些數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)PHY906來源A和B對KB、CEM和HCT116細(xì)胞具有相對小的毒性，而對結(jié)腸38和HepG2細(xì)胞具有明顯較大的毒性作用(參見表7)。在實施例ll的表lO中顯示了相似的結(jié)果。表7.傳統(tǒng)草藥制劑在不同細(xì)胞系中的細(xì)胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage70</column></row><table>基于草藥制劑的干重。b包含50%賦形劑的不同研究批次的PHY906。實施例2:CPT-ll對BDF-1和裸鼠的劑量測定監(jiān)測動物體重下降，作為由抗癌化學(xué)治療藥物導(dǎo)致的毒性指征。使用六種不同的劑量研究CPT-ll對非荷瘤瘤BDF-小鼠體重下降的作用100、200、300、400、600或800mg/kg體重，從而確定小鼠中的最大耐受劑量。在研究開始時，腹膜內(nèi)(i.p.)給藥單一推注劑量的CPT-ll,每天監(jiān)測體重下降，持續(xù)12天。在本研究開始時，對每只小鼠i.p.給藥一個劑量的CPT-ll，然后每天監(jiān)測動物的體重下降，持續(xù)12天。低于200mg/kg的劑量對體重幾乎沒有影響(與不接受CPT-ll治療的對照小鼠相比)。相反，大于或等于600mg/kg的藥物劑量在給藥CPT-ll后第2天就導(dǎo)致動物死亡。一般來說，小鼠能夠耐受高達(dá)400mg/kg的劑量。圖1顯示存活小鼠的體重下降曲線。用300mg/kgCPT-ll治療的小鼠平均體重明顯低于不接受CPT-ll治療的小鼠平均體重，直到治療后第5天(圖1)。從治療后第5天直到本試驗結(jié)束，這兩組小鼠的平均體重沒有顯著性差異。體重下降的持續(xù)時間和程度對給藥至動物的CPT-11劑量是敏感的。在注射400mg/kgCPT-ll的小鼠中，在CPT-ll治療后即刻觀察到了小鼠體重下降并持續(xù)了六天。這些動物在第12天逐步恢復(fù)了其最初體重。基于這些結(jié)果，將400mg/kg或300mg/kgCPT-ll用于BDF-1小鼠模型。然而，接種人腫瘤細(xì)胞的裸鼠對CPT-11治療明顯比BDF-1小鼠更為敏感。在帶有人類HepG2異種移植物的裸鼠中，CPT-11的最大耐受劑量為200mg/kg(數(shù)據(jù)未顯示)。實施例3:PHY906對CPT-ll誘發(fā)的荷瘤BDF-1小鼠體重下降的作用在接種結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞的小鼠中，評價PHY906作為CPT-ll治療的調(diào)節(jié)劑對毒副作用的影響。基于上述發(fā)現(xiàn)(實施例2)，選擇單一推注劑量400mg/kgCPT-11，來研究PHY906對與CPT-11毒性相關(guān)的體重下降的作用。為了評價PHY906是否損害CPT-ll的抗腫瘤功效，給小鼠皮下植入結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在接種后10至14天，在沒有或有PHY906存在的情況下，用CPT-11(400mg/kg，i.p.)治療小鼠，其中以不同劑量(125mg/kg、250mg/kg禾n500mg/kg)每天口服兩次PHY906。以指定劑量持續(xù)進行PHY906治療，連續(xù)8天。圖2顯示，PHY906對CPT-ll治療的小鼠體重下降的作用是劑量依賴性的。接受500mg/kg/b.i.d.PHY906補充治療的CPT-ll治療動物在維持體重方面表現(xiàn)出顯著的改善，能更快地恢復(fù)其原始體重(pO.Ol)。表8總結(jié)了統(tǒng)計學(xué)結(jié)果。然而，接受250mg/kg/b.i.d.PHY906的小鼠在體重下降方面沒有表現(xiàn)出差異。表8.在用CPT-ll治療的荷瘤小鼠中，PHY-卯6對體重下降的作用的統(tǒng)計學(xué)分析<table>tableseeoriginaldocumentpage72</column></row><table>實施例4:用CPT-ll和PHY906治療的接種結(jié)腸38小鼠的腫瘤重如實施例3所述治療小鼠，評價九天期限內(nèi)的腫瘤重量。結(jié)果表明，用PHY906治療既不阻礙也不損害CPT-ll的抗腫瘤功效(圖3)。實際上，該數(shù)據(jù)提示這種草藥確實可以提高CPT-ll的抗腫瘤活性。這些初步結(jié)果提示，可以將草藥組合物PHY卯6用作CPT-ll化學(xué)治療的調(diào)節(jié)劑，以顯著改善和緩解CPT-ll的毒副作用，而不危害CPT-的抗腫瘤功效。實施例5:在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906對CPT-ll抗腫瘤活性和血液學(xué)毒性的作用基于在上述研究中獲得的結(jié)果，500mg/kg/b.i.d.PHY906對由400mg/kg最大耐受劑量CPT-ll誘發(fā)的宿主毒性提供了最佳的保護。將該組劑量用于接下來的研究。對于用一次劑量CPT-11(400mg/kg，i.p.)治療的具有結(jié)腸38的BDF-1，口服給予500mg/kg/b.i.d.PHY906，持續(xù)4天或8天。每組使用五只小鼠，將本實驗重復(fù)八次。圖3代表全部實驗的典型結(jié)果。在動物模型中，伴隨的PHY906治療沒有危害根據(jù)腫瘤尺寸測定的CPT-ll抗腫瘤活性。實際上，腫瘤尺寸發(fā)生了輕度的減小，這提示PHY906可以增強CPT-11的抗腫瘤活性。骨髓抑制是用CPT-ll治療的患者中常見的副作用(BleibergHandCvitkovicE.，EurJCancer32A(Suppl3):S18-S23(1996))。為了評價PHY906是否有益于逆轉(zhuǎn)CPT-ll誘發(fā)的骨髓毒性，在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-小鼠中檢驗血液學(xué)活性。如圖4所示，在全部方案中，發(fā)現(xiàn)PHY906對紅細(xì)胞計數(shù)或血小板計數(shù)沒有影響，也沒有顯示能保護由CPT-ll誘發(fā)的骨髓抑制。就抗腫瘤活性和血液學(xué)活性而言，在用PHY906與CPT-ll共同治療4天或8天的方案之間沒有顯著性差異(數(shù)據(jù)未顯示)。實施例6:在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906對CPT-ll死亡率的作用將小鼠分成使用不同治療方案的四組(A)組用載體治療；(B)組用單劑量的400mg/kgCPT-lli.p.注射治療；(C)組用單獨PHY906(500mg/kg/b.i.d.)治療；或(D)組用單劑量400mg/kgCPT-ll加500mg/kg/b丄d.PHY906治療4天或8天。各治療方案的順序描述于材料和方法中。如表9所示，在用載體或單獨PHY906治療4天或8天后，來自A組的35只荷瘤小鼠中的35只(100。/。)和來自C組的15只小鼠中的15只(IOO%)均存活下來，這表明PHY906沒有毒性或毒性極低。相反，單獨用CPT-ll治療(B組)8天后，在40只荷瘤小鼠中僅有33只(82.5%)存活下來。然而，在接受4天或8天PHY906與CPT-ll聯(lián)合治療(D組)后，存活率明顯改善至95%(20只小鼠中的19只)或100%(24只小鼠中的24只)。這提示，PHY906治療能夠保護小鼠對抗由單劑量400mg/kgCPT-ll誘發(fā)的死亡。表9.在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906對CPT-ll治療的存活率的作用<table>tableseeoriginaldocumentpage74</column></row><table>將所有動物觀察14天。在用CPT-ll治療的40只小鼠中，7只在第5天(N-1)、第6天(N=3)、第7天(N-1)和第8天(N二2)死亡。c由于使用了CPT-ll與PHY906的聯(lián)合治療(4天)，所以1只小鼠在第6天死亡。實施例7:在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906對FU/LV杭腫瘤活性的作用FU/LV聯(lián)用表現(xiàn)出有效的抗腫瘤活性，被用作結(jié)腸直腸癌患者的一線治療(GoldberR.M.andErlichmanC"Oncology12:59-63(1988);SaltzL.B，CoxJ.V，BlankeC，等人'New.Eng丄Med.343:905-914(2000))。因此，用FU/LV在動物中進行與上述CPT-ll治療相似的實驗。將具有結(jié)腸38腫瘤的小鼠分成四組(A)組用載體治療；(B)組單獨用PHY906治療；(C)組單獨用FU/LV治療；和(D)組用FU/LV力nPHY906治療。各治療方案的順序描述于材料和方法中。在該組實驗中，在第0天對小鼠僅給藥一次FU/LV，而每天給藥兩次PHY906,連續(xù)4天。每天監(jiān)測體重和腫瘤尺寸的改變，分別如圖5和6所示。如圖5所示，在四組中體重幾乎沒有發(fā)生變化。這一觀察結(jié)果與使用CPT-ll治療觀察到的結(jié)果相反。由于沒有進行FU/LV對體重下降的劑量響應(yīng)研究，所以可能的情況是，在本實驗中給藥的FU/LV劑量沒有高到足以誘發(fā)毒性和相關(guān)的體重下降。盡管體重下降不足以證明PHY906對FU/LV的保護作用，但是圖6表明PHY906的伴隨治療沒有損害FU/LV在具有結(jié)腸38腫瘤BDF-1小鼠中的抗腫瘤活性。D組動物的腫瘤生長曲線慢于C組，這提示PHY906可以提高FU/LV在該動物模型中的抗腫瘤活性。此外，在伴隨給藥PHY卯6治療的小鼠中，在第4、8和12天監(jiān)測FU/LV的血液學(xué)毒性。PHY906沒有逆轉(zhuǎn)由FU/LV誘發(fā)的公知副作用，即白細(xì)胞減少或血小板減少(vanderWiltC丄，vanGroeningen，C.J,PinedoH.M,等人，J.CancerRes.Clin.Oncol.123:595-601(1997))(圖7)。實施例8:在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906對CPT-11/FU/LV抗腫瘤活性的作用FDA近期批準(zhǔn)CPT-ll加FU/LV的新三聯(lián)治療作為一線治療用于晚期結(jié)腸直腸癌(GoldberR.M.andErlichmanC.，Oncology12:59-63(1988);SaltzL.B,CoxJ.V,BlankeC，等人，New.Eng.J.Med.343:905-914(2000))。已經(jīng)證實該方案可減慢腫瘤生長的進程以及死亡率。然而，在接受這種三聯(lián)治療方案的患者中，經(jīng)常觀察到嚴(yán)重的遲發(fā)腹瀉。預(yù)實驗表明，在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，PHY906能夠提高CPT-11的治療指數(shù)。因此，使用與實施例7相似的方案，評價PHY906對緩解三聯(lián)化學(xué)治療的中限制劑量的毒性的功效。將具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠分成兩組(A)組僅用CPT-11/FU/LV治療；(B)組用CPT-11/FU/LV加PHY906治療。兩組中所用的FU和LV劑量均各為100mg/kg，因為在這些劑量下，在預(yù)研究中觀察到了極低的毒性。在這種三聯(lián)方案中不進行對CPT-ll的劑量依賴性研究，而使用200mg/kg或300mg/kgCPT-ll。各方案的順序描述于材料和方法中。在化學(xué)治療的后每天給藥兩次PHY906，持續(xù)4天。結(jié)果表明，在200mg/kg和300mg/kgCPT-11下，PHY906不損害三聯(lián)治療的抗腫瘤功效，分別如圖8和9所示。如圖8所示，由于在三聯(lián)治療中使用了200mg/kgCPT-ll，所以在第14天，PHY906輕度提高了對腫瘤的抑審^)=0.045)。與不接受PHY906治療的組相比，在300mg/kgCPT-11下，PHY卯6對腫瘤抑制的提高在第14'天時并不顯著(p=0.05)，但在第21天時明顯&=0.014)。這一結(jié)果提示，可能需要更長的時間期限，來觀察PHY906對CPT-11/FU/LV腫瘤抑制作用的提高。在所研究的劑量下，在三聯(lián)治療和CPT-ll治療中，PHY906表現(xiàn)出對抗腫瘤活性的相似有益作用。在三聯(lián)治療所用的劑量下，動物表現(xiàn)出體重下降。然而，PHY906在治療過程中沒有減慢體重下降，如圖10所示。此外，PHY906不影響體重下降的恢復(fù)。實施例9:在有和沒有PHY906存在的情況下，CPT-11/FU/LV在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中的藥物動力學(xué)在有和沒有PHY906存在的情況下，CPT-11/FU/LV在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中的藥物動力學(xué)數(shù)據(jù)如圖18-20所示。PHY906-6是PHY906的臨床批次，包含10%賦形齊1」(淀粉)。在共同給藥PHY906與三聯(lián)CPT-11/FU/LV后，血漿中的CPT-ll曲線下面積(AUC)增加。在共同給藥PHY906后，腫瘤或肝組織中的CPT-11沒有顯著改變。CPT-ll的活性代謝物即SN-38在血漿、肝或腫瘤中保持不變。在將PHY906與CPT-11/FU/LV三聯(lián)組合共同給藥后，血漿或肝中FU及其核苷/核苷酸代謝物(FU+FUR+FUMP)的AUC發(fā)生改變。實施例10:在具有人類HepG2腫瘤的裸鼠中，PHY906對CPT-ll抗腫瘤活性和毒性的作用來自上述實施例、特別是實施例5、7和8的結(jié)果表明，PHY906與化學(xué)治療藥物聯(lián)用可以增強化學(xué)治療藥物的抗腫瘤作用，進一步延緩腫瘤生長。基于PHY906所含草藥的己知藥理學(xué)曲線(表1)，推斷這種促進作用可以通過正常小鼠中的免疫學(xué)和/或血液學(xué)體系起作用。因此，設(shè)計實驗以在缺乏免疫學(xué)和血液學(xué)體系的裸鼠中測試這種推斷。將人類HepG2腫瘤細(xì)胞植入NCr-裸鼠中，以測試PHY906對CPT-11抗腫瘤活性的作用。前面的實驗表明，CPT-ll在裸鼠中的最大耐受劑量為200mg/kg，將它用于本研究。在第0天給藥CPT-11(200mg/kg，i.p.)。從第O天開始，每天給藥兩次500mg/kgPHY906。如圖11所示，PHY906沒有危害CPT-ll對裸鼠中人類H印G2異種移植物的抗腫瘤作用。然而，不同于在BDF-1小鼠中的觀察結(jié)果，PHY卯6沒有表現(xiàn)出保護由CPT-ll導(dǎo)致的體重下降(圖12)或動物死亡(數(shù)據(jù)未顯示)的有益作用。PHY906可以預(yù)防正常小鼠的體重下降，但不能防止裸鼠的體重下降，這一事實提示PHY906通過血液學(xué)和免疫學(xué)體系發(fā)揮其作用，而這二者正是裸鼠缺乏的。實施例11:不同中草藥制劑對CPT-ll在小鼠中的抗腫瘤作用、體重下降和存活率的作用在用癌癥化學(xué)治療藥物治療的患者中，腹瀉是限制劑量的毒性之一。除PHY906夕卜，還檢驗了其他抗腹瀉藥物。它們包括中藥如PHY-14ST、PHY-15ST和PHY915、以及洛哌丁胺，目前洛哌丁胺被推薦作為抗腹瀉藥用于CPT-ll誘發(fā)的遲發(fā)腹瀉。除腫瘤生長抑制和體重下降外，我們還檢査了接受不同草藥制劑聯(lián)合單一推注給藥CPT-ll的小鼠的存活率。在所檢驗的幾種制劑中，PHY906是觀察到提高CPT-ll抗腫瘤活性的唯一制劑(表9)，即使PHY906所含的某些草藥也存在于其他草藥制劑中。在死亡率研究中，PHY906沒有表現(xiàn)出對動物死亡率的統(tǒng)計學(xué)作用(P-0.044)。觀察到所測試的其他抗腹瀉藥如PHY-14ST、PHY-15ST和洛哌丁胺在防止體重下降或提高CPT-ll抗腫瘤作用方面完全無效。令人驚訝的是，觀察到PHY-915可減少CPT-ll的抗腫瘤活性(表10)。表10.不同草藥制劑對CPT-ll治療的具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小<table>tableseeoriginaldocumentpage78</column></row><table>a所有動物觀察14天。b使用斯氏配對t-檢驗計算p值。e基于包含賦形劑的制劑干重。d在CPT-ll治療小鼠體重下降達(dá)到最大的當(dāng)天計算。e在最初藥物治療后第6天，基于腫瘤尺寸計算。f一只小鼠在第6天死亡。"J、鼠在第3天(N-1)、第4天(N4)和第5天(N4)死亡。實施例12:PHY906在不同細(xì)胞系中的細(xì)胞毒性為了評價體外細(xì)胞模型作為質(zhì)量保證的措施，研究兩種不同PHY906制劑(PHY906A和PHY906B)對不同人腫瘤細(xì)胞系和小鼠結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞系的生長抑制的作用。如表11所示，在所述細(xì)胞系的生長抑制活性方面，PHY906A和PHY906B沒有顯著性差異。要注意的是，發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞系對PHY卯6的敏感性高于其他人細(xì)胞系。表11.PHY906在不同細(xì)胞系中的細(xì)胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage79</column></row><table>基于粗草藥水提取物的干重。PHY906的不同研究批次。上述實驗結(jié)果提示，PHY906減輕了由CPT-ll、FU/LV的治療或使用CPT-11/FU/LV三聯(lián)治療治療誘發(fā)的一些宿主毒性。植物藥PHY906不僅可以維持、而且可以增強所測試化學(xué)治療藥物的抗腫瘤活性。實際上，在具有結(jié)腸38腫瘤的小鼠和具有人類HepG2異種移植物的裸鼠中，通過增加總體抗腫瘤活性，PHY906都提高了CPT-ll、FU/LV和CPT-11/FU/LV的治療指數(shù)。在兩種不同的腫瘤模型中，使用幾種抗癌劑檢驗了這些觀察結(jié)果(圖3、6、8、9和11)。實施例13:在用L-OddC治療的接種結(jié)腸38的小鼠中，PHY906對腫瘤生長的作用在接種有結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞的小鼠中，評價PHY906作為L-OddC(卩-L-二氧戊環(huán)胞苷)治療的調(diào)節(jié)劑，對腫瘤生長的作用。給小鼠皮下注射鼠結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在接種癌細(xì)胞后第七天，用L-OddC(25mg/kg)腹膜內(nèi)治療小鼠，并口服給藥PHY906(500mg/kg，b.i.d.)。然后在剩余的實驗期內(nèi)，只給動物連續(xù)給藥相同劑量的PHY906。如圖13所示，使用L-OddC的治療表明，PHY906既不阻礙也不損害L-OddC的抗腫瘤功效。實際上，數(shù)據(jù)提示該草藥藥物確實可以提高L-OddC的抗腫瘤活性。因此，這些結(jié)果提示，可以將草藥PHY906用作L-OddC化學(xué)治療的調(diào)節(jié)劑，以顯著改善和減輕毒副作用，而不危害L-OddC的抗腫瘤功效。實施例14:在用VP-16治療的接種結(jié)腸38的小鼠中，PHY906對腫瘤生長的作用在接種有結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞的小鼠中，評價PHY906作為VP-16(依托泊普，拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑)治療的調(diào)節(jié)劑，對腫瘤生長的作用。給小鼠皮下注射鼠結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在接種癌細(xì)胞后第七天，用VP-16(25mg/kg)腹膜內(nèi)治療小鼠，并口服給藥PHY906(500mg/kg，b丄d.)。然后在剩余的實驗期內(nèi)，只給動物連續(xù)給藥相同劑量的PHY906。如圖14所示，使用VP-16的治療表明，PHY906既不阻礙也不損害VP-16的抗腫瘤功效。實際上，數(shù)據(jù)提示該草藥藥物確實可以提高VP-16的抗腫瘤活性。因此，這些結(jié)果提示，可以將草藥PHY906用作VP-16化學(xué)治療的調(diào)節(jié)劑，以顯著改善和減輕毒副作用，而不危害VP-16的抗腫瘤功效。實施例15:在用5-氟尿嘧啶治療的接種結(jié)腸38的小鼠中，PHY906對腫瘤生長的作用在接種有結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞的小鼠中，評價PHY906作為5-氟尿嘧啶(FU)治療的調(diào)節(jié)劑，對腫瘤生長的作用。給小鼠皮下注射鼠結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在接種癌細(xì)胞后第七天，用5-氟尿嘧啶以兩種劑量(250mg/kg，在第0天一次劑量，或在第0天至第4天每天給藥30mg/kg劑量)腹膜內(nèi)治療小鼠，并口服給藥PHY906(500mg/kg，b.i.d.)。然后在剩余的實驗期內(nèi)，只給動物連續(xù)給藥相同劑量的PHY906。如圖15和16所示，使用5-氟尿嘧啶的治療表明，PHY906既不阻礙也不損害5-氟尿嘧啶的抗腫瘤功效。實際上，數(shù)據(jù)提示該草藥藥物確實可以提高5-氟尿嘧啶的抗腫瘤活性。因此，這些結(jié)果提示，可以將草藥PHY906用作5-氟尿嘧啶化學(xué)治療的調(diào)節(jié)劑，以顯著改善和減輕毒副作用，而不危害5-氟尿嘧啶的抗腫瘤功效。實施例16:在用CPT-ll和洛哌丁胺治療的接種結(jié)腸38的小鼠中，PHY906對腫瘤生長的作用在接種有結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞的小鼠中，在抗腹瀉藥物洛哌丁胺存在的情況下，評價PHY卯6作為CPT-ll治療的調(diào)節(jié)劑，對腫瘤生長的作用。給小鼠皮下注射鼠結(jié)腸38腫瘤細(xì)胞。在接種癌細(xì)胞后第七天，在口服給藥PHY906(500mg/kg，b丄d.)存在的情況下，或在洛哌丁胺(2mg/kg，p.o.，b丄d.)存在的情況下，單獨用CPT-11(400mg/kg，i.p.)治療小鼠。圖17比較了PHY906與洛哌丁胺的抗腫瘤作用。如圖17所示，在PHY卯6存在的情況下，CPT-ll在減少腫瘤生長(確定為最初腫瘤重量的百分比)方面比洛哌丁胺更有效。這些初步結(jié)果提示，在延遲CPT-ll誘發(fā)的腹瀉方面，草藥PHY906比標(biāo)準(zhǔn)給藥洛哌丁胺更為有效。實施例17:在與伊立替康聯(lián)用時，測定PHY906給藥的最低有效劑量(MED)和最佳持續(xù)時間幾項研究表明，由七種草藥組成的KamPo藥在體內(nèi)有效地預(yù)防CPT-ll誘發(fā)的動物腹瀉的發(fā)生并在體內(nèi)減少CPT-ll誘發(fā)的腹瀉的嚴(yán)重性(Mori,1998)。還在體內(nèi)動物模型中評價了PHY906，己經(jīng)證實它可減輕伊立替康誘發(fā)的毒性的嚴(yán)重性。因此，基于長期歷史經(jīng)驗(1500年)證明的人體安全性、這種化合物在動物模型中有希望的臨床前活性和所述相關(guān)草藥化合物在該環(huán)境中的潛在活性，能夠開展研究，以評價PHY906對化學(xué)治療的誘發(fā)的毒性如體重下降、腹瀉、總體體力狀態(tài)和生活質(zhì)量的嚴(yán)重性的作用，以及對伊立替康或其他藥物在患頑固性晚期結(jié)腸直腸癌患者中的抗腫瘤活性的作用。這項研究包括經(jīng)組織學(xué)證實的FU-頑固性晚期結(jié)腸直腸癌患者。不需要可確定或可評價的疾病?；加兄袠猩窠?jīng)系統(tǒng)(CNS)轉(zhuǎn)移性瘤的患者是適合的，條件是CNS疾病在完成手術(shù)、化學(xué)治療的和/或放療后已經(jīng)保持穩(wěn)定至少4周。本研究的參與者年齡應(yīng)^18歲，應(yīng)沒有明顯潛在的醫(yī)學(xué)疾病。所有患者應(yīng)具有體力狀態(tài)ECOG0-2，預(yù)期壽命為至少3個月，己經(jīng)獲得知情同意書。(ECOG是"東方合作腫瘤機構(gòu)"的縮寫。ECOG0=患者可進行正常活動；ECOG1=患者具有最低限度的癥狀；EC0G2=患者要花費<50%的時間在病床上；ECOG3=患者花費〉50%的時間在病床上；ECOG4=患者始終在病床上)。患者必須已經(jīng)從任何前期手術(shù)的影響中完全恢復(fù)，在進入本研究的4周內(nèi)(對亞硝基脲類或絲裂霉素C為6周)，不接受野外輻療或任何化學(xué)治療的。要進入本研究，要求ANC(絕對嗜中性白細(xì)胞計數(shù))^1500^1，血小板計數(shù)^40ml/min，總膽紅素52.0mg/dl。洽伊薪伊份..在治療開始前，全部患者應(yīng)具有完整的病史、身體檢查、并確定其體力狀態(tài)。實驗室研究應(yīng)包括具有微分的全血計數(shù)(CBC)、血清白蛋白、電解質(zhì)、葡萄糖、血尿氮(BUN)、肌酸苷、血清鈣和鎂、肝功檢驗、凝血酶原和部分凝血活酶原時間和尿分析。將伊立替康從凍干粉再溶解到2ml無菌水中，用100mlD5W(5。/。葡萄糖水溶液)稀釋，在90min內(nèi)以125mg/r^的劑量給藥。在各參與醫(yī)院的門診治療中，應(yīng)按照每周方案將伊立替康化學(xué)治療的給藥4周，有2周休息期。應(yīng)在飲食前30min空腹服用PHY906。在化學(xué)治療的治療的當(dāng)天，將服用首次劑量，隨后給藥伊立替康。從0.60g的初始劑量開始，在各餐前每天口服三次PHY906。(每日總劑量為1.80gm/天)。目前東方患者所使用的PHY906劑量為7.2gm/天，迄今為止還沒有觀察到不良事件。因此，建議開始本試驗的劑量為所述草藥常用劑量的1/4。在完整的4周化學(xué)治療的過程中，將PHY906和伊立替康一起給藥，有2周休息。最少有三名患者將接受該初始劑量水平的PHY906治療。一旦3位患者完成了整個6周的周期，如果3位患者中沒有1位出現(xiàn)限制劑量的毒性(DLT)，則將對隨后組的3位患者使用下一個較高的劑量。在全部患者中，將在開始第一個化學(xué)治療的周期后24小時進行藥物動力學(xué)研究。如果3位患者中有1位出現(xiàn)DLT，則將以相同的劑量水平再治療3位患者。如果接下來的3位患者中有S1位患者出現(xiàn)DLT(總共6位患者中的l位或2位)，則將會把劑量遞增至下一劑量水平，除非在雙盲方案中發(fā)生那些情況，此時下一個遞增將到達(dá)改良Fibonacci方案上的水平n+l(表12)。表12.PHY906的劑量遞增方案<table>tableseeoriginaldocumentpage83</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage84</column></row><table>^^^/_#逮_#;^案如果臨床指示和首席研究者認(rèn)為必需，則可以使用較低的劑量水平，而非上述特定的劑量水平。進入和遞增至下一劑量方案的受體比例將取決于進入各劑量水平的患者安全性曲線評價。將按照NCI臨床試驗指南(CTG)擴充的常用毒性標(biāo)準(zhǔn)來評價毒性并分級。用于該方案的止吐藥方案將由摻入50ml生理鹽水的1-2mg格拉司瓊組成，在每個治療天的化學(xué)治療的前，經(jīng)1/2小時給藥。在需要時，將該止吐藥(靜脈內(nèi)或口服給藥)每8小時重復(fù)一次，以控制惡心和/或嘔吐。每周重復(fù)一次治療，連續(xù)4周，隨后休息2周。該過程將構(gòu)成一個治療周期。將用阿托品(0.5-lmg)靜脈內(nèi)治療在伊立替康輸注過程中或之后不久發(fā)生的腹瀉。對于在給藥伊立替康后H2小時發(fā)生的腹瀉，在首次出現(xiàn)腹瀉癥候時，將口服4mg洛哌丁胺治療患者，隨后每2小時口服2mg(在夜晚每4小時口服4mg)，直到腹瀉完全消除至少12小時。如果腹瀉帶血，伴有^101.6下的發(fā)熱并持續(xù)不退^12小時，則認(rèn)為該患者應(yīng)去醫(yī)院作進一步檢查和治療。伊立夢^^y^^^量參改..在本研究中將不遞增伊立替康的劑量。將按照制造商提供的包裝插頁的推薦，針對毒性修改劑量(表13)。表13.對每周和每3周1次方案的推薦劑量修改。不應(yīng)開始新治療過程，直到粒細(xì)胞計數(shù)恢復(fù)至》1500/mm3，血小板計數(shù)恢復(fù)至》100,000/mm3，與治療相關(guān)的腹瀉完全消除。應(yīng)使治療延緩1-2周，以<table>tableseeoriginaldocumentpage85</column></row><table>b國家癌癥研究所常用毒性標(biāo)準(zhǔn)C治療前賄i^浙毒絲伊份..通過每周身體檢查和血液計數(shù)評價毒性，按照國家癌癥研究所的常用毒性標(biāo)準(zhǔn)分級。在每次治療前重復(fù)這些評價和完全的化學(xué)曲線?；颊哌€每天記錄其腸道習(xí)性和抗蠕動劑的使用情況。該日記將包括攝取PHY906的時間、其腸運動頻率和持久性的記錄(成形的、龐大的或水樣)，由患者使用抗蠕動治療來控制這種癥狀。在第一個周期過程中，參與研究的護士將在巡視期間每周與每位患者接觸至少一次，以增強對腹瀉控制和完成日記的指導(dǎo)。還將使用確定的FAST方法學(xué)評價總體生活質(zhì)量，包括衰弱、惡心、嘔吐和食欲下降。由藥劑師對各次臨床治療巡視進行藥丸計數(shù)，以評價對PHY906的順從性。將在每兩個治療周期后評價疾病響應(yīng)。將按照ECOG標(biāo)準(zhǔn)確定響應(yīng)，在患有可確定或可評價疾病的所有患者中評價該響應(yīng)，但這并不構(gòu)成本研究的終點。伊立夢康游藥笏動力學(xué)，在選定的患者中，進行藥物動力學(xué)研究，以評價PHY906是否影響伊立替康的代謝和消除。在這些患者中，單獨給藥首次劑量的伊立替康(第1周期/第1天)，在第2天開始給藥PHY906。在給藥伊立替康前、在輸注伊立替康過程中的30min、60min、90min以及周期1的第1天和周期1的第8天輸注結(jié)束后0.5、1.5、3.5和6小時，立即將血樣收集在肝素化的試管內(nèi)。在聚苯乙烯試管內(nèi)，立即用2.50iil血漿處理血樣，添加500|il內(nèi)標(biāo)溶液。內(nèi)標(biāo)溶液由50pl/ml喜樹堿的冰醋酸酸化乙腈溶液組成，4.0ml溶于100ml。將樣品渦旋30秒，在40'C水浴放置15min，在室溫下冷卻，然后與900pl25mM三乙胺緩沖液(pH4,2)混合。將上清液轉(zhuǎn)入1.5mlEppendorf管，在微量離心機中以13，000xg離心4min，通過高效液相色譜法(HPLC)分析澄清上清液的等分部分。在MicrosorhC18(4.5X250mm，5pm粒度)反相HPLC柱上進行色譜分析，用72:28(v/v)25mMTEA/乙腈緩沖液以lml/min洗脫，利用具有？JEX372nm和XEm535nm的熒光檢測器(Pharmacia&UpjohnSOP#UPJ-120-5)。利用PC-NONLIN軟件(ScientificConsultingLexington,KY)和標(biāo)準(zhǔn)藥物動力學(xué)方程，通過數(shù)據(jù)的非區(qū)劃分析，確定最大血漿濃度、末端半衰期和AUC(曲線下面積)。在周期1/第1天和周期1/第8天進行藥物動力學(xué)研究，以確定延長PHY卯6暴露是否對伊立替康的血漿清除產(chǎn)生累積作用。實施例18:對胰腺癌、肝細(xì)胞癌和結(jié)腸直腸癌的作用A.材料和方法藥欽吉西他濱HCl(Gemzar⑧)購自EliLillyandcompany(Indianapolis,IN)。311-吉西他濱(14Ci/薩o1、1mCi/ml的50%EtOH溶液)購自MoravekBiochemicals，Inc.(Brea,CA)。四氫尿苷(THU)購自Calbiochem(SanDiego,CA)。3'-疊氮-3，-脫氧胸苷(AZT)和5-氟尿嘧啶(5-FU)購自SigmaChemicalCo.(St.Louis,MO)?？ㄅ嗨麨I(Xeloda⑧，CAP)購自RocheLaboratoriesInc.(Nutley，NewJersey)。具有10%賦形劑的PHY906臨床批次(PHY906-6，F(xiàn)DA165542)由SunTenPharmaceutical,Inc.(Taipei,Taiwan)制備。PHY906制劑由四種草藥組成黃芩、芍藥、棗和甘草，其相對重量比為3:2:2:2。具有未知量賦形劑的非臨床批次906MT購自MinTongPharmaceuticalCo.，Ltd.(Taichung,Taiwan)。V、嵐..體重為16至20g(4-6周齡)的雌性BDF-1和C57BL/6小鼠購自CharlesRiverLaboratories(Wilmington,MA)。體重為16至20g(4-6周齡)的雄性無胸腺NCr裸鼠購自TaconicFarms(Garmantown，NY)。小鼠胰腺癌PAN02購自NCI-FrederickCancerResearchFacility(Frederick,MD)。^西必薪溶發(fā)游虔^備.*用6.66mlPBS(磷酸緩沖的鹽水)溶解200mg吉西他濱HC1粉末，至最終濃度為30mg/ml。37/-，^"勉/賓)^^"游吝^備-在Speedvac下干燥十微升(lOpCi)311-吉西他濱，以除去乙醇，然后與250^30mg/ml吉西他濱混合，以使最終溶液的放射敏感性為0.4mCi/mmo1。該^^"勉/冥;^液的最終濃度為30mg/ml。A，薦必薪^激備卡薦逸潔審掩將卡培他濱(150mg/片)溶于40mM檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)中，緩沖液包含5%阿拉伯樹膠作為載體。最終溶液包含36mg/ml卡培他濱。A于粉劍備享藥遠(yuǎn)攻激..按照SOP#HERB-001-PHY906制備草藥提取物。簡言之，將一克包含10%(臨床批次PHY906)淀粉賦形劑的不同批次PHY906干粉添加到10ml80'CH20中，在8(TC下保溫30分鐘。在室溫下，通過離心從殘渣中分離上清液(2060g，15min)。對于臨床批次的PHY906(1g/10mlX0.9)，基于干粉的干重，計算PHY906上清液的濃度為90mg/ml。由于906MT的賦形劑量是未知的，將該制劑的濃度看作100mg/ml。用水將草藥提取物稀釋成50mg/ml，在室溫下保存，在24小時內(nèi)使用。將在靜置過程中發(fā)生的所有殘余沉淀物渦旋成懸浮液，用于治療動物。人肝細(xì)胞癌HepG2、人PANC-1胰腺癌和鼠結(jié)腸38結(jié)腸直腸癌細(xì)胞系購自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(Rockville，MD)。通常使HepG2和結(jié)腸38細(xì)胞系生長在MEME培養(yǎng)基中，而PANC-1細(xì)胞系生長在DMEM培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基都補充有10。/。胎牛血清(FBS)。將來自NCI的小塊鼠PAN02腫瘤懸浮在PBS溶液中，使最終體積為0.8ml。將細(xì)胞植入小鼠左側(cè)腹。當(dāng)腫瘤達(dá)到1500-2000mm3時，進行小鼠之間的腫瘤移植。//、廣#發(fā)漠垂，將腫瘤細(xì)胞(5x106個細(xì)胞的0.1mlPBS溶液)皮下移植到小鼠左側(cè)腹中。14天后，選擇尺寸為300-500mm3的腫瘤進行藥物研究。用滑動卡鉗測量每個腫瘤的長度和寬度。按照下列公式估算腫瘤重量腫瘤尺寸(mmS"長度(mm)X寬度(mm)2/2。在YaleAnimalFacility開展研究并保存動物。在有或沒有PHY906存在的情況下，化學(xué)治療藥物的抗腫瘤活性將總共20只荷瘤小鼠分成4組(N-5只小鼠/組)1)載體2)PHY9063)化學(xué)治療藥物4)PHY906+化學(xué)治療藥物將藥物治療的第一天定為第l天。在指定的天數(shù)，在化學(xué)治療藥物前30min，給小鼠口服給藥PHY906(500mg/kg，bid)。按照給定的劑量和方案，腹膜內(nèi)或口服給藥化學(xué)治療藥物。每天監(jiān)測小鼠的腫瘤尺寸、體重和死亡率。當(dāng)腫瘤尺寸達(dá)到體重的10%時，處死小鼠。虛^#潘.*通過在4。C以10,000g離心10min，從血液中分離小鼠血漿。a)包含卡培他濱的樣品在105-碘尿嘧啶(IU)(50pg/ml)內(nèi)標(biāo)存在的情況下，用200pi乙腈萃取血漿(50|il)。在離心后，通過speedvac干燥來自含卡培他濱樣品的上清液，用50pi0.1M乙酸鈉緩沖液(pH4.8)溶解，用1.3ml水飽和的乙酸乙酯萃取。在離心(10,000g4。C10min)后分離有機層，通過speedvac干燥，用100W水溶解。b)包含吉西他濱的血漿在5pl0.1mMAZT內(nèi)標(biāo)存在的情況下，用200^乙腈(ACN)萃取血漿(50W)。在離心后，通過speedvac干燥上清液，用包含2.5%CAN和97.5%15mM醋酸銨(pH5.0)的溶液溶解。然后通過帶UV吸收的HPLC和/或放射活性分析所得被分析物。統(tǒng)^學(xué)分析浙研兗游統(tǒng)^幕(Diggle等人AnalysisofLongitudinalData,2nded.Oxford:OxfordSciencePublications(1994》使用隨機影響模型分析來自相似劑量動物試驗的數(shù)據(jù)。使用SAS中的PROCMIXED程序，來考慮從相同小鼠中收集的觀察值之間的相關(guān)性。使用下列模型分析縱向數(shù)據(jù)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>其中WA為在第^個時間點，第z'組(未治療、單獨的藥物、單獨的PHY906和藥物+PHY906)第_/個個體的相對腫瘤尺寸，^是第A個時間點，a為基線時間影響(未治療組)，^和/p是進行藥物治療和PHY卯6治療的可用指征，P為藥物特異性線性時間作用，y為PHY906特異性線性時間作用，3為藥物-PHY906協(xié)同的線性時間作用，e^為剩余(誤差)項。我們假設(shè)來自不同個體的誤差是獨立的，來自相同個體不同時間點的誤差符合回歸模型AR(l)，從而考慮如下事實在相同的治療組內(nèi)，來自相同個體的觀察值更相關(guān)，在相同的個體中，來自更近時間點的響應(yīng)更相關(guān)。使用SAS8.01的PROCMIXED進行統(tǒng)計學(xué)分析。B.結(jié)果l.胰腺癌a)在具有鼠PAN02的C57/BL小鼠中，PHY906對不同劑量吉西他濱抗腫瘤活性的作用為了確定PHY906和吉西他濱聯(lián)合使用的最佳劑量方案以改善吉西他濱的抗腫瘤活性，在具有PAN02鼠胰腺癌的C57/BL6小鼠中，研究吉西他濱的三個不同劑量150、300和600mg/kg與500mg/kg固定劑量PHY906的組合(表14)。如圖21-23所示，在具有PAN02的小鼠中，PHY906顯著提高了吉西他濱的抗腫瘤活性(在吉西他濱的所有三個劑量中，pO.OOl)。顯然，與較低的吉西他濱劑量相比，用600mg/kg吉西他濱治療的小鼠顯示出更好的抗腫瘤作用。在這個小鼠模型中，150mg/kg劑量的吉西他濱沒有抗腫瘤活性，單獨的PHY906也是如此。表14:PHY卯6和吉西他濱在PAN02鼠胰腺癌模型中的治療狀況總結(jié)<table>tableseeoriginaldocumentpage91</column></row><table>基于準(zhǔn)確的賦形劑量(10°/。)計算PHY906的濃度。b906MT中的賦形劑量是未知的，基于干粉的干重計算濃度。b)在具有鼠PAN02的BDF-1小鼠中，PHY906對不同劑量吉西他濱抗腫瘤活性的作用除了C57/BL6小鼠外，還在不同的小鼠品種中測試PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用。因此，將PAN02胰腺癌植入BDF-1小鼠中。如圖24-25所示，將吉西他濱劑量從300mg/kg增加到600mg/kg，能顯著增加單獨的吉西他濱與同時使用PHY906和吉西他濱治療之間的腫瘤生長速率的差異。結(jié)果暗示，無論小鼠模型如何，PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用都是明顯的。另外，選擇600mg/kg吉西他濱劑量進行隨后的動物實驗。c)在人PANC-1異種移植物中，PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用在具有人PANC-1的裸鼠中，測試PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用。如圖26所示，在第一個藥物治療周期后，吉西他濱和PHY906的組合將腫瘤尺寸收縮約60%。將劑量周期定義為一周，其中包括四天的PHY906治療加三天的休息。在第二個組合藥物治療周期后，腫瘤尺寸保持穩(wěn)定，同時60%腫瘤收縮。如圖27所示，隨著第二個劑量周期的開始，小鼠經(jīng)歷高達(dá)20%的體重下降。沒有開始第三個組合藥物治療周期，直到第26天，此時腫瘤尺寸反彈回第21天的原始尺寸。d)在具有PAN02的BDF-1小鼠中，非臨床批次的PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用來自不同制造商的幾個非臨床批次PHY906顯示出不同的化學(xué)和生物學(xué)響應(yīng)。問題在于，這些體外差異是否導(dǎo)致不同的體內(nèi)響應(yīng)。906MT具有與臨床PHY906批次極為不同的化學(xué)和生物學(xué)活性，在具有PAN02的BDF-1小鼠中，比較它和PHY906對吉西他濱抗腫瘤活性的作用。由于906MT中賦形劑的量是未知的，基于粉末的干重，以1g/kgM吏用906MT劑量。吉西他濱的劑量為第1天和第8天300mg/kgbid。906MT的劑量方案與臨床批次PHY906相同。如圖24所示，顯示PHY906對吉西他濱的抗腫瘤活性有作用，但沒有顯示906MT能顯著增強吉西他濱的抗腫瘤活性，如圖28所示。這些體內(nèi)結(jié)果與其他體外藥理學(xué)結(jié)果一致(數(shù)據(jù)未顯示)。該結(jié)果暗示，在化學(xué)治療的中，包括不同比例或不同種類黃芩、甘草、棗和芍藥的任何制劑可能具有與PHY906不同的治療作用。e)PHY卯6對吉西他濱(dFdC)及其代謝物dFdU的藥物動力學(xué)作用對于未來的臨床試驗，為了確定PHY906是否會改變吉西他濱的代謝，在具有胰腺癌的小鼠中進行藥物動力學(xué)分析。將小鼠分成三組，每組15只僅吉西他濱、吉西他濱加PHY906和載體對照。各組的每只小鼠在兩個不同的時間點取血兩次。如材料和方法中所述處理血漿，通過HPLC分析，用放射活性確證峰的識別和定量。研究顯示，在有或沒有PHY906存在的情況下，吉西他濱及其代謝物(dFdU)在循環(huán)中的水平?jīng)]有顯著差異，如圖29所示。計算吉西他濱和dFdU在血漿中的AUC(濃度曲線下面積)、Q^(最大藥物濃度)、Tn^(達(dá)到最大藥物濃度的時間)和丁1/2(半衰期)，沒有顯示單獨給藥吉西他濱或與PHY906組合之間的顯著差異，如表15所總結(jié)的。表15:在具有PAN02的BDF-1小鼠中，PHY906對吉西他濱(dFdC)及其代謝物(dFdU)的血漿藥物動力學(xué)參數(shù)的作用(HPLC-UV/VIS檢測數(shù)據(jù))<table>tableseeoriginaldocumentpage93</column></row><table>f)PHY906對吉西他濱+奧沙利鉑治療的具有人類PANC-1腫瘤的NCr-裸鼠的作用由于吉西他濱單一治療在胰腺癌中響應(yīng)很弱，在不同的臨床試驗期中，用吉西他濱開展幾個聯(lián)合治療。其中包括奧沙利鉑和吉西他濱的聯(lián)合治療。發(fā)現(xiàn)在人PANC-1異種移植小鼠模型中，PHY906與奧沙利鉑和吉西他濱的聯(lián)合治療不僅能減慢腫瘤進程，而且在最初藥物治療的第7天，就能將腫瘤尺寸減少至50%，如圖30所示。2.肝細(xì)胞癌a)在具有人類HepG2腫瘤的裸鼠上，PHY906對CPT-ll抗腫瘤活性的作用前面的研究顯示，在結(jié)腸直腸癌和胰腺癌體內(nèi)模型中，PHY906與各種化學(xué)治療藥物的組合能加增強化學(xué)治療藥物的抗腫瘤作用?；赑HY906所含草藥的已知藥理學(xué)曲線，推測增強作用可能通過正常小鼠的免疫學(xué)和/或血液學(xué)體系起作用。因此，設(shè)計實驗以在缺乏免疫學(xué)和血液學(xué)體系的裸鼠中檢驗該假設(shè)。將人肝細(xì)胞癌HepG2細(xì)胞植入NCr-裸鼠中，以檢測PHY906對CPT-ll抗腫瘤活性的作用。前面的實驗表明，CPT-ll在裸鼠中的最大耐受劑量為200mg/kg，將它用于本研究。在第0天給藥CPT-11(200mg/kg，i.p.)。從第0天開始，每天給藥兩次500mg/kgPHY906，持續(xù)8天。如圖31所示，PHY906增強了CPT-ll對裸鼠中人類HepG2異種移植物的抗腫瘤作用。然而，不同于在BDF-1小鼠中的觀察結(jié)果，PHY906沒有表現(xiàn)出保護由CPT-ll導(dǎo)致的體重下降或動物死亡(數(shù)據(jù)未顯示)的有益作用。PHY906可以預(yù)防正常小鼠的體重下降，但不能防止裸鼠的體重下降，這一事實提示PHY906通過血液學(xué)和免疫學(xué)體系發(fā)揮其作用。b)在具有人類HepG2腫瘤的裸鼠上，PHY906對卡培他濱抗腫瘤活性的作用卡培他濱最初被開發(fā)作為可口服利用的氟嘧啶類似物，能夠?qū)⒏邼舛鹊幕钚约?xì)胞毒性劑5-FU遞送到腫瘤組織中。在口服給藥后，卡培他濱被肝中的羧酸酯酶代謝成5'-脫氧-5-氟胞苷(5'-DFCR)，然后被肝或腫瘤中的胞苷脫氨酶轉(zhuǎn)化為5'-脫氧-5-氟尿苷(5'-DFUR)。此外，5'-DFUR被嘧啶磷酸化酶催化活化為5'-氟尿嘧啶(5-FU)，該酶富集于腫瘤或肝中(Berg等人，Semin.Oncol.,25:53-59,1998;Schwetz等人，JAMA，286:2085，2001)。Lozano等人研究將卡培他濱用于治療55名具有不可切除的肝膽癌的患者；然而，僅觀察到13M的響應(yīng)率(Aguayo等人，SeminarsInOncology,28:503-513，2001;Leung等人，SeminarsInOncology,28:514-520，2001;Lozano等人，OralCapecitabine(Xeloda)fortheTreatmentofHepatobiliaryCancers(Hepatocellulgu*CarcinomaChol肌giocarcinomajandGallbladderCancer).19.2000.ProceedingsofASCO)。基于PHY卯6在動物研究中對5-FU和CPT-ll/5-FU/LV抗腫瘤活性的增強作用，開展實驗來研究PHY906是否能增強5-FU的口服前藥即卡培他濱的抗腫瘤活性。將移植有HepG2人肝細(xì)胞癌細(xì)胞的總共20只NCr裸鼠分成4組(N-5小鼠/組)(A)組載體對照；(B)組用PHY906(500mg/kg，b丄d.，第0-3天和7-10天)治療；(C)組:用卡培他濱(360mg/kg，bidx14D)治療；和(D)組用PHY906(500mg/kg，bid,第0-3天、7-10天)加卡培他濱(360mg/kg，bidxl4D)治療。該實驗所用的PHY906方案與臨床前I/IIa期試驗中用于緩和CPT-11/5-FU/LV誘發(fā)的細(xì)胞毒性的方案相同。發(fā)現(xiàn)PHY906能增強卡培他濱的抗腫瘤活性，如圖32所示。在較低劑量的卡培他濱中也發(fā)現(xiàn)了類似的觀察(數(shù)據(jù)未顯示)。c)在具有人類HepG2腫瘤的裸鼠上，PHY906對多柔比星抗腫瘤活性的作用為了檢査PHY906是否能增強多柔比星的抗腫瘤活性，在第1-4天和8-11天，給具有HepG2異種移植物的小鼠聯(lián)合給藥PHY906(500mg/kg，po，bid)和多柔比星(7.5mg/k，qd，Dl、4、7)。如圖33所示，顯示PHY卯6能增強多柔比星的抗腫瘤活性。d)在具有人類HepG2腫瘤的裸鼠上，PHY906對沙立度胺抗腫瘤活性的作用將具有人類HepG2腫瘤的小鼠分成四組A)對照組；B)PHY906治療組在第1-4天，給小鼠每天口服兩次PHY906(500mg/kg);C)沙立度胺組在連續(xù)14天中，給小鼠每天腹膜內(nèi)給藥一次沙立度胺(lg/kg);和D)PHY卯6和沙立度胺組在沙立度胺之前30min給藥PHY906。發(fā)現(xiàn)在人類HepG2異種移植小鼠模型中，PHY906能增強沙立度胺的抗腫瘤活性，如圖34所示。3.結(jié)腸直腸癌美國申請10/220,876和PCT申請PCT/US01/07353(它們被全文引入本文作為參考)顯示，在具有結(jié)腸38腫瘤的小鼠中，PHY906能增強CPT-ll、5-FU、CPT-ll/5-FU/LV、L-OddC、VP-16的抗腫瘤活性。還在結(jié)腸直腸癌中研究了其他方案，如奧沙利鉑和奧沙利鉑/5-FU/LV。奧沙利鉑是合成的二氨基環(huán)己垸鉑化合物，是第三代順鉑藥物，它引起鉬-DNA加合物的形成，破壞DNA的完整性。奧沙利鉬是在結(jié)腸直腸癌中顯示功效的第一個鉑化合物(Raymond等人，AnnalsofOncology,9:1053-1071，2004;Math6等人，Biomedicine&Pharmacotherapy,43:237-250,2004)。最近FDA批準(zhǔn)奧沙利鉑/5-FU/LV的聯(lián)合治療作為一線治療用于結(jié)腸直腸癌患者。在結(jié)腸直腸癌患者中，奧沙利鉑/5-FU/LV(50n/。)的響應(yīng)率優(yōu)于5-FU/LV的響應(yīng)率。在具有結(jié)腸38腫瘤的BDF-1小鼠中，檢查PHY906對奧沙利鉑、5-FU/LV和奧沙利鉑/5-FU/LV的抗腫瘤活性的作用。將小鼠分成八組(每組中N=5):(A)對照載體；(B)組用奧沙利鉑治療；(C)組用5-FU/LV治療；(D)組用奧沙利鉑/5-FU/LV治療；(E)組用PHY906治療；(F)組用PHY906加奧沙利鉑治療；(G)組用PHY906力卩5-FU/LV治療；和(H)組用PHY906加奧沙利鉑加5-FU/LV治療。結(jié)果顯示，PHY906能增強奧沙利鉑和奧沙利鉑/5-FU/LV的抗腫瘤活性，分別如圖35和36所示。奧沙利鉑/5-FU/LV聯(lián)合治療中所用的劑量導(dǎo)致100°/。的動物死亡率。然而，數(shù)據(jù)顯示，PHY906不僅能將死亡率減少至60%,而且能延遲由奧沙利鉑/5-FU/LV引起的動物死亡的發(fā)生，如圖37所示。除了用奧沙利鉑/5-FU/LV治療的動物外，在藥物治療組中沒有動物在治療過程中發(fā)生體重下降。由于死亡，不能發(fā)現(xiàn)PHY906是否可預(yù)防由奧沙利鉑/5-FU/LV引起的體重下降，如圖38所示。C.討論在小鼠中檢查了PHY906對奧沙利鉑、5-FU/LV、奧沙利鉑/5-FU/LV、吉西他濱/奧沙利鉑、多柔比星和沙立度胺的抗腫瘤活性的作用。結(jié)果顯示，PHY906可增強奧沙利鉑、奧沙利鉑/5-FU/LV、吉西他濱/奧沙利鉑、多柔比星和沙立度胺的抗腫瘤活性，如圖30、33、34、35和36所示。結(jié)果還顯示，PHY906不僅能將死亡率減少至60%，而且能延遲由奧沙利鉑/5-FU/LV引起的動物死亡的發(fā)生，如圖37所示。如前所述，PHY906是四種不同草藥組成的傳統(tǒng)中草藥制劑，它己經(jīng)在約1800年中被用于治療胃腸疾病，在正經(jīng)歷化學(xué)治療的癌癥患者中，這些疾病中的一些是通常觀察到的副作用。在小鼠結(jié)腸直腸癌模型中，除了增強許多抗癌藥如CPT-ll、5-FU、CPT-ll/5-FU/LV、VP-16、L-OddC、奧沙利鉑的抗腫瘤功效外，還發(fā)現(xiàn)PHY906能減少化學(xué)治療的誘發(fā)的毒性，包括體重下降和死亡。在人肝細(xì)胞異種移植小鼠模型中，PHY906與5-FU的口服前藥卡培他濱、多柔比星、沙立度胺或CPT-ll共同給藥，在小鼠胰腺癌模型中，PHY906與吉西他濱、奧沙利鉑、吉西他濱/奧沙利鉑共同給藥。研究顯示，PHY906能顯著增強化學(xué)治療藥物的治療指數(shù)。研究還顯示，在動物模型中共同給藥PHY906和CPT-ll/5-FU/LV、PHY906和卡培他濱、以及PHY906和吉西他濱沒有改變CPT-ll、5-FU、卡培他濱、吉西他濱或其各自的代謝物的藥物動力學(xué)曲線。生化研究顯示，PHY906制劑具有廣泛的藥理學(xué)活性。PHY906作用的潛在機理包括(l)通過抑制MDR增強化學(xué)治療藥物的細(xì)胞攝?。?2)抑制NF-kB活性；(3)抑制MMP活性；和(4)抑制血管發(fā)生。這些臨床前體內(nèi)研究為臨床機構(gòu)開發(fā)PHY906提供了基本原理。目前已經(jīng)開放I/II期開放標(biāo)記劑量遞增臨床試驗的患者登記，以評價PHY906與卡培他濱的組合在治療肝細(xì)胞癌中的作用。D.總結(jié)PHY906是由4種不同草藥組成的傳統(tǒng)中草藥制劑，它已經(jīng)在約1800年中被用于治療胃腸(GI)疾病，包括腹瀉、惡心和嘔吐。這些副作用在進行癌癥化學(xué)治療的患者中極為常見，從而產(chǎn)生如下可能性使用PHY906來緩和癌癥患者中的這些癥狀，改善他們的生活質(zhì)量。在具有腫瘤的小鼠模型中，通過減少死亡率和體重下降，PHY906能顯著減少由基于CPT-ll和基于奧沙利鉑的化學(xué)治療誘發(fā)的宿主毒性。要注意，在結(jié)腸直腸癌、胰腺癌和肝癌小鼠模型中，PHY906可增強各種化學(xué)治療藥物的抗腫瘤活性，包括CPT-ll、CPT-ll/5-FU/LV、沙立度胺、卡培他濱、多柔比星、吉西他濱、奧沙利鉑和吉西他濱/奧沙利鉬。PHY906沒有顯著改變基于CPT-ll、基于CPT-ll/5-FU/LV、基于卡培他濱或基于吉西他濱的治療的藥物動力學(xué)或組織分布。PHY906作用的機理是多因素的，包括調(diào)節(jié)各種細(xì)胞因子、增強細(xì)胞滲透性和活性化合物的轉(zhuǎn)運、抑制MMP活性和調(diào)節(jié)NF-kB表達(dá)。已經(jīng)開發(fā)了化學(xué)和生物學(xué)指紋的綜合圖，以確保PHY90產(chǎn)品的一致性。在l/IIa期結(jié)腸直腸癌患者的臨床試驗中，對于患有晚期結(jié)腸直腸癌的患者，用CPT-ll/5-FU/LV(Saltz用藥法)作為一線治療或用單獨的CPT-ll作為二線治療，研究該草藥制劑作為潛在的細(xì)胞毒性保護劑的作用。正在進行第二個臨床試驗，以確定PHY906是否能增強卡培他濱在肝細(xì)胞癌患者中的抗腫瘤活性。應(yīng)理解上述討論和實施例僅作為對某些優(yōu)選實施方案的詳細(xì)描述。因此，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員顯而易見的是，在不背離本發(fā)明精神和范圍的情況下，可以進行各種修改和等同替換。本專利申請中確定的所有雜志文章、其他參考文獻、專利和專利申請均被全文引入作為參考。上面的具體描述僅用于清楚理解的目的，不應(yīng)從中理解為不必要的限制，因為修改對本領(lǐng)域技術(shù)人員將是明顯的。盡管已經(jīng)結(jié)合特定實施方案描述了本發(fā)明，但是將理解能夠進行進一步修改，本申請用于包括一般符合本發(fā)明機理的任何變化、應(yīng)用或適應(yīng)，包括從本
發(fā)明內(nèi)容衍生至本發(fā)明所屬領(lǐng)域已知或慣例的實踐，它們適用于上文所列的主要特征且屬于所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。在說明書正文中未給出完全引用的參考文獻本文引用的所有參考文獻均被全文引入。BienvenuJA,MonneretG,GutowskiMC.等人CytokineassaysinhumanseraandtissuesToxicology129:55-61(1998).Bleiberg,H.:CPT-llinGastrointestinalCancer.EuropeanJournalofCancer,Vol.35，No.3,371-379,1999.Bleiberg,H.,Cvitkovic，E.:CharacterizationandclinicalmanagementofCPT-ll(irinotecan)-inducedadverseevents:TheEuropeanperspective.Eur.J.Cancer32A(Suppl3):S18-S23,1996.CalabresiP.和ChabnerBA:ChemotherapyofNeoplasticDiseases,Goodman&Gilman'sThePharmocologicalBasisofTherapeutics,NinthEdition,SectionX:1225-1232，1996.ChabnerBA,AllegraCJ,CurtGA，CalabresiP.:AntineoplasticAgents,Goodman&Gilman'sThePharmocologicalBasisofTherapeutics,NinthEdition,Chapter51:1233-1287.ChenJ.丄W,WuYangPC,等人ProfilingexpressionpatternsandisolatingdifferentiallyexpressedgenesbycDNAmicroarraysystemwithcolorimetrydetection.Genomics51:313-324(1998).Chu，X-Y，Kato，Y，Ued^K.等人BiliaryExcretionMechanismofCPT畫llandItsMetabolitesinHumans:InvolvementofPrimaryActiveTransporters.CancerRes.58:5137-5143,1998.DouillardJ.,CunninghamD.,RothA.，GermaJ.，JamesR.，KarasekP.，JandikP.,IvesonT.，CarmichaelJ.,GruiaG.，DembakM.,SlbaudD.,RougierP.:ArandomizedphaseIIItrialcomparingIrinotecan+5FU/FollnicAcid(FA)tothesamescheduleof5FU/FAinpatients(pts)withmetastaticcolorectalcancer(MCRC)asfrontlinechemotherapy(CT),Proc.ASCO,Vol.18，233a，1999.Gilman，M.1993.Ribonucleaseprotectionassay.InCurrentProtocolsinMolecularBiology,Vol.1.(Ausubel，F(xiàn),M.，R.Brent，R.E.Kingston,D.D.Moore，J,G.Seidman,J.A.SmithandK.Stuhl，eds.),pp4.7.1-4.7.8，JohnWileyandSons,Inc.,NewYork.GuoX,Lerner-TungM，ChenHX，ChangCN，ZhuJL,ChangCP,PizzomoG，Lin,TS，ChengYC.5-Fluoro-2pyrimidinone,Aliveraldehydeoxidase-activatedprodrugof5-fluorouracil.BiochemPharm,49，1111-1116(1995).GuptaE，Mick民RamirezJ，WangX,LestingiTM,VokesEE,RatainMJ:Pharmacokineticandpharmacodynamicevaluationofthetopoisomeraseinhibitoririnotecanincancerpatients.JClinOncol15:1502-1510,1997.HaazM.C.，Rivory,L.,Riche，C.，等人Metabolismofirinotecan(CPT醫(yī)11)byhumanhepaticmicrosomes:participationofcytochromeP-4503Aanddruginteractions.CancerRes58:468-472(1998).HaniOkaHiroshi,TakiNoKoSuke:Applicationof212formulaofKampoMedicine.KabusikiKaishya，Tokyo,Japan,1998.HsuH.禾卩HsuC.,CommonlyusedChineseherbalformulas;CompanionHandbook,OhaiPress.Joulia^J.，Pinguet，F(xiàn).，Ychou,M.,Duffour，J.，Astre，C.andBressolle，F(xiàn).:PlasmaandSalivaryPharmacokineticsof5-Fluorouracil(FU)inPatientswithMetastaticColorectalCancerReceivingFUBolusPlusContinuousInfiisionwithHigh-doseFolinicAcid.EuropeanJournalofCancer,Vol.35,No.2，26-301,1999.KanedaN.，NagataH.,FurutaT.,YokokuraT.:MetabolismandpharmacokineticsofthecamptothecinanalogueCPT畫llinthemouse.CancerRes50:1715-1720,1990.KivistoK.T.，KroemerH.K.禾口EichelbaumM.TheroleofhumancytochromeP450enzymesinthemetabolismofanticanceragents:implicationsfordruginteractions.BrJ.ClinPharmacol40:523-530(1995》KoimaK.,等人，Long-termadministrationofAsho-saiko-to敏ncreasecytochromeP-450mRNAlevelinmouseliver.Biol.Pharm.Bull.21:426-428,1998.LombardiV.R.M，GarciaM禾卩CacabelosL.R.R.Characterizationofcytokineproduction,screeningoflymphocytesubsetpatternsandinvitroapoptosisinhealthyandAlzheimer'sDisease(AD)individuals.JournalofNeuroi腿unol97:163-171(1999).MillerCL禾卩EavesCJ.Expansioninvitroofadultmurinehematopoieticstemcellswithtransplantablelympho-myeloidreconstitutingability.Proc.Natl.Acad.Sci.94:13648-13653(1997).MoriK.，HiroseT.,MachidaS.，TominagaK.:Kampomedicinesforthepreventionofirinotecan-induceddiarrheainadvancednon-smallcelllungcancer.GanToKagakuRyoho25:1159-63,1998.MaritaM.,NagaiE.，HagiwaraH.，AburadaM.,YokoiT.，KamatakiT.:Inhibitionofbeta-glucuronidasebynaturalglucuronidesofkampomedicinesusingglucuronideofSN-38(7-ethyl-10-hydroxycamptothecin)asasubstrate.Xenobiotica23:5-10,1993.Peters,G.禾卩vanGroeninger,C.:Clinicalrelevanceofbiochemicalmodulationof5-fluorouracil.AnnalsofOncology2:469-480，1991.Pinedo，H.禾卩Peters,G..Fluorouracil:BiochemistryandPharmacology.JournalofClinicalOncology,Vol.6，No.10(October),1633-1664，1988.PizzornoG.，WiegandR.，LentzS.和HandschumacherR.,BrequinarPotentiates5-FluorouracilantitumoractivityinaMurinemodelcolon38tumorbytissue-specificmodulationofuridinenucleotidepools.CancerRes.,52:1660-1665,1992.RobyC.A.,AndersonGD和DryerDA等人StJohn'sWort:EffectonCYP3A4activity.Clin.Pharmacol.Ther,67,451-457(2000).SalibaF，HagipantelliR，MissetJ-L,BastianG，vassalG,BonnayM，HeraitP,CoteC,MahjoubiM,MignardD,CvitkovicE:Pathophysiologyandtherapyinirinotecan-induceddelayed-onsetdiarrheainpatientswithadvancedcolorectalcancer:Aprospectiveassessment.JClinOncol16:2745-2751,1998.SaltzLB，LockerPK，PlrottaN,ElfringGL,MillerLL:WeeklyIrinotecan(CPT-ll)，Leucovorin(LV)，andFluorouracil(FU)issuperiortodailyx5■LV/FUinpatients(PTS)withpreviouslyuntreatedmetastaticcolorectalcancer(CRC)，Proc.ASCO,Vol.18，233a，1999.Stucky畫Marshall,L.:NewAgentsinGastrointestinalMalignancies:Part1:IrinotecaninClinicalPractice,CancerNursing,22(3》212-219，1999.TakasunaK,TakehiroH，HirohashiM，KatoM,等人Involvementofb-glucuronidasei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