專利名稱：一種治療心力衰竭的中藥組合物及其口服制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心力衰竭的中藥組合物及其口服制劑，屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
隨著人口老齡化進(jìn)程的加快和高血壓、冠心病等常見心血管病發(fā)病率的上升，心力衰竭(心衰)的患病率正逐漸升高。我國統(tǒng)計(jì)資料顯示，慢性心衰患者高達(dá)1.9％，有360萬人患慢性心衰，這部分人群2年死亡率為37％，6年內(nèi)死亡率82％。美國的統(tǒng)計(jì)資料顯示，美國有490萬心衰患者，并且每年有40～70萬新患者，人群中心衰的患病率約為1.5～2.0％，而65歲以上人群可達(dá)6～10％。因心衰住院的費(fèi)用是用于所有惡性腫瘤的2倍。在過去40年中，由于心衰導(dǎo)致的死亡增加了6倍，心衰是主要心血管病中發(fā)病率顯著增加的唯一的病癥。心衰正在成為21世紀(jì)的重要公共衛(wèi)生問題。心血管疾病已成為人類健康的極大威脅。這種患者數(shù)目巨大的臨床疾病，因?yàn)槿狈Π踩行У闹委熕幬铮灰暈樾难艿慕^癥。
心衰是各種心臟疾病導(dǎo)致心功能不全的一種綜合征，心肌收縮力下降使心排出量不能滿足機(jī)體代謝的需要。一旦出現(xiàn)心衰，大部分患者就步入一個(gè)進(jìn)行性惡化的過程。因此，心衰是一種嚴(yán)重危害人類健康的疾病，是老年人死亡的主要原因之一。
目前，心衰是許多國家和地區(qū)唯一明顯上升的主要心血管病癥，其主要原因是人口老齡化和對其他主要心血管病治療效果的改善，使冠心病、高血壓以及其他患者生存時(shí)間延長，發(fā)生心衰的機(jī)會(huì)增加。從國外資料看，西方國家冠心病和高血壓發(fā)病率目前比較穩(wěn)定，變化趨勢處于持平狀態(tài)，而心衰的發(fā)病仍明顯上升。我國冠心病和高血壓發(fā)病仍有上升趨勢，人口老齡化趨勢和西方國家近似。因此，可以預(yù)計(jì)，我國心衰的發(fā)病會(huì)呈明顯升高趨勢，人群中心衰患者人數(shù)不斷擴(kuò)大，對我國心血管病和老年病防治領(lǐng)域構(gòu)成新的重要挑戰(zhàn)，有必要加強(qiáng)這一方面的臨床醫(yī)學(xué)研究。
中藥是世界上歷史悠久的天然藥物之一，在針對心力衰竭的治療中，具有一定的優(yōu)勢和特色。從祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)認(rèn)為，心力衰竭屬于中醫(yī)學(xué)的“驚悸”、“怔忡”、“喘證”、“心痹”等范疇。在心力衰竭發(fā)生發(fā)展過程中，氣虛血瘀水停是其基本病理機(jī)制，故而治療心力衰竭當(dāng)以益氣為治病之本，活血利水為治病之標(biāo)，標(biāo)本兼顧為主。然而在我國傳統(tǒng)的中醫(yī)藥治療方面，一直沒有療效非常確切的藥物，大多數(shù)中成藥均是在經(jīng)驗(yàn)方的基礎(chǔ)上進(jìn)行藥味加減，并結(jié)合西醫(yī)的治療措施。既沒有針對疾病進(jìn)行深入的研究，也沒有開發(fā)出具有獨(dú)特療效的中藥新藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的首要目的是提供一種療效顯著的治療心力衰竭的中藥組合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供以這種治療心力衰竭的中藥組合物為有效成分的口服制劑。
本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供這種中藥組合物的制備方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種治療心力衰竭的中藥組合物，由下述重量份數(shù)的原料制成黃芪30～50份、丹參15～20份、制附子15～20份、茯苓15～20份、澤瀉15～20份、葶藶子15～20份。
各種原料的最優(yōu)選重量份數(shù)為黃芪40份、丹參17、制附子17份、茯苓17份、澤瀉17份、葶藶子17份。
其中，黃芪具有補(bǔ)氣升陽、益衛(wèi)固表、排毒生肌、利水消腫等藥理作用；丹參具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩之功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)的研究表明，黃芪和丹參均可增加心臟冠狀動(dòng)脈血流量、改善心臟功能，起到心肌細(xì)胞保護(hù)作用。此外，制附子和葶藶子具有明顯的強(qiáng)心作用，而澤瀉和茯苓則具有顯著的利尿作用。這六味藥的組合充分體現(xiàn)了中藥的特色，從患者整體水平對心力衰竭的病理生理發(fā)展過程起到抑制作用，不僅綜合了心力衰竭治療中所必須的強(qiáng)心、利尿等治標(biāo)手段，而且通過對心肌細(xì)胞的保護(hù)作用和心臟血液供應(yīng)的改善，從根本上對治療心力衰竭提出了一個(gè)合理的藥物治療手段。
上述治療心力衰竭的中藥組合物的制備方法，包括以下步驟取黃芪30～50份、丹參15～20份、制附子15～20份、茯苓15～20份、澤瀉15～20份、葶藶子15～20份；優(yōu)選黃芪40份、丹參17、制附子17份、茯苓17份、澤瀉17份、葶藶子17份；制法以上六味，取丹參3～5份(優(yōu)選4份)，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與黃芪等其余五味各加5～7倍量(優(yōu)選6倍量)60～80％(優(yōu)選70％)乙醇，加熱回流提取2～3次(優(yōu)選2次)，每次1～2小時(shí)(優(yōu)選1.5小時(shí))，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇(65～75℃，-0.08Mpa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度為1.35(60℃)的稠膏。藥渣再加7～9倍量(優(yōu)選8倍量)水，煎煮1～3小時(shí)(優(yōu)選2小時(shí))，濾過，濾液減壓濃縮(65～75℃，-0.08Mpa)至相對密度為1.35(60℃)的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，減壓干燥(65～75℃，-0.08Mpa)，所得干膏粉碎成細(xì)粉。
將所得的中藥組合物作為活性組分，添加藥劑學(xué)可接受的輔料，制成治療心力衰竭的口服制劑。所述口服制劑，包括膠囊、片劑、顆粒劑、沖劑、丸劑和散劑等。
所述輔料選自淀粉、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖中的一種或幾種。
一種治療心力衰竭的膠囊的制備方法，將上述所得干膏粉碎成細(xì)粉，加適量淀粉，混勻，用80～90％(優(yōu)選85％)乙醇制成顆粒，過20目篩，60℃干燥，整粒，裝膠囊。使用0號膠囊，每粒膠囊含0.35g。
此外，還可以運(yùn)用本領(lǐng)域習(xí)之的傳統(tǒng)或現(xiàn)代制藥技術(shù)，添加藥劑學(xué)可接受的輔料或賦型劑，將上述藥物組合物進(jìn)一步加工制成各種適于口服的劑型，如丸劑、片劑、顆粒劑、沖劑、散劑等。由于本發(fā)明的創(chuàng)新性貢獻(xiàn)在于提供了作為活性組分的藥物組合物，因此所有含該活性成分的制劑均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的服用方法和劑量溫水送服，一日兩次，每次2粒，每粒膠囊含0.35g。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提供了一種由六味中藥組成的藥物組合物，即現(xiàn)代中藥復(fù)方，其成分明確，療效可靠，質(zhì)量易控，并提出該藥物組合物的制備方法。同時(shí)結(jié)合心力衰竭在中西醫(yī)方面不同的發(fā)病機(jī)制研究結(jié)果，針對心力衰竭的病理生理機(jī)制，起到阻止心臟功能降低的作用，在心力衰竭的早期和晚期都起到良好的治療作用。
下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，并非對本發(fā)明的限制，凡依照本發(fā)明公開內(nèi)容所作的任何本領(lǐng)域的等同替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。


圖1為各組動(dòng)物心臟系數(shù)(HW/BW，g/Kg)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖2為空白對照組的正常心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖3為假手術(shù)組的正常心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖4為心力衰竭模型組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖5為本發(fā)明低劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖6為本發(fā)明中劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖7為本發(fā)明高劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖8為陽性藥物治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。
圖9為導(dǎo)管插入心室后各組典型血壓圖例，縱坐標(biāo)顯示血壓值(mmHg)，橫坐標(biāo)顯示在1.8sec內(nèi)記錄的各組血壓曲線。A空白對照組(normal control)，B假手術(shù)模型組(sham-operational group)，C疾病模型組(heart failure model group)，D本發(fā)明低劑量組(XLJN 0.15g/kg group)，E本發(fā)明中劑量組(XLJN 0.50g/kg group)，F(xiàn)本發(fā)明高劑量組(XLJN 1.50g/kg group)，G西藥治療組(positive treatment control)。
圖10為多導(dǎo)生理儀檢測的左心室收縮期血壓(mmHg)最大值統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖11為多導(dǎo)生理儀檢測的左心室舒張末期血壓(mmHg)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖12為多導(dǎo)生理儀檢測的各組動(dòng)物心率(Beat/sec)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖13為多導(dǎo)生理儀檢測的各組動(dòng)物Max dP/dt(mmHg/s)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖14為多導(dǎo)生理儀檢測的各組動(dòng)物Min dP/dt(mmHg/s)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖15為多導(dǎo)生理儀檢測的各組動(dòng)物Tau(ms)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖16為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組IVSd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖17為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組LVIDd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖18為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組LVPWd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖19為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組IVSs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖20為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組LVIDs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖21為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組LVPWs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖22為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組FS(％)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
圖23為超聲多普勒儀檢測的實(shí)驗(yàn)各組EF(％)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1.藥物組合物的制備處方黃芪400g、丹參170g、制附子170g、茯苓170g、澤瀉170g、葶藶子170g；制法以上六味，取丹參40g，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與黃芪等其余五味各加6倍量70％乙醇，加熱回流提取2次，每次1.5小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇(65～75℃，-0.08Mpa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度為1.35(60℃)的稠膏。藥渣再加8倍量水，煎煮2小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮(65～75℃，-0.08Mpa)至相對密度為1.35(60℃)的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，減壓干燥(65～75℃，-0.08Mpa)，得干膏即為本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例2.藥物組合物的制備處方黃芪300g、丹參150g、制附子150g、茯苓150g、澤瀉150g、葶藶子150g；制法以上六味，取丹參30g，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與其余黃芪等五味各加六倍量80％乙醇，加熱回流提取3次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇(65～75℃，-0.08Mpa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度為1.35(60℃)的稠膏。藥渣再加9倍量水，煎煮3小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮(65～75℃，-0.08Mpa)至相對密度為1.35(60℃)的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，減壓干燥(65～75℃，-0.08Mpa)，得干膏即為本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例3.藥物組合物的制備處方黃芪500g、丹參200g、制附子200g、茯苓200g、澤瀉200g、葶藶子200g；制法以上六味，取丹參50g，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與其余黃芪等五味各加六倍量60％乙醇，加熱回流提取2次，每次1小時(shí)，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇(65～75℃，-0.08Mpa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度為1.35(60℃)的稠膏。藥渣再加7倍量水，煎煮1小時(shí)，濾過，濾液減壓濃縮(65～75℃，-0.08Mpa)至相對密度為1.35(60℃)的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，減壓干燥(65～75℃，-0.08Mpa)，得干膏即為本發(fā)明的藥物組合物。
實(shí)施例4.制備膠囊實(shí)施例1獲得的全部藥物組合物干膏粉碎成細(xì)粉，加適量淀粉調(diào)整總量至350g，混勻，用85％乙醇制成顆粒，過20目篩，60℃干燥，整粒，裝0號膠囊，共制成1000粒，即得。
推薦的服用方法和劑量溫水送服，一日兩次，每次2粒。
實(shí)施例5.腹主動(dòng)脈縮窄造成后負(fù)荷性心功能不全模型的構(gòu)建一.實(shí)驗(yàn)材料(1)動(dòng)物Wistar雄性大鼠，84只，體重250～280g；維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司。
(2)戊巴比妥鈉，購自中國醫(yī)藥公司北京公司；批號900105(3)青霉素，購自華北制藥股份有限公司；批號U0501606
二.實(shí)驗(yàn)方法選用體重約為220～300g的Wistar大鼠，使用20％烏拉坦1g/kg進(jìn)行腹腔注射麻醉；戊巴比妥鈉；無菌條件下，沿腹中線切開皮膚，分離肌層，打開腹腔；在腎動(dòng)脈分枝稍上處找到腹主動(dòng)脈，并分離此動(dòng)脈；在游離腹主動(dòng)脈處放置直徑為27gauge針頭，用7-0號線結(jié)扎；抽出細(xì)線，造成腹主動(dòng)脈縮窄模型，縮窄面積為原腹主動(dòng)脈的25％；關(guān)閉腹腔，分層縫合肌層與皮膚層；術(shù)后給予青霉素肌肉注射防止感染；檢測大鼠血壓、心率等指標(biāo)。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果主動(dòng)脈狹窄造成左室血液流出道受阻，左室后負(fù)荷加重，心臟首先動(dòng)用代償機(jī)制，產(chǎn)生心肌肥厚，當(dāng)代償機(jī)制失去代償能力時(shí)，可產(chǎn)生心力衰竭。試驗(yàn)中，主動(dòng)脈縮窄部位在腎動(dòng)脈分枝稍上處的腹主動(dòng)脈。24小時(shí)以后，通過多導(dǎo)生理儀tail-cuff元件，測量鼠尾動(dòng)脈壓，手術(shù)組動(dòng)脈壓升高50mmHg±20mmHg，證明手術(shù)成功。
實(shí)施例6.本發(fā)明對模型動(dòng)物心臟系數(shù)的影響一.實(shí)驗(yàn)材料(1)動(dòng)物按實(shí)施例5方法結(jié)扎腹主動(dòng)脈構(gòu)建的Wistar雄性大鼠心衰模型，體重約為250g～280g(平均值為265g)，84只(2)本發(fā)明藥物(實(shí)施例4)由山東瑞友藥品檢測新技術(shù)開發(fā)咨詢中心提供，商品名暫定為欣力膠囊，受試批號030904，棕色，氣香味苦，使用0.5％羧甲纖維素助懸；(3)ACEI類——卡托普利批號國藥準(zhǔn)字H37020828；購自山東濰坊制藥有限公司；(4)β-受體阻滯劑——倍他樂克批號國藥準(zhǔn)字H32025390；購自阿斯利康制藥有限公司；(5)本發(fā)明膠囊溶酶羧甲纖維素，購自北京益利化學(xué)有限公司。
二.實(shí)驗(yàn)方法(一)分組情況1.高劑量組12只，本發(fā)明藥物使用量為每只0.22g，藥液濃度為0.5g/ml。
2.中劑量組12只，本發(fā)明藥物使用量為每只0.044g，藥液濃度為0.1g/ml。
3.低劑量組12只，本發(fā)明藥物使用量為每只0.0088g，藥液濃度為0.02g/ml。
4.西醫(yī)聯(lián)合用藥組12只，采用ACEI類藥物和β-受體阻滯劑聯(lián)合應(yīng)用，ACEI類藥物的給藥劑量為273mg/kg，藥液濃度為16.5mg/ml；β-受體阻滯劑的給藥劑量為1820mg/kg，藥液濃度為110mg/ml。
5.疾病模型組12只，僅做腹主動(dòng)脈縮窄手術(shù)，灌胃給予生理鹽水；，6.假手術(shù)對照組12只，進(jìn)行類似于腹主動(dòng)脈縮窄手術(shù)的操作，但是不對主動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎，術(shù)后灌胃以本發(fā)明膠囊溶酶。
7.空白對照組正常飼養(yǎng)，不給予任何處理。
(二)試驗(yàn)內(nèi)容大體解剖并計(jì)算心臟指數(shù)沿腹中線剪開胸腔；進(jìn)一步剪開心包，觀察心臟大體形態(tài)；計(jì)算心臟/體重的比值。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.各組動(dòng)物心臟系數(shù)(HW/BW，g/Kg)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

注Vs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；vs.Model，△P＜0.05，△△P＜0.01；vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01.
假手術(shù)組與疾病模型組、陽性治療組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異Vs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；所有用藥組均能夠顯著降低心臟指數(shù)vs.Model，△P＜0.05，△△P＜0.01；本發(fā)明高劑量組優(yōu)于陽性治療組vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，見圖1。
實(shí)施例7.本發(fā)明對模型動(dòng)物心肌組織的作用一.實(shí)驗(yàn)材料同實(shí)施例6。
二.實(shí)驗(yàn)方法心肌組織病理切片觀察(H.E.染色)
注射20mM KCl處死動(dòng)物，使心臟處于舒張期；取出心臟，固定于10％的中性甲醛中；制作石蠟切片；進(jìn)行HE染色；二甲苯中脫蠟5～10分鐘—→換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5～10分鐘—→無水乙醇5分鐘—→90％乙醇2分鐘—→70％乙醇2分鐘—→蒸餾水2分鐘。蘇木素染色液5～10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)，之后95％乙醇浸泡5秒；伊紅染色液染色30秒～2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。之后脫水、透明、封片95％乙醇脫水2分鐘—→換用新鮮的95％乙醇再脫水2分鐘—→二甲苯透明5分鐘—→換用新鮮二甲苯，透明5分鐘；用中性樹膠或其它封片劑封片。顯微鏡下觀察，細(xì)胞核呈藍(lán)色，而細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果各組動(dòng)物心臟經(jīng)HE染色后，于顯微鏡下觀察，存在顯著的形態(tài)學(xué)差異。下面就典型形態(tài)學(xué)改變進(jìn)行描述。
圖2為空白對照組的正常心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)，顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)本組心肌細(xì)胞排列整齊；細(xì)胞核藍(lán)染、清晰，未見染色質(zhì)邊集現(xiàn)象，核仁清晰，細(xì)胞核呈圓或橢圓形；胞漿著色均勻，心肌細(xì)胞肌纖維紅染，肌絲清晰可見，心肌細(xì)胞閏盤清楚，橫紋明顯，肌小節(jié)結(jié)構(gòu)完整。心肌細(xì)胞間連接緊密；血管網(wǎng)豐富，可見均勻分布紅細(xì)胞。未見心肌肥大、纖維化、血管重構(gòu)等病變。
圖3為假手術(shù)組的正常心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。心臟形態(tài)大小正常，左右心室大小、室壁厚度正常，心肌細(xì)胞排列整齊，著色均勻，間質(zhì)分布規(guī)則，未見心肌肥大、纖維化等心血管重構(gòu)的改變；形態(tài)學(xué)上觀察與正常對照組沒有差異。
圖4為心力衰竭模型組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)心臟明顯肥大，嗜酸性明顯增強(qiáng)；其中一只大鼠左、右心室壁明顯增厚；其余大鼠心室壁略顯變薄，左、右心腔擴(kuò)大。血管壁增厚、玻璃樣變、血管周圍纖維結(jié)締組織大量增生；心肌細(xì)胞排列不整、著色不均勻，心肌細(xì)胞間連接松散，間質(zhì)大量纖維化。
圖5為本發(fā)明低劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)該組部分動(dòng)物(如圖A)心臟左心室結(jié)構(gòu)改變，表現(xiàn)為左心室前部游離壁稍厚，室間隔未見增厚，左心室乳頭肌外膜可見少量纖維增生。部分動(dòng)物(如圖B)心肌細(xì)胞排列不整、著色不均勻，心肌細(xì)胞間連接松散，但是纖維增生不明顯。
圖6為本發(fā)明中劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。心臟左心室稍大，左心室前部游離壁稍厚，室間隔未見增厚，心肌細(xì)胞著色均勻，排列整齊；但細(xì)胞間連接顯松散，心肌細(xì)胞間分布著小血管、毛細(xì)血管。偶見血管網(wǎng)周圍少量纖維增生。
圖7為為本發(fā)明高劑量治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。心臟形態(tài)正常，左、右心室大小、室壁厚度正常，心肌細(xì)胞著色均勻，細(xì)胞間連接緊密，未見纖維結(jié)締組織增生。心肌細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞核藍(lán)染、清晰，未見染色質(zhì)邊集現(xiàn)象，核仁清晰，細(xì)胞核呈圓或橢圓形；胞漿著色均勻，心肌細(xì)胞肌纖維紅染，肌絲清晰可見，心肌細(xì)胞閏盤清楚，橫紋明顯，肌小節(jié)完整。心肌細(xì)胞間連接緊密；心肌細(xì)胞間血管網(wǎng)豐富，血管內(nèi)可見散在分布的紅細(xì)胞。未見心肌肥大、纖維化、血管重構(gòu)等病變。
圖8為陽性藥物治療組的心臟左心室切片(A，B分別為兩只動(dòng)物的心室)(10×20)。顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)部分動(dòng)物心臟明顯肥大，嗜酸性增強(qiáng)；左、右心室壁增厚，左、右心腔擴(kuò)大，血管周圍纖維結(jié)締組織大量增生；心肌細(xì)胞排列不整、著色不均勻，心肌細(xì)胞間質(zhì)存在纖維化。部分動(dòng)物切片表現(xiàn)接近于正常對照組。
實(shí)施例8.本發(fā)明對模型動(dòng)物心功能指標(biāo)的影響一.實(shí)驗(yàn)材料多導(dǎo)生理儀(Powerlab，ML305)，其余同實(shí)施例6。
二.試驗(yàn)方法多導(dǎo)生理儀檢測心功能指標(biāo)用肝素化的生理鹽水(125U/ml)充盈壓力換能器，確認(rèn)壓力換能器和導(dǎo)管內(nèi)沒有氣泡；設(shè)置Chart 5軟件，channel 1為ECG，channel 2為HR，channel 3為LVP 844壓力換能器，channel 4為dP/dt，用血壓計(jì)對channel 3進(jìn)行校正，換算為壓力單位(mmHg)，保存為設(shè)置文件；腹腔注射戊巴比妥鈉，45mg/kg(若工作液濃度為1.5％，則0.3ml/100g)，使其麻醉；進(jìn)行腳趾刺激反射，判斷大鼠是否深度麻醉。降大鼠固定到鼠板上，腹部向上，固定好四肢及頭部。
測量大鼠心電圖。將心電圖導(dǎo)線的陽極和陰極分別與大鼠的左上肢和右下肢相連，不接地線，此為II導(dǎo)聯(lián)的心電圖。也可以將心電圖導(dǎo)線的陽極和陰極分別與大鼠的左上肢和右上肢相連，地線與右下肢相連，此為I導(dǎo)聯(lián)的心電圖。打開chart 5的ECG(channel 1)的Bio Amp，時(shí)間設(shè)為2ms，高通1kHz，低通0.3Hz，選中50Hz濾波。調(diào)節(jié)channel 2設(shè)置，通過channel 1的ECG數(shù)據(jù)計(jì)算HR(heart rate)。待ECG波形穩(wěn)定后，記錄2min。
分離右側(cè)頸動(dòng)脈。用75％的酒精對大鼠頸部皮膚消毒，左手持彎鑷提起頸部皮膚，右手持剪刀剪開自胸骨至下顎的皮膚后，分離組織，并將迷走神經(jīng)與頸動(dòng)脈完全分離干凈。從頸動(dòng)脈下穿過兩條7-0的棉線，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，并在頸動(dòng)脈中間部位打一個(gè)松的活結(jié)，準(zhǔn)備扣住插入的插管；再檢查一遍導(dǎo)管和壓力換能器內(nèi)是否有氣泡，提起中間的活扣，用動(dòng)脈夾夾閉頸動(dòng)脈的近心端，盡量往近心端夾，以留出較長的一段便于插管；用夾閉的分離出的頸動(dòng)脈的遠(yuǎn)心端，用維納斯剪剪出一個(gè)V型的開口，V型口的底端朝向心臟；左手提起遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線，右手用直眼科鑷持導(dǎo)管插管，確認(rèn)導(dǎo)管進(jìn)入動(dòng)脈后，用預(yù)先打好的松結(jié)將動(dòng)脈和導(dǎo)管扎緊。松開近心端的動(dòng)脈夾，打開三通，即可動(dòng)脈壓的波形。如果有壓力沒有波形，或者波形的形狀不對，可能時(shí)導(dǎo)管有些堵，用少量肝素化的生理鹽水(0.5ml)沖一下即可。待大鼠穩(wěn)定2～3min，記錄下2min動(dòng)脈壓數(shù)據(jù)。
將導(dǎo)管沿著頸動(dòng)脈向心臟方向前進(jìn)，關(guān)注動(dòng)脈壓的波形變化，當(dāng)最小壓力低于0mmHg時(shí)可以確認(rèn)導(dǎo)管已經(jīng)進(jìn)入左心室。進(jìn)入心室后，待小鼠穩(wěn)定3min后開始記錄數(shù)據(jù)。總共記錄3次，每次3mi n，每兩次相隔5min；記錄完畢后，一人向外撤出導(dǎo)管，同時(shí)另一人扎死中間的結(jié)。引頸處死大鼠。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2通過多導(dǎo)生理儀檢測各組血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果(mean±SD)

NotesVs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；vs.Model，△P＜0.05，△△P＜0.01；vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01
圖10為左心室收縮期血壓(mmHg)最大值統(tǒng)計(jì)結(jié)果，顯示表明各組間均不存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)。
圖11為左心室舒張末期血壓(mmHg)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，疾病模型組和欣力膠囊低、中劑量組動(dòng)物左心室舒張末壓增高明顯Vs.Sham，**P＜0.01＝，提示舒張功能下降；欣力膠囊高劑量組、陽性治療組LVEDP增高也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異Vs.Sham，*P＜0.05；欣力膠囊用藥組和陽性治療組均能夠明顯改善LVEDP增高現(xiàn)象vs.Model，△△P＜0.01；欣力膠囊低、中劑量組差于陽性治療組vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
圖12為各組動(dòng)物心率(Beat/sec)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，顯示表明各組間均不存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p＞0.05，說明麻醉狀態(tài)穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可比性。
圖13為各組動(dòng)物Max dP/dt(mmHg/s)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組、欣力膠囊低劑量組和陽性治療組與假手術(shù)組均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異Vs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；所有用藥組均能夠顯著提高M(jìn)ax dP/dtvs.Model，△△P＜0.01，其中欣力膠囊高劑量組能夠完全改善Max dP/dt的下降，與假手術(shù)組不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異p＞0.05；陽性治療組不能完全改善Max dP/dt的下降，但優(yōu)于欣力膠囊低劑量組vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。
圖14為各組動(dòng)物Min dP/dt(mmHg/s)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組、欣力膠囊低劑量組和陽性治療組與假手術(shù)組均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異Vs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；所有用藥組均能夠顯著提高M(jìn)in dP/dtvs.Model，△△P＜0.01，其中欣力膠囊中、高劑量組與假手術(shù)組不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)；陽性治療組不能完全改善Min dP/dt的下降，而且差于欣力膠囊高劑量組vs.Positive，▲P＜0.05。
圖15為各組動(dòng)物Tau(ms)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組、欣力膠囊低劑量組與假手術(shù)組均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異Vs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；所有用藥組均能夠顯著縮短Tauvs.Model，△△P＜0.01，其中欣力膠囊中、高劑量組和陽性治療組與假手術(shù)組不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＞0.05)。
實(shí)施例9.
一.試驗(yàn)材料超聲多普勒儀(Sonos 5500)同實(shí)施例6。
二.試驗(yàn)方法備皮、消毒胸前皮膚，腹腔注射戊巴比妥鈉(45mg/kg)使大鼠麻醉；使用15-MHz超聲探頭進(jìn)行M型超聲及多普勒超聲檢查。
超聲檢測指標(biāo)包括
IVSd(mm)舒張末期室間隔厚度；LVIDd(mm)左室舒張末期內(nèi)徑；LVPWd(mm)舒張末期左室后壁厚度；IVSs(mm)收縮末期室間隔厚度；LVIDs(mm)左室收縮末期內(nèi)徑；LVPWs(mm)收縮末期左室后壁厚度；LVFS(％)左室短軸縮短率，計(jì)算公式(LVDd-LVDs)/LVDd×100％；LVEF(％)射血分?jǐn)?shù)，計(jì)算公式(LVEDV-LVESV)/LVEDV×100％。
三.試驗(yàn)結(jié)果見表3圖16為實(shí)驗(yàn)各組IVSd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，顯示表明實(shí)驗(yàn)各組的舒張末期室間隔厚度均不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(p＞0.05)。
圖17為實(shí)驗(yàn)各組LVIDd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，顯示表明疾病模型組心臟左室舒張期內(nèi)徑明顯擴(kuò)大Vs.Sham，**P＜0.01，提示該組動(dòng)物心腔擴(kuò)張，出現(xiàn)心力衰竭的形態(tài)學(xué)變化；欣力膠囊低、中劑量組和陽性組內(nèi)徑也存在明顯改變Vs.Sham，*P＜0.05，同時(shí)存在治療作用vs.Model，△P＜0.05；欣力膠囊高劑量組能夠完全改善心腔擴(kuò)張Vs.Sham，P＞0.05；vs.Model，△△P＜0.01；陽性藥物組僅與疾病模型組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Positive，▲▲P＜0.01。
圖18為實(shí)驗(yàn)各組LVPWd(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果，疾病模型組心臟左室后壁厚度明顯下降Vs.Sham，**P＜0.01；vs.Positive，▲▲P＜0.01，出現(xiàn)心力衰竭的形態(tài)學(xué)變化；其他各組與疾病模型組均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Model，△△P＜0.01。
圖19實(shí)驗(yàn)各組IVSs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果維，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)各組的收縮末期室間隔厚度均不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(p＞0.05)。
圖20為實(shí)驗(yàn)各組LVIDs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組心臟左室收縮期內(nèi)徑明顯擴(kuò)大Vs.Sham，**P＜0.01，提示該組動(dòng)物心腔擴(kuò)張，出現(xiàn)心力衰竭的形態(tài)學(xué)變化；欣力膠囊低劑量組內(nèi)徑也存在明顯改變Vs.Sham，*P＜0.05，同時(shí)存在治療作用vs.Model，△P＜0.05＝；欣力膠囊中、高劑量組和陽性藥物組能夠完全改善收縮期心腔擴(kuò)張Vs.Sham，P＞0.05；vs.Model，△△P＜0.01；陽性藥物組僅與疾病模型組存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Positive，▲▲P＜0.01，同時(shí)與欣力膠囊低劑量組也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Positive，▲P＜0.05。
圖21為實(shí)驗(yàn)各組LVPWs(mm)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組心臟收縮期左室后壁厚度明顯下降Vs.Sham，**P＜0.01；vs.Positive，▲▲P＜0.01，出現(xiàn)心力衰竭的形態(tài)學(xué)變化；其他各組與疾病模型組均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Model，△△P＜0.01。
圖22為實(shí)驗(yàn)各組FS(％)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組FS值明顯下降Vs.Sham，/**P＜0.01；欣力膠囊低劑量組和陽性治療組也存在FS降低的改變Vs.Sham，*P＜0.05，但是與疾病模型組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異vs.Model，△P＜0.05；欣力膠囊高、中劑量組能夠明顯改善心臟FS值vs.Model，△P＜0.05，△△P＜0.01，其中高劑量組效果最為明顯，優(yōu)于陽性治療組vs.Positive，▲P＜0.05。
圖23為實(shí)驗(yàn)各組EF(％)統(tǒng)計(jì)結(jié)果。疾病模型組EF值明顯下降Vs.Sham，**P＜0.01；vs.Positive，▲▲P＜0.01；欣力膠囊低劑量組也存在EF降低的改變Vs.Sham，*P＜0.05；欣力膠囊低、高、中劑量組和陽性治療組均能夠明顯改善心臟FS值vs.Model，△△P＜0.01。
表3實(shí)驗(yàn)各組超聲檢測統(tǒng)計(jì)結(jié)果(n＝7～8)

NotesVs.Sham，*P＜0.05，**P＜0.01；vs.Model，△P＜0.05，△△P＜0.01；vs.Positive，▲P＜0.05，▲▲P＜0.0權(quán)利要求
1.一種治療心力衰竭的中藥組合物，由下述重量份數(shù)的原料制成黃芪30～50份、丹參15～20份、制附子15～20份、茯苓15～20份、澤瀉15～20份、葶藶子15～20份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療心力衰竭的中藥組合物，其特征在于，由下述重量份數(shù)的原料制成黃芪40份、丹參17、制附子17份、茯苓17份、澤瀉17份、葶藶子17份。
3.一種治療心力衰竭的中藥組合物的制備方法，包括以下步驟取黃芪30～50份、丹參15～20份、制附子15～20份、茯苓15～20份、澤瀉15～20份、葶藶子15～20份；以上六味，取丹參3～5份，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與其余黃芪等五味各加5～7倍量60～80％乙醇，加熱回流提取2～3次，每次1～2小時(shí)，濾過，合并濾液，65～75℃，-0.08Mpa條件下減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至60℃下相對密度為1.35的稠膏；藥渣再加7～9倍量水，煎煮1～3小時(shí)，濾過，濾液在65～75℃、-0.08Mpa條件下減壓濃縮至60℃下相對密度為1.35的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，在65～75℃、-0.08Mpa條件下減壓干燥，所得干膏粉碎成細(xì)粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種治療心力衰竭的中藥組合物的制備方法，其特征在于所述方法為黃芪40份、丹參17、制附子17份、茯苓17份、澤瀉17份、葶藶子17份；以上六味，取丹參4份，粉碎成細(xì)粉，滅菌，備用；剩余丹參與其余黃芪等五味各加5～7倍量60～80％乙醇，加熱回流提取2～3次，每次1～2小時(shí)，濾過，合并濾液，65～75℃，-0.08Mpa條件下減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至60℃下相對密度為1.35的稠膏；藥渣再加7～9倍量水，煎煮1～3小時(shí)，濾過，濾液在65～75℃、-0.08Mpa條件下減壓濃縮至60℃下相對密度為1.35的稠膏，與上述稠膏及丹參細(xì)粉混勻，在65～75℃、-0.08Mpa條件下減壓干燥，所得干膏粉碎成細(xì)粉。
5.一種治療心力衰竭的中藥口服制劑，由權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物作為活性成分，添加藥劑學(xué)可接受的輔料制成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療心力衰竭的中藥口服制劑，其特征在于所述輔料選自淀粉、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖中的一種或幾種。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療心力衰竭的中藥口服制劑，其特征在于所述口服制劑包括膠囊、片劑、顆粒劑、沖劑、丸劑和散劑等。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種治療心力衰竭的中藥口服制劑，其特征在于所述口服制劑為膠囊。
9.一種治療心力衰竭的膠囊劑的制備方法，其特征在于將權(quán)利要求3或4得到干膏粉碎成細(xì)粉后，加適量輔料，混勻，用80～90％乙醇制成顆粒，過20目篩，60℃干燥，整粒，裝膠囊。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種治療心力衰竭的膠囊劑的制備方法，其特征在于所述輔料為淀粉。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療心力衰竭的中藥組合物，由下述重量份數(shù)的原料制成黃芪30～50份、丹參15～20份、制附子15～20份、茯苓15～20份、澤瀉15～20份、葶藶子15～20份。本發(fā)明的有益效果是由六味中藥組成的藥物組合物，其成分明確，療效可靠，質(zhì)量易控，能夠針對心力衰竭的病理生理機(jī)制，起到阻止心臟功能降低的作用，在心力衰竭的早期和晚期都起到良好的治療作用。
文檔編號A61K47/36GK1817362SQ20051013424
公開日2006年8月16日 申請日期2005年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月14日
發(fā)明者惠汝太, 宋曉東, 王繼征, 汪一波, 王曉建, 劉哲, 明德前 申請人:惠汝太