專利名稱：含有維力波糖的藥物組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及含有維力波糖的組合物，具體地說涉及含有維力波糖的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及該藥物組合物的制備方法。
本發(fā)明還涉及該藥物組合物在醫(yī)藥領域中的應用。
背景技術：
維力波糖(valibose)(化學名(+)-(1S，2S，3S，4R，5R)-1-氨基-5-羥甲基-N-2-(1，3-二羥丙基)-2，3，4-環(huán)己三醇)在美國專利US 4,701,559和US4,777,294中已被公開，其結構式[I]為 維力波糖是一種α-葡萄糖苷酶抑制劑，口服后能競爭拮抗性地抑制腸道內(nèi)雙糖類水解酶(α-葡萄糖苷酶)，從而延緩了糖類的消化和吸收，進而改善餐后高血糖。餐后高血糖會使胰島素的分泌和胰島素的作用出現(xiàn)障礙，使糖代謝進一步惡化，因此糾正餐后高血糖對于防止糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)展是非常重要的。
糖尿病是一種慢性全身進行性內(nèi)分泌代謝疾病，包括胰島素依賴型糖尿病(IDDM，I型)和非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM，II型)。由于體內(nèi)胰島素的相對或絕對不足，形成持續(xù)性的高血糖，導致一些組織器官代謝異常，繼而引起它們的功能障礙及形態(tài)改變，最容易受到危害的是視網(wǎng)膜、腎臟、血管及神經(jīng)系統(tǒng)等異常。
世界衛(wèi)生組織有關糖尿病專家統(tǒng)計因糖尿病引起的失明比一般人的多10～23倍；糖尿病性壞疽和截肢比一般人的多20倍；糖尿病并發(fā)的冠心病及中風比一般人的增加2～3倍；糖尿病導致的腎功能衰竭比一般腎病多7倍；糖尿病遺傳危險率為1.90％～8.33％。目前，糖尿病并發(fā)癥所導致的死亡率僅次于心血管病、腦血管病和腫瘤的死亡率。中老年糖尿病患者常死于冠心病、心肌梗死、腦中風；青少年糖尿病患者常因并發(fā)腎功能衰竭而死亡。此外，糖尿病并發(fā)重癥感染、酸中毒、高滲性昏迷等也是主要致命原因。
目前尚沒有文獻表明單一、特定日劑量的維力波糖對血糖控制具有特別有益的作用，并因此對治療糖尿病以及與糖尿病相關的疾病特別有用，亦沒有關于含有該單一、特定日劑量的維力波糖的藥物組合物及其制備方法的報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于提供含有維力波糖的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的在于提供該組合物的制備方法。
本發(fā)明的再一個目的在于提供該組合物在制備治療和/或預防糖尿病及與糖尿病有關的疾病的藥物中的應用。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了含有維力波糖的藥物組合物，該組合物含有0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖和任選的藥學上可接受的載體。優(yōu)選的，該藥物組合物是單位劑量的組合物。
本發(fā)明所述的單位劑量是指一次給藥的劑量。例如，采用維力波糖治療糖尿病及其有關的疾病時，每次給藥2.5mg，每日給藥三次，則維力波糖藥物組合物的單位劑量為2.5mg。
適合的藥學上可接受形式的維力波糖包括藥學上可接受的鹽形式和藥學上可接受的溶劑化物形式，還包括藥學上可接受的鹽的藥學上可接受的溶劑化物形式，其中所述維力波糖為藥學上可接受的無定形態(tài)或結晶形態(tài)。
適當?shù)慕M合物含有0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、15、20、25、30、35、40、45、50mg藥學上可接受形式的維力波糖。
具體的組合物含有0.5～2.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
具體的組合物含有2.5～5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
具體的組合物含有5～10mg藥學上可接受形式的維力波糖。
具體的組合物含有10～15mg藥學上可接受形式的維力波糖。
具體的組合物含有15～50mg藥學上可接受形式的維力波糖。
優(yōu)選的組合物含有2.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
優(yōu)選的組合物含有5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
優(yōu)選的組合物含有7.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
優(yōu)選的組合物含有10mg藥學上可接受形式的維力波糖。
優(yōu)選的組合物含有15mg藥學上可接受形式的維力波糖。
特別優(yōu)選的組合物含有2.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
維力波糖的適當?shù)乃帉W上可接受的形式包括在US 4,701,559中描述的無定形態(tài)，也包括結晶形態(tài)。優(yōu)選的藥學上可接受的形式為結晶形態(tài)的維力波糖。
維力波糖的適當?shù)乃帉W上可接受的鹽形式包括鹽酸鹽、硫酸鹽、馬來酸鹽、磷酸鹽等，優(yōu)選的藥學上可接受的鹽形式為鹽酸鹽。
維力波糖的適當?shù)乃帉W上可接受的溶劑化物形式優(yōu)選水合物。
根據(jù)在US 4,701,559和US 4,777,294中公開的方法，可以制備無定形態(tài)的維力波糖及其鹽酸鹽；根據(jù)本領域技術人員所知曉的方法，可以制備維力波糖的其它藥學上可接受的鹽或溶劑化物；此外，根據(jù)本發(fā)明后述的制備方法可以制備結晶形態(tài)的維力波糖及其鹽酸鹽。
維力波糖可以以數(shù)種互變異構體形式之一存在，術語“維力波糖”包括所用這些單獨的互變異構形式或它們的混合物。
維力波糖含有手性碳原子，因此可以以多至兩種立體異構體形式存在，術語“維力波糖”包括這些單獨的異構體或異構體的混合物的異構體形式，包括外消旋物。
本發(fā)明所述的“藥學上可接受的”包括人用和獸用兩種用途，即包括人用上可接受的化合物和獸用上可接受的化合物。
為避免疑問，當在本發(fā)明中給出藥學上可接受的維力波糖的標量(包括mg量和重量％量)時，所指的標量參照維力波糖本身的量，例如2.5mg鹽酸鹽形式的維力波糖為含有2.5mg維力波糖的鹽酸鹽的量。
在本發(fā)明中，優(yōu)選維力波糖藥物組合物為單位劑量的組合物。當單位劑量小于0.5mg時，由于劑量太小達不到有效的血藥濃度，起不到治療作用；當單位劑量從0.5mg增加到2.5mg時，會出現(xiàn)較佳的治療效果；當單位劑量超過2.5mg時，在目前的動物試驗中，血藥濃度達到飽和；此外，急性毒性試驗表明維力波糖具有很高的用藥安全性。因此，當維力波糖藥物組合物的單位劑量在2.5～50mg這個范圍內(nèi)，均可以表現(xiàn)較好的治療效果，在臨床應用時，可根據(jù)需要進行選擇。本發(fā)明優(yōu)選維力波糖藥物組合物的單位劑量為2.5mg，以節(jié)約用藥成本。然而，本領域的技術人員可以理解，包括在2.5～50mg內(nèi)的其它劑量也應在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
同一藥品，劑型不同，其所用劑量也不相同。如果將本發(fā)明的維力波糖藥物組合物制備成為緩控釋制劑時，則該組合物的單位劑量會隨著每日用藥次數(shù)的減少而相應的增加。例如，將維力波糖藥物組合物制成單位劑量為2.5mg的普通口服制劑時，每日給藥三次，每次給藥2.5mg；將維力波糖藥物組合物制成每日口服給藥一次的緩控釋制劑時，該組合物的單位劑量應當約為7.5mg。本領域的技術人員可以理解，上述根據(jù)劑型改變所作的劑量調(diào)整應在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，本發(fā)明提供含有0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖和藥學上可接受的載體的藥物組合物的制備方法，該方法包括將0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖與藥學上可接受的載體混合，并且任選隨后將產(chǎn)生的組合物配制為可供給藥的形式。
優(yōu)選維力波糖的藥物組合物的可供給藥形式為單位劑量的組合物。
除特別指明外，適合的單位劑量含有多至50mg，如0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖。
其它的單位劑量包括在本說明書中所提及的那些劑量。
本發(fā)明的方法可以提供任何可方便給藥形式的維力波糖的藥物組合物，包括經(jīng)口或胃腸外給藥形式。它們特別適合制備為經(jīng)口給藥形式，特別是藥學上可接受形式的維力波糖的片劑。
在本發(fā)明的一個具體實施方案中，維力波糖藥物組合物含有藥學上可接受形式的維力波糖、崩解劑、粘合劑、稀釋劑和潤滑劑。適當?shù)谋澜鈩榻痪劬S酮；適當?shù)恼澈蟿榱u丙基甲基纖維素粘合劑；適當?shù)南♂寗槿樘?；適當?shù)臐櫥瑒橛仓徭V。
將本發(fā)明的組合物配制為可供給藥形式的方法為常規(guī)制劑方法，如壓片法。
優(yōu)選本發(fā)明可供給藥的組合物適合經(jīng)口給藥。然而，它們也適合于其它給藥途徑，如胃腸外、舌下或透皮給藥。
可供給藥的組合物可以為片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、栓劑、可復制粉劑或液體制劑(如口服或無菌胃腸外溶液或懸浮液)。
為獲得給藥的一致性，優(yōu)選本發(fā)明的組合物為單位劑型。
口服給藥的單位劑型可以為片劑和膠囊劑，它們可以含有常規(guī)賦形劑如粘合劑像糖漿、糊精、淀粉漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、羥丙基甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨醇、甘露醇、微晶纖維素、硫酸鈣或甘氨酸；壓片潤滑劑如硬脂酸鎂；崩解劑如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、交聚維酮、羥乙酸淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素或微晶纖維素或藥學上可接受的潤濕劑如十二烷基硫酸鈉、水、乙醇。
除特別指明外，優(yōu)選本發(fā)明的組合物為作為相應日劑量的適當量的單位劑型，適當?shù)膯挝粍┬秃?.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、15、20、25、30、35、40、45或50mg藥學上可接受形式的維力波糖。
本發(fā)明所述單位劑量(如前所述，即為一次給藥的劑量)的藥物組合物，可以根據(jù)需要配制成一個或多個單位劑型。例如，當單位劑量為2.5mg時，可以配制為一個含2.5mg維力波糖的片劑，也可以配制為5個含0.5mg維力波糖的片劑，還可以配制為25個含0.1mg維力波糖的片劑。本領域的技術人員可以理解，在組合物的單位劑量未作改變的前提下，單位劑型數(shù)目的調(diào)整可導致單位劑型中維力波糖含量的改變，該改變應在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
可以通過常規(guī)方法混合、填充或壓片制備固體組合物(如口服組合物)。如果需要，可以重復混合操作步驟以將所述活性組分分散于使用大量填充劑的組合物中。此類操作步驟是本領域常規(guī)的?？梢愿鶕?jù)制藥實踐中熟知的方法對片劑進行包衣，特別是用膜包衣物水溶液進行包衣。
液體組合物(如口服液體組合物)可以制備為乳液、糖漿劑或酏劑形式，或者將它們制備為干燥產(chǎn)物形式，在使用前用水或其它適當?shù)娜苊饺芙?。此類液體制劑可以含有常規(guī)的添加劑，如懸浮劑像山梨醇、糖漿、甲基纖維素、明膠、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠、氫化可食用脂肪；乳化劑如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水溶性溶媒(可以包括食用油)如杏仁油、分餾椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇的酯；防腐劑如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨醇；并且如果需要可以含有常規(guī)的矯味劑或著色劑。
胃腸外組合物(包括胃腸外給藥組合物如單位劑量組合物)可以含有所述活性化合物和無菌溶媒，根據(jù)使用的濃度，所述活性化合物可以懸浮于或溶解于該溶媒中。制備胃腸外給藥的溶液時，可以將本發(fā)明的組合物溶于注射用水中，過濾除菌，然后灌裝于適當?shù)墓苤破炕虬碴持胁⒚芊狻Ｗ詈脤⑤o助劑如局部麻醉劑、防腐劑和緩沖劑溶解于所述溶媒中。為增加穩(wěn)定性，可以將該組合物灌裝于管制瓶中后冷凍并真空去除水分。以基本相同的方法可以制備胃腸外懸浮液，但是所述活性化合物是懸浮于溶媒中而不是溶解于溶媒中，并且除菌不能通過過濾進行?？梢詫⑺龌衔锿ㄟ^暴露于環(huán)氧乙烷中滅菌，然后將其懸浮于無菌溶媒中。最好該組合物中含有表面活性劑或潤濕劑以有助于維力波糖的均勻分布。
除特別指明外，根據(jù)給藥方法的不同，本發(fā)明的組合物可以含有0.1至99％(重量)、優(yōu)選10％至60％(重量)的活性物質(zhì)。
如果需要，所述組合物可以為帶有使用說明的包裝形式。
根據(jù)本發(fā)明的再一個方面，本發(fā)明提供了上述含有0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖的藥物組合物在制備治療和/或預防糖尿病以及與糖尿病相關的疾病的藥物中的應用。
在本發(fā)明中，“糖尿病”包括I型糖尿病和II型糖尿病。
“與糖尿病相關的疾病”包括與前驅(qū)糖尿病相關的疾病、與糖尿病本身相關的疾病以及糖尿病并發(fā)癥。
“與前驅(qū)糖尿病相關的疾病”包括如胰島素抗性(包括遺傳性胰島素抗性)疾病、損害性葡萄糖耐受性和高胰島素血癥。
“與糖尿病本身相關的疾病”包括胰島素抗性高血糖，包括獲得性胰島素抗性和肥胖癥。與糖尿病本身相關的其它疾病包括高血壓；心血管疾病，特別是動脈粥樣硬化癥；某些進食性疾病，特別是那些需要調(diào)節(jié)食欲和食物攝取的疾病，如與進食過少相關的疾病像神經(jīng)性厭食，以及與進食過多相關的疾病，如肥胖癥和食欲過盛(bulimia)。與糖尿病本身相關的其它疾病包括多囊卵巢綜合癥以及類固醇誘導的胰島素抗性和妊娠糖尿病。
進一步的，所述與糖尿病相關的疾病為肥胖癥和/或食欲過盛。
進一步的，所述與糖尿病相關的疾病為糖尿病并發(fā)癥。
“糖尿病并發(fā)癥”包括急性并發(fā)癥和慢性并發(fā)癥。急性并發(fā)癥包括各種急性感染、低血糖癥、糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病乳酸性酸中毒、糖尿病高滲性昏迷。慢性并發(fā)癥系指大血管、微血管及神經(jīng)病變。糖尿病慢性并發(fā)癥包括冠心病、高血壓、腦血管病、腎臟病、眼部并發(fā)癥(視網(wǎng)膜病變、白內(nèi)障、屈光異常、糖尿病眼肌神經(jīng)病變等)、神經(jīng)病變(周圍神經(jīng)病變、植物神經(jīng)病變及中樞神經(jīng)病變)、糖尿病足、糖尿病皮膚病變、糖尿病性陽痿、糖尿病患者的高脂血癥等。糖尿病腎病，包括糖尿病性腎病、腎小球腎炎、腎小球硬化癥、腎病綜合癥、高血壓性腎硬化以及晚期腎病。
更進一步的，本發(fā)明所述糖尿病并發(fā)癥為慢性并發(fā)癥。
再進一步的，本發(fā)明所述糖尿病并發(fā)癥包括糖尿病微血管病變、糖尿病患者的高脂血癥以及糖尿病大血管病變，其中糖尿病微血管病變包括糖尿病視網(wǎng)膜微血管病變和糖尿病腎病等。
由于維力波糖為一種α-葡萄糖苷酶抑制劑，口服后能競爭拮抗性地抑制腸道內(nèi)雙糖類水解酶(α-葡萄糖苷酶)，從而延緩了糖類的消化和吸收，進而改善餐后高血糖，因此本發(fā)明所述含維力波糖的藥物組合物應當在每日就餐前或隨餐給藥，通常每日給藥1～6次，優(yōu)選每日給藥2～3次。
藥效學試驗結果表明，在本發(fā)明所選擇的劑量范圍內(nèi)，(1)維力波糖使糖尿病動物的三多癥狀明顯緩解，降低了進食量，說明維力波糖可以用于治療進食過多及其所導致的肥胖癥；(2)維力波糖明顯降低了禁食血糖、非禁食血糖、血清果糖胺、尿糖，說明維力波糖改善了高血糖動物的糖代謝，可以用于預防或治療糖尿病；(3)維力波糖明顯改善了血清NAG酶活性、血清尿素氮含量、腎臟肥大以及腎小管上皮細胞糖原沉積等糖尿病早期腎病變或視網(wǎng)膜微血管病變的特征，說明維力波糖可預防或治療糖尿病微血管病變等疾病；(4)維力波糖明顯降低了血甘油三酯和膽固醇的水平及心臟指數(shù)，說明維力波糖具有改善糖尿病性脂代謝異常的作用，可用于預防或治療糖尿病大血管病變及高脂血癥等疾病。綜上所述，本發(fā)明所述含維力波糖的藥物組合物能夠預防和/或治療糖尿病及與糖尿病相關的疾病。
急性毒性試驗結果表明，在本發(fā)明所選擇的劑量范圍內(nèi)維力波糖具有很好的用藥安全性。
如上所述，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了單一、特定日劑量的維力波糖對血糖控制具有特別有益的作用，并因此對治療糖尿病以及與糖尿病相關的疾病特別有用。
為了更好地理解本發(fā)明的本質(zhì)，下面結合附圖，通過對本發(fā)明較佳實施方式的描述，詳細說明但不限制本發(fā)明。
附圖的簡要說明

圖1為維力波糖對STZ糖尿病大鼠尿糖的影響Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，維力波糖(0.4mg)、維力波糖(0.9mg)、維力波糖(1.6mg)為維力波糖給藥組，劑量分別為0.4mg/kg體重、0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重；與對照組Con比較，*P＜0.05，***P＜0.001；n＝8-10圖2為維力波糖對STZ糖尿病大鼠腎臟、心臟指數(shù)的影響Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，維力波糖(0.4mg)、維力波糖(0.9mg)、維力波糖(1.6mg)為維力波糖給藥組，劑量分別為0.4mg/kg體重、0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重；與對照組Con比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001n＝8-10圖3為正常大鼠組大鼠腎臟病理切片光鏡照片光鏡照片表明，正常大鼠組大鼠腎臟結構正常，未見病變。
圖4為STZ糖尿病大鼠對照組大鼠腎臟病理切片光鏡照片光鏡照片表明，高血糖對照組大鼠大部分腎小球囊纖維樣滲出，近曲管直部上皮細胞漿溶解或空泡變性。
圖5為維力波糖0.4mg/kg體重給藥組大鼠腎臟病理切片光鏡照片光鏡照片表明，維力波糖0.4mg/kg體重給藥組大鼠少部分腎小球囊纖維樣滲出，近曲管直部上皮細胞漿溶解或空泡變性。
圖6為維力波糖0.9mg/kg體重給藥組大鼠腎臟病理切片光鏡照片光鏡照片表明，維力波糖0.9mg/kg體重給藥組大鼠腎小球未見明顯變化，上皮細胞空泡變性情況減少。
圖7為維力波糖1.6mg/kg體重給藥組大鼠腎臟病理切片光鏡照片光鏡照片表明，維力波糖1.6mg/kg體重給藥組大鼠腎小球未見明顯變化，上皮細胞空泡變性情況減少。
具體實施例方式
在以下藥效學試驗和急性毒性試驗中所使用的維力波糖均為由深圳太太藥業(yè)有限公司提供的結晶形態(tài)維力波糖，其它試驗材料如無特別說明，均為市售購買產(chǎn)品。該結晶形態(tài)維力波糖及其鹽酸鹽的具體制備方法和結晶形態(tài)維力波糖的物理性質(zhì)測定結果如下I、制備方法1、原料Validamine的制備原料Validamine可以由現(xiàn)有技術文獻中公開的方法制備，例如.J.Antibiotics2457-58，1971和Chem.Lctt.，1989，725-728(Harii，s.j.T.Iwasa & Y.Kameda)中描述的方法，本發(fā)明的制備工藝中，原料Validamine的制備是通過由井崗霉素A(購自浙江錢江生物化學有限公司，含量60％)經(jīng)水解得到validoxylamineA，再由validoxylamineA與N-溴代丁二酰亞胺(NBS)反應，得到validamine。反應式如下 井崗霉素A Validoxylamine A Validoxylamine A Validamine Valienamine
將反應產(chǎn)物用CG-50 NH4+弱酸型陽離子樹脂柱，0.1N氨水洗脫分離得到純的Validamine和Valienamine。
2、結晶形態(tài)維力波糖的制備反應式如下 Validamine Schiff 維力波糖在2600毫升無水甲醇(分析純)中，加入Validamine104克(587毫摩爾)、1，3二羥基丙酮82.3克(FRUKA 97％，886毫摩爾)、冰醋酸10.4毫升、氰基硼氫化鈉76.5克(營口三征化工有限公司97％，1.18摩爾)，回流反應6小時。反應結束后，蒸除甲醇，加水500毫升，用2N HCl酸化至pH1.5，再用NaOH中和至pH6。分別經(jīng)過PURLITE C100H+型強酸型陽離子樹脂柱(水/0.5N氨水)、YD CG-50 NH4+弱酸型陽離子樹脂柱(0.1N氨水)、HZ-202 OH-強堿型陰離子樹脂柱(H2O)，TLC跟蹤檢測(展開劑正丁醇∶甲醇∶氯仿∶氨水＝5∶4∶2∶5；顯色劑0.2％茚三酮乙醇溶液；Rf＝0.46(validamine)；Rf＝0.52(valibose))。合并茚三酮呈陽性與Valibose對照品Rf值相同的組分，減壓濃縮至干，用乙醇溶解，加晶種析晶，得93克。收率63.1％，mp88-89℃。
3、結晶形態(tài)維力波糖的鹽酸鹽的制備方法取2克結晶形態(tài)的維力波糖(按照前述方法制備)，加水溶解，攪拌下滴加2N HCl溶液，至pH3，繼續(xù)攪拌2小時，經(jīng)活性炭層析柱，H2O洗脫，收集洗脫液(TLC跟蹤)，將獲得的樣品濃縮至干，用甲醇重結晶，過濾、干燥，得1克結晶形態(tài)的維力波糖鹽酸鹽。
II、結晶形態(tài)維力波糖物理性質(zhì)測定通過對上述制備方法獲得的結晶形態(tài)維力波糖進行核磁共振分析和元素分析發(fā)現(xiàn)，所獲得的結晶形態(tài)維力波糖與無定形維力波糖粉末得到了完全相同的結果，表明本試驗獲得的維力波糖與美國專利US 4,701,559中已被公開的維力波糖具有完全相同的化學結構，結構式均為(+)-(1S，2S，3S，4R，5R)-1-氨基-5-羥甲基-N-2-(1，3-二羥丙基)-2，3，4-環(huán)己三醇)。
1、核磁共振分析儀器Varian 500結果1H-NMR(D2O，500MHZ)δ1.32(1H，ddt，J＝3，1.5，15)，1.80-1.87(1H，m)，1.92(1H，dt，J＝3，15)，2.78(1H，m，J＝5.5)，3.15(1H，dd，J＝3.5)，3.25(1H，dd，J＝10.5).3.50-3.55(2H，m)，3.57(2H，t，J＝4.5)，3.62(2H，t，J＝5.5)，3.65(1H，dd，J＝5，11.5)，3.72(1H，dd，J＝3.5，11)；13C-NMR(D2O，75MHZ)δ28.61，38.97，55.63，59.28，61.31，62.70，63.19，73.91，74.21，75.342、元素分析(C10H21NO6)儀器德國ELEMENTAR公司vario EL元素分析儀計算值(％)C，47.80；H，8.42；N，5.57實測值(兩次)(％)C，47.90/47.84；H，8.56/8.57；N，5.41/5.45藥效學試驗實施例1以維力波糖為試驗藥物，考察了不同日劑量的維力波糖對鏈脲霉素糖尿病大鼠一般狀況、血糖、果糖胺、尿糖、血NAG酶活性、血清尿素氮和肌酐含量、腎臟病理變化以及血脂(包括甘油三酯、膽固醇和游離脂肪酸)和心臟指數(shù)的影響。
在鏈脲霉素(STZ)糖尿病大鼠喂食高糖飼料的長期實驗中(5周)，當大鼠的日劑量≥0.4mg/kg體重時，(1)維力波糖使糖尿病動物的三多癥狀明顯緩解，降低了進食量，說明維力波糖可以用于治療進食過多及其所導致的肥胖癥；(2)維力波糖明顯降低了禁食血糖、非禁食血糖、血清果糖胺、尿糖，說明維力波糖改善了高血糖動物的糖代謝，可以用于預防或治療糖尿病；(3)維力波糖明顯改善了血清NAG酶活性、血清尿素氮含量、腎臟肥大以及腎小管上皮細胞糖原沉積等糖尿病早期腎病變或視網(wǎng)膜微血管病變的特征，說明維力波糖可預防或治療糖尿病微血管病變等疾病；(4)維力波糖明顯降低了血甘油三酯和膽固醇的水平及心臟指數(shù)，說明維力波糖具有改善糖尿病性脂代謝異常的作用，可用于預防或治療糖尿病大血管病變及高脂血癥等疾病。
如上所述，提示當大鼠的日劑量≥0.4mg/kg體重時，維力波糖可能有利于預防和治療糖尿病及與糖尿病相關的疾病。
一、試驗材料(一)試驗藥物1、維力波糖化學合成的化合物，由深圳太太藥業(yè)有限公司提供(制備方法如上所述)。批號為20030801，分子量251，外觀呈白色粉末，純度為99.8％，實驗時用去離子水配制成所需濃度。
(二)試驗動物1、鏈脲霉素(streptozotocin，簡稱STZ)糖尿病大鼠正常SD大鼠腹腔注射鏈脲霉素58mg/kg(以pH 4.0檸檬酸緩沖液配制)，72小時后預測血糖，選用血糖在250-450mg/dl的大鼠進行實驗分組。
2、正常大鼠正常雄性SD大鼠，140-160g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，許可證編號SCXK(京)2002-0003，飼養(yǎng)于中國醫(yī)學科學院藥物研究所二級動物房。
二、試驗方法根據(jù)α-葡萄糖苷酶抑制劑的作用機理特點，并結合維力波糖預試驗研究結果，選取四組鏈脲霉素(STZ)糖尿病大鼠，每組10只。對照組以高蔗糖飼料(蔗糖∶基礎飼料＝1∶1)喂養(yǎng)，其余三組分別飼以含不同劑量維力波糖(0.4mg/kg體重、0.9mg/kg體重、1.6mg/kg體重，為實驗結束后根據(jù)該組每天平均攝食量計算所得)的高蔗糖飼料(0.4mg/100g料、1mg/100g料、2.5mg/100g料)，同時設一組正常大鼠(n＝10)飼以正常飼料作為正常動物組，以上各組均自由攝食飲水，每天觀察動物一般狀況，記錄攝食量和飲水量，一周后取血測血糖，三周后取血測血脂(包括甘油三酯、膽固醇和游離脂肪酸)、果糖胺、血N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)活性、血清尿素氮及肌酐含量等生化指標，四周后用代謝籠收集尿液測6小時尿糖含量，實驗結束時，斷頭處死動物，稱體重、腎及心臟重量，腎臟用10％福爾馬林固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，蘇木素伊紅染色，光鏡下觀察腎臟病理變化。
三、試驗結果1、攝食量和飲水量的變化結果見表1。結果表明，維力波糖給藥組的糖尿病大鼠攝食量和飲水量多的癥狀均極顯著的減輕。
表1 維力波糖對STZ糖尿病大鼠攝食量、飲水量的影響(X±SD)

與Con比較，***p＜0.001；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，其他為維力波糖給藥組2、維力波糖對STZ糖尿病大鼠血糖的影響結果見表2。結果表明，給藥18天時，維力波糖給藥組的未禁食血糖含量均極顯著的低于對照組，禁食血糖含量也不同程度降低。
表2 維力波糖對STZ糖尿病大鼠血糖的影響(X±SD)

與Con比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，其他為維力波糖給藥組3、維力波糖對STZ糖尿病大鼠血清果糖胺的影響果糖胺是血漿白蛋白與葡萄糖分子在非酶糖化過程中經(jīng)過分子重排形成的醛酮縮合物。由于白蛋白濃度在體內(nèi)的穩(wěn)定性，故血清果糖胺水平亦比較穩(wěn)定，不受攝食的影響，它反映1-2周內(nèi)的血糖水平的變化。試劑盒購自南京建成生物工程研究所。
結果見表3。結果表明，維力波糖0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重給藥組的血清果糖胺水平均顯著低于對照組。
表3 維力波糖對STZ糖尿病大鼠果糖胺的影響(X±SD)

與Con比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，其他為維力波糖給藥組4、維力波糖對STZ糖尿病大鼠尿糖含量的影響結果見圖1。結果表明，維力波糖給藥組的尿糖含量均極顯著的低于對照組。
5、維力波糖對STZ糖尿病大鼠血清NAG酶活性的影響NAG酶(N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶)是廣泛存在于腎實質(zhì)的一種溶酶體酶，與尿液白蛋白排量和視網(wǎng)膜微血管病變程度關系密切，是反映微血管病變的敏感指標。隨著微血管病變加重，NAG酶活性增加(終點法測定)。
結果見表4。結果表明，維力波糖0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重給藥組大鼠NAG酶活性降低，且NAG酶活性降低的程度隨著給藥量的增加而增大。
表4 維力波糖對STZ糖尿病大鼠血清NAG酶活性的影響(X±SD)

與Con比較，*P＜0.05，***P＜0.001；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，其他為維力波糖給藥組6、維力波糖對STZ糖尿病大鼠腎臟指數(shù)和心臟指數(shù)的影響結果見圖2。結果表明，維力波糖給藥組的動物腎臟指數(shù)均極顯著的降低，心臟指數(shù)也不同程度的低于對照組。
7、維力波糖對STZ糖尿病大鼠血清尿素氮和肌酐含量的影響測定血中尿素氮和肌酐含量可以了解腎功能的變化。血清尿素氮、肌酐含量升高，則表示腎功能異常。測定按照北京中生生物工程技術公司的試劑盒方法進行。
結果見表5。結果表明，維力波糖給藥組的動物血清尿素氮水平均不同程度減少。
表5 維力波糖對STZ糖尿病大鼠血清尿素氮和肌酐含量的影響(X±SD)

與對照組Con比較，*P＜0.05，**P＜0.01；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠組，其他為維力波糖給藥組8、維力波糖對STZ糖尿病大鼠腎臟病理變化的影響實驗各組大鼠腎臟用10％福爾馬林固定，石蠟包埋，常規(guī)切片，蘇木素伊紅染色，光鏡觀察。
結果見圖3～7。結果表明，正常大鼠腎臟結構正常，未見病變；高血糖對照組大鼠大部分腎小球囊纖維樣滲出，近曲管直部上皮細胞漿溶解或空泡變性；維力波糖0.4mg/kg體重給藥組大鼠少部分腎小球囊纖維樣滲出，近曲管直部上皮細胞漿溶解或空泡變性；維力波糖0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重給藥組腎小球未見明顯變化，上皮細胞空泡變性情況減少。說明維力波糖對STZ誘發(fā)糖尿病大鼠腎臟病變具有一定的保護作用。
9、維力波糖對STZ糖尿病大鼠血脂的影響高血糖動物常伴有脂質(zhì)代謝異常，表現(xiàn)為膽固醇、甘油三酯及游離脂肪酸等異常升高。血脂用酶方法測定，膽固醇和甘油三酯試劑盒購自北京中生生物工程技術公司，游離脂肪酸試劑盒購自日本東京第一化學藥品株式會社。
結果見表6。結果表明維力波糖在三個給藥劑量下均對血甘油三酯水平有降低作用，且維力波糖1.6mg/kg體重給藥組的血甘油三酯水平極顯著的低于對照組；同時維力波糖0.9mg/kg體重給藥組的血膽固醇水平低于對照組；而維力波糖在三個劑量下均對血游離脂肪酸水平?jīng)]有影響。
表6 維力波糖對STZ糖尿病大鼠血脂的影響(X±SD)

與Con比較，*P＜0.05；n＝9-10；Nor為正常大鼠組，Con為STZ糖尿病大鼠對照組，其他為維力波糖給藥組四、試驗結論STZ糖尿病大鼠長期實驗(5周)結果表明，當日劑量≥0.4mg/kg體重時，維力波糖使糖尿病大鼠三多癥狀明顯減輕(表1)；禁食血糖、非禁食血糖、血清果糖胺水平及尿糖含量等均明顯低于對照組(表2、3，圖1)，說明維力波糖有利于高血糖動物糖代謝的改善，并有利于改善進食過多的癥狀。維力波糖0.9mg/kg體重和1.6mg/kg體重給藥組的血清果糖胺濃度降低說明動物的血糖已得到較穩(wěn)定的控制。
STZ糖尿病大鼠喂食高糖飼料可加速糖尿病大鼠與糖尿病有關的疾病如糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展，表現(xiàn)為對照組血清NAG酶活性增加、腎臟肥大、腎小管上皮細胞糖原沉積以及血膽固醇和甘油三酯的水平升高等，而維力波糖給藥組動物NAG酶活性降低(表4)，腎臟指數(shù)和心臟指數(shù)明顯降低(圖2)，血清尿素氮水平減少(表5)，腎小球病變及腎小管上皮細胞空泡變性改善(圖3～7)，血膽固醇和甘油三酯水平降低(表6)，說明當日劑量≥0.4mg/kg體重時，維力波糖在改善高血糖動物糖代謝異常的同時，有利于延緩與糖尿病相關的疾病如糖尿病微血管病變、腎病變、高脂血癥及大血管病變等的發(fā)生和發(fā)展。
上述試驗結果還表明，當維力波糖的劑量為0.4mg/kg體重/天時，即可表現(xiàn)出一定的療效；在試驗所采用的劑量范圍(0.4～1.6mg/kg體重/天)內(nèi)，維力波糖改善鏈脲霉素(STZ)糖尿病大鼠糖尿病及與糖尿病有關的疾病隨劑量的加大而增強；且當日劑量大于0.9mg/kg體重時，維力波糖的藥效增加不明顯。
維力波糖的急性毒性試驗以維力波糖為試驗藥物，進行了大、小鼠急性毒性試驗。在試驗中，觀察了維力波糖單次給予大鼠、小鼠所產(chǎn)生的急性毒性反應和死亡情況，分別得出大鼠、小鼠經(jīng)口灌胃給藥和腹腔注射給藥的最大耐受劑量。結果表明健康清潔級SD大鼠和ICR小鼠分別單次經(jīng)口灌胃(po)和腹腔注射(ip)給予維力波糖，大、小鼠在整個試驗期間均無明顯異常反應。經(jīng)口灌胃(po)給予維力波糖的最大耐受劑量為大鼠＞5g/kg；小鼠＞7.5g/kg。腹腔注射給予維力波糖的最大耐受劑量為大鼠＞3g/kg；小鼠＞4.5g/kg。
含有維力波糖藥物組合物的單位劑量確定依據(jù)本研究中，按照本領域技術人員所知的常規(guī)方法來確定維力波糖的用藥劑量。首先用小鼠粗略地探索維力波糖的中毒劑量或致死劑量，然后用小于中毒量的劑量作為應用劑量，由此確定小鼠的最小有效劑量約為2mg/kg；由上述急性毒性試驗結果可知，大鼠、小鼠分別單次經(jīng)口灌胃(po)給予維力波糖的最大耐受劑量為大鼠＞5g/kg，小鼠＞7.5g/kg，大鼠、小鼠分別單次腹腔注射(ip)給予維力波糖的最大耐受劑量為大鼠＞3g/kg，小鼠＞4.5g/kg，由此可推測出維力波糖用于人體的劑量范圍會很寬，具有很高的用藥安全性；又由上述藥效學試驗結果可知，當維力波糖的劑量為0.4mg/kg體重/天時，即可表現(xiàn)出一定的療效，在試驗所采用的劑量范圍(0.4～1.6mg/kg體重/天)內(nèi)，維力波糖改善鏈脲霉素(STZ)糖尿病大鼠糖尿病及與糖尿病有關的疾病隨劑量的加大而增強，且當日劑量大于0.9mg/kg體重時，血藥濃度達到飽和，維力波糖的藥效增加不明顯。
用藥劑量的確定還考慮到維力波糖的藥代試驗結果，該藥以AUC0-t平均值計算，在1.0mg.kg-1劑量下大鼠灌胃給藥后的絕對生物利用度平均為15.26％；以AUC0-t平均值計算，在0.297mg·kg-1劑量下犬灌胃給藥后的絕對生物利用度為26.27％，因此預計維力波糖在體內(nèi)有20％左右的血漿結合和吸收，理論用量將增加20％左右。
綜合考慮以上試驗結果，參考動物與人體的每公斤體重劑量折算系數(shù)表(醫(yī)用實驗動物學，施新猷編著，西安，陜西科學技術出版社，1989)按照式“人體的劑量(mg/kg)＝0.16×大鼠的劑量(mg/kg)”進行換算，確定維力波糖人體口服用藥劑量范圍時還考慮到患者臨床用藥時的順應性。
由此確定維力波糖人體口服用藥劑量為1mg～150mg/60kg體重/天，優(yōu)選5mg～30mg/60kg體重/天，特別優(yōu)選7.5mg～15mg/60kg體重/天。
由于通常每日給藥1～3次，所以本發(fā)明所述含維力波糖的藥物組合物的單位劑量范圍為0.5～50mg，優(yōu)選1mg～15mg，特別優(yōu)選2.5mg～7.5mg，最優(yōu)選2.5mg。
含有維力波糖的藥物組合物的制備實施例2I處方

原料藥維力波糖按照上面描述的方法制備，其他輔料為市售購買商品。
II制法按照以下步驟進行制備1、用75％乙醇配制4％羥丙基甲基纖維素溶液。
2、在適宜容器中將維力波糖與四分之一量乳糖混合均勻，過80目篩，置高速攪拌制粒機中，加入剩余量乳糖、交聚維酮，混合均勻，加入羥丙基甲基纖維素溶液，開啟制粒刀制粒。
3、將制好的顆粒在熱風循環(huán)烘箱中干燥，干燥好的顆粒用搖擺式顆粒機20目篩整粒。將制好的顆粒，硬脂酸鎂置三維混合機中混合。
4、將混合好的顆粒用壓片機壓成片劑，對于含0.5、2.5、5和10mg活性成分的片劑片重為120mg，對于含50mg活性成分的片劑片重為250mg。
5、將上述片芯放入高效包衣機中包衣，保持片床溫度40℃～45℃，包衣增重2.0％～4.0％。
以上對本發(fā)明較佳實施方式的描述并不限制本發(fā)明，本領域技術人員可以根據(jù)本發(fā)明作出各種改變或變形，只要不脫離本發(fā)明的精神，均應屬于本發(fā)明所附權利要求的范圍。
權利要求
1.一種含有維力波糖的藥物組合物，其特征在于該組合物含有0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖和任選的藥學上可接受的載體。
2.權利要求1所述的組合物，其特征在于該組合物含有0.5～2.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
3.權利要求1所述的組合物，其特征在于該組合物含有2.5～5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
4.權利要求1所述的組合物，其特征在于該組合物含有5～10mg藥學上可接受形式的維力波糖。
5.權利要求1所述的組合物，其特征在于該組合物含有2.5mg藥學上可接受形式的維力波糖。
6.權利要求1～5所述的組合物，其特征在于該組合物含有結晶形態(tài)的維力波糖。
7.權利要求1～5所述的組合物，其特征在于該組合物含有維力波糖的鹽酸鹽。
8.一種制備權利要求1所述藥物組合物的方法，該方法包括將0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖與藥學上可接受的載體混合。
9.權利要求8所述的方法，其特征在于制備的組合物為單位劑型。
10.權利要求8所述的方法，其特征在于制備的組合物為片劑。
11.一種權利要求1所述的藥物組合物在制備治療糖尿病及與糖尿病相關的疾病的藥物中的應用。
12.權利要求11所述的應用，其特征在于所述與糖尿病相關的疾病為糖尿病并發(fā)癥。
13.權利要求11所述的應用，其特征在于所述與糖尿病相關的疾病為肥胖癥和/或食欲過盛。
14.一種權利要求1所述的藥物組合物在制備預防糖尿病及與糖尿病相關的疾病的藥物中的應用。
15.權利要求14所述的應用，其特征在于所述與糖尿病相關的疾病為糖尿病并發(fā)癥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有維力波糖的藥物組合物及其制備方法，該組合物含有0.5～50mg藥學上可接受形式的維力波糖和任選的藥學上可接受的載體。本發(fā)明還公開了該藥物組合物在制備治療和/或預防糖尿病及與糖尿病有關的疾病中的應用。
文檔編號A61P3/10GK1806796SQ20051000232
公開日2006年7月26日 申請日期2005年1月17日 優(yōu)先權日2005年1月17日
發(fā)明者閆鵬, 常弘杰, 李志明, 張驗軍, 朱嘉蓉 申請人:深圳太太藥業(yè)有限公司