專利名稱：Sti－571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療M2b型急性髓性白血病的方法，特別是一種將STI-571應(yīng)用于治療M2b型急性髓性白血病的新用途。
背景技術(shù)：
STI-571是一種蛋白酪氨酸激酶活性抑制劑，商品名格力維(Glivec)，是瑞士諾華公司推出的一種治療慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)的藥物。該藥可抑制BCR-ABL酪氨酸激酶活性，誘導(dǎo)CML白血病細(xì)胞凋亡，從而治療CML。
急性髓性白血病(AML)是一種基因組發(fā)生動(dòng)態(tài)變化的造血干/祖細(xì)胞疾病，發(fā)病率在2～9.2/10萬人口。在治療方案的選擇上臨床醫(yī)生可將病人劃分為三類1)宜選用標(biāo)準(zhǔn)方案治療；2)可選用標(biāo)準(zhǔn)方案，也可選用探索性治療方案；3)宜選用探索性治療方案治療。從總體上說，迄今AML的治療仍可由于治療相關(guān)性死亡或更多地由于耐藥性的產(chǎn)生而導(dǎo)致失敗。因而大力開展探索性治療的基礎(chǔ)、臨床研究，進(jìn)一步改善AML病人預(yù)后，仍是我們迫切需要解決的問題。
M2b型急性髓性白血病(AML M2b)以具有t(8；21)染色體易位為特點(diǎn)，約占所有AML的10.4％。與其他類型AML一樣，化療仍是AML M2b的首選治療方法?；熕幍淖饔脵C(jī)制包括抑制DNA合成、直接破壞DNA、干擾DNA轉(zhuǎn)錄、抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶II、影響蛋白質(zhì)功能及影響細(xì)胞周期等。雖然化療可獲得較高的緩解率，但繼發(fā)/原發(fā)性耐藥的產(chǎn)生及化療的毒副作用可最終導(dǎo)致治療的失敗。酪氨酸激酶活性抑制劑STI-571能否用于AML M2b的臨床治療，迄今未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，以克服上述現(xiàn)有治療方法的不足，為AML M2b病人提供一種新的治療方法，以進(jìn)一步提高AML M2b病人療效、改善其預(yù)后。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，將STI-571應(yīng)用于AML M2b的治療。
其中，STI-571在0.1～5μM濃度下作用于AML M2b細(xì)胞24～72小時(shí)，可抑制AML M2b細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)AML M2b細(xì)胞凋亡。其具體作用對(duì)象為AML M2b細(xì)胞株Kasumi-1細(xì)胞及AML M2b病人原代白血病細(xì)胞。
還可將STI-571和阿糖胞苷聯(lián)合使用，其中，STI-571在0.5～5μM和阿糖胞苷在10～50μM濃度下，可誘導(dǎo)AML M2b細(xì)胞于24～72小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)凋亡。STI-571可增強(qiáng)阿糖胞苷的抗白血病作用由于STI-571可抑制AML M2b細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)其凋亡并增強(qiáng)阿糖胞苷的抗白血病作用，因而對(duì)AML M2b的治療有臨床應(yīng)用價(jià)值。本發(fā)明為AML M2b病人的治療提供新的方法，或?qū)TI-571與化療藥聯(lián)合應(yīng)用減少化療藥的用量，既提高其療效又減輕其毒副作用，對(duì)AML M2b的臨床治療有重要意義。
以下結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。


圖1為STI-571抑制Kasumi-1細(xì)胞C-KIT蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性效果圖。
圖2為STI-571與Ara-C對(duì)復(fù)發(fā)AML M2b病人原代白血病細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用效果圖。
具體實(shí)施例方式
有關(guān)本發(fā)明的詳細(xì)說明及技術(shù)內(nèi)容，現(xiàn)結(jié)合

如下發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，在M2b型急性髓性白血病(AML M2b)病人中III型受體酪氨酸激酶家族成員C-KIT的突變率及其mRNA表達(dá)水平均較其他類型的急性髓性白血病(AML)明顯為高，可作為AMLM2b病人治療的新靶點(diǎn)。
發(fā)明人同時(shí)發(fā)現(xiàn)，酪氨酸激酶活性抑制劑STI-571可抑制C-KIT受體酪氨酸激酶活性，抑制AML M2b細(xì)胞株Kasumi-1細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)Kasumi-1細(xì)胞凋亡；用STI-571處理從復(fù)發(fā)的AML M2b病人骨髓分離得來的白血病細(xì)胞，可引起這些新鮮白血病細(xì)胞的凋亡，并可明顯增強(qiáng)化療藥阿糖胞苷(Ara-C)的凋亡誘導(dǎo)作用，使Ara-C誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率增加20％左右。
以上結(jié)果表明，包括STI-571在內(nèi)的酪氨酸激酶抑制劑對(duì)AMLM2b病人的治療具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值，可作為一種新的治療方法為改善AML M2b病人預(yù)后提供幫助。這一發(fā)現(xiàn)為C-KIT受體酪氨酸激酶抑制劑用于AML M2b病人的治療提供了直接的依據(jù)并奠定了基礎(chǔ)。
為了驗(yàn)證這一理論對(duì)于醫(yī)療實(shí)踐的作用，發(fā)明人作了以下實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證其治療效果實(shí)施例1用受體酪氨酸激酶抑制劑STI-571處理AML M2b細(xì)胞株Kasumi-1細(xì)胞并檢測(cè)其蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性，發(fā)現(xiàn)STI-571在0.1～5μM濃度下作用24～72小時(shí)可抑制其PTK活性。其作用效果請(qǐng)參見圖1，其中PTK活性用紫外分光光度計(jì)在450nm的吸光值(OD450)表示。縱坐標(biāo)為PTK活性。橫坐標(biāo)為STI-571劑量和作用時(shí)間，劑量單位為μM，時(shí)間單位為小時(shí)。
實(shí)施例2用MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)研究了STI-571對(duì)Kasumi-1細(xì)胞增殖的影響，發(fā)現(xiàn)STI-571在0.1～5μM濃度下作用24～72小時(shí)可明顯抑制Kasumi-1細(xì)胞的增殖。
實(shí)施例3用Annexin V檢測(cè)STI-571對(duì)Kasumil-1的凋亡誘導(dǎo)作用，發(fā)現(xiàn)STI-571在0.1～5μM濃度下作用24～72小時(shí)可誘導(dǎo)Kasumi-1細(xì)胞凋亡，凋亡率達(dá)50％～70％作用。
實(shí)施例4用STI-571處理從復(fù)發(fā)的AML M2b病人骨髓中分離到的新鮮白血病細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)STI-571在0.5～5μM濃度下作用24～72小時(shí)不僅可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，還可明顯增強(qiáng)化療藥阿糖胞苷的凋亡誘導(dǎo)作用，使阿糖胞苷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡增加20％～40％。其作用效果請(qǐng)參見圖2，其中縱坐標(biāo)表示細(xì)胞凋亡的百分率，橫坐標(biāo)為STI-571及阿糖胞苷的量，單位為μM。
以上結(jié)果表明，針對(duì)C-KIT受體酪氨酸激酶的STI-571可通過抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而對(duì)AML M2b有治療作用。
以上所介紹的，僅僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，不能以此來限定本發(fā)明實(shí)施的范圍，即本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的一般技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明所作的等同的變化，以及本領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員熟知的改進(jìn)、變化，都應(yīng)仍屬于本發(fā)明專利涵蓋的范圍。
權(quán)利要求
1.一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于將STI-571應(yīng)用于AML M2b的治療。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于STI-571在0.1～5μM濃度下作用AMLM2b細(xì)胞24～72小時(shí)內(nèi)可出現(xiàn)細(xì)胞凋亡。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于其作用對(duì)象為AML M2b細(xì)胞株Kasumi-1細(xì)胞及AML M2b病人原代白血病細(xì)胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于STI-571在0.5～5μM濃度作用下AML M2b細(xì)胞發(fā)生凋亡所需時(shí)間為24～72小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于可將STI-571和阿糖胞苷聯(lián)合使用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將STI-571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，其特征在于STI-571在0.5～5μM濃度下和阿糖胞苷在10～50μM濃度下作用于AML M2b細(xì)胞，在24～72小時(shí)可誘導(dǎo)凋亡。
全文摘要
一種將STI－571應(yīng)用于治療急性髓性白血病的新用途，將STI－571應(yīng)用于AML M2b的治療，還可以將STI－571和阿糖胞苷聯(lián)合使用。本發(fā)明為AML M2b病人的治療提供新的方法，或與化療藥聯(lián)合應(yīng)用減少化療藥的用量，既提高其療效又減輕其毒副作用，對(duì)AML M2b的臨床治療有重要意義。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1626087SQ20041005373
公開日2005年6月15日 申請(qǐng)日期2004年8月13日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月13日
發(fā)明者陳竺, 周光飚, 王月英, 陳賽娟 申請(qǐng)人:上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院