一種嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食品或化妝品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物及其應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 葡萄為葡萄科葡萄屬植物，為落葉藤本植物，是世界最古老的植物之一。我國葡萄 資源較為豐富，年產(chǎn)量約有近600萬噸，這些葡萄中約有80%用于釀酒，13%作為鮮果食用， 7%用于加工果汁及其它葡萄產(chǎn)品，作為葡萄酒工業(yè)的副產(chǎn)品，我國對(duì)制備葡萄酒過程中產(chǎn) 生的副產(chǎn)物一嗜酸/菌葡萄發(fā)酵產(chǎn)物的利用率并不高，每年均有大量的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵 產(chǎn)物作為飼料或廢物丟棄掉，對(duì)資源造成了極大的浪費(fèi)。
[0003] 嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物是指葡萄酒生產(chǎn)中產(chǎn)生的沉淀物質(zhì)，主要由微生物以及少 量的酒石酸和無機(jī)鹽組成。在葡萄酒成熟期間，嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物中的酵母自溶使其 細(xì)胞膜破裂，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)釋放出來，水解酶活性增加，胞內(nèi)的多聚化合物降解為低分子成 分。因此嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物中主要含有酵母多糖，酵母多糖的主要成分是葡聚糖和甘 露聚糖，目前研究發(fā)現(xiàn)酵母多糖具有多種免疫效果：①刺激動(dòng)物體內(nèi)淋巴細(xì)胞的增殖；② 活化動(dòng)物體內(nèi)的巨噬細(xì)胞，一般認(rèn)為體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)在葡聚糖的刺激下，產(chǎn)生大量對(duì)機(jī) 體免疫功能起關(guān)鍵作用的巨噬細(xì)胞，而巨噬細(xì)胞通過吞噬作用吸收、破壞和清除體內(nèi)損傷 的、衰老的、死亡的自身細(xì)胞和侵入體內(nèi)的病原微生物；③增加動(dòng)物體產(chǎn)生自然殺傷細(xì)胞的 能力；④誘使動(dòng)物對(duì)念珠菌癥產(chǎn)生非特異性免疫，提高存活率。⑤維持微生態(tài)平衡來增強(qiáng)動(dòng) 物免疫力，改善動(dòng)物健康狀況。
[0004] 現(xiàn)有的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物應(yīng)用大多不經(jīng)過處理直接使用，但由于嗜酸菌/葡 萄發(fā)酵產(chǎn)物中含有大量的微生物不利于長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物及其應(yīng)用。在本發(fā)明的工藝條件 下，制成既能夠長(zhǎng)期保存又保持嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物原有活性成分的新的嗜酸菌/葡萄 發(fā)酵產(chǎn)物；本發(fā)明還提供了一種該嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物在保健品、護(hù)膚制劑或飼料添加 劑中的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明所述的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物：ACIDOPHILUS/GRAPE FERMENT。
[0007] 本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0008] -種嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物，由以下方法制備： (1) 將葡萄酒發(fā)酵后所得的固態(tài)物質(zhì)在100 - 150°c范圍內(nèi)加熱1~2小時(shí)； (2) 在30 - 40°C下向步驟（1)中加入糖化酶糖化20 - 36h，其中糖化酶的比例為嗜酸 菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物重量的〇. 4% - 0. 6% ; (3) 將步驟（3)所得的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物離心得離心液； (4) 將離心液進(jìn)行煮沸滅菌5~10分鐘，然后用0. 3%~0. 5%的活性炭保溫50°C ~60°C脫 色40-50分鐘后過濾，濾液凍干即得嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物。
[0009] 所述的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物在制備保健品的應(yīng)用。
[0010] 所述的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物在制備護(hù)膚制劑中的應(yīng)用。
[0011] 所述的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物在制備飼料添加劑中的應(yīng)用。
[0012] -種以所述嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物作為原料制備的保健品，包括：嗜酸菌/葡萄發(fā) 酵產(chǎn)物45-65重量份、乳糖30-50重量份、羧甲基淀粉鈉3-5重量份、滑石粉0. 5-3重量份。
[0013] -種具有抗氧化功效的外用護(hù)膚制劑，使用所述的嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物和護(hù)膚 品領(lǐng)域可接受的輔料制成。
[0014] 所述外用護(hù)膚制劑為化妝水、洗面奶、面膜、洗發(fā)水、護(hù)發(fā)素。
[0015] 所述化妝水，包括如下重量份的成分：去離子水67-75重量份、嗜酸菌/葡萄發(fā)酵 產(chǎn)物9-11重量份、膠原蛋白提取液1-3重量份、甘草酸二鉀0. 05-0. 2重量份、保濕劑12-14 重量份、防腐劑〇. 5-0. 6重量份。
[0016] 所述的飼料添加劑包括：嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物9-11重量份、啤酒花5-10重量 份,維生素 E5-10重量份。
[0017] 所述的護(hù)發(fā)素包括：嗜酸菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物5-20重量份、十八醇3-10重量份、 16-烷基-3-甲基氯化銨2-10重量份、硅油5-10重量份、白礦油5-15重量份、橄欖油2-8 重量份、甘油4-10重量份。 具體實(shí)施例
[0018] 提供下列實(shí)施例，以描述和進(jìn)一步闡明本發(fā)明的某些實(shí)施方案和方面，并不能認(rèn) 為其是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。
[0019] 藥效學(xué)試驗(yàn) 試驗(yàn)1 :對(duì)小鼠抗氧化能力的影響 實(shí)驗(yàn)方法：取小鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，分籠飼養(yǎng)。給藥組分別給予實(shí)施例 1所得產(chǎn)品大劑量組（4. 54g/kg)、中劑量組（3. 03g/kg)、小劑量組（I. 52g/kg)灌腸0. 5ml ; 空白組給予等體積的生理鹽水，每日一次，連續(xù)15天后，測(cè)定肝臟超氧化歧化酶（SOD)和丙 二醛(MDA)的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1 : 表1 :小鼠肝臟SOD和MDA含量
注：與空白組比較*P< 0.05 #P< 0.01 結(jié)論：本發(fā)明所述組合物能有效提高小鼠體內(nèi)的超氧化物歧化酶（SOD)和減少丙二醛 (MDA)的含量。
[0020] 實(shí)驗(yàn)例2 :保濕性能測(cè)試?yán)?測(cè)試時(shí)以額頭作為測(cè)試部位，在面部的額頭畫一個(gè)大小為2平方厘米的固定區(qū)域作為 測(cè)試區(qū)域。在20°C、相對(duì)濕度50%的室內(nèi)環(huán)境中，用Corneometer CM820皮膚水分測(cè)量?jī)x對(duì) 每組10名年齡在18-50歲之間的女性消費(fèi)者前額皮膚進(jìn)行皮膚的水份含量測(cè)試，其結(jié)果通 過設(shè)定的濕度測(cè)量值（Moisture Measurement Value,MMV)來表示，以評(píng)價(jià)采用本發(fā)明嗜酸 菌/葡萄發(fā)酵產(chǎn)物制得的化妝水的補(bǔ)水保濕性能。
[0021 ] 其中：MMV1--涂抹化妝水前的皮膚MMV值，MMV2--涂抹化妝水后1分鐘內(nèi)的皮 膚MMV值，MMV3--涂抹保濕霜1小時(shí)后皮膚MMV值。
[0022] 補(bǔ)水率=MMV2ZMMV1 X 100% ; 保濕率=MMV3/MMV2 X 100% ; 表2 :皮膚補(bǔ)水保濕件能測(cè)試衷
由表2測(cè)試數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明的化妝水具有良好的補(bǔ)水性能和保濕性能。
[0023] 試驗(yàn)例3 :腸道粘膜免疫活化一病理組織學(xué)檢測(cè) 試驗(yàn)藥物： 實(shí)驗(yàn)方法：以腹水的形式采取Sarcomal80肺瘤細(xì)胞，該細(xì)胞在ICR小鼠(雌性，4周齡） 腹腔內(nèi)移植傳代，用生理鹽水調(diào)成3xl07ml。用25G注射器將該細(xì)胞稀釋液移植到ICR小鼠 (雌性，4周齡）的右腰背部皮下，0.1 ml/只。
[0024] 次日，根據(jù)體重進(jìn)行分組（7只/組)，進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記后，開始施用藥物。1日1次經(jīng) 口施用，施用5次后休息2天，共進(jìn)行10次。每次的施用量是0.1 ml/只。
[0025] 施用終止后第2天，分別從各組小鼠及正常小鼠（3只）切出淋巴集結(jié)區(qū)附著的小 腸，用10%的福爾馬林固定后，石蠟包埋，制成石蠟切片，脫蠟后進(jìn)行蘇木精嗜紅染色，顯微 鏡下觀察腸粘膜固有層中單核細(xì)胞(免疫細(xì)胞）的浸潤(rùn)情況。
[0026] 表3 :腸粘膜固有層中單核細(xì)胞的浸潤(rùn)像數(shù)(相對(duì)于絨毛數(shù)的比例（％ ))
顯微鏡下測(cè)定絨毛數(shù)（100-300根/檢測(cè)標(biāo)本)，并測(cè)定粘膜固有層中單核細(xì)胞的浸潤(rùn) 數(shù)，計(jì)算每根絨毛的浸潤(rùn)像的比例（％ )。
[0027] *1:正常小鼠的粘膜固有層中未觀察到單核細(xì)胞浸潤(rùn)。
[0028] t-檢驗(yàn)：Student's t-檢驗(yàn)：分別將各組相對(duì)于無處置組進(jìn)行t-檢驗(yàn)，， N. S.:無顯著性差異；p < 0. 1，有傾向；p < 0. 01有顯著性差異。
[0029] 顯微鏡下觀察正常小鼠、荷瘤無處置組、對(duì)照組、實(shí)施例7、8、9組的小腸的病理組 織，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與無處置組相比，實(shí)施例7、8、9組中，小腸粘膜的固有層中有單核細(xì)胞(淋巴 細(xì)胞，巨噬細(xì)胞）的浸潤(rùn)顯著（P < 〇. 01)。
[0030] 制