本發(fā)明涉及一種枸杞多糖在制備降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑中的用途。

背景技術(shù)：

反芻是指牛羊等反芻動(dòng)物采食經(jīng)過一段時(shí)間后將胃中半消化的食物返回嘴里再次咀嚼的過程。反芻動(dòng)物是具有反芻現(xiàn)象的動(dòng)物，通常是一些食草動(dòng)物，因?yàn)榇诛暳现械闹参锢w維比較難消化，所以需要通過反芻來促進(jìn)粗飼料的消化。多數(shù)反芻動(dòng)物的胃包括4部分，分別為瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃和皺胃。其中，瘤胃是牛羊等反芻動(dòng)物的第一胃，反芻動(dòng)物采食的飼料首先進(jìn)入瘤胃，在瘤胃內(nèi)飼料經(jīng)過瘤胃液的親潤(rùn)、切斷、物理混合以及瘤胃微生物發(fā)酵的過程，飼料中的大分子被降解為小分子物質(zhì)，被動(dòng)物吸收利用或排除體外。瘤胃中包含大量的微生物，包括細(xì)菌、真菌、原蟲和古菌。這些微生物產(chǎn)生的酶能夠有效降解反芻動(dòng)物采食的粗飼料等難于降解的成分，而瘤胃本身是不會(huì)產(chǎn)生此類降解酶。瘤胃內(nèi)食物在被微生物分解的過程中，會(huì)產(chǎn)生一定的氣體。

瘤胃中微生物發(fā)酵產(chǎn)生的氣體通過食管向外排出的過程，稱為噯氣。牛每小時(shí)約噯氣17-20次。噯氣的次數(shù)決定于氣體產(chǎn)生的速度。正常情況下瘤胃中所產(chǎn)生的氣體和通過噯氣等所排出的氣體之間維持相對(duì)平衡。如產(chǎn)生的氣體過多，不能及時(shí)排出，可形成瘤胃急性脹氣。瘤胃脹氣是反芻動(dòng)物采食了大量易發(fā)酵的牧草、飼料等，在瘤胃微生物的作用下過度發(fā)酵，產(chǎn)生大量的氣體，以致于瘤胃和網(wǎng)胃迅速擴(kuò)張而引起的疾病。瘤胃噯氣排出的氣體以甲烷和二氧化碳為主，二者均為溫室氣體，可導(dǎo)致全球氣候變暖等一系列問題。同時(shí)，反芻動(dòng)物排出甲烷氣體也是一種能量浪費(fèi)。因此，有效降低反芻動(dòng)物氣體排放和降低瘤胃脹氣發(fā)病對(duì)動(dòng)物健康和高效生產(chǎn)具有重要作用。

目前，對(duì)于反芻動(dòng)物的瘤胃調(diào)控的添加劑研究較多的是植物或植物提取物等。例如，單寧酸、皂苷、類黃酮和其他的植物次級(jí)代謝物已經(jīng)被證明能提高瘤胃發(fā)酵。單寧和皂素可以有益調(diào)節(jié)瘤胃發(fā)酵，減少瘤胃中蛋白質(zhì)的降解，防止瘤胃脹氣，抑制產(chǎn)甲烷菌并提高共軛亞油酸濃度。功能性多糖添加在動(dòng)物飼糧中可提高動(dòng)物的免疫力和改善單胃動(dòng)物的生產(chǎn)性能，且不良反應(yīng)小，是一種較為理想的飼料添加劑。功能性多糖普遍存在于自然界中，它在植物體內(nèi)起著支持組織和貯存養(yǎng)料的作用。近年來隨著許多功能性多糖生物活性的發(fā)現(xiàn)，其在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究日益受到人們的重視。

枸杞多糖(lyciumbarbarumpolysaccharide)是從枸杞中提取得到的一種水溶性多糖，由各種單糖通過糖苷鍵相連接，是枸杞的有效成分之一，枸杞的藥理和保健作用與枸杞多糖的含量有很大關(guān)系。枸杞多糖是植物多糖中少有的含蛋白質(zhì)多糖，其可提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)造血功能，保肝降壓，增強(qiáng)細(xì)胞活性，且無(wú)任何毒副作用，在食品和醫(yī)藥領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。但目前還未見關(guān)于枸杞多糖在調(diào)節(jié)反芻動(dòng)物瘤胃發(fā)酵中降低產(chǎn)氣量應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供一種枸杞多糖在制備反芻動(dòng)物瘤胃飼料添加劑中的用途，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，反芻動(dòng)物經(jīng)食用枸杞多糖后，能夠顯著降低瘤胃內(nèi)的總產(chǎn)氣量。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一個(gè)發(fā)明目的是提供一種枸杞多糖在制備降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑中的應(yīng)用。

進(jìn)一步的，所述反芻動(dòng)物為牛或羊。經(jīng)過研究，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，在反芻動(dòng)物(特別是?；蜓?的飼料中加入一定量的枸杞多糖，對(duì)反芻動(dòng)物的瘤胃微生物發(fā)酵具有良好的調(diào)節(jié)作用，可調(diào)控瘤胃微生物區(qū)系、種屬結(jié)構(gòu)及其發(fā)酵模式，從而能夠抑制原蟲和甲烷菌，降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量，同時(shí)還可以提高反芻動(dòng)物飼料中干物質(zhì)和粗蛋白的降解率及飼料中能量的利用效率。

更進(jìn)一步的，所述反芻動(dòng)物為奶畜(奶?；蚰躺窖?。從綜合效果來講，最佳的，所述奶畜為泌乳高峰期的奶?；蚰躺窖?。泌乳高峰期是奶畜一生中最重要的時(shí)期，密切關(guān)系到奶畜的泌乳與繁殖性能，奶畜在此階段的激素水平、瘤胃功能、能量的代謝以及免疫力都發(fā)生了一系列巨大的變化。奶畜在泌乳高峰期時(shí)為保證較高的奶產(chǎn)量和乳品質(zhì)，需要大量且快速的提高飼料采食量，且采食的飼料中富含易于發(fā)酵的碳水化合物等成分，極易造成奶畜的瘤胃脹氣。反芻動(dòng)物的能量代謝不同于其他動(dòng)物，主要靠瘤胃微生物產(chǎn)生的乙酸、丙酸等揮發(fā)性脂肪酸供能，丙酸可通過糖異生轉(zhuǎn)化為葡萄糖，葡萄糖是反芻動(dòng)物最重要的能量供給形式。因此，瘤胃健康及高效發(fā)酵對(duì)奶畜健康及高效生產(chǎn)具有重要作用。經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，添加枸杞多糖可顯著降低泌乳高峰期的奶?；蚰躺窖蛑辛鑫钢袣怏w生成及排放，降低噯氣發(fā)病率，并在不影響瘤胃功能的情況下可提高動(dòng)物能量平衡。

上述應(yīng)用中，所述枸杞多糖是通過下述方法制備得到的：

(1)將枸杞原料干燥，粉碎，經(jīng)超臨界co2萃取，萃取壓力為25-30mpa，co2流量為28-32l/h，萃取時(shí)間為2-3h，夾帶劑為90-95％(體積分?jǐn)?shù))乙醇，夾帶劑用量為枸杞原料(干燥后)重量的5-8％，經(jīng)萃取后的物料即為脫脂后的枸杞顆粒；

(2)向脫脂后的枸杞顆粒加入8-12倍重量的水，超聲提取，超聲提取功率為300-400w，超聲時(shí)間為20-40min，得超聲提取液；

(3)向超聲提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為70-80％的乙醇溶液進(jìn)行醇析，將醇析后的析出液濃縮、干燥，即得枸杞多糖。

優(yōu)選的，步驟(1)中，超臨界co2萃取，萃取壓力為25mpa，co2流量為30l/h，萃取時(shí)間為2.5h，夾帶劑的用量為枸杞原料重量的6％。本發(fā)明在提取枸杞多糖時(shí)，采用超臨界co2萃取技術(shù)對(duì)枸杞進(jìn)行脫脂，可以脫除枸杞中的脂類、膠類、色素等脂溶性物質(zhì)，提高了枸杞多糖的溶解性和分散性，降低了其溶出阻力，多糖與水的接觸面積及親和力大幅度增加，從而提高了枸杞多糖的提取率。

本發(fā)明還對(duì)超臨界co2萃取的萃取條件進(jìn)行了優(yōu)化，采用本發(fā)明的萃取條件，可以提高對(duì)枸杞中油脂的脫除效率，進(jìn)而提高枸杞多糖的提取率，改善枸杞多糖的風(fēng)味和品質(zhì)。

優(yōu)選的，步驟(2)中，超聲提取的功率為350w，超聲時(shí)間為25min。本發(fā)明對(duì)脫脂后的枸杞顆粒采用超聲提取，并對(duì)超聲提取工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化，其工藝流程簡(jiǎn)單，工序少，提取時(shí)間短，節(jié)約資源，生產(chǎn)成本較低，而且多枸杞多糖的提取率高。

優(yōu)選的，步驟(3)中，乙醇溶液的加入量為超聲提取液的2-4倍體積，醇析時(shí)間為2-4h，醇析溫度為2-4℃。

與其他提取方法制備得到的枸杞粗多糖，本發(fā)明的提取方法得到的枸杞多糖提取物，在作為降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑時(shí)，效果顯著突出。而對(duì)于產(chǎn)生這種效果的原因是，將超臨界co2萃取方法和超聲提取方法相結(jié)合，加大了傳質(zhì)效率，有助于溶質(zhì)的擴(kuò)散，使得枸杞多糖有效成分得到最大程度的釋放而其分子結(jié)構(gòu)不被破壞。故該提取方法得到的枸杞多糖提取物的多糖有效含量較高，在作為降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑時(shí)，效果顯著突出。

枸杞多糖的添加濃度非常重要，因?yàn)楦邼舛鹊蔫坭蕉嗵强赡軙?huì)抑制瘤胃的正常發(fā)酵。優(yōu)選的，在反芻動(dòng)物的飼料中添加0.1-0.5％(w/w)的枸杞多糖(即枸杞多糖的質(zhì)量為飼料質(zhì)量的0.1-0.5％)，能降低瘤胃中甲烷氣體的產(chǎn)量，防止瘤胃脹氣。

基于枸杞多糖能夠降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的特點(diǎn)，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種枸杞多糖在制備預(yù)防或輔助治療反芻動(dòng)物瘤胃脹氣藥物中的應(yīng)用。

上述技術(shù)方案中具有如下有益效果：

(1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)枸杞多糖能夠在制備降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑中進(jìn)行應(yīng)用，在反芻動(dòng)物的飼料中添加0.1-0.5％的枸杞多糖，能顯著降低瘤胃中甲烷氣體的產(chǎn)量，防止瘤胃脹氣。同時(shí)，枸杞多糖還可提高反芻動(dòng)物飼料中干物質(zhì)和粗蛋白的降解率，有效提高飼料的利用率。

(2)本發(fā)明研究了枸杞多糖的提取方法對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的影響。研究發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明超臨界co2萃取方法和超聲提取方法相結(jié)合的方法，在作為降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑時(shí)，效果顯著突出。

(3)經(jīng)本發(fā)明的研究發(fā)現(xiàn)，在反芻動(dòng)物中尤其是對(duì)泌乳高峰期的奶?；蚰躺窖虻木C合效果最佳，添加枸杞多糖可顯著降低氣體的生成，并在不影響瘤胃功能的情況下可提高動(dòng)物能量平衡。故從經(jīng)濟(jì)成本和飼喂效果來看，本發(fā)明的枸杞多糖更加適用于泌乳高峰期的奶牛或奶山羊。

附圖說明

圖1是功能性多糖對(duì)48h產(chǎn)氣量影響的柱狀圖。

圖2是功能性多糖對(duì)24h干物質(zhì)降解率影響的柱狀圖。

圖3是功能性多糖對(duì)48h干物質(zhì)降解率影響的柱狀圖。

圖4是功能性多糖對(duì)24h粗蛋白降解率影響的柱狀圖。

圖5是功能性多糖對(duì)48h粗蛋白降解率影響的柱狀圖。

圖6是枸杞多糖對(duì)不同生長(zhǎng)階段的奶牛36h產(chǎn)氣量影響的柱狀圖。

具體實(shí)施方式

應(yīng)該指出，以下詳細(xì)說明都是示例性的，旨在對(duì)本發(fā)明提供進(jìn)一步的說明。除非另有指明，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。需要注意的是，這里所使用的術(shù)語(yǔ)僅是為了描述具體實(shí)施方式，而非意圖限制根據(jù)本發(fā)明的示例性實(shí)施方式。

實(shí)施例1枸杞多糖的制備

(1)將枸杞原料干燥，粉碎，過70目篩，經(jīng)超臨界co2萃取，萃取壓力為28mpa，co2流量為30l/h，萃取時(shí)間為2.5h，夾帶劑為90％(體積分?jǐn)?shù))乙醇，夾帶劑用量為枸杞原料(干燥后)重量的8％，經(jīng)萃取后的物料即為脫脂后的枸杞顆粒；

(2)向脫脂后的枸杞顆粒加入10倍重量的水，超聲提取，超聲提取功率為320w，超聲時(shí)間為30min，得超聲提取液；

(3)向超聲提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為70％的乙醇溶液進(jìn)行醇析，乙醇溶液的加入量為超聲提取液的3倍體積，醇析時(shí)間為3h，醇析溫度為3℃，將醇析后的析出液濃縮、干燥，即得枸杞多糖，經(jīng)檢測(cè)，枸杞多糖提取物的得率為5.56％，采用苯酚-硫酸比色法檢測(cè)枸杞多糖提取物中的枸杞多糖的含量為91.72％。

多糖提取物得率(％)＝枸杞粗多糖質(zhì)量(g)÷干燥后的枸杞原料質(zhì)量(g)×100％。

實(shí)施例2枸杞多糖的制備

(1)將枸杞原料干燥，粉碎，過80目篩，經(jīng)超臨界co2萃取，萃取壓力為30mpa，co2流量為28l/h，萃取時(shí)間為3h，夾帶劑為95％(體積分?jǐn)?shù))乙醇，夾帶劑用量為枸杞原料(干燥后)重量的5％，經(jīng)萃取后的物料即為脫脂后的枸杞顆粒；

(2)向脫脂后的枸杞顆粒加入12倍重量的水，超聲提取，超聲提取功率為400w，超聲時(shí)間為20min，得超聲提取液；

(3)向超聲提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為75％的乙醇溶液進(jìn)行醇析，乙醇溶液的加入量為超聲提取液的2倍體積，醇析時(shí)間為2.5h，醇析溫度為4℃，將醇析后的析出液濃縮、干燥，即得枸杞多糖，經(jīng)檢測(cè)，枸杞多糖提取物的得率為5.60％，采用苯酚-硫酸比色法檢測(cè)枸杞多糖提取物中的枸杞多糖的含量為93.11％。

實(shí)施例3枸杞多糖的制備

(1)將枸杞原料干燥，粉碎，過80目篩，經(jīng)超臨界co2萃取，萃取壓力為25mpa，co2流量為32l/h，萃取時(shí)間為2h，夾帶劑為90％(體積分?jǐn)?shù))乙醇，夾帶劑用量為枸杞原料(干燥后)重量的6％，經(jīng)萃取后的物料即為脫脂后的枸杞顆粒；

(2)向脫脂后的枸杞顆粒加入8倍重量的水，超聲提取，超聲提取功率為350w，超聲時(shí)間為25min，得超聲提取液；

(3)向超聲提取液中加入體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液進(jìn)行醇析，乙醇溶液的加入量為超聲提取液的3倍體積，醇析時(shí)間為2h，醇析溫度為2℃，將醇析后的析出液濃縮、干燥，即得枸杞多糖，經(jīng)檢測(cè)，枸杞多糖提取物的得率為5.39％，采用苯酚-硫酸比色法檢測(cè)枸杞多糖提取物中的枸杞多糖的含量為92.18％。

對(duì)比例1枸杞多糖的制備

稱取24g干枸杞，粉碎后放入800ml燒杯中，加入500ml蒸餾水，熱水提取1.5h。過濾，加入1/4體積的三氯甲烷-正丁醇(體積比為5：1)，劇烈震蕩20min，3000rpm離心25min，棄去中間變性蛋白和氯仿層，留用上清液。上清液于85℃水浴攪拌濃縮至50ml。在攪拌狀態(tài)下，將濃縮液加入3倍體積90％乙醇中，室溫靜置1h，3000rpm離心10min，固形物用90％乙醇洗滌，3000rpm離心10min，然后再用無(wú)水乙醇洗滌，3000rpm離心10min，真空干燥，得到1.44g枸杞粗多糖提取物，枸杞多糖提取物的得率為6％，采用苯酚-硫酸比色法檢測(cè)枸杞多糖提取物中的枸杞多糖的含量為50.98％。

實(shí)驗(yàn)例1枸杞多糖對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的影響

(1)試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

選擇8只健康泌乳期奶牛為試驗(yàn)動(dòng)物。基礎(chǔ)日糧組成(以風(fēng)干樣計(jì))為：日糧精粗質(zhì)量比為40：60，粗飼料中青貯玉米和苜蓿按照質(zhì)量比1：1提供，精料補(bǔ)充料包括58％玉米、18.3％小麥麩、23％大豆粕、小蘇打0.7％(w/w)。每天早上9：00和下午5：30定量飼喂，充足自由飲水。

(2)試驗(yàn)樣品

向精粗質(zhì)量比為40：60的日糧中添加0.1％(w/w)的實(shí)施例1制備的枸杞多糖1、對(duì)比例1制備的枸杞多糖2、葡萄糖、黃芪多糖、低聚木糖、低聚果糖和殼聚糖，以不添加多糖作為空白對(duì)照。

(3)試驗(yàn)方法

采用反芻動(dòng)物體外發(fā)酵技術(shù)研究添加不同種類的多糖對(duì)瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣量的影響。

晨飼前，應(yīng)用口腔套管從8頭奶牛瘤胃的上中下3個(gè)不同位點(diǎn)采集瘤胃液，經(jīng)4層紗布過濾后按照1：2的體積比例接種到含有底物(基礎(chǔ)日糧)和磷酸緩沖液的發(fā)酵瓶中，并向發(fā)酵瓶中持續(xù)注入co2調(diào)節(jié)ph至6.8。

分別向發(fā)酵瓶中添加枸杞多糖提取物(實(shí)施例1制備)、枸杞多糖提取物(對(duì)比例1制備)、葡萄糖、黃芪多糖、低聚木糖、低聚果糖和殼聚糖后加塞密封。通過氣路導(dǎo)管將發(fā)酵瓶與體外發(fā)酵產(chǎn)氣自動(dòng)記錄裝置連通，并由裝置實(shí)時(shí)自動(dòng)記錄發(fā)酵產(chǎn)氣量，發(fā)酵瓶在39℃下持續(xù)培養(yǎng)48h，記錄發(fā)酵產(chǎn)量。

(2)試驗(yàn)結(jié)果

枸杞多糖對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的影響結(jié)果見圖1，由圖1可得，黃芪多糖能夠顯著降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量，與其他功能性多糖具有差異顯著性；實(shí)施例1的方法得到的枸杞多糖提取物與對(duì)比例1相比，降低產(chǎn)氣量顯著突出，說明不同方法制備得到的枸杞多糖效果上具有一定的差異；也說明了本發(fā)明在專門制備降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的飼料添加劑時(shí)，應(yīng)選擇本發(fā)明實(shí)施例1中的提取方法更為合適，可有效緩解泌乳期奶牛的瘤胃脹氣。

另外，本發(fā)明還測(cè)了ph、乙酸、丙酸、乙丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸和總揮發(fā)性脂肪酸(tvfa)等參數(shù)，檢測(cè)結(jié)果具體如下表1：

表1功能性多糖對(duì)瘤胃ph和vfa的影響

由表1可知，不同種類的功能性多糖對(duì)瘤胃中的各氣體濃度的影響各不相同，與其他種類的功能性多糖相比，采用本發(fā)明的枸杞多糖能有效調(diào)控反芻動(dòng)物瘤胃的功能，提高微生物活性和揮發(fā)酸產(chǎn)量，這有利于泌乳期奶牛體重的增加，在不影響瘤胃功能的情況下可提高動(dòng)物能量平衡。

綜上，從圖1和表1來看，與其他功能性多糖相比，枸杞多糖在降低反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的效果上顯著突出。

實(shí)驗(yàn)例2研究枸杞多糖對(duì)飼料干物質(zhì)和粗蛋白降解率的影響

枸杞多糖對(duì)飼料干物質(zhì)和粗蛋白降解率的調(diào)控

(1)試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

選擇8只安裝有永久性瘤胃瘺管的健康西農(nóng)薩能奶山羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物?；A(chǔ)日糧組成(以風(fēng)干樣計(jì))為：日糧精粗質(zhì)量比為40：60，粗飼料中青貯玉米和苜蓿按照質(zhì)量比1：1提供，精料補(bǔ)充料包括58％玉米、18.3％小麥麩、23％大豆粕、小蘇打0.7％(w/w)。每天早上9：00和下午5：30定量飼喂，充足自由飲水。

(2)試驗(yàn)樣品

向精粗質(zhì)量比為40：60的日糧中添加0.1％的實(shí)施例1制備的枸杞多糖、葡萄糖、黃芪多糖、靈芝多糖、低聚木糖、低聚果糖和殼聚糖，以不添加多糖作為空白對(duì)照。

(3)試驗(yàn)方法

選擇孔徑為300目的尼龍布，制成8×12cm的尼龍袋，分別稱取試驗(yàn)樣品7.5g(精粗比為40：60的tmr日糧)放入尼龍袋中，用橡皮筋扎好，然后將尼龍袋固定在一根長(zhǎng)20cm的半軟尼龍管的一端，在晨飼前1h放入瘤胃內(nèi)，培養(yǎng)時(shí)間分別為24h和48h，連續(xù)取樣、放樣，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)取出尼龍袋，并用大量的水清洗，直至水澄清為止。然后將洗干凈的尼龍袋65℃烘干至恒重。將尼龍袋中的降解樣倒出后，洗凈，同樣65℃烘干至恒重，測(cè)定降解前后飼料原料的干物質(zhì)和粗蛋白的降解率，測(cè)定方法參考《飼料質(zhì)量與安全檢測(cè)技術(shù)》。

(4)試驗(yàn)結(jié)果

不同種類的功能性多糖對(duì)飼料原料干物質(zhì)的降解率結(jié)果分別見圖2和圖3；不同種類的功能性多糖對(duì)飼料原料的粗蛋白降解率結(jié)果見圖4和圖5。

由圖2～5可得，不同種類的功能性多糖對(duì)反芻動(dòng)物飼料原料中的干物質(zhì)和粗蛋白的降解效果差別較大。與其他的功能性多糖相比，在飼料中添加本發(fā)明制備的黃芪多糖，在48h內(nèi)飼料的粗蛋白的降解效果明顯優(yōu)于其他種類的功能性多糖。

實(shí)驗(yàn)例3枸杞多糖對(duì)不同生長(zhǎng)階段奶牛瘤胃產(chǎn)氣量的影響

(1)試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

選擇不同生長(zhǎng)階段(每階段3只)健康奶牛為試驗(yàn)動(dòng)物，不同生長(zhǎng)時(shí)期是指：小育成牛階段(6-12個(gè)月齡)、大育成牛階段(12月齡-配孕)、妊娠期、圍產(chǎn)期(產(chǎn)前3周和產(chǎn)后3周)、泌乳高峰期(自分娩后至200天)、干乳期(自停奶日期至分娩日期之前)。

基礎(chǔ)日糧組成(以風(fēng)干樣計(jì))為：日糧精粗質(zhì)量比為40：60，粗飼料中青貯玉米和苜蓿按照質(zhì)量比1：1提供，精料補(bǔ)充料包括58％玉米、18.3％小麥麩、23％大豆粕、小蘇打0.7％(w/w)。每天早上9：00和下午5：30定量飼喂，充足自由飲水。

(2)試驗(yàn)樣品

向精粗質(zhì)量比為40：60的日糧中添加0.1％的實(shí)施例1制備的枸杞多糖，以不添加多糖作為空白對(duì)照。

(3)試驗(yàn)方法

采用反芻動(dòng)物體外發(fā)酵技術(shù)研究添加枸杞多糖對(duì)不同生長(zhǎng)階段的奶牛瘤胃發(fā)酵產(chǎn)氣量的影響。每個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期的試驗(yàn)重復(fù)三次。

晨飼前，從試驗(yàn)?zāi)膛Ａ鑫傅纳现邢?個(gè)不同位點(diǎn)采集瘤胃液，經(jīng)4層紗布過濾后按照1：2的體積比例接種到含有底物(基礎(chǔ)日糧)和磷酸緩沖液的發(fā)酵瓶中，每個(gè)發(fā)酵瓶中含有5g底物，并向發(fā)酵瓶中持續(xù)注入co2調(diào)節(jié)ph至6.8。

分別向發(fā)酵瓶中添加枸杞多糖(實(shí)施例1制備)加塞密封。通過氣路導(dǎo)管將發(fā)酵瓶與體外發(fā)酵產(chǎn)氣自動(dòng)記錄裝置連通，并由裝置實(shí)時(shí)自動(dòng)記錄發(fā)酵產(chǎn)氣量，發(fā)酵瓶在39℃下持續(xù)培養(yǎng)36h，記錄發(fā)酵產(chǎn)量。

(4)試驗(yàn)結(jié)果

枸杞多糖對(duì)反芻動(dòng)物瘤胃產(chǎn)氣量的影響結(jié)果見圖6，由圖6可得，黃芪多糖對(duì)各個(gè)生長(zhǎng)階段的奶牛瘤胃的產(chǎn)氣量的影響差別較大，經(jīng)過試驗(yàn)驗(yàn)證，黃芪多糖能夠顯著降低泌乳高峰期奶牛瘤胃產(chǎn)氣量，與其他生長(zhǎng)階段的奶牛瘤胃的產(chǎn)氣量相比具有差異顯著性。

實(shí)驗(yàn)例4應(yīng)用

本發(fā)明經(jīng)過大量的應(yīng)用實(shí)踐得到：黃芪多糖能夠顯著降低泌乳高峰期奶牛瘤胃產(chǎn)氣量，與其他生長(zhǎng)階段的奶牛瘤胃的產(chǎn)氣量相比具有差異顯著性，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。以下是其中的一個(gè)應(yīng)用案例。

瘤胃膨脹治療的關(guān)鍵就在于排出已產(chǎn)生的氣體和制止瘤胃內(nèi)容物持續(xù)大量的發(fā)酵產(chǎn)氣。

2015年7月某養(yǎng)殖小區(qū)一頭泌乳奶牛，上午采食大量的精料，下午出現(xiàn)腹部鼓脹。經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)患牛營(yíng)養(yǎng)良好，t38.5℃，p80次/分，r38次/分，噯氣及反芻較弱，瘤胃蠕動(dòng)音減弱。選用實(shí)施例1中的枸杞多糖5g/kg(每千克常規(guī)藥物加入5g枸杞多糖)和常規(guī)的藥物配方(松節(jié)油50-60ml、魚石脂20-30g、酒精100-150ml)，服用量為服用1次，患牛投服后，6min后開始噯氣，15min后胃蠕動(dòng)音增強(qiáng)，腹圍逐漸縮小，經(jīng)35min腹脹基本消失，其癥狀也逐漸好轉(zhuǎn)，2小時(shí)后出現(xiàn)反芻，并不再?gòu)?fù)發(fā)。

常規(guī)方法的藥物配方加入枸杞多糖后對(duì)泌乳奶牛瘤胃膨脹的治療效果優(yōu)異，能夠縮短治愈時(shí)間。

上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。