本發(fā)明涉及一種個體化干預配方食品，尤其涉及一種針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品。
背景技術(shù)：
根據(jù)《2012年中國腫瘤登記年報》最新數(shù)據(jù)顯示，我國每年新發(fā)惡性腫瘤病例約為312萬，每分鐘就有6人被診斷為惡性腫瘤；每年因惡性腫瘤死亡的病例約為270萬，每分鐘就有5人死于惡性腫瘤。腫瘤患者因其代謝情況的特殊、腫瘤細胞需要更多的營養(yǎng)，手術(shù)、放化療帶來的不舒適感加重病人的厭食等原因，極易出現(xiàn)營養(yǎng)不良。營養(yǎng)不良會導致患者體重下降、免疫力下降、耐受性降低，會極大縮短生存時間。如果忽視了營養(yǎng)問題，錯過了營養(yǎng)給予的時機，將造成1/4的腫瘤患者直接死于營養(yǎng)不良。全世界20％的新發(fā)惡性腫瘤患者在中國，24％的惡性腫瘤患者死亡在中國。在中國，腫瘤患者營養(yǎng)不良的發(fā)生率高達65％，惡性腫瘤患者營養(yǎng)不良的發(fā)病率約為31％-87％，其中約35％的結(jié)腸癌患者、40％的肺癌患者、45％頭頸部癌患者、49％的上消化道癌癥患者、80％的胰腺癌患者出現(xiàn)營養(yǎng)不良，每年約有22％的腫瘤患者直接死于營養(yǎng)不良，營養(yǎng)不良已成為我國惡性腫瘤患者常見的并發(fā)癥之一。
大量的證據(jù)和臨床實踐表明，營養(yǎng)支持對于患者的治療效果和康復速度具有十分重要和不可替代的作用。如何才能避免腫瘤患者的營養(yǎng)不良問題？目前，特殊醫(yī)學用途配方食品是臨床上實施營養(yǎng)支持的主要方法，根據(jù)腫瘤的共同代謝特點和對某些特定營養(yǎng)成分需求，人為地改變其比例，造成體內(nèi)某種特定物質(zhì)過剩或缺乏，使其不利于腫瘤細胞的擴增，或提高腫瘤對抗腫瘤治療的敏感性，或減少其他治療的毒副反應。正確的營養(yǎng)治療不但可改善惡性腫瘤病人的營養(yǎng)狀態(tài)還能起到治療腫瘤的作用。
腫瘤本質(zhì)上是基因病，各種環(huán)境的和遺傳的致癌因素等以協(xié)同或序貫的方式引起DNA損害，從而激活原癌基因和(或)滅活腫瘤抑制基因，加上凋亡調(diào)節(jié)基因和(或)DNA修復基因的改變，而引起表達水平的異常，使正常細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化，最終導致腫瘤形成。
突變細胞從原發(fā)腫瘤沿著一定渠道，通過淋巴道、血液、腔道到達另一部分或多個部位，形成新的轉(zhuǎn)移灶。而腫瘤轉(zhuǎn)移的途徑主要有四個方面：局部擴散、淋巴管滲透、血行轉(zhuǎn)移、腔道種植。其中以淋巴管滲透和血行轉(zhuǎn)移最多。90％的患者都是因為腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移、復發(fā)，導致腫瘤治療前功盡棄的。
與突變細胞遷徙抑制能力相關(guān)的基因包括p53結(jié)合蛋白1基因(TP53BP1)、p53蛋白基因(TP53)、血管內(nèi)皮生長因子基因(VEGF)，其中TP53BP1基因變異導致蛋白質(zhì)翻譯減少引起細胞的惡變，導致腫瘤易感性增加；TP53基因的變異易導致蛋白質(zhì)翻譯減少引起細胞的惡變，導致腫瘤易感性增加；VEGF基因存在變異，易引起細胞生長失去控制，通過促進腫瘤新生淋巴管形成和擴張，直接和間接的促進腫瘤的淋巴擴散和淋巴轉(zhuǎn)移，從而導致癌癥的易感性增加。
一些食物和營養(yǎng)物質(zhì)可以通過與突變細胞遷徙抑制能力基因的相互作用來控制腫瘤的轉(zhuǎn)移，具體如下：
豌豆屬于豆類植物，豌豆富含人體所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，尤其是含有優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)。而且豆類植物不含膽固醇，這一點優(yōu)于動物蛋白。豌豆蛋白粉是采用先進工藝從豌豆中提取的蛋白質(zhì)，豌豆蛋白含有人體所有必需的所有氨基酸，屬于全價蛋白質(zhì)，有利于均衡營養(yǎng)，提高免疫力，尤其適合術(shù)后病人食用。
殼聚糖(Chitosan)是甲殼素的脫乙酰產(chǎn)物，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的唯一帶正電荷的堿性多糖，有顯著的生物活性和保健功能。由于甲殼素和殼聚糖分子質(zhì)量大、晶體結(jié)構(gòu)緊密、溶解性差，其應用受到限制。殼寡糖是殼聚糖降解的產(chǎn)物(Chitooligosaccharide，COS)，一般認為由2～10個氨基葡糖通過β-l，4-糖苷鍵連接而成，也有學者將其擴大為2～20個單元結(jié)構(gòu)的。殼寡糖的分子量小、水溶性好，更易被吸收利用，比大分子殼聚糖具有更好的生理活性，如抗腫瘤、增強免疫效應、抗氧化、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)、降血糖等。近年來國內(nèi)外學者對殼寡糖及衍生物的抗腫瘤作用進行了較多的研究，目前認為其抗腫瘤的機制是通過直接抑制腫瘤細胞增生、影響腫瘤血管生成和遷移、誘導細胞壞死和凋亡、增強機體免疫力而實現(xiàn)的。何學斌等以200mg/(kg·d)水溶性殼聚糖灌胃，可顯著抑制荷S180和艾氏腹水癌小鼠腫瘤的生長。殼寡糖是腫瘤血管生成的有效抑制劑，并且在對比殼寡糖與可溶性殼聚糖抑制埃利希腹水瘤細胞生長和腫瘤血管生成時發(fā)現(xiàn)，50μg殼寡糖比100μg可溶性殼聚糖具有更強的抑制效果。Wang等以人臍靜脈上皮細胞做體外實驗表明COS可抑制由血管內(nèi)皮生長因子引發(fā)的血管生成，1000μg/mL效果最好。劉清華、Huang、Pae、Hasegawa等研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖作用肉瘤細胞后，細胞阻滯于G0/G1期，同時細胞凋亡增加，明顯提高Bax的表達，降低Bcl-2的表達，提示殼寡糖可抑制肉瘤的生長并促進其凋亡。Xu等對肝癌細胞SMMC-7221的研究中發(fā)現(xiàn)COS可顯著介導該細胞的凋亡，并且隨COS濃度升高而效率增大。用0.8mg/mL COS處理72h后，引發(fā)的凋亡率可達38％。Maeda等的研究表明，殼寡糖在抑制荷瘤小鼠腫瘤生長的同時，可激活腸上皮淋巴細胞和脾臟的NK細胞，并可加強腸上皮淋巴細胞和脾淋巴細胞對S180細胞的毒作用，認為它們主要是通過增強機體免疫功能而起抑制腫瘤的作用。朱婉萍認為殼寡糖通過提高荷瘤小鼠T淋巴細胞的轉(zhuǎn)化功能，NK細胞的殺傷活性，IL-2、IFN-Y的含量和巨噬細胞的吞噬功能來發(fā)揮抗腫瘤作用。
綠豆淀粉從綠豆中提取而來，具有很高的營養(yǎng)價值，用途十分廣泛。綠豆淀粉具有抗菌抑菌作用、降血脂作用、抗腫瘤作用、解毒作用等多種生物活性，其含有相當數(shù)量的低聚糖(戊聚糖、半乳聚糖等)。這些低聚糖是人體腸道內(nèi)有益菌——雙歧桿菌的增殖因子，經(jīng)常食用綠豆淀粉可改善腸道菌群，減少有害物質(zhì)吸收，預防某些癌癥的發(fā)生。
乳清蛋白是采用先進工藝從牛奶分離提取出來的珍貴蛋白質(zhì)，不但容易消化，而且還具有高生物價、高效化率、高蛋白質(zhì)功效比和高利用率，是蛋白質(zhì)中的精品。含有人體所需的所有必需氨基酸，其氨基酸組成模式與骨骼肌中的氨基酸組成模式幾乎完全一致，極容易被人體所吸收。主要成分有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、免疫球蛋白、乳鐵蛋白等，具有抗氧化，消滅或抑制細菌，促進正常細胞生長，提高機體免疫力的作用。其提高免疫力的作用機制為：維持谷氨酰胺水平，進而保護免疫細胞功能。谷氨酰胺是淋巴細胞和巨噬細胞在免疫反應過程的重要底物，高速利用谷氨酰胺生成嘌呤和嘧啶核苷酸有利合成更多的DNA，使免疫細胞增殖加速。乳清蛋白富含谷氨酸等谷氨酰胺前體物質(zhì)，通過增加免疫細胞的增殖速度來提高機體免疫力。
小麥草是用來榨汁喝的小麥草的種子是專門培育的，從播放到生產(chǎn)其過程有別于普通小麥，使種子更加安全，有機，無污染環(huán)境下生長，其作用確實十分神奇。在國外及香港，臺灣，十分風行的生機飲食主角之一，例如臺灣的生機之母李秋涼女士長期服用小麥草，30年抗癌成功。在國內(nèi)也越來越受到大家的重視。本草綱目記載小麥草“麥苗，氣味辛、寒、無毒。主治消酒毒、暴熱、酒疽、目黃等，搗爛絞汁日飲之，解渴，退胸隔熱，利小腸，佐韭食，甚益顏色?！毙←湶莺胸S富的葉綠素、維生素A、維生素C、維生素E及維生素B族，和礦物質(zhì)鈣、鎂、磷、鐵、硒，以及超抗氧化劑SOD、纖維和有益酵素。酸性體質(zhì)是百病之源，據(jù)日本食品分析中心所做的研究表明，小麥草每100g含量中有66.4％屬于堿性的。
大米蛋白主要由清蛋白、球蛋白、醇溶性蛋白和谷蛋白等四種蛋白組成，氨基酸組成平衡合理，且氨基酸含量高，是公認的優(yōu)質(zhì)食品蛋白，符合WHO/FAO推薦的理想模式。大米蛋白是低抗原性蛋白，不會產(chǎn)生過敏反應，對應用于腫瘤人群的食品是十分有利的。大米蛋白不僅具有獨特的營養(yǎng)功能，還有抗高血壓、降膽固醇、抗癌變的作用。Molita等對大米分離蛋白(RPI)研究結(jié)果表明，飼喂大米分離蛋白的二甲基苯并蒽(DMBA)誘導雌性小白鼠腫瘤重量低于飼喂酪蛋白小白鼠，大米分離蛋白具有抗DMBA誘導癌變作用。
葛根素是從豆科植物野葛根中提取的一種單一成份黃酮苷，具有活血化瘀、改善微循環(huán)、擴張冠狀動脈和腦血管、降低心肌耗氧量，抑制癌細胞增殖及耐藥等作用。韓萍等研究發(fā)現(xiàn)，葛根粗提物和葛根素純品濃度相關(guān)性的抑制小細胞肺癌H446細胞增殖，其機制可能與阻滯細胞周期于G0/G1期、上調(diào)Bax表達、下調(diào)Bel-2表達有關(guān)。
益生菌是指投入后通過改善宿主腸道菌群生態(tài)平衡而發(fā)揮有益作用，從而達到提高宿主健康狀態(tài)的微生物。益生菌的主要來源是動物腸道正常的生理性細菌和非腸道菌?？煞殖扇箢悾喝闂U菌類、雙歧桿菌類和革蘭陽性球菌。益生菌作為一種新型的且較安全的生物制品在腫瘤防治中逐漸成為一種趨勢。乳酸菌、雙歧桿菌等益生菌及其代謝產(chǎn)物，可誘導機體產(chǎn)生干擾素，促進細胞分裂素，活化免疫細胞，促進免疫球蛋白的生成，提高機體免疫功能，抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。雙歧桿菌具有降解N-亞硝酸，消除氧自由基、過氧化脂質(zhì)等致癌因子的作用。實驗證明雙歧桿菌不僅可以抑制腫瘤發(fā)生，對已經(jīng)形成的腫瘤仍具有抑制作用。大多數(shù)腫瘤細胞都表現(xiàn)出較高的端粒酶活性。而正常體細胞由于端粒酶活性低，其端粒隨著細胞分裂逐漸縮短，細胞逐漸老化、死亡。在近期的研究中已經(jīng)證實了經(jīng)過鼠李糖乳桿菌(LGG)表面分子脂磷壁酸(LTA)處理白血病細菌株端粒酶后，端粒酶的活性明顯降低，這表明益生菌的抗腫瘤機制可能與降低端粒酶的活性有關(guān)。
益生元是指能夠選擇性地刺激特定腸道菌的生長、活性而有益于宿主健康的非消化性食物成分，這是1995年國際“益生元之父”Dr.Glenn Gibson對益生元進行的定義。Gibson等人在2004年又給出了最新的定義：“益生元是一種可被選擇性發(fā)酵且專一性地改變腸道中對宿主健康有益菌群的組成和活性的配料(ingredient)，常稱“雙歧因子”。益生元是食品行業(yè)中的通用名稱，其實它包括多種產(chǎn)品，目前國際上認可較多的益生元主要包括菊粉(Inulin)、低聚乳果糖(LACT)、低聚木糖(XOS)、低聚異麥芽糖(IMO)、低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)、大豆低聚糖(SOS)、棉子糖、水蘇糖等，有些微藻類也可作為益生元如節(jié)旋藻、螺旋藻等，天然植物中的中草藥、蔬菜、野生植物等提取物也能作為益生元使用。糖類益生元與其他促益生菌生長的物質(zhì)相比有著不可替代的優(yōu)點，它無藥物殘留，細菌不會產(chǎn)生抗藥性，無污染，耐高溫，性質(zhì)穩(wěn)定，加工儲運過程中損失少，是一種天然的食品添加劑。
多糖類(polysaccharide)是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一，廣泛存在于高等植物、動物、微生物、地衣和海藻等中，如植物的種子、莖和葉組織、動物粘液、昆蟲及甲殼動物的殼真菌、細菌的胞內(nèi)胞外等。多糖在抗腫瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血、免疫促進等方面發(fā)揮著生物活性作用。具有免疫活性的多糖其衍生物常常還具有其他活性，如硫酸化多糖具有抗HIV活性及抗凝血活性，羧甲基化多糖具有抗腫瘤活性。多糖類通過抑制VEGF基因的表達，有效調(diào)節(jié)細胞凋亡基因，抑制腫瘤細胞的分裂與增殖，并促進腫瘤細胞死亡、侵襲和轉(zhuǎn)移。李娜研究發(fā)現(xiàn)在不同濃度靈芝多糖(0μg/ml、0.2μg/ml、0.8μg/ml、3.2μg/ml、12.8μg/ml)作用下，各組LA795肺癌細胞連續(xù)培養(yǎng)48h，應用ELISA技術(shù)檢測顯示，LA795肺癌細胞培養(yǎng)上清中VEGF表達水平分別為147.98±0.28、120.25±14.24、103.11±10.57、91.27±13.62、84.66±10.41，以空白對照組的VEGF的表達水平最高，隨靈芝多糖濃度的不斷增高，LA795肺癌細胞VEGF表達水平逐漸降低。證明靈芝多糖可下調(diào)LA795肺癌細胞分泌免疫抑制分子VEGF、TGF-β1、IL-10。
紅花(Carthamus tinctorius L.)是菊科植物，為我國傳統(tǒng)中草藥，花青苷類物質(zhì)是其發(fā)揮藥理作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，通過抑制血管生成相關(guān)因子VEGF、CXCR4，可抑制胃癌細胞體外生長及轉(zhuǎn)移侵襲能力。同時紅花中的有效成分紅花多糖能夠通過抑制VEGF的表達，使腫瘤生長及轉(zhuǎn)移受到抑制。黃凌娜等(2016)研究表明，紅花提取的花青苷能夠抑制胃癌細胞SGC-7901的生長及侵襲能力，且呈濃度依賴，半數(shù)抑制濃度(IC50)＝136.2mg/L。經(jīng)花青苷處理48h后，SGC-7901的轉(zhuǎn)移侵襲能力明顯減弱，多重線性相關(guān)法分析得出侵襲能力與藥物濃度間存在較強的線性相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.913。當花青苷濃度為150mg/L時，侵襲能力抑制率達52.3％。孫偉等(2016)研究表明紅花多糖顯著促進人結(jié)腸癌LoVo細胞凋亡，可使結(jié)腸癌LoVo細胞增殖受到抑制，侵襲能力減弱，調(diào)節(jié)細胞周期。
三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)，又名田七、人參三七、田三七、山漆等，為五加科(Araliaceae)人參屬植物，主產(chǎn)于云南、廣西及四川等地，是臨床常用傳統(tǒng)中藥。三七味甘、微苦，性溫，歸肝、胃、心、小腸經(jīng)，具有止血、散瘀、消腫、止痛、補虛、強壯等功效，主治咯血、衄血、外傷出血、跌打腫痛等，近年來用于治療冠心病、糖尿病、抗心絞痛、抗血栓等。從上世紀40年代開始，諸多學者對三七進行了一系列研究，揭示了其主要成分及三七在血液系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、物質(zhì)代謝系統(tǒng)，以及抗炎、抗衰老、抗腫瘤等多方面的生理活性。三七具有抗腫瘤血行轉(zhuǎn)移能力，通過抑制VEGF基因表達，抑制腫瘤新生血管形成，在保護心肌缺生長。鄧偉等(2013)對中藥三七抑制二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌血管生成的研究表明：三七在HCC腫瘤血管生成和進展中可能通過抑制Ang-2、Tie-2、HIF-1α及VEGF而發(fā)揮預防作用。
多酚類物質(zhì)具有很強的抗氧化作用，被稱為“第七類營養(yǎng)素”。多酚類化合物是指分子結(jié)構(gòu)中有若干個酚性羥基的植物成分的總稱，包括黃酮類、單寧類、酚酸類以及花色苷類等酚是在植物性食物中發(fā)現(xiàn)的、具有潛在促進健康作用的化合物。它存在于一些常見的植物性食物，如可可豆，茶，大豆，紅酒，蔬菜和水果中。EGCG(多酚類物質(zhì))通過活化抑瘤蛋白p53信號通路，下調(diào)VEGF表達水平來抑制癌癥的發(fā)生發(fā)展。田夢秋等(2015)研究茶多酚對人鼻咽癌細胞裸鼠移植瘤的生長抑制作用發(fā)現(xiàn)：茶多酚對人鼻咽癌HONE1細胞裸鼠移植瘤的生長具有明顯抑制作用，機制可能與調(diào)節(jié)VEGF表達，從而抑制腫瘤血管生成等作用有關(guān)。金龍玉研究EGCG調(diào)節(jié)p53和EGFR信號通路抑制人類肺癌細胞的分子機制發(fā)現(xiàn)：EGCG(綠茶多酚)活化抑瘤蛋白p53信號通路促進其抗肺腫瘤效果。EGCG通過上調(diào)p53的磷酸化，抑制MDM2與p53的相互作用從而抑制MDM2對p53的泛素化降解促進p53的穩(wěn)定與積聚。EGCG通過促進p53的胞核積聚，上調(diào)其反式激活能力，從而誘導其下游靶基因如p21等的表達上調(diào)，干擾肺癌細胞周期行進。
葉黃素是一種含氧類胡蘿卜素，是構(gòu)成蔬菜、水果、花卉等植物色素的主要組分，其在甘藍、菠菜等深綠色葉菜及金盞花等花卉中含量較高；其分子式為C40H56O2，相對分子質(zhì)量為568.88，沒有維生素A活性；研究表明，葉黃素游離羥基與脂肪酸酯化可增強對熱和紫外線的穩(wěn)定性，因此商品化葉黃素產(chǎn)品多為葉黃素酯型；葉黃素酯進入人體后可被高效地水解并釋放出游離葉黃素，從而發(fā)揮生物學功效。葉黃素獨特的化學結(jié)構(gòu)及組成決定了其獨特的生物學功能，在抗氧化、預防白內(nèi)障、延緩動脈硬化以及抗腫瘤等方面具有重要作用。有學者發(fā)現(xiàn)，葉黃素對乳腺癌、胃癌、食管癌、口腔上皮癌等多種腫瘤具有明顯抑制作用。葉黃素對腫瘤的抑制主要通過上調(diào)凋亡基因和P53表達來實現(xiàn)。王若仲等研究顯示，葉黃素通過上調(diào)凋亡基因Bax和p53信使RNA的表達，從而抑制人肝癌細胞HepG2的生長。
中藥丹參為唇形科多年生草本植物丹參的干燥根莖，具有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰之功效。多年來的實驗研究以及臨床應用表明，單味藥丹參、或丹參的提取物、或丹參與其他藥物組成的復方制劑均具有一定的抗腫瘤作用。其提取成分主要包括脂溶性和水溶性兩大類，脂溶性成分主要為共軛醌、酮類化合物，包括丹參酮(I、ⅡA、ⅡB)、異丹參酮(I、Ⅱ)、隱丹參酮、異隱丹參酮、丹參醇(I、Ⅱ、Ⅲ)、丹參醌(A、B、C、D)和二氫丹參醌等；水溶性成分主要為酚酸類化合物，包括丹參酸(乙、丙)、丹參素、咖啡酸、原兒茶酸、原兒茶醛、紫草酸、迷迭香酸及丹參酚酸(A、B、C、D、E、F、G)。丹參提取物中對腫瘤有抑制的作用的有效成分主要為丹參酮，通過上調(diào)P53表達，阻滯其細胞周期，使細胞核裂解呈現(xiàn)碎片狀，產(chǎn)生凋亡小體促進細胞凋亡。畢明慧等(2011)分別以0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L、40mg/L丹參素作用SMMC7721細胞24、48和72h后，分別觀察細胞凋亡形態(tài)并檢測不同濃度(0～40mg/L)丹參素作用SMMC7721細胞24h后p53mRNA表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參素在一定濃度范圍內(nèi)可呈時間和劑量依賴性地抑制SMMC7721細胞增殖并誘導細胞凋亡，其機制可能與p53表達上調(diào)有關(guān)。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品，要解決的技術(shù)問題是提高腫瘤患者的突變細胞遷徙抑制能力。
為解決上述問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：一種針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品，所述個體化干預配方食品通過如下步驟制成：
1)檢測個體的p53結(jié)合蛋白1基因、p53蛋白基因、血管內(nèi)皮生長因子基因的變異；
2)評估所檢測的基因的變異的風險；
3)選擇食品基礎(chǔ)方中的原料，根據(jù)所評估的風險選擇基因方中的原料，然后將所選擇的原料制成粉狀食品。
優(yōu)選地，在所述步驟1)中，檢測的p53結(jié)合蛋白1基因的位點為位點一：rs62021180；檢測的p53蛋白基因的位點為位點二：rs1042522；檢測的血管內(nèi)皮生長因子基因的位點為位點三：rs699947。
優(yōu)選地，在所述的步驟2)中，所檢測的基因的變異的風險等于位點一風險度、位點二風險度和位點三風險度的乘積。
優(yōu)選地，
當檢測到的位點一的基因型分別為AA、AG、GG時，位點一風險度分別為0.31、0.31、4.18；
當檢測到的位點二的基因型分別為CC、CG、GG時，位點二風險度分別為風險度0.22、3.71、3.71；
當檢測到的位點三的基因型分別為AA、AC、CC時，位點三風險度分別為0.52、3.53、3.53。
優(yōu)選地，在所述步驟3)中，基礎(chǔ)方中的原料包括基礎(chǔ)方必要原料，基礎(chǔ)方必要原料按重量計包括：豌豆蛋白2～5份、殼聚糖0.5～2份、綠豆淀粉0.2～0.8份、乳清蛋白0.2～0.8份、小麥草0.2～0.8份。
優(yōu)選地，在所述步驟3)中，基礎(chǔ)方中的原料還包括基礎(chǔ)方補充原料，基礎(chǔ)方補充原料按重量計包括：大米蛋白1～4份、葛根粉1～4份、益生菌0.2～0.8份、益生元0.2～0.8份。
優(yōu)選地，在所述步驟3)中，基因方中的原料包括基因方必要原料，基因方必要原料按重量計包括：靈芝多糖1～4份、紅花0.5～2份、三七0.5～2份。
優(yōu)選地，在所述步驟3)中，基因方中的原料還包括基因方補充原料，基因方補充原料按重量計還包括：茶多酚2～3份、葉黃素2～3份、丹參提取物0.5～2份。
優(yōu)選地，在所述步驟3)中，
如果所檢測的基因變異的風險為低風險時，選擇基礎(chǔ)方必要原料，再選擇基因方必要原料；
如果所檢測的基因變異的風險為中風險時，選擇基礎(chǔ)方必要原料，再選擇基因方必要原料和基因方補充原料。
如果所檢測的基因變異的風險為高風險時，選擇基礎(chǔ)方必要原料和基礎(chǔ)方補充原料，再選擇基因方必要原料和基因方補充原料。
4)個體化干預配方食品的制作
上述個體化干預配方食品的制作可通過自動化低溫制樣機裝置來完成。
優(yōu)選地，所述自動化低溫制樣機的制備單元包括加樣室、微波滅菌組件、低溫干燥粉碎組件、篩分裝置管道、分離儲存混合組件、混料組件、控制面板。將優(yōu)選的基礎(chǔ)方必要原料放入加樣室的第一樣品室、基礎(chǔ)方補充原料放入加樣室的第二樣品室、基因方必要原料放入加樣室的第三樣品室、基因方補充原料放入加樣室的第四樣品室，各組分原料經(jīng)微波滅菌組件滅菌；滅菌后各組分原料經(jīng)過低溫干燥粉碎組件，干燥后的細粉原料經(jīng)過篩分裝置管道后進入分離儲存混合組件；安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分原料的質(zhì)量配比，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在第一至第四儲存室中并充分混合；安裝在儲存分離組件的重力傳感器可以根據(jù)可以需要控制不同儲存室組合物的質(zhì)量配比進入可移動混料組件充分混勻，上述過程均通過控制面板進行控制。收集所述組合物，真空封裝，即為本發(fā)明所述針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品。具體制作方法如下：
(1)精選優(yōu)質(zhì)原料；
(2)通過控制面板設(shè)置需要的重量配比；
(3)將各配方的組分原料加入到對應的樣品室中，經(jīng)微波滅菌，滅菌功率為750W，持續(xù)90s；
(4)將上步的各組分進行真空低溫干燥粉碎，真空度為-0.08MPa以下，溫度不超過4℃，時間約為5小時；
(5)將上步各組分原料通過60～90目篩分，即得各組分原粉；
(6)將上述原粉通過安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分的質(zhì)量配比，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在第一至第四儲存室中；
(7)第一至第四儲存室中的組合物在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min的條件下在儲存室內(nèi)充分混勻，時間為30～60s；
(8)上述儲存在不同儲存室的各配方組合物經(jīng)過重力傳感器控制不同配方的質(zhì)量配比，分別進入到混料組件的不同產(chǎn)品室內(nèi)，在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min條件下充分混勻，時間為15～20s；
(9)收集上述混料組件內(nèi)對應產(chǎn)品室的組合物即得本發(fā)明所述針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品。
本發(fā)明還提供了一種針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
1)檢測個體的p53結(jié)合蛋白1基因、p53蛋白基因、血管內(nèi)皮生長因子基因的變異；
2)評估所檢測的基因的變異的風險；
3)選擇食品基礎(chǔ)方中的原料，根據(jù)所評估的風險選擇基因方中的原料，制成所述的針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品。
本發(fā)明的有益效果為：在基因檢測的基礎(chǔ)上，針對患者的基因型變異情況，給出適合患者基因型的特殊醫(yī)學用途配方食品，為腫瘤患者提供合理的營養(yǎng)補充，預防腫瘤患者營養(yǎng)不良現(xiàn)象的發(fā)生，提高腫瘤患者的突變細胞遷徙抑制能力。
以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明的構(gòu)思、具體結(jié)構(gòu)及產(chǎn)生的技術(shù)效果作進一步說明，以充分地了解本發(fā)明的目的、特征和效果。
附圖說明
圖1是本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中組合物制備系統(tǒng)示意圖。
具體實施方式
實施例一基因變異的檢測
采集個體口腔上皮細胞樣本，用硅膠吸附法抽提基因組DNA，經(jīng)電泳檢測驗證后進行熒光定量PCR反應。
將個體樣本分別放入3個反應孔中，同時檢測3個位點，即TP53BP1基因的rs62021180(位點一)；TP53基因的rs1042522(位點二)；VEGF基因的rs699947(位點三)。另外根據(jù)實驗需要增設(shè)不含DNA模板的NTC空白對照孔；
在每個反應孔中加入試劑為熒光定量PCR反應體系，總體積為10μL，即濃度為20ng/μL的DNA模板2μL、10×熒光定量PCR反應緩沖液MGB1μL、25mMdNTP合成DNA的四種脫氧核苷酸底物0.1μL、25mMMgCl2溶液0.5μL、(5units/μL)TaqDNA聚合酶0.02μL、去離子水4.98μL、3個位點分別采用不同的正向引物(20μM，0.225μL)、反向引物(20μM，0.225μL)、VIC熒光探針(10μM，0.25μL)和FAM熒光探針(10μM，0.25μL)；3個位點使用引物和探針如下表1所示。
表1
將反應孔和空白對照在PCR擴增儀上進行反應，先預熱：50℃、2分鐘，95℃、10分鐘，然后進行60個循環(huán)的95℃、30秒，60℃、1分鐘，反應結(jié)束后取出反應體系再放入熒光定量PCR儀上讀取樣品熒光量，得到三個基因的三張圖。
將熒光定量PCR儀上顯示的最終樣本熒光信號的圖與NTC空白對照比較，每個位點可能出現(xiàn)三種不同的信號中的一種，即純VIC熒光信號、VIC和FAM雜合熒光信號以及純FAM熒光信號，分別代表該位點三種不同的基因型。
實施例二評估所檢測的基因的變異的風險
根據(jù)大規(guī)模中國人群中的分子流行病學相關(guān)研究成果查閱，實施例所測得的三個位點的不同基因型的風險度如下表2所示：
表2
每個與突變細胞遷徙抑制能力相關(guān)的基因多態(tài)性位點分別有三種亞型，將所選位點所有亞型出現(xiàn)的可能進行排列組合；然后將這些亞型的風險度相乘獲得不同排列組合的風險度乘積；將獲得的風險度乘積從小到大或從大到小排列，合并風險度乘積相等的組；最終按風險度乘積的大小確定各組風險度的高低。
上述方法是將各位點作為獨立因素進行加權(quán)處理的，風險度乘積越大，評估風險越大；用上述方法計算得出的聯(lián)合基因型遺傳高風險個體可表述為其因自身突變細胞遷徙抑制能力差異而引發(fā)腫瘤的遺傳風險因素較多或結(jié)果確定性較強。
進一步地，將相關(guān)多態(tài)性位點標記為a、b、c……，將不同的亞型標記為1、2、3，即攜帶位點1亞型1+位點2亞型1+位點3亞型1的單倍型表示為a1b1c1；將這個優(yōu)選實施例檢測的位點rs62021180(TP53BP1)、rs1042522(TP53)和rs699947(VEGF)分別標記為a、b、c，根據(jù)上述表格中所列的單基因風險度計算風險度乘積結(jié)果如表3所示：
表3
優(yōu)選地，風險度乘積采用PHP編制程序，然后在計算機中輸入各單基因風險度值后進行計算。
然后將上表3中的單倍型按風險度乘積從低到高排列并分組，如表4所示；風險等級越高，風險度乘積越大，即個體因自身突變細胞遷徙抑制能力差異而引發(fā)腫瘤的遺傳風險越高。
表4
將三位點聯(lián)合基因型風險等級I-IV定義為低風險，風險等級V-VII定義為中風險，風險等級VIII定義為高風險。
實施例三制備和服用個體化干預配方食品
(1)原料準備
按照如下表5～7中的數(shù)據(jù)準備相關(guān)原料，分別進行相關(guān)配方組合物的生產(chǎn)。其中豌豆蛋白選用煙臺東方蛋白科技有限公司生產(chǎn)的金冠瑞豌豆蛋白質(zhì)粉，殼聚糖選用廣州利源食品添加劑有限公司生產(chǎn)的殼聚糖粉，綠豆淀粉選用衡水福橋淀粉有限公司生產(chǎn)的福橋牌綠豆淀粉，乳清蛋白選用石家莊春信生物科技有限公司生產(chǎn)的乳清蛋白，小麥草選用浙江百源食品有限公司生產(chǎn)的脫水小麥草，大米蛋白選用Krauterhaus Sanct Bernhard KG公司生產(chǎn)的大米蛋白粉，葛根粉選用興化市嘉禾食品有限公司生產(chǎn)的葛根粉，益生菌選用山東向日葵生物科技有限公司生產(chǎn)的乳酸菌凍干粉，益生元選用上海耐今實業(yè)有限公司生產(chǎn)的益生元粉，靈芝多糖選用宣城市百草植物工貿(mào)有限公司生產(chǎn)的提取靈芝多糖粉，紅花選用亳州市駿豐藥業(yè)有限責任公司生產(chǎn)的紅花干品，三七選用云南鶴明生物科技有限公司生產(chǎn)的三七干品，茶多酚選用湖北福潤德食品原料有限公司生產(chǎn)的含量為99％的綠茶提取茶多酚，葉黃素選用山東西唐生物科技有限公司生產(chǎn)的萬壽菊提取葉黃素粉，丹參提取物選用西安維特生物科技有限責任公司的產(chǎn)品。
表5個體化干預食品配方1
表6個體化干預食品配方2
表7個體化干預食品配方3
按照如下表8中的配比選用表5～7的相關(guān)配方組合物制備非個體化干預配方食品和個體化干預配方食品。
表8
(2)各種干預配方食品的生產(chǎn)
干預配方食品的制作可通過自動化低溫制樣機裝置來完成。
如圖1所示，所述自動化低溫制樣機的制備單元包括加樣室1、微波滅菌組件2、低溫干燥粉碎組件3、篩分裝置管道4、分離儲存混合組件5、混料組件6、控制面板7。將優(yōu)選的基礎(chǔ)方必要原料放入加樣室的A樣品室、基礎(chǔ)方補充原料放入加樣室的B樣品室、基因方必要原料放入加樣室的C樣品室、基因方補充原料放入加樣室的D樣品室，各組分原料經(jīng)微波滅菌組件滅菌；滅菌后各組分原料經(jīng)過低溫干燥粉碎組件，干燥后的細粉原料經(jīng)過篩分裝置管道后進入分離儲存混合組件；安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分原料的質(zhì)量配比，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在A、B、C、D儲存室中并充分混合；安裝在儲存分離組件的重力傳感器可以根據(jù)可以需要控制不同儲存室組合物的質(zhì)量配比進入可移動混料組件充分混勻，上述過程均通過控制面板進行控制。收集所述組合物，真空封裝，即為本發(fā)明所述針對癌細胞遷徙能力相關(guān)基因的配方食品。具體制作方法如下：
a.干預配方食品1的制備
(1)精選豌豆蛋白、殼聚糖、綠豆淀粉、乳清蛋白、小麥草、大米蛋白、葛根粉、益生菌、益生元、靈芝多糖、紅花、三七、茶多酚、葉黃素、丹參提取物等優(yōu)質(zhì)原料；
(2)通過控制面板按照表5中各組分重量配比進行設(shè)置；
(3)將基礎(chǔ)方必要原料放入加樣室的A樣品室、基礎(chǔ)方補充原料放入加樣室的B樣品室、基因方必要原料放入加樣室的C樣品室、基因方補充原料放入加樣室的D樣品室，經(jīng)微波滅菌，滅菌功率為750W，持續(xù)90s；
(4)將上步的各組分進行真空低溫干燥粉碎，真空度為-0.08MPa以下，溫度不超過4℃，時間約為5小時；
(5)將上步各組分原料通過60～90目篩分，即得各組分原粉；
(6)將上述原粉通過安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分的質(zhì)量配比(基礎(chǔ)方：豌豆蛋白2份、殼聚糖0.5份、綠豆淀粉0.2份、乳清蛋白0.2份、小麥草0.2份，基礎(chǔ)方補充方：大米蛋白1份、葛根粉1份、益生菌0.2份、益生元0.2份，基因方：靈芝多糖1份、紅花0.5份、三七0.5份，基因方補充方：茶多酚2份、葉黃素2份、丹參提取物0.5份)，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在A、B、C、D儲存室中；
(7)A(基礎(chǔ)方組合物)、B(基礎(chǔ)方補充方組合物)、C(基因方組合物)、D(基因方補充方組合物)儲存室中的組合物在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min的條件下在儲存室內(nèi)充分混勻，時間為30～60s；
(8)上述儲存在不同儲存室的各配方組合物經(jīng)過重力傳感器控制不同配方的質(zhì)量配比(非個體化干預配方食品：A，低風險個體化干預配方食品：3.1份A、2份C，中風險個體化干預配方食品：3.1份A、2份C、2.5份D，高風險個體化干預配方食品：3.1份A、2.4份B、2份C、2.5份D)，分別進入到混料組件的不同產(chǎn)品室內(nèi)，在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min條件下充分混勻，時間為15～20s；
(9)收集上述混料組件內(nèi)對應產(chǎn)品室的組合物，分裝成20g/包真空封裝，即得本發(fā)明實施例三(3)所用的四種針對突變細胞遷徙抑制腫瘤基因的干預配方食品1。
b.干預配方食品2的制備
(1)精選豌豆蛋白、殼聚糖、綠豆淀粉、乳清蛋白、小麥草、大米蛋白、葛根粉、益生菌、益生元、靈芝多糖、紅花、三七、茶多酚、葉黃素、丹參提取物等優(yōu)質(zhì)原料；
(2)通過控制面板按照表5中各組分重量配比進行設(shè)置；
(3)將基礎(chǔ)方必要原料放入加樣室的A樣品室、基礎(chǔ)方補充原料放入加樣室的B樣品室、基因方必要原料放入加樣室的C樣品室、基因方補充原料放入加樣室的D樣品室，經(jīng)微波滅菌，滅菌功率為750W，持續(xù)90s；
(4)將上步的各組分進行真空低溫干燥粉碎，真空度為-0.08MPa以下，溫度不超過4℃，時間約為5小時；
(5)將上步各組分原料通過60～90目篩分，即得各組分原粉；
(6)將上述原粉通過安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分的質(zhì)量配比(基礎(chǔ)方：豌豆蛋白3份、殼聚糖1份、綠豆淀粉0.5份、乳清蛋白0.5份、小麥草0.5份，基礎(chǔ)方補充方：大米蛋白2份、葛根粉2份、益生菌0.5份、益生元0.5份，基因方：靈芝多糖2份、紅花1份、三七1份，基因方補充方：茶多酚2.5份、葉黃素2.5份、丹參提取物1份)，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在A、B、C、D儲存室中；
(7)A(基礎(chǔ)方組合物)、B(基礎(chǔ)方補充方組合物)、C(基因方組合物)、D(基因方補充方組合物)儲存室中的組合物在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min的條件下在儲存室內(nèi)充分混勻，時間為30～60s；
(8)上述儲存在不同儲存室的各配方組合物經(jīng)過重力傳感器控制不同配方的質(zhì)量配比(非個體化干預配方食品：A，低風險個體化干預配方食品：5.5份A、4份C，中風險個體化干預配方食品：5.5份A、4份C、6份D，高風險個體化干預配方食品：5.5份A、5份B、4份C、6份D)，分別進入到混料組件的不同產(chǎn)品室內(nèi)，在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min條件下充分混勻，時間為15～20s；
(9)收集上述混料組件內(nèi)對應產(chǎn)品室的組合物，分裝成20g/包真空封裝，即得本發(fā)明實施例三(3)所用的四種針對突變細胞遷徙抑制腫瘤基因的干預配方食品2。
c.干預配方食品3的制備
(1)精選豌豆蛋白、殼聚糖、綠豆淀粉、乳清蛋白、小麥草、大米蛋白、葛根粉、益生菌、益生元、靈芝多糖、紅花、三七、茶多酚、葉黃素、丹參提取物等優(yōu)質(zhì)原料；
(2)通過控制面板按照表5中各組分重量配比進行設(shè)置；
(3)將基礎(chǔ)方必要原料放入加樣室的A樣品室、基礎(chǔ)方補充原料放入加樣室的B樣品室、基因方必要原料放入加樣室的C樣品室、基因方補充原料放入加樣室的D樣品室，經(jīng)微波滅菌，滅菌功率為750W，持續(xù)90s；
(4)將上步的各組分進行真空低溫干燥粉碎，真空度為-0.08MPa以下，溫度不超過4℃，時間約為5小時；
(5)將上步各組分原料通過60～90目篩分，即得各組分原粉；
(6)將上述原粉通過安裝在篩分裝置管道的重力傳感器控制不同組分的質(zhì)量配比(基礎(chǔ)方：豌豆蛋白5份、殼聚糖2份、綠豆淀粉0.8份、乳清蛋白0.8份、小麥草0.8份，基礎(chǔ)方補充方：大米蛋白4份、葛根粉4份、益生菌0.8份、益生元0.8份，基因方：靈芝多糖4份、紅花2份、三七2份，基因方補充方：茶多酚3份、葉黃素3份、丹參提取物2份)，形成基礎(chǔ)方組合物、基礎(chǔ)方補充方組合物、基因方組合物、基因方補充方組合物分別儲存在A、B、C、D儲存室中；
(7)A(基礎(chǔ)方組合物)、B(基礎(chǔ)方補充方組合物)、C(基因方組合物)、D(基因方補充方組合物)儲存室中的組合物在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min的條件下在儲存室內(nèi)充分混勻，時間為30～60s；
(8)上述儲存在不同儲存室的各配方組合物經(jīng)過重力傳感器控制不同配方的質(zhì)量配比(非個體化干預配方食品：A，低風險個體化干預配方食品：9.4份A、8份C，中風險個體化干預配方食品：9.4份A、8份C、8份D，高風險個體化干預配方食品：9.4份A、9.6份B、8份C、8份D)，分別進入到混料組件的不同產(chǎn)品室內(nèi)，在轉(zhuǎn)速為60r/min～100r/min條件下充分混勻，時間為15～20s；
(9)收集上述混料組件內(nèi)對應產(chǎn)品室的組合物，分裝成20g/包真空封裝，即得本發(fā)明實施例三(3)所用的四種針對突變細胞遷徙抑制腫瘤基因的干預配方食品3。
(3)個體化干預配方食品的效果驗證
從腫瘤特殊項目研究中心的腫瘤患者中隨機選擇手術(shù)后突變細胞遷移抑制能力低風險、中風險和高風險的肺部腫瘤病人若干名，按照下表9中的數(shù)據(jù)服用以上制備的非個體化干預配方食品或個體化干預配方食品，其中，每日服用3次，早中晚各一次，每次一包，用約150ml溫開水(45度)溶解后，直接飲用。服用后每月檢測循環(huán)腫瘤細胞(circulating tumor cells,CTCs)數(shù)量，共檢測三次，然后取每組(30名)的CTC的平均值作為檢測結(jié)果，統(tǒng)計受試者服用干預配方食品前后體重的差異及顯效例數(shù)，結(jié)果如下表9所示。
表9
*表示P<0.05，存在顯著差異。
循環(huán)腫瘤細胞是指因自發(fā)或診療操作由原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶脫落進入外周血的腫瘤細胞，其存在于多種實體瘤中，少量能夠長期生存的循環(huán)腫瘤細胞是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要原因，CTCs受到突變細胞遷移抑制能力的影響，其數(shù)量能夠反應機體突變細胞遷移抑制能力的強弱；體重的差異反應腫瘤病人的營養(yǎng)狀態(tài)，用以評估該個體化干預配方食品的營養(yǎng)價值。由表9的數(shù)據(jù)可以看出，不同類型的干預配方食品對相應的病人均有的效果，個體化干預配方食品的效果更好(CTC數(shù)量的差異具有顯著性且顯效人數(shù)更多)，均能保證腫瘤病人的營養(yǎng)需求(服用前后體重沒有顯著變化)，且風險等級越高的病人對個體化干預配方食品的效果越明顯。
以上詳細描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應當理解，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此，凡本技術(shù)領(lǐng)域中技術(shù)人員依本發(fā)明的構(gòu)思在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上通過邏輯分析、推理或者有限的實驗可以得到的技術(shù)方案，皆應在由權(quán)利要求書所確定的保護范圍內(nèi)。