三株防治新疆紅棗樹黑斑病病害的生防細菌菌株的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了三株防治新疆紅棗樹黑斑病的拮抗細菌菌株，菌株為芽孢桿菌屬。所述芽孢桿菌經(jīng)平板對峙試驗篩選所得，能夠有效抑制紅棗樹黑斑病病原菌的生長。菌株來源于土壤中，012菌體形狀為桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陰性茵，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化；045-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、易乳化；063-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽性菌。單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化。菌株做為生物制劑，不含有化學(xué)農(nóng)藥的有害成分，具有無毒無污染、易生產(chǎn)等優(yōu)點，具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說明】三株防治新疆紅棗樹黑斑病病害的生防細菌菌株
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于森林保護領(lǐng)域，具體涉及三株防治新疆紅棗樹黑斑病病害的拮抗細菌菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人們對紅棗的營養(yǎng)價值及藥用價值認識得不斷深入，社會需求量的加大，有效地激發(fā)了新疆規(guī)?；l(fā)展、產(chǎn)業(yè)化經(jīng)營棗樹的積極性，現(xiàn)已發(fā)展成為南疆林果業(yè)中的新型產(chǎn)業(yè)。隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整和退耕還林政策的實施，新疆紅棗產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，截至2009年底，新疆紅棗種植面積已達32.07萬hm2，約占全國的21.38%，南疆已成為我國商品棗的生產(chǎn)基地。隨著紅棗直播建園技術(shù)的應(yīng)用，紅棗種植規(guī)模迅速擴大，矮化密植栽培模式在全疆廣泛采用，但綜合管理水平相對滯后，導(dǎo)致黑斑病、縮果病、裂果病等病害在局部地區(qū)嚴重發(fā)生，尤其是棗黑斑病。
[0003]通常主要通過加強棗園綜合管理，增強樹勢來防治。如合理密植、合理施肥合理灌水、合理利用激素、化學(xué)防治等。由于生態(tài)果園的提出，化學(xué)防治對果園生態(tài)環(huán)境與人類健康有影響。生物防治不僅具有有效控制害蟲、不污染環(huán)境、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)、而且利用生物防治或微生物活菌劑防治植物病害，資源豐富，選擇性強，對人、畜及植物安全，一旦被馴化而建立種群，對病蟲害有較長期的控制作用。從微生物種類來看，多作為微生物農(nóng)藥使用，不論是病毒、細菌、和真菌等，研究的熱點都是-拮抗細菌。拮抗細菌是從土壤中篩選出的對植物病原物有抑制作用的細菌，主要是通過產(chǎn)生抑制物質(zhì)或改變菌種周圍的小環(huán)境來致使病菌菌絲畸形或菌絲不產(chǎn)孢，從而達到拮抗的作用的一類細菌。拮抗菌株芽孢桿菌，是從土壤中分離獲得的對紅棗樹黑斑病具有較好拮抗作用的一株生物防治細菌菌株，對紅棗黑斑病病害的防治具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的 技術(shù)問題是提供三株防治新疆紅棗樹黑斑病病害的生防細菌株。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:通過對土壤中細菌進行分離純化，篩選出對紅棗黑斑病病原菌拮抗活性好的拮抗細菌。其方法如下:
[0006]1、篩選細菌；
[0007]2、供試病原菌由10級研究生從紅棗病斑中分離得到；
[0008]3、配制培養(yǎng)基:1)菌株純化常用的培養(yǎng)基；2)細菌鑒定常用培養(yǎng)基
[0009]4、拮抗細菌拮抗作用的測定:1)拮抗細菌對病原菌的平板對峙拮抗試驗；2)拮抗細菌發(fā)酵液對病原菌生長影響的試驗
【具體實施方式】
[0010]以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。[0011]實施例1
[0012]采用土壤稀釋法篩選分離細菌，很據(jù)形態(tài)、生理生化特征及16S rDNA序列分析鑒定確定其為小芽孢桿菌。菌株來源于土壤中，012菌體形狀為桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陰性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化；045-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽性菌，單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、易乳化；063-1菌體的形狀為短桿狀，鞭毛特征不明顯，為革蘭氏陽性菌。單菌落為近圓形，乳白色、奶油狀、不透明、中央有隆起的皺褶、邊緣整齊、不易乳化。通過拮抗細菌的拮抗試驗可以得出三株拮抗菌對紅棗黑斑病病菌的拮抗效果平 均達到了 85%，效果非?？捎^；通過抑制原理實驗可以得出:三株拮抗細菌與紅棗黑斑病病菌發(fā)生拮抗試驗時，拮抗細菌使紅棗黑斑病病原菌正常的菌絲隔膜發(fā)生了斷裂、解體或畸形。且本次試驗鑒定出的三株芽孢桿菌，本次試驗鑒定出的拮抗細菌，均為好氧型細菌，在厭氧情況下可以緩慢生長，具有良好地適應(yīng)生長能力，在溫度高達45°C時也能正常生長。從而在生物藥劑開發(fā)中，提高了培育拮抗細菌的存活率，為以后農(nóng)業(yè)提供廉價、高效的生物農(nóng)藥奠定了基礎(chǔ)。
【權(quán)利要求】
1.篩選細菌。
2.供試病原菌由10級研究生從紅棗病斑中分離得到。
3.配制培養(yǎng)基:1)菌株純化常用的培養(yǎng)基；2)細菌鑒定常用培養(yǎng)基。
4.拮抗細菌拮抗作用的測定:1)拮抗細菌對病原菌的平板對峙拮抗試驗；2)拮抗細菌發(fā)酵液對病原菌生長影響的試驗。
【文檔編號】C12Q1/04GK103695527SQ201310727738
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月26日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月26日
【發(fā)明者】馬榮, 田呈明, 朱銀飛, 梁英梅, 王曉煒, 王陽陽, 胡建新 申請人:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)