一種高、中、低聚茶褐素及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種高、中、低聚茶褐素的制備方法，該方法包括以下步驟：步驟1，普洱熟茶用水提取得到提取液，提取液濃縮后離心得到上清液；步驟2，上清液加入乙醇，得到沉淀物，沉淀物加水溶解，離心得到離心液，干燥后得到茶褐素干粉；步驟3，茶褐素干粉用水溶解，用濾膜過濾法得到不同聚合度的茶褐素。
【專利說明】一種高、中、低聚茶褐素及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品領(lǐng)域，具體涉及一種高、中、低聚茶褐素及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]在普洱茶發(fā)酵過程中，普洱茶中的物質(zhì)發(fā)生了很大的變化，特別是色素物質(zhì)變化很大。茶褐素是普洱茶中主要成分，也是普洱茶區(qū)別于其他茶類飲料的重要成分，受到了很大的關(guān)注。茶褐素的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其極性也很大，不溶于絕大多數(shù)有機(jī)試劑，關(guān)于茶褐素的研究也較少。
[0003]目前人們對于茶褐素研究報(bào)道中大多使用的是有機(jī)溶劑萃取法。普洱茶先磨碎后用水提取，用三氯甲烷或者二氯甲烷萃取除去咖啡因，再用乙酸乙酯與正丁醇除去茶黃素與茶紅素，最后得到茶褐素。流程大致如下:茶葉一粉碎一無水乙醇浸泡一過濾一茶渣一熱水提取一過濾一減壓濃縮一二氯甲烷萃取3次一乙酸乙酯萃取3次一正丁醇萃取3次一水相減壓濃縮一茶褐素粗品一無水乙醇洗滌一茶褐素。
[0004]普洱茶中茶褐素為特征性成分，普洱茶發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵程度不同茶褐素聚合度逐漸加大，所以區(qū)分不同聚合度茶褐素可以評價(jià)普洱茶品質(zhì)，并且可以從不同聚合度茶褐素的比例，判斷普洱茶發(fā)酵年份。另外不同聚合度茶褐素在體內(nèi)的吸收分布各不相同，所以結(jié)合藥理試驗(yàn)篩選不同聚合度茶褐素的藥理作用，并且可以作為特殊功效普洱茶的質(zhì)量控制指標(biāo)。不同聚合度茶褐素含量可以作為普洱茶品質(zhì)評價(jià)的重要指標(biāo)。
[0005]茶褐素是一種分 子量差異大的高聚合物，本發(fā)明經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，根據(jù)分子量的不同，茶褐素可以分為高聚合的茶褐素和低聚合的茶褐素，為研究方便，分子量分布小于I萬(其中在2000左右和6000左右有集中分布)定義為低聚茶褐素；分子量分布在f 5萬(其中在I萬和3萬左右有比較明確的集中分布)定義為中聚茶褐素；分子量大于5萬定義為高聚茶褐素。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)中有制備茶褐素的報(bào)道，但沒有制備不同聚合度的茶褐素的方法的報(bào)道，本發(fā)明經(jīng)過研究，發(fā)現(xiàn)一種制備不同聚合度的茶褐素的方法，該方法簡單易行，可同時(shí)制備不同聚合度的茶褐素。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0007]本發(fā)明提供一種不同聚合度的茶褐素的制備方法，該方法包括以下步驟:
[0008]步驟1，普洱熟茶用水提取得到提取液，提取液濃縮后離心得到上清液；
[0009]步驟2，上清液加入乙醇，得到沉淀物，沉淀物加水溶解，離心得到離心液，干燥后得到茶褐素干粉；
[0010]步驟3，茶褐素干粉用水溶解，用濾膜過濾法得到不同聚合度的茶褐素。
[0011]其中步驟I所述用水提取是用5-20倍量的水，80-100°C提取2_5次，每次0.5-2小時(shí)；合并提取液后，減壓濃縮到相對密度1.05^1.10，然后再離心。
[0012]其中步驟2中所述加入乙醇是加入90%以上的乙醇，使加入后的乙醇濃度達(dá)到70%-80%，加入乙醇后，常溫或冷卻放置12-36小時(shí)，析出沉淀物，分離上清液得到沉淀物，沉淀物用水溶解至比重1.05^1.10，離心收集離心液，干燥后得到茶褐素干粉。
[0013]其中步驟3中所述用水溶解是將茶褐素干粉用水溶解到0.5_2g/L，然后用孔徑
0.45 μ m和0.22 μ m的微孔濾膜過濾。
[0014]濾出的溶液再經(jīng)過截流分子量為5萬的納濾膜過濾，過濾采用自然壓力；其中，沒有濾出的溶液稱為膜上溶液，收集該膜上溶液并進(jìn)行干燥得到高聚合度的茶褐素。
[0015]濾出的溶液再截流分子量為I萬的納濾膜過濾采用自然壓力；其中，沒有濾出的溶液稱為膜上溶液，收集該膜上溶液并進(jìn)行干燥得到中聚合度的茶褐素，收集濾出的溶液并進(jìn)行干燥得到低聚合度的茶褐素。
[0016]本發(fā)明優(yōu)選的制備方法如下:
[0017]茶褐素制備工藝
[0018]取普洱熟茶適量，加10倍量水加熱80°C提取2次，每次I小時(shí)，過濾，茶渣加8倍量水，加熱80°C提取0.5小時(shí)，過濾，茶渣棄去，合并提取液，過300目濾布，濾液70°C減壓真空濃縮至相對密度1.05-1.10，管式離心，得離心上清液，加95%乙醇醇沉至含醇量80%，靜置過夜，離心，得醇沉沉淀，加熱水復(fù)溶至比重1.05-1.10,管式離心，得上清液，噴霧干燥，得茶褐素干粉。
[0019]不同聚合度茶褐素制備工藝
[0020]取茶褐素干粉水復(fù) 溶(5g — 5L)，依次過0.45 μ m和0.22 μ m的微孔濾膜，濾過液先用截流分子量為5萬的納濾膜過濾，膜上截流溶液減壓濃縮至比重1.l(Tl.15，凍干得高聚茶褐素；5萬膜透過液再用截流分子量為I萬的納濾膜進(jìn)行膜截流，膜上未通過溶液檢驗(yàn)濃縮至1.l(Tl.15，凍干得中聚茶褐素；1萬膜下透過液濃縮后凍干得低聚茶褐素。
[0021]本發(fā)明得到的茶褐素經(jīng)過檢測得到其分子量分布，檢測方法如下:
[0022]GPC方法:分析采用凝膠滲透色譜法在十八角激光光散射儀和示差檢測器聯(lián)用。以0.lmol/L硝酸鈉溶液加0.2%疊氮化鈉為流動(dòng)相，柱溫40°C;示差折光檢測器；溫度40°C;激光檢測波長658nm ;流速為0.5mL/min ;進(jìn)樣體積:200 μ L。
[0023]試驗(yàn)處理樣品:
[0024]取茶褐素樣品適量，分別配置成5mg/ml的溶液，溶液過0.45 μ m微孔濾膜過濾，進(jìn)樣檢測，結(jié)果如下表:
【權(quán)利要求】
1.一種不同聚合度的茶褐素的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟: 步驟I，普洱熟茶用水提取得到提取液，提取液濃縮后離心得到上清液； 步驟2，上清液加入乙醇，得到沉淀物，沉淀物加水溶解，離心得到離心液，干燥后得到茶褐素干粉； 步驟3，茶褐素干粉用水溶解，用濾膜過濾法得到不同聚合度的茶褐素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，其中步驟I所述用水提取是用5-20倍量的水，80-100°C提取2-5次，每次0.5-2小時(shí)；合并提取液后，減壓濃縮到相對密度1.05"!.10,然后再離心。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，其中步驟2中所述加入乙醇是加入90%以上的乙醇，使加入后的乙醇濃度達(dá)到70%-80%，加入乙醇后，常溫或冷卻放置12-36小時(shí)，析出沉淀物，分離上清液得到沉淀物，沉淀物用水溶解至比重1.05^1.10，離心收集離心液，干燥后得到茶褐素干粉；
4.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，其中步驟3中所述用水溶解是將茶褐素干粉用水溶解成0.5-2g/L，然后用孔徑0.45 μ m和0.22 μ m的微孔濾膜過濾，濾出的溶液再經(jīng)過截流分子量為5萬的納濾膜過濾，其中，沒有濾過的溶液稱為膜上溶液，收集該膜上溶液并進(jìn)行干燥得到高聚茶褐素，濾出的溶液再經(jīng)截流分子量為I萬的納濾膜過濾，收集沒有濾過的溶液，并進(jìn)行干燥得到中聚茶褐素，收集濾出的溶液并進(jìn)行干燥得到低聚茶褐素。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，步驟如下: 取普洱熟茶適量，加10倍量水加熱80°c提取2次，每次I小時(shí)，過濾，茶渣加8倍量水，加熱80°C提取0.5小時(shí)，過濾，茶渣棄去，合并提取液，過300目濾布，濾液70°C減壓真空濃縮至相對密度1.05-1.10，管式離心，得離心上清液，加95%乙醇醇沉至含醇量80%，靜置過夜，離心，得醇沉沉淀，加熱水復(fù)溶至比重1.05-1.10,管式離心，得上清液，噴霧干燥，得干粉A ;取茶褐素干粉A用水復(fù)溶，依次過0.45 μ m和0.22 μ m的微孔濾膜，濾過液先用截流分子量為5萬的納濾膜過濾，膜上截流溶液減壓濃縮至比重1.l(Tl.15凍干得高聚茶褐素；5萬膜透過液再用截流分子量為I萬的納濾膜進(jìn)行膜截流，膜上未通過溶液減壓濃縮至比重1.l0-l.15，凍干得中聚茶褐素；分子量截流膜I萬的納濾膜透過液濃縮后凍干得低聚茶褐素。
6.用權(quán)利要求1的方法制備的茶褐素，其特征在于，其中分子量分布小于I萬為低聚茶褐素；分子量分布在1-5萬為中聚茶褐素；分子量大于5萬為高聚茶褐素。
【文檔編號】A23F3/18GK103504048SQ201210222451
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2012年6月29日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月29日
【發(fā)明者】李瑞明, 王玉, 張?zhí)m蘭, 顧睿, 李長文, 劉順航, 賈黎暉, 陳慶闖 申請人:云南天士力帝泊洱生物茶集團(tuán)有限公司