專利名稱：一種使用素食材料生成維生素b12的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生成維生素B12的方法，更具體地說(shuō)，涉及一種使用素食材料生成維生素B12的方法。
技術(shù)背景
維生素B12對(duì)人體的健康非常重要，缺乏適量的維生素B12，會(huì)導(dǎo)致惡性的貧血及大腦神經(jīng)受到破環(huán)，因維生素B12主要存在于肉類及乳類中，而不存在植物里，對(duì)一些不食用乳類食品的長(zhǎng)期素食者會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)不良，這都是一直以來(lái)在營(yíng)養(yǎng)學(xué)上的問(wèn)題，雖然近來(lái)?yè)?jù)說(shuō)維生素B12存在于大豆中，實(shí)驗(yàn)證明及西方研究并不贊同這種說(shuō)法，而事實(shí)因植物類食品本身是決乏維生素B12，有些食品往往便添加了維生素B12在其中。而現(xiàn)時(shí)維生素B12 的制造是通過(guò)微生物發(fā)酵技術(shù)，轉(zhuǎn)化前體化學(xué)物為維生素B12，在轉(zhuǎn)化過(guò)程中添加化學(xué)物。 也有傳言說(shuō)發(fā)酵的大豆食品中含有維生素B12，經(jīng)過(guò)對(duì)市場(chǎng)中發(fā)酵大豆食品的普查中，利用高效液相分折儀的分析，市場(chǎng)中出售的發(fā)酵大豆食品，例如腐乳、南乳等，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)其含有可分析量的維生素B12。總之到目前為止，并沒(méi)有使用純天然、沒(méi)添加化學(xué)品、用全素食材料制造維生素B12的方法
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，提供一種使用素食材料生成維生素B12的方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是構(gòu)造一種使用素食材料生成維生素 B12的方法，其包括以下步驟將能代謝淀粉或多糖為單糖的食用發(fā)酵真菌的菌株接種到大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫有氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)至長(zhǎng)滿菌絲；將費(fèi)氏丙酸桿菌的菌株接種到所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫低氧的環(huán)境條件下，發(fā)酵培養(yǎng)至產(chǎn)生維生素B12。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，所述大豆混合物是大豆與米類的混合物、大豆與谷類的混合物、或者大豆與黑豆的混合物。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，所述食用發(fā)酵真菌是雅致放射毛霉。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，通過(guò)以下步驟生成所述大豆混合物的凝結(jié)物將大豆混合物用清水浸泡5、小時(shí)；在浸泡后的大豆混合物中加入清水，用粉碎機(jī)磨成漿，并進(jìn)行分離漿汁；用慢火將所述漿汁煮15 30分鐘，然后使用葡萄糖內(nèi)酯或其它凝固劑制成所述大豆混合物的凝結(jié)物。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，將所述大豆混合物用清水浸泡6小時(shí)，其中，浸泡時(shí)間會(huì)在不同溫度下作出調(diào)整。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，使用網(wǎng)孔布，進(jìn)行分離漿汁。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，用慢火將所述漿汁煮20 分鐘。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，所述葡萄糖內(nèi)酯的濃度為 0.01mol/L。
在本發(fā)明所述的使用素食材料生成維生素B12的方法中，還包括加入鹽鹵汁，淹過(guò)所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，再培養(yǎng)1-2個(gè)月。
實(shí)施本發(fā)明的使用素食材料生成維生素B12的方法，具有以下有益效果利用多種微生物在全素食材料中發(fā)酵制造維生素B12，可為長(zhǎng)期素食者，無(wú)論其素食的原因是宗教信仰，還是潮流推動(dòng)，帶來(lái)的是全素及純天然含維生素B12的食品。


下面將結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，附圖中圖1是本發(fā)明生成的維生素B12的高效液相色譜分析儀的標(biāo)準(zhǔn)曲線示意圖； 圖加是本發(fā)明大豆和大米混合的分析圖； 圖2b是圖加中維生素B12的含量分析圖； 圖3a是本發(fā)明大豆和谷類混合的分析圖； 圖北是圖3a中維生素B12的含量分析圖； 圖如是本發(fā)明大豆和大麥混合的分析圖； 圖4b是圖如中維生素B12的含量分析圖； 圖如是本發(fā)明大豆和黑米混合的分析圖； 圖恥是圖fe中維生素B12的含量分析圖； 圖6a是本發(fā)明大豆和黑豆混合的分析圖； 圖6b是圖6a中維生素B12的含量分析圖； 圖7a是本發(fā)明大豆和別的非米類、谷類或豆類物質(zhì)混合的分析圖； 圖7b是圖7a中維生素B12的含量分析圖。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
在本技術(shù)中會(huì)使用兩種微生物進(jìn)行發(fā)酵，雅致放射毛霉(Actinomucor elegans) 及費(fèi)氏丙酸桿菌(Propionibacterium freudenreichii)，其中的真菌雅致放射毛霉常用于腐乳發(fā)酵過(guò)程，可將淀粉或多糖代謝為單糖，單獨(dú)使用不能制造維生素B12，細(xì)菌費(fèi)氏丙酸桿菌常用于瑞士芝士制造的發(fā)酵中，在乳中發(fā)酵能產(chǎn)生小量的維生素B12，但單獨(dú)使用在植物材料中發(fā)酵，并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)能制造維生素B12的能力。在本發(fā)明申請(qǐng)的技術(shù)方案中分兩部分(一)將使用真菌雅致放射毛霉在指定的素食材料并在室溫有氧條件下，發(fā)酵至真菌起白毛，若2天左右(發(fā)酵環(huán)境可導(dǎo)致時(shí)間有差別)把部份的淀粉或多糖代謝為單糖，在此其它的食用發(fā)酵真菌能代謝淀粉或多糖為單糖也可使用；(二)再加上細(xì)菌費(fèi)氏丙酸桿菌在室溫低氧發(fā)酵一至兩個(gè)月。在一般的素食材料中，使用這兩種微生物用上述的方法也未能使其生產(chǎn)維生素B12，只會(huì)在一些適當(dāng)素食材料的組合中才能產(chǎn)生或產(chǎn)生比較多量的維生素B12，適當(dāng)?shù)慕M合有大豆加上谷類，如米類，谷類等、或大豆加黑豆。在發(fā)明申請(qǐng)中發(fā)現(xiàn)使用這兩種的組合的素食材料，再加以上所述兩種微生物進(jìn)行分段發(fā)酵，都能產(chǎn)生維生素 B12，比單一使用費(fèi)氏丙酸桿菌在牛奶中發(fā)酵所產(chǎn)生的維生素B12高出超過(guò)10倍。在一實(shí)施例中，使用素食材料生成維生素B12的過(guò)程為
將大豆混合物用清水浸泡5、小時(shí)；優(yōu)選的，將所述大豆混合物用清水浸泡6小時(shí)，其中，浸泡時(shí)間會(huì)在不同溫度下作出調(diào)整。另外，該大豆混合物是大豆與米類的混合物、大豆與谷類的混合物、或者大豆與黑豆的混合物。如圖加是本發(fā)明大豆和大米混合的分析圖； 圖3a是本發(fā)明大豆和谷類混合的分析圖；圖如是本發(fā)明大豆和大麥混合的分析圖；圖fe 是本發(fā)明大豆和黑米混合的分析圖；圖6a是本發(fā)明大豆和黑豆混合的分析圖。在大豆混合物中加入清水，用粉碎機(jī)磨成漿，并進(jìn)行分離漿汁；優(yōu)選的，使用網(wǎng)孔布，進(jìn)行分離漿汁。用慢火將所述漿汁煮15 30分鐘，然后使用葡萄糖內(nèi)酯或其它凝固劑制成所述大豆混合物的凝結(jié)物；優(yōu)選的，用慢火將所述漿汁煮20分鐘。優(yōu)選的，葡萄糖內(nèi)酯的濃度為 0.01mol/L。將能代謝淀粉或多糖為單糖的食用發(fā)酵真菌的菌株接種到大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在在室溫有氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)至長(zhǎng)滿菌絲；優(yōu)選的，該食用發(fā)酵真菌是雅致放射毛霉。將費(fèi)氏丙酸桿菌的菌株接種到所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫低氧的環(huán)境條件下，發(fā)酵培養(yǎng)至產(chǎn)生維生素B12。如圖2b是圖加中維生素B12的含量分析圖；圖 3b是圖3a中維生素B12的含量分析圖；圖4b是圖如中維生素B12的含量分析圖；圖恥是圖fe中維生素B12的含量分析圖；圖6b是圖6a中維生素B12的含量分析圖。加入鹽鹵汁，淹過(guò)所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，再培養(yǎng)1-2個(gè)月。圖1是維生素B12在高效液相色譜分析儀的標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用這標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算維生素B12在最后大豆混合物的凝結(jié)物樣品的含量。如圖的分析結(jié)果顯示維生素B12 可在大豆混合谷類(圖h 5b)；及大豆混合黑豆(圖6a 6b)中找到，但不在圖7a 7b所示的大豆和別的非米類、谷類或豆類物質(zhì)混合的分析圖中找到?？赏ㄟ^(guò)如下方法對(duì)經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后的大豆混合物的凝結(jié)物中維生素B12的含量進(jìn)行檢測(cè)
把5克樣品放入塑料袋中，加20ml酸緩沖溶液，該酸緩沖溶液由1. 92179g/Liter乙酸和2. 44936g/Liter醋酸鈉組成。放入研磨機(jī)中2分鐘以研磨液。把樣品從塑料袋拿出，然后在120°C高壓滅菌10分鐘。
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等待30分鐘降溫至室溫。 把液體樣品離心5分鐘(8000RMP/分鐘)，取上層清液，在0. 45um的濾膜過(guò)濾。然后，取每個(gè)樣品1毫升和添加IOOul的內(nèi)標(biāo)。然后在高效液相色譜分析。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，包括以下步驟將能代謝淀粉或多糖為單糖的食用發(fā)酵真菌的菌株接種到大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫有氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)至長(zhǎng)滿菌絲；將費(fèi)氏丙酸桿菌的菌株接種到所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫低氧的環(huán)境條件下，發(fā)酵培養(yǎng)至產(chǎn)生維生素B12。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，所述大豆混合物是大豆與米類的混合物、大豆與谷類的混合物、或者大豆與黑豆的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，所述食用發(fā)酵真菌是雅致放射毛霉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，通過(guò)以下步驟生成所述大豆混合物的凝結(jié)物將大豆混合物用清水浸泡；在浸泡后的大豆混合物中加入清水，用粉碎機(jī)磨成漿，并進(jìn)行分離漿汁；用慢火煮所述漿汁，然后使用葡萄糖內(nèi)酯或其它凝固劑制成所述大豆混合物的凝結(jié)物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，將所述大豆混合物用清水浸泡的時(shí)間與浸泡的溫度相關(guān)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，使用網(wǎng)孔布，進(jìn)行分離漿汁。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，所述葡萄糖內(nèi)酯的濃度為0. 01mol/Lo
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其特征在于，還包括加入鹽鹵汁，淹過(guò)所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，再進(jìn)行培養(yǎng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種使用素食材料生成維生素B12的方法，其包括以下步驟將能代謝淀粉或多糖為單糖的食用發(fā)酵真菌的菌株接種到大豆混合物的凝結(jié)物的表面,并在室溫有氧條件下發(fā)酵培養(yǎng)至長(zhǎng)滿菌絲；將費(fèi)氏丙酸桿菌的菌株接種到所述大豆混合物的凝結(jié)物的表面，并在室溫低氧的環(huán)境條件下，發(fā)酵培養(yǎng)至產(chǎn)生維生素B12。利用多種微生物在全素食材料中發(fā)酵制造維生素B12，可為長(zhǎng)期素食者，無(wú)論其素食的原因是宗教信仰，還是潮流推動(dòng)，帶來(lái)的是全素及純天然含維生素B12的食品。
文檔編號(hào)C12R1/645GK102533909SQ20111045802
公開(kāi)日2012年7月4日 申請(qǐng)日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者慕容健昌, 潘玉瓊, 陳嘉欣 申請(qǐng)人:北京師范大學(xué)-香港浸會(huì)大學(xué)聯(lián)合國(guó)際學(xué)院, 潘玉瓊