專利名稱：一種制備燕麥活性肽的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬于農(nóng)產(chǎn)品深加工技術(shù)領域，具體涉及ー種制備燕麥活性肽的方法。
背景技術(shù)：
燕麥一般分為帶稃型和裸粒型兩大類。世界各國栽培的燕麥以帶稃型的為主，常稱為皮燕麥。我國栽培的燕麥以裸粒型的為主，常稱裸燕麥。燕麥的醫(yī)療價值和保健作用， 已被古今中外醫(yī)學界所公認。據(jù)1981 1985年中國農(nóng)科院與北京市心腦血管研究中心、 北京市海淀醫(yī)院等18家醫(yī)療單位5輪動物試驗和3輪997例臨床觀察研究證明，裸燕麥能預防和治療由高血脂弓I發(fā)的心腦血管疾病。燕麥蛋白質(zhì)是燕麥最主要的成分之一，谷類中燕麥蛋白質(zhì)含量最高，必需氨基酸組成合理，含有人體必需的8種氨基酸，賴氨酸含量高于小麥粉和稻米，有利于飲食中其他氨基酸的吸收，色氨酸含量也很豐富，具有很高的營養(yǎng)和保健價值。燕麥蛋白質(zhì)經(jīng)酶解可得到小分子的肽和氨基酸，這ー類分子中都含有親水基團，可以吸收水分或鎖住皮膚角質(zhì)層水分，具有非常好的保濕功效。燕麥蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸還是組織和細胞生長發(fā)育必須的營養(yǎng)物資，在化妝品中添加這些物質(zhì)，還可以滋潤肌膚、營養(yǎng)細胞、促進皮膚組織健康的生
i^/k ^ ο目前國內(nèi)外對于燕麥蛋白以及燕麥多肽的研究也趨于熱衷，基本分為兩類，ー類是大分子量的燕麥蛋白提取方法的研究，另ー類是以降解后的小分子量的燕麥多肽提取方法進行研究。中國專利《一種提取燕麥多肽、燕麥葡聚糖的綜合提取方法》中，其公開的エ 藝是ー種綜合提取燕麥成分的方法，且其對于燕麥多肽提取エ藝部分是采用單ー堿性蛋白酶酶解再硅藻土板框過濾的方法。中國專利《從燕麥麩皮中提取燕麥淀粉、蛋白粉、葡聚糖的方法》中，其公開的エ藝是離心機分離出燕麥蛋白，再噴霧干燥得到燕麥蛋白。中國專利《ー種燕麥多肽及其制備方法與應用》中，公開的是超聲預處理，酶降解，大孔樹脂吸附純化的エ藝方法。而其他公開的涉及燕麥蛋白或多肽提取的專利文獻，均是單ー提取燕麥蛋白，或者對燕麥蛋白進行降解后即為產(chǎn)品。在其他文獻報道中，《燕麥麩皮濃縮蛋白提取 エ藝研究》與《堿提酸沉法制備燕麥麩濃縮蛋白的エ藝及其改進》等文獻均是單ー提取燕麥蛋白質(zhì)?！睹阜ㄖ苽溲帑滬煹鞍譇CE抑制肽的研究》、《燕麥多肽提取エ藝及特性研究》、《燕麥多肽提取エ藝及特性研究》等文獻均采用酶降解燕麥多肽，但并沒有對燕麥多肽進行不同分子量的富集。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種采用新型エ藝制備燕麥活性肽的方法，制得的燕麥活性肽功效更顯著，更利于人們應用。本發(fā)明提供的一種制備燕麥活性肽的方法，其特征在于以燕麥麩皮為原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，堿性提取燕麥蛋白質(zhì)，離心分離，離心液等電點沉淀，離心得到燕麥蛋白，復溶燕麥蛋白，定向酶解得到燕麥多肽，超濾富集燕麥多肽，冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。具體制備步驟為
(1)將燕麥麩皮加水攪拌，升溫到70-90°C，調(diào)整pH為6.0-8. 0，加入0. 01-0. 1%的淀粉酶反應0. 5-1小時；然后調(diào)整溫度為40-70°C, pH為4. 0-7. 0，添加0. 01-0. 1%的β -葡聚糖酶反應15-30分鐘；再調(diào)整體系溫度為50-700C，pH為7. 0-10. 0，反應0. 5-2小時；
(2)將提取液進行離心，離心機離心時，離心溫度保持在50-70°C；
(3)使用酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心溫度保持在30-50°C；
(4 )將離心得到的燕麥蛋白配制為0. 5-2. 0%的溶液，溫度保持在40-70で，pH為 4. 0-8. 0，添加酶進行酶解，添加酶的量保持在2. 0-20 u/ml，反應時間為0. 5-2小時；
(5)將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da；
(6)將得到的燕麥多肽進行冷凍干燥，最終得到燕麥活性肽粉末。上述制備步驟中
步驟(1)中燕麥麩皮與水的重量體積比例為1:10-1:20。步驟(1)中添加的淀粉酶的活力為4000 u/ml。步驟(1)中添加的β -葡聚糖酶的活力為50000 u/ml。步驟(2)中離心轉(zhuǎn)速保持在2000-3000轉(zhuǎn)/分鐘。步驟(3)中酸為鹽酸、檸檬酸或醋酸。步驟(3)中離心轉(zhuǎn)速保持在3000-5000轉(zhuǎn)/分鐘。步驟(4)中添加的酶為胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、復合蛋白酶和堿性蛋白酶中的ー種或幾種，其中復合蛋白酶為諾維信ftOtamex復合蛋白酶，堿性蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶。本發(fā)明采用燕麥麩皮作為原料，運用多種酶定向酶解，超濾富集特定分子量的燕麥活性肽，制得的燕麥活性肽呈淡黃至白色粉末，其分子量在1000-5000Da之間，純度為 80-95%,使燕麥多肽功效更顯著，更利于人們應用。下面結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明做進ー步的說明。
具體實施例方式實施例1
將燕麥麩皮加水10倍攪拌，升溫到80°C，調(diào)整PH為6. 0，加入0. 01%酶活カ為4000 u/ml的淀粉酶反應0. 5小時；然后調(diào)整溫度為50°C，pH4. 0，添加0. 03%酶活力為50000 u/ ml的β -葡聚糖酶反應15分鐘；再調(diào)整體系溫度為50°C，pH為8. 0，反應1小吋。將提取液進行離心，離心機離心吋，離心轉(zhuǎn)速保持在2000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在50°C。使用鹽酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心機轉(zhuǎn)速保持在4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在30°C。將離心得到的燕麥蛋白配制為1. 0%的溶液，溫度保持在50°C，pH為5. 0，添加胃蛋白酶和木瓜蛋白酶進行酶解，添加酶的量分別為10 u/ml和8u/ml，反應時間為1小吋。將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da。得到的燕麥多肽采用冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。經(jīng)檢驗計算得出該燕麥活性肽純度為90%。實施例2
將燕麥麩皮加水20倍攪拌，升溫到80°C，調(diào)整pH為6. 5，加入0. 05%酶活カ為4000 u/ml的淀粉酶反應1小時；然后調(diào)整溫度為55°C，pH4. 5，添加0. 02%酶活カ為50000 u/ ml的β -葡聚糖酶反應20分鐘；再調(diào)整體系溫度為60°C，pH為8. 5，反應1小吋。將提取液進行離心，離心機離心吋，離心轉(zhuǎn)速保持在2500轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在60°C。使用醋酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心機轉(zhuǎn)速保持在4000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在40°C。將離心得到的燕麥蛋白配制為0. 8%的溶液，溫度保持在50°C，pH為4. 5，添加木瓜蛋白酶進行酶解，添加酶的量為lOu/ml，反應時間為2小吋。將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da。得到的燕麥多肽采用冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。經(jīng)檢驗計算得出該燕麥活性肽純度為92%。實施例3
將燕麥麩皮加水15倍攪拌，升溫到75°C，調(diào)整pH為6. 0，加入0. 08%酶活カ為4000 u/ml的淀粉酶反應0. 5小時；然后調(diào)整溫度為70°C，pH6. 0，添加0. 07%酶活力為50000 u/ ml的β -葡聚糖酶反應25分鐘；再調(diào)整體系溫度為60°C，pH為9. 0，反應1小吋。將提取液進行離心，離心機離心吋，離心轉(zhuǎn)速保持在2000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在50°C。使用鹽酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心機轉(zhuǎn)速保持在3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在45°C。將離心得到的燕麥蛋白配制為1. 5%的溶液，溫度保持在50°C，pH為7. 0，添加諾維信ftOtamex復合蛋白酶和枯草桿菌堿性蛋白酶進行酶解，添加酶的量分別為5u/ml 和lOu/ml，反應時間為30分鐘。將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da。得到的燕麥多肽采用冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。經(jīng)檢驗計算得出該燕麥活性肽純度為88%。實施例4
將燕麥麩皮加水18倍攪拌，升溫到90°C，調(diào)整pH為6.0，加入0. 1%酶活力為4000 u/ ml的淀粉酶反應40分鐘；然后調(diào)整溫度為60°C，pH5. 5，添加0. 05%酶活カ為50000 u/ml 的β -葡聚糖酶反應20分鐘；再調(diào)整體系溫度為70°C，pH為8. 0，反應1. 5小吋。將提取液進行離心，離心機離心吋，離心轉(zhuǎn)速保持在3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在50°C。使用檸檬酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心機轉(zhuǎn)速保持在5000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在50°C。將離心得到的燕麥蛋白配制為2. 0%的溶液，溫度保持在50°C，pH為6. 0，添加諾維信ftOtamex復合蛋白酶進行酶解，添加酶的量為15u/ml，反應時間為1. 5小吋。將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da。得到的燕麥多肽采用冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。經(jīng)檢驗計算得出該燕麥活性肽純度為93%。實施例5
將燕麥麩皮加水20倍攪拌，升溫到85°C，調(diào)整pH為6. 5，加入0. 01%酶活カ為4000 u/ml的淀粉酶反應1小時；然后調(diào)整溫度為55°C，pH5. 0，添加0. 1%酶活カ為50000 u/ml 的β -葡聚糖酶反應20分鐘；再調(diào)整體系溫度為60°C，pH為9. 0，反應2小吋。將提取液進行離心，離心機離心吋，離心轉(zhuǎn)速保持在2000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在50°C。使用檸檬酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心機轉(zhuǎn)速保持在5000轉(zhuǎn)/分鐘，離心溫度保持在40°C。將離心得到的燕麥蛋白配制為1. 5%的溶液，溫度保持在55°C，pH為8. 0，添加枯草桿菌堿性蛋白酶進行酶解，添加酶的量分別為15u/ml，反應時間為2小時。將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da。得到的燕麥多肽采用冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。經(jīng)檢驗計算得出該燕麥活性肽純度為91%。以上實施例僅是本發(fā)明較有代表性的舉例。本發(fā)明的技術(shù)方案并不限于上述實施例，還可以有許多變形。本領域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導出或聯(lián)想到的所有變形，均應診斷是本發(fā)明的保護范圍。
權(quán)利要求
1.一種制備燕麥活性肽的方法，其特征在于以燕麥麩皮為原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，堿性提取燕麥蛋白質(zhì)，離心分離，離心液等電點沉淀，離心得到燕麥蛋白，復溶燕麥蛋白，定向酶解得到燕麥多肽，超濾富集燕麥多肽，冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于包括以下具體步驟(1)將燕麥麩皮加水攪拌，升溫到70-90°C，調(diào)整pH為6.0-8. 0，加入0. 01-0. 1%的淀粉酶反應0. 5-1小時；然后調(diào)整溫度為40-70°C, pH為4. 0-7. 0，添加0. 01-0. 1%的β -葡聚糖酶反應15-30分鐘；再調(diào)整體系溫度為50-700C，pH為7. 0-10. 0，反應0. 5-2小時；(2)將提取液進行離心，離心機離心時，離心溫度保持在50-70°C；(3)使用酸調(diào)節(jié)離心液等電點，然后對液體再次離心，離心溫度保持在30-50°C；(4)將離心得到的燕麥蛋白配制為0.5-2. 0%的溶液，溫度保持在40-70°C，pH為 4. 0-8. 0，添加酶進行酶解，添加酶的量保持在2. 0-20 u/ml，反應時間為0. 5-2小時；(5)將降解得到的燕麥多肽進行超濾，采用的超濾膜的截留分子量為1000-5000Da；(6)將得到的燕麥多肽進行冷凍干燥，最終得到燕麥活性肽粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(1)中燕麥麩皮與水的重量體積比例為1:10-1:20。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(1)中添加的淀粉酶的活力為4000 u/ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在干步驟(1)中添加的 β -葡聚糖酶的活力為50000 u/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(2)中離心轉(zhuǎn)速保持在2000-3000轉(zhuǎn)/分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(3)中酸為鹽酸、 檸檬酸或醋酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(3)中離心轉(zhuǎn)速保持在3000-5000轉(zhuǎn)/分鐘。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于步驟(4)中添加的酶為胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、復合蛋白酶和堿性蛋白酶中的ー種或幾種。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備燕麥活性肽的方法，其特征在于所述復合蛋白酶為諾維信ftOtamex復合蛋白酶，堿性蛋白酶為枯草桿菌蛋白酶。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備燕麥活性肽的方法，該方法以燕麥麩皮為原料，加水提取，加入淀粉酶和β-葡聚糖酶酶解，堿性提取燕麥蛋白質(zhì)，離心分離，離心液等電點沉淀，離心得到燕麥蛋白，復溶燕麥蛋白，定向酶解得到燕麥多肽，超濾富集燕麥多肽，冷凍干燥得到燕麥活性肽粉末。本發(fā)明得到的燕麥小分子肽分子量在1000-5000Da，純度為80-95%。該燕麥活性肽具有抑制ACE酶的活性，保濕、促進細胞新陳代謝等功效，可以廣泛應用于降壓保健食品等領域。
文檔編號C12P21/06GK102559821SQ201110446378
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月28日
發(fā)明者李春榮, 詹耀才, 鐘細娥, 高展炬 申請人:廣東省食品工業(yè)研究所