專利名稱:細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明于細胞間超凈臺中細胞培養(yǎng)液及其他液體的無菌轉(zhuǎn)移設(shè)施。
背景技術(shù):
在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常進行洗細胞、消化細胞及更換培養(yǎng)液等操作,以保證細胞 的正常生長與傳代培養(yǎng),對其無菌要求很嚴格。目前的方法是每次換液時,需用新滅菌的玻 璃吸管將細胞洗液及舊培養(yǎng)液吸出,再更換無菌的吸管吸取新培養(yǎng)液到培養(yǎng)瓶,且吸出的 液體要暫時放入超凈臺中廢液缸,實驗結(jié)束后再將其帶出來,傾倒處理后放回超凈臺。這種 傳統(tǒng)的操作方法繁瑣費時,而且由于玻璃吸管其吸嘴的限制會導(dǎo)致液體吸取不干凈,反復(fù) 傾倒廢液缸也容易產(chǎn)生人為的污染等弊端。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種細胞培養(yǎng)液及其他液體的無菌移液裝置, 該裝置能簡化吸取細胞液操作過程,并且能使該操作過程更為準確、方便、高效。為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的提出以下技術(shù)方案一種細胞培養(yǎng)液無菌簡易移 液裝置,它的特點是用膠管先連接槍頭連接器、再分別連接從瓶塞上插入廢液收集瓶的兩 支插管的上管口,之后連接氣體分流裝置以及氣泵。它的槍頭連接器的前端收縮變細,以便 插入細長的槍頭。它的氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,在y字形長劃的中下部與短 劃中部分別設(shè)有尖角一致朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣。這種氣體分流裝置為y字形 結(jié)構(gòu)的三通管,y字形長劃與短劃之間的夾角一般為30 60°,最好為45°。采用上述技術(shù)方案的細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,使液體吸取過程更加準確、 高效、操作時簡單快捷,液體的吸取干凈徹底,消除了人為污染等弊端。
現(xiàn)結(jié)合附圖對本發(fā)明做詳細說明圖1為本發(fā)明細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置系統(tǒng)示意2為圖1中序2零件的放大3為圖1中序7零件的放大圖
具體實施例方式如圖1所示本發(fā)明的培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,它用膠管1先連接槍頭連接器 2、再分別連接從瓶塞3上塞入廢液收集瓶6的管4與管5的上口,然后連接氣體分流裝置 7以及氣泵8。膠管1是醫(yī)用乳膠管,其長度可視具體要求而定。它的槍頭連接器2前端收縮變 細,以便插入細長的槍頭。槍頭連接器2可以用普通的金屬管制作。其前端尖嘴處可在酒 精燈火焰處灼燒,然后連接滅菌的細長槍頭,用來伸進細胞培養(yǎng)瓶吸取液體。槍頭的吸嘴相比傳統(tǒng)的玻璃吸管細小而且尖銳,因此消除了用以往的方法液體吸取不干凈的現(xiàn)象。除槍 頭連接器及部分膠管可放置在超凈臺,其余各部均在可置于超凈臺外。廢液收集瓶6為5L 的三角瓶。它的氣體分流裝置7為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,管壁的材質(zhì)可以選用金屬、陶瓷、 玻璃等,一般選玻璃管。在y字形長劃的中下部與短劃中部,分別設(shè)有尖角一致朝上截面為 V形的可閉合彈性膜瓣9與10。它們相當(dāng)于管道系統(tǒng)里的逆止閥。這種氣體分流裝置為y 字形結(jié)構(gòu)的三通管,y字形長劃與短劃之間的夾角一般為30 60°,最好為45°。插入橡膠瓶塞3里的管4上端與廢液導(dǎo)出膠管1連接,另一管5的上端與氣泵8 通過膠管1連接。氣泵8與氣體分流裝置7用膠管1連接好,就可以進行操作。當(dāng)踩腳踏 氣泵后,通往外界的V型瓣10會打開,氣體排出;腳離開腳踏氣泵,通向外界的V型瓣10會 閉合。由于這時整個系統(tǒng)內(nèi)形成負壓,這導(dǎo)致另一個分支里的V型瓣9打開,液體被吸進槍 頭,經(jīng)槍頭連接器2——膠管1——插管4進入廢液收集瓶6中。氣泵8是普通常見的充抽 雙功能腳踏充氣泵,相比動力氣泵操作簡易、不消耗電能、無污染。為進一步闡述本發(fā)明,下面列舉三個具體實施例來介紹本發(fā)明的使用方法。實施例1進行懸浮細胞傳代培養(yǎng)時第一步灼燒槍頭連接器的尖嘴,待溫度降下來插上無菌的槍頭,懸空放置。第二步將細胞培養(yǎng)瓶中的細胞用吸管轉(zhuǎn)移到15ml離心管,離心使細胞沉淀。腳 踩氣泵,松開,槍頭伸進離心管液體,液體回抽進廢液收集瓶。第三步吸取一定量PBS緩沖液到離心管,吹吸細胞若干次,離心后,槍頭連接器 更換槍頭后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。第四步吸取新鮮培養(yǎng)液到離心管,輕輕吹打混勻,然后平均分到兩個培養(yǎng)瓶。表1采用傳統(tǒng)方法與本發(fā)明進行懸浮細胞傳代培養(yǎng)效果比較
使用玻璃吸管 數(shù)使用槍頭數(shù)是否存在殘余液 體傳統(tǒng)方法30存在本方法22不存在實施例2進行貼壁細胞的傳代培養(yǎng)時第一步灼燒槍頭連接器的尖嘴,待溫度降下來插上無菌的槍頭,懸空放置。第二步腳踩氣泵,松開,槍頭伸進細胞培養(yǎng)瓶液體中,液體回抽進廢液收集瓶。第三步吸取一定量PBS緩沖液到培養(yǎng)瓶,輕輕吹洗若干次,槍頭連接器更換槍頭 后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。重復(fù)此步驟,確保胰酶消化時血清的影響減少到最第四步吸取少量胰酶消化液到培養(yǎng)瓶,消化1分鐘后吸取新鮮培養(yǎng)液到培養(yǎng)瓶 終止胰酶的作用,以防傷害細胞。輕輕吹打,移至15ml離心管,離心,槍頭連接器更換槍頭 后按以上操作抽取液體到廢液收集瓶。第五步吸取新鮮培養(yǎng)液到離心管,輕輕吹打混勻,然后平均分到兩個培養(yǎng)瓶。表2采用傳統(tǒng)方法與本發(fā)明進行貼壁細胞傳代培養(yǎng)效果比較
權(quán)利要求
1.一種細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,其特征在于用膠管(1)先連接槍頭連接器 O)、再分別連接從瓶塞C3)插入廢液收集瓶(6)的插管(4)與(5)的上管口,之后連接氣 體分流裝置(7)以及氣泵(8)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,其特征在于所述的槍頭連 接器( 前端收縮變細并插入細長的槍頭。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,在y字形長劃的中下部與短劃中部,分別設(shè)有尖角一致 朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣(9)與(10)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,所述y字形長劃與短劃之間的夾角為30 60°。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,其特征在于所述的氣體分 流裝置(7)為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,所述y字形長劃與短劃之間的夾角最好為45°。
全文摘要
一種細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,它的特點是用膠管先連接槍頭連接器、再分別連接從瓶塞上插入廢液收集瓶的兩支插管的上管口,之后連接氣體分流裝置以及氣泵。它的槍頭連接器的前端收縮變細,以便插入細長的槍頭。它的氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,在y字形長劃的中下部與短劃中部分別設(shè)有尖角一致朝上截面為V形的可閉合彈性膜瓣。這種氣體分流裝置為y字形結(jié)構(gòu)的三通管,y字形長劃與短劃之間的夾角一般為30~60°,最好為45°。這種細胞培養(yǎng)液無菌簡易移液裝置,使液體吸取過程更加準確、高效、操作時簡單快捷,液體的吸取干凈徹底,消除了人為污染等弊端。
文檔編號C12M1/00GK102061252SQ20101056384
公開日2011年5月18日 申請日期2010年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月29日
發(fā)明者李文哲, 王旭 申請人:大連大學(xué)