專利名稱：氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
玉米漿是淀粉生產(chǎn)的副產(chǎn)物，由玉米浸漬水制得，簡稱CSL。在浸漬玉米的過程中， 由于使用了一定量、一定濃度的亞硫酸，而使玉米種皮成為半透性膜，一些可溶性蛋白質(zhì)、 無機(jī)鹽和糖可以透過半透膜種皮進(jìn)入到浸漬水中，因此，玉米漿含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)。在浸漬玉米的過程中，由于乳酸菌的作用而產(chǎn)生乳酸使浸漬液的酸度增加，玉米粒中的部分可溶性蛋白質(zhì)會轉(zhuǎn)化為氨基酸溶于浸漬液中。在氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)中，通常向發(fā)酵液中添加一部分有機(jī)氮作為速效氮源并利用其中的微量生長因子。現(xiàn)有技術(shù)一般采用酸水解的方法將豆粕水解成豆粕水解液作為有機(jī)氮源。但是，由于豆粕的價(jià)格較高，并且需要用酸水解，因此生產(chǎn)成本高、設(shè)備投資大、工藝復(fù)雜，且水解所用的酸對設(shè)備腐蝕大、生產(chǎn)環(huán)境條件惡劣。因此，為了降低成本，一般將豆粕水解液搭配少量玉米漿水解液(將玉米漿中的蛋白質(zhì)水解為氨基酸)一起使用。但是，在氨基酸的連續(xù)發(fā)酵過程中，通常需要根據(jù)菌體的生長情況調(diào)整氮源的用量，而每批次的豆粕水解液與玉米漿水解液的質(zhì)量都不盡相同，因此，豆粕水解液和玉米漿水解液中所含的氨基酸的種類和含量也有所區(qū)別，這就需要根據(jù)實(shí)際需要的有機(jī)氮(有機(jī)氮包括α-氨態(tài)氮、 多肽和蛋白質(zhì))的含量來調(diào)整豆粕水解液和玉米漿水解液的用量配比，以實(shí)時(shí)滿足發(fā)酵的需要。因此，在采用豆粕水解液和玉米漿水解液混合物作為氨基酸發(fā)酵液用氮源的發(fā)酵工藝操作復(fù)雜，而且不利于保證發(fā)酵水平的穩(wěn)定性，而影響了發(fā)酵效率。發(fā)明目的本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有的采用豆粕水解液和玉米漿水解液的混合物作為氨基酸發(fā)酵液用氮源的發(fā)酵工藝操作復(fù)雜，而且不利于保證發(fā)酵水平的穩(wěn)定性，而降低了發(fā)酵效率的缺點(diǎn)，提供一種使發(fā)酵工藝操作簡單、能夠穩(wěn)定發(fā)酵水平、提高發(fā)酵效率的氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，如果將玉米漿中的蛋白質(zhì)水解為氨基酸后(玉米漿水解液)單獨(dú)用于發(fā)酵生產(chǎn)中時(shí)，由于水解后的蛋白水解液中含有的氨基酸的種類繁多而復(fù)雜、過于豐富，除了發(fā)酵所需氨基酸外還含有一些對發(fā)酵生產(chǎn)不利的氨基酸，例如，在賴氨酸生產(chǎn)工藝中，蛋白水解液中所含的纈氨酸、異亮氨酸等就是對發(fā)酵不利的氨基酸，而現(xiàn)有工藝又很難將玉米漿水解液中的對發(fā)酵生產(chǎn)不利的氨基酸除去，因此，仍然無法將該玉米漿的蛋白水解液作為氨基酸發(fā)酵液用氮源單獨(dú)使用。雖然，可能人們普遍認(rèn)為只有將玉米漿中所含的相對含量較高的蛋白質(zhì)水解成氨基酸后，才有可能充分滿足氨基酸發(fā)酵液對氮源的量的需要，但是，本發(fā)明的發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，一方面，采用本發(fā)明的方法得到的除去了蛋白質(zhì)的改良玉米漿中的游離氨基酸的含量其實(shí)已經(jīng)基本滿足氨基酸發(fā)酵液對氮源量的需要，另一方面，本發(fā)明的除去了蛋白質(zhì)的改良的玉米漿排除了不利于發(fā)酵生產(chǎn)的氨基酸的干擾。因此，本發(fā)明所述的改良后的玉米
3漿完全可以作為氨基酸發(fā)酵所需的有機(jī)氮源單獨(dú)使用，或者根據(jù)待發(fā)酵氨基酸的種類簡單配合一些所需的其它補(bǔ)充氮源一起使用。本發(fā)明提供了一種氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法，其中，該方法包括下述步驟1)將玉米漿與鹽溶液混合，使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出，并使沉淀析出的蛋白質(zhì)變性；2)分離變性的蛋白質(zhì)。本發(fā)明還提供了采用本發(fā)明所述的方法制備得到的改良的玉米漿在培養(yǎng)發(fā)酵賴氨酸用菌種中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了采用本發(fā)明所述的方法制備得到的改良的玉米漿在發(fā)酵賴氨酸中的應(yīng)用。本發(fā)明的方法是利用蛋白質(zhì)鹽析的原理，通過先將玉米漿與鹽溶液混合使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出，由于蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程，為了防止可逆過程的發(fā)生，保證鹽析的效果，利用加熱方法使蛋白質(zhì)變性并將變性的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，得到改良的玉米漿。 經(jīng)過改良的玉米漿能夠除去原液(每升)中30重量％以上的蛋白質(zhì)。將本發(fā)明的改良的玉米漿用于后續(xù)的發(fā)酵工藝的發(fā)酵液中時(shí)，避免了因玉米漿中蛋白質(zhì)含量過高而引起的對微生物發(fā)酵生產(chǎn)造成的不良影響。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的方法具有下述優(yōu)點(diǎn)1)克服了采用豆粕水解液和玉米漿的混合物作為氨基酸發(fā)酵液用氮源不利于保證發(fā)酵水平的穩(wěn)定性，而影響了發(fā)酵效率的問題，本發(fā)明的方法能夠保證發(fā)酵生產(chǎn)水平穩(wěn)定，并有效提高發(fā)酵效率。2)工藝操作簡單，避免了在豆粕水解工藝中由于鹽酸的使用量大，對生產(chǎn)設(shè)備的腐蝕性大、勞動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)性大的缺陷。3)按照本發(fā)明的方法得到的改良的玉米漿營養(yǎng)豐富，氨基酸組分適宜，可以直接作為氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)的有機(jī)氮源使用而無需另外搭配其它蛋白水解液使用。4)原料成本、水、電、蒸汽消耗明顯降低，自動(dòng)化程度提高。
具體實(shí)施例方式按照本發(fā)明，所述氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法包括下述步驟1)將玉米漿與鹽溶液混合，使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出，并使沉淀析出的蛋白質(zhì)變性；2)分離變性的蛋白質(zhì)。按照本發(fā)明，所述玉米漿指濕磨法生產(chǎn)玉米淀粉糖過程中的副產(chǎn)品(由玉米浸漬水濃縮得到)，外觀為黃色或褐色液體，所述玉米漿含有蛋白質(zhì)、氨基酸、植酸、脂多糖和微量元素等成分。玉米漿中包括各種形態(tài)的無機(jī)氮和有機(jī)氮，包括如NH4+等無機(jī)氮和蛋白質(zhì)、多肽、 游離氨基酸等中含有的有機(jī)氮，總氮表示無機(jī)氮和有機(jī)氮的總量?？梢园凑誈B/T609-2006 的方法測定玉米漿中總氮的含量，按照GB3595-83的方法測定玉米漿中氨基氮的含量(代表無機(jī)氮的含量)，兩個(gè)含量相減即得到玉米漿中有機(jī)氮的含量。有機(jī)氮包括α-氨態(tài)氮 (游離氨基酸主要以α-氨態(tài)氮形式存在)、多肽和蛋白質(zhì)，并可以根據(jù)GB/T 12143.2-1989法測定α-氨態(tài)氮和氨基氮的總量，再減去按照GB3595-83的方法測定玉米漿中氨基氮的含量即α-氨態(tài)氮的含量。蛋白質(zhì)與多肽中的氮含量可以通過將有機(jī)氮與α-氨態(tài)氮兩個(gè)含量相減得到，由于多肽含量極少，因此，近似地認(rèn)為有機(jī)氮與α -氨態(tài)氮兩個(gè)值相減得到的即為蛋白質(zhì)中的氮含量，用該蛋白質(zhì)中的氮的含量X系數(shù)6. 25即得到蛋白質(zhì)的含量，上述測定方法均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知。按照本發(fā)明，以1升玉米漿的體積為基準(zhǔn)，所述玉米漿中的干物含量一般大于300 克，優(yōu)選為350-500克，總氮含量一般為20-45克，氨基氮含量一般為3_18克，α -氨態(tài)氮的含量一般為3-7克，蛋白質(zhì)含量一般為60-150克。所述干物含量指固體物質(zhì)的含量，主要成分是蛋白質(zhì)、氨基酸、植酸、脂多糖和微量元素等。所述干物含量的測定方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知，例如，重量法(恒溫干燥法)例如，在105°C下烘干至恒重的玉米漿的干基重量。按照本發(fā)明，所述玉米漿與鹽溶液的用量比例的可調(diào)節(jié)范圍較寬，只要能夠保證使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出即可；所述鹽溶液的濃度的可選擇范圍較寬，例如，可以為 25重量％至鹽的飽和濃度；而鹽溶液的濃度越高越利于蛋白質(zhì)的完全、快速析出，優(yōu)選情況下，所述鹽溶液的濃度為鹽的飽和濃度。此外，可以根據(jù)玉米漿中蛋白質(zhì)的量的多少來調(diào)節(jié)用于沉淀玉米漿中蛋白質(zhì)的鹽溶液的用量，優(yōu)選情況下，所述鹽溶液與玉米漿的體積比可以為0. 5-1. 5，更優(yōu)選為0. 5-1。所述鹽溶液可以是各種能夠與蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析作用的無機(jī)鹽的水溶液，并且，其中的無機(jī)離子對微生物的發(fā)酵無不良影響，例如，所述無機(jī)鹽可以選自硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉和硫酸鎂中的一種或多種；優(yōu)選情況下，所述無機(jī)鹽為硫酸銨。由于硫酸銨的溫度系數(shù)小而溶解度大，在硫酸銨的溶解度范圍內(nèi)，許多蛋白質(zhì)和酶都可以被鹽析出來；另外，硫酸銨分段鹽析效果也比其它鹽好，不易引起蛋白質(zhì)變性。除了鹽析的作用，硫酸銨還可以作為發(fā)酵生產(chǎn)的無機(jī)氮源，無須另外除去。因此，所述無機(jī)鹽優(yōu)選為硫酸銨。由于硫酸銨與水可以互溶，因此，所述硫酸銨溶液中硫酸銨的濃度的可調(diào)節(jié)范圍較寬，出于溶解度和鹽析效果的考慮，所述硫酸銨溶液中硫酸銨的濃度優(yōu)選為40-50 重量％。但硫酸銨的溶解度受溫度影響顯著，因此，所述用于溶解硫酸銨的水溫度要求足以全部溶解相應(yīng)質(zhì)量的硫酸銨，例如，硫酸銨的溶解度在40-50重量％，則該溫度范圍為 40-100 "C。按照本發(fā)明，為了進(jìn)一步保證蛋白質(zhì)的充分析出，優(yōu)選情況下，所述玉米漿與鹽溶液的混合在攪拌下進(jìn)行，所述混合的時(shí)間一般可以為10-50分鐘，更優(yōu)選為15-30分鐘。按照本發(fā)明，在步驟(1)中，使蛋白質(zhì)變性的方法可以為各種本領(lǐng)域常規(guī)的方法， 例如，加熱變性的方法，將含有蛋白質(zhì)沉淀的玉米漿在60-110°C，優(yōu)選在90-105°C下放置 30-60分鐘，優(yōu)選為30-40分鐘。按照本發(fā)明，在步驟(2)中，將變性的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離的方法可以采用本領(lǐng)域的各種常規(guī)的分離方法，例如，可以采用過濾的方法，一般可以采用板框壓濾機(jī)進(jìn)行過濾。過濾的方法和條件只要能夠?qū)⒆冃缘牡鞍踪|(zhì)分離即可，通常情況下，所述板框壓濾機(jī)的過濾面積可以為20-40平方米，板框工作壓力可以為0. 2-0. 5MPa。按照本發(fā)明，優(yōu)選情況下，為了進(jìn)一步降低某些物質(zhì)的溶解度以到達(dá)析出固形物的目的，以及利于后續(xù)過濾除去玉米漿中的沉淀物質(zhì)，所述過濾在60-80°C下進(jìn)行。
按照本發(fā)明，將變性的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離后得到的液相即為改良后的玉米漿溶液。 可以采用常規(guī)的檢測方法在常規(guī)的檢測條件下對改良的玉米漿中總氮、氨基氮的含量進(jìn)行檢測。檢測方法可以為本文前述的本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的國家標(biāo)準(zhǔn)檢測方法。按照本發(fā)明的方法得到的改良后的玉米漿中的蛋白質(zhì)的去除率能夠達(dá)到30重量％ (每升改良后的玉米漿)以上，可直接用于氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)中。本發(fā)明的方法可以適用于各種氨基酸發(fā)酵液用玉米漿的改良，特別適用于賴氨酸發(fā)酵液用玉米漿的改良。按照本發(fā)明，一方面，將采用本發(fā)明提供的方法制備得到的改良的玉米漿應(yīng)用于培養(yǎng)發(fā)酵賴氨酸用菌種的種子培養(yǎng)液中，即將改良的玉米漿作為氮源提供給發(fā)酵賴氨酸用的菌種，排除了對菌種的不利影響而能夠更有利于菌種的生長。另一方面，將采用本發(fā)明提供的方法制備得到的改良的玉米漿應(yīng)用于發(fā)酵賴氨酸的發(fā)酵液中，避免了因玉米漿中蛋白質(zhì)含量過高而引起的對微生物發(fā)酵生產(chǎn)造成的不良影響，從而顯著提高了賴氨酸的產(chǎn)率。下面將通過具體實(shí)施方式
對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中檢測玉米漿中總氮、氨基氮、α -氨態(tài)氮的含量方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的國家標(biāo)準(zhǔn)。(按照GB/T609-2006測定總氮含量，按照GB 3595-83測定氨基氮含量，按照GB/T 12143. 2-1989的甲醛法測定出α -氨態(tài)氮和氨基氮的總含量，再減去按照 GB3595-83的方法測定的氨基氮的含量即α _氨態(tài)氮的含量)對比例1中的豆粕水解液和玉米漿水解液購自中糧生化公主嶺有限公司。實(shí)施例1本實(shí)施例用于說明本發(fā)明提供的氨基酸發(fā)酵液用改良的玉米漿的制備方法。(1)在60°C下，將硫酸銨與水在反應(yīng)釜中混合、攪拌30分鐘，得到質(zhì)量百分比濃度為40重量％的硫酸銨水溶液6. 2m3 ；(2)將6. 6m3玉米漿(每升玉米漿中干物含量為350克，總氮含量為28. 5克，氨基氮含量為3. 3克，α-氨態(tài)氮含量為5. 4克，蛋白質(zhì)含量為123. 75克)泵入反應(yīng)釜中，攪拌 30分鐘，使玉米漿與硫酸銨水溶液充分反應(yīng)； (3)加水定容至13. 2m3，攪拌混合30分鐘；(4)升高溫度至105°C后保溫40分鐘；(5)降溫至 70°C ；(6)將上述溶液通過板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，過濾時(shí)過濾面積為40平方米，過濾壓力 0. 4MPa ；(7)過濾后得到的液相進(jìn)入改良玉米漿(每升玉米漿中干物含量為280克，總氮含量為42. 4克，氨基氮含量為28克，α -氨態(tài)氮含量為5. 4克，蛋白質(zhì)含量為56. 25克)儲罐，儲存?zhèn)溆谩?shí)施例2本實(shí)施例用于說明本發(fā)明提供的氨基酸發(fā)酵液用改良的玉米漿的制備方法。(1)在70°C下，將硫酸鈉與水在反應(yīng)釜中混合、攪拌30分鐘，得到質(zhì)量百分比濃度為25重量％的硫酸鈉水溶液9. 75m3 ；(2)將13m3玉米漿(每升玉米漿中干物含量為400克，總氮含量為32. 3質(zhì)量體積比％，氨基氮含量為3. 5克，α -氨態(tài)氮含量為5. 9克，蛋白質(zhì)含量為143. 13克)泵入反應(yīng)釜中，攪拌30分鐘，使玉米漿與硫酸鈉水溶液充分反應(yīng)；(3)加水定容至26. 5m3，攪拌混合30分鐘；(4)升高溫度至100°C后保溫30分鐘；(5)降溫至 80°C ；(6)將上述溶液通過板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，過濾時(shí)過濾面積為40平方米，進(jìn)料壓力 0. 4MPa ；(7)過濾后得到的液相進(jìn)入改良玉米漿(每升玉米漿中干物含量為320克，總氮含量為20. 6克，氨基氮含量為3克，α -氨態(tài)氮含量為5. 9克，蛋白質(zhì)含量為73. 13克)儲罐，儲存?zhèn)溆?。?shí)施例3本實(shí)施例用于說明本發(fā)明提供的氨基酸發(fā)酵液用改良的玉米漿的制備方法。(1)在30°C下，將氯化鈉與水在反應(yīng)釜中混合、攪拌20分鐘，得到質(zhì)量百分比濃度為26. 5重量％的氯化鈉水溶液5m3 ；(2)將IOm3玉米漿(每升玉米漿中干物含量為450克，總氮含量為34. 7克，氨基氮含量為4.5克，α-氨態(tài)氮含量為6. 2克，蛋白質(zhì)含量為150克)泵入反應(yīng)釜中，攪拌45 分鐘，使玉米漿與氯化鈉水溶液充分反應(yīng)；(3)加水定容至20m3，攪拌混合15分鐘；(4)升高溫度至95°C后保溫60分鐘；⑶降溫至75°C;(6)將上述溶液通過板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，過濾時(shí)過濾面積為40平方米，進(jìn)料壓力 0. 2MPa ；(7)過濾后得到的液相進(jìn)入改良玉米漿(每升玉米漿中干物含量為370克，總氮含量為24. 6克，氨基氮含量為4克，α -氨態(tài)氮含量為6. 2克，蛋白質(zhì)含量為90克)儲罐，儲存?zhèn)溆谩?shí)施例4本實(shí)施例用于說明本發(fā)明提供的氨基酸發(fā)酵液用改良的玉米漿的制備方法。(1)在60°C下，將硫酸鎂與水在反應(yīng)釜中混合、攪拌30分鐘，得到質(zhì)量百分比濃度為40重量％的硫酸鎂水溶液9m3 ；(2)將15m3玉米漿(每升玉米漿中干物含量為380克，總氮含量為30. 7克，氨基氮含量為4.2克，α-氨態(tài)氮含量為5.5克，蛋白質(zhì)含量為131. 25克)泵入反應(yīng)釜中，攪拌 30分鐘，使玉米漿與硫酸鎂水溶液充分反應(yīng)；(3)加水定容至30m3，攪拌混合40分鐘；(4)升高溫度至110°C后保溫30分鐘；(5)降溫至 60°C ；(6)將上述溶液通過板框過濾機(jī)進(jìn)行過濾，過濾時(shí)過濾面積為40平方米，進(jìn)料壓力 0. 2MPa ；(7)過濾后得到的液相進(jìn)入改良玉米漿(每升玉米漿中干物含量為300克，總氮含量為23. 8克，氨基氮含量為3. 6克，α -氨態(tài)氮含量為5. 5克，蛋白質(zhì)含量為91. 9克)儲罐，儲存?zhèn)溆谩?br> 實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1-4本實(shí)驗(yàn)實(shí)施例用于說明賴氨酸的制備。(1)玉米原料的浸泡將100重量份玉米用300重量份水進(jìn)行浸泡，并通入SO2使得浸漬溶液中含有0. 15 重量％的亞硫酸。浸泡溫度控制在50°C，浸泡時(shí)間50小時(shí)。浸泡后的玉米含水在46重量％。(2)破碎將步驟(1)得到的玉米脫去胚芽、種皮，然后將玉米進(jìn)一步粉碎、濃縮制成淀粉乳。(3)酶解液化將步驟(2)得到的淀粉乳調(diào)濃度至16° Β 波美度(波美度是表示溶液濃度的一種方法。由波美比重計(jì)測得)用碳酸鈣調(diào)節(jié)PH至6，以每克粉碎產(chǎn)物的干重計(jì)，加入40酶活力單位的α -淀粉酶(諾維信公司購得)，并在90°C下保溫酶解120分鐘后得到酶解液化產(chǎn)物。(4)酶解糖化將步驟(3)得到的酶解液化產(chǎn)物降溫至60°C左右，加硫酸調(diào)整PH至4，以每克干物的干重計(jì)，加入90酶活力單位的糖化酶(諾維信公司購得)，并在60°C下保溫糖化24小時(shí)，使DE值彡98%。通過用液壓式板框壓濾機(jī)進(jìn)行壓濾，分離出酶解清液(糖液)。(5)將步驟(4)得到的酶解糖化產(chǎn)物用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行真空濃縮至總糖的60重量％，得到濃縮糖液待用。(6)分別將實(shí)施例1-4得到0. 8重量份的改良玉米漿與40重量份的酶解糖液物質(zhì)以及1. 5重量份的磷酸二氫鉀、1. 0重量份的硫酸鎂、0. 2重量份的蘇氨酸混合制備得到發(fā)酵底物。加熱到121°C消毒，維持20分鐘后快速降溫至37°C，接入黃色短桿菌菌種(菌株原種FB42購自江南大學(xué))，在37°C、攪拌轉(zhuǎn)速900轉(zhuǎn)/分鐘、0. 5體積體積/分鐘的通氣條件下進(jìn)行菌種培養(yǎng)，當(dāng)菌液稀釋25倍后用可見光分光光度計(jì)在波長為562納米下測定吸光值達(dá)到0. 09 (吸光值即表示了菌液中菌體的數(shù)量)，停止培養(yǎng)。將上述培養(yǎng)的黃色短桿菌菌液加入到含有0. 4重量份的改良玉米漿與20重量份的酶解糖液物質(zhì)以及1. 5重量份的磷酸二氫鉀、1. 0重量份的硫酸鎂、2. 0重量份的甜菜堿混合制備得到發(fā)酵底物已消毒發(fā)酵液的發(fā)酵罐中，接種量為發(fā)酵罐定容體積的10%。在 37°C、攪拌轉(zhuǎn)速900轉(zhuǎn)/分鐘、1體積體積/分鐘的通氣條件下進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)酵過程中流加步驟(5)得到的濃縮糖液，使發(fā)酵液中還原糖維持在10克/升左右，另外為了補(bǔ)充氮源還需流加硫酸銨溶液(濃度40重量％ )，使發(fā)酵液中氨基氮含量維持在1克/升左右進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)48小時(shí)。根據(jù)GB 3595-83標(biāo)準(zhǔn)檢測發(fā)酵過程中的氨基氮含量，根據(jù)GB 10794-89標(biāo)準(zhǔn)檢測發(fā)酵過程中的賴氨酸含量(以賴氨酸鹽酸鹽計(jì))，并計(jì)算賴氨酸發(fā)酵轉(zhuǎn)化率。轉(zhuǎn)化率=發(fā)酵液的賴氨酸含量X發(fā)酵液的體積/(種子罐用糖質(zhì)量+發(fā)酵罐用糖質(zhì)量)，其中賴氨酸含量為質(zhì)量體積比。結(jié)果如表1所示。表 權(quán)利要求
1.一種氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法，其特征在于，該方法包括下述步驟1)將玉米漿與鹽溶液混合，使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出，并使沉淀析出的蛋白質(zhì)變性；2)分離變性的蛋白質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述鹽溶液與玉米漿的體積比為0.5-1. 5 ；所述鹽溶液的濃度為25重量％至鹽的飽和濃度。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述鹽溶液與玉米漿的體積比為0.5-1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的方法，其中，所述鹽溶液為無機(jī)鹽的水溶液，所述無機(jī)鹽選自硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉和硫酸鎂中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟(1)中，所述玉米漿與鹽溶液的混合在攪拌下進(jìn)行，所述混合的時(shí)間為10-50分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟(1)中，使沉淀析出的蛋白質(zhì)變性的方法包括將含有蛋白質(zhì)沉淀的玉米漿在60-110°C下保溫30-60分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟(2)中，分離變性的蛋白質(zhì)的方法包括在 60-80°C下，采用板框壓濾機(jī)對含有變性的蛋白質(zhì)的玉米漿進(jìn)行過濾。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，以1升玉米漿的體積為基準(zhǔn)，所述玉米漿中的干物含量為300-500克，總氮的含量為20-45克，氨基氮的含量為3_18克，α -氨態(tài)氮的含量為3-7克，蛋白質(zhì)的含量為60-150克。
9.由權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所述的方法制備得到的改良的玉米漿在培養(yǎng)發(fā)酵賴氨酸用菌種中的應(yīng)用。
10.由權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所述的方法制備得到的改良的玉米漿在發(fā)酵賴氨酸中的應(yīng)用。
全文摘要
氨基酸發(fā)酵液用改良玉米漿的制備方法，其中，該方法包括下述步驟1)將玉米漿與鹽溶液混合，使玉米漿中的蛋白質(zhì)沉淀析出，并使沉淀析出的蛋白質(zhì)變性；2)分離變性的蛋白質(zhì)。本發(fā)明還提供了改良的玉米漿在培養(yǎng)發(fā)酵賴氨酸用菌種中的應(yīng)用以及在發(fā)酵賴氨酸中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的改良后的玉米漿完全可以作為氨基酸發(fā)酵所需的有機(jī)氮源單獨(dú)使用，或者根據(jù)待發(fā)酵氨基酸種類簡單配合一些所需的其它補(bǔ)充氮源一起使用。將本發(fā)明的改良的玉米漿用于后續(xù)的發(fā)酵工藝的發(fā)酵液中時(shí)，避免了因玉米漿中蛋白質(zhì)含量過高而引起的對微生物發(fā)酵生產(chǎn)造成的不良影響。
文檔編號C12R1/13GK102373247SQ201010263390
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月25日
發(fā)明者盧宗梅, 周勇, 安全, 鐘華 申請人:中糧生物化學(xué)(安徽)股份有限公司