專利名稱：一種提取活性多糖的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取活性多糖的工藝，尤其是一種從藍莓中提取多糖的方法。
背景技術(shù)：
80年代以來，科學(xué)家們對植物多糖，特別是對中藥中的多糖研究產(chǎn)生了濃厚的興 趣，至今已相繼報道了 100多種具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、抗感染、降血糖等多種生理 活性的中藥多糖，有的已在臨床用于腫瘤、肝炎、心血管等疾病的輔助治療和康復(fù)，其中最 重要的藥理作用當推免疫促進作用。已有的大量藥理和臨床應(yīng)用表明，這些功能確切的多 糖，其原生藥大多屬于補益類中藥。近來的藥理研究和臨床應(yīng)用均表明其具有顯著的免疫 增強作用，而其有效成分為多糖或糖綴合物glycoconjugates，包括糖肽蛋白多糖等不同的 糖肽其免疫活性的表現(xiàn)形式也不相同，有的表現(xiàn)為細胞免疫功能強，有的表現(xiàn)為體液免疫 功能強，而有的還具有顯著的抗脂質(zhì)過氧化作用，抑制LDL的氧化這些糖肽類化合物的結(jié) 構(gòu)分析表明，它們的共同特點是多糖含量高，有的可高達90%糖結(jié)構(gòu)有其共性，即均以Ara 為末端，但也各具個性，有的主鏈是1-6連結(jié)，有的是1-4連結(jié)，有的還結(jié)合色素。藥理研究 結(jié)果還表明這些糖肽類化合物中不但整體分子具有免疫活性，而且分子中的多糖鏈也具有 免疫活性，有的比整體分子的作用還要強?？鼓[瘤藥將多糖作為抗腫瘤藥是由于人們對當 前癌癥化療藥物不滿意。雖然化學(xué)家們合成了無數(shù)個對癌細胞有相當強殺傷作用的化合 物，但在殺死癌細胞的同時也同樣損傷正常細胞，臨床上表現(xiàn)出很多副作用，特別是化療藥 物對患者免疫系統(tǒng)造成損害，因此多糖類免疫調(diào)節(jié)劑在腫瘤的治療上很有吸引力。藍莓(Blueberry)學(xué)名越桔，別名有篤斯、嘟嗜、都柿、甸果等，屬于杜鵑花科越桔 屬植物。果實呈藍色，并披一層白色果粉，果肉細膩，果味酸甜，風(fēng)味獨特，具有清爽宜人的 香氣，可鮮食，亦可加工成果汁飲料和果酒。藍莓具有豐富的多糖含量，其中低聚多糖約6g/100g鮮重，而纖維素含量約 4. 6g/100g鮮重，可作為植物多糖的一個重要來源。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了提供一種產(chǎn)品收率高，能源消耗少，成本低，產(chǎn)量大，多糖純 度達97%以上，保持原有風(fēng)味，易于實現(xiàn)工業(yè)化的多糖提取工藝。本發(fā)明所提出的制備方法如下1)酶解取藍莓鮮果，加入其重量0. 5倍量的的去離子水，加纖維素酶和鹽酸，升 溫酶解10 12h，使其酶解，過濾得酶解液；2)大孔樹脂吸附酶解液經(jīng)過非極性大孔樹脂除雜，透過液用極性大孔樹脂吸 附，再用乙醇洗脫；3)膜濃縮用納濾膜將洗脫液膜濃縮，得截留濃縮液；4)干燥將濃縮液冷凍干燥，即得。上述提取工藝，其特征是所述的酶解工藝中，纖維素酶在去離子水中的含量為0. 5 3. 0%，用鹽酸調(diào)節(jié)PH為4，溫度控制在40 45°C。上述提取工藝，其特征是所述非極性大孔樹脂柱可用D101、PSD、HZ802大孔樹脂。上述提取工藝，其特征是所述極性大孔樹脂可用LSA-5B，D4020, D201大孔樹脂。上述提取工藝，其特征是所述極性大孔樹脂吸附后用3 4倍量柱體積的50 60%乙醇洗脫。上述提取工藝，其特征是所述納濾膜采用ESNA系列納濾膜或HNF-4040系列納濾膜。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點酶解步驟使得提取率比一般的溶劑提取更高，提 高了產(chǎn)品的收率和同一原料成本下的產(chǎn)量；大孔樹脂和膜分離都使得處理條件更溫和，多 糖被完好保留，同時再生容易，節(jié)省大量能耗和成本；冷凍干燥步驟提高了成品的純度。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取IOOg藍莓鮮果(總糖含量10.3% )，溶于50L去離子水中，加2. 5g纖維素酶， 加鹽酸調(diào)節(jié)PH至4，在40°C溫度下提取IOh后，酶解液過柱體積5L的D-101型大孔樹脂柱 除雜，得透過液，然后通過LSA-5B型大孔樹脂柱吸附多糖分子，接著用15L 50%乙醇洗脫 多糖，用ESNA2納濾膜濃縮洗脫液，濃縮液冷凍干燥，最終得到8. 06g含量為98. 9%的多糖 成品。實施例2 取IOOg藍莓鮮果(總糖含量9.9%)，溶于50L去離子水中，加4. Ig纖維素酶，力口 鹽酸調(diào)節(jié)PH至4，在42°C溫度下提取Ilh后，酶解液過柱體積5L的PSD大孔樹脂柱進行除 雜，得透過液，然后通過D4020型大孔樹脂柱吸附出多糖分子，接著用15L 55%乙醇洗脫多 糖，用HNF40-4040納濾膜濃縮洗脫液，濃縮液冷凍干燥，最終得到8. 25g含量為99. 的多 糖成品。實施例3 取IOOg藍莓鮮果(總糖含量10.4% )，溶于50L去離子水中，加9. 3g纖維素酶， 加鹽酸調(diào)節(jié)PH至4，在45°C溫度下提取Ih后，酶解液過柱體積5L的HZ802大孔樹脂柱進 行除雜，得透過液，然后通過D201型大孔樹脂柱吸附出多糖分子，接著用15L 60%乙醇洗 脫多糖，用HNF70-4040納濾膜濃縮洗脫液，濃縮液冷凍干燥，最終得到8. 27g含量為98. 6% 的多糖成品。
權(quán)利要求
一種提取活性多糖的工藝，其特征在于由以下步驟組成1)酶解取藍莓鮮果，加入其重量0.5倍量的的去離子水，加纖維素酶和鹽酸，升溫酶解10～12h，使其酶解，過濾得酶解液；2)大孔樹脂吸附酶解液經(jīng)過非極性大孔樹脂除雜，透過液用極性大孔樹脂吸附，再用乙醇洗脫；3)膜濃縮用納濾膜將洗脫液膜濃縮，得截留濃縮液；4)干燥將濃縮液冷凍干燥，即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取工藝，其特征是所述的酶解工藝中，纖維素酶在去離子水中的含量為0. 5 3. 0%，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為4，溫度控制在40 45°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取工藝，其特征是所述非極性大孔樹脂柱可用HZ802、DlOU PSD大孔樹脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取工藝，其特征是所述極性大孔樹脂可用LSA-5B，D4020, D201大孔樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取工藝，其特征是所述極性大孔樹脂吸附后用3 4倍量柱 體積的50 60%乙醇洗脫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述提取工藝，其特征是所述納濾膜采用ESNA系列納濾膜或 HNF-4040系列納濾膜。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取活性多糖的工藝，以藍莓鮮果為原料，經(jīng)過纖維素酶酶解、大孔樹脂分離、膜濃縮、冷凍干燥得成品。采用本發(fā)明生產(chǎn)活性多糖，收率高，能源消耗少，成本低，產(chǎn)量大，純度高，同時保留了多糖的風(fēng)味。
文檔編號C12P19/04GK101805766SQ201010166449
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月5日
發(fā)明者孫世芳, 趙玲 申請人:蘇州瑞藍博中藥技術(shù)開發(fā)有限公司