專利名稱：一種釀酒酵母菌株及其發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法
一種釀酒酵母菌株及其發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，是一種釀酒酵母菌株及其發(fā)
酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法，涉及釀酒酵母菌株S"cc/2"ram;;c" cewv^ae DQ1 CGMCC No. 2528。
背景技術(shù)：
能源問(wèn)題關(guān)系到民眾生活、經(jīng)濟(jì)發(fā)展、環(huán)境保護(hù)和國(guó)家安全等重要領(lǐng)域， 始終是世界各國(guó)關(guān)注和研究的重點(diǎn)。隨著化石燃料的儲(chǔ)藏量日益減少，全球 變暖，以及人們對(duì)能源的需求，尋求可再生的能源迫在眉睫。生物乙醇能夠 部分替代汽油，同時(shí)減輕溫室氣體的排放，正成為人們非常感興趣的液體替 代燃料。
當(dāng)前乙醇主要的發(fā)酵原料是玉米等淀粉類原料，這引起糧價(jià)上漲，導(dǎo)致 人車爭(zhēng)糧的局面，從長(zhǎng)遠(yuǎn)看，必須開(kāi)發(fā)新的原料從而滿足大規(guī)模乙醇燃料的
發(fā)展。秸稈，稻草等纖維質(zhì)原料是世界資源最豐富的可再生資源，從纖維質(zhì) 原料生產(chǎn)乙醇是一種很有前景的技術(shù)，其能夠滿足當(dāng)今社會(huì)的能源挑戰(zhàn)。根 據(jù)美國(guó)2005年農(nóng)業(yè)和能源部的研究報(bào)告，美國(guó)如果把每年13億噸干重的生 物質(zhì)，轉(zhuǎn)化為600億加侖的乙醇，那么可以替代美國(guó)30%的交通燃料。秸稈 作為一種豐富的農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物，成本低廉，以它作為原料能夠降低生物乙醇的 原料成本。
纖維質(zhì)原料生產(chǎn)乙醇一般包括三步預(yù)處理，酶解和發(fā)酵?，F(xiàn)在主要的預(yù)處理方法是高溫稀酸預(yù)處理和汽爆技術(shù)，預(yù)處理能夠破壞原料對(duì)酶解過(guò)程 的抵抗性，但是也產(chǎn)生了大量的抑制物，從而抑制了酵母在水解液中的生長(zhǎng) 與乙醇生產(chǎn)。為了能有效的發(fā)酵纖維素水解液，研究者提出了許多方法用于 脫除水解液中的抑制物，以提高發(fā)酵效率包括堿中和，離子交換，溶劑萃取 等方法，但這些不僅提高了成本，還增加了后續(xù)分離的難度。為了獲得高的 乙醇濃度，就需要一種能夠耐受高的固體原料含量，高抑制物濃度的菌株， 從而實(shí)現(xiàn)過(guò)程經(jīng)濟(jì)可行。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種釀酒酵母菌株及其發(fā)酵秸 稈生產(chǎn)乙醇的方法。
本發(fā)明提供一種釀酒酵母菌株& cc/zaram>^as cerev/w'ae DQ1 ， CGMCC No. 2528;該釀酒酵母菌株的保藏單位是中國(guó)微生物菌種保藏委員會(huì)普通微生 物中心(CGMCC);保藏日期為2008年5月28日，由華東理工大學(xué)生物反 應(yīng)器工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生物質(zhì)能源室培養(yǎng)制得。
本發(fā)明的菌種具有如下特征
(1) 在酵母浸膏瓊脂平板3(TC培養(yǎng)48小時(shí)，特征為呈卵形或者橢圓形； 菌落為乳白色，表面光滑；
(2) 能夠發(fā)酵葡萄糖，蔗糖，不能夠發(fā)酵木糖；
(3) 具有寬泛的生長(zhǎng)28 42X:溫度，能夠在高溫30 40。C下發(fā)酵；
(4) 生長(zhǎng)pH范圍2 6;
(5) 秸稈發(fā)酵過(guò)程，該菌能夠承受高固體下應(yīng)力作用，能夠耐受高糖濃
度，(6) 在含有抑制物濃度，甲酸0 4g/L，乙酸l 10g/L，糠醛0 5g/L， 羥甲基糠醛0 5g/L，能夠耐受抑制物的作用；
(7) 培養(yǎng)方法為在搖瓶或反應(yīng)器內(nèi)，溫度控制37'C，轉(zhuǎn)速150rpm， YPD培養(yǎng)基培養(yǎng)或用含有KH2(P04)3 l 3g/L， MgSO40.2 2g/L， (NH4)2S04 l 3g/L，酵母萃取粉或者玉米漿為0.5 2g/L，優(yōu)選酵母萃取粉；YPD是指 含有濃度為葡萄糖20g/L，蛋白胨20g/L，酵母萃取物10g/L的培養(yǎng)基。
一種利用釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法，其步驟為，
(1) 酵母菌株馴化從酵母菌種保藏平板選取單菌落或甘油管，接種于 合成培養(yǎng)基，溫度30 37°C，搖床轉(zhuǎn)速100 200rpm，培養(yǎng)16 24小時(shí)，OD600 在5 12，以1% 15% (v/v)的接種量接入到含20%水解液的混合培養(yǎng)基培 養(yǎng)，培養(yǎng)15 24小時(shí)，然后依次轉(zhuǎn)接入含有40%， 60%， 80%， 100%水解液 的混合培養(yǎng)基，對(duì)菌種進(jìn)行逐步的馴化；
所述的合成培養(yǎng)基中的葡萄糖，濃度為15 25g/L;
所述的OD6oo指的是某種溶液在600nm波長(zhǎng)處的吸光值；
所述的混合培養(yǎng)基中的葡萄糖，濃度為40 60g/L;
所述的混合培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)鹽，組份濃度分別為KH2(P04)3 l 3g/L， MgS04 0.2 2g/L， (NH4)2S04 l 3g/L，酵母萃取粉或者玉米漿為0.5 2g/L， 優(yōu)選酵母萃取粉；
(2) 兩級(jí)發(fā)酵種子的制備從菌種保藏平板或冷凍的甘油管中，首先在 搖瓶中合成培養(yǎng)基培養(yǎng)，溫度30 37。C，搖床轉(zhuǎn)速100 200rpm，培養(yǎng)16 24小時(shí)，然后再以1 15%的接種量，接入含有30 50%水解液的混合培養(yǎng) 基中，轉(zhuǎn)速為150 200rpm，培養(yǎng)18 24小時(shí)，然后5 10%的液體接種或 離心后獲取等量的細(xì)胞接種發(fā)酵；所述的水解液是指秸稈稀酸預(yù)處理液或者蒸汽爆破秸稈酶解后離心所獲
得的上清液，其中，秸稈稀酸預(yù)處理液是將將秸稈在170 20(TC，硫酸為0.5 5%(w/W)，處理時(shí)間為1 5分鐘，獲得的液體組份；蒸汽爆破秸稈酶解后離 心所獲得的上清液是在發(fā)酵罐中固體質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 20%(w/w)，加酶量在 5 20FPU/gDM， FPU指纖維素酶液中的纖維素酶活，DM是指秸稈干重，50°C 水解48 72小時(shí)，獲得的固液混合物10000卬m，離心10分鐘獲得上清液；
(3) 種子的擴(kuò)大培養(yǎng)根據(jù)發(fā)酵罐的裝液量大小，可以擴(kuò)大培養(yǎng)種子液 的體積，其方法是，兩級(jí)培養(yǎng)后的種子以1 15%的接種量，接入水解液中通 氣攪拌培養(yǎng)種子，逐次擴(kuò)大獲得更多的種子培養(yǎng)液；
(4) 接種與發(fā)酵在發(fā)酵罐中加入預(yù)處理秸桿原料，調(diào)整固體含量，利 用纖維素酶在發(fā)酵接種前預(yù)先酶解時(shí)間為0 24小時(shí)，酶解溫度在45 55°C， 用酸或堿調(diào)節(jié)pH控制在4.5 5.0，發(fā)酵溫度為30 40°C，發(fā)酵周期為48 84小時(shí)；以10%的接種量接入兩級(jí)或多級(jí)培養(yǎng)所獲得的種子，實(shí)現(xiàn)同步糖化 發(fā)酵生產(chǎn)乙醇；
在發(fā)酵罐中加入預(yù)處理秸桿原料的方式為一次加入或者分批加入，固體 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15 32%;
所述的纖維素酶液為纖維素酶和纖維二糖酶兩種酶的混合或者一種同時(shí) 含有纖維素酶和纖維二糖酶的酶液，加酶量為5 20FPU/DM;
所述的預(yù)先酶解是指加入酵母菌種之前，水解秸稈0 24小時(shí)，發(fā)酵罐 中加入營(yíng)養(yǎng)鹽，組份濃度分別為KH2(P04)3 l 3g/L， MgS04 0.2 2g/L， (NH4)2S04l 3g/L，酵母萃取粉或玉米漿為0.5 2g/L，優(yōu)選酵母萃取粉；
所述的酸選自濃度為98%的硫酸；
所述的堿選自飽和氫氧化鈣溶液，氫氧化鈉溶液或者氫氧化鈉固體中的一種，優(yōu)選飽和氫氧化鈣溶液；氫氧化鈉溶液濃度為50%; 所述的酵母菌種為釀酒酵母CGMCC No. 2528;
在所述的混合培養(yǎng)基，水解液，發(fā)酵罐中含有抑制物，組份濃度為甲酸0 4g/L，乙酸l 10g/L，糠醛0 5g/L，羥甲基糠醛0 5g/L，酵母菌種CGMCC No. 2528能夠耐受抑制物的作用；
所述的秸桿選自玉米秸桿，汽爆玉米秸桿，小麥秸稈或者稻子秸稈中的 一種，優(yōu)選為汽爆玉米秸桿。
圖1為本發(fā)明適合于秸稈乙醇發(fā)酵的釀酒酵母培養(yǎng)及其應(yīng)用方法示意圖。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的積極效果是
(1) 本發(fā)明是基于發(fā)酵菌株在含有抑制物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)馴化能夠提高 其水解液耐受性，采用兩級(jí)培養(yǎng)擴(kuò)大提高了菌種的水解液存活能力，縮短了 發(fā)酵時(shí)間，降低了成本，提高了乙醇產(chǎn)率和得率，適用于大規(guī)模應(yīng)用；
(2) 當(dāng)前生物質(zhì)原料預(yù)處理技術(shù)，都會(huì)產(chǎn)生許多抑制物，本發(fā)明能夠?qū)?現(xiàn)纖維質(zhì)原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇過(guò)程的可行性，解決纖維質(zhì)乙醇發(fā)酵過(guò)程的關(guān)鍵 問(wèn)題；
(3) 同現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明適合于不同來(lái)源的生物質(zhì)原料，具有工藝 上的可移植性，能夠促進(jìn)纖維質(zhì)原料生產(chǎn)乙醇的實(shí)質(zhì)性發(fā)展；
(4) 本發(fā)明采用可承受的營(yíng)養(yǎng)鹽濃度范圍和酶解工藝，采用高的秸稈原 料固體含量，充分利用水解液資源，提高了生產(chǎn)效率，降低了生產(chǎn)成本，環(huán) 境友好，適合于大規(guī)模和工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為本發(fā)明秸稈乙醇發(fā)酵的釀酒酵母培養(yǎng)及其應(yīng)用方法示意圖；圖2實(shí)施例l發(fā)酵周期曲線。
具體實(shí)施方式
以下提供本發(fā)明一種釀酒酵母菌株及其發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法的具體 實(shí)施方式。
實(shí)施例1
請(qǐng)參見(jiàn)附圖2，為發(fā)酵周期曲線，汽爆秸稈為原料，發(fā)酵罐初始固體含量 為15%，加入纖維素酶15 FPU/DM， 5(TC酶解12小時(shí)，按照兩步培養(yǎng)的種子 液以10%接入發(fā)酵罐中，隨后補(bǔ)料操作；氫氧化鈣飽和溶液調(diào)節(jié)pH為5.0， 為營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別為KH2(P04)3 2g/L， MgS04lg/L， (NH4)2S04 2g/L，酵母萃 取粉lg/L，使固體含量到達(dá)到25%，發(fā)酵周期控制在72小時(shí)，乙醇濃度到 6.0%，得率在78%。
實(shí)施例2
玉米秸稈在180'C， 5%硫酸濃度，預(yù)處理5min，獲得預(yù)處理液和預(yù)處理 秸桿，然后稀酸預(yù)處理秸桿調(diào)整液固比加酶15FPU/DM水解48小時(shí)，離心獲 得上清夜，用固體氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH;汽爆秸桿調(diào)整水含量同樣加酶15FPU/DM 水解48小時(shí)，離心后獲得上清液。按照兩級(jí)培養(yǎng)的方式，獲得種子，以10% 接種于離心后的水解液，種子培養(yǎng)和發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別為KH2(P04)3 3g/L， MgS042g/L， (NH4)2S04 3g/L，酵母萃取粉2g/L， 37。C發(fā)酵72小時(shí)，乙醇基 于葡萄糖的得率均在89%。實(shí)施例3
玉米秸稈在20(TC， 0.5%硫酸濃度，預(yù)處理lmin，獲得預(yù)處理液和預(yù)處 理秸桿，然后稀酸預(yù)處理秸桿調(diào)整液固比加酶5FPU/DM水解48小時(shí)，離心 獲得上清夜；汽爆秸桿調(diào)整水含量同樣加酶解5FPU/DM糖化48小時(shí)，離心 后獲得上清液。按照兩級(jí)培養(yǎng)的方式，獲得種子，以10%接種于離心后的水 解液，種子培養(yǎng)和發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別為KH2(P04)3 3g/L， MgS04 2g/L， (N H4)2S04 3g/L，酵母萃取粉2g/L， 37。C發(fā)酵72小時(shí)，乙醇基于葡萄糖的得率 均在85%。
實(shí)施例4
汽爆秸桿為原料，在發(fā)酵罐中調(diào)整固體含量為15%，加入相應(yīng)濃度的纖 維素酶20FPU/DM，加入鹽濃度分別為KH2(P04)3 lg/L， MgS04 0.2g/L， (NH02SO4 lg/L，酵母萃取粉0.5g/L，5(TC酶解12小時(shí)，降低溫度在35 38t:， 按照兩級(jí)培養(yǎng)的種子液以10%接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵周期控制在72小時(shí)，乙醇 濃度達(dá)3.5%，得率在80%。
實(shí)施例5
汽爆秸桿為原料，在發(fā)酵罐中調(diào)整固體含量為15%,加入相應(yīng)濃度的纖 維素酶7FPU/DM， 5(TC酶解12小時(shí)，降低溫度在35 38°C ，按照種子擴(kuò)大 培養(yǎng)的方式，采用四級(jí)培養(yǎng)的種子液以10%接入發(fā)酵罐中，營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別 為KH2(P04)3 2g/L, MgS04lg/L， (NH4)2S04 lg/L，酵母萃取粉lg/L，發(fā)酵周 期控制在72小時(shí)，乙醇濃度達(dá)3.5%，得率在80%。實(shí)施例6
汽爆秸稈為原料，發(fā)酵罐初始固體含量為15%，加入纖維素酶7FPU/DM， 按照兩步培養(yǎng)的種子液以10%接入發(fā)酵罐中，隨后補(bǔ)料操作，使固體含量到 達(dá)到25%，氫氧化f5飽和溶液調(diào)節(jié)pH5.0，發(fā)酵周期控制在84小時(shí)；為營(yíng)養(yǎng) 鹽濃度分別為KH2(P04)3 2g/L, MgS04lg/L， (NH4)2S04 2g/L，酵母萃取粉1， 乙醇濃度到5.5%，得率在72%。
實(shí)施例7
汽爆秸桿為原料，在發(fā)酵罐中調(diào)整固體含量為30%，加入相應(yīng)濃度的纖 維素酶7FPU/DM， 50'C酶解6小時(shí)，為營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別為KH2(P04)3 2g/L， MgS04 lg/L， (NH4)2S04 2g/L，酵母萃取粉lg/L，降低溫度在35 38°C ，按 照兩級(jí)培養(yǎng)的種子液以10%接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵周期控制在72小時(shí)，乙醇濃 度達(dá)7.2%，得率在67°/。。
實(shí)施例8
汽爆秸桿為原料，在發(fā)酵罐中調(diào)整固體含量為30%，加入相應(yīng)濃度的纖 維素酶7FPU/DM, 5(TC酶解12小時(shí)，為營(yíng)養(yǎng)鹽濃度分別為KH2(P04)3 lg/L， MgS04 lg/L， (NH4)2S04 lg/L,酵母萃取粉lg/L，降低溫度在38X:，按照兩 級(jí)培養(yǎng)的種子液以10%接入發(fā)酵罐中，發(fā)酵周期控制在72小時(shí)，乙醇濃度達(dá) 7%，得率在65%。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾， 這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1. 一種釀酒酵母菌株，其特征在于，釀酒酵母菌株為Saccharomycescerevisiae DQ1，在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)登記保藏，保藏日期為2008年5月28日，保藏編號(hào)為CGMCC No.2528。
2. —種應(yīng)用權(quán)利要求1所述的釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，具體步驟為，(1) 酵母菌株馴化從酵母菌種保藏平板選取單菌落或甘油管保藏的酵 母菌，接種于合成培養(yǎng)基，搖瓶培養(yǎng)，溫度30 37'C，搖床轉(zhuǎn)速100 200rpm， 16 24小時(shí)OD6oo達(dá)到5 12，以1 15%的接種量接入到含20%水解液的混 合培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)15 24小時(shí)，然后依次轉(zhuǎn)接入含有40%， 60%, 80%， 100%水解液的混合培養(yǎng)基，對(duì)菌種進(jìn)行逐步的馴化；所述的合成培養(yǎng)基中的葡萄糖，濃度為15 25g/L; 所述的OD6oo指的是某種溶液在600nrn波長(zhǎng)處的吸光值； 所述的混合培養(yǎng)基中的葡萄糖，濃度為40 60g/L; 所述的混合培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)鹽，組份濃度分別為KH2(P04)3 l 3g/L， MgS04 0.2 2g/L， (NH4)2S04l 3g/L，酵母萃取粉或者玉米漿為0.5 2g/L;(2) 兩級(jí)發(fā)酵種子的制備從菌種保藏平板或冷凍的甘油管取得菌種， 首先在搖瓶合成培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30 37-C，搖床轉(zhuǎn)速100 200rpm， 培養(yǎng)16 24小時(shí)，然后以1 15%的接種量，接入含有30 50%水解液的混 合培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)速為150 200rpm，培養(yǎng)18 24小時(shí)，然后5 10%的液體 接種或離心后獲取等量的細(xì)胞接種發(fā)酵；所述的水解液是指秸稈稀酸預(yù)處理液或者蒸汽爆破秸稈酶解后離心所獲 得的上清液；(3) 種子的擴(kuò)大培養(yǎng)根據(jù)發(fā)酵罐的裝液量大小，擴(kuò)大培養(yǎng)種子液，其方法是，兩級(jí)培養(yǎng)后的種子以1 15%的接種量，繼續(xù)接入水解液中通氣攪拌 培養(yǎng)種子，逐次擴(kuò)大獲得更多的種子培養(yǎng)液；(4)接種與發(fā)酵在發(fā)酵罐中加入預(yù)處理秸桿原料，利用纖維素酶在發(fā) 酵接種前預(yù)先酶解0 24小時(shí)，酶解溫度在45 55"C，用酸或堿調(diào)節(jié)pH控 制在4.5 5.0，發(fā)酵溫度為30 4(TC，發(fā)酵周期為48 84小時(shí)；以10%的接 種量接入兩級(jí)或多級(jí)培養(yǎng)所獲得的種子，實(shí)現(xiàn)同步糖化發(fā)酵生產(chǎn)乙醇；在發(fā)酵罐中加入預(yù)處理秸桿原料的方式為一次加入或者分批加入，固體 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15 32%;所述的纖維素酶液選自纖維素酶或者纖維二糖酶兩種酶的一種或者兩種 混合，加酶量為5 20FPU/DM， FPU指纖維素酶液中的纖維素酶活，DM是指稻桿干重；所述的預(yù)先酶解是指加入酵母菌種之前，水解秸稈0 24小時(shí)，發(fā)酵罐 中加入營(yíng)養(yǎng)鹽，組份濃度分別為KH2(P04)3 l 3g/L， MgS04 0.2 2g/L， (NH4)2S04 l 3g/L,酵母萃取粉或玉米漿為0.5 2g/L，優(yōu)選酵母萃取粉；所述的酸選自濃度為98%的硫酸；所述的堿選自飽和氫氧化鈣溶液，氫氧化鈉溶液或者氫氧化鈉固體中的 一種；在混合培養(yǎng)基，水解液，發(fā)酵罐中含有抑制物，組份濃度為甲酸0 4g/L， 乙酸l 10g/L，糠醛0 5g/L，羥甲基糠醛0 5g/L;所述的秸桿選自玉米秸桿，汽爆玉米秸桿，小麥秸稈或者稻子秸稈中的 一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，在所述的步驟(1)中，所述的混合培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)鹽，組份濃度分別為KH2(P04)3 l 3g/L， MgSO40.2 2g/L， (NH4)2S04 l 3g/L，酵母萃 取粉為0.5 2g/L。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，在所述的步驟(2)中，秸稈稀酸預(yù)處理液是指將將秸稈在170 200°C，硫酸濃度為0.5 5%,處理時(shí)間為1 5分鐘，獲得的液體組份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，在所述的步驟(2)中，蒸汽爆破秸稈酶解后離心所獲得的上清 液是指在發(fā)酵罐中固體質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 20%，加酶量在5 20FPU/gDM， 50°C 水解48 72小時(shí)，獲得的固液混合物lOOOOrpm，離心10分鐘獲得的上清液。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的堿優(yōu)選飽和氫氧化鈣溶液。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種釀酒酵母菌株發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法， 其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的秸桿優(yōu)選為汽爆玉米秸桿。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種釀酒酵母菌株及其發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法，菌種為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae DQ1)，保藏編號(hào)CGMCC No.2528，該菌株能夠耐受秸稈水解液中甲酸，乙酸，糠醛類抑制物；可以耐受高的葡萄糖，乙醇濃度；具有寬泛的生長(zhǎng)溫度，在高溫下發(fā)酵；發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇的方法為，兩級(jí)培養(yǎng)種子，第一級(jí)在合成培養(yǎng)基培養(yǎng)16～24小時(shí)，第二級(jí)以5～10％的接種量接入含有30～70％水解液的混合培養(yǎng)基，培養(yǎng)15～20小時(shí)，以10％接種量接入水解液或同步糖化發(fā)酵秸稈生產(chǎn)乙醇。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)適合于高固體含量秸稈酶解同步糖化發(fā)酵，發(fā)酵周期短，乙醇得率高，生產(chǎn)成本低，具有很好的工業(yè)化應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)C12P7/10GK101434913SQ20081020449
公開(kāi)日2009年5月20日 申請(qǐng)日期2008年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月12日
發(fā)明者建 張, 楚德強(qiáng), 杰 鮑 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué) 被以下專利引用 (3),