專利名稱：電融合微電極和使用其操縱細(xì)胞和/或細(xì)胞組分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一禾中電融合微電極(declrofiisk)n microelectrode)和iOT其操縱(manipulate)細(xì)胞和/或細(xì)胞組^(cellularcomponents)的方法。
背景技術(shù)：
細(xì)胞的電融合和電穿孔包括對(duì)細(xì)BM加電流。在許多情況下，希望 加直流電之前對(duì)細(xì))ia行排列。細(xì)胞的排列可以艦吸取鶴空抽吸AI實(shí)施。細(xì)胞的排列還可以M31施加交流^it行。但是，當(dāng)M3iM加交流E^t行排列時(shí)，細(xì)胞的存活率顯著斷氐。所以，希望有一種具備AX排列細(xì)鵬口傳避流電鵬功能的工具。細(xì)胞融^(cell&sion)的過程包括可以MaM加一個(gè)或多個(gè)直流(DC)脈沖誘導(dǎo)的細(xì)鵬莫的局 逆滲透。 A^周知，當(dāng)電融合細(xì)胞時(shí)，在鄉(xiāng)舒DC脈沖之前為細(xì)胞排列施加介電^c(dielec(rophoretic)5t流電(AC)，會(huì)極^Ctfe^^細(xì)胞融合的速率。與介質(zhì)的^f只以及兩個(gè)電l紋間的距離有關(guān)，AC的j頓對(duì)于細(xì)胞的排歹訴口定位^^、要的。然而，也已知曉AC對(duì)細(xì)胞是有害的，并且高電壓和/或長(zhǎng)的時(shí)間段甚至?xí)?dǎo)鄉(xiāng)胞溶賄lysis)。而且，小室的典型構(gòu)造設(shè)計(jì)成能{狄量的細(xì)胞在同一時(shí)間融合。由于需要大^f只的介質(zhì)，牛親的低電導(dǎo)率溶^^、需的，其所含的抗氧化成分也會(huì)傷害細(xì)胞，或者在卵母細(xì)胞這種,練瞎況下，甚至封秀導(dǎo)細(xì)胞激舌。為了避免同時(shí)i頓抗氧化劑和AC，針對(duì)現(xiàn)有小室的一個(gè)可割戈方法是在解剖顯微鏡下AI完成單個(gè)細(xì)胞的排列。總之，對(duì)于常規(guī)電融合方法的要求，可以將缺點(diǎn)概括為i)需要顯然不是生理性的并且會(huì)削弱細(xì)胞的生存能力的非電解質(zhì)溶液；ii)由于大的電極間距，AC脈沖的ail會(huì)導(dǎo)致劍勞害并隨后引起細(xì)鵬敬cell distress); iii)單個(gè)細(xì)胞排列耗費(fèi)時(shí)間；和iv)由于反復(fù)f頓，電小室可能會(huì)成為病原污染的來源。
本發(fā)明是為了克服本領(lǐng)域中的這些和其它不足。發(fā)明 本發(fā)明一方面涉及一種由具有第一近端和第二遠(yuǎn)端的管制成的電融合微
電極。所述管在其夕卜表面上具有從管的第一近端遊賣延伸到管的第^^端的導(dǎo)電涂層。本發(fā)明另一方面涉及一種電融合微電極^g，其包含如J^f述的電融合微電極和肖,S^述管的第:n^端接納電融合微電極的固定Xi^oldingtoo1)。
本發(fā)明的還一方面涉及含有兩個(gè)或更多個(gè)如上所述的電融合微電極，的系統(tǒng)。本發(fā)明再另一方面涉及一種操縱細(xì)胞和/^ffl!Ma分的方法。該方、^括
將細(xì)胞和/或細(xì)胞組分與如上所述的電融合微電極的管的第一近端撤4。這種撤蟲
在有交M纟Mg胞和/自胞組分的劍牛下進(jìn)行。本發(fā)明的還另一方面涉及一種操鄉(xiāng)，胞和/自胞組分的方法。該方、 ^括
將細(xì)胞和/或細(xì)胞組分與兩個(gè)，多個(gè)如JJf述的電融合微電極^i蟲。在有交 縱細(xì)胞和/，胞組分的斜牛下，在每一個(gè)微電極管的第一ifi端進(jìn)行)^細(xì)胞禾n/^ffl胞
組分的撤蟲。本發(fā)明樹共了具備Ax排歹蜘胞和向細(xì)胞傳3ii:流^s功能的工具。哺乳動(dòng)物的細(xì)胞核移纟調(diào)于少,胞，尤其是處理人類卵母細(xì)胞時(shí)。所以，
獲得允許單個(gè)細(xì)胞排列的工具是理想的。在^^鄉(xiāng)鵬制下，#^蟲的微電極的{頓使得育,精確定創(chuàng)艘融合的細(xì)胞的期望位置，并且由于電極-細(xì)胞的直,蟲，可避免4OT交流電，以及使用小量的介質(zhì)。交流電的省去和所需的小體積，使得育,采用可以用油覆蓋的常規(guī)培養(yǎng)介質(zhì)。財(cái)卜，直接的細(xì)胞撤蟲甚至?xí)﨧^I艘4柳的直流電量，斷氏對(duì)細(xì)胞劍另害的可能性。最后，這種微電樹總的價(jià)榭吏其可以一次性j頓，從而杜絕了污染的可能性。
附圖簡(jiǎn)述

圖1A-B是本發(fā)明的電融合微電極的兩個(gè)不同的實(shí)敲案的平面圖。圖
1A-B的電融合微電極由具有第一近端和一個(gè)第:i^端的管串喊，所述管砂卜表面
上具有從管的第一近端遊賣延伸到管的第^^端的導(dǎo)電涂層。在圖1A中，微電極管具有固定吸量管潮勾，其中第一近端是直的。在圖1B中，微電極管具有固定吸量管結(jié)構(gòu)，其中第Hfi端是彎曲的。圖1C是圖1A的電融合微電極的咅艦亂示出了導(dǎo)電涂層怎樣環(huán)繞微電極管沿圓周延伸。
圖2A-D歸出了本發(fā)明的電融合微電極管的第一近端的各種實(shí) 案的透視圖。在圖2A中，微電極管的第一近端題的并是開放的。在圖2B中，微電極管的第一近端是直的并是密封的。在圖2C中，微電極管的第一近端是彎曲的并是開放的。在圖2D中，微電極管的第一近端是彎曲的并是密封的。
圖3A是本發(fā)明的電融合微電極驢的一個(gè)實(shí)船案的平面圖。該電融合微電極裝置包含安裝在固定工具內(nèi)的本發(fā)明的電融合微電極。如圖所示，固定工敲微電極管的第二遠(yuǎn)端接納電融合微電極。圖3B是圖3A所示的電融合微電極，的^A軍圖。圖4是本發(fā)明的電融合微電^^fi的一個(gè)實(shí)m^案的平面圖，戶;M^a具
有安裝在固定工具內(nèi)的本發(fā)明的電融合微電極。與電源可操作地連接的電極夾(electrode clip)在導(dǎo)電涂層^i接到電融合微電極。圖5示出了本發(fā)明的系統(tǒng)的一個(gè)實(shí) 案。所皿統(tǒng)有兩個(gè)可操作地與真空或抽吸器連接的本發(fā)明的電融合微電l^置，每個(gè)電融合微電纟M安^W可操作地與電源連接的電極夾。
發(fā)明詳述本發(fā)明的一方面涉及一禾中由具有第一近端和第二遠(yuǎn)端的管制成的電融合微電極。所述管在其夕卜表面上具有從管的第一近端遊賣延伸至惰的第J端的導(dǎo)電涂層。圖1A-B示出了本發(fā)明的電S蟲合微電極的兩個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)案。如圖所示，電融合微電極10由具有近端14 (電極尖端)和遠(yuǎn)端16的微電極管12制成。在管12的夕卜表面上的導(dǎo)電涂層18從管12的近端14遊賣延伸到遠(yuǎn)端16。在圖1A示出的實(shí)驗(yàn)案中，微電極管12具有固定吸量管結(jié)構(gòu)，其中近端14超的。在圖1B顯示的實(shí) 案中，微電極管12具有固定吸量管結(jié)構(gòu)，其中近端14是彎曲的。電融合微電極10的管12可以是具有不同幾何構(gòu)造的倒可中空管。因此，如果需要，管12的壁可以有角度。在雌的實(shí) 案中，管12是圓l翅的。更ifci^t也，管12具有固定吸量管結(jié)構(gòu)(holding pipette configuration^
當(dāng)然，管12的直徑和長(zhǎng)度是可變的。如以下更詳細(xì)描述的那樣，管12的直徑和長(zhǎng)度將根據(jù)細(xì)胞(和/或細(xì)胞組分)的種類以及使用電融合微電極10的操縱的^ 化。典型地，管12的長(zhǎng)度為約50-80毫米，直徑為約0.5-1.5 。
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微電極10的管12可以由任意數(shù)目的包括但不限于玻璃、塑料、PVC、陶瓷和/^^屬的材料制成。招腿的實(shí)船案中，管12由玻璃制成。甚至更4腿地，管12由硼硅麟玻璃毛細(xì)飾喊，其經(jīng)拉伸和纟^^為固定吸量管娜。
導(dǎo)電涂層18 tt^M31將^^布在管12的夕卜表面上以液體的形 加。在圖1C所示的優(yōu)選的實(shí) "案中，導(dǎo)電涂層18圍繞微電極管12沿圓周延伸。適合的電導(dǎo)體包括但不限于鋁、銅、銀、金、鈦、鈾、鉤和合金以及它們的混合物。微電極管12的近端14可以具有不同的構(gòu)型。在一個(gè)實(shí)te"案(圖2A-B)中，管12的近端14是直的。在可割戈實(shí)航案(圖2C-D)中，管12的近端14是彎曲的。當(dāng)管12的近端14是彎曲的時(shí)，Mi5端14的尖端彎曲雌為約0-90度。管12的近端14在尖端處可以是開放的(圖2A和2C，開口20)赫封閉的(圖2B和2D)。發(fā)明另一方面涉及一種具有如上所述的電融合微電極和肖,在微電極管
的第Z^端接納電融合微電極的固定工具的電融合微電極，。圖3A示出了本發(fā)明的電融合微電t碟置的一個(gè)實(shí)皿案。如圖所示，電
融合微電極裝置62具有安裝在固定工具30內(nèi)的電融合微電極10，電融合微電極
10的近端14伸出固定工具30之外。
固定工具30^^含接納組件36的管，接納組件36含有孔34，電融合微電極10從中穿過被接納。固定工具30還具有主軸32和位于接納組件36和主軸32之間的電絕緣體38，從而 魅圣接納組件36的電流不會(huì)到勝軸32。
接納組件36和主軸32可以由相同的材料構(gòu)成，并且雌由導(dǎo)電的耐用材料構(gòu)成。另一方面，電絕緣體38由不導(dǎo)電的材料構(gòu)成，例如塑料。電鄉(xiāng)條體38的不導(dǎo)電特性防止電 31接納組件36傳避往軸32。這個(gè)設(shè)計(jì)在電操作實(shí)施過程中產(chǎn)生更定域的電 M，這在下面有更詳細(xì)的討論。電鄉(xiāng)機(jī)體38的絕劍爭(zhēng)性也允許以衝氐細(xì)胞死，B鄉(xiāng)MA固虹具30。圖3B是圖3A的電融合微電l^g62的爐圖，其示出了固定工具30的裝配。如圖所:示，支持工具30的三個(gè)主要組件(接納組件36、電絕緣體38和主軸32) iKl電絕緣體38上帶螺紋的連接器42和主軸32上帶螺紋的連接器44相連接。帶螺紋的連接器42育,緊固入開口48，開口 48具有與帶螺紋的連接器42的螺紋相匹配的帶螺紋的壁。同樣，帶螺紋的連接器44能被緊固入開口50，開口 50具有與帶螺紋的連接器44的螺紋相匹配的帶螺紋的壁。這種t親的組裝 方式防止接納組件36的導(dǎo)電材料和主軸32的導(dǎo)電材料之間形成電^l蟲。
絕緣套管40被安裝在管12的遠(yuǎn)端16 a以防止管12在裝入固定工具 30中時(shí)發(fā)生不希望的移動(dòng)，并在向?qū)щ娡繉?8施加電流時(shí)進(jìn)一步絕緣固定工具 30。通過將管12 (經(jīng)由遠(yuǎn)端16)滑入接納組件36的孔34 ^!繊電極10安裝到 固定工具30中。招腿的實(shí) 案中，4微電極10在接納組件36中安謝尋足夠 深，從而使接納組件36施壓固定微電極10。再次參照?qǐng)D3A，根據(jù)一個(gè)實(shí)皿案，管12的第一近端14是開放的(圖 2A和2C)，并且電融合微電極體62可操作地與真空或抽吸器連接。 *， 真空^l吸，管的遠(yuǎn)端可操作地與微電極管12 。真空^tt吸^微電極管 12的連MMM3i接軟管46實(shí)現(xiàn)。如圖3A所示，連接軟管46安裝在固定工 具30的主軸32內(nèi)，從而 微電極管12和開口 20的內(nèi)部抽吸形皿空。
根據(jù)圖4所示的另一個(gè)實(shí)臟案，電融合微電I^S62具有在導(dǎo)電涂層 18處與微電極管12連接的電極夾56。電極夾56伏JM31夾持在孔34附近的微 電極管12上而與微電極管12連接。電極夾56經(jīng)電連接器58與電源連接。根據(jù) 該實(shí)驗(yàn)案，電^M電極夾56從電源傳避l滑12。在一^H腿的實(shí)驗(yàn)案中，將本發(fā)明的電融合微電極體安裝在鵬從器 (micromanip麵)上。鵬也，所述鵬縱翻到置顯微鏡下鵬。適合的,從 器包括但不限于MM188和MM109,縱器，Narishigie Co., LTD (東京，日
本)生產(chǎn)。圖5示出了本發(fā)明的系統(tǒng)的一個(gè)實(shí)1 案，fM^、統(tǒng)包含兩個(gè)電融合微電 極體62，針電融合微電極體可操作地與真空翻吸器54連接。另外，電 融合微電極10與M3^^器58可操作地與電源連接的電極夾56電撤蟲。^5^M 系統(tǒng)的一個(gè)tt^的實(shí)施方案中，本發(fā)明的第一電融合微電極裝置和與直流電源的 正極^(positive teiminal)連接的第一電極夾58相連，而本發(fā)明的第二電融合微電極 裝置和與直流電源的負(fù)極端(negative tenranal)連接的第二電極夾58相連。
在操作時(shí)，可以將本發(fā)明的電融合微電極、，和系統(tǒng)用于操纟，胞柳
8鄉(xiāng)胞組分。因此，本發(fā)明另一個(gè)方面涉及一種操鄉(xiāng)胸胞種鄉(xiāng)BMa分的方法。 該方纟跑括將細(xì)胞柳自胞組分與本發(fā)明的電融合微電極撤蟲。在有$娥 胞 和/或細(xì)胞組分的劍牛下，在微電極管的第一近端實(shí)施細(xì)胞種^H胞組分與本發(fā)明 的電融合微電極的，蟲。本發(fā)明的還一個(gè)方面涉及一種操縱細(xì)胞和/自胞組分的方法。i亥方, 摘每細(xì)胞和/或細(xì)胞組分與兩個(gè)頗多個(gè)本發(fā)明的電融合微電極撤蟲。在有 娥縱 細(xì)胞稱自胞組分的劍牛下，在每一個(gè)微電極管的第一近端實(shí)施細(xì)胞稱自胞組 分的撤蟲。依照本發(fā)明的方法的細(xì)胞操縱可以包括細(xì)胞和/或細(xì)胞組分的排列 (aligning)、融合(fbsing)、電穿孔(electroporating)、電融合(electrofosing)禾口/或移植 (transplanting)。根據(jù)本發(fā)明的方法的一個(gè)實(shí) 案，^ffi本發(fā)明的電融合微電極實(shí)施細(xì)胞
禾n/自胞組分的操縱，其中電融合微電極的第一近端是開放的，且其中戶脫電融
合微電極具有在管的第二遠(yuǎn)端與該微電極可操作ii^i接的真空或抽吸器。根據(jù)該 實(shí)施方案，接觸細(xì)胞和減細(xì)胞組分M^t細(xì)胞和/^ffl胞組分施加吸取(aspiration) 鋤吸(suction)來實(shí)施。為了AX排歹踟胞和/或細(xì)胞組分這一目的，依照本發(fā)明的方法通常將吸 取或抽吸施加到細(xì)胞和/鄉(xiāng)胞組分。根據(jù)TO法M3iWP滅吸取實(shí)鵬胞Al排 列，避免了用于排歹啲交流電的〗頓，從而顯著:tfe^高了細(xì)胞的存活。細(xì)胞存活 的顯著提高使 ￡每 ，縱中可^1^1>的細(xì)胞 。可以使用微電l跪動(dòng)與吸取或抽吸的組合來實(shí)施本發(fā)明的方法。通常，優(yōu) 劍頓吸取或抽吸排列細(xì)胞，然后il51本發(fā)明的電融合微電^M加直流電。
本發(fā)明的方法待別適合于細(xì)胞核移植。iOT本發(fā)明的電融合微電極、，、 或系統(tǒng)鄉(xiāng)行細(xì)胞核移植，Mm—卵母細(xì)胞移出細(xì)胞核，并將該細(xì)胞核移植 到已經(jīng)予Bfe摘除了細(xì)胞核的第二卵母細(xì)胞的卵周隙(perivitellinespace)中，然后{， 一卵母細(xì)胞的移植細(xì)胞核與第二卵母細(xì)胞的細(xì)M結(jié)合。這MM^所^ffl胞核與 細(xì)鵬釋方爐流電來完成。如上所述，電融合微電極的長(zhǎng)度和直徑可以根據(jù)細(xì)胞的種類和使用微電極 的操縱的鄉(xiāng)而變化。例如當(dāng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移植時(shí)，管的直樹尤 選在約15 nm至U約25 )jm的范圍內(nèi)。當(dāng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的融合時(shí)，管的直4鎖選在約60 urn到約100拜的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)M^案中，管的外徑可以為約0.97 mm，而管的內(nèi)徑可為約0.69mm。在該實(shí)M^案中，戶腐管具有厚度只有約0.28mm 的非常薄的管壁。
實(shí)施例掛共以下的實(shí)施例是為了闡明本發(fā)明的實(shí);^案，而非要限制其范圍。
^Mii-電融合微電極的構(gòu)造長(zhǎng)度為78mm，夕卜徑為0.97mm和內(nèi)徑為0.69mm的毛細(xì)管(Drummond Scientific, Boomall,Pa.)，被巨離一端(近端)10-15mm的iia^7jc平微電極拉偉1藤 (微立帝螺)(Campden Inc., LTD.,倫敦)上拉伸大約60-100拜。將所述管娜段 儀(microforgeXNarishige Co., LTD, Tokyo, J鄰an)上切割^W光以獲得最終的60卿 的外徑和20Mm的內(nèi)徑。
^MM^-不成熟哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的細(xì)胞核移植經(jīng)穿刺B6D2F1雌小鼠未經(jīng)促排卵巢的卵泡獲得胚泡(germinal vesicle,
GV)階段的卵母細(xì)胞。然后，在補(bǔ)充了細(xì)鵬公弛素B的介質(zhì)中，4頓一個(gè)或多個(gè) 本發(fā)明電融合微電，W51Mi^lWK出細(xì)胞核。隨后將一個(gè)細(xì)胞核引A5U已預(yù) 先摘除了細(xì)胞核的不成熟卵母細(xì)胞的卵周隙中。然后將每一個(gè)被移植的卵母細(xì)胞 方ffi在兩個(gè)本發(fā)明的電融合微電禾及t間，暴露于單^U.0kV/cr^ 50-99 的直流 融合脈沖。30^60併中后，檢查卵母細(xì)胞的融^象。然后將i鍾組的卵母細(xì)SM文 入培養(yǎng)基中并評(píng)定其成熟清況。可以將已經(jīng)排出第一極體的卵母細(xì)胞固定并用姬 姆薩(Giemsa)染色進(jìn)行染色體分析。作為對(duì)照，對(duì)大約三分之一的卵母細(xì)胞不 進(jìn)行倒可操作，僅僅i^S同樣的介質(zhì)中并暴露于同樣的試劑。 實(shí)施例3陽胚泡移植經(jīng)荊UB6D2F1雌小鼠未經(jīng)糊柳巢的卵泡獲得胚泡(GV)階段的卵母 細(xì)胞。在PMSGf湖啲雌小鼠hCGf掛后15小時(shí)收集分裂中期n (固)卵母細(xì) 胞。然后，在補(bǔ)充了細(xì)胞松弛素B的介質(zhì)中，{頓一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明電融合微電 極將細(xì)胞核從GV卵母細(xì)胞中取出。M3H頓一個(gè)或多個(gè)本發(fā)明電融合微電t鵬 過將分裂中期紡 ^所在的"中心"區(qū)和第一極體一起清除而將謹(jǐn)卵母細(xì)胞去細(xì) 胞核。隨后，將GV細(xì)胞核引入預(yù)先去細(xì)胞核的未成熟的(GV) ^熟的(MH) 卵母細(xì)胞的卵周隙中。然后將*被如 縱的卵母細(xì)!&^§在兩個(gè)本發(fā)明電融 合微電豐fe間，暴露于單^X 1.0 kV/叫50-99 ios的直流融合脈沖以迸行電融合。將30~60併中后顯示出融^t象的卵母細(xì)I^MJ:歸基中:t歸12個(gè)小時(shí)4魏胞核 成熟。可以^|糊咄第一極體的卵母細(xì)胞固定并用 1薩染色以進(jìn)行鵬體分析。
雖然出于說明的目的已經(jīng)詳細(xì)描述了本發(fā)明，f鵬該理解這些細(xì)節(jié)僅僅只 為該目的，那些本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以在不背離以下權(quán)利要求所限定的本發(fā)明的 宗旨和范疇的情況下，對(duì)此做出各種改動(dòng)。
權(quán)利要求
1. 一種電融合微電極，其包括具有第一近端和第二遠(yuǎn)端的管，其中該管具有在其外表面上的導(dǎo)電涂層，所述涂層從該管的第一近端連續(xù)延伸至該管的第二遠(yuǎn)端。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述管具有固定吸量管結(jié)構(gòu)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述管的第一近端是密封的。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述管的第一近端是開放的。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述管的第一近端是彎曲的。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中戶腿管由選自由鵬、塑料、PVC、 陶瓷和金屬纟賊的組的材料制成。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6的電融合微電極，其中所述管由玻璃制成。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述導(dǎo)電涂層選自由鋁、銅、銀、 金、鈦、鉬、鴇、合金和它們的混糊纟誠的組。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1的電融合微電極，其中所述導(dǎo)電涂層環(huán)^^述管沿圓周延伸。
10. —種電融合微電極，，其包括根據(jù)I51利要求1的電融合微電極，和 育,^^述管的第1端接納電融合微電極的固定工具。
11. 根據(jù)權(quán)利要求IO的電融合微電極驢，其中戶腿管的第^fi端是開放的， 所述電融合微電極^3進(jìn)一步包括.-真空或抽吸器，^^f述管的第r^端與微電極可操作;te^接，從而在第一 近端引起抽吸。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10的電融合微電禾^g，進(jìn)一步包括..電極夾，其可操作地與電源連接并可舒脫導(dǎo)電涂層鵬接到臓管，使得 電流會(huì)鵬電極彭人電源傳避斷述管。
13. 根據(jù)權(quán)利要求10的電融合微電tKS，其中所述固^X具進(jìn)一步包括 管，其包含接納組件，微電極管的第』端接納進(jìn)該接納組件中； 主軸；和電絕緣體，其位于主軸和接納組件之間，從而纟魅圣接納組件的電流不到勝軸。
14. 根據(jù)權(quán)利要求10的電融合微電極體，進(jìn)一步包括 為控制固定工具而安裝的微櫞從器。
15. —種系統(tǒng)，其包括兩個(gè)頗多個(gè)根據(jù)權(quán)利要求io的電融合微電i^a。
16. —種操,胞和/或細(xì)胞組分的方法，所述方飽括在有繊,胞和/鄉(xiāng)胞組分的餅下，將細(xì)胞和/或細(xì)胞組分與權(quán)利要求1的電融合微電極的管的第一i5端^M。
17. 根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所述管的第一近端是開放的，所述電融合 微電極迸一步包括在管的第二遠(yuǎn)端與微電極可操作;t^^接的真空^l吸器；所述方法進(jìn)一步包括^0f述撤iM程中對(duì)所鄉(xiāng)胞和/或細(xì)胞組分施加抽吸。
18. 根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中朋述電融合微電aiS—步包括可操作地與電源連接并可^^腿導(dǎo)電涂層^3i接到戶脫管的電極夾，所述方法進(jìn)"^包括棚述擲敏程中對(duì)戶;M^胞和/鄉(xiāng)鵬且分施加電流。
19. 根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所逝麯蟲包括排列、融合、電穿孔、電融合稱，植細(xì)胞稱^9胞組分。
20. —種操鄉(xiāng)胞和/鄉(xiāng)胞組分的方法，臓方飽括將細(xì)胞和/自胞組分與兩個(gè)或更多個(gè)權(quán)利要求1的電融合微電極撤蟲，其中 所述撤鵬繊翻胞和/或細(xì)胞組分的斜牛下頓述管的第一近端實(shí)施。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由具有第一近端和第二遠(yuǎn)端的管制成的電融合微電極。所述管在其外表面上具有從管的第一近端連續(xù)延伸到管的第二遠(yuǎn)端的導(dǎo)電涂層。還公開了一種電融合微電極裝置，其具有電融合微電極和能夠在管的第二遠(yuǎn)端接納該電融合微電極的固定工具。本發(fā)明還涉及具有兩個(gè)或更多個(gè)本發(fā)明的電融合微電極的系統(tǒng)，和使用本發(fā)明的電融合微電極、裝置和系統(tǒng)操縱細(xì)胞和/或細(xì)胞組分的方法。
文檔編號(hào)C12M1/42GK101506346SQ200680048161
公開日2009年8月12日 申請(qǐng)日期2006年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日
發(fā)明者G·D·帕萊爾莫 申請(qǐng)人:康乃爾研究基金會(huì)有限公司