草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了草莓花藥脫毒組培苗的移栽馴化方法,包括以下步驟:1)花粉采集與清洗消毒,2)誘導(dǎo)分化成苗,3)幼苗快繁與生根,4)出苗與洗苗,5)移栽,6)馴化。本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明提供的方法,無須練苗,直接洗凈培養(yǎng)基即可進(jìn)行移栽,在苗床上搭建塑料拱棚,封閉三天后有效控制拱膜中溫度、基質(zhì)濕度、光照時(shí)間和強(qiáng)度,花粉脫毒組培苗的成活率可達(dá)100%,獲得無病毒株的概率大幅提高;同時(shí),草莓花粉脫毒率能達(dá)100%,可以不用病毒檢測程序,縮短了從脫毒到規(guī)模生產(chǎn)種苗的周期,有效降低了生產(chǎn)成本與勞動(dòng)成本,大幅度提高生產(chǎn)效益,提供了大批量的優(yōu)質(zhì)脫毒種苗,為草莓可持續(xù)產(chǎn)業(yè)化健康發(fā)展提供了技術(shù)支撐。
【專利說明】
草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及植物組培育苗技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法。【背景技術(shù)】
[0003]花粉植物的試管苗在培養(yǎng)基上主要是靠培養(yǎng)基中的糖分進(jìn)行異養(yǎng)代謝,而且在試管中濕度和溫度都比較穩(wěn)定,一旦移入土壤,生理生態(tài)環(huán)境發(fā)生巨大變化,往往由于試管苗不能很快適應(yīng)這種變化而造成大批死亡,特別是移栽適值自然氣溫高低變化頻繁,按期移栽很難成活。目前普遍采用是瓶苗有兩個(gè)階段煉苗過程:一是組培瓶苗移到室外在自然光下放置2 d?3 d練苗;二是再開瓶蓋煉苗3 d?5 d,結(jié)果是由異養(yǎng)換到自養(yǎng)環(huán)境時(shí)間短,幼苗還沒有適宜,再開瓶蓋,污染率迅速上升可達(dá)到30%?60%,大大降低幼苗的抵抗力,移栽后成活率大幅度下降。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷,提供了草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,包括以下步驟:1)草莓花粉的取材與清洗消毒:采用田間草莓花粉發(fā)育至4_?6_大小的單核靠邊期的花藥,花粉單核靠邊期的草莓花蕾形態(tài)是:花萼未開放,花蕾略長于花冠或花冠剛露白、花冠白色或者淡綠且不松動(dòng)、花藥微黃而充實(shí);將采取的新鮮花藥放在2 °C?4°C中儲(chǔ)藏24h后,用自來水將花藥表面沖洗干凈;沖洗過的花藥移入超凈工作臺(tái)上放入無菌燒杯中,先用75%酒精消毒30 s?40s,無菌水沖洗2遍?3遍,再用0.1%的升萊溶液消毒4 min?5 min,用滅菌過的玻璃棒順一個(gè)方向輕輕攪動(dòng),然后用無菌水沖洗4遍?5遍,每次1 min,迅速用濾紙吸干,得到無菌花藥;2)花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化:在無菌條件下,用無菌針將已消毒的花蕾固定在已經(jīng)過滅菌的大橡皮上;用已滅菌的解剖刀和解剖針剝開花蕾,取出花藥,將取出的花藥接種到裝有愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為:MS+ BA 1.5 mg/L?2.5mg/L+NAA 0.10 mg/L?0.25mg/L+3%蔗糖+6g/L?8g/L瓊脂,pH值為5.8;當(dāng)愈傷組織的直徑2 mm?3 mm時(shí),轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中,分化培養(yǎng)基組成為:MS+ BA 0.08 mg/L?0.12mg/L+IBA 0.8 mg/L?1.2mg/L中+3%蔗糖+6g/L ?8g/L瓊脂,pH值為5.8;當(dāng)形成明顯的叢生芽時(shí)將芽切成小塊,接種于叢生增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖,叢生增殖培養(yǎng)基組成為:MS+BA 1.2 mg/L?1.8mg/L+NAA 0.08 mg/L?0.12mg/+ 3%蔗糖+6g/L?8g/L瓊脂L,pH值為5 ? 8;3)脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng):將步驟2)得到的脫毒苗放入增殖培養(yǎng)基中25d?35d長成叢生瓶苗;增殖培養(yǎng)基為加入 6_芐氨基腺嘌呤0.19mg/L?0.21mg/L的MS培養(yǎng)基;將高3cm、生長健壯的無根苗接種于MS培養(yǎng)基上,2周后,苗基部長出輻射狀的白色小根,每株生根5條?7條,3周后,根生長1 cm?1.5cm,用于移栽;4)移栽前基質(zhì)準(zhǔn)備:基質(zhì)的組成為:按照重量比草炭:珍珠巖:蛭石=3:1:1;在移苗前Id,將混合好、已潤濕的基質(zhì)裝入32、50穴的穴盤或直徑9cm?12cm的營養(yǎng)缽中,輕壓;用50%的可濕性多菌靈粉劑1000倍液澆透,第二天移苗時(shí),基質(zhì)含水量為70%?80 %,即適合移苗;5)出瓶洗苗分級:起苗前用75 %酒精棉將所用操作工具全部消毒,直接從培養(yǎng)室移出生根的組培瓶苗到洗滌室,用直徑1 cm工具把組培苗從瓶中揀出,置于25 °C?28 °C的清水中洗凈根部的培養(yǎng)基,不要傷到根系、嫩芽及葉片,然后按大小將幼苗分級,并分出無根苗;6)移栽:當(dāng)天把洗凈分級的組培苗運(yùn)到種苗苗圃網(wǎng)室然進(jìn)行移栽,用準(zhǔn)備好的工具在穴盤的基質(zhì)上插洞,將幼苗根部輕輕放入洞中,輕輕掩上,稍壓實(shí);移完后用噴霧器輕噴水,沖洗幼苗葉片上的基質(zhì),使得根系與基質(zhì)接觸更緊密,以利于根系生長;對于無根苗,先沾適宜濃度: NAA 0.05mg/L?0.1mg/L或IBA 0? 8mg/L?1.0mg/L的生根粉或生根劑,再移植,或移植后用濃度為800倍液的生根粉進(jìn)行灌根;7)馴化:移栽完當(dāng)天須在苗床上搭建塑料小拱棚,密封3d后每天早上或傍晚掀膜30min,從側(cè)面揭膜面積的10%,開始馴化組培苗;隨后每天揭膜時(shí)間增加lOmin,揭膜面積增加10%;視環(huán)境中的溫度高低和育苗基質(zhì)含水量適當(dāng)增加光照通風(fēng)透氣時(shí)間,l〇d?15 d后可揭去薄膜;移植后需進(jìn)行遮光管理,移植后的前2d用遮陽網(wǎng)遮光60%?70%,之后的10d?14d逐漸見光, 直至不遮光;馴化的組培苗成活率達(dá)100%,30d后便可移至直徑為10cm的營養(yǎng)缽或育苗床進(jìn)行培育。
[0006]進(jìn)一步的,上述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,所述步驟3)脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng)之前,可以采用酶聯(lián)免疫吸附法,即ELISA法進(jìn)行病毒檢測。
[0007]進(jìn)一步的,上述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,所述步驟2)中,花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化生長條件為:溫度23°C?25°C,光照強(qiáng)度2500 lx?30001x,光照14 h/d?16h/d,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d。
[0008]進(jìn)一步的,上述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,所述步驟3)中,脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng)的生長條件為:溫度23°C?25°C,光照強(qiáng)度2000 lx?30001x,光照10 h/ d?12h/d,快繁及生根兩個(gè)階段培養(yǎng)時(shí)間50 d?60d。
[0009]進(jìn)一步的,上述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,所述步驟6)中,移栽條件為:溫度15°C?25°C。[〇〇1〇]進(jìn)一步的,上述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,所述步驟7)中,馴化條件為:溫度20°C?38°C,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d。
[0011]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明提供的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,采用在移栽前無須對瓶苗的練苗過程,直接從組織培養(yǎng)室移出生根的草莓組培瓶苗到洗滌室, 直接打開瓶蓋取苗,用25°c?28°C的溫水洗凈根部的培養(yǎng)基,當(dāng)天運(yùn)到種苗苗圃網(wǎng)室然進(jìn)行移栽,移栽當(dāng)天在苗床上搭建塑料拱棚,封閉三天后有效控制拱膜中溫度、基質(zhì)濕度、光照時(shí)間和強(qiáng)度,花粉脫毒組培苗的成活率可達(dá)100%,采用花粉培養(yǎng)技術(shù)較莖尖培養(yǎng)和熱處理脫毒獲得無病毒株的概率大幅提高;同時(shí),花粉脫毒不用病毒檢測程序,縮短了從脫毒到規(guī)模生產(chǎn)種苗的周期,有效降低了生產(chǎn)成本與勞動(dòng)成本,大幅度提高生產(chǎn)效益,提供了大批量的優(yōu)質(zhì)脫毒種苗,為草莓可持續(xù)產(chǎn)業(yè)化健康發(fā)展提供了技術(shù)支撐?!揪唧w實(shí)施方式】
[0012]本發(fā)明所用制劑來源:多菌靈:廠家:安徽華星化工股份有限公司;農(nóng)藥登記證號:PD85150-19;生產(chǎn)許可證號:XK13-003-00126;產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)證號:HG3290-2000;批號:2014 年 01 月 20 日;生根劑(粉):NAA的廠家:上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司Chembase,批號:Lot N0.B0013K0321017; IBA的廠家:上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司Chembase登記號:CAS 133-32-4批號: 141212。[0〇13] 實(shí)施例1:草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,包括以下步驟:1)草莓花粉的取材與清洗消毒:采用田間草莓花粉發(fā)育至4_?6_大小的單核靠邊期的花藥,花粉單核靠邊期的草莓花蕾形態(tài)是:花萼未開放,花蕾略長于花冠或花冠剛露白、花冠白色或者淡綠且不松動(dòng)、花藥微黃而充實(shí);將采取的新鮮花藥放在2 °C?4°C中儲(chǔ)藏24h后,用自來水將花藥表面沖洗干凈;沖洗過的花藥移入超凈工作臺(tái)上放入無菌燒杯中,先用75%酒精消毒30 s?40s,無菌水沖洗2遍?3遍,再用0.1%的升萊溶液消毒4 min?5 min,用滅菌過的玻璃棒順一個(gè)方向輕輕攪動(dòng),然后用無菌水沖洗4遍?5遍,每次1 min,迅速用濾紙吸干,得到無菌花藥;2)花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化:在無菌條件下,用無菌針將已消毒的花蕾固定在已經(jīng)過滅菌的大橡皮上;用已滅菌的解剖刀和解剖針剝開花蕾,取出花藥,將取出的花藥接種到裝有愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為:MS+ BA 1.5 mg/L?2.5mg/L+NAA 0.10 mg/L?0.25mg/L+3%蔗糖+6g/L?8g/L瓊脂,pH值為5.8;當(dāng)愈傷組織的直徑2mm?3mm時(shí),轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基MS+ BA 0.08 11^幾?0.1211^幾+11^0.8 11^幾?1.211^/1^+3%鹿糖+68幾?88幾瓊脂中411值為5.8; 當(dāng)形成明顯的叢生芽時(shí)將芽切成小塊,接種于叢生增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖,叢生增殖培養(yǎng)基組成為MS+BA 1.2 mg/L?1.8mg/L+NAA 0.08 mg/L?0.12mg/L+3%鹿糖+6g/L?8g/L瓊脂,pH值為5.8;花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化生長條件為:溫度23°C?25°C,光照強(qiáng)度2500 lx? 30001x,光照 14 h/d?16h/d,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d;3)脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng):此步驟之前,可采用酶聯(lián)免疫吸附法,即ELISA法進(jìn)行病毒檢測,也可不檢測;將步驟2)得到的脫毒苗放入增殖培養(yǎng)基中25 d?35d長成叢生瓶苗;增殖培養(yǎng)基為加入6-芐氨基腺嘌呤0.19mg/L?0.21mg/L的MS培養(yǎng)基;將高3cm、生長健壯的無根苗接種于MS 培養(yǎng)基上,2周后,苗基部長出輻射狀的白色小根,每株生根5條?7條,3周后,根生長1 cm? 1.5cm,用于移栽;脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng)的生長條件為:溫度23 °C?25 °C,光照強(qiáng)度2000 lx? 30001x,光照10 h/d?12h/d,快繁及生根兩個(gè)階段培養(yǎng)時(shí)間50 d?60d;4)移栽前基質(zhì)準(zhǔn)備:基質(zhì)配方:草炭;珍珠巖:蛭石=3:1:1;在移苗前1天,將混合好、已潤濕的基質(zhì)裝入32、50穴的穴盤或直徑9cm?12cm的營養(yǎng)缽中,輕壓;用50%的可濕性多菌靈粉劑1000倍液澆透,第二天移苗時(shí),基質(zhì)含水量為70%? 80 %,即適合移苗;5)出瓶洗苗分級:起苗前用75 %酒精棉將所用操作工具全部消毒,直接從培養(yǎng)室移出生根的組培瓶苗到洗滌室,用直徑1 cm工具把組培苗從瓶中揀出,置于25 °C?28 °C的清水中洗凈根部的培養(yǎng)基,不要傷到根系、嫩芽及葉片,然后按大小將幼苗分級,并分出無根苗;6)移栽:當(dāng)天把洗凈分級的組培苗運(yùn)到種苗苗圃網(wǎng)室然進(jìn)行移栽,用準(zhǔn)備好的工具在穴盤的基質(zhì)上插洞,將幼苗根部輕輕放入洞中,輕輕掩上,稍壓實(shí);移完后用噴霧器輕噴水,沖洗幼苗葉片上的基質(zhì),使得根系與基質(zhì)接觸更緊密,以利于根系生長;對于無根苗,先沾適宜濃度: NAA 0.05mg/L?0.1mg/L或IBA 0? 8mg/L?1.0mg/L的生根粉或生根劑,再移植,或移植后用濃度為800倍液的生根粉進(jìn)行灌根;移栽條件為:溫度15°C?25°C ;7)馴化:移栽完當(dāng)天須在苗床上搭建塑料小拱棚,密封3d后每天早上或傍晚掀膜30min,從側(cè)面揭膜面積的10%,開始馴化組培苗;隨后每天揭膜時(shí)間增加lOmin,揭膜面積增加10%;視環(huán)境中的溫度高低和育苗基質(zhì)含水量適當(dāng)增加光照通風(fēng)透氣時(shí)間,l〇d?15 d后可揭去薄膜;移植后需進(jìn)行遮光管理,移植后的前2d用遮陽網(wǎng)遮光60%?70%,之后的10d?14d逐漸見光, 直至不遮光;馴化的組培苗成活率達(dá)100%,30d后便可移至直徑為10cm的營養(yǎng)缽或育苗床進(jìn)行培育;馴化條件為:溫度20°C?38°C,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d。[〇〇14]最后應(yīng)說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已,并不用于限制本發(fā)明, 盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明,對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說,其依然可以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改,或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。 凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi),所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,包括以下步驟:1)草莓花粉的取材與清洗消毒:采用田間草莓花粉發(fā)育至4_?6mm大小的單核靠邊期的花藥,花粉單核靠邊期的草莓 花蕾形態(tài)是:花萼未開放,花蕾略長于花冠或花冠剛露白、花冠白色或者淡綠且不松動(dòng)、花 藥微黃而充實(shí);將采取的新鮮花藥放在2 °C?4 °C中儲(chǔ)藏24h后,用自來水將花藥表面沖洗 干凈;沖洗過的花藥移入超凈工作臺(tái)上放入無菌燒杯中,先用75%酒精消毒30 s?40 s,無 菌水沖洗2遍?3遍,再用0.1%的升汞溶液消毒4 min?5 min,用滅菌過的玻璃棒順一個(gè)方 向輕輕攪動(dòng),然后用無菌水沖洗4遍?5遍,每次1分鐘,迅速用濾紙吸干,得到無菌花藥;2)花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化:在無菌條件下,用無菌針將已消毒的花蕾固定在已經(jīng)滅菌過的大橡皮上;用已滅菌的 解剖刀和解剖針剝開花蕾,取出花藥,將取出的花藥接種到裝有愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,愈 傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組成為:MS+ BA 1.5 mg/L?2.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L?0.25mg/L+3%蔗 糖+6 g/L?8 g/L瓊脂,pH值為5.8;當(dāng)愈傷組織的直徑2 mm?3 mm時(shí),轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中, 分化培養(yǎng)基組成為:MS+ BA 0.08 mg/L?0.12mg/L+IBA 0.8 mg/L?1.2 mg/L+3%蔗糖+6 g/L?8 g/L瓊脂,pH值為5.8,當(dāng)形成明顯的叢生芽時(shí)將芽切成小塊,接種于叢生增殖培養(yǎng) 基上進(jìn)行增殖,叢生增殖培養(yǎng)基組成為:MS+BA 1.2 mg/L?1.8 mg/L+NAA 0.08 mg/L? 0 ? 12 mg/L+3%蔗糖+6 g/L?8 g/L瓊脂,pH值為5 ? 8;3)脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng):將步驟2)得到的脫毒苗放入增殖培養(yǎng)基中25d?35d長成叢生瓶苗;增殖培養(yǎng)基為加入 6_芐氨基腺嘌呤0.19 mg/L?0.21 mg/L的MS培養(yǎng)基;將高3cm、生長健壯的無根苗接種于MS 培養(yǎng)基上,2周后,苗基部長出輻射狀的白色小根,每株生根5條?7條,3周后,根生長1 cm? 1.5cm,用于移栽;4)移栽前基質(zhì)準(zhǔn)備:基質(zhì)的組成為:按照重量比草炭:珍珠巖:蛭石=3:1:1;在移苗前1天,將混合好、已潤濕的基質(zhì)裝入32、50穴的穴盤或直徑9?12cm的營養(yǎng)缽 中,輕壓;用50%的可濕性多菌靈粉劑1000倍液澆透,第二天移苗時(shí),基質(zhì)含水量為70%?80 %,即適合移苗;5)出瓶洗苗分級:起苗前用75 %酒精棉將所用操作工具全部消毒,直接從培養(yǎng)室移出生根的組培瓶苗到 洗滌室,用直徑1 cm工具把組培苗從瓶中揀出,置于25 °C?28 °C的清水中洗凈根部的培養(yǎng) 基,不要傷到根系、嫩芽及葉片,然后按大小將幼苗分級,并分出無根苗;6)移栽:當(dāng)天把洗凈分級的組培苗運(yùn)到種苗苗圃網(wǎng)室然進(jìn)行移栽,用準(zhǔn)備好的工具在穴盤的基 質(zhì)上插洞,將幼苗根部輕輕放入洞中,輕輕掩上,稍壓實(shí);移完后用噴霧器輕噴水,沖洗幼苗 葉片上的基質(zhì),使得根系與基質(zhì)接觸更緊密,以利于根系生長;對于無根苗,先沾適宜濃度: NAA 0.05mg/L?0.1mg/L或IBA 0.8 mg/L?1.0 mg/L的生根粉或生根劑,再移植,或移植后 用濃度為800倍液的生根粉進(jìn)行灌根;7)馴化:移栽完當(dāng)天須在苗床上搭建塑料小拱棚,密封3d后每天早上或傍晚掀膜30min,從側(cè)面揭膜面積的10%,開始馴化組培苗;隨后每天揭膜時(shí)間增加lOmin,揭膜面積增加10%;視環(huán)境 中的溫度高低和育苗基質(zhì)含水量適當(dāng)增加光照通風(fēng)透氣時(shí)間,l〇d?15 d后可揭去薄膜;移 植后需進(jìn)行遮光管理,移植后的前2d用遮陽網(wǎng)遮光60%?70%,之后的10 d?14d逐漸見光, 直至不遮光;馴化的組培苗成活率達(dá)100%,30d后便可移至直徑為10cm的營養(yǎng)缽或育苗床進(jìn)行培育。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,所述步驟 3)脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng)之前,采用酶聯(lián)免疫吸附法,S卩ELISA法進(jìn)行病毒檢測。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,所述步驟2)中,花藥愈傷組織的誘導(dǎo)及莖葉分化生長條件為:溫度23°C?25°C,光照強(qiáng)度2500 lx? 30001x,光照 14 h/d?16h/d,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,所述步驟3)中,脫毒組培苗快繁及生根培養(yǎng)的生長條件為:溫度23 °C?25 °C,光照強(qiáng)度2000 lx? 30001x,光照10 h/d?12h/d,快繁及生根兩個(gè)階段培養(yǎng)時(shí)間50 d?60d。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,所述步驟6)中,移栽條件為:溫度15°C?25°C。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓花粉脫毒組培苗的移栽馴化方法,其特征在于,所述步驟7)中,馴化條件為:溫度20°C?38°C,培養(yǎng)時(shí)間20 d?30d。
【文檔編號】A01H4/00GK105993962SQ201610603534
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月28日
【發(fā)明人】陳英, 張愛萍, 于盛, 張西英
【申請人】新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第六師農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所